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基于SRAP和ISSR的山野豌豆種質(zhì)資源遺傳多樣性分析的開(kāi)題報(bào)告一、研究方案的選題背景山野豌豆是豆科植物,常見(jiàn)于我國(guó)北方山區(qū)和高寒地帶。山野豌豆具有營(yíng)養(yǎng)豐富、味道鮮美、潤(rùn)肺止咳的藥用價(jià)值,又具有改善耐寒性、抗逆性及提高內(nèi)源激素水平等多重生物學(xué)特性,是國(guó)內(nèi)外育種人員廣泛關(guān)注的重要經(jīng)濟(jì)作物。然而,山野豌豆野生種質(zhì)資源獨(dú)特而豐富,但基礎(chǔ)研究薄弱,其遺傳多樣性的鑒定和保護(hù)亟待開(kāi)展。二、研究目的及意義本研究旨在利用SRAP和ISSR技術(shù)對(duì)山野豌豆種質(zhì)資源的遺傳多樣性進(jìn)行分析,對(duì)山野豌豆種質(zhì)資源的種間遺傳關(guān)系、種內(nèi)遺傳多樣性和遺傳結(jié)構(gòu)的組成進(jìn)行研究,為山野豌豆的資源開(kāi)發(fā)和遺傳改良提供有效的科學(xué)依據(jù),同時(shí)也為野生豌豆的保護(hù)提供重要的借鑒意義。三、研究方法及技術(shù)路線1.材料的準(zhǔn)備和篩選從我國(guó)北方山區(qū)收集150份山野豌豆種質(zhì)資源,按照不同自然界分類進(jìn)行篩選,挑選20份反映不同地域和種群的豌豆品種進(jìn)行分析。2.SRAP技術(shù)的分析設(shè)計(jì)SRAP引物對(duì)篩選豌豆進(jìn)行聚類分析。3.ISSR技術(shù)的分析設(shè)計(jì)ISSR引物對(duì)豌豆進(jìn)行聚類分析。4.數(shù)據(jù)分析采用Treecon軟件,基于Nei遺傳距離構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù),采用Powermarker軟件進(jìn)行遺傳結(jié)構(gòu)分析;SPSS軟件進(jìn)行聚類分析。四、預(yù)期研究結(jié)果本研究預(yù)期將獲得下列結(jié)論:1.SRAP和ISSR標(biāo)記可以成功應(yīng)用于山野豌豆的遺傳多樣性分析。2.山野豌豆遺傳多樣性相對(duì)較高,不同品系間存在明顯的遺傳多樣性差異。3.山野豌豆種群分化明顯,地域分布會(huì)對(duì)豌豆種質(zhì)資源的遺傳多樣性產(chǎn)生影響。4.可通過(guò)遺傳多樣性分析,為山野豌豆的資源開(kāi)發(fā)和種質(zhì)共享提供重要依據(jù)。五、預(yù)期成果1.發(fā)表國(guó)內(nèi)外期刊論文1-2篇2.參加相關(guān)會(huì)議并作報(bào)告1-2次3.為山野豌豆的遺傳多樣性研究提供依據(jù)和數(shù)據(jù)支撐4.撰寫(xiě)山野豌豆種質(zhì)資源遺傳多樣性分析的學(xué)位論文六、研究時(shí)間安排第一年:1.整理文獻(xiàn),設(shè)計(jì)試驗(yàn)內(nèi)容和方案,確定SRAP和ISSR引物2.采集150份山野豌豆種質(zhì)資源,篩選20個(gè)豌豆品種用于遺傳多樣性分析3.制備SRAPPCR反應(yīng)體系,優(yōu)化PCR反應(yīng)條件;ISSR引物聚合酶連鎖反應(yīng)(PCR)及后續(xù)處理方法的優(yōu)化第二年:1.SRAP和ISSR引物分離和純化2.SRAPPCR產(chǎn)物的擴(kuò)增和檢測(cè),并篩選優(yōu)異譜帶以及ISSR擴(kuò)增的基帶3.數(shù)據(jù)的分析和處理第三年:1.數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析,進(jìn)化樹(shù)的構(gòu)建和遺傳結(jié)構(gòu)的組成分析2.遺傳距離的分析,遺傳多樣性指數(shù)的計(jì)算3.總結(jié)和撰寫(xiě)論文七、參考文獻(xiàn)1.Yuan,J.S.,Wang,Y.F.,Ji,Z.R.,etal.(2002).ThegeneticdiversityofwildSoybean(Glycinesoja)populationfromvariouslatitudinalgradientsinEasternAsia.TheorApplGenet:102,15-21.2
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