胚胎質(zhì)量評(píng)估

關(guān)于胚胎質(zhì)量評(píng)估

胚胎質(zhì)量是妊娠成功的關(guān)鍵因素之一，胚胎的發(fā)育潛能，即胚胎質(zhì)量的評(píng)估直接影響移植胚胎的篩選和妊娠結(jié)局。第2頁,共28頁，2024年2月25日，星期天評(píng)估胚胎質(zhì)量的方法：傳統(tǒng)的形態(tài)學(xué)評(píng)估動(dòng)態(tài)觀測(cè)技術(shù)胚胎“組學(xué)”評(píng)估第3頁,共28頁，2024年2月25日，星期天

目前，胚胎質(zhì)量的評(píng)估以傳統(tǒng)形態(tài)學(xué)方法為主，即根據(jù)胚胎受精與分裂的規(guī)律，在幾個(gè)特定的時(shí)間點(diǎn)，觀察胚胎形態(tài)，以形態(tài)學(xué)為標(biāo)準(zhǔn)對(duì)胚胎質(zhì)量進(jìn)行評(píng)估和分級(jí)，選擇級(jí)別最高的胚胎進(jìn)行移植。一、傳統(tǒng)的形態(tài)學(xué)評(píng)估第4頁,共28頁，2024年2月25日，星期天1、原核評(píng)分：一般IVF或ICSI后16-18小時(shí)觀察原核，主要圍繞原核及核仁大小、數(shù)目和分布情況評(píng)估。Scott-Z的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，將原核分成Z1、Z2、Z3和Z4四類。第5頁,共28頁，2024年2月25日，星期天Z1：雌雄原核中核仁數(shù)量相等且同時(shí)都極化。Z2：雌雄原核中核仁數(shù)量相等但同時(shí)散在分布第6頁,共28頁，2024年2月25日，星期天Z3：雌雄原核中有相同的核仁數(shù)量但一個(gè)原核中為極化分布而另一個(gè)中為散在分布或者兩原核中核仁數(shù)量和/或大小不等（數(shù)量不等＞1）或核仁過大或過小。Z4：雌雄原核沒有連接或大小不等或沒有位于合子的中心。第7頁,共28頁，2024年2月25日，星期天

z1、z2級(jí)原核通常會(huì)發(fā)育為較優(yōu)質(zhì)的胚胎，可獲得較高的妊娠率；Z3、Z4級(jí)原核發(fā)育的胚胎通常發(fā)育潛力潛力低下，染色體異常幾率增加。在原核的發(fā)育過程中，核仁的分布和排列并不是固定的，所以原核期合子形態(tài)的評(píng)估應(yīng)與胚胎形態(tài)評(píng)估聯(lián)合應(yīng)用。第8頁,共28頁，2024年2月25日，星期天2、卵裂期胚胎形態(tài)的評(píng)估

包括卵裂速度、卵裂球的大小、形狀、一致性、胞漿碎片比例。第9頁,共28頁，2024年2月25日，星期天D2胚胎：細(xì)胞數(shù)4-6＞6或3210分?jǐn)?shù)43210碎片0%＜10%10-25%26-50%＞50%分?jǐn)?shù)43210卵裂球?qū)ΨQ或稍不對(duì)稱很不對(duì)稱分?jǐn)?shù)10D3胚胎：細(xì)胞數(shù)8-10＞10或6-74-52-31分?jǐn)?shù)43210碎片0%＜10%10-25%26-50%＞50%分?jǐn)?shù)43210卵裂球?qū)ΨQ或稍不對(duì)稱很不對(duì)稱分?jǐn)?shù)10WIH評(píng)分：胚胎分?jǐn)?shù)=細(xì)胞數(shù)評(píng)分+碎片評(píng)分+對(duì)稱評(píng)分第10頁,共28頁，2024年2月25日，星期天每一個(gè)胚胎按其細(xì)胞數(shù)、碎片程度、對(duì)稱性記錄-C-F-S-，如8CF4S1代表其為8細(xì)胞胚胎，碎片評(píng)分4分，對(duì)稱性評(píng)分1分。D3胚胎中，8CF4S1為優(yōu)質(zhì)細(xì)胞胚胎，5CF0S0為一多碎片不對(duì)稱5細(xì)胞胚胎。第11頁,共28頁，2024年2月25日，星期天胚胎分級(jí)評(píng)分法Ⅰ級(jí)：胚胎卵裂球呈圓/卵圓形，大小均勻，形態(tài)規(guī)則，胞質(zhì)均勻清晰，透明帶完整，無碎片或碎片少于5%。Ⅱ級(jí)：卵裂球形態(tài)不規(guī)則，大小略不規(guī)則，胞質(zhì)可有顆?，F(xiàn)象，碎片10%～20%。Ⅲ級(jí)：卵裂球大小明顯不均，可有明顯的形態(tài)不規(guī)則，胞質(zhì)可有顆?，F(xiàn)象，碎片21%～50%，透明帶完整。Ⅳ級(jí)：卵裂球大小嚴(yán)重不均，胞質(zhì)可有嚴(yán)重顆?，F(xiàn)象，碎片多于50%；或24小時(shí)無細(xì)胞分裂。注：I、II、III級(jí)胚胎在發(fā)育中如果出現(xiàn)以下情況，胚胎評(píng)級(jí)時(shí)在形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)上降一級(jí)：a、授精后20小時(shí)內(nèi)未見到原核，48小時(shí)證實(shí)為延遲受精的胚胎。b、取卵后48小時(shí)超過8細(xì)胞，或72小時(shí)未超過5細(xì)胞第12頁,共28頁，2024年2月25日，星期天

各實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)體系、操作方法等不同導(dǎo)致胚胎的發(fā)育速度不一致，應(yīng)參照ESHRE發(fā)布Istanbul共識(shí)（2011）找出符合各自中心最佳觀測(cè)點(diǎn)。第13頁,共28頁，2024年2月25日，星期天胚胎觀察時(shí)間點(diǎn)設(shè)置（引自Istanbul共識(shí)）觀察點(diǎn)觀察時(shí)間（/小時(shí)，受精后）期望值受精17±1原核形成合子23±11細(xì)胞發(fā)生率50%2細(xì)胞發(fā)生率20%早卵裂26±1（ICSI）28±1（IVF）2-細(xì)胞D2胚胎評(píng)估44±14-細(xì)胞D3胚胎評(píng)估68±18-細(xì)胞D4胚胎評(píng)估92±2桑葚胚D4胚胎評(píng)估116±1囊胚第14頁,共28頁，2024年2月25日，星期天分級(jí)評(píng)級(jí)胚胎形態(tài)學(xué)特征1好10%碎片細(xì)胞大小均勻，與期別相符無多核2中10%-25%碎片大多數(shù)細(xì)胞大小均勻，與期別相符無多核3差大量碎片（>25%）細(xì)胞大小與期別不相符有多核現(xiàn)象胚胎的形態(tài)學(xué)評(píng)級(jí)（引自Istanbul共識(shí)）第15頁,共28頁，2024年2月25日，星期天3、囊胚評(píng)估（Gardner標(biāo)準(zhǔn)）主要從囊胚的擴(kuò)張狀態(tài)、內(nèi)細(xì)胞團(tuán)和滋養(yǎng)細(xì)胞的發(fā)育進(jìn)行評(píng)估第16頁,共28頁，2024年2月25日，星期天首先根據(jù)囊胚的擴(kuò)張和孵出狀態(tài)分為1-6級(jí)：

1級(jí)：早期囊胚，囊胚腔小于胚胎體積的一半

2級(jí)：囊胚，囊胚腔大于或等于胚胎體積的一半

3級(jí)：完全囊胚，囊胚腔充滿整個(gè)胚胎

4級(jí)：擴(kuò)張囊胚，囊胚大于整個(gè)胚胎

5級(jí)：正孵出的囊胚，滋養(yǎng)細(xì)胞開始從透明帶突出

6級(jí)：已孵出的囊胚，囊胚完全從透明帶孵出第17頁,共28頁，2024年2月25日，星期天然后對(duì)3-6級(jí)的囊胚進(jìn)一步評(píng)價(jià)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)（ICM）和滋養(yǎng)細(xì)胞的發(fā)育：

ICM評(píng)分：A：很多細(xì)胞，包裹緊密

B：少數(shù)細(xì)胞，疏松結(jié)合

C：很少細(xì)胞滋養(yǎng)層評(píng)分：A：很多細(xì)胞形成連續(xù)上皮

B：少數(shù)細(xì)胞形成疏松上皮

C：很少細(xì)胞

根據(jù)這個(gè)分級(jí)方法，第5天最好的囊胚評(píng)分應(yīng)該是4AA第18頁,共28頁，2024年2月25日，星期天傳統(tǒng)的胚胎形態(tài)學(xué)評(píng)分方法，需要將胚胎從培養(yǎng)箱中取出進(jìn)行觀察，這樣會(huì)因?yàn)榕囵B(yǎng)環(huán)境改變而不利于胚胎發(fā)育。胚胎學(xué)動(dòng)態(tài)觀察技術(shù)可在保證胚胎穩(wěn)定發(fā)育的生長(zhǎng)環(huán)境下，對(duì)胚胎進(jìn)行全程觀測(cè)，可以為胚胎學(xué)家提供更多胚胎發(fā)育過程形態(tài)學(xué)及動(dòng)力學(xué)信息，減少胚胎評(píng)估的主觀性。二、動(dòng)態(tài)觀測(cè)技術(shù)第19頁,共28頁，2024年2月25日，星期天獲取胚胎發(fā)育客觀數(shù)據(jù)，支持準(zhǔn)確優(yōu)選最佳胚胎時(shí)差胚胎成像系統(tǒng)（time-lapse）第20頁,共28頁，2024年2月25日，星期天局限性：時(shí)差胚胎成像系統(tǒng)價(jià)格昂貴，單次觀察的標(biāo)本數(shù)量有限等缺點(diǎn)，限制該技術(shù)的推廣應(yīng)用。是否可以提高妊娠結(jié)局并常規(guī)應(yīng)用與臨床尚存爭(zhēng)議，需要大量前瞻性研究來證明其有效性第21頁,共28頁，2024年2月25日，星期天基因組學(xué)蛋白質(zhì)組學(xué)轉(zhuǎn)錄組學(xué)代謝組學(xué)三、胚胎“組學(xué)”評(píng)估第22頁,共28頁，2024年2月25日，星期天1、代謝組學(xué)

通過檢測(cè)胚胎代謝產(chǎn)物來評(píng)估胚胎發(fā)育潛能，因具有非侵人性、低風(fēng)險(xiǎn)等優(yōu)點(diǎn)而成為目前研究熱點(diǎn)。第23頁,共28頁，2024年2月25日，星期天

胚胎代謝組學(xué)評(píng)分方法的相關(guān)技術(shù)平臺(tái)尚未完全建立，僅有限的幾種代謝物可以進(jìn)行檢測(cè)并作為評(píng)估胚胎發(fā)育的指標(biāo)。只有當(dāng)多種代謝物可以同時(shí)進(jìn)行檢測(cè)并全面反應(yīng)胚胎代謝組學(xué)圖譜的時(shí)候，胚胎代謝組學(xué)評(píng)分方法的預(yù)測(cè)價(jià)值才能完全體現(xiàn)。第24頁,共28頁，2024年2月25日，星期天2、基因組學(xué)胚胎染色體的異常是影響胚胎發(fā)育潛能的重要因素。隨著分子生物學(xué)技術(shù)和PGD的發(fā)展，囊胚或極體活檢結(jié)合胚胎全染色體分析的PGS（pre-implantationgeneticscreening）技術(shù)開始應(yīng)用于臨床，為診斷單基因疾病提供了有效檢測(cè)手段，可提高單基因病和染色體異常患者的臨床妊娠率和降低自然流產(chǎn)率。第25頁,共28頁，2024年2月25日，星期天

隨著新一代高通量測(cè)序（nextgenerationsequencing，NGS)）技術(shù)的出現(xiàn)及其檢測(cè)費(fèi)用降低，可實(shí)現(xiàn)胚胎的全基因組擴(kuò)增與測(cè)序。NGS技術(shù)可以更準(zhǔn)確、有效地檢測(cè)胚胎染色體異常。一旦渡過科研與臨床轉(zhuǎn)化階段，NGS技術(shù)將在PGD／PGS技術(shù)臨床應(yīng)用中具有廣泛的前景。第26頁,共28頁，2024年2月25日，星期天

胚胎形態(tài)學(xué)評(píng)分