艾梅乙的實(shí)驗(yàn)室診斷與溝通

關(guān)于艾梅乙的實(shí)驗(yàn)室診斷與溝通2梅毒梅毒是由蒼白（梅毒）螺旋體引起的慢性、系統(tǒng)性性傳播疾病。主要通過性途徑傳播，臨床上可表現(xiàn)為一期梅毒、二期梅毒、三期梅毒、潛伏（隱性）梅毒和先天梅毒（胎傳梅毒）等。是《中華人民共和國傳染病防治法》中，列為乙類防治管理的病種。第2頁,共38頁，2024年2月25日，星期天傳播途徑：性接觸是主要的傳染途徑。未經(jīng)治療的患者在感染后的1年內(nèi)最具有傳染性（顯性和隱性梅毒患者均是傳染源）。隨著病期的延長，傳染性越來越小。到感染后2年，通過性接觸一般無傳染性。母嬰傳播。在妊娠7周時，梅毒螺旋體即可通過胎盤傳染未經(jīng)治療者，雖已無性傳播，但妊娠時仍可再傳染胎兒,但病期越長傳染性越小。第3頁,共38頁，2024年2月25日，星期天診斷梅毒的診斷必須依靠流行病學(xué)病史、臨床癥狀及實(shí)驗(yàn)檢查進(jìn)行綜合分析。梅毒的實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果對診斷有決定性意義。第4頁,共38頁，2024年2月25日，星期天實(shí)驗(yàn)室診斷1、暗視野檢查/鍍銀染色法2、非梅毒螺旋體抗原血清實(shí)驗(yàn)（非特異性梅毒抗體，TRSUT、RPR）3、梅毒螺旋體抗原血清實(shí)驗(yàn)（特異性梅毒抗體，TPPA、TPHA、

TP-ELISA）第5頁,共38頁，2024年2月25日，星期天暗視野顯微鏡檢查

：取患者的可疑皮損（如硬下疳、丘疹等），在暗視野顯微鏡下檢查，見到可運(yùn)動的梅毒螺旋體，可作為梅毒的確診依據(jù)。暗視野下是非常小的纖細(xì)的發(fā)光體，長約6～14um,8～14個規(guī)則、緊密的螺旋。典型的運(yùn)動方式：蛇形、伸縮式、螺旋式看到典型的TP的特征和運(yùn)動方式的螺旋體便可判定為TP陽性。第6頁,共38頁，2024年2月25日，星期天暗視野檢查臨床意義：當(dāng)標(biāo)本陽性時，可確診梅毒。適用于早期梅毒（一二期）。陰性不能排除梅毒診斷。不適用于來自口腔的標(biāo)本。暗視野顯微鏡檢查是能夠立即在獲得性或先天性梅毒的早期進(jìn)行直接診斷的唯一標(biāo)準(zhǔn)。第7頁,共38頁，2024年2月25日，星期天非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)（TRSUT）?梅毒螺旋體一旦感染人體，在3-4周產(chǎn)生抗類脂質(zhì)抗原的IgM和IgG的混合抗體（也叫反應(yīng)素）。?可做定量試驗(yàn)，用于判斷療效、判斷病情活動程度、預(yù)后隨訪指標(biāo)。(注意前滯現(xiàn)象，假陰性)?早期梅毒治療后血清低度下降4倍認(rèn)為治療有效。?復(fù)發(fā)或再感染可陽轉(zhuǎn)或滴度升高。?有些疾病可導(dǎo)致生物學(xué)假陽性。技術(shù)、急性熱性病、結(jié)締組織病、SLE等，但一般滴度不會超過1:8，而且隨著原發(fā)疾病好轉(zhuǎn)，滴度可以自行下降。第8頁,共38頁，2024年2月25日，星期天梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)

TPPA、

TP-ELISA以梅毒螺旋體特異蛋白為抗原，檢測梅毒患者血中特異性抗梅毒螺旋體抗原的抗體。感染梅毒螺旋體后，一旦梅毒螺旋體抗體試驗(yàn)呈陽性，則患者幾乎終生陽性。TPPA、TPHA為梅毒確證試驗(yàn)，其敏感性：一期76%，二期100%潛伏97%特異性100%，可有1%假陽性存在，如SLE。IgM抗體可作為梅毒早期診斷或胎傳梅毒診斷。第9頁,共38頁，2024年2月25日，星期天

我科室目前檢測梅毒主要為TP-ELISA進(jìn)行篩查，陽性者進(jìn)行TPPA和TRUST的補(bǔ)充試驗(yàn)。

第10頁,共38頁，2024年2月25日，星期天TRUST滴度與治療效果治療成功：早期梅毒患者在治療后6個月內(nèi)癥狀消失，且滴度有至少4倍的下降。晚期梅毒或隱性梅毒在治療后12-24個月內(nèi)滴度有至少4倍的下降。治療失敗：治療后癥狀持續(xù)或重新出現(xiàn)；治療后RPR滴度反而上升了4倍或以上；RPR滴度較高（1:32或以上）且在六個月內(nèi)沒有達(dá)到4倍的下降?？姑范局委熓〉牟∪藨?yīng)考慮合并HIV感染及神經(jīng)梅毒的可能性。血清固定：經(jīng)正規(guī)治療后，梅毒患者RPR一般都會轉(zhuǎn)為陰性，但有1-3%的病人即使經(jīng)足量抗梅治療，滴度仍持續(xù)呈低滴度陽性，這種現(xiàn)象稱為血清固定，其原因尚不明了。血清固定患者的滴度重又上升則提示再次感染梅毒。第11頁,共38頁，2024年2月25日，星期天療后血清學(xué)隨訪方法:TRUST時間：第1年，每3個月檢查1次。第2年，每6個月檢查1次。第3年，最后1個月檢查。第12頁,共38頁，2024年2月25日，星期天胎傳梅毒實(shí)驗(yàn)室診斷標(biāo)準(zhǔn)嬰兒可自母體獲得IgG，TPPA和ELISA等試驗(yàn)均可呈假陽性。①暗視野檢查陽性。②非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)持續(xù)陽性。③非梅毒螺旋體抗原血清抗體滴度是母親的4倍以上。④患兒早期IgM陽性。⑤隨訪18個月觀察。注應(yīng)取嬰兒靜脈血進(jìn)行檢測，而不是臍帶血。第13頁,共38頁，2024年2月25日，星期天神經(jīng)梅毒的實(shí)驗(yàn)室診斷梅毒患者出現(xiàn)神經(jīng)癥狀者，或者經(jīng)過驅(qū)梅治療無效者，應(yīng)作腦脊液檢查。這一檢查對神經(jīng)梅毒的診斷、治療及預(yù)后的判斷均有幫助。檢查項(xiàng)目應(yīng)包括：細(xì)胞計(jì)數(shù)、總蛋白測定、RPR及TPPA試驗(yàn)等。①梅毒血清學(xué)試驗(yàn)（TRUST、TPPA）陽性。②腦脊液異常（WBC計(jì)數(shù)≥10*10/L、蛋白>500mg/L）。③腦脊液VDRL（玻片法檢測IgM抗體實(shí)驗(yàn)）試驗(yàn)陽性。第14頁,共38頁，2024年2月25日，星期天我科梅毒的檢測為每周一三五，周一三五才抽血的要下個時間才能檢測。如臨床需要我科可進(jìn)行快速金標(biāo)檢測，對于陽性者需做TRSUT檢測，判定其是否為活動期梅毒，一般金標(biāo)陽性者TP-ELISA基本為陽性，而梅毒抗體IgG為終身攜帶，其TPPA基本為陽性。對孕婦和新生兒母親為陽性者可按一下流程進(jìn)行：第15頁,共38頁，2024年2月25日，星期天第16頁,共38頁，2024年2月25日，星期天第17頁,共38頁，2024年2月25日，星期天艾滋病人類免疫缺陷病毒（HIV），即艾滋?。ˋIDS，獲得性免疫缺陷綜合征）病毒，是造成人類免疫系統(tǒng)缺陷的一種病毒。1981年，人類免疫缺陷病毒在美國首次發(fā)現(xiàn)。它是一種感染人類免疫系統(tǒng)細(xì)胞的慢病毒，屬逆轉(zhuǎn)錄病毒的一種。檢測：《全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范2015年修訂版》第18頁,共38頁，2024年2月25日，星期天逆轉(zhuǎn)錄病毒，其結(jié)構(gòu)上的多種特異蛋白質(zhì)作可為我們檢測的目標(biāo),如gp120,gp41,p17,p24等第19頁,共38頁，2024年2月25日，星期天HIV感染以后的血清學(xué)動態(tài)第20頁,共38頁，2024年2月25日，星期天HIV檢測1、樣本的采集和處理全血、血清、血漿、口腔黏膜滲出液、尿液以及干血斑樣品可用于HIV抗體檢測全血、血清、血漿可用于HIV抗原檢測抗凝全血可用于CD4+和CD8+淋巴細(xì)胞測定血漿可用于病毒載量、基因型、耐藥檢測淋巴細(xì)胞富集液、全血可用于HIV核酸定性定量、基因型檢測和HIV-1分離培養(yǎng)第21頁,共38頁，2024年2月25日，星期天2、樣本的保存未檢測標(biāo)本：短期內(nèi)（1周）可放于2-8℃，一周以上應(yīng)存放于-20℃一下。用于核酸檢測的樣品4天內(nèi)檢測可放于4度，3月以內(nèi)放-20度，3月以上放-70度保存。檢測后標(biāo)本:初篩有反應(yīng)及時進(jìn)行補(bǔ)充試驗(yàn)，樣本應(yīng)置于帶蓋試管內(nèi)，并標(biāo)記唯一的編碼姓名種類和采集時間。篩查陰性標(biāo)本按具體要求決定（2-8度冰箱保存7天后按醫(yī)療廢物處理）第22頁,共38頁，2024年2月25日，星期天HIV抗體檢測要點(diǎn)1、篩查試驗(yàn)有反應(yīng)，須做補(bǔ)充試驗(yàn)。補(bǔ)充試驗(yàn)是通過檢測樣本中是否存在艾滋病病毒抗體、抗原或者核酸而確定艾滋病病毒感染的檢測方法。補(bǔ)充試驗(yàn)包括抗體確證試驗(yàn)（免疫印跡試驗(yàn)，條帶/線性免疫試驗(yàn)，特定條件下的替代檢測，免疫層析或免疫滲濾試驗(yàn)）和核酸試驗(yàn)（核酸定性和核酸定量試驗(yàn)）。替代檢測包括三種酶聯(lián)免疫試驗(yàn)、三種快速試驗(yàn)或酶聯(lián)免疫加快速試驗(yàn)。2、篩查試驗(yàn)無反應(yīng)，不應(yīng)做補(bǔ)充試驗(yàn)

第23頁,共38頁，2024年2月25日，星期天

結(jié)果報(bào)告篩查報(bào)告篩查試驗(yàn)無反應(yīng)報(bào)告為“HIV抗體陰性”；篩查有反應(yīng)必須進(jìn)行復(fù)檢，復(fù)檢兩次檢測均無反應(yīng)報(bào)告為“HIV抗體陰性“，復(fù)檢檢測均有反應(yīng)或一個有反應(yīng)一個無反應(yīng)需進(jìn)行“補(bǔ)充試驗(yàn)”；初篩報(bào)告為”HIV感染待確定”（09版為HIV抗體待復(fù)檢），不能出具陽性報(bào)告。HIV抗體篩查報(bào)告需由一名檢驗(yàn)人員和一名審核者簽字。并同時報(bào)告院感保健科和臨床。第24頁,共38頁，2024年2月25日，星期天確證報(bào)告：由確證試驗(yàn)室出具，我科為初篩實(shí)驗(yàn)室，只能出具待確定的結(jié)果，送市疾控做確證試驗(yàn)。

篩查有反應(yīng)須送疾控的標(biāo)本送檢必須要有病人的身份證信息，基本信息（電話號碼、婚姻狀況等），并有我科蓋章簽字的復(fù)檢單，送檢標(biāo)本須7日內(nèi)送檢。第25頁,共38頁，2024年2月25日，星期天關(guān)于HIV檢測弱陽性的問題婦產(chǎn)科出現(xiàn)過孕婦HIV檢測弱陽性的情況，雖考慮為孕婦特殊人群導(dǎo)致的假陽性，但依然應(yīng)該引起重視，遇到初篩弱陽性的情況，我科建議重新采血用兩種試劑進(jìn)行復(fù)檢，若有任意一種有反應(yīng)，則須送市疾控進(jìn)行確證試驗(yàn)。弱陽性不排除初期感染抗體效價低的情況。HIV初篩無反應(yīng)不能排除窗口期的情況，尤其對于高危人群、有冶游史、職業(yè)暴露等情況，建議隔3個月、6個月、1年均進(jìn)行隨訪檢測。第26頁,共38頁，2024年2月25日，星期天乙肝乙肝是由乙型肝炎病毒感染引起的，以肝臟炎性病變?yōu)橹鳎⒖梢鸲嗥鞴贀p害的一種疾病。少數(shù)晚期可轉(zhuǎn)化為肝硬化、肝癌。是我國當(dāng)前流行最為廣泛、危害性最嚴(yán)重的一種疾病。乙肝病毒。是一種DNA病毒，屬于嗜肝DNA病毒科，HBV的抵抗力較強(qiáng)，對低溫、干燥、紫外線、一般濃度的化學(xué)消毒劑都能夠耐受，但65℃10小時、煮沸10分鐘或高壓蒸氣均可滅活HBV。含氯制劑、環(huán)氧乙烷、戊二醛、過氧乙酸和碘伏等也有較好的滅活效果。第27頁,共38頁，2024年2月25日，星期天傳播途徑1.血液傳播：血液傳播是乙肝傳播途徑中最常見的一種，比如輸血過程中被感染，但是隨著醫(yī)學(xué)的進(jìn)步，此現(xiàn)象得以了有效控制，但是尚未杜絕。2.醫(yī)源性傳播：醫(yī)源性傳播也就是說在就醫(yī)的過程中被感染，目前多數(shù)存在的是微量注射或接種而引起的感染，因此要特別注意注射、接種、紋身等使用的各種醫(yī)療器具。3.母嬰傳播：患急性乙肝或攜帶乙肝表面抗原的母親可將乙肝病毒傳給新生兒，尤其攜帶乙肝表面抗原的母親為主要的感染類型。（值一提的是乙肝免疫球蛋白可以有效地抑制乙肝母嬰的傳播，有效率可達(dá)百分之九十以上。）4.性傳播：乙肝病毒的性傳播是性伙伴感染的重要途徑，這種傳播亦包括家庭夫妻之間的傳播。注：成年人感染乙肝病毒后，因?yàn)槊庖呦到y(tǒng)比較完善，所以有可能及時清除乙肝病毒。第28頁,共38頁，2024年2月25日，星期天乙肝的檢測1、乙肝兩對半定量：為乙肝病毒表面抗原（HbsAg）抗-HBs（乙肝病毒表面抗體）HBeAg（乙肝病毒e抗原）抗HBe（乙肝病毒e抗體）抗-HBc（乙肝病毒核心抗體）2、乙肝DNA定量3、乙肝mRNA定量第29頁,共38頁，2024年2月25日，星期天淺談乙肝兩對半HBsAb是乙肝唯一有效的保護(hù)性抗體。高危人群HBsAb濃度值≥100mIU/ml，具有足夠的保護(hù)作用。HBsAg可提示存在乙肝病毒的感染。HBeAg提示乙肝復(fù)制活躍，傳染性強(qiáng)。HBeAb提示乙肝復(fù)制被抑制，可能好轉(zhuǎn)，傳染性弱。HBcAb提示感染過或接觸了乙肝病毒。第30頁,共38頁，2024年2月25日，星期天乙肝兩對半常見模式1、-----過去和現(xiàn)在均未感染HBV2、----+曾感染HBV，急性感染恢復(fù)期3、---++過去和現(xiàn)在均已感染過HBV4、-+---預(yù)防注射疫苗5、-+-++既往感染；急性HBV感染恢復(fù)期6、-+--+既往感染；急性HBV感染已恢復(fù)7、+---+急性HBV感染；慢性HBsAg攜帶者8、+--++急性HBV感染趨向恢復(fù)；慢性HBsAg

攜帶者，傳染性弱9、+-+-+急性或慢性，傳染性極強(qiáng)10、+----急性HBV感染早期，HBsAg攜帶者11、+-+--急性HBV感染早期，傳染性強(qiáng)12、--+++急性感染中期13、+-+++急性感染趨向恢復(fù)；慢性攜帶者14、+--+-急性感染趨向恢復(fù)15、---+-急性感染趨向恢復(fù)16、-+-+-HBV感染已恢復(fù)第31頁,共38頁，2024年2月25日，星期天乙肝DNA檢測，一般DNA定量>10的5次方表示病毒載量大，復(fù)制活躍，傳染性強(qiáng)。<10的2次方表示復(fù)制量低，傳染性低。乙肝mRNA檢測，由于乙肝病毒生活史復(fù)制過程必須生成mRNA,所以現(xiàn)在最新的研究表示，mRAN在提示乙肝病毒復(fù)制的過程優(yōu)于乙肝DNA和兩對半。但目前我科無法開展此項(xiàng)目。第32頁,共38頁，2024年2月25日，星期天討論大三陽肯定比小三陽嚴(yán)重？第一：如果“小三陽”DNA檢測呈陰性，肝功能、B超等均長期正常，說明病毒已不復(fù)制，無傳染性，所以無需隔離與治療。這種情況約占“小三陽”患者總數(shù)的60％~70％，如果一味追求轉(zhuǎn)陰而服用大量治療性中西藥物只會增加肝臟負(fù)擔(dān)，甚至招致不良后果。第二：“小三陽”還有一種表現(xiàn)為乙肝病毒DNA低水平復(fù)制（PCR檢測＜105），肝功能正?；蜉p度異常，稱為慢性乙肝病毒殘留期。這種情況約占“小三陽”患者總數(shù)的20％，目前國內(nèi)對此種患者最容易忽視。如果不積極治療，任其發(fā)展，可導(dǎo)致肝硬化、肝癌。第三：最嚴(yán)重的是乙肝病毒DNA高水平復(fù)制（PCR檢測＞105），肝功能不正常，稱為“e抗原陰性的慢性乙肝”。這種情況約占“小三陽”患者總數(shù)的10％，它的特點(diǎn)是病毒復(fù)制活躍，傳染性強(qiáng)，是由于乙肝病毒變異所致。這種“小三陽”反而比“三大陽”嚴(yán)重，其轉(zhuǎn)化為肝硬化、肝癌的幾率更高。第33頁,共38頁，2024年2月25日，星期天兩對半及HBV-DNA全陰就是沒有乙肝？在乙肝繼發(fā)的肝病及肝癌晚期情況中，因?yàn)楦渭?xì)胞被破壞殆盡，乙肝病毒無容身之處，所以無法查到其抗體，同樣的，也無法檢測到乙肝病毒的DNA。依然不能排除乙肝病毒有變異的可能性和檢測方法的局限性。所以乙肝病人應(yīng)該定期復(fù)查乙肝兩對半、乙