糖化血紅蛋白測定標(biāo)準(zhǔn)化的進(jìn)程和意義

關(guān)于糖化血紅蛋白測定標(biāo)準(zhǔn)化的進(jìn)程和意義糖尿病(DM)

定義Diabetes:多尿Mellitus:多糖糖尿病是一種常見的多系統(tǒng)累及疾病;影響糖類，蛋白質(zhì)和類脂的代謝過程并引發(fā)多種退行性病變。WHO:“一種通常由環(huán)境因素和遺傳因素聯(lián)合引發(fā)的慢性高血糖癥。”俗稱:糖尿病第2頁,共16頁，2024年2月25日，星期天糖尿病(DM)

糖尿病治療的最終目的在于降低糖尿病的發(fā)病率和死亡率Dialysis

Transplantation第3頁,共16頁，2024年2月25日，星期天Source:IDF;DiabetesAtlas2000生活方式的西方化激化該病的流行糖尿病(DM)糖尿病–21世紀(jì)人類健康問題的一大挑戰(zhàn)第4頁,共16頁，2024年2月25日，星期天糖尿病(DM)

糖尿病-至2025全球估計有3億糖尿病患者

糖尿病患者數(shù)量增長趨勢圖糖尿病患者數(shù)量以每年4％－6％的速度在增長。新確診患者每年以8％速度在增長。在發(fā)達(dá)國家，二型糖尿病患者的數(shù)量占發(fā)病總數(shù)的85％－95％。由于生活方式的改變，發(fā)展中國家的發(fā)病率也有顯著上升的趨勢。299239151200020102025DiabeticsSource:IDF;DiabetesAtlas2000第5頁,共16頁，2024年2月25日，星期天血紅蛋白

血紅蛋白主要有三種主要功能

結(jié)構(gòu)

血紅蛋白的分子由4個多肽單位和4個亞鐵血紅素構(gòu)成在每個亞鐵血紅素的中心是二價鐵離子，血紅蛋白由6％的血紅素和94％的球蛋白構(gòu)成。血紅蛋白呈橢圓型外觀，大約為5.5x5.5x7.0nm.正常成人的血色素HbA的分子量是66000道爾頓，成人的血紅蛋白分子由4個多肽片斷構(gòu)成，HbA由二條

鏈和二條

鏈以四面體的構(gòu)造組成。運(yùn)輸氧氣運(yùn)輸二氧化碳機(jī)體緩沖液

功能第6頁,共16頁，2024年2月25日，星期天糖化血紅蛋白

/HbA1c

構(gòu)成葡萄糖進(jìn)入紅細(xì)胞并與血紅蛋白發(fā)生反應(yīng)

紅血球破碎后才可釋放出血紅蛋白第7頁,共16頁，2024年2月25日，星期天血紅蛋白

血紅蛋白可分為糖化和未糖化二種

正常成人體內(nèi)的血紅蛋白

HbHbA0HbA1HbA1aHbA1bHbA1cHbA(

??)HbA2(

)HbF(

)97%0.5%2.5%成人

Hb胎兒

Hb未糖化糖化當(dāng)?地中海貧血時HbA1c含量下降可檢測GHb含量6%94%-主要的糖化血紅蛋白已經(jīng)由20年以上的研究歷史5%A1a和A1b含量極低第8頁,共16頁，2024年2月25日，星期天HbA1c

血紅蛋白可在不同的位置進(jìn)行糖化糖化優(yōu)先的順序Gluc1?-chainVal...1?-chainLys...66...3...

-chainVal...15

-chain2Lys...16...?-chainLys...174...GlucGlucGlucGluc首選結(jié)合位置第9頁,共16頁，2024年2月25日，星期天HbA1c

定義

HbAoHbA1cValHisLeuThrProGluGlucValHisLeuThrProGluGluLysSer....GluLysSer....HbA1c是在?鏈的N端發(fā)生糖化的血紅蛋白

只有第一個氨基酸被糖化?-鏈第10頁,共16頁，2024年2月25日，星期天HbA1c

定義

HbAo-多肽HbA1c-多肽ValHisLeuThrProGluGlucValHisLeuThrProGluGluLysSer....GluLysSer....?-鏈的酶解IFCC

參考系統(tǒng)選用該多肽為一級參考物質(zhì)第11頁,共16頁，2024年2月25日，星期天HbA1c

HbA1c由蛋白的非酶法糖化形成不穩(wěn)定HbA1c可逆快速穩(wěn)定的

HbA1c不可逆慢速離子交換HPLC分離HIAs無干擾,只檢測HbA1c第12頁,共16頁，2024年2月25日，星期天常

用

方

法HbA1c的檢測方法

適用于日常檢測的方法很少

依據(jù)電荷攜帶的不同

瓊脂電泳

瓊脂糖電泳

離子交換層析

/HPLC

根據(jù)結(jié)構(gòu)的不同

親和層析

/HPLC

免疫分析

根據(jù)化學(xué)特性的不同在過去的二十年間，依據(jù)糖化和非糖化血紅蛋白之間的理化性質(zhì)不同，發(fā)展了許多檢測方法常見的方法：第13頁,共16頁，2024年2月25日，星期天50年代后期:柱式陽離子交換樹脂

長柱狀

耗時數(shù)天可重復(fù)使用1971:

離子交換柱法0.055mmol/L磷酸緩沖液沖洗HbA1c和HbA1(a+b)分離HbA0和HbA2由0.15mmol/L磷酸緩沖液分離70年代后期:

微柱法測定HbA1(a+b+c)例如:Bio-Rex70再現(xiàn)性差

溫度與pH難穩(wěn)定

血脂干擾1981:

親和層析法發(fā)表HbA1c的檢測方法發(fā)展史

第14頁,共16頁，2024年2月25日，星期天HbA1c的檢測方法發(fā)展史

Source:JohnG,ClinChemLabMed2003;41(9)1983:

BioRad開發(fā)柱式HbA1c

法1988:

DAKO開發(fā)免疫法(EIAMTP)1993:

BoehringerMannheim開發(fā)常用HIA1999:

Roche診斷推介測定全血法

首此實(shí)現(xiàn)HbA1c測試于綜合工作平臺，并實(shí)現(xiàn)機(jī)上融血2002: