臨床實驗室生物安全管理課件(PPT50張)

臨床實驗室生物安全管理2021/10/10星期日1某醫(yī)大附院報告了2例感染SARS的病例病例1：女，31歲，檢驗師

患者2003年4月10日出現(xiàn)發(fā)熱，體溫持續(xù)性升高，達39-40℃。白細胞計數(shù)波動在2-4×109/L。于門診拍胸片示雙肺未見異常。發(fā)熱后第6天以高熱原因待查收入呼吸科病房，予以抗生素治療未見好轉(zhuǎn)?；颊咴诎l(fā)病前一周曾給本院一名發(fā)熱護士查便常規(guī)，未戴口罩，該護士后被確診為SARS。高熱第8天側(cè)位胸片見心后緣左肺片狀陰影，疑似SARS住院。入院后呼吸困難，兩肺陰影增多，確診為SARS。2021/10/10星期日2病例2：男，54歲，主管檢驗師患者于2003年4月18日晚出現(xiàn)寒戰(zhàn)，次日感覺全身酸痛，當晚自測體溫37.2℃。于4月20日清晨5點發(fā)熱至38.5℃，遂來本院就診?；颊?月7日起多次收集SARS患者分泌物（痰和咽拭子）及排泄物（大便）并進行鏡檢，雖然戴有口罩，但鏡檢時未罩嚴鼻孔，也未戴防護鏡、穿隔離衣。入院第4天確診為SARS。2021/10/10星期日3一、生物安全基本知識什么叫實驗室生物安全？Laboratorybilsafety

實驗室的生物安全條件和狀態(tài)不低于容許水平，可避免實驗室人員、來訪人員、社區(qū)及環(huán)境受到不可接受的損害，符合相關(guān)法規(guī)、標準等對實驗室生物安全責任的要求?！皩嶒炇疑锇踩币辉~用來描述那些用以防止發(fā)生病原體或毒素無意中暴露及意外釋放的防護原則、技術(shù)以及實踐。2021/10/10星期日4實驗室生物安全防護（biosafetyprotectionforlaboratories)

是指當實驗室工作人員所處理的實驗對象含有致病性微生物及其毒素時，通過在實驗室設計建造、使用個體防護設施、嚴格遵守標準化工作及操作程序等方面采取綜合措施，以確保實驗室工作人員不受實驗室對象侵染，確保周圍環(huán)境不受污染。2021/10/10星期日5一、生物安全基本知識實驗室生物安全保障（laboratorybiosecurity）

“實驗室生物安全保障”則是指單位和個人為防止病原體或毒素丟失、被竊、濫用、轉(zhuǎn)移或有意釋放而采取的安全措施。2021/10/10星期日6氣溶膠aerosols

懸浮于氣體介質(zhì)中的粒徑一般為0.001~100μm

的固態(tài)或液態(tài)微小粒子形成的相對穩(wěn)定的分散體系。2021/10/10星期日7一、生物安全基本知識

——感染性微生物的危險度等級分類危險度1級（無或極低的個體和群體危險）不太可能引起人或動物致病的微生物。危險度2級（個體危險中等，群體危險低）病原體能夠?qū)θ嘶騽游镏虏?，但對實驗室工作人員、社區(qū)、牲畜或環(huán)境不易導致嚴重危害。實驗室暴露也許會引起嚴重感染，但對感染有有效的預防和治療措施，并且疾病傳播的危險有限。危險度3級（個體危險高，群體危險低）病原體通常能引起人或動物的嚴重疾病，但一般不會發(fā)生感染個體向其他個體的傳播，并且對感染有有效的預防和治療措施。危險度4級（個體和群體的危險均高）病原體通常能引起人或動物的嚴重疾病，并且很容易發(fā)生個體之間的直接或間接傳播，對感染一般沒有有效的預防和治療措施。2021/10/10星期日8一、生物安全基本知識

——

實驗室分級實驗室可以分為：基礎實驗室——生物安全防護水平一級（BSL-1）基礎實驗室——生物安全防護水平二級（BSL-2）防護實驗室——生物安全防護水平三級（BSL-3）最高防護實驗室——生物安全防護水平四級（BSL-4）根據(jù)操作不同危險度等級微生物所需的實驗室設計特點、建筑構(gòu)造、防護設施、儀器、操作以及操作程序來決定實驗室的生物安全水平。表1敘述了與不同危險度等級相對應的（而非“等同的”）各危險度等級微生物所要求的實驗室生物安全水平。2021/10/10星期日9危險度等級生物安全水平實驗室類型實驗室操作安全設施1級基礎實驗室——生物安全水平一級基礎的教學、研究GMT不需要；開放實驗臺2級基礎實驗室——生物安全水平二級初級衛(wèi)生服務；診斷、研究加防護服、生物危害標志開放實驗臺，此外需BSC用于防護可能生成的氣溶膠3級防護實驗室——生物安全水平三級特殊的診斷、研究在二級生物安全防護水平上增加特殊防護服、進入制度、定向氣流BSC和／或其他所有實驗室工作所需要的基本設備4級最高防護實驗室——生物安全水平四級危險病原體研究在三級生物安全防護水平上增加氣鎖入口、出口淋浴、污染物品的特殊處理Ⅲ級BSC或Ⅱ級BSC并穿著正壓服、雙開門高壓滅菌器（穿過墻體）、經(jīng)過濾的空氣生物安全水平、操作和設備

BSC:生物安全柜；GMT:微生物操作技術(shù)規(guī)范2021/10/10星期日10生物安全水平1級2級3級4級實驗室隔離a不需要不需要需要需要房間能夠密閉消毒不需要不需要需要需要通風——向內(nèi)的氣流——通過建筑系統(tǒng)的通風設備——HEPA過濾排風不需要不需要不需要最好有最好有不需要需要需要需要/不需要b需要需要需要雙門入口不需要不需要需要需要氣鎖不需要不需要不需要需要帶淋浴設施的氣鎖不需要不需要不需要需要通過間不需要不需要需要/不同生物安全水平對設施的要求

a在環(huán)境與功能上與普通流動環(huán)境隔離b取決于排風位置2021/10/10星期日11生物安全水平1級2級3級4級帶淋浴設施的通過間不需要不需要需要/不需要不需要污水處理不需要不需要需要需要高壓滅菌器——現(xiàn)場——實驗室內(nèi)——雙門不需要不需要不需要最好有不需要不需要需要最好有最好有需要需要需要生物安全柜不需要最好有需要需要人員安全監(jiān)控條件d不需要不需要最好有需要不同生物安全水平對設施的要求c取決于實驗室中所使用的微生物因子

d例如：觀察窗、閉路電視、雙向通訊設備2021/10/10星期日12個體防護裝備裝備避免的危害安全性特征實驗服、隔離衣、連體衣污染衣服背面開口罩在日常服裝外塑料圍裙污染衣服防水鞋襪碰撞和噴濺不露腳趾護目鏡碰撞和噴濺防碰撞鏡片（必須有視力校正或外戴視力校正眼鏡）側(cè)面有護罩安全眼鏡碰撞防碰撞鏡片（必須有視力校正）側(cè)面有護罩面罩碰撞和噴濺罩住整個面部發(fā)生意外時易于取下防毒面具吸入氣溶膠在設計上包括一次性使用的、整個面部或一半面部空氣凈化的、整個面部或加罩的動力空氣凈化（poweredairpurifying，PAPR）的以及供氣的防毒面具手套直接接觸微生物劃破得到微生物學認可的一次性乳膠、乙烯樹脂或聚腈類材料·保護手·網(wǎng)孔結(jié)構(gòu)2021/10/10星期日13一級和二級生物安全水平安全指南2021/10/10星期日14主要內(nèi)容實驗室的設計和設施實驗室的基本規(guī)范健康和醫(yī)學監(jiān)測培訓實驗室設備檢測過程安全防護廢棄物處理實驗室應急程序2021/10/10星期日15一、實驗室的設計和設施在設計實驗室和安排某些類型的實驗工作時，對于那些可能造成安全問題的情況要加以特別關(guān)注，這些情況包括：1、氣溶膠的形成2、處理大容量和∕或高濃度微生物3、儀器設備過度擁擠和過多4、嚙齒動物和節(jié)肢動物的侵擾5、未經(jīng)允許人員進入實驗室6、工作流程：一些特殊標本和試劑的使用。設施和設備要求詳見GB/T19489-2008中的要求2021/10/10星期日16典型的一級生物安全水平實驗室2021/10/10星期日17典型的二級生物安全水平實驗室在生物安全柜中進行可能發(fā)生氣溶膠的操作程序。

門保持關(guān)閉并貼上適當?shù)奈ｋU標志。潛在被污染的廢棄物同普通廢棄物隔開。2021/10/10星期日18二、實驗室的基本規(guī)范

BSL-Ⅰ和BSL-Ⅱ?qū)嶒炇遥?．進入規(guī)定

2．工作人員的防護要求

3.有關(guān)安全操作

4.實驗室工作區(qū)5.生物安全管理2021/10/10星期日191.進入規(guī)定1、在處理危險度2級或更高危險度級別的微生物時，在實驗室門上應標有國際通用的生物危害警告標志（圖1）。2、只有經(jīng)批準的人員方可進入實驗室工作區(qū)域。3、實驗室的門應保持關(guān)閉。4、兒童不應被批準或允許進入實驗室工作區(qū)域。5、進入動物房應當經(jīng)過特別批準。6、與實驗室工作無關(guān)的動物不得帶入實驗室。2021/10/10星期日202021/10/10星期日212.人員防護1、在實驗室工作時，任何時候都必須穿著連體衣、隔離服或工作服。2、在進行可能直接或意外接觸到血液、體液以及其他具有潛在感染性的材料或感染性動物的操作時，應戴上合適的手套。手套用完后，應先消毒再摘除，隨后必須洗手。3、在處理完感染性實驗材料和動物后，以及在離開實驗室工作區(qū)域前，都必須洗手。4、為了防止眼睛或面部受到潑濺物、碰撞物或人工紫外線輻射的傷害，必須戴安全眼鏡、面罩（面具）或其他防護設備。5、嚴禁穿著實驗室防護服離開實驗室，（如去餐廳、咖啡廳、辦公室、圖書館、員工休息室和衛(wèi)生間）。6、不得在實驗室內(nèi)穿露腳趾的鞋子。7、禁止在實驗室工作區(qū)域進食、飲水、吸煙、化妝和處理隱形眼鏡。8、禁止在實驗室工作區(qū)域儲存食品和飲料。9、在實驗室內(nèi)用過的防護服不得和日常服裝放在同一柜子內(nèi)。2021/10/10星期日223.有關(guān)安全操作1、嚴禁用口吸移液管。2、嚴禁將實驗材料置于口內(nèi)。嚴禁舔標簽。3、所有的技術(shù)操作要按盡量減少氣溶膠和微小液滴形成的方式來進行。4、應限制使用皮下注射針頭和注射器。除了進行腸道外注射或抽取實驗動物體液，皮下注射針頭和注射器不能用于替代移液管或用作其他用途。5、出現(xiàn)溢出、事故以及明顯或可能暴露于感染性物質(zhì)時，必須向?qū)嶒炇抑鞴軋蟾?。實驗室應保存這些事件或事故的書面報告。6、必須制訂關(guān)于如何處理溢出物的書面操作程序，并予以遵守執(zhí)行。7、污染的液體在排放到生活污水管道以前必須清除污染（采用化學或物理學方法）。根據(jù)所處理的微生物因子的危險度評估結(jié)果，可能需要準備污水處理系統(tǒng)。8、需要帶出實驗室的手寫文件必須保證在實驗室內(nèi)沒有受到污染。2021/10/10星期日234.實驗室工作區(qū)1、實驗室應保持清潔整齊，嚴禁擺放和實驗無關(guān)的物品。2、發(fā)生具有潛在危害性的材料溢出以及在每天工作結(jié)束之后，都必須清除工作臺面的污染。3、所有受到污染的材料、標本和培養(yǎng)物在廢棄或清潔再利用之前，必須清除污染。4、在進行包裝和運輸時必須遵循國家和∕或國際的相關(guān)規(guī)定。5、如果窗戶可以打開，則應安裝防止節(jié)肢動物進入的紗窗。2021/10/10星期日245.生物安全管理1、實驗室主任（對實驗室直接負責的人員）負責制訂和采用生物安全管理計劃以及安全或操作手冊。2、實驗室主管（向?qū)嶒炇抑魅螀R報）應當保證提供常規(guī)的實驗室安全培訓。3、要將生物安全實驗室的特殊危害告知實驗室人員，同時要求他們閱讀生物安全或操作手冊，并遵循標準的操作和規(guī)程。實驗室主管應當確保所有實驗室人員都了解這些要求。實驗室內(nèi)應備有可供取閱的安全或操作手冊。4、應當制訂節(jié)肢動物和嚙齒動物的控制方案。5、如有必要，應為所有實驗室人員提供適宜的醫(yī)學評估、監(jiān)測和治療，并應妥善保存相應的醫(yī)學記錄。2021/10/10星期日25三、健康和醫(yī)學監(jiān)測主管機構(gòu)有責任通過實驗室主任來確保實驗室全體工作人員接受適當?shù)慕】当O(jiān)測。監(jiān)測的目的是監(jiān)控職業(yè)獲得性疾病。為達到這些目的，應進行如下工作：1、根據(jù)需要提供主動或被動免疫（工作人員的免疫接種）2、促進實驗室感染的早期檢測3、應禁止高度易感人群（如孕婦或免疫損傷人員）在高危險實驗室中工作4、提供有效的個體防護裝備和方法。2021/10/10星期日26在二級生物安全水平操作微生物的實驗室工作人員的監(jiān)測指南：1、必須有錄用前或上崗前的體檢。記錄個人病史，并進行一次有目的的職業(yè)健康評估。2、實驗室管理人員要保存工作人員的疾病和缺勤記錄。3、育齡期婦女應知道某些微生物（如風疹病毒）的職業(yè)暴露對未出生孩子的危害。保護胎兒的正確措施因婦女可能接觸的微生物而異。2021/10/10星期日27四、培訓

進入實驗室工作人員必須經(jīng)過培訓,方能取得進入實驗室控制區(qū)域工作的資格。培訓由實驗室負責人組織,熟悉實驗室工作和操作規(guī)范的人員擔任輔導。培訓內(nèi)容包括:1.實驗室生物安全管理規(guī)定、自身防護的規(guī)定及相關(guān)的其它規(guī)定；2.實驗室各項儀器裝備的使用方法；3.正確的著裝方法；4.微生物學操作基本技術(shù)及無菌操作方法；5.實驗室清潔及消毒方法；6.意外事故處理方法；7.國內(nèi)外新技術(shù)、新方法等的不定期培訓。2021/10/10星期日28培訓的實施細則

1.理論培訓:(l)培訓目標:①熟悉本實驗室的各項規(guī)章制度和操作規(guī)范,形成初步的實驗室工作概念。②了解本實驗室從事工作的特點以及各種微生物的危害評估文件。(2)培訓方式:

講解。(3)培訓內(nèi)容:①本實驗室各項成文的規(guī)章制度:生物安全防護、廢棄物處理、安全制度、衛(wèi)生制度、責任制度、試劑定購制度、儀器使用制度等。②實驗室的各項規(guī)章制度和生物安全管理手冊。(4)考核:

由本實驗室三位工作人員組織對理論學習的書面考試和面試工作。書面考試注重其掌握的準確程度,面試主要測試其熟練程度和靈活應變能力。考核本合格者須重新學習,不能進入下一步的培訓。2021/10/10星期日29培訓的實施細則

2.常規(guī)技能培訓:

(l)培訓目標:①熟練基本實驗操作和儀器的使用；②初步培養(yǎng)實驗的基本觀念和良好的實驗習慣。(2)培訓方式:

現(xiàn)場實驗。(3)培訓內(nèi)容: ①衛(wèi)生打掃:實驗室地面、實驗臺面、超凈臺面、垃圾處理以及打掃得先后順序；工作休息區(qū)的衛(wèi)生打掃。②實驗室常規(guī)操作技術(shù):包括無菌觀念、平板的制備、劃線分離、顯微鏡觀察、菌落接種、活化、菌體收集、菌（毒）種保存等。③ 小型儀器的使用：微量移液器和移液管的使用、pH計和試紙、天平、混勻器、微波爐、電磁爐、水浴鍋等。④大型儀器的使用:普通冰箱和低溫冰箱(存放和處理樣品)、高壓鍋、離心機、液氮罐、生物安全柜、培養(yǎng)箱、顯微鏡等。⑤消毒和滅菌方法:物理滅菌（紫外、過濾、灼燒、高壓)法、化學滅菌(熏蒸、酒精、消毒液)法等。

2021/10/10星期日30五、實驗室設備選擇設備時應符合一些基本原則，即：1、在設計上應能阻止或限制操作人員與感染性物質(zhì)間的接觸2、建筑材料應防水、耐腐蝕并符合結(jié)構(gòu)要求3、設備裝配后應無毛刺、銳角以及易松動的部件4、設備的設計、建造與安裝應便于操作、易于維護、清潔、清除污染和進行質(zhì)量檢驗。應盡量避免使用玻璃及其他易碎的物品。需要詳細咨詢設備的性能和結(jié)構(gòu)規(guī)格，以確保設施具備必要的安全特性。2021/10/10星期日31基本生物安全設備1、移液輔助器——避免用口吸的方式移液。有不同設計的多種產(chǎn)品可供使用。2、生物安全柜，在以下情況使用：——處理感染性物質(zhì)；如果使用密封的安全離心杯，并在生物安全柜內(nèi)裝樣、取樣，則這類材料可在開放實驗室離心——空氣傳播感染的危險增大時——進行極有可能產(chǎn)生氣溶膠的操作時（包括離心、研磨、混勻、劇烈搖動、超聲破碎、打開內(nèi)部壓力和周圍環(huán)境壓力不同的盛放有感染性物質(zhì)的容器、動物鼻腔接種以及從動物或卵胚采集感染性組織）。3、一次性塑料接種環(huán)，也可在生物安全柜內(nèi)使用電加熱接種環(huán)，以減少生成氣溶膠。4、螺口蓋試管及瓶子。5、用于清除感染性材料污染的高壓滅菌器或其他適當工具。6、一次性巴斯德塑料移液管，盡量避免使用玻璃制品。7、在投入使用前，像高壓滅菌器和生物安全柜等設備必須用正確方法進行驗收。應參照生產(chǎn)商的說明書定期檢測。2021/10/10星期日32六、運輸過程

——安全操作注意事項感染性物質(zhì)（菌種）的儲存、包裝與運輸

食品微生物檢測中使用的標準（參照菌種）的包裝與運輸應按照《病原微生物實驗室生物安全管理條例》和《人間傳染的病原微生物名錄》有關(guān)規(guī)定進行。以食品微生物檢測中常見的沙門氏菌屬為例，其屬于第三類病原微生物，實驗活動所需生物安全實驗室級別為二級。運輸包裝分類為B類。具體要求如下：1.運輸專用名稱為：診斷標本或臨床標本或生命物質(zhì)B類。英文運輸專用名稱為：Biologicalsubstance，categoryB。UN編號為：UN3373。2.應有三層包裝：第一層包裝要求用保存標本的原始容器(外螺旋管),稱為主容器(見圖1)，需將蓋口密封，主容器單包裝最大運輸量液體1L，固體4kg；運輸標本的主容器2021/10/10星期日33第二層包裝可以采用專用二級包裝桶或耐高壓塑料袋，稱為輔助容器(見圖2)，應防水、防破損、防泄漏，并含吸收材料；運輸標本的輔助容器(吸收材料)

2021/10/10星期日34七、廢棄物處理實驗室應建立廢棄物處理程序要對感染性物質(zhì)及其包裝物進行鑒別并分別進行處理，相關(guān)工作要遵守國家和國際規(guī)定。廢棄物可以分成以下幾類：1、可重復或再使用，或按普通“家庭”廢棄物丟棄的非污染（非感染性）廢棄物2、污染（感染性）銳器——皮下注射用針頭、手術(shù)刀、刀子及破碎玻璃；這些廢棄物應收集在帶蓋的不易刺破的容器內(nèi)，并按感染性物質(zhì)處理3、通過高壓滅菌和清洗來清除污染后重復或再使用的污染材料4、高壓滅菌后丟棄的污染材料5、直接焚燒的污染材料。2021/10/10星期日35八、實驗室安全應急程序意外事故應對方案應當提供以下操作規(guī)范：1、防備自然災害，如火災、洪水、地震和爆炸2、生物危害的危險度評估3、意外暴露的處理和清除污染4、人員和動物從現(xiàn)場的緊急撤離5、人員暴露和受傷的緊急醫(yī)療處理6、暴露人員的醫(yī)療監(jiān)護7、暴露人員的臨床處理8、流行病學調(diào)查9、事故后的繼續(xù)操作。2021/10/10星期日36在制定意外事故應對方案時應考慮以下幾方面問題：1、高危險度等級微生物的鑒定2、高危險區(qū)域的地點，如實驗室、儲藏室和動物房3、明確處于危險的個體和人群4、明確責任人員及其責任，如生物安全官員、安全人員、地方衛(wèi)生部門、臨床醫(yī)生、微生物學家、獸醫(yī)學家、流行病學家以及消防和警務部門5、列出能接受暴露或感染人員進行治療和隔離的單位6、暴露或感染人員的轉(zhuǎn)移7、列出免疫血清、疫苗、藥品、特殊儀器和物資的來源8、應急裝備的供應，如防護服、消毒劑、化學和生物學的溢出處理盒、清除污染的器材物品。2021/10/10星期日37二、微生物實驗室應急措施（1）手套的損壞、污染1.手套被污染時應立即用消毒劑噴灑手套；2.脫下手套，放入黃色垃圾袋內(nèi)，待消毒，脫手套的方法為：a.用一手捏起另一只手套近手腕處的外緣；b.將手套從手上脫下并將手套外表面翻轉(zhuǎn)入內(nèi)；c.用戴著手套的手拿住該手套；d.用脫去手套的手指插入另一手套腕部內(nèi)面；e.脫下該手套使其內(nèi)面向外并形成一個由兩個手套組成的袋狀；f.丟棄在高溫消毒袋中待消毒處理；g.更換新手套繼續(xù)實驗。注意：以上操作要遠離面部。

2021/10/10星期日38二、微生物實驗室應急措施（2）衣物污染1.盡快脫掉最外層防護服，并注意防止感染性物質(zhì)進一步擴散；2.將已污染的防護服放入黃色垃圾袋內(nèi)，待高壓滅菌；3.脫掉手套，到污染區(qū)出口處洗手；4.更換防護服和手套；5.必要時對發(fā)生污染及脫防護服的地方進行消毒處理（如果內(nèi)衣被污染，應立即脫掉已污染的衣物，消毒處理）。2021/10/10星期日39二、微生物實驗室應急措施（3）感染性物質(zhì)濺灑污染皮膚及粘膜a.感染性液體（主要指增菌培養(yǎng)液）外溢到皮膚，應立即停止工作，脫掉手套，用75%的酒精進行皮膚消毒，再用大量水沖洗。手部清洗消毒的方法：應推薦使用肘動式或自動式洗手開關(guān)，用流動水沖洗手部多次，然后用液體皂滴在手上，反復撮手，再用水徹底沖洗（動作輕揉，水不要開的太大），清洗完畢，用干凈的紙巾或手巾擦干，可以用75%的酒精擦手來清除雙手的輕度污染，在沒有洗手池的地點，可以使用含酒精的“免洗”手部清潔產(chǎn)品替代。b.感染性液體濺入眼睛，應立即停止工作，脫掉手套，迅速到緩沖區(qū)用洗眼器沖洗，再用生理鹽水沖洗（注意動作輕柔，勿損傷眼睛）。洗眼器的使用方法為：取下洗眼器罩，受感染者的眼睛部位擺放到?jīng)_眼器花灑正上方，將洗眼器開關(guān)打開，洗眼器花灑即有清水噴出。以上兩種情況都應做適當?shù)念A防治療和醫(yī)學觀察，并報告實驗室安全員進行事故記錄。2021/10/10星期日40二、微生物實驗室應急措施（4）刺傷、切割傷或擦傷應急處理要保持鎮(zhèn)靜，立即停止實驗，脫掉手套，用清水和肥皂水清洗傷口，盡量擠出傷口處的血液，取出急救箱，用碘酒或75%的酒精擦洗傷口，適當?shù)陌＜皶r就醫(yī)，告知醫(yī)生受傷原因及可能的微生物污染，必要時要進行醫(yī)學處理。2021/10/10星期日41二、微生物實驗室應急措施（5）潛在危害性氣溶膠的釋放操作中生物安全柜突然停機或轉(zhuǎn)為正壓；大量感染性物質(zhì)溢出、濺灑；非封閉離心桶的離心機內(nèi)帶有感染性物質(zhì)的離心管發(fā)生破裂都有可能造成氣溶膠的釋放。此時所有人員必須立即撤離相關(guān)區(qū)域，報告實驗室安全員，在1小時內(nèi)任何人不得進入事發(fā)實驗室，以使氣溶膠排出和重粒子沉降；無中央通風系統(tǒng)則應推遲進入（如24小時），貼出標識以示禁止入內(nèi)，過后由專業(yè)人員指導清除污染，如甲醛蒸汽熏蒸，操作時注意防護，暴露人員應進行醫(yī)學觀察，必要時及時就醫(yī)。2021/10/10星期日42二、微生物實驗室應急措施（6）生物安全柜內(nèi)溢灑當生物安全柜內(nèi)發(fā)生溢灑時，處理溢灑物不要將頭伸入安全柜內(nèi)，也不要將臉直接面對前操作口，而應處于前視面板的后方。選擇消毒劑時需要考慮消毒劑對生物安全柜的腐蝕性（使用含氯制劑后再用清水擦拭）。當溢灑的量不足1mL時，可直接用消毒劑浸濕的紙巾（或其它材料）擦拭。使用消毒劑時，要從溢出區(qū)域的外圍開始，向中心進行處理。當生物安全柜內(nèi)大量溢出時，要1.使生物安全柜保持開啟狀態(tài)；2.在溢灑物上從外圍向中心覆蓋浸有消毒劑的吸收材料，作用一定時間以發(fā)揮消毒作用。（必要時，用消毒劑浸泡工作表面以及排水溝和接液槽）；3.消毒后脫下手套。如果防護服已被污染，脫掉污染的防護服后，洗手；4.穿好新的防護裝備，如手套、防護服、護目鏡等；5.小心將吸收了溢灑物的吸收材料和溢灑物收集到專用的收集袋或容器中，并反復用新的吸收材料將剩余物質(zhì)吸凈；6.破碎的玻璃或其它銳器要用鑷子或鉗子處理；7.用消毒劑擦拭或噴灑安全柜內(nèi)壁、工作表面以及前視窗的內(nèi)側(cè)，作用一定時間后，用潔凈水擦去消毒劑；8.必要時，使用甲醛熏蒸。2021/10/10星期日43二、微生物實驗室應急措施（7）感染性物質(zhì)溢灑在臺面、地面感染性物質(zhì)溢灑在臺面、地面，此時，需要準備的處理工具為：

——對感染性物質(zhì)有效的消毒液：消毒液需要按使用要求定期配制（次氯酸鈉溶液的使用濃度為0.5－1%）；

——消毒液盛放容器（如噴壺）；

——鑷子或鉗子

——耐高壓的掃帚和簸箕，或其他處理銳器的機械裝置；

——足量的紙巾或其他適宜的吸附材料；

——用于盛放感染性溢出物以及清理物品的生物危害袋；

——橡膠手套；

——面部防護裝備，如面罩、護目鏡、一次性口罩等；

——溢灑處理警示標識，如“禁止進入”、“生物危險”等。

2021/10/10星期日44

當發(fā)生生物危險物質(zhì)溢灑時，要立即通知房間內(nèi)的無關(guān)人員迅速離開，在撤離房間的過程中注意防護氣溶膠。關(guān)門并張貼“禁止進入”、“溢灑處理”的警告標識，撤離人員脫去個體防護裝備，用適當?shù)南緞┖退逑幢┞镀つw并立即通知實驗室安全員。至少30min后準備好清理工具和物品，穿著適當?shù)膫€體防護裝備（鞋、防護服、口罩、雙層手套、護目鏡等）后進入實驗室。此時需要兩人共同處理溢灑物。用紙巾等吸收材料覆蓋溢灑物，從外圍向中心傾倒適當量的消毒劑，使消毒劑與溢灑物混合并作用30分鐘，而后小心將吸收了溢灑物的吸收材料連同溢灑物收集到專用的收集袋或容器中，并反復用新的吸收材料將剩余物質(zhì)吸凈。破碎的玻璃或其它銳器要用鑷子或鉗子處理。并將它們置于可防刺透的容器（利器盒）中。處理的溢灑物以及處理工具（包括收集銳器的鑷子等）全部置于專用的收集袋或容器內(nèi)封好。用消毒劑噴灑或擦拭可能被污染的區(qū)域，包括手套和防護服前部。脫去個體防護裝備，將暴露部位向內(nèi)折，置于專用的收集袋或容器中封好，洗手。所有處理用具及廢物送于高壓滅菌。2021/10/10星期日45二、微生物實驗室應急措施（8）離心機內(nèi)帶有感染性物質(zhì)的離心管發(fā)生破裂1.非封閉離心桶的離心機內(nèi)帶有感染性物質(zhì)的離心管發(fā)生破裂時：離心機正在運行時發(fā)生破裂或懷疑發(fā)生破裂，應關(guān)閉電源，密閉30min使氣溶膠沉降。離心機停止后發(fā)現(xiàn)破裂，應立即蓋上蓋子密閉30min。而后戴結(jié)實的手套（如厚橡膠手套）及口罩（避免吸入氣溶膠），必要時可在外面戴一次性手套。使用鑷子清理玻璃碎片，或用鑷子夾著的棉花來清理。破碎的離心管及離心桶、轉(zhuǎn)軸和轉(zhuǎn)子都應放在無腐蝕性的、對相關(guān)微生物具有殺滅作用的消毒劑內(nèi)浸泡60min以上。未破損的帶蓋離心管應放在另一個有消毒劑的容器中適當浸泡，或用消毒劑徹底擦拭后回收。離心機內(nèi)腔應用適當濃度的同種消毒劑擦拭（使用含氯消毒劑后，應再用清水擦拭，并干燥）。清理時所使用的全部材料都應按感染性廢棄物處理。最后向?qū)嶒炇野踩珕T報告，進行事故記錄。2021/10/10星期日462.在可封閉的離心桶（安全杯）內(nèi)離心管發(fā)生破裂時：如果懷疑封閉的離心桶內(nèi)有管子破裂，應在生物安全柜內(nèi)打開離心桶蓋子察看。確有破裂時，松開離心桶（安全杯）蓋子，但不要打開，放入黃色垃圾袋，直接高壓滅菌；或者采用化學消毒法：將離心桶及內(nèi)容物放到對該種微生物有效的無腐蝕性消毒劑里浸泡60min以上。離心杯在使用消毒劑浸泡后，應再用清水洗凈后干燥。最后向?qū)嶒炇野踩珕T報告，進行事故記錄。2021/10/10星期日47二、微生物實驗室應急措施（9）發(fā)現(xiàn)相關(guān)癥狀若實驗操作者或其所在實驗室的工作人員出現(xiàn)與被操作病原微生物導致疾病類似的癥狀，則應被視為可能發(fā)生實驗室感染，應及時到指定醫(yī)院就診，并如實說明工作性質(zhì)和發(fā)病情況。在就診過程中，應采取必要的隔離防護措施，以免疾病傳播。2021/10/10星期日48檢驗科生物安全事件案例一例傷寒桿菌感染90年代初期，我院檢驗科細菌室一位工作人員在檢驗操作時，不慎將長有傷寒桿菌的