高三生物第一輪復(fù)習(xí)基因工程和蛋白質(zhì)工程

第49講

基因工程和蛋白質(zhì)工程1.概念:指按照人們的愿望，通過轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物新的遺傳特性，創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品2.別名:

。3.原理:

。4.操作對(duì)象:

。5.操作水平:

。6.操作環(huán)境:生物

（體內(nèi)/體外）進(jìn)行7.結(jié)果：

。8.優(yōu)點(diǎn)：

（1）

。

（2）

等?；蛑亟MDNA分子水平基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)基因體外創(chuàng)造出符合人們需要的生物類型和生物產(chǎn)品

定向改造生物性狀克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙一.基因工程概述1.人的胰島素基因?yàn)槭裁茨芡ㄟ^拼接并在受體細(xì)胞大腸桿菌中表達(dá)出相同蛋白質(zhì)。能表達(dá)的基礎(chǔ)：①基因是控制生物性狀和遺傳的獨(dú)立遺傳單位②遺傳信息的傳遞都遵循中心法則③生物界共同一套遺傳密碼理論基礎(chǔ)：能拼接的基礎(chǔ)：①DNA的基本組成單位都是四種脫氧核苷酸。②雙鏈DNA分子的空間結(jié)構(gòu)都是規(guī)則的雙螺旋結(jié)構(gòu)。③都遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則“分子手術(shù)刀”“分子縫合針”“分子運(yùn)輸車”二、基因工程的基本工具1.分子手術(shù)刀”-限制性內(nèi)切核酸酶(也稱“限制酶”)原核生物數(shù)千特定核苷酸序列磷酸二酯鍵黏性末端二.基因操作基本的工具（1）該DNA片段上EcoRI的識(shí)別序列在哪兒？（2）請(qǐng)用剪刀模擬EcoRI的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)將目的基因“切割”下來。探究?活動(dòng)一、用剪刀模擬EcoRI剪切目的基因(Bt基因)操作(3)要想獲得某個(gè)特定性狀的目的基因必須要用限制酶切幾次？可產(chǎn)生幾個(gè)黏性(平)末端？切割后的目的基因上有幾個(gè)黏性（平）末端要切2次，產(chǎn)生4個(gè)黏性(平)末端；目的基因上有2個(gè)教材隱性知識(shí)：(1)源于選擇性必修3P71“旁欄思考”：①原核生物中存在限制酶的意義是什么？原核生物中限制酶的作用是切割外源DNA以保證自身安全，防止外來病原物的危害。②限制酶來源于原核生物，為什么不能切割自己的DNA分子？限制酶不切割自身DNA的原因是原核生物DNA分子中不存在該酶的識(shí)別序列或識(shí)別序列已經(jīng)被修飾（甲基化），使限制酶不能將其切開。

下表中列出了幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)，圖1、圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)．請(qǐng)回答下列問題：(1)DNA序列經(jīng)過上表中幾種限制酶識(shí)別切割后，可以獲得

種黏性末端的DNA片段。三(2)用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，可以同時(shí)使用

兩種限制酶同時(shí)處理質(zhì)粒、外源DNA，這樣處理的優(yōu)點(diǎn)

。

BamHI和HindⅢ（或EcoRI、HindⅢ或EcoRI、BamHI）防止目的基因、質(zhì)粒的自身環(huán)化以及目的基因反向連接在質(zhì)粒改編：(3)若啟動(dòng)子在質(zhì)粒上方，目的基因上鏈為模板鏈右方為3端，則應(yīng)選取

兩種限制酶同時(shí)處理質(zhì)粒、外源DNAEcoRI、HindⅢ選擇限制酶切割位點(diǎn)的基本原則：A.確保質(zhì)粒和目的基因產(chǎn)生相同的粘性末端

B

.

不破壞目的基因和質(zhì)粒上的標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制遠(yuǎn)點(diǎn)等原件（至少保留一個(gè)完整的標(biāo)記基因，便于篩選

）C.最好采用雙酶切法切割目的基因和質(zhì)粒，防止目的基因、質(zhì)粒的自身環(huán)化以及目的基因反向連接在質(zhì)粒上

還需要考慮連接的方向1.（2023·湖北·統(tǒng)考高考真題）用氨芐青霉素抗性基因（AmpR）、四環(huán)素抗性基因（TetR）作為標(biāo)記基因構(gòu)建的質(zhì)粒如圖所示。用含有目的基因的DNA片段和用不同限制酶酶切后的質(zhì)粒，構(gòu)建基因表達(dá)載體（重組質(zhì)粒），并轉(zhuǎn)化到受體菌中。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．若用HindⅢ酶切，目的基因轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物可能不同B．若用PvuⅠ酶切，在含Tet（四環(huán)素）培養(yǎng)基中的菌落，不一定含有目的基因C．若用SphⅠ酶切，可通過DNA凝膠電泳技術(shù)鑒定重組質(zhì)粒構(gòu)建成功與否D．若用SphⅠ酶切，攜帶目的基因的受體菌在含Amp（氨芐青霉素）和Tet的培養(yǎng)基中能形成菌落D標(biāo)記基因：篩選出含有目的基因的細(xì)胞（有的細(xì)胞只含有質(zhì)粒不含有目的基因故還需要進(jìn)行目的基因及表達(dá)產(chǎn)物檢測(cè)。）2.（2023·浙江·統(tǒng)考高考真題）紫外線引發(fā)的DNA損傷，可通過“核苷酸切除修復(fù)（NER）”方式修復(fù)，機(jī)制如圖所示。著色性干皮癥（XP）患者的NER酶系統(tǒng)存在缺陷，受陽光照射后，皮膚出現(xiàn)炎癥等癥狀?；颊哂啄臧l(fā)病，20歲后開始發(fā)展成皮膚癌。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．修復(fù)過程需要限制酶和DNA聚合酶B．填補(bǔ)缺口時(shí)，新鏈合成以5’到3’的方向進(jìn)行C．DNA有害損傷發(fā)生后，在細(xì)胞增殖后進(jìn)行修復(fù)，對(duì)細(xì)胞最有利D．隨年齡增長，XP患者幾乎都會(huì)發(fā)生皮膚癌的原因，可用突變累積解釋C（2021年湖北真題）3．限制性內(nèi)切酶EcoRI識(shí)別并切割雙鏈DNA，用EcoRI完全酶切果蠅基因組DNA，理論上得到DNA片段的平均長度（堿基對(duì)）約為（

）A．6 B．250 C．4000 D．24000C例4.下列所示的黏性末端是由幾種限制性核酸內(nèi)切酶作用產(chǎn)生的（）①A.1種B.2種C.3種D.4種D圖中的黏性末端哪些能連接在一起？

、

。①②③④

②③④1.不同的限制酶可能切割形成相同的黏性末端2.相同的黏性末端能夠堿基互補(bǔ)配對(duì)，能被DNA連接酶縫合二.基因操作基本的工具2.DNA連接酶磷酸二酯鍵大腸桿菌黏性末端黏性末端（從T4噬菌體入侵的細(xì)菌中提取）教材隱性知識(shí)：DNA連接酶和DNA聚合酶(2)源于選擇性必修3P72“旁欄思考”：DNA連接酶和DNA聚合酶

(填“是”或“不是”)一回事。原因是：①DNA連接酶連接的是

，而DNA聚合酶是把單個(gè)的

連接到已有的DNA片段上。②

起作用時(shí)需要以一條DNA鏈為模板，而

不需要模板。不是兩個(gè)DNA片段脫氧核苷酸DNA聚合酶DNA連接酶例6（2023年重慶真題）某小組通過PCR（假設(shè)引物長度為8個(gè)堿基短于實(shí)際長度）獲得了含有目的基因的DNA片段，并用限制酶進(jìn)行酶切（下圖），再用所得片段成功構(gòu)建了基因表達(dá)載體。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．其中一個(gè)引物序列為5＇TGCGCAGT-3＇B．步驟①所用的酶是SpeI和CfoIC．用步驟①的酶對(duì)載體進(jìn)行酶切，至少獲得了2個(gè)片段D．酶切片段和載體連接時(shí)，可使用E．coli連接酶或T4連接酶B一般是經(jīng)人工改造的3.載體二.基因操作基本的工具噬菌體受體DNA上限制酶酶切位點(diǎn)標(biāo)記且對(duì)受體細(xì)胞無害總結(jié)：易錯(cuò)點(diǎn)撥(1)質(zhì)粒與擬核中的DNA有哪些相同點(diǎn)：（至少寫出兩點(diǎn)）

①

。

②

。

③

。(2)質(zhì)粒

（是/不是）一種細(xì)胞器。(3)細(xì)胞膜上的載體蛋白與基因工程中的載體的區(qū)別

①化學(xué)本質(zhì)不同：細(xì)胞膜上的載體：

?；蚬こ讨械妮d體可能是物質(zhì)，如

；也可是生物，如

；

②功能不同：細(xì)胞膜上的載體功能是

;基因工程中的載體是一種“分子運(yùn)輸車”,把

?；瘜W(xué)本質(zhì)和結(jié)構(gòu)相同能夠自我復(fù)制具有遺傳效應(yīng)或都能夠指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成等不是蛋白質(zhì)質(zhì)粒動(dòng)植物病毒噬菌體協(xié)助細(xì)胞膜控制物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞（2020，高三，衡水）目前基因工程所用的質(zhì)粒載體主要是以天然細(xì)菌質(zhì)粒的各種元件為基礎(chǔ)重新組建的人工質(zhì)粒，pBR322質(zhì)粒是較早構(gòu)建的質(zhì)粒載體，其主要結(jié)構(gòu)如圖一所示：(1)構(gòu)建人工質(zhì)粒時(shí)要有抗性基因，以便于______________________________。觀察上圖，如果A為質(zhì)粒，則C表示

。便于重組DNA的篩選或（篩選出含有目的基因的細(xì)胞）重組質(zhì)粒(2)pBR322分子中另有單個(gè)的BamHⅠ限制酶作用位點(diǎn)，現(xiàn)將經(jīng)BamHⅠ處理后的質(zhì)粒與用另一種限制酶BglⅡ處理得到的目的基因，通過____________作用連接，成功地獲得了重組質(zhì)粒。能形成重組質(zhì)粒的原因是______________________________________________。DNA連接酶兩種限制酶切割得到的黏性末端相同(4)作為受體大腸桿菌應(yīng)不含________________，以方便篩選已導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體大腸桿菌。將大腸桿菌在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖二的菌落。再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上，使絨布面沾上菌落，然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖三的結(jié)果(空圈表示與圖二對(duì)照無菌落的位置)。圖三結(jié)果顯示，多數(shù)大腸桿菌導(dǎo)入的是______________。切割目的基因的限制酶應(yīng)為_________。（EcoRI或BamHI）

ampR和tetRpBR322質(zhì)粒BamHI(1)實(shí)驗(yàn)原理4.DNA的粗提取與鑒定二.基因操作基本的工具0DNA溶解度NaCl濃度0.14mol/L2mol/L(2)實(shí)驗(yàn)步驟

0DNA溶解度NaCl濃度0.14mol/L2mol/L1.低溫可抑制核酸水解酶的活性，進(jìn)而抑制DNA降解；2.低溫抑制DNA分子運(yùn)動(dòng)，使DNA易形成沉淀析出；3.低溫有利于增加DNA的柔韌性，減少斷裂。1.目的基因的獲取三.基因操作基本操作程序2、從基因文庫中直接獲取1、人工合成3、利用PCR獲取和擴(kuò)增目的基因在已知目的基因核苷酸序列且基因較小的情況下，利用DNA合成儀自動(dòng)合成將含有某種生物不同基因的許多DNA片段，導(dǎo)入到受體菌的群體中儲(chǔ)存，各個(gè)受體菌分別含有這種生物的不同基因，稱為基因文庫?；蚪M文庫:部分基因文庫:包含一種生物的全部基因（cDNA文庫）基因文庫類型：包含一種生物的部分基因【思考1】從基因組文庫中獲得的胰島素基因，若以大腸桿菌作為受體細(xì)胞卻未得到對(duì)應(yīng)的胰島素，其原因可能是？故將真核生物的基因?qū)朐松?，?yīng)該從什么文庫中獲??？胰島素基因含內(nèi)含子，在大腸桿菌中，其初始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中與內(nèi)含子對(duì)應(yīng)的RNA序列不能被切除，無法表達(dá)出胰島素；cDNA文庫【思考2】從部分文庫中獲得的胰島素基因，若以大腸桿菌作為受體細(xì)胞卻未得到對(duì)應(yīng)的胰島素，其原因可能是？該如何改進(jìn)？大腸桿菌無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等細(xì)胞器，對(duì)胰島素原不具有加工、修飾、分泌功能；需要在體外加工形成胰島素或?qū)⒛康幕驅(qū)虢湍妇蝎@得產(chǎn)物。關(guān)于抗蟲棉Bt毒蛋白（教材隱性知識(shí)）：源于選擇性必修3P77“相關(guān)信息”：Bt抗蟲蛋白基因產(chǎn)生的Bt抗蟲蛋白只在某類昆蟲腸道的堿性環(huán)境中才能表現(xiàn)出毒性，而人和牲畜的胃液呈

，腸道細(xì)胞也無特異性受體，因此，Bt抗蟲蛋白不會(huì)對(duì)人畜產(chǎn)生危害。酸性（2023山東真題）科研人員構(gòu)建了可表達(dá)J-V5融合蛋白的重組質(zhì)粒并進(jìn)行了檢測(cè)，該質(zhì)粒的部分結(jié)構(gòu)如圖甲所示，其中V5編碼序列表達(dá)標(biāo)簽短肽V5。(1)與圖甲中啟動(dòng)子結(jié)合的酶是

。除圖甲中標(biāo)出的結(jié)構(gòu)外，作為載體，質(zhì)粒還需具備的結(jié)構(gòu)有

（答出2個(gè)結(jié)構(gòu)即可）。(2)構(gòu)建重組質(zhì)粒后，為了確定J基因連接到質(zhì)粒中且插入方向正確，需進(jìn)行PCR檢測(cè)，若僅用一對(duì)引物，應(yīng)選擇圖甲中的引物

。已知J基因轉(zhuǎn)錄的模板鏈位于b鏈，由此可知引物F1與圖甲中J基因的

（填“a鏈”或“b鏈”）相應(yīng)部分的序列相同。RNA聚合酶限制酶切割位點(diǎn)、標(biāo)記基因、復(fù)制原點(diǎn)等F2和R1或F1與R2（1）構(gòu)建目的：

；

。（2）構(gòu)建過程：2.基因表達(dá)載體的構(gòu)建—基因工程的核心：

同種限制酶若只考慮兩兩連接，質(zhì)粒和目的基因至少可以連接

種；即

。3目的基因-目的基因、質(zhì)粒-質(zhì)粒、目的基因-質(zhì)粒①使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳給下一代。②使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用三.基因操作基本操作程序思考：基因表達(dá)載體，只含有目的基因就可以了嗎？注意：1.生物之間進(jìn)行基因交流，只有使用受體生物自身基因的啟動(dòng)子才能比較有利于基因的表達(dá)；2.為了增強(qiáng)目的基因的表達(dá)水平，有時(shí)還要增加一些其他調(diào)控元件，如增強(qiáng)子等；2.基因表達(dá)載體的構(gòu)建—基因工程的核心：如：乳腺生物反應(yīng)器是將藥用蛋白基因與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子重組在一起位于哪？作用？1（2023·遼寧·統(tǒng)考高考真題）CD163蛋白是PRRSV病毒感染家畜的受體。為實(shí)時(shí)監(jiān)控CD163蛋白的表達(dá)和轉(zhuǎn)運(yùn)過程，將紅色熒光蛋白R(shí)FP基因與CD163基因拼接在一起（如下圖），使其表達(dá)成一條多肽。該拼接過程的關(guān)鍵步驟是除去（

）A．CD163基因中編碼起始密碼子的序列B．CD163基因中編碼終止密碼子的序列C．RFP基因中編碼起始密碼子的序列D．RFP基因中編碼終止密碼子的序列B3.轉(zhuǎn)化的方法：導(dǎo)入植物細(xì)胞導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞導(dǎo)入原核細(xì)胞花粉管通道法、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法顯微注射法、病毒介導(dǎo)法Ca2+處理法（感受態(tài)法）三.基因操作基本操作程序農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法①農(nóng)桿菌特點(diǎn)：易感染

植物，對(duì)大多數(shù)

植物沒有感染能力。②原理：Ti質(zhì)粒上的

可以轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞，并整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上。雙子葉植物和裸子單子葉T-DNA感染植物細(xì)胞，把目的基因插入到植物細(xì)胞的染色體的DNA上受傷的葉片傷口處的細(xì)胞可釋放大量的酚類物質(zhì)，可吸引農(nóng)桿菌，有利于目的基因成功轉(zhuǎn)化a.農(nóng)桿菌的作用是

。b.用農(nóng)桿菌感染時(shí)，優(yōu)先選擇

（受傷的/完好的）葉片細(xì)胞與重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌培養(yǎng)，選用該葉片的理由是

。c.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法有兩次導(dǎo)入與拼接：第一次是是將目的基因拼接到Ti質(zhì)粒的T-DNA上并導(dǎo)入農(nóng)桿菌，第二次(非人工操作)是將含目的基因的T-DNA導(dǎo)入植物細(xì)胞，并將含目的基因的T-DNA拼接到受體細(xì)胞的染色體DNA上導(dǎo)入的目的基因，可能存在于細(xì)胞質(zhì)中，也可能整合到染色體DNA上。染色體DNA上的目的基因有可能通過花粉傳播進(jìn)入其他作物中，造成“基因污染”。

花粉管通道法（我國獨(dú)創(chuàng)）在植物授粉后一定時(shí)間內(nèi)，剪去柱頭，將DNA溶液滴在花柱切面，使目的基因通過花粉管通道進(jìn)入胚囊。適用生物：開花植物據(jù)圖回答：（1）B基因在水稻卵細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄，推測(cè)其可能的原因是卵細(xì)胞中

。A．含B基因的染色體缺失B．DNA聚合酶失活C．B基因發(fā)生基因突變D．B基因的啟動(dòng)子無法啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄B基因存在于水稻基因組中，其僅在體細(xì)胞（2n）和精子中正常表達(dá)，但在卵細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄。為研究B基因表達(dá)對(duì)卵細(xì)胞的影響，設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn)。DB基因存在于水稻基因組中，其僅在體細(xì)胞（2n）和精子中正常表達(dá)，但在卵細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄。為研究B基因表達(dá)對(duì)卵細(xì)胞的影響，設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn)。（2）從水稻體細(xì)胞或

中提取總RNA，構(gòu)建

文庫，進(jìn)而獲得B基因編碼蛋白的序列。將該序列與Luc基因連接成融合基因，然后構(gòu)建重組表達(dá)載體。

精子

cDNAB基因存在于水稻基因組中，其僅在體細(xì)胞（2n）和精子中正常表達(dá)，但在卵細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄。為研究B基因表達(dá)對(duì)卵細(xì)胞的影響，設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn)。（3）在過程①、②轉(zhuǎn)化篩選時(shí)，過程

在培養(yǎng)基中應(yīng)加入卡那霉素。過程

中T-DNA整合到受體細(xì)胞染色體DNA上，②①①常用法:

.②常用菌：

。③過程：

Ca2+處理法(感受態(tài)細(xì)胞法)大腸桿菌單細(xì)胞、繁殖快、遺傳物質(zhì)相對(duì)少④受體細(xì)胞用Ca2+處理的目的是

。⑤用Ca2+處理受體細(xì)胞是通過改變

的通透性來完成使其變?yōu)楦惺軕B(tài)細(xì)胞，容易吸收周圍環(huán)境中的DNA分子細(xì)胞壁Ca2+處理細(xì)胞感受態(tài)細(xì)胞表達(dá)載體與感受態(tài)細(xì)胞混合感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA微生物作為受體細(xì)胞有哪些優(yōu)點(diǎn)？將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞Bt基因mRNABt抗蟲蛋白抗蟲棉PCR與核酸分子雜交技術(shù)檢測(cè)抗原—抗體雜交技術(shù)分子水平抗蟲鑒定（個(gè)體水平）4.目的基因的檢測(cè)與鑒定三.基因操作基本操作程序a.檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因可采用DNA分子雜交技術(shù)。b.檢測(cè)目的基因是否成功轉(zhuǎn)錄出mRNA可采用核酸分子雜交技術(shù)。例6.(2021·山東，25)人類γ基因啟動(dòng)子上游的調(diào)控序列中含有BCL11A蛋白結(jié)合位點(diǎn)，該位點(diǎn)結(jié)合BCL11A蛋白后，γ基因的表達(dá)被抑制。通過改變?cè)摻Y(jié)合位點(diǎn)的序列，解除對(duì)γ基因表達(dá)的抑制，可對(duì)某種地中海貧血癥進(jìn)行基因治療?？蒲腥藛T擴(kuò)增了γ基因上游不同長度的片段，將這些片段分別插入表達(dá)載體中進(jìn)行轉(zhuǎn)化和熒光檢測(cè)，以確定BCL11A蛋白結(jié)合位點(diǎn)的具體位置。相關(guān)信息如圖所示。(1)為將擴(kuò)增后的產(chǎn)物定向插入載體指導(dǎo)熒光蛋白基因表達(dá)，需在引物末端添加限制酶識(shí)別序列。據(jù)圖可知，在F1～F7末端添加的序列所對(duì)應(yīng)的限制酶是______，在R末端添加的序列所對(duì)應(yīng)的限制酶是________。本實(shí)驗(yàn)中，從產(chǎn)物擴(kuò)增到載體構(gòu)建完成的整個(gè)過程共需要____種酶。SalⅠEcoRⅠ6(2)將構(gòu)建的載體導(dǎo)入除去BCL11A基因的受體細(xì)胞，成功轉(zhuǎn)化后，含F(xiàn)1～F6與R擴(kuò)增產(chǎn)物的載體表達(dá)熒光蛋白，受體細(xì)胞有熒光，含F(xiàn)7與R擴(kuò)增產(chǎn)物的受體細(xì)胞無熒光。含F(xiàn)7與R擴(kuò)增產(chǎn)物的受體細(xì)胞無熒光的原因是___________________________________________________。F7與R擴(kuò)增產(chǎn)物不含完整的啟動(dòng)子，熒光蛋白基因不表達(dá)據(jù)此結(jié)果可推測(cè)，BCL11A蛋白結(jié)合位點(diǎn)位于______________________________________________，理由是_________________________________________________________________________________列上所對(duì)應(yīng)序列之間的區(qū)段上引物F4與F5在調(diào)控序根據(jù)有無熒光情況判斷，F(xiàn)1～F4與R擴(kuò)增產(chǎn)物上均有結(jié)合位點(diǎn)，因此結(jié)合位點(diǎn)位于F4所對(duì)應(yīng)調(diào)