流感病毒在體內的免疫反應過程

關于流感病毒在體內的免疫反應過程Outline

一、非特異性免疫應答二、特異性免疫應答三、小結四、免疫反應的驗證第2頁,共22頁，2024年2月25日，星期天流感病毒的結構

根據核蛋白和基質蛋白的抗原性,流感病毒可以分成甲(A)、乙(B)、丙(C)三種類型,其中甲型流感病毒根據其表面血凝素(HA)和神經氨酸酶(NA)分成許多亞型。第3頁,共22頁，2024年2月25日，星期天Outline

第4頁,共22頁，2024年2月25日，星期天/mobanCompanyLogo一、非特異性免疫應答流感病毒感染的早期，首先引起防御屏障吞噬細胞干擾素NK細胞等為主的非特異性免疫第5頁,共22頁，2024年2月25日，星期天/mobanCompanyLogo防御屏障作用在感染的初期，呼吸道粘膜及其分泌物等構成第一道防御屏障,阻擋流感病毒的侵入，再通過纖毛的擺動，排除病毒，凈化呼吸道。吞噬細胞的作用當第一道防線不足以阻擋病毒的入侵時，病毒則侵入呼吸道粘膜下組織，此時局部的吞噬細胞吞噬病原體。與此同時，補體被激活，其活化產物C3b/C4b通過調理作用，增強吞噬細胞的吞噬能力?；罨耐淌杉毎尫糯罅康拇傺滓蜃雍脱装Y介質，進一步增強免疫應答和炎癥反應。一、非特異性免疫應答第6頁,共22頁，2024年2月25日，星期天/mobanCompanyLogoNK細胞的作用

NK細胞是自然殺傷的淋巴細胞，在干擾素和細胞因子的誘導下，NK細胞即可活化，活化的NK細胞直接與病毒感染的細胞(靶細胞)接觸，并通過釋放穿孔素裂解靶細胞，達到抗病毒的作用。一、非特異性免疫應答干擾素的作用干擾素(IFN)是病毒感染的細胞或其它活化細胞產生的一類分泌性蛋白，具有抗病毒、抗腫瘤和免疫調節(jié)等多種生物學活性。干擾素可通過誘導細胞合成抗病毒蛋白(AVP)，該蛋白抑制病毒的復制、限制病毒的擴散。在感染的起始階段特異性免疫尚未形成之前，干擾素發(fā)揮重要的抗病毒作用。第7頁,共22頁，2024年2月25日，星期天/mobanCompanyLogo二、特異性免疫應答病毒感染屬細胞內感染,所以細胞免疫的作用尤為突出。流感病毒侵入機體后，依靠血凝素(HA)吸附于宿主細胞表面，經過吞飲進入胞漿后在其內合成病毒蛋白而成為內源性抗原，此內源性抗原降解為抗原肽，然后與MHC-1類分子結合成抗原肽—MHC-1類復合物，然后表達于細胞膜上，供CD8+T細胞識別。細胞免疫應答第8頁,共22頁，2024年2月25日，星期天/mobanCompanyLogo二、特異性免疫應答該細胞稱抗原提呈細胞(APC)；APC膜上的抗原肽—MHC-1類復合物與T細胞表面的抗原受體(TCR)特異性結合，使T細胞活化、增殖、分化為細胞毒性T細胞(CTL)。CTL可通過抗原受體識別流感病毒感染的(靶細胞)細胞，然后釋放穿孔素和顆粒酶等物質，攻擊和殺傷靶細胞，達到清除或釋放在細胞內復制的病毒體，從而在抗體的配合下清除病毒。CTL還通過分泌IFN、TNF等細胞因子發(fā)揮抗病毒作用。CD4+T細胞受流感病毒刺激后被活化、增殖、分化為效應性Th1細胞，并釋放多種細胞因子，誘發(fā)炎癥反應，促進CTL的增殖和分化，在抗病毒感染中起重要作用。細胞免疫應答第9頁,共22頁，2024年2月25日，星期天/mobanCompanyLogo體液免疫體液免疫主要作用于細胞外游離的病毒。流感病毒侵入機體后，B細胞膜上的抗原受體(BCR)與其特異性結合，成為B細胞活化的信號，使B細胞活化、增殖、分化為漿細胞，漿細胞在流感病毒抗原的刺激下合成并分泌具有抗病毒效應的抗體。二、特異性免疫應答第10頁,共22頁，2024年2月25日，星期天/mobanCompanyLogo病毒中和抗體:該抗體能與細胞外游離的病毒結合，封閉其細胞受體結合的病毒抗原表位或改變病毒表面抗原構型，阻止病毒吸附、侵入易感細胞，但不能直接殺滅病毒。血凝抑制抗體:表面含有血凝素的流感病毒可刺激機體產生血凝抑制抗體，該抗體能中和病毒的感染性。補體結合抗體:此類抗體不能中和病毒感染性，但可通過調理作用增強巨噬細胞的吞噬作用。二、特異性免疫應答體液免疫中的抗體：第11頁,共22頁，2024年2月25日，星期天/mobanCompanyLogo總之，機體抗流感病毒免疫應答由非特異性免疫應答和特異性免疫應答共同來完成。非特異性免疫先于特異性免疫發(fā)生，主要通過屏障結構、非特異性免疫細胞(吞噬細胞、NK細胞)和體液免疫分子(補體、干擾素)等發(fā)揮抗病毒作用。特異性免疫是建立在非特異性免疫的基礎上，受流感病毒抗原的誘導而發(fā)生。但特異性免疫的作用更強烈、更有效、更具有針對性。主要通過細胞免疫和體液免疫發(fā)揮特異性抗流感病毒作用。三、小結第12頁,共22頁，2024年2月25日，星期天/mobanCompanyLogo流感病毒多種多樣，但只要感染過同一種病毒發(fā)生了感冒，之后再感染同一類病毒時就不會感冒了。這是因為免疫記憶。用同一抗原再次免疫時，可引起比初次更強的抗體產生，稱之為再次免疫應答或免疫記憶，無論在體液免疫或細胞免疫均可發(fā)生免疫記憶現(xiàn)象。在體液免疫時，對TD抗原的再次應答可表現(xiàn)為抗體滴度明顯上升，免疫球蛋白類別可由IgM轉換為IgG，而且抗體親和力增強。提示再次應答不僅發(fā)生抗體量的變化，而且也發(fā)生了質的變化。實驗證明，免疫記憶的基礎是免疫記憶細胞的產生。三、小結第13頁,共22頁，2024年2月25日，星期天/mobanCompanyLogo（1）IgA的檢測原理：病毒首先侵襲呼吸道黏膜，而黏膜表面的分泌性IgA可以有選擇的轉移到黏膜表面，能夠結合病毒防止其粘附和進入。因此，只需檢測IgA的變化即可證實是否為免疫反應。四、免疫反應的驗證第14頁,共22頁，2024年2月25日，星期天/mobanCompanyLogo方法：將小鼠隨機分2組，設病毒組和正常組。在乙醚輕度麻醉下，滴鼻感染15滴LD50流感病毒液，感染后5天，殺剖小鼠，稱體重和肺重測定肺指數。采血分離血清，收集鼻咽沖洗液、支氣管肺泡灌洗液、腸道沖洗液進行ELISA法檢測IgA含量。四、免疫反應的驗證第15頁,共22頁，2024年2月25日，星期天四、免疫反應的驗證（2）外周血IL-12水平的檢測原理：白細胞介素12又稱NK細胞刺激因子(NKSF)。IL-12主要由單核巨唾細胞、NK細胞和B細胞分泌,主要生物學活性有:①促進激活的T細胞和NK細胞的增殖;增強Th細胞、NK細胞、LAK細胞及CTL的生物學活性。②誘導Tn向Th1分化,并促進Th1的增殖和發(fā)育,與IL-4共同調節(jié)Th1/Th2平衡,調節(jié)機體的免疫應答。第16頁,共22頁，2024年2月25日，星期天/mobanCompanyLogo實驗對象：1、健康對照組：收集XX醫(yī)院健康體檢者20名2、流感癥狀組：收集XX醫(yī)院明確診斷的流感癥狀患者26名；經rRT-PCR方法確定為非甲型HlNl流感病毒感染3、輕癥甲流組：收集XX醫(yī)院診斷明確甲型H1N1流感病毒感染住院患者29名;經rRT-PCR方法確診為甲型H1N1病毒感染，癥狀較輕4、重癥甲流組：收集XX醫(yī)院明確診斷甲型H1N1病毒感染住院患者名13名;經rRT-PCR方法確定為甲型H1N1病毒感染,并且癥狀較重四、免疫反應的驗證第17頁,共22頁，2024年2月25日，星期天實驗過程：實驗前準備:板條包被ELASA法測定檢測物濃度四、免疫反應的驗證第18頁,共22頁，2024年2月25日，星期天結論：流感病毒感染呼吸道后,通過呼吸器官上皮細胞感染其下方樹突狀細胞和巨唾細胞并且在這些細胞中傳播,樹突狀細胞和巨嗟細胞可以分秘抗病毒的細胞因子例如TNF-α、IL-12、IL-18等來協(xié)調有效的先天免疫反應來對抗病毒。四、免疫反應的驗證第19頁,共22頁，2024年2月25日，星期天/mobanCompanyLogo（3）外周血T淋巴細胞亞群及B、NK細胞百分率的測定步驟：1.標本采集及制備2.染色及固定細胞3.流式細胞儀上T淋巴細胞亞群及B、NK的檢測及分析

四、免疫反應的驗證第20頁,共22頁，2024年2月25日，星期天結論：正常情況下CD4+T/CD8+T比值維持動態(tài)平衡