遼寧省錦州市某校2022-2023學年高二下學期期中生物試題（解析版）

高級中學名校試卷PAGEPAGE1遼寧省錦州市某校2022-2023學年高二下學期期中試題一、單選題1.下列有關果酒、果醋和泡菜制作的敘述，正確的是（）A.在果酒發(fā)酵后期擰開瓶蓋的間隔時間可延長B.制作果酒的適宜溫度高于制作果醋的C.參與果酒、果醋和泡菜制作的主要微生物都是原核生物D.果酒發(fā)酵過程中發(fā)酵液的pH會降低，泡菜發(fā)酵過程中發(fā)酵液的pH基本不變〖答案〗A〖祥解〗果酒變果醋發(fā)酵改變兩個條件：1、通氧，因為醋酸菌是好氧細菌；2、升高溫度，因為果酒的發(fā)酵溫度在18～30℃，而果醋的發(fā)酵溫度在30～35℃?！驹斘觥緼、在果酒發(fā)酵后期，由于營養(yǎng)物質減少、代謝廢棄物積累等因素，酵母菌呼吸速率減慢，產(chǎn)生的二氧化碳減少，因此擰開瓶蓋的間隔時間可延長，A正確；B、果酒的發(fā)酵溫度在18～30℃，而果醋的發(fā)酵溫度在30～35℃，制作果酒的適宜溫度低于制作果醋的，B錯誤；C、參與果酒的主要微生物是酵母菌，屬于真核生物，C錯誤；D、果酒發(fā)酵過程中由于產(chǎn)生二氧化碳，所以發(fā)酵液的pH會降低，泡菜發(fā)酵過程中會產(chǎn)生乳酸，發(fā)酵液的pH會降低，D錯誤。故選A。2.圖1表示以蘋果為原料進行果酒、果醋發(fā)酵的過程示意圖；圖2是探究果酒與果醋發(fā)酵的裝置示意圖。下列敘述正確的是（）A.若圖1中的甲和乙均表示原料，則果酒和果醋發(fā)酵均以葡萄糖為原料B.圖1中的①~③進行的場所分別是細胞質基質、線粒體內膜和細胞質基質C.在果酒和果醋的發(fā)酵后期，圖2中氣體出口排出的氣體不同D.果酒和果醋制作過程中，均要通過圖2中的培養(yǎng)基入口不斷加入原料〖答案〗C〖祥解〗1、酵母菌是兼性厭氧性生物，無氧條件下可以發(fā)酵產(chǎn)生酒精。2、醋酸菌是好氧菌，在氧氣充足時，糖充分情況下可將糖轉化為醋酸，糖不足時，可將酒精轉化為醋酸?！驹斘觥緼、若圖1中的甲和乙均表示原料，則果酒和果醋發(fā)酵分別以葡萄糖和乙醇，A錯誤；B、圖1中的①~③依次表示呼吸作用第一階段，無氧呼吸第二階段，有氧呼吸第二、三接單，進行的場所分別是細胞質基質、細胞質基質和線粒體，B錯誤；C、在果酒和果醋的發(fā)酵后期，圖2中氣體出口排出的氣體不同，前者每隔一段時間打開一次氣體出口，后者由于使需要發(fā)酵，一直打開進氣口和出氣口，C正確；D、果酒和果醋制作過程中，均不需要通過圖2中的培養(yǎng)基入口不斷加入原料，D錯誤。故選C。3.為了分離和純化高效分解石油的細菌，科研人員用被石油污染過的土壤進行如圖A所示的實驗。同學甲進行過程④的操作，其中一個平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如圖B所示。下列敘述錯誤的是（）A.步驟③與普通液體培養(yǎng)基成分最大區(qū)別是步驟③的培養(yǎng)基中石油是唯一碳源B.步驟⑤振蕩培養(yǎng)基的目的是提高培養(yǎng)液溶氧量，同時使菌體與培養(yǎng)液充分接觸C.圖B培養(yǎng)基的結果可能是由涂布不均勻造成的D.步驟⑤后取樣測定石油含量的主要目的是篩選出能分解石油的細菌〖答案〗D〖祥解〗1、微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。2、分析圖B：圖B采用的是稀釋涂布平板法，但涂布不均勻?！驹斘觥緼、該實驗的目的是為了分離和純化高效分解石油的細菌，因此步驟③與普通液體培養(yǎng)基成分最大區(qū)別是步驟③的培養(yǎng)基中石油是唯一碳源，A正確；B、步驟⑤需要振蕩培養(yǎng)，原因是提高培養(yǎng)液中（溶解）氧的含量，通過振蕩可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質的利用率，B正確；C、圖B采用的接種方法是稀釋涂布平板法，出現(xiàn)圖B結果（菌落分布不均勻）可能的操作失誤是涂布不均勻，C正確；D、步驟⑤后取樣測定石油含量的目的是篩選出分解石油能力最強的細菌，D錯誤。故選D。4.我國衛(wèi)生部門規(guī)定每1000mL自來水中大腸桿菌數(shù)不能超過3個（37℃，培養(yǎng)48h），大腸桿菌數(shù)目的測定常采用濾膜培養(yǎng)法在選擇性和鑒別性培養(yǎng)基上進行。下列說法錯誤的是（）A.若培養(yǎng)溫度不是37℃，可能會影響檢測結果B.若檢測過程中發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基被污染，則培養(yǎng)基必須經(jīng)過滅菌后再使用C.為檢測大腸桿菌數(shù)目，接種時一般用稀釋涂布平板法D.測定自來水中大腸桿菌數(shù)目時，需利用鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)后計數(shù)〖答案〗B〖祥解〗微生物的接種方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。①平板劃線法：通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面。②稀釋涂布平板法：將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)?！驹斘觥緼、溫度會影響細菌繁殖，因此若培養(yǎng)溫度不是37℃，可能會影響檢測結果，A正確；B、’若檢測過程中發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基被污染，則必須重新配置培養(yǎng)基然后滅菌再次進行實驗，B錯誤；C、稀釋涂布平板法可以用細菌計數(shù)，C正確；D、測定飲用水中大腸桿菌的數(shù)目可取一定量的飲用水，之后按一定倍數(shù)稀釋，再用加入伊紅-亞甲藍的鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)，取深紫色金屬光澤菌落進行計數(shù)，D正確。故選B。5.品種青花菜具有由核基因控制的多種優(yōu)良性狀，另一遠緣植物乙的細胞質中存在抗除草劑基因，欲將乙細胞質中的抗性基因引入甲中。相關敘述錯誤的是（）A.過程A中取頂芽細胞進行體細胞雜交有利于獲得脫毒苗B.過程B中常用PEG誘導原生質體融合C.過程C中只有融合細胞具有完整的細胞結構，可以正常生長D.雜種植株的抗除草劑基因遵循孟德爾遺傳定律〖答案〗D〖祥解〗題圖分析：該圖為體細胞雜交過程，其中A為去除細胞壁，制備原生質體，可以酶解法，B為誘導原生質體融合，可以用聚乙二醇處理，融合的雜種細胞應該具備乙品種細胞質中的抗性基因和甲品種的控制多種優(yōu)良性狀的核基因?！驹斘觥緼、頂端分生組織幾乎不帶毒，因此，過程A中取頂芽細胞進行體細胞雜交有利于獲得脫毒苗，A正確；B、流程中A處理可使用纖維素酶和果膠酶處理植物細胞獲得原生質體，B處理可使用聚乙二醇促融，B正確；C、過程C中只有融合細胞活性部位互補，具有完整的細胞結構，才正常生長，然后將獲得的雜種細胞進行組織培養(yǎng)獲得雜種植株，C正確；D、抗除草劑基因不一定插入到細胞核內的染色體上，所以雜種植株的抗除草劑基因不一定遵循孟德爾遺傳定律，D錯誤。故選D。6.為了獲得抗蚜蟲棉花新品種，研究人員將雪花蓮凝集素基因（GNA）和尾穗莧凝集素基因（ACA）與載體（pBI121）結合，然后導入棉花細胞。下列操作與實驗目的不符的是（）A.用限制酶BsaBI和DNA連接酶處理兩種基因可獲得GNA-ACA融合基因B.與只用KpnI相比，KpnI和XhoI處理融合基因和載體可保證基因轉錄方向正確C.將棉花細胞接種在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上可篩選出轉基因細胞D.用PCR技術可檢測GNA和ACA基因是否導入棉花細胞中〖答案〗C〖祥解〗1、基因工程又稱基因拼接技術和DNA重組技術，是以分子遺傳學為理論基礎，以分子生物學和微生物學的現(xiàn)代方法為手段，將不同來源的基因按預先設計的藍圖，在體外構建雜種DNA分子，然后導入活細胞，以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、生產(chǎn)新產(chǎn)品?；蚬こ碳夹g為基因的結構和功能的研究提供了有力的手段。2、基因工程的基本操作程序：目的基因的獲取、基因表達載體的構建、將目的基因導入受體細胞、目的基因的檢測和表達?！驹斘觥緼、雪花蓮凝集素基因（GNA）和尾穗莧凝集素基因（ACA）均有BsaBI酶切位點，所以用限制酶BsaBI和DNA連接酶處理兩種基因可獲得GNA-ACA融合基因，A不符合題意；B、圖中質粒與ACA-GNA上都含有KpnⅠ和XhoⅠ的酶切位點，與只用KpnI相比，KpnI和XhoⅠ處理融合基因和載體可保證基因轉錄方向正確，B不符合題意；C、由于重組質粒含有卡那霉素的抗性基因，故將棉花細胞接種在含卡那霉素的培養(yǎng)基上可篩選出轉基因細胞，C符合題意；D、根據(jù)GNA-ACA融合基因的兩端序列設計合適的引物，可以利用PCR技術檢測GNA和ACA基因是否導入棉花細胞中，D不符合題意。故選C。7.“X基因”是DNA分子上一個有遺傳效應的片段，若要用PCR技術特異性地拷貝“X基因”，需在PCR反應中加入兩種引物，兩種引物及其與模板鏈的結合位置如圖甲所示。經(jīng)4輪循環(huán)后，產(chǎn)物中有五種不同的DNA分子，如圖乙所示，其中第③和④種DNA分子的個數(shù)有（）A.8個 B.6個 C.4個 D.2個〖答案〗B〖祥解〗PCR：（1）概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應，是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術；（2）原理：DNA雙鏈復制；（3）條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）；（4）過程：高溫變性、低溫復性、中溫延伸。（5）結果：經(jīng)過n次擴增，形成的DNA分子數(shù)是2n個，其中只有2條單鏈不含有引物?！驹斘觥客ㄟ^圖中信息可知，“X基因”第1次復制得到兩個DNA：①和②各1個；“X基因”第2次復制得到4個DNA：①復制得①和③、②復制得②和④；“X基因”第3次復制得到8個DNA：①復制得①和③、③復制得③和⑤、②復制得②和④、④復制得④和⑤；“X基因”第4次復制得到16個DNA：①復制得①和③、②復制得②和④、2個③復制得2個③和2個⑤、2個④復制得2個④和2個⑤、兩個⑤復制得到4個⑤。從上面的推測可知，經(jīng)4輪循環(huán)產(chǎn)物后，產(chǎn)物中有8個⑤、3個④、3個③、1個②、1個①。因此，經(jīng)4輪循環(huán)后，第③和④種DNA分子的個數(shù)有：3+3=6個，故選B。8.一種雙鏈DNA分子被三種不同的限制酶切割，切割產(chǎn)物通過電泳分離，用大小已知的DNA片段的電泳結果作為分子量標記（右圖左邊一列）。關于該雙鏈DNA,下列說法錯誤的是（）A.呈環(huán)狀結構B.分子質量大小為10kbC.有一個NotI和兩個EcoRI切點D.其NotI切點與EcoRI切點的最短距離為2kb〖答案〗D〖祥解〗通過與分子量標記比較可知單用EcoRI處理后產(chǎn)生了4kb和6kb兩條帶；而利用EcoRI和NotI雙酶切時產(chǎn)生了6kb、3kb、1kb三條帶，即4kb的片段進一步被NotI酶切為3kb和1kb的片段，因此DNA含有一個NotI酶切位點，因為用NotI處理只產(chǎn)生了一個10kb的條帶，所以該分子必須是環(huán)狀的，長度一定是10kb。據(jù)此答題?！驹斘觥緼B、單用EcoRI處理和利用EcoRI和NotI雙酶切時產(chǎn)生的結果不同，說明DNA含有NotI酶切位點，因為用NotI處理只產(chǎn)生了一個10kb的條帶，所以該分子必須是環(huán)狀的，且長度一定是10kb，A正確；B正確；C、因為用NotI處理只產(chǎn)生了一個10kb的條帶，說明該環(huán)狀DNA上含有一個NotI切割位點，單用EcoRI處理后產(chǎn)生了4kb和6kb兩條帶，說明該環(huán)狀DNA上含有2個EcoRI切割位點，C正確：D、用EcoRI處理后產(chǎn)生的4kb的片段，進一步被NotI酶切為3kb和1kb的片段，可以得知NotI切點與EcoRI切點的最短距離為1kb，最大距離為3kb，D錯誤。故選D。9.實時熒光RT-PCR可用于RNA病毒的核酸檢測，其原理是∶在PCR復性過程中探針和引物一起與模板結合，探針兩側分別帶有熒光基團和抑制熒光發(fā)出的淬滅基團，新鏈延伸過程中，DNA聚合酶會破壞探針，導致熒光基團與淬滅基團分離而發(fā)出熒光。利用RT-PCR進行核酸檢測的相關過程如圖所示。下列說法錯誤的是（）A.做RT-PCR之前，需要先根據(jù)cDNA的核苷酸序列合成引物和探針B.RNA不能作為PCR擴增的模板，故需要將樣本中的RNA反轉錄為DNA后再進行擴增C.若檢測結果有強烈熒光信號發(fā)出，說明被檢測者沒有感染病毒D.病毒的檢測還可以檢測病毒的物質或病毒引發(fā)產(chǎn)生的抗體，其原理都是抗原-抗體雜交〖答案〗C〖祥解〗根據(jù)題意，通過病毒的RNA進行逆轉錄產(chǎn)生cDNA，cDNA在PCR過程中解旋后可以和引物一起與模板結合，探針兩側有熒光基團和抑制熒光發(fā)出的淬滅基團，延伸過程DNA聚合酶破壞了探針使淬滅基團分離后發(fā)出熒光而檢測到是否有cDNA來判斷是否有病毒。【詳析】A、PCR需要根據(jù)cDNA的核苷酸序列合成引物，同時RT-PCR還需要探針與待測樣本DNA混合，故需要根據(jù)cDNA的核苷酸序列合成探針，A正確；B、PCR擴增必須以DNA為模板，RNA不能作為PCR擴增的模板，所以需要將樣本中的RNA反轉錄為DNA后再進行擴增，B正確；C、若檢測結果有強烈熒光信號發(fā)出，說明被檢測者極有可能感染了病毒，C錯誤；D、RNA病毒的檢測方法有：①RNA檢測，即檢測病毒的遺傳物質RNA；②特異性抗原蛋白檢測，即檢測病毒表面的一種糖蛋白；③特異性抗體檢測，即檢測感染者體內通過免疫反應所產(chǎn)生的某種抗體。后兩種方法的原理是抗原-抗體雜交，D正確。故選C。10.為了研究抗生素X對四種不同細菌（1、2、3、4）的作用效果，有人做了如圖的抗菌實驗，四天后菌落形態(tài)如圖所示，則下列分析正確的是（）A.抗生素X對細菌3的抑制效果最好B.抗生素X對細菌4的抑制效果最差C.抗生素X對細菌2的抑制比對細菌3的抑制效果好D.可以用抗生素X去治療由細菌1引起的疾病〖答案〗C〖祥解〗題圖分析，如果抗生素X對細菌沒有抑制作用，則細菌能夠在濾紙上形成菌落；如果抗生素X對細菌有抑制作用則細菌的菌落越小說明抗生素X對細菌的抑制作用越大，圖形中細菌1不受抗生素X的影響，細菌2、3、4都受抗生素X的影響，并且抑制作用由小到大為：3<4<2?！驹斘觥緼、四天后細菌2的黑色區(qū)域最短，說明抗生素X對細菌2的抑制效果最好，A錯誤；B、四天后細菌3的黑色區(qū)域最短，說明抗生素X對細菌3的抑制效果最差，B錯誤；C、根據(jù)圖中結果可知，用抗生素X對細菌2的抑制比對細菌3的抑制效果好，C正確；D、由圖可知，抗生素X對細菌1不起作用，因此不能用抗生素X去治療由細菌1引起的疾病，D錯誤。故選C。11.兩種遠緣植物的細胞融合后會導致一方的染色體被排出。若其中一個細胞的染色體在融合前由于某種原因斷裂，形成的染色體片段在細胞融合后可能不會被全部排出，未排出的染色體片段可以整合到另一個細胞的染色體上而留存在雜種細胞中。依據(jù)該原理，將普通小麥與耐鹽性強的中間偃麥草進行體細胞雜交獲得了耐鹽小麥新品種，過程如圖1所示。將得到的普通小麥、中間偃麥草及雜種植物1~4的基因組DNA進行PCR擴增，結果如圖2所示，下列敘述錯誤的是（）A.過程②紫外線的作用是誘導中間偃麥草發(fā)生染色體片段斷裂B.過程③利用了細胞膜的流動性，過程⑤可種植在高鹽土壤中篩選C.④過程中需要更換培養(yǎng)基，適當提高生長素的比例有利于根的分化D.據(jù)圖2推斷符合要求的耐鹽雜種植株為植株1、2、4〖答案〗D〖祥解〗題圖分析：①是通過酶解法去除植物細胞壁，②是用紫外線誘導染色體變異，③是誘導融合形成雜種細胞，④為脫分化和再分化形成雜種植株的過程，體現(xiàn)了植物細胞的全能性，⑤為篩選耐鹽小麥的過程?！驹斘觥緼、過程②紫外線的作用是誘導中間偃麥草的染色體斷裂，從而可能實現(xiàn)偃麥草的耐鹽相關基因整合到小麥染色體上，從而獲得高耐鹽的小麥，A正確；B、③是誘導融合形成雜種細胞，利用了細胞膜的流動性；⑤為篩選耐鹽小麥的過程，可種植在高鹽土壤中篩選，B正確；C、④為脫分化和再分化形成雜種植株的過程，由于分化形成根或芽所需要的生長素和細胞分裂素的比例不同，因此該過程中需要更換培養(yǎng)基，適當提高生長素的比例有利于根的分化，C正確；D、根據(jù)圖2可知，1、2、4同時具有普通小麥和中間偃麥草的DNA片段，因此再生植株1-4中一定是雜種植株的有1、2、4。若要篩選得到耐鹽的小麥，需要將雜種植株種植在高鹽的土壤中進一步篩選，即植株1、2、4不一定都是耐鹽的雜種植株，D錯誤。故選D。12.花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。為培育抗黑腐病雜植株，研究者設計如下流程。下列相關敘述正確的是（）A.過程①需要使用胰蛋白酶或者膠原蛋白酶來處理兩種細胞B.過程②后，顯微鏡下觀察到有葉綠體的細胞即為融合細胞C.過程③的培養(yǎng)基中需加入植物激素來誘導脫分化和再分化D.可借助PCR技術、黑腐病菌接種實驗對雜種植株進行鑒定〖答案〗D〖祥解〗1、植物的體細胞雜交就是將同種或不同種的細胞經(jīng)過一定的誘導方法誘導融合形成一個細胞，再將細胞培育成植株的過程。2、雜種細胞再生出新的細胞壁是植物原生質體融合的標志，細胞中高爾基體與細胞壁的形成有關。3、植物體細胞雜交的優(yōu)點是：克服遠緣雜交不親和的障礙，培育遠緣雜種植株。4、雜種細胞經(jīng)過植物組織培養(yǎng)的再分化過程，可選擇性表達出親本細胞的相應性狀。5、分析題圖：圖示為采用植物體細胞雜交技術獲得抗黑腐病雜種植株的流程圖，其中①表示采用酶解法（纖維素酶和果膠酶）去除細胞壁的過程；②表示誘導原生質體融合的過程；③是脫分化形成愈傷組織的過程?！驹斘觥緼、過程①是去除細胞壁，可用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁，A錯誤；B、過程②表示誘導原生質體融合的過程，顯微鏡下觀察有無葉綠體作為初步篩選的標志，還需要鑒定是否具有抗黑腐病特性來確定融合細胞，B錯誤；C、過程③是脫分化形成愈傷組織的過程，沒有再分化，C錯誤；D、在分子水平上可通過PCR技術對雜種植株進行鑒定，在個體水平上可以通過對雜種植株進行黑腐病菌接種實驗，可篩選出具有高抗性的雜種植株，D正確。故選D。13.抗體—藥物偶聯(lián)物(ADC)通過采用特定技術將具有生物活性的小分子藥物連接到能特異性識別腫瘤細胞的單克隆抗體上，實現(xiàn)對腫瘤細胞的選擇性殺傷。ADC的結構及其發(fā)揮作用的機理如圖所示，下列有關說法錯誤的是（）A.單克隆抗體制備過程中通常將免疫后得到的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合B.用96孔板培養(yǎng)和多次篩選雜交瘤細胞后，在體外大規(guī)模培養(yǎng)可獲得單克隆抗體C.ADC通過抗體與細胞膜上的受體特異性結合，以主動運輸?shù)姆绞竭M入腫瘤細胞D.ADC在腫瘤細胞里被溶酶體裂解，釋放藥物，使腫瘤細胞死亡〖答案〗C〖祥解〗分析題圖，抗體藥物偶聯(lián)物(ADC)通過將具有生物活性的小分子藥物與單克隆抗體結合，被腫瘤細胞特異性識別，通過胞吞的方式進入腫瘤細胞，導致溶酶體裂解，釋放藥物，實現(xiàn)了對腫瘤細胞的選擇性殺傷?！驹斘觥緼、效應B細胞能夠分泌抗體，但是不具有增殖能力，而骨髓瘤細胞具有無線增殖的能力，因此利用動物細胞融合技術將效應B細胞和骨髓瘤細胞融合成雜交瘤細胞，雜交瘤細胞既能無限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體，利用該細胞制備單克隆抗體，A正確；B、單克隆抗體制備過程中至少經(jīng)過兩次篩選，一次是用特定的選擇培養(yǎng)基進行篩選，獲得雜交瘤細胞，雜交瘤細胞還需進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，即用96孔板培養(yǎng)和多次篩選雜交瘤細胞后，就可獲得既能無限增殖，又能分泌特異性抗體的雜交瘤細胞，B正確；C、由題圖可知，ADC進入腫瘤細胞是胞吞的方式，C錯誤；D、ADC通過胞吞的方式進入腫瘤細胞，溶酶體使其裂解，釋放藥物，實現(xiàn)了對腫瘤細胞的選擇性殺傷，D正確。故選C。14.矮牽?；ò曜仙纳顪\由花青素的含量高低決定，花青素由查耳酮合酶（CHS）催化合成。為獲得紫色更深的矮牽牛，科研人員將CHS基因導入野生型紫花矮牽牛葉肉細胞中，得到的轉基因植株花色反而出現(xiàn)了淺紫色。檢測CHS基因的轉錄水平，得到如圖所示電泳圖譜（2道和3道分別表示野生型和轉基因植株）。下列判斷正確的是（）A.用不同的限制酶處理含CHS基因的DNA和運載體B.轉基因植株中內源CHS基因的轉錄水平明顯低于野生型C.轉基因植株內外源CHS基因的轉錄均被抑制D.沒有獲得紫色更深的植株是因為CHS基因沒有成功轉入〖答案〗B〖祥解〗基因表達是指將來自基因的遺傳信息合成功能性基因產(chǎn)物的過程，基因表達產(chǎn)物通常是蛋白質?；虮磉_包括轉錄和翻譯。轉錄過程由RNA聚合酶進行，以DNA的一條鏈為模板，按照堿基互補配對的原則，合成相對應的RNA分子。翻譯過程是以信使RNA（mRNA）為模板，指導合成蛋白質的過程?！驹斘觥緼、用相同的限制酶處理含CHS基因的DNA和運載體，使其含有相同的黏性末端，以便兩者構建重組分子，A錯誤；B、從圖中可以看出，2道中外源的條帶處為0，內源的條帶較粗，說明沒有外源基因的表達，而3道中外源的條帶較粗，內源的條帶較細，說明內源基因（CHS基因）的轉錄水平明顯低于野生型，B正確；C、轉基因植株內源CHS基因的轉錄被抑制，外源CHS基因的轉錄正常，C錯誤；D、從圖中看到，外源基因轉入成功，沒有獲得紫色更深的植株可能是因為內源CHS基因表達被抑制，外源CHS基因和內源CHS基因的綜合表達量沒有野生型的內源CHS基因表達量高，D錯誤。故選B。15.玉米中賴氨酸含量比較低的原因是賴氨酸合成過程中的兩種關鍵酶——天冬氨酸激酶和二氫吡啶二羧酸合成酶的活性，受細胞內氨基酸濃度的影響較大。賴氨酸達到一定濃度時會抑制這兩種酶的活性。為了提高玉米中的賴氨酸含量，興趣小組提出的下列方法不可行的是（）A.用紫外線處理玉米愈傷組織，篩選有利突變體B.將富含賴氨酸的蛋白質編碼基因導入玉米細胞C.通過基因定點突變技術修飾天冬氨酸激酶和二氫吡啶二羧酸合成酶基因的個別堿基D.利用蛋白質工程直接改造天冬氨酸激酶和二氫吡啶二羧酸合成酶的空間結構〖答案〗D〖祥解〗1、基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲??；②基因表達載體的構建；③將目的基因導入受體細胞；④目的基因的檢測與鑒定．其中構建基因表達載體是基因工程的核心步驟，需要限制酶和DNA連接酶．植物組織培養(yǎng)技術包括脫分化和再分化兩個重要過程，而決定植物脫分化和再分化的關鍵因素是植物激素的種類和比例，特別是生長素和細胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過程中非常重要。2、蛋白質工程：指以蛋白質分子的結構規(guī)律及其生物功能的關系作為基礎，通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質進行改造，或制造一種新的蛋白質，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求?！驹斘觥緼、離體的細胞或組織通過脫分化培養(yǎng)可以形成愈傷組織，愈傷組織分裂能力比較強，用紫外線處理玉米愈傷組織會發(fā)生突變，可以篩選有利突變體，A不符合題意；B、賴氨酸達到一定濃度時會抑制天冬氨酸激酶和二氫吡啶二羧酸合成酶的活性，因此將富含賴氨酸的蛋白質編碼基因導入玉米細胞，能充分利用細胞內的賴氨酸合成蛋白質，從而降低細胞內賴氨酸對天冬氨酸激酶和二氫吡啶二羧酸合成酶的抑制，從而提高玉米中的賴氨酸含量，B不符合題意；C、將天冬氨酸激酶的第352位的蘇氨酸變成異亮氨酸，將二氫吡啶二羧酸合成酶中104位的天冬酰胺變成異亮氨酸，就可以使玉米葉片和種子中的游離賴氨酸分別提高5倍和2倍。因此，增加玉米細胞中賴氨酸含量最有效的途徑是通過基因定點突變技術修飾天冬氨酸激酶和二氫吡啶二羧酸合成酶基因的個別堿基，C不符合題意；D、蛋白質工程是對基因修飾或基因合成，從而改變蛋白質的結構，而不是直接改造蛋白質的空間結構，這方法不可行，D符合題意。故選D。二、不定項選擇題（本題共5小題，每小題3分，共15分。在每小題給出的四個選項中，有一項或多項是符合題目要求的。全部選對得3分，選對但選不全得1分，有選錯得0分。）16.地球上的植物每年產(chǎn)生的纖維素超過70億噸，其中40%~60%能被土壤中產(chǎn)生纖維素酶的某些微生物分解利用。剛果紅染液可以與像纖維素這樣的多糖物質形成紅色復合物，但并不與水解后的纖維二糖、葡萄糖等發(fā)生這種反應。在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅，剛果紅與纖維素形成紅色復合物；而當纖維素被纖維素分解菌分解后，復合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以這些菌為中心的透明圈（如圖所示）。下列關于纖維素分解菌的分離與計數(shù)實驗，敘述錯誤的是（）A.分離纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基應以纖維素為唯一碳源B.對纖維素分解菌計數(shù)時應選擇菌落數(shù)在30-300之間C采用平板劃線法統(tǒng)計平板上菌落數(shù)，統(tǒng)計值比活菌實際數(shù)低D.通過比較得知，菌落②中的菌株分解纖維素能力最強〖答案〗CD〖祥解〗在微生物學中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱為選擇培養(yǎng)基?！驹斘觥緼、以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，能分解纖維素的微生物才能存活，所以可以用來分離纖維素分解菌，A項正確。B、為了保證結果準確，一般選擇菌落數(shù)為30~300的平板進行計數(shù)，B項正確。C、采用平板劃線法能將單個微生物分散在固體培養(yǎng)基上，但沒法進行計數(shù)；要計數(shù)應采用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計平板上菌落數(shù)，統(tǒng)計值比活菌實際數(shù)低，因為當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，C項錯誤。D、菌落①小，但降解圈大，說明菌落①中的菌株分解能力最強，D項錯誤。故選CD。17.下圖是利用植物體細胞雜交技術獲得“番茄一馬鈴薯”雜種植株的過程，相關說法正確的是（）A.番茄、馬鈴薯原生質體的融合體現(xiàn)了細胞膜的結構特點B.②表示融合的原生質體再生出細胞壁的過程C.①②過程在等滲溶液中進行，可避免原生質體在酶解過程中受到損傷D.③表示脫分化過程；④表示再分化過程，③④過程中都需要光照條件〖答案〗ABC〖祥解〗題圖分析：圖示為番茄一馬鈴薯雜種植株的培育過程，①表示去壁過程，常用酶解法；②表示融合的原生質體再生出細胞壁的過程；③表示脫分化過程；④表示再分化過程。【詳析】A、番茄、馬鈴薯原生質體的融合依賴膜的流動性，既該過程體現(xiàn)了細胞膜的結構特點，A正確；B、②表示融合的原生質體再生出細胞壁的過程，這是植物體細胞雜交獲得成功的標志，B正確；C、為避免原生質體在酶解過程中受到損傷，①②過程必須在高滲溶液或等滲溶液中進行，C正確；D、③為脫分化過程，而④過程為再分化過程，在該過程中誘導生芽時需要光照條件，因為色素形成需要光照，D錯誤。故選ABC。18.農(nóng)桿菌Ti質粒上的T-DNA可以轉移并隨機插入到被侵染植物的染色體DNA中。研究者將下圖中被侵染植物的DNA片段連接成環(huán)，并以此環(huán)為模板進行PCR，擴增出T-DNA插入位置兩側的未知序列，以此可確定T-DNA插入的具體位置。下列相關敘述正確的是（）A.PCR技術依據(jù)的原理是DNA半保留復制B.PCR技術需要解旋酶和耐高溫的DNA聚合酶C.選擇圖中的引物①④組合可擴增出兩側的未知序列D.通過與受體細胞的基因組序列比對來確定插入位置〖答案〗ACD〖祥解〗PCR反應過程：變性→復性→延伸。變性：當溫度上升到90℃以上時，雙鏈DNA解聚為單鏈，復性：溫度下降到50℃左右，兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結合，延伸：72℃左右時，TaqDNA聚合酶有最大活性，可使DNA新鏈由5'端向3'端延伸?！驹斘觥緼、PCR擴增技術全稱為聚合酶鏈式反應，是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術，依據(jù)的原理是DNA的半保留復制，A正確；B、PCR技術需要耐高溫的DNA聚合酶，但不需要解旋酶，高溫下雙螺旋可以打開，B錯誤；C、DNA的兩條鏈反向平行，子鏈從引物的3'端開始延伸，利用圖中的引物①④組合可擴增出兩側的未知序列，C正確；D、通過與受體細胞的基因組序列比對，即可確定T-DNA的插入位置，D正確。故選ACD。19.抗癌“神藥”抗PD—L1單克隆抗體通過抑制T細胞上的PD—1受體和腫瘤細胞上的配體PD—L1結合，從而激活T細胞的功能，對抗癌癥。下圖是制備抗PD-L1單克隆抗體的示意圖（注：細胞集落是指在培養(yǎng)基中由一個細胞增殖分化而形成的細胞團）。下列關于該藥物的制備說法正確的是（）A.制備過程運用了動物細胞融合和動物細胞培養(yǎng)技術B.在該培養(yǎng)液中聚乙二醇只能誘導B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合C.用選擇性培養(yǎng)基篩選出的雜交瘤細胞均能產(chǎn)生抗PD—L1抗體D.圖中細胞集落①可用于擴大化培養(yǎng)生產(chǎn)抗PD—L1單克隆抗體〖答案〗AD〖祥解〗1、單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。2、兩次篩選：①篩選得到雜交瘤細胞（去掉未雜交的細胞以及自身融合的細胞）；②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細胞群。3、雜交瘤細胞的特點：既能大量增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體。4、誘導動物細胞融合的方法有：物理法（離心、振動）、化學法（聚乙二醇）、生物法（滅活的病毒）。5、單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比，最大的優(yōu)勢在于特異性強，靈敏度高，可大量制備?！驹斘觥緼、單克隆抗體制備過程中需要誘導B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合以及雜交瘤細胞的體外培養(yǎng)，該過程中運用了動物細胞融合和動物細胞培養(yǎng)技術，A正確；B、培養(yǎng)液中聚乙二醇不僅能誘導B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合，還能誘導B淋巴細胞和B淋巴細胞融合，骨髓瘤細胞和骨髓瘤細胞融合，B錯誤；C、用選擇性培養(yǎng)基篩選出的雜交瘤細胞不一定能產(chǎn)生抗PD-L1抗體，還需要進行抗體檢測，C錯誤；D、圖中細胞集落①與PD-L1抗原反應呈陽性，說明能夠產(chǎn)生特異性抗體，可以用于擴大化培養(yǎng)生產(chǎn)抗PD-L1單克隆抗體，D正確故選AD。20.下列關于DNA的提取和DNA片段的擴增及電泳鑒定的敘述，正確的是（）A.利用DNA和蛋白質在冷酒精中溶解性的差異可初步分離DNAB.在提取白色絲狀物時雙向攪拌比單向攪拌更有利于獲得結構完整的DNAC.PCR實驗中使用的微量離心管、槍頭、蒸餾水和移液器等在使用前都必須進行高壓滅菌處理D.PCR的產(chǎn)物一般通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定，電泳時電泳緩沖液不能沒過凝膠〖答案〗A〖祥解〗RCR全稱為聚合酶鏈式反應，是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術。原理：DNA復制?！驹斘觥緼、利用DNA不溶于冷酒精而蛋白質溶于冷酒精的特點，可將DNA和蛋白質分開，A正確；B、在提取白色絲狀物時用玻璃棒輕輕單向攪拌更有利于獲得結構完整的DNA，B錯誤；C、PCR實驗中使用的微量離心管、槍頭、蒸餾水在使用前都必須進行高壓蒸氣滅菌處理，移液器不需要進行高壓蒸氣滅菌處理，C錯誤；D、通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定PCR的產(chǎn)物時，電泳緩沖液沒過凝膠1mm為宜，D錯誤。故選A。三、非選擇題：21.如圖所示為發(fā)酵工程生產(chǎn)產(chǎn)品的流程圖，請回答以下問題：（1）發(fā)酵工程一般包括菌種的選育、________、培養(yǎng)基的配制、滅菌、接種、發(fā)酵、產(chǎn)品的分離、提純等方面，其中發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)是________。要隨時取樣檢測培養(yǎng)基中的細菌數(shù)目、產(chǎn)物濃度等，同時，要嚴格控制________（寫出兩項）等發(fā)酵條件。（2）人們可以通過多種手段獲得發(fā)酵工程的菌種，例如生產(chǎn)人生長激素的工程菌是通過①基因工程技術培養(yǎng)的，而高產(chǎn)青霉素菌種是通過②________培育的。（3）青霉菌在一定條件下可產(chǎn)生青霉素，青霉素具有殺菌的作用，有同學認為利用青霉菌發(fā)酵生產(chǎn)青霉素的過程中不必擔心雜菌的污染，你是否認同這樣的觀點?________。為什么?________。（4）在發(fā)酵過程中，總有頭孢霉素產(chǎn)生。人們通過對青霉素生產(chǎn)菌代謝途徑的研究發(fā)現(xiàn)，在青霉素與頭孢霉素的合成過程中，它們有一個共同的前體，這個前體經(jīng)過兩種不同酶的作用分別合成兩個產(chǎn)物。如何改造青霉素生產(chǎn)菌，使其只生產(chǎn)青霉素呢?________?！即鸢浮剑?）①.擴大培養(yǎng)②.發(fā)酵##發(fā)酵過程③.溶氧、溫度、pH、通氣量、轉速等（2）誘變育種（3）①.不認同②.因為青霉素只能殺滅部分雜菌，在青霉素生產(chǎn)過程中如果污染了雜菌某些雜菌會產(chǎn)生酶將青霉素分解掉（4）敲除控制頭孢霉素產(chǎn)生的酶的基因，使前體只產(chǎn)生青霉素〖祥解〗1、發(fā)酵工程生產(chǎn)的產(chǎn)品有兩類：一類是代謝產(chǎn)物，另一類是菌體本身。2、產(chǎn)品不同，分離提純的方法一般不同。①如果產(chǎn)品是菌體，可采用過濾，沉淀等方法將菌體從培養(yǎng)液中分離出來；②如果產(chǎn)品是代謝產(chǎn)物，可用萃取、蒸餾、離子交換等方法進行提取。3、發(fā)酵過程中要嚴格控制溫度、pH、溶氧、通氣量與轉速等發(fā)酵條件。4、發(fā)酵過程一般來說都是在常溫常壓下進行，條件溫和、反應安全，原料簡單、污染小，反應專一性強，因而可以得到較為專一的產(chǎn)物?！拘?詳析】發(fā)酵工程的內容包括菌種選育、擴大培養(yǎng)、培養(yǎng)基的配制、滅菌、接種、發(fā)酵過程和產(chǎn)品的分離提純（生物分離工程）等方面。發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)是發(fā)酵過程。發(fā)酵階段需要隨時取樣、檢測細菌數(shù)目和產(chǎn)物濃度等，以了解發(fā)酵進程，發(fā)酵過程中培養(yǎng)基不斷消耗，所以還要及時添加培養(yǎng)基，不同的發(fā)酵條件可能無法得到發(fā)酵產(chǎn)物，所以還要嚴格控制發(fā)酵條件，如溶氧、溫度、pH、通氣量、轉速等?！拘?詳析】能生產(chǎn)人生長激素的工程菌是通過基因工程，將人的生長激素基因導入細菌體內培養(yǎng)的，高產(chǎn)青霉素菌種是通過誘變育種培育的。【小問3詳析】青霉菌在一定條件下可產(chǎn)生青霉素，青霉素具有殺菌的作用，有同學認為利用青霉菌發(fā)酵生產(chǎn)青霉素的過程中不必擔心雜菌的污染，這種觀點是錯誤的，青霉菌產(chǎn)生的青霉只能抑制細菌和放線菌的生長和繁殖，況且也并不是所有的細菌都能被青霉素抑制，同時青霉素對真菌起不到殺滅的作用，且雜菌污染可能會影響青霉素的產(chǎn)量或者導致青霉素被分解，因此用青霉菌發(fā)酵生產(chǎn)青霉素的過程中依然需要防止雜菌的污染?！拘?詳析】由題意可知，兩種酶分別影響兩種產(chǎn)物的合成，所以分別敲除兩個酶的基因，若敲除某個基因時青霉菌大量產(chǎn)生青霉素，則該基因即為需要敲除的控制頭孢霉素形成的酶的基因。22.請回答與微生物培養(yǎng)與計數(shù)的相關問題：（1）牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基是常用的細菌基礎培養(yǎng)基，某小組同學打算配制固態(tài)培養(yǎng)，在配制時需添加__________作凝固劑。培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細菌培養(yǎng)提供了__________和__________。除此之外，培養(yǎng)基還必須含有的基本成分是__________和__________。（2）下列材料或用具中，需要滅菌的是__________；需要消毒的是__________。（填序號）①培養(yǎng)皿②玻璃棒、試管、錐形瓶③實驗者的雙手（3）日常生活中經(jīng)常用到__________消毒法，在100℃煮沸5~6min，可以殺死微生物的營養(yǎng)細胞和一部分芽孢。巴氏消毒法可以殺死牛奶中的絕大多數(shù)微生物，并且__________。（4）在將篩選到的微生物進行分離純化時，采用了兩種不同的接種方法，培養(yǎng)一段時間后得到如圖所示的菌落。平板A所采用的接種方法是__________，平板B所采用的接種工具是__________。A、B兩個平板所采用的接種方法適合用來計數(shù)的是__________（填“A”或“B”）（5）根據(jù)下圖所示，4號試管的土壤樣品稀釋了__________倍，根據(jù)圖示的三個平板上的菌落結果，可以估算1克土壤中的細菌數(shù)為__________個。〖答案〗（1）①.瓊脂②.氮源（碳源不作要求）③.碳源④.無機鹽⑤.水（2）①.①②②.③（3）①.煮沸②.基本不會破壞牛奶的營養(yǎng)成分（4）①.稀釋涂布平板法②.接種環(huán)③.A（5）①.105②.8.5×108〖祥解〗培養(yǎng)基一般含有水、碳源、氮源、無機鹽。無菌技術除了用來防止實驗室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，還能有效避免操作者自身被微生物感染。稀釋涂布平板計數(shù)法的原理：當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測樣品中大約含有多少活菌。其計算公式：每克樣品中的菌株數(shù)=（C÷V）×M（C代表某一稀釋度下平板生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積，M代表稀釋倍數(shù)）。【小問1詳析】瓊脂在常溫下是固態(tài)，可以作為固體培養(yǎng)基的凝固劑。蛋白胨為細菌提供了氮源（也有碳源），淀粉為細菌提供了碳源。培養(yǎng)基還含有水和無機鹽。【小問2詳析】滅菌是用強烈的理化因素殺死所有的微生物，包括芽孢和孢子，以下需要滅菌的是①培養(yǎng)皿②玻璃棒、試管、錐形瓶，消毒是用溫和的理化因素殺死部分微生物，如③實驗者的雙手?！拘?詳析】日常生活中常用到煮沸消毒法，在100℃煮沸5~6min。巴氏消毒法是對于一些不耐高溫的液體，62~65℃消毒30min或80~90℃處理30s~1min，可殺死牛奶中絕大多數(shù)微生物，并且不破壞牛奶的營養(yǎng)成分。【小問4詳析】平板A中菌落均勻分布，是利用稀釋涂布平板法接種，平板B是平板劃線法接種，接種工具是接種環(huán)。適合計數(shù)的是稀釋涂布平板法，即A?！拘?詳析】據(jù)圖，10g土樣加入90mL無菌水稀釋了10倍，1mL菌液加入9mL無菌水稀釋了10倍，據(jù)圖，4號試管的土壤樣品稀釋了105倍，據(jù)圖三個平板的菌落的平均數(shù)是170個菌落，根據(jù)公式每g土壤中的細菌數(shù)=（C/V）×M=（170/0.2）×106=8.5×108個。23.下圖中親本植物的基因型為Aa（染色體數(shù)為2n），A、B、C、D表示以親本植物為材料進行的四種人工繁殖過程，請據(jù)圖回答下列問題：（1）植物組織培養(yǎng)過程中，外植體需要進行消毒處理。利用圖中的部分葉片進行植物組織培養(yǎng)時，需將其先用______________消毒30s后，用無菌水清洗2-3次，再用次氯酸鈉處理30min后，立即用無菌水清洗2-3次。（2）經(jīng)過B過程獲得的子代植株基因型為______________，子代再連續(xù)自交2代后，A的基因頻率和AA基因型頻率分別為______________。（3）圖中①需經(jīng)過的生理過程是______________。（4）②過程表示將該植物的兩個原生質體進行融合，與雜交瘤細胞的制備方法相比，該過程不能用______________；圖中A、B、C、D過程都能得到一種高度液泡化的薄壁細胞組成的結構是______________，某同學取上述薄壁細胞制成臨時裝片觀察中期細胞，可觀察到的染色體組數(shù)目分別為______________。（5）D過程獲得植株是可育的，若讓其和原植株進行人工雜交，其后代中基因純合的類型所占比例為______________?！即鸢浮剑?）（體積分數(shù)為70%）酒精（2）①.Aa②.50%、37．5%（3）脫分化、再分化（4）①.滅活病毒誘導②.愈傷組織③.1、2、2、4（5）1/6〖祥解〗消毒是指殺死病原微生物、但不一定能殺死細菌芽孢的方法。通常用化學的方法來達到消毒的作用。用于消毒的化學藥物叫做消毒劑。滅菌是指把物體上所有的微生物（包括細菌芽孢在內）全部殺死的方法，通常用物理方法來達到滅菌的目的。A過程為取玉米的花藥進行離體培養(yǎng)，得到單倍體植株的過程。B過程為葉片→脫分化，愈傷組織→胚狀體→個體，經(jīng)過有絲分裂。C過程為離體組織先長芽后長根的組織培養(yǎng)。D過程為原生質體培養(yǎng)?！拘?詳析】常用（體積分數(shù)為70%）酒精消毒對植物組織進行消毒?！拘?詳析】B過程只涉及有絲分裂，基因型與原來的植株相同，因此獲得的子代植株基因型為Aa。子代自交1代后，基因型為1/4AA、1/2Aa、1/4aa，再自交1代后，基因型為：AA：1/4+1/2×1/4=3/8，Aa：1/2×1/2=1/4，aa：1/4+1/2×1/4=3/8，A的基因頻率為3/8+1/4×1/2=1/2（50%）。AA基因型頻率為3/8（37．5%）。【小問3詳析】圖中①需經(jīng)過的生理過程是脫分化變成愈傷組織，再分化為胚狀體?！拘?詳析】滅活病毒誘導常用于誘導動物細胞融合，不用于植物細胞（原生質體）融合。愈傷組織是指原植物體的局部受到創(chuàng)傷刺激后，在傷口表面新生的組織。它由活的薄壁細胞組成，可起源于植物體任何器官內各種組織的活細胞。圖中A、B、C、D過程都能得到愈傷組織。A過程為花藥得到的單倍體，染色體組數(shù)為1。2、3過程都是體細胞進行有絲分裂，與原來的體細胞染色體數(shù)目相同，因此染色體組數(shù)為2。D為原生質體融合，染色體加倍，染色體組數(shù)為4?！拘?詳析】D過程獲得植株基因型是AAaa，產(chǎn)生配子及比例為AA∶aa∶Aa=1∶1∶4，若讓其和原植株（Aa）進行人工雜交，其后代中基因純合的類型（AAA、aaa）所占比例為1/2×1/6+1/2×1/6=1/6。24.1965年中國科學家人工合成了具有生物活性的結晶牛胰島素，摘取了人工合成蛋白質的桂冠。此后科學家又提出了利用基因工程改造大腸桿菌生產(chǎn)人胰島素的兩種方法：AB法是根據(jù)胰島素A、B兩條肽鏈的氨基酸序列人工合成兩種DNA片段，利用工程菌分別合成兩條肽鏈后將其混合自然形成胰島素；BCA法是利用胰島B細胞中的mRNA得到胰島素基因，導入工程菌獲得胰島素。這兩種方法使用同一種質粒作為載體。回答下列問題。（1）AB法中人工合成的兩種DNA片段均有多種可能的序列的原因是______。________（填“AB”、“BCA”或“AB和BCA”）法獲取的目的基因中不含人胰島素基因啟動子。（2）圖中是利用基因工程生產(chǎn)人胰島素過程中使用的質粒及目的基因的部分結構。為使目的基因與載體正確連接，在設計PCR引物時可添加限制酶______的識別序列。通過上述方法獲得人的胰島素基因后，需要通過PCR技術進行擴增，已知胰島素基因左端①處的堿基序列為-CCTTTCAGCTCA-，則其中一種引物設計的序列是5′-______-3′。（3）β-半乳糖苷酶可以分解無色的X-gal產(chǎn)生藍色物質使菌落呈現(xiàn)藍色，否則菌落為白色。據(jù)此簡述篩選工程菌的過程______。（4）科學家利用蛋白質工程技術，研制出了賴脯胰島素，與天然胰島素相比，其皮下注射后易吸收、起效快。寫出獲取賴脯胰島素基因的流程：______?！即鸢浮剑?）①.一種氨基酸可能對應多種密碼子②.AB和BCA（2）①.XhoⅠ和MunⅠ②.－CTCGAGCCTTTCAGCTCA－（3）經(jīng)鈣離子處理的大腸桿菌與重組質粒混合培養(yǎng)一段時間后，再將大腸桿菌接種到添加了氨芐青霉素和X-gal的培養(yǎng)基上篩選出白色的菌落即為工程菌（4）從預期的蛋白質功能出發(fā)→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找到相對于的脫氧核苷酸序列〖祥解〗蛋白質工程的過程：根據(jù)中心法則逆推以確定目的基因的堿基序列：預期蛋白質功能→設計預期的蛋白質結構→推測應有氨基酸序列→找到對應的脫氧核苷酸序列（基因）；最終還是回到基因工程上來解決蛋白質的合成。【小問1詳析】一種氨基酸可能對應多種密碼子，所以AB法中人工合成的兩種DNA片段均有多種可能的序列。結合題干BCA法是通過從人體胰島B細胞中的mRNA得到胰島素基因，以及題干“AB法是根據(jù)胰島素A、B兩條肽鏈的氨基酸序列人工合成兩種