細菌總數(shù)的測定

項目七

水樣中生物指標的測定任務一

細菌總數(shù)的測定

《生活飲用水衛(wèi)生標準》（GB5749-2006）規(guī)定,菌落總數(shù)不能超過100CFU/mL。

一、方法原理

將采集的水樣接種于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中，在36℃培養(yǎng)48h后，查出培養(yǎng)基上所生長的需氧菌以及兼性厭氧菌的菌落總數(shù)即為水樣中的細菌菌落總數(shù)。項目七水樣中生物指標測定二、試劑及儀器

（一）試劑及藥品

將上述成分溶于1000mL水中，調(diào)節(jié)pH至7.4～7.6，分裝于玻璃容器中，121℃高壓蒸汽滅菌20min，避光干燥保存。

1.營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基

成分質(zhì)量（g）成分質(zhì)量（g）蛋白胨牛肉膏103氯化鈉瓊脂1015～20

2.無菌水

取適量實驗用水，1℃高壓蒸汽滅菌20min，備用。項目七水樣中生物指標測定

（二）實驗儀器

高壓蒸汽滅菌鍋、均質(zhì)器、恒溫培養(yǎng)箱、電爐、天平、無菌平皿、無菌試管、無菌刻度吸管或移液槍、無菌錐形瓶、酒精燈、菌落計數(shù)器。

項目七水樣中生物指標測定三、操作步驟（一）水樣采集

一般在距離水面10～15cm處使用采樣瓶采集水樣；從水龍頭采集自來水時，要先放水3～5min后關(guān)閉水龍頭，使用火焰灼燒或者酒精消毒后再放水1min，使用采樣瓶采集水樣。（二）樣品測定

1.樣品稀釋吸取10mL裝有90mL無菌水的錐形瓶吸取10mL的水樣裝有90mL無菌水的錐形瓶1:10水樣稀釋液1:100水樣稀釋液┈┈裝有90mL無菌水的錐形瓶1:1000水樣稀釋液┈┈裝有90mL無菌水的錐形瓶1:10000水樣稀釋液項目七水樣中生物指標測定（二）樣品測定

2.接種培養(yǎng)吸取1mL水樣或稀釋過的水樣項目七水樣中生物指標測定滅菌培養(yǎng)皿傾注15～20ml的融化過并冷卻到44～47℃的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基來回轉(zhuǎn)動培養(yǎng)基，使水樣與培養(yǎng)基混合均勻培養(yǎng)箱培養(yǎng)基凝固后調(diào)節(jié)溫度在36℃培養(yǎng)48h，然后進行菌落計數(shù)（二）樣品測定

3.計數(shù)方法項目七水樣中生物指標測定

（1）首先選擇的是菌落總數(shù)在30～300的樣品，若只有一個稀釋度的平均菌落數(shù)符合此范圍，則將其菌落總數(shù)乘以稀釋的倍數(shù)作為細菌總數(shù)。

（2）當有兩個稀釋度的水樣的菌落數(shù)都在30～300時，則計算二者之間的比值，如果比值小于2，則報告兩者的平均數(shù)；如果比值大于2，則報告稀釋度較小的菌落數(shù)。

（3）如果所有稀釋度的菌落總數(shù)都大于300，則報告稀釋度最高的菌落總數(shù)乘以稀釋倍數(shù)。

（4）所有稀釋度的菌落總數(shù)都小于30時，則報告稀釋度最低的菌落總數(shù)乘以