體液免疫球蛋白測(cè)定

關(guān)于體液免疫球蛋白測(cè)定免疫球蛋白（immunoglobulin,Ig）：是由漿細(xì)胞合成和分泌的一組具有抗體活性的蛋白質(zhì)。第2頁(yè),共44頁(yè)，2024年2月25日，星期天重鏈性質(zhì)，Ig分5類：IgG(γ)、IgA(α)、IgM(μ)、IgD(δ)、IgE(ε)輕鏈性質(zhì)，Ig分2型：κ、λIg占血漿蛋白總量：20%檢測(cè)意義：反應(yīng)機(jī)體的免疫功能、診斷疾病Ig含量：血清IgG、IgA、IgM：g/L、IgD、IgE：mg/L體液IgG、IgA、IgM：mg/L

第3頁(yè),共44頁(yè)，2024年2月25日，星期天第4頁(yè),共44頁(yè)，2024年2月25日，星期天第5頁(yè),共44頁(yè)，2024年2月25日，星期天第一節(jié)血清IgG、IgA、IgM測(cè)定第6頁(yè),共44頁(yè)，2024年2月25日，星期天IgG的特性和功能IgG于出生后3個(gè)月開始合成，是血清中含量最高的免疫球蛋白IgG多為單體，半衰期約為23天，占血清免疫球蛋白總量的75%～80%大多數(shù)抗感染抗體與自身抗體均為IgG類IgG是唯一能通過胎盤的抗體有四個(gè)亞型（IgG1、IgG2、IgG3、IgG4）第7頁(yè),共44頁(yè)，2024年2月25日，星期天第8頁(yè),共44頁(yè)，2024年2月25日，星期天第9頁(yè),共44頁(yè)，2024年2月25日，星期天IgM的特性和功能為五聚體，是分子量最大的Ig，稱巨球蛋白。IgM激活補(bǔ)體能力比IgG強(qiáng)天然血型抗體是IgMIgM是個(gè)體發(fā)育過程最早能產(chǎn)生的抗體，胚胎晚期已能合成，新生兒臍帶血中若IgM水平升高，表示該兒曾有宮內(nèi)感染IgM是抗原刺激后出現(xiàn)最早的抗體，故檢測(cè)IgM水平可用于傳染病的早期診斷有2個(gè)亞型（IgM1、IgM2）第10頁(yè),共44頁(yè)，2024年2月25日，星期天IgA的特性和功能分為血清型和分泌型兩種，血清型IgA主要由腸系膜淋巴組織中的漿細(xì)胞產(chǎn)生。而分泌型IgA（SIgA）是由呼吸道、消化道、泌尿生殖道等處的固有層中漿細(xì)胞產(chǎn)生。主要存在于初乳、唾液、淚液，以及呼吸道消化道和泌尿生殖道黏膜表面的分泌液中。分泌型IgA的合成和主要作用部位在黏膜分2個(gè)亞型：（IgA1、IgA2）第11頁(yè),共44頁(yè)，2024年2月25日，星期天第12頁(yè),共44頁(yè)，2024年2月25日，星期天一、血清IgG、IgA、IgM測(cè)定測(cè)定方法

單向環(huán)狀免疫擴(kuò)散法免疫濁度法第13頁(yè),共44頁(yè)，2024年2月25日，星期天原理誤差主要原因評(píng)價(jià)

單向環(huán)狀免疫擴(kuò)散法第14頁(yè),共44頁(yè)，2024年2月25日，星期天免疫濁度法

直接透射比濁法速率散射比濁法注意點(diǎn)評(píng)價(jià)第15頁(yè),共44頁(yè)，2024年2月25日，星期天二、血清IgG、IgA、IgM測(cè)定的臨床意義年齡年齡與血中Ig含量有一定關(guān)系高Ig血癥:

多克隆Ig增高（感染）；單克隆Ig增高（免疫增殖?。┑虸g血癥:

先天性低Ig血癥（免疫缺陷病）；獲得性低Ig血癥(蛋白丟失).第16頁(yè),共44頁(yè)，2024年2月25日，星期天第二節(jié)血清IgD、IgE測(cè)定

正常人血清中IgD含量很低，半衰期2.8天。膜結(jié)合型IgD(mIgD)構(gòu)成BCR，是B細(xì)胞分化發(fā)育成熟的標(biāo)志。未成熟B細(xì)胞僅表達(dá)mIgM

成熟B細(xì)胞表達(dá)mIgM和mIgD

活化的B細(xì)胞或記憶B細(xì)胞mIgD逐漸消失

第17頁(yè),共44頁(yè)，2024年2月25日，星期天

IgE是正常人血清中含量最少的免疫球蛋白，主要由黏膜下淋巴組織中的漿細(xì)胞分泌，為親細(xì)胞抗體，引起I型超敏反應(yīng)；與機(jī)體抗寄生蟲免疫也可能有關(guān)。第18頁(yè),共44頁(yè)，2024年2月25日，星期天一、血清IgD測(cè)定及臨床意義

測(cè)定方法：

放射免疫分析法化學(xué)發(fā)光免疫分析法免疫比濁法

酶聯(lián)免疫吸附法第19頁(yè),共44頁(yè)，2024年2月25日，星期天IgD：生物功能不詳

增高：類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、變態(tài)反應(yīng)性疾病、敗血癥、新生兒溶血病

降低：意義不大第20頁(yè),共44頁(yè)，2024年2月25日，星期天二、血清IgE測(cè)定及臨床意義測(cè)定方法總IgE測(cè)定：放射免疫分析法

化學(xué)發(fā)光免疫分析法免疫比濁法酶聯(lián)免疫吸附法特異性IgE測(cè)定：免疫斑點(diǎn)法酶聯(lián)免疫吸附法第21頁(yè),共44頁(yè)，2024年2月25日，星期天IgE臨床意義：

增高：變態(tài)反應(yīng)性疾病、寄生蟲感染、病毒感染、自身免疫性疾病。

降低：意義不大第22頁(yè),共44頁(yè)，2024年2月25日，星期天第三節(jié)尿液及腦脊液Ig測(cè)定

正常人尿液中的Ig含量甚微，當(dāng)機(jī)體的免疫功能異?；蜓装Y反應(yīng)引起腎臟疾病時(shí)，可導(dǎo)致腎小球?yàn)V過膜分子屏障破壞或電荷屏障受損，從而引起球蛋白及其他大分子蛋白質(zhì)漏出增多。生理情況下，Ig根據(jù)其分子量大小，通過血腦屏障的難易度不同，IgG、IgA、IgM在腦脊液中的濃度遞減。病理狀態(tài)時(shí)，腦脊液組分發(fā)生改變。第23頁(yè),共44頁(yè)，2024年2月25日，星期天第24頁(yè),共44頁(yè)，2024年2月25日，星期天分子屏障：腎小球?yàn)V過屏障第25頁(yè),共44頁(yè)，2024年2月25日，星期天電荷屏障：1上皮細(xì)胞2基底膜3內(nèi)皮細(xì)胞4被濾過物質(zhì)第26頁(yè),共44頁(yè)，2024年2月25日，星期天一、尿液Ig測(cè)定及臨床意義尿液：

腎小球?yàn)V膜受損程度：選擇性蛋白尿指數(shù)（selectiveproteinuriaindex,SPI）標(biāo)本：晨尿或隨機(jī)尿SPI＝（尿IgG／血清IgG）／（尿TRF／血清TRF）SPI≤0.1選擇性微小病變型腎病SPI≥0.2非選擇性膜性腎病、膜增殖性腎炎、腎病綜合癥

第27頁(yè),共44頁(yè)，2024年2月25日，星期天增高有臨床意義：腎病、免疫增殖病可根據(jù)尿內(nèi)Ig增高的類型幫助鑒別診斷腎小球疾病的種類第28頁(yè),共44頁(yè)，2024年2月25日，星期天二、腦脊液Ig測(cè)定及臨床意義腦脊液：

血腦屏障受損程度：白蛋白商值白蛋白商值（ALBquotient，QALB）：QALB＝［（AlbCSF／AlbS）×1000］QALB〈9時(shí)，提示血腦屏障無明顯受損

9－15輕度受損急慢性病毒感染、多發(fā)性硬化、神經(jīng)梅毒、帶狀皰疹神經(jīng)節(jié)炎、腦萎縮

15－33中度受損急性神經(jīng)疏螺旋體病、條件致病性腦膜炎、吉蘭－巴雷綜合征

33－100重度受損化膿性腦膜炎、單純皰疹性腦炎、結(jié)核性腦膜炎等細(xì)菌感染性疾病

〉100完全破裂第29頁(yè),共44頁(yè)，2024年2月25日，星期天區(qū)分鞘內(nèi)免疫球蛋白來源：IgG生成指數(shù)和24hIgG合成率IgG生成指數(shù)＝QIgG／Qalb(QIgG=IgGCSF/IgGS,Qalb=AlbCSF/Albs)IgG合成率/24h=[(IgGCSF-IgGS/541)-(AlbCSF-AlbS/243)×(IgGS/AlbS)×0.43×500IgG生成指數(shù)和24hIgG合成升高時(shí)，表明CSF中的IgG主要有中樞神經(jīng)系統(tǒng)鞘內(nèi)合成，多見于多發(fā)性硬化癥第30頁(yè),共44頁(yè)，2024年2月25日，星期天第四節(jié)血清IgG亞類測(cè)定及臨床意義Ig亞類：IgG1、IgG2、IgG3、IgG4，其含量依次下降測(cè)定方法：

單向免疫擴(kuò)散法免疫比濁法（常用）放射免疫分析法酶聯(lián)免疫吸附法第31頁(yè),共44頁(yè)，2024年2月25日，星期天臨床意義：IgG亞類的含量隨年齡的不同而變化IgG亞類缺陷可表現(xiàn)為：反復(fù)呼吸道感染、腹瀉、中耳炎、鼻竇炎、支擴(kuò)以及哮喘等IgA缺乏癥常伴有IgG2缺陷，某些病毒感染IgG1、IgG2、IgG3下降顯著IgG亞類異常增高主要見于Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)第32頁(yè),共44頁(yè)，2024年2月25日，星期天第五節(jié)M蛋白測(cè)定及臨床意義

M蛋白：

B淋巴細(xì)胞或漿細(xì)胞單克隆異常增殖產(chǎn)生的異常單克隆免疫球蛋白臨床上多見于多發(fā)性骨髓瘤、高丙種球蛋白血癥、惡性淋巴瘤、重鏈病、輕鏈病等

第33頁(yè),共44頁(yè)，2024年2月25日，星期天M蛋白測(cè)定蛋白區(qū)帶電泳：經(jīng)典方法計(jì)算蛋白含量和百分比免疫比濁法：免疫球蛋白定量準(zhǔn)確性高、快速免疫電泳：M蛋白分型免疫固定電泳：M蛋白分型及鑒定，分辨率高第34頁(yè),共44頁(yè)，2024年2月25日，星期天GAMκλIgG-κ型M蛋白Marker免疫固定電泳模式圖第35頁(yè),共44頁(yè)，2024年2月25日，星期天第六節(jié)輕鏈測(cè)定及臨床意義本周蛋白的檢測(cè)

樣本：尿液方法：免疫電泳、加熱沉淀（簡(jiǎn)便易行）κ–Ig和λ-Ig定量檢測(cè)

樣本：尿液、血液方法：?jiǎn)蜗蛎庖邤U(kuò)散法、免疫比濁法（常用，準(zhǔn)確、快速）應(yīng)用：M蛋白血癥的分型及鑒定第36頁(yè),共44頁(yè)，2024年2月25日，星期天第七節(jié)冷球蛋白的檢測(cè)冷球蛋白：

在低溫下發(fā)生沉淀，加溫后又復(fù)溶的免疫球蛋白在低溫時(shí)產(chǎn)生冷沉淀的機(jī)制尚不十分明確多數(shù)冷球蛋白為免疫復(fù)合物，其抗原可以是外源性的，也可以是內(nèi)源性的第37頁(yè),共44頁(yè)，2024年2月25日，星期天冷球蛋白的類型及臨床意義

I型：為單克隆冷球蛋白型，占25%～40%;最常見為IgG或IgM。多見于免疫增生性疾病

Ⅱ型：?jiǎn)慰寺『投嗫寺』旌闲屠淝虻鞍祝?5%～25%;最常見的組合為IgM－IgG。多見于自身免疫性疾病

Ш型：多克隆混合型冷球蛋白，約占50%;最常見的組合為IgM－IgG。多見于自身免疫性疾病以及感染性疾病第38頁(yè),共44頁(yè)，2024年2月25日，星期天標(biāo)本：在體溫條件下采集和保存靜脈血4ml，不加抗凝劑檢測(cè)：靜脈血水浴離心冰箱37℃37℃0-4℃1－2h沉淀24h內(nèi)，單克隆冷球蛋白數(shù)天后出現(xiàn)為混合型冷球蛋白驗(yàn)證：將冷沉淀物置于pH4.0的0.1M乙酸鈉緩沖液加熱3－5d第39頁(yè),共44頁(yè)，2024年2月25日，星期天重點(diǎn)腎小球?yàn)V過膜破壞程度、血腦屏障受損程度評(píng)價(jià)指標(biāo)冷球蛋白檢測(cè)第40頁(yè),共44頁(yè)，2024年2月25日，星期天1.免疫應(yīng)答主要分為哪幾個(gè)階段？2.什么是免疫球蛋白?其分子基本結(jié)構(gòu)?3.免疫球蛋白分類及亞類?4.血清免疫球蛋白測(cè)定方法有哪些?5.比較單向免疫擴(kuò)散法和速率散射比濁法優(yōu)缺點(diǎn)。6.免疫球蛋白IgG、IgA、IgM測(cè)定有何臨床意義？思考題第41頁(yè),共44頁(yè)，2024年2月25日，星期天7.免疫球蛋白IgG亞類測(cè)