藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座

內(nèi)容：1、藥品雜質(zhì)與限量2、雜質(zhì)檢驗方法3、藥品中普通雜質(zhì)檢驗4、特殊雜質(zhì)檢驗與判定方法藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第1頁要求：1、掌握：藥品中雜質(zhì)起源、雜質(zhì)分類、雜質(zhì)限量概念和計算，普通雜質(zhì)和特殊雜質(zhì)檢驗方法。2、熟悉：藥品中雜質(zhì)判定方法。3、了解：熱分析法基本原理及其在雜質(zhì)研究中應(yīng)用。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第2頁藥品雜質(zhì)是在藥品生產(chǎn)和貯藏過程中引入，任何影響藥品純度物質(zhì)。雜質(zhì)檢驗意義：確保用藥安全、有效，同時也為生產(chǎn)、流經(jīng)過程質(zhì)量確保和企業(yè)管理考評提供依據(jù)。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第3頁第一節(jié)藥品雜質(zhì)與限量

一、藥品雜質(zhì)與純度1、藥品純度即藥品純凈程度。對藥品純度認識是在防治疾病實踐中積累起來。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第4頁2、藥品純度評價：應(yīng)把藥品性狀、理化常數(shù)、雜質(zhì)檢驗、含量測定等作為一個有聯(lián)絡(luò)整體來評價藥品純度。3、藥品純度與試劑純度不一樣，不能用化學試劑規(guī)格代替藥品標準，更不能將化學試劑看成藥品直接用于臨床。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第5頁二、雜質(zhì)起源藥品中存在雜質(zhì)主要起源于藥品生產(chǎn)過程和藥品貯藏過程。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第6頁（一）生產(chǎn)過程引入雜質(zhì)1、未反應(yīng)完全原料、反應(yīng)中間體和副產(chǎn)物2、制劑過程中產(chǎn)生新雜質(zhì)3、生產(chǎn)過程中用到試劑、溶劑4、無效、低效異構(gòu)體或晶型原料合成（縮合、水解、酯化等）試劑、溶劑原料藥制劑藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第7頁（二）貯藏過程引入雜質(zhì)藥品因保管不善或貯藏時間過長，在外界條件如溫度、濕度、日光、空氣影響下或因微生物作用可能發(fā)生水解、氧化、分解、異構(gòu)化、晶型轉(zhuǎn)變、聚合、潮解和發(fā)霉等改變，產(chǎn)生相關(guān)雜質(zhì)。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第8頁三、藥品雜質(zhì)分類1、按起源分為普通雜質(zhì)是指在自然界中分布較廣泛，在各種藥品生產(chǎn)和貯藏過程中輕易引入雜質(zhì)。特殊雜質(zhì)是指在特定藥品生產(chǎn)和貯藏過程中引入雜質(zhì)。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第9頁2、按其毒性分為信號雜質(zhì)本身普通無害，但其含量多少能夠反應(yīng)出藥品純度水平。如氯化物、硫酸鹽等。有害雜質(zhì)如重金屬、砷鹽、氟化物等，對人體有害，在質(zhì)量標準中應(yīng)嚴格加以控制，以確保用藥安全。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第10頁3、按其結(jié)構(gòu)分為無機雜質(zhì)有氯化物、硫酸鹽、硫化物、氰化物、重金屬等。有機雜質(zhì)如有機藥品中引入原料、中間體、副產(chǎn)物、分解產(chǎn)物、異構(gòu)體等。殘留溶劑，苯、甲醇、丙酮等。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第11頁有機雜質(zhì)分為特定雜質(zhì)和非特定雜質(zhì)特定雜質(zhì)是指在質(zhì)量標準中分別要求明確程度，并單獨進行控制雜質(zhì)。包含結(jié)構(gòu)已知雜質(zhì)和結(jié)構(gòu)未知雜質(zhì)。非特定雜質(zhì)是指在質(zhì)量標準中未單獨列出，而僅采取一個通用程度進行控制一系列雜質(zhì)，其在藥品中出現(xiàn)種類與概率并不固定。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第12頁四、雜質(zhì)限量1、雜質(zhì)限量：藥品中所含雜質(zhì)最大允許量。2、表示方法：%或ppm。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第13頁3、檢驗方法：（1）限量檢驗法

對照法靈敏度法比較法（2）定量測定法藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第14頁4、計算公式：雜質(zhì)限量=(雜質(zhì)最大允許量/供試品量)×100%=(標準溶液濃度×體積/供試品量)×100%L=(C×V/S)×100%藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第15頁對乙酰氨基酚中氯化物檢驗：取對乙酰氨基酚2.0g，加水100ml，加熱溶解后冷卻，濾過，取濾液25ml，依法檢驗氯化物（ChP），所發(fā)生渾濁與標準氯化鈉溶液5.0ml（每1ml相當于10μgCl）制成對照液比較，不得更濃。問氯化物限量是多少？藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第16頁葡萄糖中重金屬檢驗：取葡萄糖4.0g，加水23ml溶解后，加醋酸鹽緩沖液（PH3.5）2ml，依法檢驗重金屬（中國藥典），含重金屬不得超出百萬分之五，問應(yīng)取標準鉛溶液多少毫升（每1ml相當于10μgPb）？藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第17頁磷酸可待因中嗎啡檢驗：取本品0.10g，加鹽酸溶液（9→100）使溶解成5ml，加亞硝酸鈉試液2ml，放置15min，加氨試液3ml，所顯顏色與嗎啡溶液[取無水嗎啡2.0mg，加鹽酸溶液（9→100）使溶解成100ml]5.0ml用同一方法制成對照液比較，不得更深，問限量為多少？藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第18頁中國藥典要求檢驗砷鹽時，應(yīng)取標準砷溶液2.0ml（每1ml相當于1μgAs）制備標準砷斑，今依法檢驗溴化鈉中砷鹽，要求含砷量不得超出0.0004%，問應(yīng)取供試品多少克？藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第19頁取溴化鈉0.5g，檢驗砷鹽，與標準砷溶液2.0ml制備標準砷斑比較，不得超出要求限量（0.0004%）。標準砷溶液濃度是多少（μg/ml）？藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第20頁乙醇中甲醇檢驗：取樣品2mL，用水稀釋至50mL，分取1mL加磷酸溶液（1→10）0.2mL與5％高錳酸鉀溶液0.25mL，在30－35℃保溫15min，滴加10％焦亞硫酸鈉溶液至無色，緩緩加入在冰浴中冷卻硫酸溶液（3→4）5mL，再加新制1％變色酸溶液0.1mL，置水浴中加熱20min，如顯色與標準甲醇溶液（精密稱取甲醇20mg，加水使成200mL）2.0mL用同一方法制成對照液比較，不得更深。計算乙醇中甲醇限量（g/mL）？藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第21頁第二節(jié)雜質(zhì)檢驗方法

藥品中雜質(zhì)檢驗主要是依據(jù)藥品與雜質(zhì)在物理性質(zhì)、化學性質(zhì)上差異進行。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第22頁一、雜質(zhì)研究規(guī)范（一）有機雜質(zhì)在藥品質(zhì)量標準中項目名稱1、以雜質(zhì)化學名稱作為項目名稱—被檢驗雜質(zhì)是已知化合物（特定雜質(zhì)）2、以某類雜質(zhì)總稱作為項目名稱—雜質(zhì)不明確為單一物質(zhì)而為某一類物質(zhì)時3、以檢測方法作為項目名稱—被檢驗雜質(zhì)結(jié)構(gòu)未知，類別未知時藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第23頁（二）雜質(zhì)檢驗項目確實定1、依據(jù)藥品起始原料、生產(chǎn)工藝、藥品穩(wěn)定性情況確定2、降解產(chǎn)物和毒性雜質(zhì)為必控項目3、原料中已控制雜質(zhì)，制劑中不再控制4、手性藥品藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第24頁（三）雜質(zhì)程度確實定1、依據(jù)原料藥每日劑量來制訂質(zhì)控程度2、有機雜質(zhì)程度要求應(yīng)包含：每一個已知雜質(zhì)、未知雜質(zhì)、總雜質(zhì)3、雜質(zhì)程度制訂考慮原因藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第25頁（四）雜質(zhì)檢驗方法選擇與驗證1、檢測方法：

化學法光譜法色譜法2、要求：專屬、靈敏、檢測限藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第26頁二、雜質(zhì)慣用檢驗方法

化學色譜光譜物理藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第27頁（一）化學方法雜質(zhì)與藥品化學性質(zhì)相差較大時雜質(zhì)+試劑→顏色、沉淀、氣體→雜質(zhì)限量藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第28頁1、顯色反應(yīng)檢驗法：目視比色法2、沉淀反應(yīng)檢驗法：比濁法3、生成氣體檢驗法：—砷、硫、碳酸鹽、氨或胺鹽、氰化物4、滴定法藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第29頁（二）色譜方法檢驗：有機雜質(zhì)相關(guān)物質(zhì)：殘留原料、中間體、降解物、異構(gòu)體、聚合體、副反應(yīng)產(chǎn)物等。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第30頁1、薄層色譜法（TLC）（1）雜質(zhì)對照法：

已知雜質(zhì)并能制備雜質(zhì)對照品．．供試品對照品．．．藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第31頁（2）供試品溶液本身稀釋對照法：

雜質(zhì)結(jié)構(gòu)不能確定，或無雜質(zhì)對照品高濃度：供試品溶液低濃度：對照品溶液．．高濃度低濃度．．．．藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第32頁（3）雜質(zhì)對照法與供試品溶液本身稀釋對照法并用：藥品中存在各種雜質(zhì)（4）對照藥品法：無適合雜質(zhì)對照品—可用與供試品相同藥品作為對照品藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第33頁系統(tǒng)適用性試驗（ChP）：1、檢測靈敏度：對照溶液稀釋若干倍后，應(yīng)顯示清楚斑點。2、比移值：供試品溶液與對照品溶液主斑點或雜質(zhì)斑點一致。3、分離效能：各相鄰有效分離。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第34頁2、高效液相色譜法（HPLC）（1）外標法（雜質(zhì)對照品法）：

有雜質(zhì)對照品且進樣量能夠準確控制供試液：A雜對照液：A對藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第35頁（2）加校正因子主成份本身對照法：建立方法時，需要雜質(zhì)對照品雜質(zhì)檢驗時，不需雜質(zhì)對照品①雜質(zhì)對照品＋藥品對照品f②供試液對照液：供試液稀釋成與L相當溶液C雜藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第36頁（3）不加校正因子主成份本身對照法：

無雜質(zhì)對照品對照液：供試品稀釋液，進樣測得A主供試液：進樣測得雜質(zhì)∑Ai∑Ai＜A主，合格藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第37頁（4）峰面積歸一化法：

粗略考查供試品中雜質(zhì)各雜質(zhì)峰面積總和占總峰面積百分率，不得超出限量。

L%=∑Ai/(∑Ai+A主）×100%藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第38頁3、氣相色譜法：揮發(fā)性雜質(zhì)、殘留溶劑檢驗方法與HPLC法相同4、毛細管電泳法：用于酶類藥品中酶類雜質(zhì)檢驗藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第39頁（三）光譜分析法1、紫外分光光度法在藥品無吸收而雜質(zhì)有吸收波長測定吸收度，要求測得吸收度不得超出某一限值。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第40頁2、紅外分光光度法：檢驗藥品中無效或低效晶型如：甲苯咪唑中A晶型檢驗

A晶型

C晶型在640cm-1有強吸收吸收很弱在662cm-1吸收很弱有強吸收

662cm-1640cm-1662cm-1640cm-1

對照品（10%A晶型）

D2D1

供試品

D2’D1’

＜10%R=D1/D2

＞R’=D1’/D2’藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第41頁3、原子吸收分光光度法測定金屬雜質(zhì)限量檢驗時：對照品液=供試品+限量-----a

供試品液=------------------bb＜(a-b)，符合要求；b＞(a-b)，不合格。維生素C中鐵、銅離子檢驗碳酸鋰中鉀鹽檢驗藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第42頁（四）其它方法1、熱分析法在程序控制溫度下，測量物質(zhì)物理化學性質(zhì)與溫度關(guān)系一類技術(shù)。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第43頁2、酸堿度檢驗法：

——藥品中堿性或酸性雜質(zhì)（1）酸堿滴定法：在一定指示液下，用酸或堿滴定供試品溶液中堿性或酸性雜質(zhì)，以消耗酸或堿滴定液毫升數(shù)作為程度指標。（2）指示液法：將一定量指示液變色pH范圍作為供試液中酸堿性雜質(zhì)程度指標。（3）pH測定法：測定溶液pH值。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第44頁3、物理性狀檢驗法（1）臭味及揮發(fā)性差異（2）顏色差異（3）溶解行為差異（4）旋光性質(zhì)差異藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第45頁ChP（）附錄：氯化物、硫酸鹽、硫化物、硒、氟、氰化物、鐵鹽、重金屬、砷鹽、銨鹽檢驗法、干燥失重、水分測定法、熾灼殘渣、易炭化物檢驗法、殘留溶劑測定法、熱分析法、制藥用水中總有機碳測定法。溶液顏色、澄清度檢驗法、不溶性微粒、結(jié)晶性檢驗法、粒度和粒度分布測定法、X射線粉末衍射法、滲透壓摩爾濃度測定法、可見異物檢驗法。第三節(jié)藥品中普通雜質(zhì)檢驗

藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第46頁一、氯化物檢驗法1、原理：氯化物在硝酸酸性條件下與硝酸銀試液作用，生成氯化銀白色渾濁液，與一定量標準氯化鈉溶液在相同條件下生成氯化銀渾濁程度比較。

藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第47頁2、方法：50ml納氏比色管—要求量供試品+稀硝酸10ml+水→40ml—要求量標準氯化鈉溶液+稀硝酸10ml+水→40ml分別加入硝酸銀試液1.0ml+水→50ml在暗處放置5分鐘黑色背景上，從比色管上方向下觀察、比較。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第48頁3、注意事項：（1）供試品帶顏色供試品+AgNO3放置10min過濾澄清溶液+標準NaCl+水對照溶液供試品+AgNO3供試品溶液暗處放置5min后比較藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第49頁（2）供試品不澄清：過濾。（3）不溶于水有機藥品：

——加水振搖，過濾，取濾液檢驗；——加稀乙醇或丙酮溶解后再檢驗；

——超聲，加熱等使Cl-溶解，取濾液或上清夜進行檢驗。（4）有機氯雜質(zhì)：有機破壞。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第50頁二、硫酸鹽檢驗法1、原理：藥品中存在微量硫酸鹽與氯化鋇在鹽酸酸性介質(zhì)中生成硫酸鋇白色渾濁，與一定量標準硫酸鉀溶液在相同條件下生成渾濁比較。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第51頁2、方法：50ml納氏比色管—要求量供試品+水→40ml+稀鹽酸2ml—要求量標準硫酸鉀溶液+水→40ml+稀鹽酸2ml分別加入25%氯化鋇溶液5ml+水→50ml放置10分鐘黑色背景上，從比色管上方向下觀察、比較。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第52頁3、注意事項：（1）供試品帶顏色：內(nèi)消色法。（2）藥品水中不易溶解，加入適量有機溶劑溶解后再依法檢驗。（3）供試品如需過濾，應(yīng)先用加鹽酸使成酸性水洗凈濾紙中硫酸鹽，再濾過。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第53頁三、鐵鹽檢驗法（一）硫氰酸鹽法（ChP、USP）1、原理：鐵鹽在鹽酸酸性溶液中與硫氰酸銨生成紅色可溶性硫氰酸鐵配離子，再與一定量標準鐵溶液用同法處理后所呈顏色進行比較。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第54頁2、方法：50ml納氏比色管要求量供試品+水→25ml+稀鹽酸4ml與過硫酸銨50mg+水→35ml+30%硫氰酸銨溶液3ml+水→50ml如顯色，馬上與對照溶液（要求量標準鐵溶液，同法處理）比較。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第55頁加入過硫酸銨：◎作為氧化劑可氧化供試品中Fe2+成Fe3+◎預(yù)防光線使硫氰酸鐵還原或分解褪色藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第56頁3、注意事項：（1）一些藥品在檢驗過程中需加硝酸處理。（2）加入過量硫氰酸銨

。（3）供試液管與對照液管色調(diào)不一致不便比較時，可于分液漏斗中，各加正丁醇或異戊醇提取，分取醇層比色。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第57頁（二）巰基醋酸法（BP）原理：巰基醋酸還原Fe3+為Fe2+，在氨堿性溶液中深入與Fe2+作用生成紅色配位離子，與一定量標準鐵溶液經(jīng)同法處理后產(chǎn)生顏色進行比較。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第58頁紅色藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第59頁四、重金屬檢驗法重金屬：指在試驗條件下能與硫代乙酰胺或硫化鈉作用顯色金屬雜質(zhì)，如銀、鉛、汞、銅、鎘、錫、銻、鉍等。檢驗時以鉛為代表。中國藥典檢驗有三種方法。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第60頁第一法：硫代乙酰胺法適合用于溶于水、稀酸和乙醇藥品。1、原理：硫代乙酰胺在弱酸性（pH3.5醋酸鹽緩沖液）條件下水解，產(chǎn)生硫化氫，與微量重金屬離子生成黃色到棕黑色硫化物均勻混懸液，與一定量標準鉛溶液經(jīng)同法處理后所呈顏色比較。

藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第61頁2、方法：25ml納氏比色管—甲管：標準鉛溶液一定量，醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml后，加水或溶劑→25ml—乙管：要求方法制成供試品溶液25ml甲乙兩管中分別加硫代乙酰胺試液各2ml放置2分鐘同置白紙上，自上向下透視。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第62頁3、注意事項：（1）供試品有色：加稀焦糖內(nèi)消色法供試品溶液+硫代乙酰胺濾膜過濾澄清溶液+標準Pb對照溶液+硫代乙酰胺供試溶液比較藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第63頁（2）供試品中若有微量高鐵鹽存在，在弱酸性溶液中將氧化硫化氫析出硫，產(chǎn)生渾濁，影響比色。供試品溶液中加抗壞血酸0.5-1.0g，并在對照溶液中加入相同量抗壞血酸，再照上述方法檢驗。(ChP)藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第64頁第二法：熾灼后硫代乙酰胺法適合用于含芳環(huán)、雜環(huán)以及難溶于水、稀酸或乙醇有機藥品。

1、原理：將供試品熾灼破壞后，加硝酸處理，使有機物分解、破壞完全后，再按第一法進行檢驗。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第65頁2、方法：取熾灼殘渣項下遺留殘渣（H2SO4處理）加HNO3，加熱，蒸干，熾灼灰化加HCl溶解，加熱蒸干（除殘留HCl）殘渣加水溶解，調(diào)pH，轉(zhuǎn)移至比色管中按第一法檢驗藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第66頁3、注意事項：（1）熾灼溫度：500-600℃。（2）熾灼殘渣加硝酸處理后，必須蒸干、除盡氧化氮。（3）做空白對照。（4）含鈉鹽或氟有機藥品改用鉑坩堝或硬質(zhì)玻璃蒸發(fā)皿。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第67頁第三法：硫化鈉法適合用于溶于堿性水溶液而難溶于稀酸藥品。Pb2++S2-→PbS↓1、原理：在堿性介質(zhì)中，以硫化鈉為顯色劑，使Pb2+生成PbS微?；鞈乙?，與一定量標準鉛溶液經(jīng)同法處理后所呈顏色比較。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第68頁2、方法：取供試品適量，加氫氧化鈉試液5ml與水20ml溶解后，置納氏比色管中，加硫化鈉試液5滴，搖勻，與一定量標準鉛溶液一樣處理后顏色比較，不得更深。3、注意：硫化鈉試液對玻璃有腐蝕性，臨用新制。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第69頁五、砷鹽檢驗法

—引入：生產(chǎn)過程中無機試劑古蔡法二乙基二硫代氨基甲酸銀法（Ag-DDC）次磷酸法藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第70頁（一）古蔡（Gutzeit）氏法1、原理：金屬鋅與酸作用產(chǎn)生新生態(tài)氫，與藥品中微量砷鹽反應(yīng)生成具揮發(fā)性砷化氫，遇溴化汞試紙，產(chǎn)生黃色至棕色砷斑，與一定量標準砷溶液所生成砷斑比較，判斷供試品中坤鹽是否符合限量。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第71頁藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第72頁2、裝置：180mm80mmEDC醋酸鉛棉花BAA、100ml標準磨口錐形瓶B、中空標準磨口塞C、導氣管D、具孔有機玻璃旋塞E、中央含有圓孔（孔徑6.0mm）有機玻璃旋塞蓋溴化汞試紙藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第73頁3、方法：導氣管中裝入醋酸鉛棉花旋塞頂端放溴化汞試紙標準砷斑制備樣品砷斑制備藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第74頁4、反應(yīng)條件：（1）標準砷溶液：1μg/ml。（2）標準砷斑：2ml標準砷溶液。（3）醋酸鉛棉花：吸收硫化氫。

H2S↑+Pb(Ac)2→PbS↓

（4）碘化鉀及氯化亞錫作用。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第75頁

AsO43-+2I-+2H+→AsO33-+I2+H2OAsO43-+Sn2++2H+

→AsO33-+Sn4++H2O

②I2+Sn2+

→2I-+Sn4+

4I-+Zn2+→[ZnI4]2-AsO43-AsO33-AsH3慢快

KISnCl2①將五價砷還原為三價砷，加緊反應(yīng)速度＋5＋3③抑制銻化氫生成促進AsH3生成④形成鋅錫齊，去極化，使氫氣均勻連續(xù)產(chǎn)生碘化鉀及氯化亞錫作用藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第76頁5、注意事項：（1）供試品為硫化物、亞硫酸鹽、硫代硫酸鹽等還原劑，先加硝酸處理。（2）供試品為鐵鹽，先加酸性氯化亞錫。（3）環(huán)狀結(jié)構(gòu)有機藥品，需經(jīng)有機破壞。（5）含銻藥品，改用白田道夫法。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第77頁（二）二乙基二硫代氨基甲酸銀法1、原理：—金屬鋅與酸作用，產(chǎn)生新生態(tài)氫，與微量砷鹽反應(yīng)，生成含有揮發(fā)性砷化氫；—砷化氫遇二乙基二硫代氨基甲酸銀，使其還原產(chǎn)生紅色膠態(tài)銀；—用目視比色法或在510nm波優(yōu)點測定吸收度；—與一定量標準砷溶液用同法處理后得到有色溶液進行比較。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第78頁藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第79頁2、裝置：

18080CBAD105.0ml刻線醋酸鉛棉花A、100ml標準磨口錐形瓶B、中空標準磨口塞C、導氣管D、平底玻璃管藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第80頁3、方法：導氣管中裝入醋酸鉛棉花D管中加入Ag-DDC試液5ml標準砷對照液制備樣品砷溶液制備白色背景上，從D管上方向下觀察比較，或在510nm波優(yōu)點測定吸光度藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第81頁4、注意事項：（1）As濃度：1μg/40ml-10μg/40ml范圍內(nèi)（2）有機堿吸收反應(yīng)中產(chǎn)生HDDC：USP用吡啶ChP用三乙胺-氯仿（1.8:98.2）（3）試驗條件下，500μg銻不干擾測定藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第82頁（三）白田道夫法原理：氯化亞錫在鹽酸中將砷鹽還原成棕褐色膠態(tài)砷，與一定量標準砷溶液用同法處理后顏色比較，可控制供試品中砷量。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第83頁（四）次磷酸法原理：鹽酸酸性溶液中，次磷酸還原砷鹽為棕色游離砷，與一定量標準砷溶液用同法處理后所顯顏色比較，控制供試品中砷。

NaH2PO2+HCl→H3PO2+NaCl3H3PO2+H3AsO3→3H3PO3+2As↓藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第84頁恒重(ChP)：除另有要求處，系指供試品連續(xù)兩次干燥或熾灼后稱重差異在0.3mg以下重量；干燥至恒重第二次及以后各次稱重均應(yīng)在要求條件下繼續(xù)干燥1小時后進行；熾灼至恒重第二次稱重應(yīng)在繼續(xù)熾灼30min后進行。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第85頁六、干燥失重測定法干燥失重：指藥品在要求條件下，經(jīng)干燥后所減失量，以百分率表示。檢驗：水分及揮發(fā)性物質(zhì)。方法：常壓恒溫干燥法減壓干燥法與恒溫減壓干燥法干燥劑干燥法藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第86頁（一）常壓恒溫干燥法適用：受熱較穩(wěn)定藥品。1、方法：供試品恒重稱量瓶105℃干燥干燥失重％＝干燥失重供試品×100％藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第87頁2、注意事項：（1）供試品平鋪于扁形稱量瓶中，厚度不超出5mm。大顆粒結(jié)晶藥品，應(yīng)先研細至粒度約2mm。（2）含較多結(jié)晶水藥品，在105℃不易除去，可提升干燥溫度。（3）含有較大量水分，熔點又較低藥品，采取先于40-50℃加熱，使結(jié)晶水緩緩釋去，然后逐步升高溫度，在105℃干燥至恒重。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第88頁（4）易吸濕、或受熱發(fā)生相變而達不到恒重藥品，采取一定溫度下、干燥一定時間所減失重量代表干燥失重。（5）供試品為膏狀物，應(yīng)先取一含洗凈粗砂粒及一小玻棒稱量瓶于要求條件下干燥至恒重，然后稱入一定量供試品，用玻棒攪勻、干燥，干燥過程中攪拌數(shù)次，促使水分揮發(fā)，直至恒重。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第89頁（二）減壓干燥法與恒溫減壓干燥法適用：熔點低或受熱分解藥品。相對于常壓，減壓條件下干燥溫度降低、干燥時間縮短。方法：減壓干燥器或恒溫減壓干燥箱壓力控制在2.67kPa(20mmHg)以下干燥劑無水氯化鈣、硅膠、五氧化二磷。恒溫減壓干燥器中慣用五氧化二磷。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第90頁（三）干燥劑干燥法適用：受熱分解或易升華供試品。方法：將供試品置干燥器中，利用干燥器內(nèi)干燥劑吸收水分，干燥至恒重。慣用干燥劑：

硅膠、硫酸、五氧化二磷藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第91頁七、水分測定法1、費休氏法原理：藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第92頁費休氏液：I2、SO2、無水甲醇、無水吡啶—無水吡啶：定量吸收反應(yīng)產(chǎn)物HI、SO3，形成氫碘酸吡啶和硫酸酐吡啶?！獰o水甲醇：與硫酸酐吡啶形成穩(wěn)定甲基硫酸氫吡啶。終點：費休氏液淡黃→紅棕色永停法藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第93頁2、甲苯法本法適合用于含揮發(fā)性成份藥品。原理：試樣中水與甲苯形成共沸二元混合物一起被蒸餾出來依據(jù)蒸出水體積計算水含量。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第94頁八、熾灼殘渣檢驗法熾灼殘渣（residueonignition）：

有機藥品經(jīng)炭化或揮發(fā)性無機藥品加熱分解后，高溫熾灼，所產(chǎn)生非揮發(fā)性無機雜質(zhì)硫酸鹽?？刂扑幤分蟹菗]發(fā)性無機雜質(zhì)。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第95頁1、方法：供試品炭化濕潤除盡H2SO4蒸氣灰化恒重緩緩熾灼H2SO40.5-1ml低溫700－800℃熾灼熾灼殘渣％＝殘渣供試品×100％藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第96頁2、注意事項：（1）供試品取用量：依據(jù)熾灼殘渣限量和稱量誤差決定。普通應(yīng)使熾灼殘渣量為1-2mg，殘渣限量普通為0.1-0.2%。（2）熾灼前，須蒸發(fā)除盡硫酸。（3）如需將殘渣留作重金屬檢驗，則熾灼溫度必須控制在500-600℃。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第97頁九、易炭化物檢驗法易炭化物檢驗法是檢驗藥品中遇硫酸易炭化或易氧化而呈色微量有機雜質(zhì)。這類雜質(zhì)多數(shù)結(jié)構(gòu)未知，常采取加硫酸呈色后與對照液比較方法進行檢驗。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第98頁1、方法：比色管對照溶液5ml。硫酸5ml，分次緩緩加入要求量供試品，振搖使溶解。靜置15分鐘后。白色背景前，平視觀察。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第99頁2、對照液：（1）標準比色液；（2）由比色用K2Cr2O7液、CoCl2液和CuSO4液按要求方法配制；（3）KMnO4液。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第100頁3、注意事項（1）供試品為固體，應(yīng)先研成細粉。（2）如需加熱，應(yīng)放冷后再移至比色管。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第101頁十、有機溶劑殘留量測定法藥品中殘留溶劑系指在原料藥或輔料生產(chǎn)中，以及在制劑制備過程中使用，但在工藝過程中未能完全去除有機溶劑。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第102頁分三類：一類：防止使用，苯、四氯化碳等二類：限制使用，乙腈、氯仿、甲醇等三類：推薦使用，乙酸、乙醇、乙醚等中國藥典檢驗方法：氣相色譜法。藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第103頁1、色譜柱：毛細管柱、填充柱。2、系統(tǒng)適用性試驗：（1）理論板數(shù)：填充柱>1000，毛細管柱>5000（2）分離度：R≥1.5（3）標準偏差：內(nèi)標法RSD≤5%，外標法≤10%藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第104頁3、供試品溶液制備：水、有機溶劑依據(jù)程度要求配制適當濃度4、對照品溶液制備

依據(jù)殘留溶劑程度或?qū)嶋H殘留量確定濃度藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第105頁5、測定法：第一法毛細管柱頂空進樣等溫法

有機溶劑數(shù)量少，極性差異小。第二法毛細管柱頂空進樣系統(tǒng)程序升溫法

有機溶劑數(shù)量多，極性差異大。第三法溶液直接進樣法藥物的雜質(zhì)檢查專業(yè)知識講座第106頁頂空進樣法：也稱液上氣