各種耐藥檢測方法及注意事項

各種耐藥檢測方法及注意事項各種耐藥檢測方法及注意事項第1頁話題結束后你將能夠…在年CLSI表單M100-S20上找到并列出其主要改變。為你試驗室日常工作制訂合理策略和指導方針。各種耐藥檢測方法及注意事項第2頁年1月CLSI藥敏試驗標準M100-S20列表（）＊M02-A10紙片擴散法（）＊＊M07-A8

MIC方法（）＊＊＊M100每年更新一次＊＊M02、M07每三年更新一次各種耐藥檢測方法及注意事項第3頁年CLSI藥敏標準主要改變

一關于腸桿菌科細菌各種耐藥檢測方法及注意事項第4頁“藥品測試和匯報”表1中

腸桿菌科細菌

關于頭孢噻吩CLSIM100-S20.GroupUCLSIM100-S19.GroupA各種耐藥檢測方法及注意事項第5頁為何頭孢噻吩被移動位置?在美國，注射頭孢噻吩已經(jīng)無效對于腸桿菌科細菌，口服頭孢噻吩主要用于尿路感染頭孢噻吩敏感性測試能夠代表其它口服頭孢菌素類–頭孢羥氨芐,頭孢泊肟,頭孢氨芐,氯碳頭孢僅尿路感染分離株匯報頭孢噻吩結果各種耐藥檢測方法及注意事項第6頁腸桿菌科

折點已修正(MICμg/ml)藥品CLSIM100-S19CLSIM100-S20SIRSIR頭孢唑啉<=816>=32<=12>=4頭孢噻肟<=816-32>=64<=12>=4頭孢唑肟<=816-32>=64<=12>=4頭孢曲松<=816-32>=64<=12>=4頭孢他啶<=816>=32<=48>=16氨曲南<=816>=32<=48>=16CLSIM100-S20.Table2A.各種耐藥檢測方法及注意事項第7頁腸桿菌科細菌

折點未修正，有待評定(MICμg/ml)

藥品CLSIM100-S20SIR頭孢呋辛（非口服）<=816>=32頭孢吡肟<=816>=32頭孢替坦<=1632>=64頭孢西丁<=816>=32CLSIM100-S20.Table2A.各種耐藥檢測方法及注意事項第8頁腸桿菌科折點修正(紙片法mm)藥品CLSIM100-S19CLSIM100-S20SIRSIR頭孢唑啉>=1815-17<=14NANANA頭孢噻肟>=2315-22<=14>=2623-25<=22頭孢唑肟>=2015-19<=14>=2522-24<=21頭孢曲松>=2114-20<=13>=2320-22<=19頭孢他啶>=1815-17<=14>=2118-20<=17氨曲南>=2216-21<=15>=2118-20<=17各種耐藥檢測方法及注意事項第9頁為何頭孢唑啉沒有紙片法折點？所研究地域范圍內頭孢唑啉MIC折點無可靠結果需要深入深入研究紙片藥品濃度有待修正各種耐藥檢測方法及注意事項第10頁為何CLSI降低了頭孢菌素和氨曲南對腸桿菌科細菌折點？先前折點是20多年前制訂加強了對于以往和新β-內酰胺酶耐藥機制認識，以及加上ESBLs加入確定折點有了新方法藥代動力學和藥效動力學（PK/PD)各種耐藥檢測方法及注意事項第11頁

折點無需再評定

在美國，大多藥品都買不到或者沒有同意使用對于E.coli，Klebsiellaspp.和Proteusmirabilis，檢測他們中任何一個，都必須繼續(xù)完成ESBLs篩選和確證試驗假如ESBLs陽性，要把cephalosporins、penicillins、

aztreonam敏感結果改為耐藥頭孢孟多頭孢尼西頭孢哌酮拉氧頭孢各種耐藥檢測方法及注意事項第12頁腸桿菌科修正后碳氫酶烯類折點（MICug/ml）藥品CLSIM100-S19CLSIM100-S20SIRSIR多利培南---<=12>=4厄他培南<=24>=8<=0.250.5>=1亞胺培南<=48>=16<=12>=4美羅培南<=48>=16<=12>=4各種耐藥檢測方法及注意事項第13頁腸桿菌科新碳氫酶烯類折點需要碳氫酶烯酶試驗（比如：改良Hodge試驗）嗎？不，在化驗單匯報中，碳氫酶烯酶試驗不是必需。碳氫酶烯酶試驗主要用于感染控制方面。各種耐藥檢測方法及注意事項第14頁檢測ESBLs（1）最初方法起源于：●一些分離株在敏感范圍內提升了MIC值●得到關于病人產(chǎn)ESBLs分離菌株數(shù)據(jù)結果有限

對大腸埃希氏菌，克雷伯均屬，奇異變形桿菌進行ESBLs篩選和確證試驗各種耐藥檢測方法及注意事項第15頁檢測ESBLs（2）現(xiàn)在咱們認識到：●ESBLs表型檢測不是最理想

1：在做確證試驗時，多重耐藥機制出現(xiàn)會掩蓋ESBLs

比如-ESBLs+AmpC-ESBLs+porinmutation2:ESBLs出現(xiàn)在除E.coli，Klebsiellaspp.，Proteusmirabilis之外其它腸桿菌科細菌一些種時確證試驗并不可行

3：一些試驗室不做檢測

●相對于耐藥機制認識，MIC與統(tǒng)計輸出結果關系更親密各種耐藥檢測方法及注意事項第16頁檢測ESBLs（3）目標假如使用……舊折點M100-S19修正過折點M100-S20用于標本處理ESBL篩選和確證試驗YesNo把頭孢菌素類，青霉素類，氨曲南由“S”改為“R”YesNo用于感染控制ESBL篩選和確證試驗Yes(假如要求做…..)Yes（假如要求做…..)把頭孢菌素類，青霉素類，氨曲南由“S”改為“R”YesNo各種耐藥檢測方法及注意事項第17頁二非腸桿菌科細菌各種耐藥檢測方法及注意事項第18頁不動桿菌屬在表1里刪除粘菌素/多粘菌素沒有不動桿菌屬FDA臨床指證在表2B-2里折點沒有改變

各種耐藥檢測方法及注意事項第19頁刪除銅綠假單胞菌

—關于青霉素類解釋對這類藥品敏感種類提醒需要一個高濃度治療銅綠假單胞菌引發(fā)嚴重感染。針對這些感染，單一療法往往造成臨床治療失敗。應考慮加入體外試驗對銅綠假單胞菌有抗菌活性抗生素，比如喹諾酮類和氨基糖苷類各種耐藥檢測方法及注意事項第20頁三葡萄球菌屬各種耐藥檢測方法及注意事項第21頁萬古霉素MICCLSIM100-S20()萬古霉素紙片擴散法無抑菌環(huán)(=6mm)可檢測含VanA金黃色葡萄球菌分離株萬古霉素抑菌環(huán)>=7mm，必須檢測其MIC值紙片擴散法測萬古霉素不可靠檢測到萬古霉素MIC>=8ug/ml任何金黃色葡萄球菌，應送到參考試驗室各種耐藥檢測方法及注意事項第22頁增加Linezolid耐藥折點Linezolid不敏S.aureus罕見0.05%(7/15,280isolates)

CLSIagendabookJune●耐藥機制已經(jīng)確定

–rRNA突變、介導耐藥（能被質粒編碼）Mendesetal..AntimicrobAgentsChemother.52:2244.各種耐藥檢測方法及注意事項第23頁增加MRSA定義MRSA就是金葡一些菌株表示mecA基因或是其它耐甲氧西林機制，比如與青霉素結合蛋白親和力改變各種耐藥檢測方法及注意事項第24頁關于mecA陰性MRSA機制—修飾青霉素結合蛋白位點(PBPs)1,2,4(MOD-SA)—編碼blaZ青霉素酶過分表示—Methicillinase？●罕見●文件里有限臨床資料

re:相關β-內酰胺類藥品治療

Croes,Setal..ClinMicrobiolInfect.Epub.10/09Chambers,H.1997.ClinMicrobiolRev.10:781.各種耐藥檢測方法及注意事項第25頁S.aureusorS.Lugdunensis

苯唑西林和頭孢西丁檢測頭孢西丁取代了檢測苯唑西林耐藥，匯報苯唑西林敏感或耐藥必須以頭孢西丁為準。假如頭孢西丁和苯唑西林同時耐藥或是任何二者之一耐藥，此菌株需匯報苯唑西林耐藥各種耐藥檢測方法及注意事項第26頁S.aureusorS.Lugdunensis

苯唑西林（OX)和頭孢西丁(CX)檢測﹡大多市場上判定系統(tǒng)教授規(guī)則提醒“耐藥”O(jiān)XCX耐藥機制流行率匯報-OXSS無普遍SRRmecA普遍RRSmecA(低水平表示)不常見R﹡SRPBP改變或是大量β-內酰胺酶（近似MRSA）罕見R﹡各種耐藥檢測方法及注意事項第27頁抗生素列表里新增兩種

頭孢烯亞類藥品打破了MRSA(andMRCoNS)耐全部β-內酰胺類藥品規(guī)則CeftarolineandCeftobiprole含有抑制MRSA活性*未經(jīng)FDA認可—January

CLSIM100-S20.pp144.

種類

亞類藥品名稱頭孢烯（Cephems）抑制MRSA活性頭孢菌素類CeftarolineCeftobiprole頭孢比普酯各種耐藥檢測方法及注意事項第28頁四鏈球菌屬關于肺炎鏈球菌無增加/變動/刪除各種耐藥檢測方法及注意事項第29頁修正β-溶血鏈球菌關于

青霉素結果延伸β-溶血鏈球菌青霉素“S”結果能夠預測：見左圖每個β-溶血鏈球菌分群在列表里藥品都有臨床指征（大菌落菌株）

CLSIM100S20.PP.93A、B、C、G群A群另加…..氨芐西林阿莫西林阿莫西林/克拉維酸氨芐西林/舒巴坦頭孢唑啉頭孢吡肟頭孢噻吩頭孢拉定頭孢噻肟頭孢唑肟頭孢曲松厄他培南亞胺培南美羅培南頭孢克洛頭孢地尼頭孢丙烯頭孢布烯頭孢呋辛頭孢泊肟頭孢匹林各種耐藥檢測方法及注意事項第30頁修正…草綠色鏈球菌草綠色鏈球菌屬包含：

5群，每個群有幾個種變異鏈球菌群唾液鏈球菌群牛鏈球菌群米勒鏈球菌群溫和鏈球菌群各種耐藥檢測方法及注意事項第31頁刪除：草綠色鏈球菌關于青霉素

推斷性結果

為何？即使極少，但在青霉素與頭孢菌素之間缺乏交叉敏感還是得到了證實。最近交叉敏感數(shù)據(jù)并不宜于回顧。許多草綠色鏈球菌對?-內酰胺類藥品不敏感。許多草綠色菌藥敏試驗主要來自于嚴重感染，需要MIC，需要可靠試驗結果！各種耐藥檢測方法及注意事項第32頁六質控和其它各種耐藥檢測方法及注意事項第33頁修正…對不敏感種類闡述僅有敏感解釋標準分離株因為耐藥菌株極少被檢出，種類已經(jīng)確定。分離菌株檢測在MIC折點以上或是在抑菌環(huán)折點以下應匯報不敏。注解1：不敏分離株并不意味著存在耐藥機制，碰到MIC值在敏感折點以上分離株不存在耐藥機制原因可能是野生型菌株，且發(fā)覺在折點確定以后注解2：細菌變異造成出現(xiàn)不敏菌株，應證實其微生物判定結果和抗生素敏感試驗（附錄A）

CLSIM100-S20.pp.22.各種耐藥檢測方法及注意事項第34頁舉例：僅有敏感折點值

不敏感=MIC>1.0μg/ml出現(xiàn)任何不敏分離株-重新進行AST檢測-保留菌株-送往高一級試驗室（用CLSI標準MIC法檢測）(查看CLSIM100-S20附錄A中不敏“罕見”or“不存在”統(tǒng)計)*Saderetal..DiagnMicrobiolInfectDis.65:158.CLSIM100-S20.

微生物藥品MIC(ug/ml)備注SIR肺炎鏈球菌萬古霉素<=1.0--統(tǒng)計中僅有”敏感“結果葡萄球菌屬達托霉素<=1.0--幾乎沒有”不敏感“報導各種耐藥檢測方法及注意事項第35頁增加：警告?zhèn)€別—腦脊液分離株不能匯報藥品…..

不匯報頭霉素類（eg.頭孢西丁，頭孢替坦）CLSIM100-20.PP.30,35.各種耐藥檢測方法及注意事項第36頁質控范圍校正抗生素大腸埃希氏菌ATCC25922銅綠假單胞菌ATCC27853金黃色葡萄球菌ATCC29213肺炎鏈球菌ATCC49619MIC粘菌素XX多粘菌素BX達托霉素X利奈唑胺X四環(huán)素X紙片擴散法多利培南XX各種耐藥檢測方法及注意事項第37頁增加：質控表上新藥品（非FDA同意）藥品亞類說明貝西沙星（局部用藥）氟喹諾酮類眼藥Razupenem(靜脈注射)碳青霉烯類廣譜，對腸桿菌科，革蘭氏陽性菌（包含耐甲氧西林葡萄球菌屬，腸球菌屬）都有抗菌活性普利沙星（口服）氟喹諾酮類廣譜，對腸桿菌科，非發(fā)酵菌，大多革蘭氏陽性菌，艱難梭菌都有抗菌活性Fidaxomicin（口服）大環(huán)內酯類（class?）治療艱難梭菌引發(fā)感染新藥各種耐藥檢測方法及注意事項第38頁關于CLSI和FDAFDA當前沒有針對已修正折點機構，商家需要花費幾年時間去修正這些折點。全部產(chǎn)品試驗系統(tǒng)生產(chǎn)廠家必須正當使用FDA折點

建立標準建立折點

修正折點/再評價

調控建立折點判別機制（對修正折點/再評價-）CLSIFDA各種耐藥檢測方法及注意事項第39頁年CLSI關于非苛養(yǎng)菌常規(guī)藥敏試驗和匯報抗菌藥品提議分組﹡僅用于MIC法，紙片擴散法不可靠各種耐藥檢測方法及注意事項第40頁腸桿菌科A組（常規(guī)試驗//常規(guī)匯報藥品）B組（首選試驗//有選擇匯報藥品）C組（補充試驗//有選擇匯報藥品）U組（僅用于泌尿道補充試驗藥品）氨芐西林阿米卡星氨曲南頭孢噻吩﹡頭孢唑啉阿莫西林/克拉維酸氨芐西林/舒巴坦哌拉西林/他唑巴坦替卡西林/克拉維酸頭孢他啶洛美沙星或氧氟沙星諾氟沙星慶大霉素妥布霉素頭孢呋辛氯霉素頭孢吡肟四環(huán)素頭孢替坦頭孢西丁呋喃妥因頭孢噻肟或頭孢曲松磺胺甲惡唑環(huán)丙沙星左氧氟沙星甲氧芐啶厄他培南亞胺培南美羅培南哌拉西林甲氧芐啶/磺胺甲惡唑各種耐藥檢測方法及注意事項第41頁銅綠假單胞菌A組（常規(guī)試驗//常規(guī)匯報藥品）B組（首選試驗//有選擇匯報藥品）C組（補充試驗//有選擇匯報藥品）U組（僅用于泌尿道補充試驗藥品）頭孢他啶阿米卡星洛美沙星或氧氟沙星諾氟沙星慶大霉素妥布霉素氨曲南頭孢吡肟哌拉西林環(huán)丙沙星左氧氟沙星亞胺培南美羅培南哌拉西林/他唑巴坦替卡西林各種耐藥檢測方法及注意事項第42頁葡萄球菌屬A組（常規(guī)試驗//常規(guī)匯報藥品）B組（首選試驗//有選擇匯報藥品）C組（補充試驗//有選擇匯報藥品）U組（僅用于泌尿道補充試驗藥品）阿奇霉素或克拉霉素或紅霉素﹡達托霉素氯霉素洛美沙星諾氟沙星克林霉素利奈唑胺環(huán)丙沙星或左氧沙星或氧氟沙星莫西沙星苯唑西林（頭孢西?。┨├顾厍嗝顾囟辔鳝h(huán)素四環(huán)素慶大霉素呋喃妥因甲氧芐啶/磺胺甲惡唑萬古霉素奎奴普汀/達福普汀磺胺甲惡唑利福平甲氧芐啶各種耐藥檢測方法及注意事項第43頁腸球菌屬A組（常規(guī)試驗//常規(guī)匯報藥品）B組（首選試驗//有選擇匯報藥品）C組（補充試驗//有選擇匯報藥品）U組（僅用于泌尿道補充試驗藥品）氨芐西林青霉素﹡達托霉素慶大霉素（僅用于篩選高水平耐藥株）環(huán)丙沙星左氧氟沙星諾氟沙星利奈唑胺鏈霉素（僅用于篩選高水平耐藥株）奎奴普汀/達福普汀呋喃妥因萬古霉素四環(huán)素各種耐藥檢測方法及注意事項第44頁不動桿菌屬A組（常規(guī)試驗//常規(guī)匯報藥品）B組（首選試驗//有選擇匯報藥品）C組（補充試驗//有選擇匯報藥品）U組（僅用于泌尿道補充試驗藥品）氨芐西林/舒巴坦阿米卡星頭孢他啶哌拉西林/他唑巴坦替卡西林/克拉維酸環(huán)丙沙星左氧氟沙星頭孢吡肟亞胺培南美羅培南頭孢噻肟頭孢曲松慶大霉素妥布霉素多西環(huán)素米諾環(huán)素四環(huán)素哌拉西林甲氧芐啶/磺胺甲惡唑各種耐藥檢測方法及注意事項第45頁洋蔥伯克霍爾德菌嗜麥芽窄食單胞菌A組（常規(guī)試驗//常規(guī)匯報藥品）B組（首選試驗//有選擇匯報藥品）甲氧芐啶/磺胺甲惡唑頭孢他啶﹡氯霉素﹡左氧氟沙星美羅培南米諾環(huán)素﹡替卡西林/克拉維酸A組（常規(guī)試驗//常規(guī)匯報藥品）B組（首選試驗//有選擇匯報藥品）甲氧芐啶/磺胺甲惡唑﹡頭孢他啶﹡氯霉素左氧氟沙星米諾環(huán)素﹡替卡西林/克拉維酸各種耐藥檢測方法及注意事項第46頁其它非腸桿菌科細菌A組（常規(guī)試驗//常規(guī)匯報藥品）B組（首選試驗//有選擇匯報藥品）C組（補充試驗//有選擇匯報藥品）U組（僅用于泌尿道補充試驗藥品）頭孢他啶阿米卡星頭孢他啶頭孢曲松左氧氟沙星或氧氟沙星諾氟沙星慶大霉素妥布霉素氨曲南頭孢吡肟氯霉素磺胺異惡唑哌拉西林環(huán)丙沙星左氧氟沙星四環(huán)素亞胺培南美羅培南哌拉西林/他唑巴坦替卡西林/克拉維酸甲氧芐啶/磺胺甲惡唑各種耐藥檢測方法及注意事項第47頁年CLSI關于苛養(yǎng)菌常規(guī)藥敏試驗和匯報抗菌藥品提議分組﹡僅用于MIC法，紙片擴散法不可靠各種耐藥檢測方法及注意事項第48頁嗜血桿菌屬A組（常規(guī)試驗//常規(guī)匯報藥品）B組（首選試驗//有選擇匯報藥品）C組（補充試驗//有選擇匯報藥品）氨芐西林氨芐西林/舒巴坦阿奇霉素克拉霉素頭孢呋辛（非口服）氨曲南阿莫西林/克拉維酸頭孢噻肟或頭孢他啶或頭孢曲松頭孢克洛頭孢丙烯甲氧芐啶/磺胺甲惡唑頭孢地尼或頭孢克肟或頭孢泊肟頭孢呋辛（口服）氯霉素環(huán)丙沙星或左氧氟沙星或洛美沙星或莫西沙星或氧氟沙星吉米沙星厄他培南或亞胺培南利福平美羅培南泰利霉素四環(huán)素各種耐藥檢測方法及注意事項第49頁肺炎鏈球菌A組（常規(guī)試驗//常規(guī)匯報藥品）B組（首選試驗//有選擇匯報藥品）C組（補充試驗//有選擇匯報藥品）紅霉素﹡頭孢吡肟﹡頭孢噻肟﹡頭孢曲松﹡阿莫西林﹡阿莫西林/克拉維酸克林霉素青霉素（苯唑西林紙片）吉米沙星左氧氟沙星莫西沙星氧氟沙星﹡頭孢呋辛甲氧芐啶/磺胺甲基異惡唑﹡美羅培南氯霉素泰利霉素﹡厄他培南﹡亞胺培南四環(huán)素利奈唑胺萬古霉素利福平各種耐藥檢測方法及注意事項第50頁β-溶血鏈球菌A組（常規(guī)試驗//常規(guī)匯報藥品）B組（首選試驗//有選擇匯報藥品）C組（補充試驗//有選擇匯報藥品）克林霉素紅霉素頭孢吡肟或頭孢噻肟或頭孢曲松氯霉素﹡達托霉素青霉素或氨芐西林左氧氟沙星氧氟沙星萬古霉素利奈唑胺奎奴普丁/達福普丁各種耐藥檢測方法及注意事項第51頁草綠色溶血鏈球菌A組（常規(guī)試驗//常規(guī)匯報藥品）B組（首選試驗//有選擇匯報藥品）C組（補充試驗//有選擇匯報藥品）﹡氨芐西林﹡青霉素頭孢吡肟頭孢噻肟頭孢曲松氯霉素克林霉素萬古霉素紅霉素利奈唑胺各種耐藥檢測方法及注意事項第52頁淋病奈瑟氏菌A組（常規(guī)試驗//常規(guī)匯報藥品）B組（首選試驗//有選擇匯報藥品）C組（補充試驗//有選擇匯報藥品）頭孢克肟或頭孢泊肟頭