FDA審核生物學評價-致敏性測試報告都看什么

2/2FDA審核生物學評價-致敏性測試報告都看什么？

2023-06-2511:531、生物學評價測試對醫(yī)療器械很重要

毫無疑問，醫(yī)療器械是挽救生命的重要工具。從HIV血液診斷檢測、血糖自測等體外診斷IVD，到應用于監(jiān)測X射線管性能的軟件作為醫(yī)療器械(SaMD)，再到手持手術器械等I類醫(yī)療器械。醫(yī)療器械在改善全世界患者的健康方面發(fā)揮著重要作用，但也存在著潛在的不良風險，必須嚴格監(jiān)管。生物相容性測試是觀察醫(yī)療器械的化學組成、滅菌過程和設備接觸類型與患者組織和生理系統(tǒng)相互作用的過程。這種測試是醫(yī)療器械安全評估的關鍵步驟。

2、FDA認證時，致敏性測試的重點是哪些？

致敏性依據(jù)的標準是10993-10，同樣建議實驗室出具符合GLP的報告，而審核員在拿到報告后會在報告中重點關注下列內容:

(一般用于510(k)申請的報告都為英文，所以為了能讓大家在英文報告中找到對應內容，這里我們使用英文相關術語，避免歧義)

1.致敏性測試的類型：主要的實驗類型有三種，包括GuineaPigMaximizationTest(GPMT),LLNA(perASTMF2148),BuehlerDermalSensitization(PerISO10993-10)?；蛘咂渌椒?。

FDA當前推薦適用GPMT方法，也就是上述的GuineaPigMaximizationTest.如果實驗使用了其它方法，那么FDA需要提供使用其它方法的詳細描述；

2.實驗樣品信息：報告中需要包含用于此次實驗樣品的信息，比如部件名稱，材料名稱等；注意，需要確保試驗樣品為產(chǎn)品的最終形態(tài)，也就是和產(chǎn)品上市的狀態(tài)保持一致，不建議提供原材料作為實驗樣品。

3.ExtractionConditions

a.TestArticleExtractionRatio

樣品的浸提比例一般包括，6cm2/ml(<0.5mmthick),3cm2/ml(>0.5mmthick),1.25cm2/ml(elastomer>1mmthick),0.2g/ml(elastomers),0.1g/ml(non-elastomers).或者其它比例。

FDA當前推薦使用基于面積來浸提，也就是上述的6cm2/ml(<0.5mmthick),3cm2/ml(>0.5mmthick),1.25cm2/ml(elastomer>1mmthick)。如果實驗使用了基于重量來確定浸提比例，則需要給出合理的解釋。FDA認為使用重量來代替面積可能會因為不充足的樣品量而導致假陰性的結果，所以如果給出解釋，那么應該重點解釋基于重量確定的浸提比例而得到的樣本量應該等于或優(yōu)于基于面積確定的浸提比例而得到的樣本量。

至于如果確定6cm2/ml(<0.5mmthick),3cm2/ml(>0.5mmthick),還是1.25cm2/ml(elastomer>1mmthick)，那么就要根據(jù)樣本的物理特征了，正如括號中備注的，小于或大于0.5mm厚度，或者帶有彈性且大于1mm厚度等條件來決定。

b.ExtractionVehicle

浸提介質一般包括PolarVehicle(0.9%Sodiumchloride),Non-PolarVehicle(Vegetable,SesameorCottonSeedOil),或者其它。

FDA當前推薦使用極性(PolarVehicle)和非極性溶劑(Non-PolarVehicle)分別浸提。也就是上述兩種浸提介質都要使用。如果使用其它浸提介質，需要給出合理的解釋。

c.ExtractionConditions

浸提條件一般包括37℃for24hr,37℃for72hr,50℃for72hr,70℃for24hr,121℃for1hr,或者其它浸提條件。

FDA當前推薦使用50℃for72hr,或者70℃for24hr。

如果使用37℃for24hr,或37℃for72hr，則需要給說明器械的臨床使用時間是否大于浸提時間。

如果使用121℃for1hr，則需要給說明為什么此浸提溫度對產(chǎn)品的浸提物不會有影響。

d.Wasthetestextractdiluted,filtered,orwasthepHadjusted?

FDA當前建議在報告中明確包含浸提液狀態(tài)的描述，此描述應可以清晰的說明浸提液是否在使用前經(jīng)過稀釋，過濾或者調節(jié)pH值。

FDA期待的描述中，應該清楚的表明，浸提液在使用前沒有經(jīng)過上述處理。

e.PositiveControl

FDA當前建議在報告中明確包含陽性對照的描述，此描述應該可以清晰的體現(xiàn)

1）Conductedconcurrentlywithtestarticle

2)Historicalcontrol<3monthsfromthetimeoftest

3)Historicalcontrol>3monthsfromthetimeoftest

4)NoPositiveControl

陽性對照應該是上述1）或2）的狀態(tài)。

如果出現(xiàn)3）或4）的情況，則說明此實驗不符合ISO1033-10，Clause4.0(d)的要求，需要重新進行測試。

f.Whatisthepositivecontrol?

FDA當前建議在報告中明確陽性對照是什么，DNCB(0.05-0.5%),DNCB(≥0.5%)，或者其它。

FDA當前推薦使用DNCB(0.05-0.5%)作為陽性對照。

如果使用DNCB(≥0.5%)作為陽性對照，需要對評價是否對此實驗最終結果的可接受性和敏感性有影響。

如果使用其它物質作為陽性對照，則需要給出使用這種物質的合理性。

g.NegativeControl

FDA當前建議在報告中明確包含陰性對照的描述，此描述應該可以清晰的體現(xiàn)所使用的陰性對照信息。

FDA當前推薦使用Extractionvehicleswithouttestmaterialonly作為陰性對照，如果使用了其它的陰性對照，則需要提供合理性評價。

h.Extract/TestArticleisclear?

FDA當前建議在報告中包含對浸提物質的狀態(tài)進行描述，浸提介質中的測試樣本是否清晰，比如不渾濁，沒有顆粒，沒有顏色改變，沒有膨脹或者降解.

FDA期待的描述中應該如上述所列，沒有這些情況出現(xiàn)。

i.ExtractStorageConditions

浸提溶劑的存儲條件包括兩種Usedby24hrspost-extraction,和Stored(>24hrs)。也就是浸提后的溶劑是否在24小時內使用。

FDA當前建議浸提后的溶劑需要在24小時內使用，否則需要給出合理的解釋，并提供使用存儲了24小時后的浸提溶劑進行實驗對結果沒有影響的證據(jù)。

一般建議浸提后立即使用。

4.Methods

a.TestSystem

FDA當前推薦的實驗細胞毒性的實驗系統(tǒng)為≥10Test&≥5ControlMalesand/orFemalesthatare/werenotpregnant,注意需要注明實驗中使用的雌性動物么有懷過孕。

如果不是此實驗系統(tǒng)，則需要提供替代細胞類型的描述，并給出合理的解釋。

b.Werethreepairsofintradermalinjectionsgivenonthebacksoftheanimals

FDA當前建議在報告中包含對實驗動物背部進行皮內注射的描述，此描述應包括必要的信息，可以讓審核員清晰的判斷在動物背部進行的皮內注射的方法是否符合下面的要求:

Testanimals

1.Two0.1mlofa1:1FCA/vehiclemixture

2.Two0.1mloftestextract

3.Two0.1mlofa1:1mixtureofthe1:1FCAandtextextract

Controlanimals

1.Two0.1mlofa1:1FCA/vehiclemixture

2.Two0.1mloftestextract

3.Two0.1mlofa1:1mixtureofthe1:1FCAandtextextract

FDA審核員期望此部分的實驗是按照上述要求實施的，如果不是，則需要給出理由。

c.Onday6afterinjection

FDA當前建議在報告中包含描述，此描述可以清晰的表明是否在注射后第6天的實施了下列操作

Approximately24hbeforeInductionII,clipandtreattheinjectionsiteswitha10%sodiumlaurylsulfate(SLS)inpetroleumjelly(anyreminingSLSshouldberemovedpriortoInductionIItreatment)

如果沒有實施上述操作，則需要給出理由。

d.Onday7afterinjection

FDA當前建議在報告中包含描述，此描述可以清晰的表明是否在注射后第7天的實施了下列操作:

Saturate(-0.3ml)the2x4cmfilterpaperpatcheswithtestextractorcontrolvehicleappliedtoinjectionareafor48hoursandremovethepatchesafter48hours.

如果沒有實施上述操作，則需要給出理由。

e.14DaysafterremovalofInductionpatches

FDA當前建議在報告中包含描述，此描述可以清晰的表明是否在移除貼片后14天的實施了下列操作:

Cliptherightandleftflankareasofeachguineapigandsaturate2x2cmpatches/hilltopchamberswithtestextractorcontrolvehicle.(Oneflankshouldbetreatedwithpatch/chambercontainingthetestextract,whiletheotherflankshouldbetreatedwiththecontrolvehicle.Patches/chambersshouldbeleftinplacefor24hoursbeforeremoval)

如果沒有實施上述操作，則需要給出理由。

f.Weretheredeviations?

FDA當前建議報告中明確結果是否存在偏差，如果存在，則需要提供解釋，為什么此偏差不會影響結果的有效性。

5.Results

a.Didanimalsappearnormal,andwerethereanydeaths?

FDA當前建議報告中明確體現(xiàn)實驗用動物的狀態(tài)，是否存在任何死亡情況。

一般來說，實驗動物應該外觀正常，沒有死亡。如果出現(xiàn)不正常的外觀或者死亡情況，則需要對這些不良時間進行調查，并根據(jù)調查結果評估是否影響實驗結果。

b.WastheMagnussonandKligmanscore<1.0forthepolarextractinalltestandcontrolanimals?

FDA當前建議報告中明確描述是否使用MagnussonandKligman評分小于1.0來評價極性萃取和對照動物.

如果評分大于等于1，需要提供解釋，為什么此評分不能說明致敏性，以及為什么此評分的對照不影響實驗的有效性。

c.WastheMagnussonandKligmanscore<1.0forthenon-polarextractinalltestandcontrolanimals?

FDA當前建議報告中明確描述是否使用MagnussonandKligman評分小于1.0來評價非極性萃取和對照動物。

如果評分大于等于1，需要提供解釋，為什么此評分不能說明致敏性，以及為什么此評分的對照不影響實驗的有效性。

d.Werethepositivecontrols≥1.0inallanimals?

FDA當前建議報告中明確描述是否所有陽性對照的評分都是大于等于1的。如果不是，則需要提供理由。

6.Conclusion

SensitizingPotential

FDA當前建議報告中明確關于潛在毒性的測試結論，實驗結論一般應為non-Sensitizer。如果實驗結論是Sensitizer，則需要給出為什么此結論可以被接受。

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