進(jìn)出口食品平板菌落計(jì)數(shù)-濾膜法

中，按4.4.2.2條中所述的方法，迅速振搖，制成1:10的樣品勻液。吸取樣品時(shí)，吸管插入液面下不要超過(guò)2.5cm。吸管內(nèi)液體要在2s～4s內(nèi)完全排入稀釋液中。不要在稀釋液中吹洗吸管。4.4.3稀釋樣品勻液4.4.3.1用10mL滅菌吸管準(zhǔn)確吸取1;10的樣品勻液10ml.放入裝有90ml.PT稀釋液的200ml.滅菌廣口瓶中。按4.4.2.2中所述的方法，迅速振搖，制成1:100的樣品液。4.4.3.2分別用10mL滅菌吸管按4.4.3.1條所述方法將樣品勻液制成10倍遞增PT稀釋液的樣品液如10-3、10-4、10-5……4.4.4酶處理的食品需要酶處理的食品取1:10PT樣品勻液10mL加酶原液1mL,在滅菌試管中混合放入35℃土1℃水浴中處理20min~30min,取出過(guò)濾。對(duì)每一份試樣，選用適宜的三個(gè)連續(xù)稀釋度的樣液，每個(gè)稀釋度的樣液分別過(guò)濾兩次。將滅菌的過(guò)濾裝置連接于真空抽濾瓶上，以無(wú)菌操作將無(wú)菌濾膜放在抽濾底座上，用不銹鋼夾子固定。以無(wú)菌操作加10ml～20mL無(wú)菌蒸餾水于濾器中，加入PT樣品勻液10mL,打開(kāi)真空泵，抽吸過(guò)濾，再加入10mL～15mL無(wú)菌蒸餾水，抽吸過(guò)濾，關(guān)閉真空泵。用無(wú)菌鑷子將濾膜取出。4.6培養(yǎng)以無(wú)菌操作將濾膜取出放于預(yù)先干燥的TSFA瓊脂平板表面上，濾膜和瓊脂表面之間應(yīng)無(wú)氣泡。將TSFA瓊脂平板，平放入36℃±1℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48h。4.7.1培養(yǎng)后，對(duì)每個(gè)TSFA瓊脂平板上產(chǎn)生的深、淺綠色菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)。25～250個(gè)菌落為合適范圍。如果不能立即計(jì)數(shù)，應(yīng)將平板存放于0℃~4℃,但不得超過(guò)24h。4.7.2如只有一個(gè)稀釋度的兩個(gè)平板上的菌落在合適范圍內(nèi)，先計(jì)算兩個(gè)平板的平均值，再將平均值乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)，作為每克(毫升)(g(mL))樣品中平板菌數(shù)。4.7.3如有兩個(gè)稀釋度在合適范圍內(nèi)，先計(jì)算每個(gè)稀釋度兩個(gè)平板的平均值。再計(jì)算兩個(gè)稀釋度的平均值，然后計(jì)算每克(毫升)(g(mL))樣品中平板菌落數(shù)。4.7.4當(dāng)最低稀釋度的兩個(gè)平板上都少于25個(gè)菌落時(shí)，計(jì)數(shù)這一稀釋度兩個(gè)平板上的實(shí)際菌落數(shù)。計(jì)算兩個(gè)平板上的平均菌落數(shù)，將平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)，得到估計(jì)的平板菌落數(shù)。給這個(gè)數(shù)注上星號(hào)(*),表明該數(shù)系從菌落數(shù)在25～250這一范國(guó)之外的平板估計(jì)所得。4.7.5當(dāng)所有平板上的菌落都超過(guò)250時(shí)，則應(yīng)將最高稀釋度的兩個(gè)平板的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)。得到估計(jì)的平板菌落數(shù)。給這個(gè)數(shù)注上星號(hào)(*)(同4.7.4)。4.7.6如果所有稀釋度的平板都沒(méi)有菌落，則以小于1乘以最低稀釋倍數(shù)報(bào)告平板菌落數(shù)。給這個(gè)數(shù)注上星號(hào)(*)(同4.7.4)。4.7.7同一稀釋度的兩個(gè)平板中，一個(gè)有25～250個(gè)菌落，另一