實(shí)驗(yàn)一神經(jīng)干動(dòng)作電位

關(guān)于實(shí)驗(yàn)一神經(jīng)干動(dòng)作電位

實(shí)驗(yàn)一

神經(jīng)干動(dòng)作電位的引導(dǎo)及傳導(dǎo)速度和不應(yīng)期的測(cè)定

第2頁,共25頁，2024年2月25日，星期天【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?/p>

1.學(xué)習(xí)和掌握制備蛙類神經(jīng)干制作方法。

2.①學(xué)習(xí)使用BL-420生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)引導(dǎo)蛙類坐骨神經(jīng)干動(dòng)作電位的方法。

②分析神經(jīng)干動(dòng)作電位的基本波形、幅值、時(shí)程，測(cè)定神經(jīng)興奮的傳導(dǎo)速度和不應(yīng)期。

第3頁,共25頁，2024年2月25日，星期天

【實(shí)驗(yàn)原理】神經(jīng)干動(dòng)作電位是神經(jīng)興奮的客觀標(biāo)志。它是由粗細(xì)不等、興奮性不同的神經(jīng)纖維所組成的，故在神經(jīng)干表面記錄的動(dòng)作電位為復(fù)合性動(dòng)作電位。這種電位的幅度在一定范圍內(nèi)可隨刺激強(qiáng)度的增加而加大。第4頁,共25頁，2024年2月25日，星期天處于興奮部位的膜外電位負(fù)于靜息部位，當(dāng)神經(jīng)沖動(dòng)通過后，該處的電位又恢復(fù)到靜息水平，這一可擴(kuò)布的、一過性的電位變化，即動(dòng)作電位。如果將兩個(gè)引導(dǎo)電極分別置于神經(jīng)干表面，當(dāng)神經(jīng)干一端興奮時(shí)，興奮波先后通過兩個(gè)引導(dǎo)電極處，記錄到兩個(gè)方向相反的電位偏轉(zhuǎn)波形，稱為雙向動(dòng)作電位。第5頁,共25頁，2024年2月25日，星期天【實(shí)驗(yàn)對(duì)象】

蟾蜍或蛙

【實(shí)驗(yàn)器材】蛙類手術(shù)器械（粗剪刀，眼科剪，手術(shù)剪，鑷子，探針，蠟盤，玻璃分針，大頭針，）培養(yǎng)皿，神經(jīng)屏蔽盒，引導(dǎo)線，刺激電極，任氏液，BL-420生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，廢液缸，張力換能器。第6頁,共25頁，2024年2月25日，星期天【實(shí)驗(yàn)步驟】

1.制備坐骨神經(jīng)腓神經(jīng)標(biāo)本

（1）破壞腦脊髓

（2）剪除軀干上部及內(nèi)臟

（3）剝皮及分離下肢

（4）制備坐骨神經(jīng)-腓神經(jīng)標(biāo)本。

第7頁,共25頁，2024年2月25日，星期天第8頁,共25頁，2024年2月25日，星期天第9頁,共25頁，2024年2月25日，星期天第10頁,共25頁，2024年2月25日，星期天第11頁,共25頁，2024年2月25日，星期天第12頁,共25頁，2024年2月25日，星期天2.儀器連接

（1）開機(jī)并啟動(dòng)BL-420生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)

（2）本實(shí)驗(yàn)采用雙通道記錄，將兩對(duì)引導(dǎo)電極分別與通道1和通道2連接，刺激電極連接至刺激器輸出接口。

連接方法如見圖：第13頁,共25頁，2024年2月25日，星期天

BL-420生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)神經(jīng)屏蔽盒CH1CH2

刺激輸出刺激電極地線C1C2C3C4

儀器連接示意圖第14頁,共25頁，2024年2月25日，星期天第15頁,共25頁，2024年2月25日，星期天（3）將坐骨神經(jīng)—腓神經(jīng)標(biāo)本放入神經(jīng)屏蔽盒（坐骨神經(jīng)中樞端放在刺激電極上，外周端放在引導(dǎo)電極上）。第16頁,共25頁，2024年2月25日，星期天【實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目】1、觀察細(xì)胞外引導(dǎo)雙相動(dòng)作電位的波形特點(diǎn)、測(cè)定幅值及時(shí)程。2、測(cè)定神經(jīng)干動(dòng)作電位傳導(dǎo)速度。3、測(cè)定不應(yīng)期：記下第二個(gè)動(dòng)作電位剛消失時(shí)的兩個(gè)刺激脈沖之間的波間隔，此時(shí)的波間隔值即為絕對(duì)不應(yīng)期。用不應(yīng)期減去絕對(duì)不應(yīng)期即可得出相對(duì)不應(yīng)期第17頁,共25頁，2024年2月25日，星期天【結(jié)果分析】1.解釋雙相動(dòng)作電位產(chǎn)生的機(jī)制，記錄動(dòng)作電位的時(shí)程、幅值。(3)2.測(cè)定神經(jīng)干動(dòng)作電位傳導(dǎo)速度:V=ΔS/ΔT(m/s)。（4）3.動(dòng)作電位不應(yīng)期的測(cè)量（5）4.刺激強(qiáng)度與復(fù)合動(dòng)作電位幅值的關(guān)系（6）第18頁,共25頁，2024年2月25日，星期天【注意事項(xiàng)】1.破壞蟾蜍的腦和脊髓時(shí)，應(yīng)防止其耳后腺及皮膚分泌的蟾酥毒液射入操作者的眼內(nèi)或污染實(shí)驗(yàn)標(biāo)本。2.制備神經(jīng)標(biāo)本過程中，應(yīng)避免用手捏神經(jīng)或鑷子夾傷神經(jīng)。3.為了防止神經(jīng)標(biāo)本干燥，制備過程中需不斷滴加任氏液，使其保持良好的興奮性。第19頁,共25頁，2024年2月25日，星期天4.將神經(jīng)干放入屏蔽盒之前，用刀片輕刮引導(dǎo)電極，以保證電極和神經(jīng)干密切接觸。5．制作標(biāo)本過程中，切勿傷及神經(jīng)干及其分支，避免牽拉和其它不良刺激，6．實(shí)驗(yàn)過程中，應(yīng)經(jīng)常在標(biāo)本上滴加任氏液以保持濕潤(rùn)，使其保持良好的興奮性。7．每次刺激標(biāo)本以后，必須讓肌肉休息1-2分鐘，以防標(biāo)本疲勞。第20頁,共25頁，2024年2月25日，星期天雙向動(dòng)作電位第21頁,共25頁，2024年2月25日，星期天傳導(dǎo)速度：動(dòng)作電位在神經(jīng)干的傳導(dǎo)速度，可用電生理學(xué)方法進(jìn)行測(cè)量。測(cè)定神經(jīng)沖動(dòng)在神經(jīng)干上傳導(dǎo)的距離（S）和通過該距離所需時(shí)間（t），即可計(jì)算出神經(jīng)沖動(dòng)的傳導(dǎo)速度(V)，V＝ΔS/Δt。第22頁,共25頁，2024年2月25日，星期天

不應(yīng)期：當(dāng)雙脈沖的間隔時(shí)間為20ms左右時(shí)，示波器熒光屏上呈現(xiàn)兩個(gè)同樣大小的動(dòng)作電位。逐漸縮短雙脈沖之間的間隔，第二個(gè)動(dòng)作電位逐漸向第一個(gè)動(dòng)作電位靠近，振幅也隨之降低，最后可因落在第一個(gè)動(dòng)作電位的絕對(duì)不應(yīng)期內(nèi)而完全消失。第23頁,共25頁，2024年2月25日，星期天刺激強(qiáng)度與復(fù)合動(dòng)作電位幅值的關(guān)系

一根神經(jīng)纖維在受到閾值以上刺激產(chǎn)生動(dòng)作電位不隨著刺激強(qiáng)度增大而增大,但是坐骨神經(jīng)干是有許多神經(jīng)纖維組成的,在受到閾值以上刺激時(shí),由于引起不同數(shù)目神經(jīng)纖維產(chǎn)生動(dòng)作電位,隨著刺激強(qiáng)度增大,神經(jīng)纖維產(chǎn)生動(dòng)作電位的數(shù)目也越多,動(dòng)作電位的幅度也就越大,當(dāng)全部神經(jīng)纖維都產(chǎn)生動(dòng)作電位時(shí)