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文檔簡介

臨床血液學(xué)

1.胚胎造血期特點(diǎn):中胚葉造血期:2~9周,卵黃囊壁上的血島是人類最初的造

血中心;肝臟造血期即胚胎發(fā)育的第6周到第7個(gè)月;骨髓造血期從胚胎3個(gè)月

開始,到8個(gè)月時(shí)骨髓成為造血中心。

2.造血干細(xì)胞在體內(nèi)可長期地重建造血,而早期造血祖細(xì)胞只能短期重建造血,

晚期造血祖細(xì)胞則完全喪失重新造血的能力。

3.在造血正調(diào)控因子中,屬于早期造血因子的是多系集落刺激因子。

4.T細(xì)胞可產(chǎn)生IL-2-IL-5因子,不能產(chǎn)生IL-1因子。

5.正常人無效造血可占總造血的1%。

6.區(qū)分造血干細(xì)胞和早期造血祖細(xì)胞的依據(jù)是細(xì)胞表面標(biāo)志。

7.腫瘤壞死因子a對(duì)祖細(xì)胞具有抑制和激活兩種效應(yīng)。

8.造血干細(xì)胞只進(jìn)行不對(duì)稱有絲分裂。

9.轉(zhuǎn)化生長因子B參與造血的負(fù)向調(diào)控,阻止細(xì)胞進(jìn)入S期,維持造血干、祖

細(xì)胞處于非增殖狀態(tài)。

10.從出生到4歲,全身骨髓的髓腔內(nèi)均為紅骨髓。5歲后,紅骨髓脂肪化由遠(yuǎn)

心端向近心端發(fā)展。健康成人紅骨髓約占骨髓總量的50%o

11.青春期后逐漸萎縮的里吧器官是胸腺。

12.骨髓穿刺的常用部位是骼骨、胸骨、脛骨,成人最理想的骨髓穿刺部位是骼

骨后上棘。

13.骨髓增生標(biāo)準(zhǔn)中,有核細(xì)胞與成熟紅細(xì)胞的比值為1:20時(shí),屬于增生活躍。

14.對(duì)增生極度減低的骨髓片,可計(jì)數(shù)100個(gè)有核細(xì)胞。

15.正常骨髓中,粒細(xì)胞系統(tǒng)中比例最高的是中性桿狀核粒細(xì)胞,大約20%。

16.正常骨髓分裂象中常見于早幼及中幼階段,約占有核細(xì)胞的1%,增殖過高

的骨髓分裂象約占有核細(xì)胞的5%o

17.正常骨髓分裂象中幼紅細(xì)胞約占有核細(xì)胞的20%,以中、晚幼紅細(xì)胞為主,

平均各約10%O

18.細(xì)胞核形態(tài)異常改變的是Pelger-Huet異常,其它為胞質(zhì)異常。漿細(xì)胞中有

Russel小體。

19.胞質(zhì)豐富的原始階段細(xì)胞是原始漿細(xì)胞。

20.核染色質(zhì)呈粗大網(wǎng)狀且排列緊密的是原始巨核細(xì)胞。

21.在正常骨髓象中,在1.5cmX3.0cm的片膜上,可見巨核細(xì)胞7~35個(gè),數(shù)量

最少的是原始巨核細(xì)胞。

22.骨髓涂片中出現(xiàn)火焰細(xì)胞的是漿細(xì)胞系統(tǒng)。

23.粒細(xì)胞系統(tǒng)中,體積最大的階段是早幼粒細(xì)胞,體積大于原始粒細(xì)胞是血細(xì)

胞發(fā)育成熟演變規(guī)律中的特例。

24.顆粒常覆蓋在細(xì)胞核上的是嗜堿性粒細(xì)胞。

25.胞質(zhì)中出現(xiàn)紫紅色非特異性嗜天青顆粒的是早幼粒細(xì)胞;細(xì)小的、分散均勻

的灰塵樣紫紅色天青胺藍(lán)顆粒的是單核細(xì)胞。

26.原發(fā)性染色體異常也稱為標(biāo)記染色體。

27.成熟中性粒細(xì)胞過氧化物酶活性增高:再生

障礙性貧血、感染、急淋和慢淋,其他降低。

28.可以被過碘酸氧化并形成雙醛基的物質(zhì)是含乙二醇的多糖類物質(zhì)。

29.區(qū)別過碘酸-雪夫反應(yīng)陽性結(jié)果+和++的紅色顆粒數(shù)量是10個(gè)。

30,過碘酸-雪夫反應(yīng)可輔助診斷紅血病或紅白血病,正常幼紅細(xì)胞和紅細(xì)胞均呈

陰性反應(yīng),而發(fā)病時(shí)可呈陽性反應(yīng)。

31.過碘酸-雪夫反應(yīng)陽性:缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙性貧血及骨髓增生異常

綜合癥;過碘酸-雪夫反應(yīng)陰性:巨幼細(xì)胞性貧血、溶血性貧血、再生障礙性貧

血和白血病等疾病。

32.血細(xì)胞內(nèi)的堿性磷酸酶水解基質(zhì)液中的a-磷酸蔡酚時(shí),所需的PH值環(huán)境是

9.4~9.6。

33.急、慢性粒細(xì)胞白血病和急性單核細(xì)胞白血病時(shí),堿性磷酸酶染色積分值減

低,但在類白血病時(shí),NAP積分值明顯增高,中性桿狀核粒細(xì)胞堿性磷酸酶活性

增強(qiáng),甚至中性晚幼粒細(xì)胞也呈陽性反應(yīng)。

34.NAP試驗(yàn)中除成熟粒細(xì)胞外,呈陽性反應(yīng)的細(xì)胞是巨噬細(xì)胞。

35.NAP可用于鑒別真性紅細(xì)胞增多癥和繼發(fā)性紅細(xì)胞增多癥,前者積分值升高,

后者無明顯變化。

36.醋酸AS-D蔡酚酯酶染色中紅細(xì)胞系統(tǒng)的反應(yīng)特點(diǎn)是:早期幼紅細(xì)胞可呈陽

性反應(yīng),隨細(xì)胞的成熟陽性反應(yīng)程度逐漸減弱,此反應(yīng)不被氟化鈉抑制。

37.酸性磷酸酶染色時(shí),可被酒石酸抑制的是淋巴瘤細(xì)胞和慢性淋巴細(xì)胞白血病

38.巨核細(xì)胞可呈陰性反應(yīng)的化學(xué)染色是堿性a丁酸蔡酚酯酶染色。

39.能鑒別T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的化學(xué)染色是堿性a丁酸蔡酚酯酶染色和酸

性磷酸酶染色。

40.惡性組織細(xì)胞病有時(shí)需與急性單核細(xì)胞白血病相區(qū)分,可采用堿性a丁酸蔡

酚酯酶染色,前者陽性,但反應(yīng)不被氟化鈉抑制;也可借助過氧化酶染色輔助鑒

別,前者陰性,后者弱陽性。

41.鐵染色時(shí),骨髓小粒中的鐵術(shù)語細(xì)胞外鐵。

42.區(qū)分遺傳性和繼發(fā)性鐵粒幼性貧血的是發(fā)病年齡,前者多發(fā)于青少年,后者

多發(fā)于中老年;人體內(nèi)鐵主要經(jīng)膽汁、尿液排出。

43.正常情況下,人體內(nèi)鐵的主要存在形式是鐵蛋白;當(dāng)體內(nèi)鐵負(fù)荷過重時(shí),以

含鐵血黃素形式貯存。

44.鐵吸收率的正確范圍是10%~35%o

45.骨髓細(xì)胞核質(zhì)發(fā)育不平衡的是:①缺鐵性貧血(核老質(zhì)幼)②巨幼細(xì)胞性貧

血(核幼質(zhì)老)。

46.氟化高鐵血紅蛋白吸收峰在540nm處。

47.成年男性貧血標(biāo)準(zhǔn)是Hb<120g/L,Hct<41%

48.根據(jù)Hb濃度確定貧血:重度為30~60g/L,極重度為小于等于30g/L,常合并

貧血性心臟病。

49.缺鐵性貧血的細(xì)胞外鐵陰性,細(xì)胞內(nèi)鐵明顯減少,鐵粒幼細(xì)胞小于15%,轉(zhuǎn)

鐵蛋白飽和度<15%,紅細(xì)胞游離原口卜咻大于0.9Pmol/Lo

50.缺鐵性貧血缺鐵早期Hb、網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)量、鐵吸收率、總鐵結(jié)

合力及鐵幼粒細(xì)胞均正常。

51.早期缺鐵性貧血時(shí),有貧血,血清鐵減低,轉(zhuǎn)鐵蛋白飽和度降低,此時(shí)可見

正細(xì)胞正色素性貧血。

52.缺鐵性貧血時(shí)骨髓象顯示紅系明顯增生,以中幼紅細(xì)胞和晚幼紅細(xì)胞為主。

而鐵粒幼紅細(xì)胞骨髓象中中幼紅細(xì)胞為主。

53.中幼和晚幼紅細(xì)胞的胞質(zhì)中出現(xiàn)鐵顆粒成為鐵粒幼紅細(xì)胞,成熟紅細(xì)胞中出

現(xiàn)鐵顆粒稱為鐵粒紅細(xì)胞。

54.由于造血原料利用障礙導(dǎo)致的貧血是鐵粒幼細(xì)胞性貧血。

55.鐵粒幼細(xì)胞性貧血可以出現(xiàn)轉(zhuǎn)鐵蛋白飽和度增高。

56.鐵粒幼細(xì)胞性貧血時(shí)環(huán)形鐵粒幼紅細(xì)胞水平常占幼紅細(xì)胞15%以上。

57.葉酸缺乏癥血象中粒細(xì)胞出現(xiàn)巨型桿狀核和核分頁過多,5葉者大于5%或6

葉者大于1%。

58.葉酸經(jīng)葉酸還原酶作用變?yōu)樗臍淙~酸,它具有轉(zhuǎn)運(yùn)“一碳團(tuán)”如甲基、甲酰

基等作用。

59.血液透析可導(dǎo)致葉酸丟失過多。

60.急性再障貧血的骨髓增生程度多為增生減低,三系血細(xì)胞減少。

61.再障時(shí),骨髓病理組織檢驗(yàn)顯示造血組織與脂肪組織容積比降低,小于0.34。

62.再生障礙危象表現(xiàn)為慢性溶血者突發(fā)全血細(xì)胞和網(wǎng)織紅細(xì)胞減少。

63.B珠蛋白生成障礙性貧血又稱B地中海貧血,臨床分為輕型(雜合子型)、

微型、中間型、重型等。

64.珠蛋白生成障礙性貧血時(shí)常見靶形紅細(xì)胞增多。

65.獲得性物理因素所致溶血性貧血有微血管性溶血性貧血、心源性溶血性貧血、

行軍性血紅旦白尿癥。

66.溶血性貧血外周血涂片中常見有核和嗜多色性紅細(xì)胞。

67.溶血性貧血急性發(fā)作期,外周血網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)一般是2%~4%。

68.紅細(xì)胞壽命(51CrTl/2)在溶血存在時(shí)應(yīng)<25天。

69.紅細(xì)胞葡萄糖6-磷酸脫氫酶缺陷癥分五型:蠶豆病、藥物致溶血性貧血、感

染誘發(fā)溶血、新生兒高膽紅素血癥、遺傳性非球形紅細(xì)胞溶血性貧血。

70.遺傳性口形紅細(xì)胞增多癥分為水腫細(xì)胞型、干細(xì)胞型,其依據(jù)是紅細(xì)胞內(nèi)

Na、K離子濃度。

71.細(xì)胞鐮變?cè)囼?yàn)(HbS病)所用試劑是偏重亞硫酸(Na2s205)。

72.PHN的篩選/排除試驗(yàn)是Rous試驗(yàn),確診試驗(yàn)是Ham試驗(yàn)(酸化血清溶血試

驗(yàn))。

73.篩選/排除試驗(yàn)選用PK熒光斑點(diǎn)試驗(yàn),可能的溶血性貧血是啥咤-5'-核甘酸

缺乏癥;用熱變性試驗(yàn)的是血紅蛋白病;Heinz小體生成試驗(yàn)用于丙酮酸激酶缺

乏癥或血紅蛋白癥;Ret試驗(yàn)用于微血管病性溶血性貧血;Coombs試驗(yàn)用于急

發(fā)性溶血性輸血反應(yīng)。

74.冷凝集素綜合癥的抗體型別為IgM。

75.與M0型急性髓細(xì)胞性白血病在形態(tài)上類似的是ALL-L2,都為形態(tài)較小,也

可較大,胞質(zhì)少,無顆粒和Auer等。

76.Phi。小體染色可輔助鑒別M2a與ALL。

77.M3有短而粗的Auer小體,數(shù)條或數(shù)十條呈束狀交叉排列。

78.AML-M3最容易并發(fā)DIC。

79.M4EO嗜酸性粒細(xì)胞增多。

80.M5a骨髓原單核細(xì)胞280%;M5b原始單核細(xì)胞<80%,原始和幼稚單核細(xì)

胞>30%。

81.M6血涂片及骨髓中幼紅細(xì)胞常見的形態(tài)學(xué)變異是巨幼樣改變。

82.M7未成熟型主要增多的巨核細(xì)胞是原始巨核細(xì)胞。

83.特有的遺傳學(xué)標(biāo)記:M2:t(8,21)(q22,q22);M3:t(15,17)(q21,

ql2)及PML-RAPa融合蛋白;M4E0:Inv(16)(pl3,q22);慢粒:t(9,22)

(q34,qll)及Ph染色體。;B細(xì)胞慢性淋巴細(xì)胞白血?。簍(11,14)(ql3,

q32);T細(xì)胞慢性淋巴細(xì)胞白血?。篿nv(14)(qll,q32);多毛細(xì)胞白血病:del

(14)(q22,q23)o

84.CML常出現(xiàn)的融合基因是BCR-ABL;AML-M3常出現(xiàn)的融合基因是PML-RAPa;

AML-M2b常出現(xiàn)的融合基因是AML-MTG8。

85.AML-M3敏感免疫學(xué)標(biāo)志:CD33;AML-M5敏感免疫學(xué)標(biāo)志:CD14;AML-M7

敏感免疫學(xué)標(biāo)志:CD41o

86.AML-M1POX染色原始細(xì)胞陽性率正確的是>3%。

87.AML-M2原始粒細(xì)胞PAS染色結(jié)果應(yīng)為陰性反應(yīng)。

88.粒-單核細(xì)胞共有的標(biāo)記是CDllb、CD31~CD36>CD64和CD68。

89.M6型白血病的紅血病期以原始紅細(xì)胞和早幼紅細(xì)胞為主;紅白血病期血象以

中幼紅細(xì)胞和晚幼紅細(xì)胞為主。

90.紅白血病期骨髓增生極度活躍或明顯活躍,紅系和粒系(或單核系)細(xì)胞呈

惡性增生。

91.巨核細(xì)胞白血病時(shí)血片中可見小巨核細(xì)胞,形態(tài)類似于淋巴細(xì)胞。

92.慢性粒細(xì)胞白血病起源于克隆性增殖性疾患的造血干細(xì)胞,其白細(xì)胞總數(shù)顯

著增高。

93.慢性粒細(xì)胞一一慢性期:原始細(xì)胞W10%;加速期原始細(xì)胞210%;急變期

外周血原始粒+早幼粒230%,骨髓中原始粒+早幼粒250%o

94.絕大多數(shù)的慢性淋巴細(xì)胞白血病是B細(xì)胞型(95%)。

95.慢性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞化學(xué)染色特點(diǎn):PAS染色陽性。

96.B細(xì)胞特異性抗原有CD19、CD20、CD2B、CD5、HLA-DR、Smlg等,而T細(xì)胞

慢性淋巴細(xì)胞性白血病主要表面標(biāo)記是CD2、CD3、CD4、CD6、CD8,而CD5陰

性。

97.CD7為出現(xiàn)早、且貫穿表達(dá)整個(gè)T細(xì)胞分化發(fā)育過程中;CD19是鑒別全B細(xì)

胞敏感又特異的指標(biāo);CD10是診斷common-ALL必須標(biāo)記;CyCD22檢測(cè)早期B

細(xì)胞來源的急性白血病特異而有敏感;CD14是單核細(xì)胞所特有的。

98.漿細(xì)胞白血病時(shí),外周血白細(xì)胞分類中的漿細(xì)胞應(yīng)該大于20%,這是與多發(fā)

性骨髓瘤鑒別的主要區(qū)別。

99.關(guān)于MDS的FAB分類中,被WHO刪除的類型是RAEB-T。

100.MDS時(shí)髓系細(xì)胞表面抗原及淋巴細(xì)胞亞群分布異常,CD3、CD4細(xì)胞減少,

CD4/CD8比值減低或倒置。

101.MDS骨髓活檢顯示,聚集成簇并位于骨髓中央的細(xì)胞是原始粒細(xì)胞和早幼

粒細(xì)胞。

102.有助于早期診斷MDS的巨核細(xì)胞類型是小巨核細(xì)胞。

103.骨髓異

常增生綜合癥其骨髓中鐵粒幼紅細(xì)胞常增多。

104.霍奇金病的骨髓組織活檢可將R-S細(xì)胞陽性率提高至9%~22%o

105.非霍奇金淋巴瘤的主要診斷依據(jù)是病理學(xué)檢查。

106.漿細(xì)胞病包括多發(fā)骨髓瘤、原發(fā)性巨球蛋白血癥等,不包括漿細(xì)胞白血病。

原發(fā)性巨球蛋白血癥大量增多的單克隆巨球蛋白是

107.lgMo

108.漿細(xì)胞白血病骨髓象:漿細(xì)胞成熟程度和形態(tài)極不一致,形態(tài)較小,核仁

明顯,核染色質(zhì)致密。

109.48%~60的患者骨髓穿刺呈“干抽”樣見于多毛細(xì)胞白血病。

110.證實(shí)多毛細(xì)胞白血病最可靠和有效的手段是掃描電鏡超微結(jié)構(gòu)檢查。

111.骨髓增生性疾病包括真性紅細(xì)胞增多癥、原發(fā)性血小板增多癥和骨髓纖維

化等,不包括骨髓增生異常綜合癥。

112.真性紅細(xì)胞增多癥診斷時(shí)血紅蛋白濃度應(yīng)達(dá)到男性>180g/L,女性>170g/L。

113.骨髓纖維化外周血圖片中常見的異形紅細(xì)胞是淚滴狀紅細(xì)胞。

114.多發(fā)性骨髓瘤血象中,紅細(xì)胞常見“緡線狀”排列。

115.真性紅細(xì)胞增多癥的骨髓象特點(diǎn):偶有“干抽”現(xiàn)象,有核細(xì)胞增生活躍,

巨核細(xì)胞增多,各系各階段比值及形態(tài)大致正常,骨髓鐵減少或消失。

116.惡性組織細(xì)胞病最為突出和首發(fā)的癥狀為發(fā)熱。

117.粒細(xì)胞缺乏癥的骨髓象表現(xiàn)為:成熟階段中性粒細(xì)胞明顯減低和缺乏,但

可見原始和早幼粒細(xì)胞,表明粒細(xì)胞系成熟障礙。

118.類白血病患者的骨髓象顯示為增生活躍。

119.傳染性單核細(xì)胞增多癥血液中存在嗜異性抗體,屬于IgM,2~3周滴度達(dá)到

最高。骨髓象有核細(xì)胞增生程度屬于增生活躍。

120.血小板a顆粒中含有vWF;致密顆粒中含有ADP;溶酶體顆粒中含有膠原

酶。

121.血小板a顆粒特有的蛋白是血小板球蛋白(B-TG)和血小板第四因子

(PF4)o

122.屬于血小板活化標(biāo)志物的指標(biāo)是5-羥色胺。

123.纖溶酶原活性增高表明纖溶系統(tǒng)活性減低,見于血栓前狀態(tài)和血栓性疾病。

124.a2纖溶酶主要功能是與纖溶酶結(jié)合形成等分子復(fù)合物,從而滅活纖溶酶,

減少引起纖溶亢進(jìn),表現(xiàn)為出血傾向,呈導(dǎo)致DIC。

125.D-二聚體可鑒別原發(fā)性纖溶癥和繼發(fā)性纖溶癥,它是后者的特有代謝物。

126.D-二聚體是交聯(lián)纖維蛋白的特異性降解產(chǎn)物,只有在血栓形成后才會(huì)在血漿

中增高。D-二聚體增高多見于深靜脈血栓形成、肺栓塞、DIC等繼發(fā)纖溶亢進(jìn),

是診斷血栓形成的重要分子標(biāo)志物。

127.血漿D-二聚體增高的病理?xiàng)l件是纖維蛋白形成和繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)。

128.PAI-1的主要作用是t-PA和u-PA結(jié)合形成不穩(wěn)定的復(fù)合物,使其失去活性。

129.血友病患者篩選試驗(yàn)中發(fā)生延長的凝血時(shí)間是APTTo

130.PT為外源凝血途徑的篩選試

驗(yàn);APTT是內(nèi)源凝血途徑的篩選試驗(yàn);TT檢測(cè)的是低(無)纖維蛋白原血癥或

外周血中肝素及肝素樣抗凝物質(zhì);BT反映的是毛細(xì)血管和血小板的相互作用;

診斷FVLeiden突變采用的試驗(yàn)是活化蛋白C抵抗(APCR)試驗(yàn)。

131.接觸凝血因子通過接觸反應(yīng)啟動(dòng)內(nèi)源凝血途徑。

132.在體內(nèi),最不穩(wěn)定的凝血因子是FV。

133.血管壁單層內(nèi)皮細(xì)胞中含有各種細(xì)胞器,其中特有的細(xì)胞器是棒管狀小體。

134.低分子量肝素抗凝機(jī)制特點(diǎn):對(duì)FXa的抑制活性相對(duì)增強(qiáng),而對(duì)口la的

抑制活性相對(duì)減弱。

135.FXa活性用于監(jiān)測(cè)低相對(duì)分子量肝素,活性維持在0.5~4.0個(gè)抗因子Xa/ml。

136.外源凝血途徑特點(diǎn):組織因子(TF)進(jìn)入血液,活化FVD;內(nèi)源凝血途徑:

所需凝血因子全部源自血液,主要涉及FXD、FXI、FIX、FVIIo

137.依賴維生素K的凝血因子:口I、FVD、FIX、FX;接觸凝血因子:FXfl,F

XI;對(duì)凝血酶敏感的凝血因子:Fl、FV、FWI、FXIIIo

138.抗凝血酶可與FXa、FXIIa、FXIa、FlXa結(jié)合而這些酶失去活性。

139.蛋白C系統(tǒng)包括蛋白C、蛋白S、血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)及活化蛋白C抑制

物。

140.血漿總蛋白S包括游離蛋白S以及C4Bp-PSo

141.纖溶酶原抑制劑(PAI)可t-PA以1:1比例結(jié)合,使其失活;a2-AP與PL

以1:1結(jié)合抑制PL活性。

142.采用凝血酶作用于待測(cè)血漿中的纖維蛋白原的方法是Clauss法(凝固法)。

143.凝血酶時(shí)間觀察的是加入“標(biāo)準(zhǔn)化”凝血酶溶液后形成纖維蛋白絲所需時(shí)

間。

144.一期止血缺陷篩查試驗(yàn)包括出血時(shí)間和束臂試驗(yàn);二期止血缺陷篩查試驗(yàn)

包括凝血酶原時(shí)間和活化部分凝血活酶時(shí)間;血管壁檢查包括血管性血友病因子

和血漿6-酮-前列腺素Fla;抗凝物質(zhì)測(cè)定包括抗凝血酶、蛋白C、蛋白S等。

145.抗凝血酶缺乏可導(dǎo)致靜脈血栓;繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)發(fā)生于血栓形成之后;繼

發(fā)性低凝狀態(tài)多發(fā)生于DIC后期;血管性血友病的發(fā)病原因是由VWF缺陷所致。

146.狼瘡樣抗凝物質(zhì)增多會(huì)導(dǎo)致血栓形成。

147.如血漿中存在狼瘡抗凝物質(zhì),則應(yīng)延長的血漿凝固時(shí)間是APTT。

148.抗凝治療中,如懷疑肝素抵抗,可測(cè)定抗凝血酶。

149.原發(fā)性纖溶亢進(jìn)癥是指纖溶酶活性增強(qiáng),降解纖維蛋白原。

150.纖維蛋白原減低見于肝硬化,因其由肝細(xì)胞合成。

151.采用發(fā)色底物法測(cè)定血漿纖維酶原活性時(shí),需向受檢血漿中加入鏈激酶和

發(fā)色底物,生成對(duì)硝基苯胺(PNA)。

152.血清纖維蛋白降解產(chǎn)物膠乳凝集法中,血清FDP和乳膠顆粒上的抗體結(jié)合

所需濃度為25Pg/ml。

153.DIC診斷中最為敏感的指標(biāo)是血清FDP測(cè)定。

154.抗凝治療中,監(jiān)測(cè)普通肝素的首選試驗(yàn)指標(biāo)是APTT。

155.PT是檢測(cè)口服抗凝藥的首選指標(biāo),應(yīng)用口服抗凝藥時(shí)使PT維持在正常對(duì)照

值的1.5~2.0倍,或國際標(biāo)準(zhǔn)化比值(INR)在2.0~3.0為宜。

156.血漿魚精蛋白副凝固試驗(yàn)陰性見于DIC晚期。

157.臨床上有出血而APTT和PT正常時(shí),應(yīng)首先懷疑遺傳性因子VIII缺乏癥。

158.在使用大劑量肝素時(shí),既可獲得最佳抗凝療效又無嚴(yán)重的出血風(fēng)險(xiǎn)的APTT

測(cè)定值范圍應(yīng)是較正常對(duì)照值延長1.5~2.5倍。

159.血友病A、B均為性連鎖隱性遺傳病;而血管性血友病除UN亞型和III為常

染色體隱形遺傳病外,其余均為常染色體顯性遺傳。

160.血友病患者篩選試驗(yàn)中發(fā)生延長的凝血時(shí)間是APTTo

161.抗栓酶治療的監(jiān)測(cè)指標(biāo)是纖維蛋白原和血小板。

162.紅色血栓又稱靜脈血栓;白色血栓(灰色血栓)又稱動(dòng)脈血栓。

臨床血液學(xué)和血液學(xué)檢驗(yàn)知識(shí)點(diǎn)

(一)粒細(xì)胞系統(tǒng)

1.原始粒細(xì)胞(myeloblast):10~18um,胞體圓或類圓形,核占細(xì)胞的2/3以

上,居中或略偏位,核染色質(zhì)呈細(xì)顆粒狀排列均勻,核仁2~5個(gè)、較小、清楚;

胞漿量少,染天藍(lán)色,有透明感,無顆粒。

2.早幼粒細(xì)胞(promyelocyte):12~20um,較原粒細(xì)胞大,核染色質(zhì)較原粒細(xì)

胞粗糙,染色質(zhì)顆粒開始有聚集,核仁可見或消失;胞漿染淡藍(lán)色、藍(lán)色或深藍(lán)

色,含大小不等、形態(tài)不一的紫紅色顆粒(即非特異性顆粒)。

3.中幼粒細(xì)胞(myelocyte)

①中性中幼粒(neutrophilicmyelocyte):10~18um,胞核橢圓形或一側(cè)

開始扁平,可有凹陷,其凹陷處約占細(xì)胞的2/3~1/2,核染色質(zhì)聚集呈索塊狀,

核仁隱約可見或消失;胞漿量多,染淡紅或少數(shù)區(qū)域略偏藍(lán),含大小一致的紅色

顆粒、即特異性顆粒(致少有一個(gè)區(qū)域)。

②嗜酸性中幼粒(eosinophilic):15~20um:核與中性中幼粒相似;胞漿內(nèi)

充滿粗大而均勻、排列緊密的橘紅色特異性嗜酸性顆粒。

③嗜堿性中幼粒(basphilic):10~15um,核圓形或橢圓形、但常常輪廓不

清,核染色質(zhì)較模糊;胞漿內(nèi)及核上含有排列零亂、大小不等數(shù)量不多的紫黑色

嗜堿性顆粒。

4、晚幼粒細(xì)胞(metamyelocyte)

①中性晚幼粒(neutropilicmetamyelocyte):10~16um,核明顯凹陷呈腎形,

馬蹄形,半月形,但其核凹陷程度不超過假設(shè)直徑的一半,核染色質(zhì)粗糙,排列

更緊密,無核仁;胞漿量多,淺紅色,充滿中性特異性顆粒。

②嗜酸性晚幼粒(eosinophilicmetamyelocyte):10~16um,核形及結(jié)構(gòu)

與中性晚幼粒相似;胞漿內(nèi)充滿橘紅色的、大小一致的嗜酸性特異性顆粒。

③嗜堿性晚幼粒(basophilicmetamyelocyte):10~14um,核固縮呈腎形,

輪廓模糊;胞漿內(nèi)及核上分布有少量嗜堿性非特異顆粒。

5.桿狀核粒細(xì)胞(stabgranulocyte)

①中性桿狀核粒細(xì)胞(neutrophilicstabgranulocyte):10~15um,核凹

陷程度超過假設(shè)直徑的一半,核徑最窄處大于最寬處1/3以上,呈帶狀彎曲,核

染色質(zhì)粗糙呈塊狀;胞漿充滿中性顆粒。

②嗜酸性桿狀核粒細(xì)胞(eosinophilicstabgranulocyte):11~16um,

核與中性桿狀相似;漿內(nèi)充滿嗜酸性顆粒。

③嗜堿性桿狀核粒細(xì)胞(basophilicstabgranulocyte):10~12um,核

呈模糊桿狀;胞漿內(nèi)及核上分布有少量嗜堿性顆粒。

6.分葉核粒細(xì)胞(segmentedgranulocyte)

①中性分葉核粒細(xì)胞(neutrophilicsegmentedgranulocyte):10~14u

m,核呈分葉狀,葉與葉之間有細(xì)絲相連或全斷開,常分2~5葉,核染色質(zhì)已濃

集呈粗的小塊狀,染深紫紅色;胞漿豐富,內(nèi)含淡紅色均勻細(xì)小顆粒。

②嗜酸性分葉核粒細(xì)胞((eosinophHicsegmentedgranulocyte):11~16

um,核多分2葉,核染色質(zhì)結(jié)構(gòu)與中性分葉核相似;胞漿內(nèi)充滿粗大均勻一致

的橘紅色嗜酸性顆粒。

③嗜堿性分葉核粒細(xì)胞(basophilicsegmentedgranulocyte):10~12u

m,核可分3~4葉或分葉不明顯;胞漿分布有少量大小不等的紫黑色嗜堿性顆粒。

(二)紅細(xì)胞系統(tǒng)

①原始紅細(xì)胞(pronormoblast):15~20um,呈圓形或橢圓形,邊緣常呈鈍

角狀或瘤狀突起,核呈圓形,居中或偏位,約占細(xì)胞體的4/5左右,核染色質(zhì)呈

顆粒狀較原粒細(xì)胞粗而密集,核仁廠3個(gè)不等,且大小不一,形狀不規(guī)則,呈淺

藍(lán)色或暗藍(lán)色;胞漿量少,染深藍(lán)色、不透明,有油畫藍(lán)感,無顆粒。

②早幼紅細(xì)胞(eariynormoblast):10~18um,核圓形或橢圓形,約占細(xì)胞

的2/3以上,核染色質(zhì)顆粒有濃集現(xiàn)象,較原紅細(xì)胞粗糙,核仁模糊或消失;胞

漿量增多,染不透明藍(lán)色或深藍(lán)色,邊緣可見瘤狀突起。

③中幼紅細(xì)胞(polychromaticnormoblast):8~15um,核圓形,約占細(xì)

胞的1/2,核染色質(zhì)凝聚呈條索狀或塊狀,中間有明顯空隙,如壓碎餅干樣或打

碎墨硯感,無核仁;胞漿量相對(duì)較多,漿內(nèi)由于已合成不等量的血紅蛋白,可染

呈不同程度的嗜多色性。

④晚幼紅細(xì)胞(orthochromaticnormoblast):7~10um,核圓形居中或

偏位,占細(xì)胞的1/2以下,核染色質(zhì)致密聚集成結(jié)構(gòu)不清的紫黑色團(tuán)塊狀,無核

仁;胞漿量較多,因已合成大量血紅蛋白,常染淺灰紅色或淺紅色。

⑤網(wǎng)織紅細(xì)胞(reticulocyte):7.2~7.5um,為晚幼紅細(xì)胞剛脫核而成,是尚

未完全成熟的紅細(xì)胞,瑞氏染色為多嗜性紅細(xì)胞,用煌焦油藍(lán)活體染色后在細(xì)胞

內(nèi)可見藍(lán)色細(xì)顆?;虺示€狀或網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。

⑥紅細(xì)胞(erythrocyte):正常紅細(xì)胞平均為7.2um,呈雙面微凹之圓盤狀,

中央較薄,染色淺,邊緣較厚,染色深,呈粉紅色,無核。

(三)單核細(xì)胞系統(tǒng)

①原始單核細(xì)胞(monoblast):15~20“m,胞體圓形或橢圓形,核較大圓

形或類圓形,核染色質(zhì)纖細(xì),呈疏松網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),核仁1~3個(gè);胞漿量較其它原始

細(xì)胞豐富,灰藍(lán)色,不透明,邊緣不規(guī)則或有偽足狀突起。

②幼稚單核細(xì)胞(promonocyte):15~25um,核圓形或不規(guī)則形,易見扭

曲、凹陷、切跡等改變,核染色質(zhì)較原始單核細(xì)胞粗糙疏松,核仁可有可無;胞

漿淺灰藍(lán)色,不透明,可見細(xì)小顆粒。

③單核細(xì)胞(monocyte):12~20um,核形態(tài)常不規(guī)則,有腎形,馬蹄形,

“S”形,分葉狀,筆架形等,核染色質(zhì)疏松呈絲網(wǎng)狀或條紋狀結(jié)構(gòu),無核仁;

胞漿量較多,染不透明的灰藍(lán)色,可見細(xì)小紅色顆粒。

(四)淋巴細(xì)胞系統(tǒng)

1.原始淋巴細(xì)胞(lymphoblast):10~18um,胞體圓形或橢圓形,核呈圓形或

橢圓形,核染色質(zhì)呈細(xì)顆粒狀,核仁1~2個(gè);胞漿量少,呈淡藍(lán)色,透明,無顆

粒。

2.幼稚淋巴細(xì)胞(prolymphocyte):10~16um,核圓形或橢圓形,核染色質(zhì)仍

較細(xì)致,核仁可有可無;胞漿量較少,淡藍(lán)色,偶見有少許紅色顆粒。

3.淋巴細(xì)胞(lymphocyte)

①大淋巴細(xì)胞:12~15um,核圓形稍偏于一側(cè),核染色質(zhì)排列緊密均勻,

深紫紅色;胞漿量相對(duì)較多,染透明淡藍(lán)色,可有少量大小不等的紅色嗜天青顆

粒。

②小淋巴細(xì)胞:6~9um,核相對(duì)較小,呈圓形,核染色質(zhì)緊密呈大塊狀,

結(jié)構(gòu)不清楚,染深紫紅色;胞漿極少,似裸核樣,如可見則呈淡藍(lán)色,一般無顆

粒。

(五)漿細(xì)胞系統(tǒng)

1.原始漿細(xì)胞(plasmablast):14~18um,胞體圓形或橢圓形,核圓形,占細(xì)

胞的2/3以上,居中或偏位,核染色質(zhì)呈粗顆粒網(wǎng)狀,染紫紅色,核仁2~5個(gè);

胞漿量多,染深藍(lán)色,不透明,無顆粒。

2.幼稚漿細(xì)胞(proplasmacyte):12~16um,胞體多呈橢圓形,核圓形或橢圓

形,占細(xì)胞的1/2,居中或偏位,核染色質(zhì)較原漿細(xì)胞粗糙緊密,開始聚集,染

深紫紅色,核仁模糊或消失;胞漿量多,深藍(lán)色或紫藍(lán)色或呈藍(lán)色火焰狀,不透

明,有時(shí)可有空泡及少數(shù)嗜天青顆粒。

3.漿細(xì)胞(plasmacyte):8-15um,核明顯縮小,圓形,占細(xì)胞的1/3以下,

偏于一側(cè),核染色質(zhì)濃集成塊狀,常排列呈車輪狀,無核仁;胞漿量豐富,染藍(lán)

色或紫藍(lán)色,不透明,有時(shí)有泡沫感,漿內(nèi)可含有小空泡及/或少量嗜天青顆粒,

偶見胞漿中有較大的紅色或淡藍(lán)色透明的球狀物,稱Russell小體,是球蛋白聚

集而成。

(六)巨核細(xì)胞系統(tǒng)

1.原始巨核細(xì)胞(megakaryoblast):15~30um,胞體圓形或不規(guī)則形,核大,

呈圓形或不規(guī)則形,核染色質(zhì)較其他原始細(xì)胞粗,呈粗網(wǎng)狀或細(xì)條索狀結(jié)構(gòu),染

深紫紅色,核仁2~3個(gè),淡藍(lán)色,不清晰,不規(guī)則;胞漿量較少,不均勻,不規(guī)

則,染深藍(lán)色,無顆粒。

2.幼稚巨核細(xì)胞(promegkaryocyte):30~50um,外形不規(guī)則,核亦不規(guī)則,

有重疊,可扭轉(zhuǎn)呈腎形或分葉狀,核染色質(zhì)呈粗顆粒或粗網(wǎng)狀或局部濃集呈小塊

狀,排列緊密,核仁可有可無;胞漿量增多,常有偽足狀突出,染藍(lán)色或淺藍(lán)色,

在近核處出現(xiàn)或多或少的很細(xì)小紅色嗜天青顆粒。

3.巨核細(xì)胞(megakarycyte)

①顆粒型巨核細(xì)胞:40~70um,可達(dá)lOOum,外形不規(guī)則,核較大,形態(tài)

不規(guī)則,多呈分葉狀,核染色質(zhì)較粗糙,排列緊密呈團(tuán)塊狀,紫紅色,無核仁;

胞漿量豐富,染粉紅色,夾雜有藍(lán)色,內(nèi)含大量細(xì)小紅色顆粒,常聚集呈簇,但

無血小板形成。

②產(chǎn)板型巨核細(xì)胞:40~70Pm,可達(dá)lOOum,形態(tài)大致與顆粒型巨核細(xì)胞

相似,唯有不同的一點(diǎn)是胞漿內(nèi)充滿細(xì)小的紅色顆粒及數(shù)量不等的血小板。

③裸核型巨核細(xì)胞:是產(chǎn)板型巨核細(xì)胞的胞漿解體后,釋放出大量血小板,

僅剩一個(gè)細(xì)胞核,稱之為裸核。

4.血小板(platelet):胞體很小,2~4um,呈圓形、橢圓形,逗點(diǎn)狀,不規(guī)則

形,中心部位有細(xì)小紫紅色顆粒,無細(xì)胞核,涂片上血小板常三五成群堆集出現(xiàn)。

(七)其他細(xì)胞

1.組織嗜細(xì)胞(tissuebasophiliccell):又稱肥大細(xì)胞(mastcell),12~20

um,呈圓形,橢圓形,梭形,三角形等,核小,呈圓形或橢圓形,居中或偏位,

核染色質(zhì)模糊,結(jié)構(gòu)不清;胞漿充滿圓形、大小一致的深紫色嗜堿性顆粒。

2.內(nèi)皮細(xì)胞(endothelialcell):8~22um,形態(tài)極不規(guī)則,多呈梭形,核呈圓

形或橢圓形,核染色質(zhì)呈網(wǎng)狀,多無核仁;胞漿量少,染淡藍(lán)色,邊緣常模糊不

清,常沿核長軸的兩側(cè)或一端呈尾狀伸出,可有細(xì)小紫紅色顆粒。

3.纖維細(xì)胞(fibrocyte):胞體較大,不規(guī)則,多為長尾形,核圓形或橢圓形(1~

數(shù)個(gè)),核染色質(zhì)呈或細(xì)或粗的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),核仁1~2個(gè),不清晰,成熟者無核仁;

胞漿豐富,多在細(xì)胞兩端,染淡藍(lán)色,邊界模糊,內(nèi)含纖維網(wǎng)狀物及少許嗜天青

顆粒。

4.成骨細(xì)胞(osteoblast):胞體較大,20~40um,長橢圓形或不規(guī)則形,單個(gè)

或多個(gè)成群分布,核圓形或橢圓形,常偏于細(xì)胞一側(cè),核染色質(zhì)排列呈粗網(wǎng)狀,

染深紫紅色,核仁可有1~3個(gè);胞漿豐富,染深藍(lán)色或灰藍(lán)色,邊緣常呈模糊云

霧狀。

5.破骨細(xì)胞(osteoclast):胞體巨大,60~100um,形態(tài)不規(guī)則,頗象巨核細(xì)胞,

核小、數(shù)量較多,3~100個(gè)不等,圓形或橢圓形,大小大致相等,邊緣清晰,彼

此獨(dú)立,無核絲相連,隨意排列,核染色質(zhì)呈粗網(wǎng)狀,幾乎每個(gè)核都有一個(gè)藍(lán)色

核仁;胞漿豐富,染淡藍(lán)色或淺紅色,含大小不等的紫紅細(xì)小顆粒。

6.脂肪細(xì)胞(fattycell):30~50um,胞體圓形或橢圓形,核較小,形狀不規(guī)

則,常被擠壓在一邊,核染色質(zhì)呈細(xì)致密網(wǎng)狀,無核仁;胞漿內(nèi)充滿大量空泡。

7.組織細(xì)胞(histiocyte):胞體較大,20~50um,形態(tài)多樣,一般呈圓形或橢

圓形及不規(guī)則形,核可有圓形,橢圓形,腎形,核染色質(zhì)呈疏松網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),核仁

2~4個(gè)不等;胞漿多少不一,染色也常不一致,有深藍(lán),淡藍(lán),灰藍(lán)色等,邊緣

多不規(guī)則或不清楚,無顆粒或含有少量或細(xì)或粗或粗細(xì)不一的嗜天青顆粒,可有

空泡或含異物等。

8.吞噬細(xì)胞(phagocyte):不是一種獨(dú)立的細(xì)胞,而是胞漿內(nèi)含有吞噬物質(zhì)的

一組細(xì)胞的總稱。具有吞噬功能的細(xì)胞有單核細(xì)胞、組織細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞,

纖維細(xì)胞等。吞噬細(xì)胞的形態(tài)極不一致,由吞噬物的類型及吞噬物的多少而定。

其胞核圓形、橢圓形或不規(guī)則形,常一個(gè)核,有時(shí)為雙核,核常被擠壓至一側(cè),

核染色質(zhì)較疏松,核仁可有可無。胞漿多少不一,淡藍(lán)色或淡紅色,常有空泡,

并有數(shù)量不等的吞噬物,吞噬物有空泡、色素、顆粒、有核細(xì)胞、紅細(xì)胞、血小

板、碳核、細(xì)菌等。有時(shí)吞噬細(xì)胞成堆存在。

第二節(jié)異常血細(xì)胞形態(tài)學(xué)(4學(xué)時(shí))

了解:初步認(rèn)識(shí)各種異常血細(xì)胞形態(tài),并畫出每一臺(tái)顯微鏡下的細(xì)胞圖像。

血細(xì)胞形態(tài)在病理情況下,可在胞體、胞核、胞漿等方面發(fā)生異常改變。

(一)粒細(xì)胞系統(tǒng)形態(tài)異常

1.白血病時(shí)粒細(xì)胞改變

①胞體:大小不等、畸形。

②胞漿:Auer小體,顆粒粗大、增多。

Auer小體:是在細(xì)胞漿內(nèi)出現(xiàn)結(jié)構(gòu)均勻一致的紅色細(xì)棒狀小體。產(chǎn)生原因是嗜

天青顆粒融合而成。常見于急性非淋巴細(xì)胞性白血病細(xì)胞漿內(nèi)。

③胞核:畸形、切跡、折疊、凹陷、扭曲、分葉等。如急淋時(shí)核易破碎,核分裂

象增多。

④核漿比:增大、發(fā)育不平衡(M2b)。

⑤核仁:大、數(shù)量增多、亦可不清楚。

2.巨大粒細(xì)胞:可見于中、晚、桿、分階段。常見巨晚幼、巨桿狀。

①形態(tài)特征:與同期相比,胞體大、核大、核染色質(zhì)較同階段細(xì)胞細(xì)致。

②形成原因:核酸代謝障礙。

③常見疾病:巨幼貧、M6、MDS、M2b、抗葉酸類藥物治療后。

3.中性粒細(xì)胞分葉過多:分5葉以上,常見于巨幼貧、嚴(yán)重感染恢復(fù)期。

4.粒細(xì)胞中毒變性改變

①中毒顆粒:胞漿顆粒大小不等、分布不均、染紫黑色或深紫紅色。見于嚴(yán)重感

染、大面積燒傷等。

②空泡:漿或核內(nèi)空泡。見于嚴(yán)重感染。

③杜勒小體(Dohle):藍(lán)斑,在細(xì)胞漿內(nèi)直徑約l~2um的藍(lán)色區(qū)域。見于嚴(yán)重

感染,肝硬化等。

④核變性:核固縮、核腫脹、核碎裂、核溶解。見于嚴(yán)重感染。

(-)紅細(xì)胞系形態(tài)異常

1.巨幼紅細(xì)胞

①形態(tài)特征:與同期細(xì)胞相比,胞體大、核大、核染色質(zhì)細(xì)致、排列疏松“幼核

老漿”。

②產(chǎn)生原因:核酸代謝障礙。

③常見疾病:巨幼貧、M6、MDS、抗葉酸治療后等。

2.低色素性紅細(xì)胞

①形態(tài)特征:與同期細(xì)胞相比,漿量少、嗜堿性、著色偏藍(lán),核染色質(zhì)無明顯異

常改變“幼漿老核”。成熟紅細(xì)胞中心淡染區(qū)明顯擴(kuò)大。

②產(chǎn)生原因:Hb合成障礙(不能說缺鐵)。

③常見疾?。篒DA、Hb病、慢性感染性貧血等。

3.紅細(xì)胞大小不等、形態(tài)不整:見于各種增生性貧血。

4.球形紅細(xì)胞:V6.4um,中心淡染區(qū)明顯縮小或消失。見于遺傳性球形紅細(xì)

胞增多癥。

5.橢圓形紅細(xì)胞:橫徑/長徑<0.78。見于遺傳性橢圓形紅細(xì)胞增多癥。

6.靶形紅細(xì)胞:見于低色素性貧血、地貧等。

7.嗜多色性紅細(xì)胞:成熟紅細(xì)胞染灰藍(lán)色或淺灰色。多表示骨髓造血功能活躍,

多見于溶貧、失血性貧血等。

8.嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞:瑞氏染色后在紅細(xì)胞漿中有藍(lán)黑色細(xì)小顆粒存在。表示

骨髓再生加速。鉛中毒時(shí)多見。

9.裂紅細(xì)胞:即紅細(xì)胞碎片??梢娪谖⒀懿⌒匀茇殹IC及損傷性。

10.紅細(xì)胞中出現(xiàn)異常結(jié)構(gòu)

①豪-周小體(Howoll-Jolly,s):屬核殘余物??梢娪诰抻棕殹⑷茇?、脾切除后、

鉛中毒等。

②卡波環(huán)(Cabot,sring):可見于鉛中毒、巨幼貧等。

(三)淋巴細(xì)胞形態(tài)異常

1.異型淋巴細(xì)胞:分漿細(xì)胞型、單核細(xì)胞、幼稚型??梢娪诔鲅獰帷鲉渭捌?/p>

它病毒感染。

2.原、幼淋巴細(xì)胞:淋巴細(xì)胞白血病、淋巴瘤等。

(四)單核-巨噬細(xì)胞系統(tǒng)形態(tài)異常

1.惡組:多形性、多核異組。

2.急單、類單核細(xì)胞白血病反應(yīng)等。

3.戈謝細(xì)胞(Gaucher):戈謝病。

4.尼曼-皮克細(xì)胞(Niemann-pick):尼曼-皮克病。

(五)巨核細(xì)胞系統(tǒng)形態(tài)異常

1.幼巨產(chǎn)板:ITP。

2.小巨核:大小與成熟淋巴細(xì)胞相似,形態(tài)不規(guī)則,有偽足突起,核染色質(zhì)濃

集,無明核仁。可見于白血病、MDS等。

3.巨大血小板:見于巨大血小板綜合癥。

第二章檢驗(yàn)的基本方法

第一節(jié)制片方法(1學(xué)時(shí))

掌握:制片及染色的基本方法。

了解:染液及緩沖液的配制方法。

一、骨髓制片

1.第一次骨髓穿刺患者,骨髓涂片8張以上或?qū)⑺楣撬枰喝客客?,?/p>

時(shí)涂外周血

片4張。

2.復(fù)查病人,骨髓涂片4張,同時(shí)涂外周血片2張。

二、脫落細(xì)胞制片

1.一般包塊穿刺,涂片1?2張。

2.胸腹水及尿液標(biāo)本,取50ml以上離心(3000r/分)10分鐘,取沉淀物

涂片2張。

3.腦脊液標(biāo)本,將全部送檢物離心(3000r/分)沉淀,取沉淀物涂片1張。

4.痰液標(biāo)本,取可疑部分涂片3?5張。

第二節(jié)血細(xì)胞及脫落細(xì)胞瑞氏-姬姆薩染色(1學(xué)時(shí))

一、試劑

1.瑞氏染色液:稱1克瑞氏染粉,加入1瓶甲醇(分析純,約500ml)中混

勻,室溫放

置3個(gè)月后應(yīng)用或每天混勻1次,放置室溫連續(xù)7天后應(yīng)用o

2.姬姆薩染色液:稱0.5克姬姆薩(吉氏)染粉,加入33ml丙三醇(甘油,分

析純)中混勻,放56℃水浴箱中3小時(shí)以上,中間混勻3?

5次,取出冷確至室溫,再加入33ml甲醇(分析純)中,

混勻即可應(yīng)用。

3.磷酸鹽緩沖液(PH=6.4?6.8):磷酸二氫鉀(無水,分析純)5克

磷酸氫二鈉(含12.出0,分析純)5克

蒸播水10000ml

溶解混勻備用

4.姬姆薩染色液一磷酸鹽緩沖液混合比例:姬姆薩染色液約2?3ml,加磷酸鹽

緩沖液約30?40ml混勻即可應(yīng)用。每天上下午各新鮮配制1

次。

二、染色方法

1.血或骨髓涂片在瑞氏染色液中固定5?8秒鐘。

2.放入姬姆薩染色液一磷酸鹽緩沖液混合液中染色15?20分鐘,慢性粒細(xì)胞

白血病患者

涂片染色30分鐘,取出涼干或用濾紙吸干即作鏡下觀察。

第三、四節(jié)血象及骨髓象檢驗(yàn)分析步驟(2學(xué)時(shí))

掌握:血象檢驗(yàn)結(jié)果及骨髓象檢驗(yàn)結(jié)果的正常值,正常骨髓象的正常形態(tài)特征。

熟悉:常見血液病的臨床表現(xiàn)及血象、骨髓象的形態(tài)學(xué)改變特征。

了解:其他系細(xì)胞的正常形態(tài)及異常形態(tài)。

(一)血象檢驗(yàn)

1.在做骨髓穿刺的同時(shí)須做血象檢驗(yàn)

⑴BRC、RC、WBC、PLT計(jì)數(shù)。

⑵涂片染色觀察。

①紅細(xì)胞形態(tài)有無異常。

②白細(xì)胞形態(tài)有無異常。

③血小板形態(tài)及數(shù)量有無異常。

④有無寄生蟲及其他異常細(xì)胞。

2、作用

⑴提供思路

①一系減少:HbI、WBC及PLT正常一單純貧血。

WBCI、Hb及PLT正常一粒細(xì)胞減少或缺乏。

PLTIHb及WBC正常一ITP。

②二系減少:Hb及PLTlWBC正常一ITP、急白、MDS、巨幼貧。

③三系減少:Hb、PLT及WBC均I-AA、急白、巨幼貧。

⑵提供診斷依據(jù)

①骨髓象相似,血象有區(qū)別

如:球形RBCtiGFf骨髓紅系t、血象有核紅t、球形RBCt。

IDA------------?骨髓紅系t、血象無有核紅、RBC中心淡染區(qū)擴(kuò)大。

②血象相似,骨髓象不同

如:AA------------血象三系I、骨髓巨核細(xì)胞I及無白血病細(xì)胞。

非白血病性白血病血象三系I、骨髓有白血病細(xì)胞。

MA--------------血象三系I,骨髓粒系、紅系、巨核系均有巨幼變。

③血象有明顯變化、骨髓無變化

如:傳單>血象淋巴細(xì)胞t、異淋f(>10%)、骨髓無變化。

傳淋----------血象淋巴細(xì)胞f、異淋I、骨髓無變化。

④骨髓有變化、血象無明顯變化

如:戈謝病------骨髓有戈謝細(xì)胞、血象無明顯變化。

尼曼-皮克病--------?骨髓有尼曼-皮克細(xì)胞、血象無明顯變化。

(-)骨髓象檢查

凡疑有血液系統(tǒng)或并發(fā)血液系統(tǒng)疾病均應(yīng)作骨髓穿刺檢查

1、適應(yīng)癥

①檢查血常規(guī)有問題:血象增高、減少。

⑵臨床體征有不明原因貧血、出血、發(fā)熱、骨痛、肝脾淋巴結(jié)腫大。

2、禁忌癥

①由于凝血因子缺陷引起的出血性疾病,如血友病。

②晚期妊娠作骨穿檢查要慎重。

③小兒及不合作患者不宜作胸骨穿刺術(shù)。

3、標(biāo)本采集:一般由臨床醫(yī)生作。

⑴采集部位:胸骨、脊突、骸骨、脛骨粗隆(2歲以下小兒)。

⑵采集質(zhì)量保證

①無菌、嚴(yán)防感染。

②死亡病例應(yīng)在30分鐘內(nèi)完成。

③量不能多,一般不超過0.2ml,否則導(dǎo)致血?。ɑ煅绊懪卸ㄔ\斷。

④對(duì)某些疾病采取多部位穿刺可提高診斷率。如轉(zhuǎn)移癌、骨髓瘤等在病變或骨痛

部位穿刺其陽性率

較高;如AA多部位穿刺有利確診。

⑶涂片質(zhì)量保證

①推片時(shí)角度太大、太快都使涂片厚,反之則薄。

②先涂血片、后涂骨髓片。

③骨髓抽太多,制片人應(yīng)將剩骨髓液的玻片斜立,用棉花在斜面的底部吸去部分

血液,再行涂片,底片不能丟。

④作好標(biāo)識(shí):姓名、血片(B)、骨髓(M)。

⑤涂片中前3張涂片,對(duì)估計(jì)PLT量較好。

⑷判定骨髓取材滿意的幾項(xiàng)指標(biāo)

①抽吸骨髓時(shí)病人有特殊的痛感。

②骨髓液及涂片均可見骨髓小粒(骨髓渣)和脂肪滴。

③顯微鏡觀察涂片可發(fā)現(xiàn)骨髓特有細(xì)胞。

④含有大量幼粒幼紅細(xì)胞,粒細(xì)胞桿狀核與分葉核的比值大于血片中的比值。

⑸干抽的概念:是指非技術(shù)錯(cuò)誤或穿刺位置不當(dāng)而抽不出骨髓液或只得到少量血

液。其常見疾病有:

①原發(fā)性或繼發(fā)性骨髓纖維化。

②骨髓增生極度活躍,細(xì)胞過于濃集。如:白血病、真紅。

③骨髓增生減低:AAo

④腫瘤骨髓浸潤:惡淋、MM、轉(zhuǎn)移癌等。

4、檢驗(yàn)的方法及步驟

(1)低倍鏡觀察

①取材、涂片、染色情況:采用“良好”、“尚可”、“欠佳”等標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)價(jià)。

②判定骨髓有核細(xì)胞增生程度:有核細(xì)胞與成熟紅細(xì)胞之比,分五級(jí):

增生極度活躍:平均約1:1

增生明顯活躍:平均約1:10

增生活躍:平均約1:20

增生減低:平均約1:50

增生極度減低:平均約1:200

③觀察涂片尾部及邊緣有無大的或成群(團(tuán))的異常細(xì)胞,同時(shí)計(jì)數(shù)全片巨核細(xì)

胞。

(2)油鏡觀察

①選擇部位:在涂片體、尾交界處,選擇細(xì)胞分布比較均勻處。

②有核細(xì)胞分類計(jì)數(shù):可根據(jù)增生程度確定分類總數(shù)

增生減低及極度減低:分100或200個(gè)細(xì)胞。

增生活躍:分200或500個(gè)細(xì)胞。

增生明顯活躍及極度活躍:分500個(gè)細(xì)胞。

③觀察細(xì)胞形態(tài)

粒系:中毒顆粒、空泡、有無巨幼變粒細(xì)胞、Aure小體等。

紅系:幼紅細(xì)胞及成熟紅細(xì)胞有無異常變化。

巨核系:小巨核、幼巨產(chǎn)板、巨大血小板、估計(jì)血小板量。

④注意有無寄生蟲。

⑤判定低倍鏡下觀察到的異常細(xì)胞性質(zhì)。

(3)計(jì)算結(jié)果

①根據(jù)分類結(jié)果計(jì)算出各系統(tǒng)及各階段細(xì)胞的百分率。

②計(jì)算粒紅比值:粒細(xì)胞系總和/紅細(xì)胞系總和。

(4)填寫報(bào)告

①根據(jù)骨髓象分類結(jié)果,按報(bào)告單要求逐項(xiàng)進(jìn)行填寫。

②做好骨髓象所見的形態(tài)特征描述。

(5)骨髓報(bào)告分析及意見

①取材、涂片、染色情況:良好、尚可、欠佳。

②骨髓增生程度,粒:紅=?:?。

③粒系:

④紅系:

⑤淋巴系或單核系:

⑥全片巨核細(xì)胞數(shù),根據(jù)血小板分布估計(jì)其量是多、正常、少。

⑦有無寄生蟲。

⑧血片分類及所見進(jìn)行描述。

⑨寫出診斷意見:根據(jù)血象、骨髓象和細(xì)胞化學(xué)染色所見,結(jié)合臨床資料,提出

具體診斷意見或供參考的意見。診斷意見分為以下幾種:

肯定性診斷:骨髓有特異性變化,臨床表現(xiàn)又典型者,如各種白血病、MA、MM、

轉(zhuǎn)移癌、戈謝病、尼曼-皮克病等。

支持性診斷:血象、骨髓象有形態(tài)改變,可解釋臨床表現(xiàn),如IDA、AA、溶貧等。

可疑性診斷:骨髓象有部分變化或出現(xiàn)少量異常細(xì)胞,臨床表現(xiàn)又不典型,可能

為某種疾病的早期或前期或不典型病例者,如難治性貧血等,要結(jié)合臨床、作相

應(yīng)的檢查,并動(dòng)態(tài)觀察

其變化。

排除性診斷:如臨床上懷疑ITP的患者,其骨髓中血小板易見(不少),巨核細(xì)

胞無成熟障礙,即可排除ITP的可能性。

形態(tài)學(xué)描寫:骨髓有些改變,但提不出上述性質(zhì)診斷意見,可簡述其形態(tài)學(xué)變化

的主要特點(diǎn),并建議作動(dòng)態(tài)觀察,盡可能提出進(jìn)一步檢查的建議。

⑩填寫報(bào)告日期并簽名。

5、骨髓象檢查的注意事項(xiàng)

①由于細(xì)胞形態(tài)變化多種多樣,故觀察細(xì)胞時(shí)不能根據(jù)某一、二個(gè)特點(diǎn)就輕易作

出肯定性診斷或否定性診斷,要全面觀察細(xì)胞的形態(tài)變化,結(jié)合臨床綜合分析

作出判斷。

②同一病人的骨髓涂片,可因制作涂片不佳(太厚、太?。?、染色不好、選擇分

類或觀察的部位不當(dāng)均易導(dǎo)致判斷錯(cuò)誤。

③觀察細(xì)胞形態(tài)要認(rèn)識(shí)到血細(xì)胞的發(fā)育是一個(gè)連續(xù)不斷的過程,對(duì)各系細(xì)胞劃分

為若干階段是人為劃分的,在實(shí)際觀察中常會(huì)遇到一些細(xì)胞既有上一階段的某

些特征,又有下一階段的某些特點(diǎn),由于血細(xì)胞是向成熟方向發(fā)育,故一般遇

此情況歸入下一階段。

④對(duì)于個(gè)別介于兩系統(tǒng)之間的細(xì)胞難以判斷時(shí),可采用大數(shù)歸類法(即將此類難

以判斷的細(xì)胞歸入細(xì)胞多的細(xì)胞系)。如在紅系較多的骨髓片中,將介于漿細(xì)

胞與幼紅細(xì)胞之間的細(xì)胞歸入紅系細(xì)胞;介于原粒細(xì)胞與原淋巴細(xì)胞之間的細(xì)

胞,一般情況原粒細(xì)胞較原淋巴細(xì)胞易見,故應(yīng)歸入原粒;如為急性淋巴細(xì)胞

白血病的病人,應(yīng)歸入原淋巴細(xì)胞。切忌在急性白血病骨髓象中分出多種原始

細(xì)胞(如原粒、原單、原淋都有)的現(xiàn)象。

⑤急性白血病時(shí),各系統(tǒng)原始細(xì)胞在理論上雖各有特征,但有時(shí)及為相似,很難

鑒別,這時(shí)應(yīng)注意觀察伴隨出現(xiàn)的幼稚細(xì)胞、成熟細(xì)胞,并與其比較,同時(shí)要

結(jié)合細(xì)胞化學(xué)染色、血象細(xì)胞形態(tài)等綜合考慮,推測(cè)原始細(xì)胞的歸屬。

⑥有時(shí)可見到難以識(shí)別的細(xì)胞,可參考涂片上其他細(xì)胞后作出判斷,如仍不能確

定可歸入“分類不明細(xì)胞”,但不宜太多,若有一定數(shù)量,則應(yīng)通過細(xì)胞化學(xué)

染色、集體閱片或會(huì)診等方法弄清類別。

⑦骨髓涂中巨核細(xì)胞減少或血小板減,而外周血象中血小板數(shù)正常時(shí),則往往是

由穿刺凝固或涂片凝固所致。

⑧作骨髓細(xì)胞學(xué)檢查時(shí),應(yīng)同時(shí)作血象細(xì)胞學(xué)檢查,這有助于疾病的診斷及化療

后療效判斷。

(三)判定骨髓計(jì)數(shù)值的高低

根據(jù)骨髓各系統(tǒng)各階段細(xì)胞的計(jì)數(shù)值與其相應(yīng)的X±SD的離散程度進(jìn)行判

斷。

計(jì)數(shù)值:在X±1SD以內(nèi)視為正常

在X—1SD以下視為減低

在X+1SD~2SD之間視為增高

在X+2SD以上視為明顯增高

從第五節(jié)起以下的實(shí)驗(yàn)課均讓學(xué)生自己動(dòng)手做,教師輔導(dǎo)。

第五節(jié)大致正常骨髓象(4學(xué)時(shí))

掌握:血象檢驗(yàn)結(jié)果及骨髓象檢驗(yàn)結(jié)果的正常值,骨髓各系統(tǒng)各階段細(xì)胞的正常

形態(tài)特征,正常骨髓象報(bào)告的書寫方法。

熟悉:其他系細(xì)胞的正常形態(tài)。

一般符合列情況者,可視為大致正常骨髓象。

1.骨髓有核細(xì)胞增生活躍。

2.粒紅比值:2~4:lo

3.各系統(tǒng)各階段細(xì)胞比值在正常范圍,形態(tài)無明顯異常。

①粒系:約占40~60%,其中原粒V2%,早幼粒V5%,中性中幼粒8%~12%,中

性晚幼粒10%~15%,中性桿狀核15%~20%,中性分葉核12%~20%,且桿狀〉

分葉,嗜酸<5%,嗜堿VI%。

②紅系:約占20%~25%,原紅VI%,早幼紅<5%,以中、晚幼紅細(xì)胞為主、各

約占10%,形態(tài)無異常。

③淋巴細(xì)胞系:約占15~25%,均為成熟淋巴細(xì)胞,原幼淋巴細(xì)胞小兒偶見。

④單核及漿細(xì)胞系:各<4%。無原幼單及原幼漿細(xì)胞。

⑤巨核系:通常在1.5義3cm的涂片膜上,可見7~35個(gè)巨核細(xì)胞。其中原巨0或

罕見,幼巨0~5%,顆粒巨10~27%,產(chǎn)板巨44%~60%,裸核0~30%。血小板

易見,呈堆存在。

⑥其它細(xì)胞:可見少量非造血細(xì)胞,如組織細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、肥大細(xì)胞、破骨細(xì)

胞、成骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞等。

⑦核分裂象少。

⑧無異常細(xì)胞及寄生蟲。

⑨各系細(xì)胞形態(tài)正常。

第六節(jié)臨床血液生化和血細(xì)胞化學(xué)

一、細(xì)胞化學(xué)染色(4學(xué)時(shí))

掌握:NAP染色、鐵粒染色、POX染色方法、結(jié)果判定、正常值及臨床意義。

熟悉:NAP染色、鐵粒染色、POX染色方法的試劑配制。

了解:NAP染色、鐵粒染色、POX染色方法的。

(一)堿性磷酸酶染色(NAP)

------鈣鉆法

1.原理細(xì)胞內(nèi)的堿性磷酸酶在PH9.2~9.8時(shí),將底物B-甘油磷酸鈉水解,產(chǎn)

生磷酸根,后者與其質(zhì)液中的鈣離子作用形成磷酸鈣,再與硝酸鉆起反應(yīng),形成

磷酸鉆,最后與硫化錢作用形成硫化鉆黑色沉淀定位于胞漿中。

2.試劑

(1)備用試劑:①95%乙醇②2%CaCl2③2%硝酸鉆④1%硫化鏤⑤B-甘油磷

酸鈉⑥Tris-HCI緩沖液(PH9.5):Tris6g溶于400ml水中,加0.1MHCI80ml,調(diào)

PH9.5,加水至500ml

孵育液(每次必須新鮮配制):緩沖液

(2)Tris20ml,2%CaCI2

20ml,B一甘油磷酸鈉200mg。

3.方法

(1)新鮮血片用95%乙醇固定lOmin,取出,自然干燥。

(2)將孵育液放入45℃水浴箱中先預(yù)溫5min后,再放入涂片孵育30min,取出

涂片(不沖洗)立即放入2%硝酸鉆中5min,取出用自來水充分沖洗干凈。

(3)放入1%硫化鏤溶液(每次必須新鮮配制)中2min,用自來水沖洗干凈,

用核固紅復(fù)染30min。

4.結(jié)果

陽性:中性粒細(xì)胞胞漿內(nèi)有棕黑色沉淀。

陰性:中性粒細(xì)胞胞漿內(nèi)無棕黑色沉淀。

5.正常參考值

成人:積分80分左右。

兒童:因年齡而異。

6.臨床意義

(1)細(xì)菌:積分球菌tt>GN桿菌,病毒減低或無變化。但NAP積分正常/1,

不能除外細(xì)菌感染。

(2)慢粒II,類白t?tto

(3)ALLf,ANLLl。

(4)AAtt,PNH正常/l。

(5)惡組II,反應(yīng)性組織細(xì)胞增多t-tto

(6)增性紅細(xì)胞增多癥t,繼發(fā)性紅細(xì)胞增多正常。

(7)激素治療后NAPt?

(8)妊娠期NAPto

7.質(zhì)量保證

(1)孵育液、1%硫化錠每次實(shí)驗(yàn)必須新鮮配制。

(2)Tris-HCI緩沖液的PH應(yīng)控制在9.2~9.8之間。

(3)溫度應(yīng)嚴(yán)格控制在45℃左右(上下不超過1℃)。

(4)涂片在孵育液中準(zhǔn)確溫育30分鐘。

(5)涂片從孵育液中取出時(shí)不能沖洗,應(yīng)直接放入硝酸鉆,否則實(shí)驗(yàn)失敗。

(6)涂片從硝酸鉆中取出時(shí)應(yīng)用自來水沖洗3分鐘,否則涂片太臟,結(jié)果不好

觀察。

(7)每次染色必須作對(duì)照。

(二)鐵染色

1.原理骨髓小粒中的含鐵血黃素稱細(xì)胞外鐵,其中的三價(jià)鐵與分子中的蛋白

質(zhì)結(jié)合不牢固,經(jīng)稀鹽酸處理后而游離,并能在酸性亞鐵氧化鉀溶液中產(chǎn)生普魯

士藍(lán)反應(yīng)。細(xì)胞內(nèi)鐵也可用此法顯示。根據(jù)反應(yīng)的強(qiáng)弱了解骨髓中鐵的含量。

2.試劑

(1)酸性亞鐵氧化鉀溶液

200g/L亞鐵氧化鉀溶液5份

濃鹽酸1份

取200g/L亞鐵甄化鉀溶液置于試管中,緩緩滴加濃鹽酸,邊滴邊搖勻,至

出現(xiàn)白色沉淀,再滴加200g/L亞鐵氟化鉀溶液,亦邊滴邊搖勻,至白色沉

淀消失為止,備用。

(2)2g/L核固紅一硫酸鋁溶液

取硫酸鋁2g溶于100ml蒸儲(chǔ)水中,再加入核固紅0.2g,置37℃水浴中1小

時(shí),并隨時(shí)振搖,使溶解,過濾后使用。

3.方法

(1)選髓粒豐富的骨髓片,用甲醇固定10分鐘。

(2)髓片上滴滿酸性亞鐵氧化鉀溶液,染色30分鐘。

(3)用蒸儲(chǔ)水沖洗后,用核固紅復(fù)染20分鐘。

4.結(jié)果判斷

幼紅細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)藍(lán)綠色顆粒為陽性。

5.正常參考值

正常:細(xì)胞內(nèi)鐵>20%,細(xì)胞外鐵+~++。

IDA:細(xì)胞內(nèi)鐵<15%,細(xì)胞外鐵陰性。

6.

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