實驗五白細胞分類計數(shù)

關于實驗五白細胞分類計數(shù)一、實驗目的掌握顯微鏡外周血白細胞分類計數(shù)（DLC）的方法；掌握外周血各類白細胞的正常形態(tài)。第2頁,共53頁，2024年2月25日，星期天二、實驗原理將血液制成細胞分布均勻的血涂片，用瑞氏染液染色，根據(jù)各類細胞的形態(tài)特點和顏色差異將白細胞區(qū)別并進行計數(shù)。通常計數(shù)100個白細胞，計算得出各種白細胞所占的百分率。第3頁,共53頁，2024年2月25日，星期天三、實驗器材與試劑器材：顯微鏡，香柏油，擦鏡紙，清潔液試劑：Wright染液。四、實驗標本：制備良好的血涂片第4頁,共53頁，2024年2月25日，星期天

五、操作步驟1.制備血涂片：按照正確的操作方法制備血涂片2.染色：用Wright染液對血涂片染色，沖洗干凈，自然干燥后備用。3.低倍鏡觀察：低倍鏡下觀察全片，包括白細胞飛分布和染色情況。第5頁,共53頁，2024年2月25日，星期天

4.油鏡觀察：選擇血涂片體尾交界處細胞分布均勻、著色良好的區(qū)域，滴加1滴香柏油，按一定的方向順序對所見到的每個白細胞進行分類，并用白細胞分類計數(shù)器做好記錄，共計數(shù)100個白細胞。第6頁,共53頁，2024年2月25日，星期天

5.計算：求出各類白細胞所占的百分率。6.報告方式：百分率（%）。第7頁,共53頁，2024年2月25日，星期天六、參考區(qū)間

WBC百分率

（%）絕對值（×109/L）中性桿Nst

1~50.04~0.50中性分Nsg

50~702.00~7.00嗜酸性E

0.5~50.05~0.50嗜堿性B

0~10~0.10淋巴L

20~400.80~4.00單核M

3~80.12~0.80第8頁,共53頁，2024年2月25日，星期天

七、注意事項1.計數(shù)區(qū)域：以體尾交界處最佳。2.分類方法：遵循一定的方向，以“城垛式”連續(xù)進行，避免主觀選擇視野；結果的記錄可采用計數(shù)器、手工畫“正”字或“+++++”。3.計數(shù)的白細胞數(shù)：白細胞總數(shù)在（3.0~15.0）×109/L之間者，分類計數(shù)100個白細胞；總數(shù)在15.0×109/L以上時，計數(shù)200個；總數(shù)低于3.0×109/L時，應選用兩張血涂片計數(shù)50~100個白細胞。第9頁,共53頁，2024年2月25日，星期天4.計數(shù)結果：用各類白細胞的百分率乘以白細胞總數(shù)，即可求得每升血液中各類白細胞數(shù)量的絕對值。5.血涂片中有有核紅細胞時，應逐個計數(shù)，但不計入100個白細胞內，以分類100個白細胞過程中見到的有核紅細胞個數(shù)來報告，并注明其所屬階段。6.分類中還應注意觀察成熟紅細胞、血小板的形態(tài)、染色及其分布情況，注意有無寄生蟲（如瘧原蟲）及其他異常所見。第10頁,共53頁，2024年2月25日，星期天外周血各類白細胞的正常形態(tài)第11頁,共53頁，2024年2月25日，星期天白細胞粒細胞淋巴細胞單核細胞一、白細胞的組成中性粒細胞嗜酸性粒細胞嗜堿性粒細胞——白細胞是機體抵抗病原微生物等異物入侵的主要防線第12頁,共53頁，2024年2月25日，星期天全能干細胞髓系干細胞淋巴系干細胞粒-單核系祖細胞T淋巴系祖細胞B淋巴系祖細胞原粒細胞T原淋巴細胞B原淋巴細胞分葉核粒細胞單核細胞T淋巴細胞B淋巴細胞漿細胞GM-CSFT幼淋巴細胞B幼淋巴細胞早幼粒細胞中幼粒細胞晚幼粒細胞桿狀核粒細胞幼單核細胞原單核細胞嗜酸性粒細胞嗜堿性粒細胞第13頁,共53頁，2024年2月25日，星期天中性粒細胞（Neutrophil，N）

具有趨化、變形、黏附、吞噬、殺菌作用，防御和抵抗病原菌侵襲二、白細胞的功能第14頁,共53頁，2024年2月25日，星期天淋巴細胞（Lymphocyte，L）B細胞漿細胞生成Ab體液免疫T細胞免疫活性物質

細胞免疫第15頁,共53頁，2024年2月25日，星期天單核細胞（Monocyte，M）

吞噬，殺滅病原體清除損傷或已死亡的細胞處理抗原第16頁,共53頁，2024年2月25日，星期天嗜堿性粒細胞（Basophil，B）

通過釋放嗜堿性顆粒（組胺、肝素、慢反應物質等）參與超敏反應第17頁,共53頁，2024年2月25日，星期天嗜酸性粒細胞（Eosinophil，E）

抑制嗜堿性粒細胞和肥大細胞合成和釋放活性物質，吞噬其釋出顆粒，破壞組胺，限制過敏反應參與對寄生蟲的免疫反應第18頁,共53頁，2024年2月25日，星期天1.中性粒細胞(N)直徑10-15um胞質：粉紅色，含較多細小均勻的紫紅色中性顆粒。胞核：染色不均三、白細胞正常形態(tài)第19頁,共53頁，2024年2月25日，星期天按胞核的形態(tài)分為：N桿狀核（Nst）N分葉核（Nsg）核徑最窄處大于最寬處1/3為桿狀核，核型多樣，可呈C形、S形、V形或不規(guī)則形。核徑最窄處小于最寬處1/3為分葉核，細胞分2~5葉，甚至5葉以上。第20頁,共53頁，2024年2月25日，星期天中性粒細胞第21頁,共53頁，2024年2月25日，星期天桿狀核第22頁,共53頁，2024年2月25日，星期天分葉核第23頁,共53頁，2024年2月25日，星期天2.嗜酸性粒細胞（E）形態(tài)：略大于中性粒細胞胞漿：胞漿內充滿粗大、整齊、均勻、排列緊密、有立體感的桔紅色嗜酸性顆粒胞核：長呈分葉狀，二葉居多，呈眼鏡狀，偶見3~4葉,染色質粗，染深紫紅色。第24頁,共53頁，2024年2月25日，星期天嗜酸性粒細胞（血涂片）第25頁,共53頁，2024年2月25日，星期天第26頁,共53頁，2024年2月25日，星期天3.嗜堿性粒細胞（B）胞體呈圓形，略小于中性粒細胞胞漿：含粗大但大小不一、分布不均勻的紫黑色嗜堿性顆粒，顆粒常覆蓋于核上，致使核的輪廓與結構模糊不清胞核：核分葉不明顯，形態(tài)不規(guī)則。第27頁,共53頁，2024年2月25日，星期天嗜堿性粒細胞（血涂片）顆粒特點大小不一分布不均嗜堿性強第28頁,共53頁，2024年2月25日，星期天第29頁,共53頁，2024年2月25日，星期天第30頁,共53頁，2024年2月25日，星期天4.淋巴細胞（L）形態(tài)：直徑6-15um，分為大L和小L。胞核：圓形或腎形，深紫紅色。染色質粗糙，排列均勻，大淋巴細胞核常偏于一側。胞漿：小淋巴極少,漿內無顆粒，常呈裸核。大淋巴胞漿豐富，呈透明藍色，常有少量粗大、大小不均的紫紅色嗜天青顆粒。第31頁,共53頁，2024年2月25日，星期天淋巴細胞（血涂片）第32頁,共53頁，2024年2月25日，星期天第33頁,共53頁，2024年2月25日，星期天5.單核細胞（M）形態(tài)：為外周血中最大的細胞，直徑15-25um

胞體呈圓形或不規(guī)則形

。胞漿：豐富，染淡藍色或灰藍色，呈毛玻璃樣半透明。胞漿內含大量細小、彌散分布的灰塵樣淡紫紅色嗜天青顆粒，可見空泡。胞核：細胞核大，呈不規(guī)則圓形、腎形、馬蹄形或不規(guī)則分葉，有時折疊扭曲。染色質細致、疏松如網狀，染為淡紫紅色。第34頁,共53頁，2024年2月25日，星期天第35頁,共53頁，2024年2月25日，星期天第36頁,共53頁，2024年2月25日，星期天五類白細胞第37頁,共53頁，2024年2月25日，星期天外周血正常白細胞形態(tài)特征第38頁,共53頁，2024年2月25日，星期天四、一些異常結構及細胞的認識第39頁,共53頁，2024年2月25日，星期天1.核左移

外周血中桿狀核粒細胞增多或出現(xiàn)晚幼粒、中幼粒、早幼粒細胞第40頁,共53頁，2024年2月25日，星期天2.核右移：主要見于營養(yǎng)性巨幼細胞性貧血、惡性貧血等第41頁,共53頁，2024年2月25日，星期天3.毒性變化大小不均：病程長的化膿性炎癥中毒顆粒：化膿菌感染及大面積燒傷空泡：敗血癥Dohle小體（藍斑）：是核和胞質發(fā)育不平衡表現(xiàn)退行性變：核固縮、核腫脹、核溶解第42頁,共53頁，2024年2月25日，星期天

中性粒細胞大小不均第43頁,共53頁，2024年2月25日，星期天大小不均

第44頁,共53頁，2024年2月25日，星期天

中性粒細胞中毒顆粒第45頁,共53頁，2024年2月25日，星期天中毒顆粒：粗大、大小不等、分布不均勻的紫黑色或深紫紅色顆粒。第46頁,共53頁，2024年2月25日，星期天

中性粒細胞退行性變第47頁,共53頁，2024年2月25日，星期天退行性變第48頁,共53頁，2024年2月25日，星期天

中性粒細胞空泡性變：中性粒細胞胞質內出現(xiàn)一個或數(shù)個空泡第49頁,