液相色譜儀柱壓問題處理方法 液相色譜解決方案

第第頁液相色譜儀柱壓問題處理方法液相色譜解決方案液相色譜儀是一種常見的液相色譜儀，這種儀器具有“四高一廣”的特點，既高壓、高速、、高靈敏、應用范圍廣。作為常見的科研分析儀器，在確保檢驗的準確性的同時，液相色譜做到了色譜柱可反復使用、樣品不被破壞、易回收等優(yōu)點，是科研人員進行研究的有利工具。當然作為一款精密儀器，液相色譜儀對于操作具有一定的要求，而在使用時，難免可能發(fā)生一定的問題，今天我們就來講講面對柱壓問題，使用液相色譜儀應該注意的要點。對于液相色譜儀來說，柱壓的穩(wěn)定與色譜圖峰的好壞、柱效、分離效果及保留時間等都有所關聯(lián)。一般來說，柱壓問題主要集中在壓力過高、壓力過低兩方面。壓力過高壓力過高一般指液相色譜儀使用時壓力突然升高的問題。原因1：流路中存在堵塞解決方法：進行分段檢查。首先斷開真空泵的入口處，此時PEEK管里充滿液體，使PEEK管低于溶劑瓶，看液體是否自由滴下，如果液體不滴或緩慢滴下，則是溶劑過濾頭堵塞。處理方法用30%的硝酸浸泡半個小時，在用超純水沖洗干凈。打開Purge閥，使流動相不經(jīng)過柱子，如果壓力沒有明顯下降，則是過濾白頭堵塞。處理方法將過濾白頭取出，用10%的異丙醇超聲半個小時。如果壓力降至100PSI以下，過濾白頭正常。把色譜柱出口端取下，如果壓力不下降，則是柱子堵塞。處理方法：如果是緩沖鹽堵塞，則用95%的水沖至壓力正常。如果是一些強保留的物質導致堵塞，則要用比現(xiàn)在流動相更強的流動相沖至壓力正常。假如按上面的方法長時間沖洗壓力都不下降，則可考慮將柱子的進出口反過來接在儀器上，用流動相沖洗柱子。這時，如果柱壓仍不下降，只有換柱子入口篩板，但一旦操作不甚，很容易造成柱效下降，所以盡量少用。問題無法解決可考慮更換色譜柱。原因2：流速設定不正確解決方法：重新設定正確流量。原因3：流動相配比不正確解決方法：不同配比的流動相其黏度系數(shù)不相同，較高黏度的流動相相應的系統(tǒng)壓力也大，如果可能可更換黏度較小的溶劑或重新設定配比。原因4：系統(tǒng)壓力零點漂移解決方法：調(diào)節(jié)壓力傳感器的零點。壓力過低原因1：系統(tǒng)泄漏解決方法：尋找各個接口處，特別是色譜柱兩端的接口，把泄漏的地方旋緊即可。拆下柱子加適當力擰緊或襯四氟薄膜。原因2：泵里進混入空氣，此時表現(xiàn)的往往是壓力不穩(wěn)，忽高忽低，更嚴重一點會導致泵無法吸上液體解決方法：打開Purge閥，用3~5ml/min的流速沖洗，如果不行，則要用專用針筒在排空閥處借住外力將氣泡吸出。原因3：無流動相流出解決方法：檢查儲液瓶中有無流動相，沉子是否浸在流動相中，泵是否運行。原因4：參比閥未關閉解決方法：將流速降低后關閉參比閥。一般降至0.1～0.2mL/min后關閉參比閥。液相色譜柱的安裝

液相色譜儀由高壓液體泵、檢測器及液相色譜柱等三部分組成，其中液相色譜柱的正確安裝和使用，是液相色譜工作的關鍵；也是液相色譜工獲得正確可靠的實驗數(shù)據(jù)的必經(jīng)之路。

液相色譜柱的安裝：

1、液相色譜柱的結構：

a、空柱由柱接頭、柱管及濾片組裝而成。

柱接頭采用低死體積結構，柱接頭是兩端螺紋組件，一端是為7/16英寸外螺紋，另一端是3／16英寸的內(nèi)螺紋(國內(nèi)外已規(guī)范化)。7／16英寸外螺紋與1／4英寸柱管(Φ6.35mm)連接，中間放置壓壞用于密封。3／16英寸的內(nèi)螺紋與1／16英寸(Φ1.57mm)的連接管連接，中間也放置壓環(huán)用于柱接頭的密封。為了盡量減少柱外死體積，在安裝色譜柱時，用Φ1.57mm連接管通過空心螺釘壓環(huán)后要盡量插到底，然后再擰緊空心螺釘。壓環(huán)被空心螺釘擠壓變形后緊箍在連接管上(連接管通過壓環(huán)后露出的管長度應嚴格控制在2．5mm長或其他固定尺寸)。

在兩端柱接頭內(nèi)，柱管兩端各放置一片不銹鋼濾片(或濾網(wǎng))，用于封堵柱填料不被流動相沖出柱外而流失?？罩鹘M件均為316#不銹鋼材質，能耐受一般的溶劑作用。但由于含氯化物的溶劑對其有一定的腐蝕性，故使用時要注意，柱及連接管內(nèi)不能長時間存留此類溶劑，以避免腐蝕。

b、柱填料：

液相色譜柱的分離作用是在填料與流動相之間進行的，柱子的分類是依據(jù)填料類型而定。

正相柱：多以硅膠為柱填料。根據(jù)外型可分為無定型和球型兩種，其顆粒直徑在3—10?m的范圍內(nèi)。另一類正相填料是硅膠表面鍵合—CN，-NH2等官能團即所謂的鍵合相硅膠。

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