2024年大學試題(醫(yī)學)-分子診斷學筆試參考題庫含答案

“人人文庫”水印下載源文件后可一鍵去除，請放心下載?。▓D片大小可任意調(diào)節(jié)）2024年大學試題(醫(yī)學)-分子診斷學筆試參考題庫含答案“人人文庫”水印下載源文件后可一鍵去除，請放心下載！第1卷一.參考題庫(共75題)1.Klenow酶在（）情況下，呈現(xiàn)DNA聚合酶活性，在（）情況下呈現(xiàn)外切酶活性。2.簡述黏性末端DNA重組體的構(gòu)建過程。3.（）可用于中期及間期細胞，檢測微缺失和微重復。A、著絲粒探針B、染色體涂抹探針C、基因座特異探針D、端粒重復序列探針4.下列有關(guān)重組DNA技術(shù)的敘述，正確的是（）A、重組DNA技術(shù)所用的工具酶是限制酶、連接酶和運載體B、所有的限制酶都只能識別一種特定的核苷酸序列C、選細菌作為重組質(zhì)粒的受體細胞是因為細菌繁殖快D、只要目的基因進入了受體細胞就能成功實現(xiàn)表達5.下列哪些屬于染色體以外的遺傳因子（）A、轉(zhuǎn)座子B、病毒核酸C、細菌的質(zhì)粒D、高等植物的葉綠體E、轉(zhuǎn)位因子F、插入序列G、真核生物的線粒體6.具mRNA模板活性的病毒基因組是（）A、正鏈DNA病毒B、負鏈DNA病毒C、負鏈RNA病毒D、逆轉(zhuǎn)錄科的正鏈RNA病毒E、正鏈RNA病毒（逆轉(zhuǎn)錄科的正鏈RNA病毒除外）7.目前在蛋白質(zhì)組學的研究中主要采用了哪些技術(shù)？8.囊性纖維化（CF）是由囊性纖維化穿膜傳導調(diào)節(jié)因子（CFTR）基因突變所致，CFTR最常見的突變?yōu)椋ǎ〢、錯義突變B、移碼突變C、密碼子突變（ΔF508）D、無義突變E、剪切位點突變9.線粒體DNA與核DNA有哪些不同之處？10.下列不屬于獲取目的基因的方法是（）A、“鳥槍法”B、轉(zhuǎn)錄法C、反轉(zhuǎn)錄法D、根據(jù)已知氨基酸序列合成法11.有關(guān)R質(zhì)粒敘述正確的是（）A、R質(zhì)粒帶有抗性轉(zhuǎn)移因子B、R質(zhì)粒又稱耐藥性質(zhì)粒C、R質(zhì)粒帶有抗性決定因子D、R質(zhì)粒能決定細菌的性別E、R質(zhì)粒具有自我轉(zhuǎn)移能力F、R質(zhì)粒能進行自我復制12.酚抽提法可用于高分子量DNA的分離純化，所用試劑分別有不同的功能，下列正確的是（）A、SDS為陽離子去污劑，主要引起細胞膜的降解并能乳化脂質(zhì)和蛋白質(zhì)B、EDTA為二價金屬離子螯合劑，可促進DNase的活性C、蛋白酶K只可消化K類蛋白質(zhì)D、酚可使蛋白質(zhì)變性沉淀E、無RNase的DNase可有效地水解RNA13.臨床基因擴增檢驗實驗室應(yīng)如何設(shè)置。14.如何保證臨床基因擴增檢驗實驗室的質(zhì)量。15.基因工程疫苗研究開發(fā)應(yīng)遵循的原則是什么？16.脆性X智力低下1號基因FMR-1）基因5端重復序列異常擴增，其全突變重復范圍（n）是（）A、6～45B、45～55C、55～200D、0～6E、>20017.功能基因組學的主要特征。（）A、高精度B、高通量C、大規(guī)模D、計算機分析E、高分辯率18.簡述原核生物的類核組成。19.真核生物基因是（）A、基因重疊現(xiàn)象B、類核結(jié)構(gòu)C、斷裂基因D、質(zhì)粒E、可移動基因成分20.UNG防污染預防下列哪種污染（）A、產(chǎn)物B、靶核酸C、氣溶膠D、標本間E、病原微生物21.PCR反應(yīng)過程分為三個步驟，即（），（）和（）。22.苯丙酮尿癥常用的分子診斷檢測方法：（）A、PCR-STRB、PCR-SSCPC、PCR-DGGED、PCR-RFLPE、多重ASPCR23.線粒體DNA（mtDNA）與核DNA主要不同之處有（）A、非孟德爾的母系遺傳B、低突變率C、異質(zhì)性和復制分離D、閾值效應(yīng)24.有關(guān)DNA序列自動化測定的不正確敘述是（）A、用熒光代替了同位素標記B、激光掃描分析代替人工讀序C、基本原理與手工測序相同D、不需要引物E、需要與手工序列分析相同的模板25.試述載體構(gòu)建一般方法。26.（）可用于中期及間期細胞，檢測染色體的非整倍性。A、著絲粒探針B、染色體涂抹探針C、基因座特異探針D、端粒重復序列探針27.分離與純化mRNA可采用下列哪種方法（）A、oligo（dT）-纖維素柱層析法B、oligo（dA）-纖維素液相結(jié)合離心法C、oligo（U）-濾紙法D、oligo（dC）-纖維素柱層析法E、oligo（dG）-纖維素液相結(jié)合離心法28.原核生物基因組的特征包括（）A、具有類核結(jié)構(gòu)B、只有一個DNA復制起點C、有大量的基因重疊現(xiàn)象D、存在可移動基因成分E、基因組中有重復序列存在F、結(jié)構(gòu)基因多數(shù)是多拷貝的G、廣泛存在操縱子結(jié)構(gòu)29.亨廷頓病IT15基因CAG常用的分子診斷方法（）A、限制性內(nèi)切酶MstⅡ切割法B、長距離PCR法（LD-PCR）C、多重PCRD、擴增產(chǎn)物變性聚丙烯酰胺凝膠電泳放射自顯影E、Southern印跡雜交法30.遺傳疾病分子診斷的策略（）A、直接診斷策略B、SSCPC、基因多態(tài)性連鎖分析D、RFLPE、基因突變的定量（dosage）診斷31.識別基因序列不同，但酶切后產(chǎn)生的粘性末端相同的一類酶為（）。A、同工酶B、同尾酶C、同裂酶D、同位酶32.簡述原位雜交在臨床中的應(yīng)用。33.細菌基因轉(zhuǎn)移的方式有（）A、接合B、轉(zhuǎn)化C、轉(zhuǎn)染D、轉(zhuǎn)導E、轉(zhuǎn)座34.簡述PFGE的基本原理。35.HBV基因組是（）A、完全雙鏈DNA分子B、不完全雙鏈DNA分子C、完全雙鏈RNA分子D、不完全雙鏈RNA分子E、單鏈DNA分子36.有關(guān)化學法的敘述，不正確的是（）A、所用化學試劑有一定危害性B、所需的DNA模板純度要求較高C、測序前對待測DNA末端進行放射性標記D、便于自動化E、測序反應(yīng)分為4組或5組相互獨立的化學反應(yīng)37.核酸原位雜交是（）A、核酸分子雜交技術(shù)與組織細胞化學和免疫組織化學結(jié)合起來的一種雜交方法B、基本原理及探針的標記方法與傳統(tǒng)核酸分子雜交技術(shù)相同C、不能確定與探針互補的核酸序列在細胞內(nèi)的空間位置D、不需要將核酸從細胞中提取出來38.下列哪項與短串聯(lián)重復序列（STR）位點的不穩(wěn)定性相關(guān)（）A、脆性X綜合癥、重癥肌無力和Huntington?舞蹈癥B、脆性X綜合癥、重癥肌無力和Kearns-sayre綜合癥C、Kearns-sayre綜合癥、慢性進行性眼外肌癱瘓和Huntington?舞蹈癥D、Kearns-sayre綜合癥、慢性進行性眼外肌癱瘓和Kearns-sayre綜合癥39.黏粒（cosmid）是質(zhì)粒－噬菌體雜合載體，它的復制子來自（）、cos位點序列來自（），最大的克隆片段達到45kb。40.只含蛋白質(zhì)而不含核酸的的病毒稱（）A、類病毒（Viroids）B、衛(wèi)星（Satellites）C、類病毒（viroid）D、朊病毒（Prions）E、擬病毒（virusoid）41.下面哪些方法屬于基因芯片原位合成技術(shù)（）A、原位光刻合成B、合成點樣C、壓電打印D、分子印章42.簡述基因的特點和鑒別標準。43.能對未知序列進行擴增的PCR是（）A、多重PCRB、巢式PCRC、原位PCRD、反向PCRE、不對稱PCR44.有關(guān)煮沸裂解法提取質(zhì)粒DNA的正確敘述是（）A、該法是一種條件比較溫和的物理方法B、煮沸能完全滅活核酸內(nèi)酶AC、不適用于大多數(shù)Ecoli菌株D、適用于HB101菌株E、適用于45.通過凝膠電泳法可對RNA分子完整性進行鑒定，提示無RNA的降解時應(yīng)（）A、28S?RNA的熒光強度約為18S的2倍B、18S?RNA的熒光強度約為28S的2倍C、5S?RNA的熒光強度約為18S的2倍D、5S?RNA的熒光強度約為28S的2倍E、28S?RNA的熒光強度約為5S的2倍46.從高溫嗜熱細菌中發(fā)現(xiàn)高溫DNApolymerase后，使得PCR技術(shù)得以廣泛應(yīng)用，在高溫下有活性的DNApolymerase有（）、（）、（）、（）。其中具有3’-5’外切活性的高溫DNApolymerase有（）和（）。47.試述5′RACE技術(shù)原理和方法。48.作為基因的運輸工具-運載體，必須具備的條件之一及理由是（）A、能夠在宿主細胞中穩(wěn)定地保存下來并大量復制，以便提供大量的目的基因B、具有多個限制酶切點，以便于目的基因的表達C、具有某些標記基因，以便為目的基因的表達提供條件D、能夠在宿主細胞中復制并穩(wěn)定保存，以便于進行篩選49.HIV基因組編碼的附加基因和調(diào)節(jié)基因（）A、vifB、vprC、nefD、tatE、rev50.分段基因組（segmentedgenome）是指病毒基因組（）A、由數(shù)條不同的核酸分子組成B、由數(shù)條相同的核酸分子組成C、由數(shù)條互補的核酸分子組成D、由可分成不同功能區(qū)段的一個核酸分子組成E、以上都不對51.變形聚丙烯酰胺凝膠電泳能分離的單鏈寡核苷酸片段，一般為（）A、100～200個核苷酸B、200～300個核苷酸C、300～500個核苷酸D、500～700個核苷酸E、任意長度均可52.影響PCR反應(yīng)的因素有哪些？53.人的二倍體細胞DNA大約由多少堿基對（）組成。A、1.0×109bpB、2.0×109bpC、3.0×109bpD、4.0×109bpE、5.0×109bp54.基因治療是把健康的外源基因?qū)耄ǎ〢、有基因缺陷的DNA分子中B、有基因缺陷的染色體中C、有基因缺陷的細胞器中D、有基因缺陷的細胞中55.Western印跡56.能夠引起遺傳性視神經(jīng)病的線粒體病遺傳學分類類型是（）A、點突變B、mt?DNA的大規(guī)模缺失C、mt?DNA的大規(guī)模插入D、源于核DNA缺陷引起mtDNA缺失57.國際病毒分類委員會（ICTV）將病毒分成哪幾類？58.（）影響核酸分子雜交的因素。A、DNA的濃度B、DNA的大小和復雜性C、溫度D、離子強度59.T4-DNA連接酶是通過形成磷酸二酯鍵將兩段DNA片段連接在一起，其底物的關(guān)鍵基團是（）。A、2’-OH和5’-PB、2’-OH和3’-PC、3’-OH和5’-PD、5’-OH和3’-P60.肌營養(yǎng)不良癥分子診斷的常用方法（）A、限制性內(nèi)切酶MstⅡ切割法B、長距離PCR法（LD-PCR）C、多重PCRD、擴增產(chǎn)物變性聚丙烯酰胺凝膠電泳放射自顯影E、Southern印跡雜交法61.DNA在細胞核內(nèi)通常與下列哪種物質(zhì)結(jié)合（）A、蛋白質(zhì)B、糖類C、脂類D、無機鹽E、水62.PCR檢測技術(shù)有何臨床應(yīng)用。63.α珠蛋白基因由α類基因或假基因組成，以下那一個不是假基因（）A、ψζB、ψα1C、ψα2D、ζE、以上均不是64.HIV-1（）A、引起AIDSB、主要攻擊輔助性T淋巴細胞C、導致免疫系統(tǒng)紊亂和免疫缺陷D、屬逆轉(zhuǎn)錄病毒E、使被感染的細胞喪失功能但不會死亡65.SARS-CoV的分子診斷主要是（）A、根據(jù)基因組序列設(shè)計特異性引物作PCRB、根據(jù)基因組序列設(shè)計特異性引物作RT-PCRC、根據(jù)病毒膜蛋白作ELISAD、根據(jù)病毒核衣殼蛋白作ELISAE、根據(jù)病毒滴度66.一個典型的基因不包括（）A、增強子B、5′非編碼區(qū)C、3′非編碼區(qū)D、啟始密碼子E、終止密碼子67.可以自我轉(zhuǎn)移的質(zhì)粒，其分子量一般在（）A、1.5×107以上B、1.5×107以下C、1.5×107與2.5×107之間D、2.5×107以下E、2.5×107以上68.細菌的移動基因存在著三種類型的轉(zhuǎn)位因子包括（）、（）、（）。69.真核生物染色體DNA主要以下列哪種形式存在（）A、環(huán)狀單鏈分子B、線性單鏈分子C、環(huán)狀雙鏈分子D、線性雙鏈分子E、線性或環(huán)狀雙鏈分子70.原位雜交的基本原理。71.原核細胞和真核細胞轉(zhuǎn)錄的mRNA均具有與rRNA結(jié)合的SD序列，以利于進行有效的轉(zhuǎn)錄。72.下列哪項不符合轉(zhuǎn)位因子的含義（）A、轉(zhuǎn)位因子是DNA重組的一種形式B、可在質(zhì)粒與染色體之間移動的DNA片段C、轉(zhuǎn)座子是轉(zhuǎn)位因子的一個類型D、可移動的基因成分E、能在一個DNA分子內(nèi)部或兩個DNA分子之間移動的DNA片段73.蛋白質(zhì)截短測試法與其它分子檢測方法最大的不同在于（）A、只檢測單位點突變B、只檢測已知突變C、只檢測與疾病相關(guān)的突變D、可檢測未知突變E、可檢測多位點突變74.外標定量方法最大的缺點是（）A、不能測定原始模板的絕對量B、測定的重復性和精密性有問題C、標準品制備困難D、不能排除樣本間的測定差異E、測定必須在擴增的指數(shù)期進行75.大腸桿菌作為基因工程受體菌的優(yōu)缺點是什么？第2卷一.參考題庫(共75題)1.固相雜交不包括（）。A、Northern印跡雜交B、原位雜交C、吸附雜交D、Southern印跡雜交2.病毒基因組存在（）A、基因重疊現(xiàn)象B、類核結(jié)構(gòu)C、斷裂基因D、質(zhì)粒E、可移動基因成分3.真核表達調(diào)控的順式作用元件有哪些？其作用特點是什么？4.下列哪種不是基因擴增檢驗技術(shù)（）A、PCRB、LCRC、NASBAD、bDNAE、SDA5.在LacZ標記基因插入外源基因，經(jīng)IPTG誘導，在X-gal培養(yǎng)基中顯（）色，為（）性克隆，未插入基因的克隆顯（）色，為（）性克隆。6.原核生物具有（）A、基因重疊現(xiàn)象B、類核結(jié)構(gòu)C、斷裂基因D、質(zhì)粒E、可移動基因成分7.Sanger雙脫氧鏈終止法采用DNA引物引導新生DNA的合成，采用的模板是（）A、單鏈DNAB、雙鏈DNAC、單鏈RNAD、雙鏈RNAE、蛋白質(zhì)8.變性高效液相色譜法9.基因組最大的生物（）A、人B、某些藻類C、某些細菌D、某些顯花植物和兩棲類動物E、某些哺乳動物10.PCR擴增阻礙突變系統(tǒng)檢測突變的原理是基于（）A、由于突變，限制性內(nèi)切酶識別位點變化，不能被切開B、由于突變，電泳遷移率發(fā)生變化C、連接酶不能連接與靶序列錯配的兩個DNA片段D、Taq酶不能延伸3’末端與靶序列錯配的引物E、以上都不是11.質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)特點有（）A、以環(huán)狀雙鏈DNA分子存在B、質(zhì)粒DNA有超螺旋結(jié)構(gòu)C、以環(huán)狀單鏈DNA分子存在D、質(zhì)粒DNA有半開環(huán)結(jié)構(gòu)E、以環(huán)狀雙鏈RNA分子存在F、質(zhì)粒DNA有線性結(jié)構(gòu)G、以線性雙鏈DNA分子存在12.Southern印跡13.下列哪種不是對核酸分子完整性進行鑒定的方法（）A、凝膠電泳法B、Northern雜交C、ELISAD、Western?blottingE、生物芯片技術(shù)14.應(yīng)用重組DNA技術(shù)診斷疾病的過程中必須使用基因探針才能達到檢測疾病的目的。這里的基因探針是指（）A、用于檢測疾病的醫(yī)療器械B、用放射性同位素或熒光分子等標記的DNA分子C、合成β-球蛋白的DNAD、合成苯丙羥化酶的DNA片段15.A260/A28016.核酸操作的基本技術(shù)有哪些？17.組蛋白家族中核小體組蛋白組蛋白包括（）A、H1、H2A、H2B、H3B、H1、H2A、H2B、H3AC、H2A、H2B、H3、H4D、H2A、H2B、H3A、H418.后基因組計劃的主要目標（）A、基因功能比較B、基因功能鑒定C、基因組測序D、基因數(shù)據(jù)分析E、基因結(jié)構(gòu)19.基因序列中保守性最高的序列（）A、內(nèi)含子B、外顯子C、整個基因D、5′非編碼區(qū)E、3′非編碼區(qū)20.簡述假基因的分類及其發(fā)生機理。21.下列哪一種酶作用時需要引物？（）A、限制酶B、末端轉(zhuǎn)移酶C、反轉(zhuǎn)錄酶D、DNA連接酶22.簡述哺乳動物細胞基因組DNA抽提的主要方法有哪幾種？23.耐熱連接酶的使用，可增加寡核苷酸連接實驗的（）A、靈敏度B、重現(xiàn)性C、特異性D、假陽性E、假陰性24.限制性核酸內(nèi)切酶是由細菌產(chǎn)生的，其生理意義是（）。A、修復自身的遺傳缺陷B、促進自身的基因重組C、強化自身的核酸代謝D、提高自身的防御能力25.黏性末端連接法，不僅操作方便，而且（）。A、產(chǎn)生新切點B、易于回收外源片段C、載體不易環(huán)化D、影響外源基因的表達26.簡述從瓊脂糖凝膠中回收DNA片段的主要方法有哪幾種？27.通過轉(zhuǎn)座可引起哪些遺傳效應(yīng)？28.質(zhì)譜分析技術(shù)主要是用來檢測蛋白質(zhì)的（）。A、分子量B、分子組成C、分子構(gòu)像D、分子大小29.液相分子雜交包括（）A、吸附雜交B、發(fā)光液相雜交C、液相夾心雜交D、復性速率液相分子雜交30.人工染色體載體必須具有的元件是（）。A、染色體端粒B、著絲粒C、自主復制序列D、以上三項全部31.試證明Ct值與模板DNA的起始拷貝數(shù)成反比。32.操縱子結(jié)構(gòu)不存在（）A、細菌基因組中B、病毒基因組中C、真核生物基因組中D、大腸桿菌基因組中E、原核生物基因組中33.蛋白質(zhì)之間相互作用的形式主要包括（）。A、分子和亞基的聚合B、分子識別C、分子自我裝配D、多酶復合體E、分子雜交34.下列哪些技術(shù)屬于分子影像技術(shù)（）A、UltrasoundB、SPECTC、MRID、CTE、PET35.COS位點，COS質(zhì)粒，COS細胞它們均含有用于自身環(huán)化的12個堿基的互補粘性末端。36.下列有關(guān)連接反應(yīng)的敘述，錯誤的是（）。A、連接反應(yīng)的最佳溫度為37℃B、連接反應(yīng)緩沖體系的甘油濃度應(yīng)低于10%C、連接反應(yīng)緩沖體系的ATP濃度不能高于1mMD、接酶通常應(yīng)過量2-5倍37.CsCl2-EB法中在過量EB存在的下，超速離心后密度最大沉于管底的是（）A、蛋白質(zhì)B、帶切口的環(huán)狀或線性DNAC、RNAD、復合糖類E、閉環(huán)質(zhì)粒DNA38.用下列方法進行重組體的篩選，只有（）說明外源基因進行了表達。A、Southem印跡雜交B、Northem印跡雜交C、Western印跡D、原位菌落雜交39.目前使用較為廣泛的質(zhì)粒DNA小量提取的方法是（）A、牙簽少量制備法B、小量一步提取法C、SDS裂解法D、堿裂解法E、煮沸裂解法40.臨床基因擴增中，弱陽性室內(nèi)質(zhì)控樣本發(fā)生失控，其原因可能是（）A、核酸提取中的丟失B、標本中擴增抑制物殘留C、擴增儀孔間溫度不均一D、Taq酶和/或逆轉(zhuǎn)錄酶失后E、擴增產(chǎn)物污染41.試述質(zhì)粒的類型有哪些？42.逆轉(zhuǎn)錄病毒編碼的基本結(jié)構(gòu)基因（）A、gag（編碼核心蛋白）B、pol（編碼逆轉(zhuǎn)錄酶等）C、rex（編碼rex調(diào)節(jié)蛋白）D、tax（編碼tax調(diào)節(jié)蛋白）E、env基因（編碼包膜蛋白）43.用于核酸分子雜交的探針不能是放射性標記的（）。A、DNAB、RNAC、抗體D、寡核苷酸44.有哪幾種反義核苷酸基因失活療法？簡述其原理。45.簡述長病毒末端重復序列的特點和作用。46.病毒基因組末端重復序列結(jié)構(gòu)有（）A、粘性末端B、末端插入序列C、末端反向重復序列D、末端正向重復序列E、長末端重復序列47.下列哪種不是從瓊脂糖凝膠中回收DNA片段的方法（）A、DEAE纖維素膜插片電泳法B、電泳洗脫法C、冷凍擠壓法D、低熔點瓊脂糖挖塊回收法E、漂洗法48.簡述變性高效液相色譜法檢測基因變異的優(yōu)點。49.簡述重組DNA技術(shù)的原理及技術(shù)。50.（）影響DNA變性的因素。A、DNA的濃度B、DNA的大小和復雜性C、溫度D、離子強度51.脈沖場凝膠電泳與傳統(tǒng)凝膠電泳的不同點有（）A、采用的凝膠基質(zhì)不同B、采用的電場類型不同C、采用的電泳儀裝置不同D、分辨的DNA片段大小不同E、樣品的制備不同52.紫外分光光度法可對核酸純度進行鑒定，下列說法是正確的（）A、純DNA的A270/A280比值為2.0B、純DNA的A260/A280比值為1.8C、純DNA的A260/A280比值為2.0D、純DNA的A270/A280比值為1.8E、純DNA的A230/A270比值為1.853.pBR322質(zhì)粒作為基因克隆載體不具有下列何種調(diào)控元件（）。A、Ampr和TetrB、ori復制子C、LacZ標記D、多克隆位點54.某一重組DNA的載體部分有兩個BamHI酶切位點。用BamHI酶切后凝膠電泳上出現(xiàn)四條長度不同的帶子，其長度總和與已知數(shù)據(jù)吻合，該重組分子插入片段上的BamHI酶切位點共有（）。A、4個B、3個C、1個D、2個55.下列說法正確的是（）A、質(zhì)粒的主要成分是RNAB、質(zhì)粒的復制依賴于宿主細胞C、宿主細胞離開了質(zhì)粒就不能生存D、質(zhì)粒的存在對宿主細胞沒有任何影響E、不同類群的質(zhì)粒不能共存于同一菌株56.鐮狀細胞貧血分子診斷（）A、限制性內(nèi)切酶MstⅡ切割法B、長距離PCR法（LD-PCR）C、多重PCRD、擴增產(chǎn)物變性聚丙烯酰胺凝膠電泳放射自顯影E、Southern印跡雜交法57.λ噬菌體外包裝目的基因片段的大小應(yīng)為（）。A、小于λ噬菌體DNA的50%B、小于噬菌體DNA的75%C、大于λ噬菌體DNA的105%D、為λ噬菌體DNA的75%～105%58.蛋白酶K可有效地降解內(nèi)源蛋白，能快速水解細胞裂解物中的DNA酶和RNA酶，以利于完整DNA和RNA的分離。59.真核細胞基因表達的特點為（）。A、單順反子B、多順反子C、轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)譯連續(xù)進行D、.轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)譯在同一時空進行60.人類單核苷酸的多態(tài)性（SNP）的特點及主要用途有哪幾個方面？61.以下哪項描述是錯誤的（）A、細菌是單細胞生物B、細菌是原核生物C、細菌生長快個體小D、細菌以有絲分裂的方式增殖E、細菌無細胞核結(jié)構(gòu)62.基因工程誕生的理論基礎(chǔ)是什么？63.Northern印跡技術(shù)是（）A、檢測RNA的核酸雜交技術(shù)B、是以發(fā)明者的名字命名的C、屬于固相雜交的范疇D、與Southern印跡雜交的方法類似，只是變性劑不同64.適合從聚丙烯酰胺凝膠中回收DNA片段的標準方法是（）A、DEAE纖維素膜插片電泳法B、非透析袋電泳洗脫法C、透析袋電泳洗脫法D、壓碎與浸泡法E、冷凍擠壓法65.鐮狀血紅蛋白（HbS）66.由一個細胞或者組織的基因組所表達的全部相應(yīng)的蛋白質(zhì)，稱為（）。67.脆性X智力低下1號基因（FMR-1）基因5端（）重復序列異常擴增。A、CGGB、CAGC、CGAD、CGCE、CAA68.PND和PGD的適應(yīng)癥（）A、有可能孕育出嚴重遺傳性疾病和先天性畸形胎兒的孕婦B、夫婦一方有某種遺傳病或曾生出過某種遺傳病患兒，或孕婦有X伴性隱性遺傳病家族史C、夫婦任何一方為染色體異常、染色體平衡移位和倒位攜帶者D、早孕階段曾服用過致畸藥物或曾有病毒感染史等致畸情況E、羊水過多或過少F、原因不明的多次流產(chǎn)、死胎、死產(chǎn)的孕婦G、胎兒發(fā)育遲緩H、未觸到正常的胎兒I、年齡超過35歲的孕婦等等69.描述質(zhì)粒DNA的結(jié)構(gòu)特點。70.要探知細胞內(nèi)某一蛋白質(zhì)的表達水平，可以通過（）實現(xiàn)。A、Southern?blotB、Northern?blotC、Western?blotD、原位分子雜交71.關(guān)于逆轉(zhuǎn)錄病毒敘述不正確的是（）A、迄今發(fā)現(xiàn)的RNA腫瘤病毒均屬RNA逆轉(zhuǎn)錄病毒B、嗜肝DNA病毒科屬DNA逆轉(zhuǎn)錄病毒C、逆轉(zhuǎn)錄病毒RNA為正鏈D、病毒顆粒均攜帶逆轉(zhuǎn)錄酶E、前病毒DNA可以整合到宿主細胞染色體DNA中72.用柱層析法純化質(zhì)粒DNA時DNA的何種殘基與硅基質(zhì)結(jié)合（）A、嘌呤B、磷酸鹽殘基C、嘧啶D、糖基E、氫離子73.試述舉2種質(zhì)粒DNA提取的方法及應(yīng)用。74.電泳時EB加在瓊脂糖凝膠中一般會降低DNA在瓊脂糖凝膠電泳中的遷移率。75.關(guān)于cDNA的不正確的提法是（）。A、同mRNA互補的單鏈RNAB、同mRNA互補的含有內(nèi)含子的DNAC、以mRNA為模板合成的雙鏈RNAD、以上都不正確第1卷參考答案一.參考題庫1.參考答案：有dNTP；沒有dNTP2.參考答案：目的基因和載體可由同一種限制酶切割后產(chǎn)生，或由不同的限制酶切割形成互補黏性末端，經(jīng)退火，彼此間很容易按堿基配對原則形成氫鍵。然后由DNA連接酶催化連接接頭處的缺口，形成重組質(zhì)粒。載體DNA在限制酶切割后，用堿性磷酸酶處理，除去5’端磷酸基，以避免載體DNA自身環(huán)化。3.參考答案：C4.參考答案：B5.參考答案：A,C,D,E,F,G6.參考答案：E7.參考答案： ①蛋白質(zhì)的分離技術(shù)：二維凝膠電泳。 ②蛋白質(zhì)的鑒定技術(shù)主要包括：質(zhì)譜技術(shù)、Edman降解分析技術(shù)、蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)分析技術(shù)?。 ③蛋白質(zhì)與核酸間相互作用的研究技術(shù)：凝膠滯后實驗、DNase?Ⅰ?足紋分析、核酸一蛋白質(zhì)雜交實驗。 ④蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)間相互作用的研究技術(shù)：酵母雙雜交技術(shù)。8.參考答案：C9.參考答案： 非孟德爾的母系遺傳：mtDNA?因位于細胞質(zhì)中，表現(xiàn)為嚴格的母性遺傳，不服從孟德爾遺傳，絕大部分mtDNA?是通過卵細胞遺傳。 高突變率：mt?DNA突變率約為nDNA的10～100倍，此外mtDNA?與有毒物質(zhì)的結(jié)合頻率比核DNA?高數(shù)倍至數(shù)十倍。 異質(zhì)性和復制分離：異質(zhì)性即突變mtDNA與野生型mtDNA?以不同的比例共存于一個細胞內(nèi)的現(xiàn)象。復制分離即在細胞分裂的復制過程中，突變的和野生型的mtDNA?隨機進入子細胞的過程，復制分離的結(jié)果使突變mtDNA?雜合體向突變純合或野生純合方向轉(zhuǎn)變，但因突變復制具有優(yōu)勢，故易產(chǎn)生突變積累，突變積累的程度不同，突變mtDNA?在群體中的多態(tài)性程度也不同。 閾值效應(yīng)：每個細胞的mt?DNA有多種拷貝，而一個細胞mt?DNA編碼基因的表現(xiàn)型依賴于一個細胞內(nèi)突變型mt?DNA和野生型mt?DNA的相對比例，mtDNA?突變導致氧化磷酸化水平降低，當能量降低到維持組織正常功能所需能量的最低值時即達到了mtDNA表達的能量閾值，可引起某組織或器官的功能異常而出現(xiàn)臨床癥狀，這就是閾值效應(yīng)。 半自主復制與協(xié)同作用：mt?DNA雖有自我復制、轉(zhuǎn)錄和編碼功能，但該過程還需要數(shù)十種nDNA編碼的酶參加，因此mt?DNA基因的表達同時也受nDNA的制約，兩者具有協(xié)同作用。10.參考答案：B11.參考答案：A,B,C,E,F12.參考答案：C13.參考答案：由于基因擴增檢驗是對靶核酸的指數(shù)倍擴增過程，因而有大量的擴增產(chǎn)物的出現(xiàn)，這種擴增產(chǎn)物極易對以后的新擴增反應(yīng)產(chǎn)生“污染”，為防止這種污染的發(fā)生，就需要對基因擴增檢驗實驗室進行嚴格的分區(qū)。臨床基因擴增檢驗實驗室原則上分為四個分隔開的工作區(qū)域，即試劑貯存和準備區(qū)、標本制備區(qū)、擴增反應(yīng)混合物配制和擴增區(qū)以及擴增產(chǎn)物分析區(qū)。如果采用全自動擴增儀，后兩個區(qū)域可以合并。應(yīng)注意的是，各工作區(qū)域必須有明確的標記，避免不同工作區(qū)域內(nèi)的設(shè)備、物品混用。進入各工作區(qū)域必須嚴格按單一方向進行，即試劑貯存和準備區(qū)→標本制備區(qū)→擴增反應(yīng)混合物配制和擴增區(qū)→擴增產(chǎn)物分析區(qū)。各區(qū)的儀器設(shè)備包括工作服、鞋子、實驗記錄本和筆等都必須專用，不得混淆。此外，上述四個工作區(qū)域內(nèi)還應(yīng)有固定于房頂?shù)淖贤鉄?，以便于工作后區(qū)域內(nèi)的空氣照射。14.參考答案：臨床基因擴增檢驗實驗室的常規(guī)測定由一系列步驟組成，包括樣本收集、樣本處理（核酸提?。?、核酸擴增、產(chǎn)物檢測結(jié)果報告及解釋等。室內(nèi)質(zhì)量控制僅涉及樣本處理、核酸擴增和產(chǎn)物分析等測定分析步驟，而室間質(zhì)量評價則除了監(jiān)測測定分析步驟外，還包括較大范圍的實驗室活動，諸如樣本接收中的可靠性、結(jié)果報告及解釋等。QA則是覆蓋更廣范圍的活動，包括樣本收集、結(jié)果報告和解釋等。15.參考答案： （1）不能或難于培養(yǎng)的的病原體如乙型肝炎病毒（HBV），丙型肝炎病毒（HCV），戊型肝炎病毒（HEV），EB病毒（Epstein-Barr病毒，EBV），巨細胞病毒（CMV），人乳頭瘤病毒（HPV），麻風桿菌，疾原蟲、血吸蟲等。 （2）有潛在致癌性或免疫病理作用的病原體，前者如1型嗜人T淋巴細胞病毒（HTLV-I），人免疫缺損病毒（HIV），單純皰疹病毒（HSV），還有EBV、CMV、HPV等。后者如呼吸道合胞病毒（RSV），登革熱病毒（DGV），腎綜合征出血熱病毒（HFRSV）。 （3）常規(guī)疫苗免疫效果差，如霍亂和痢疾菌苗；或者反應(yīng)大，如百日咳和傷寒菌苗。 （4）能大大節(jié)約成本，簡化免疫程序的多價疫苗，如以痘苗病毒，腺病毒，卡介苗或沙門氏菌為載體的多價活疫菌。16.參考答案：E17.參考答案：B,C,D18.參考答案：原核生物與真核生物的主要區(qū)別在細胞核上。原核生物沒有典型的細胞核結(jié)構(gòu)，基因組DNA位于細胞中央的核區(qū)，沒有核膜將其與細胞質(zhì)隔開，但能在蛋白質(zhì)的協(xié)助下，以一定的組織形式盤曲、折疊包裝起來，形成類核（nucleoid）也稱擬核。類核的中央部分由RNA和支架蛋白（scaffoldingprotein）組成，外圍是雙鏈閉環(huán)的超螺旋DNA。在超螺旋結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上，DNA分子再扭結(jié)成許多活結(jié)樣或花瓣樣的放射狀結(jié)構(gòu)的DNA環(huán)。每個環(huán)形的活結(jié)狀結(jié)構(gòu)代表一個結(jié)構(gòu)域，在各結(jié)構(gòu)域中DNA呈負超螺旋狀態(tài)。每個DNA環(huán)是一個相對獨立的功能區(qū)，可以獨立完成不同區(qū)域的基因表達與調(diào)控。在類核中80﹪為DNA，其余為RNA和蛋白質(zhì)。如果用DNA酶處理后可使基因組DNA鏈斷裂；如果用RNA酶或蛋白酶處理類核，則類核變得松散，不能維持DNA鏈的折疊結(jié)構(gòu)，這表明RNA和蛋白質(zhì)對維持類核分子的折疊以及形成環(huán)狀結(jié)構(gòu)是必不可少的。19.參考答案：C20.參考答案：A21.參考答案：變性；退火；延伸22.參考答案：A,B,C,D,E23.參考答案：B24.參考答案：D25.參考答案： A.目的基因分析（1）ORF?分析（2）酶切位點分析。 B.載體選擇與分析（1）多克隆位點分析（2）抗性標記分析（3）啟動子與其他篩選標記分析。 C.連接體系與連接時間確定。26.參考答案：A27.參考答案：A28.參考答案：A,B,D,E,G29.參考答案：D30.參考答案：A,C,E31.參考答案：B32.參考答案：原位雜交技術(shù)可以通過標記的探針與分裂中期染色體DNA雜交來精確定位特定核苷酸序列在染色體上的位置；與細胞RNA雜交可觀察組織細胞中特定基因的表達水平；還可用特異性的細菌或病毒的核酸序列作為探針與組織、細胞雜交，以確定有無病原體的感染等。原位雜交能在成分復雜的組織中對單一細胞進行研究，不受同一組織中其它成分的影響，因此對于那些細胞數(shù)量少且散在于其它組織中的細胞內(nèi)DNA或RNA的研究更為方便。此外，原位雜交不需要從組織中提取核酸，有利于檢測組織中含量極低的靶序列，并可完整地保持組織和細胞的形態(tài)，更能準確地反應(yīng)出組織細胞的相互關(guān)系及功能狀態(tài)。舉例：原位雜交檢測上皮細胞中人乳頭狀瘤病毒（HPV）DNA。33.參考答案：A,B,D,E34.參考答案：PFGE采用一種正交的交變脈沖電場，在進行瓊脂糖凝膠電泳時，其方向、脈沖時間和電壓大小可交替改變。在每次電場方向改變時，DNA分子就要有一定的時間改變形狀和遷移方向，只有當DNA分子達到一定構(gòu)型，沿新的泳動方面伸直后，才能向前遷移。DNA分子的轉(zhuǎn)向時間與其大小關(guān)系極為密切，分子越大，分子構(gòu)型轉(zhuǎn)換所需時間就越長，轉(zhuǎn)變遷移方向的時間也就越長。對于不同大小的DNA大分子，其改變泳動方向所需的時間不等，遷移速度的快慢也就不等，因此就可以按DNA分子量大小使其分離開來。根據(jù)欲分離的DNA分子大小適當調(diào)節(jié)電場方向的相交角度、電壓及脈沖時間等參數(shù)，即可將各種分子量大小不同的分子分開。35.參考答案：B36.參考答案：D37.參考答案：A,B,D38.參考答案：A39.參考答案：質(zhì)粒；噬菌體40.參考答案：D41.參考答案：A,C,D42.參考答案：對于數(shù)量很少的編碼tRNA、rRNA和某些小分子RNA的基因，我們較易通過核酸序列加以判斷。而對于數(shù)量極大的蛋白質(zhì)編碼基因，目前可根據(jù)其特點使用五項標準來鑒別：①開放閱讀框（openreadingframe，ORF）；②序列特征和密碼子偏愛；③序列保守性；④轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物；⑤基因失活。但這些標準使用起來卻往往會遇到一些困難。43.參考答案：D44.參考答案：E45.參考答案：A46.參考答案：TaqDNA聚合酶；TthDNA聚合酶；VentDNA聚合酶；PwoDNA聚合酶；DNA聚合酶；PwoDNA聚合酶；PfuDNA聚合酶47.參考答案：PCR用于擴增代表mRNA轉(zhuǎn)錄物某一單位點與其3′或5′末端之間區(qū)域的部分cDNA稱為快速擴增cDNA末端技術(shù)（RACE）。如果已知mRNA的一片段鏈內(nèi)短序列，據(jù)此或設(shè)計基因特異引物，用原先存在的poly（A）尾（3′末端）或附加的同聚尾（5′末端）互補的序列做末端引物，就可以獲得從未知末端直到已知區(qū)域的部分cDNA序列。為獲得5′末端部分cDNA克隆需用基因特異引物，產(chǎn)物第一鏈產(chǎn)物，可用末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶及dATP加poly（A）尾。通過QT引物和反轉(zhuǎn)錄使用的上游基因特異引物生成第二鏈cDNA。48.參考答案：A49.參考答案：A,B,C,D,E50.參考答案：A51.參考答案：C52.參考答案：PCR反應(yīng)體系包含DNA模板、寡核苷酸引物、DNA聚合酶、dNTP及含有必需離子的反應(yīng)緩沖液，這些因素都對PCR反應(yīng)產(chǎn)生影響。53.參考答案：C54.參考答案：A55.參考答案：Western印跡又稱免疫印跡（immunoblotting），是一種通過標記的抗體檢測經(jīng)SDS分離的特定蛋白質(zhì)的技術(shù)。56.參考答案：A57.參考答案： 國際病毒分類委員會（ICTV）制定了《國際病毒分類與命名原則》。根據(jù)病毒的基因組組成及復制方式，可將病毒分為如下幾類：DNA病毒（DNA?Viruses） 第一組：雙鏈DNA病毒（Group?I：dsDNA?Viruses） 第二組：單鏈DNA病毒（Group?II：ssDNA?Viruses）?RNA病毒（RNA?viruses） 第三組：雙鏈RNA病毒（Group?III：dsRNA?Viruses） 第四組：正鏈RNA病毒（Group?IV：（+）ssRNA?Viruses） 第五組：負鏈RNA病毒（Group?V：（-）ssRNA?Viruses）DNA與RNA逆轉(zhuǎn)錄病毒（DNA?and?RNA?Reverse?Transcribing?Viruses） 第六組：RNA逆轉(zhuǎn)錄病毒（Group?VI：RNA?Reverse?Transcribing?Viruses） 第七組：DNA逆轉(zhuǎn)錄病毒（Group?VII：DNA?Reverse?Transcribing?Viruses）亞病毒因子（Subviral?Agents）衛(wèi)星（Satellites）類病毒（Viroids）朊病毒（Prions）58.參考答案：A,B,C,D59.參考答案：C60.參考答案：C61.參考答案：A62.參考答案：（1）PCR在病原微生物的檢測中的應(yīng)用；（2）PCR在遺傳病中的應(yīng)用；（3）PCR在腫瘤中的應(yīng)用；（4）其它方面的應(yīng)用：PCR技術(shù)除用于臨床診斷和治療外，還可用于DNA指紋、個體識別、親子關(guān)系識別、法醫(yī)物證等。63.參考答案：D64.參考答案：A,B,C,D65.參考答案：B66.參考答案：A67.參考答案：E68.參考答案：插入序列；轉(zhuǎn)位子；噬菌體Mu和D10869.參考答案：C70.參考答案：樣本經(jīng)適當處理后，使細胞通透性增加，讓探針進入細胞內(nèi)與組織、細胞中待檢測的核酸進行特異性結(jié)合形成雜交體，然后通過組織化學或免疫組織化學方法在被檢測的核酸原位形成的雜交信號，在顯微鏡或電子顯微鏡下對待測核酸進行細胞內(nèi)定位的方法。71.參考答案：錯誤72.參考答案：A73.參考答案：C74.參考答案：B75.參考答案： 優(yōu)點：大腸桿菌培養(yǎng)方便、操作簡單、成本低廉，基礎(chǔ)生物學、分子遺傳學等方面的背景知識清楚，對其基因表達調(diào)控的分子機理也比較了解，而且歷經(jīng)二十年的基因工程實踐，大腸桿菌已發(fā)展成為一種安全的基因工程實驗體系，有多種適用的寄主菌株和載體系列，大腸桿菌易于進行工業(yè)化批量生產(chǎn)。 缺點：在通常情況下，細菌的RNA聚合酶不能識別真核的啟動子；許多真核基因的蛋白質(zhì)產(chǎn)物需要經(jīng)過翻譯后的加工修飾，如正確的折疊和組裝，而細菌中通常并沒有這樣的修飾機制，從而可能導致真核基因在大腸桿菌中的翻譯產(chǎn)物無法產(chǎn)生有活性的蛋白；外源真核基因所表達的蛋白質(zhì)分子往往能夠被細菌的蛋白酶識別，并被當做“異已分子”降解掉。第2卷參考答案一.參考題庫1.參考答案：C2.參考答案：A3.參考答案： 順式作用元件為一些能與DBP結(jié)合的特定序列的DNA片段，決定轉(zhuǎn)錄起始位點和RNA聚合酶的轉(zhuǎn)錄效應(yīng)，按功能可分為啟動子、增強子、沉默子、衰減子和終止子等DNA序列片段。 啟動子：真核基因啟動子是基因表達時與基因轉(zhuǎn)錄起始有關(guān)的5’端DNA序列，包括在-30bp區(qū)富含有AT的典型TATA盒（框）（TATA?box）和在-70～-80bp區(qū)域（在TATA?box上游）啟動元件。前者是引導RNA聚合酶Ⅱ在正確起始位點轉(zhuǎn)錄mRNA所必需的DNA序列，即保證轉(zhuǎn)錄的精確起始。后者UPE是調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄起始頻率和提高轉(zhuǎn)錄效率的調(diào)控序列，后者的序列常為GGTCAAT和GGGCCC序列，稱為GC?box，它們經(jīng)協(xié)同作用，以調(diào)控基因的轉(zhuǎn)錄效率。 增強子：增強子是使啟動子的基因轉(zhuǎn)錄效率顯著提高（增強轉(zhuǎn)錄活性）的一類順式作用元件，其本身不具有啟動子活性，是由多個獨立的，具有特征性的核苷酸序列所組成。其基本的核心組件常由812bp組成，以單拷貝或多拷貝串聯(lián)的形式存在。增強子一般有以下特性：⑴增強子能提高同一條DNA鏈上基因轉(zhuǎn)錄的速率；⑵增強子對同源或異源基因都有效?⑶增強子的位置可在基因5’上游、3’下游或內(nèi)部；⑷無方向性，增強子從5’→3’或是從3’→5’均可對啟動子發(fā)揮作用；⑸增強子可遠離轉(zhuǎn)錄起始點；⑹增強子一般無基因特異性，對各種基因啟動子均有作用，但具有組織或細胞特異性。 典型的增強子首先發(fā)現(xiàn)于SV40的病毒中，為SV40的早期基因增強子，約200bp，含2個72bp的重復序列，位于早期啟動子上游，增強子可促使病毒基因轉(zhuǎn)錄效率提高100倍，因此具有這一增強子的載體已得到了廣泛的應(yīng)用。些年來，來自于Rous肉瘤病毒基因長末端重復序列和人類巨細胞病毒（CMV）增強子也已被廣泛用于真核細胞的基因表達。增強子能增強啟動子的轉(zhuǎn)錄能力，有效的增強子能促進轉(zhuǎn)錄達10倍或100倍以上，在某些情況下，表達產(chǎn)物可能具有細胞毒效應(yīng)。因此，最好使用一種可被外界刺激信號誘導表達外源基因的誘導型啟動子，誘導型啟動子有熱休克啟動子、金屬硫蛋白啟動子、糖皮質(zhì)激和固醇類激素誘導的啟動子，熱休克啟動子的誘導可通過提高細胞的培養(yǎng)溫度使啟動子轉(zhuǎn)錄水平提高，重金屬離子可有效地促進金屬硫蛋白啟動子的轉(zhuǎn)錄活性。 R.NA剪接信號：多數(shù)高等的真核基因都含有內(nèi)含子序列，在細胞核內(nèi)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的前體mRNA要經(jīng)過剪接過程去掉內(nèi)含子順序后才成為成熟的mRNA分子。雖然許多基因的cDNA轉(zhuǎn)入哺乳類動物細胞后，其表達不受有或無內(nèi)含子的影響，但有些基因在真核細胞中表達需要有內(nèi)含子的存在。一般來說，在哺乳動物細胞的表達載體中最好有一段內(nèi)含子序列的剪接信號，以提供外源基因cDNA表達的需要。常用的內(nèi)含子剪接序列有SV40的小t抗原的內(nèi)含子序列等。 負調(diào)控元件：沉默子和衰減子是抑制基因轉(zhuǎn)錄的DNA序列，稱為負調(diào)控元件，它們與反式作用因子相互結(jié)合而起作用。這些負調(diào)控元件不受距離和方向的限制，并可對異源基因表達起作用。 終止子和polyA信號：核基因轉(zhuǎn)錄的確切終止信號和終止機制，目前尚不清楚，終止過程不是在RNA聚合酶指導下完成的，在不明機制下發(fā)生轉(zhuǎn)錄終止?，F(xiàn)在已發(fā)現(xiàn)模板DNA分子的3’端有轉(zhuǎn)錄終止信號序列，稱終止子。通常由轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的具有polyA尾的基因終止信號是在多聚腺苷酸化位點下游的一段長度為數(shù)百個堿基的DNA區(qū)域內(nèi)的G/T簇，例如在SV40中的AGGTTTTTT的DNA序列為終止轉(zhuǎn)錄調(diào)控元件。一般轉(zhuǎn)錄終止子為發(fā)夾結(jié)構(gòu)的反向重復序列?，F(xiàn)在基因工程表達載體上所使用的轉(zhuǎn)錄終止子都是病毒基因或細胞基因的3’端的一段序列，其中也包括3’端不翻譯區(qū)。如SV40小t抗原和β-球蛋白的轉(zhuǎn)錄終止片段常用于構(gòu)建真核基因表達載體。 在雙啟動子的表達載體中，啟動子的轉(zhuǎn)錄方向為同向時，上游啟動的轉(zhuǎn)錄由于會穿過下游啟動子，這樣就使得下游的轉(zhuǎn)錄受到極大的影響，造成下游轉(zhuǎn)錄水平的下降，但是如果在兩個啟動子間插入一個轉(zhuǎn)錄終止子后，上游啟動子對下游啟動子的影響就被消除了，這樣下游啟動子的表達量會有明顯提高。當兩個啟動轉(zhuǎn)錄方向相反時，基因表達可能會被轉(zhuǎn)錄形成的反義RNA所抑制，這時插入轉(zhuǎn)錄終止子將會消除這種抑制作用。4.參考答案：D5.參考答案：白；陽；藍；陰6.參考答案：B7.參考答案：A,B8.參考答案： DHPLC的填料由一個具有惰性物化性質(zhì)的固定相和PS-DVB微孔球共價連接而成，采用具有疏水性的又帶正電荷的TEAA作為“橋分子”，使DNA片段能夠被吸附在固定相上。DHPLC的流動相為有機溶劑乙氰，雙鏈DNA分子被吸附在固定相上，通過改變流動相中乙氰的濃度，不同片段長度的DNA分子被逐步洗脫，從而實現(xiàn)DNA片段的分離。洗脫下來的DNA片段一般通過紫外檢測，波長254nm，而不需要進行費時的凝膠電泳分析。 當柱溫柱溫>50℃時，根據(jù)雙鏈分子的序列進行分離，這時可用于雜合雙鏈分子與純合雙鏈分子的分離。當柱溫>70℃時，依據(jù)單鏈DNA分子的堿基組成和片段長短進行分離。9.參考答案：D10.參考答案：D11.參考答案：C,D,E,F12.參考答案：將待檢測的DNA樣品固定在固相載體上（硝酸纖維素膜或尼龍膜），與標記的核酸探針進行雜交，在與探針有同源序列的位置上顯示出雜交信號。通過Southern雜交可以判斷被檢測的DNA樣品中是否有與探針同源的片段以及該片段的長度。13.參考答案：D14.參考答案：B15.參考答案：指核酸溶液在260nm和280nm紫外波長下的吸光度的比值，根據(jù)比值來判斷核酸樣品有無蛋白質(zhì)和酚等的污染。16.參考答案：①核酸提取與純化②核酸的檢測與保存③核酸的凝膠電泳④核酸分子雜交。17.參考答案：C18.參考答案：B19.參考答案：B20.參考答案： 與正常功能的基因序列相似，但無轉(zhuǎn)錄功能或轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物無功能的基因稱假基因（pseudogene）。根據(jù)是否保留相應(yīng)功能基因的間隔序列（如內(nèi)含子），假基因分兩大類：一類保留了間隔序列，稱為非加工假基因（non-processedpseudogene），通常因基因的復制修飾，如點突變、插入、缺失和移碼突變而導致復制后的基因在轉(zhuǎn)錄和翻譯時出現(xiàn)異常，喪失正常功能，它與功能基因一般在同一染色體上，也稱復制型假基因（duplicatedpseudogene）。假基因中大多數(shù)則缺少間隔序列的稱為已加工假基因（processedpseudogene），主要是轉(zhuǎn)錄過程中mRNA以cDNA的方式重新整合進入基因組（很可能發(fā)生在生殖細胞中），在長期進化選擇過程中因為隨機突變積累而喪失功能，通常這種假基因無內(nèi)含子，兩邊有小的側(cè)翼定向重復序列（flankingdirectrepeat），3’端多具多聚腺苷酸尾。21.參考答案：C22.參考答案： 哺乳動物細胞基因組DNA抽提的主要方法有：酚提取法、甲酰胺解聚法、玻棒纏繞法和異丙醇沉淀法、磁珠吸附法等。23.參考答案：A,C24.參考答案：D25.參考答案：C26.參考答案：從瓊脂糖凝膠中回收DNA片段的方法主要包括DEAE-纖維素膜插片電泳法、電泳洗脫法、低熔點瓊脂糖凝膠挖塊回收法、冷凍擠壓法及現(xiàn)在有試劑盒供應(yīng)的以硅為基礎(chǔ)的純化系統(tǒng)等。27.參考答案： ⑴.引起突變?轉(zhuǎn)位可能引起多種基因突變。當轉(zhuǎn)位因子插入一個基因內(nèi)部，會引起這個基因的插入失活；當插入多順反子前端的基因中時，可引起下游的所有基因停止轉(zhuǎn)錄，因為轉(zhuǎn)位因子中含ρ依賴的轉(zhuǎn)錄終止信號；當插入染色體或質(zhì)粒中時，常引起缺失和倒位突變。 ⑵.引入新的基因?在插入位點上引入新的基因，如含有抗藥基因R質(zhì)粒的轉(zhuǎn)位因子，轉(zhuǎn)位到染色體中時，可在該部位出現(xiàn)抗藥性基因。若將帶有Amp+R質(zhì)粒的細菌與不含R質(zhì)粒的帶有Kan+轉(zhuǎn)座子的細菌進行接合，結(jié)果產(chǎn)生了Amp+?Kan+的細菌，并且能夠在含有氨芐青霉素及卡那霉素的培養(yǎng)板上生長。經(jīng)過轉(zhuǎn)位作用，在這種細菌內(nèi)產(chǎn)生Amp+及Kan+的質(zhì)粒，經(jīng)過再次接合作用，即可產(chǎn)生含Amp+?Kan+R質(zhì)粒細菌。 ⑶.引起生物進化?基因重排經(jīng)常發(fā)生，轉(zhuǎn)座作用是基因重排的重要機理之一，如通過轉(zhuǎn)座，可將兩個本來相隔遙遠的基因靠攏，從而進行協(xié)調(diào)的控制作用，這兩段基因順序經(jīng)過轉(zhuǎn)座作用連接在一起有可能在進化過程中產(chǎn)生新的蛋白質(zhì)。28.參考答案：A29.參考答案：A,B,C,D30.參考答案：D31.參考答案： 一般來說，第n次PCR循環(huán)的熒光信號強度（Rn）等于背景信號強度（RB）加上每個分子的熒光強度（即單位熒光強度RS與分子數(shù)目的乘積），用數(shù)學式表示如下：Rn=RB+XO（1+Ex）nRs式中：Rn代表熒光信號強度；RB代表背景信號強度；Xo代表起始模板拷貝數(shù)；Ex代表擴增效率；Rs代表單位熒光強度；N代表循環(huán)次數(shù)。 對每一個特定的PCR反應(yīng)來說，Ex、RT、RB、和Rs都是常數(shù)，所發(fā)Ct值與lgXo成反比，也就是說，Ct值與起始模板DNA的拷貝數(shù)（Xo）的對數(shù)成反比，起始DNA濃度每增一倍，Ct值減小一個循環(huán)。因此，Ct值的引入確保了實時熒光PCR定量的精確和嚴格。32.參考答案：C33.參考答案：A,B,C,D,E34.參考答案：B,C,E35.參考答案：錯誤36.參考答案：A37.參考答案：C38.參考答案：C39.參考