臨床實驗室生物安全培訓

關于臨床實驗室生物安全培訓一、術語和定義實驗室生物安全（Biosafety）是指為避免微生物和醫(yī)學實驗室各種活動中生物因子（例如：細菌、病毒、真菌、毒素以及含有感染性病毒的各種樣本）可能對人、環(huán)境和社會造成的危害，而采取的防護措施（硬件）和管理措施（軟件），以達到對人、環(huán)境和社會的安全防護目的的一種綜合行為。

（1）.氣溶膠：懸浮于氣體介質中的粒徑一般為0.001~1000um的固態(tài)或液態(tài)微小粒子形成的相對穩(wěn)定的分散體系。（2）.生物安全柜：具備氣流控制及高效空氣過濾裝置的操作柜，可有效降低實驗過程中產(chǎn)生的有害氣溶膠對操作者和環(huán)境的危害。第2頁,共45頁，2024年2月25日，星期天生物安全的目的主要是對人的保護工作人員同事及家人后勤服務人員環(huán)境第3頁,共45頁，2024年2月25日，星期天二.實驗室生物安全防護水平分級

將實驗室生物安全防護水平分為一級、二級、三級和四級，一級防護水平最低，四級防護水平最高：A.生物安全防護水平為一級的實驗室適用于操作在通常情況下不會引起人類或者動物疾病的微生物B.生物安全防護水平為二級的實驗室適用于操作能夠引起人類或者動物疾病，一般情況下對人、動物或者環(huán)境不構成嚴重危害，傳播風險有限，實驗室感染后很少引起嚴重疾病，并且具備有效治療和預防措施的微生物C.生物安全防護水平為三級的實驗室適用于操作能夠引起人類或者動物嚴重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動物與人、動物與動物間傳播的微生物D.生物安全防護水平為四級的實驗室適用于操作能夠引起人類或者動物非常嚴重疾病的微生物，以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物第4頁,共45頁，2024年2月25日，星期天三、臨床實驗室生物安全管理A.生物安全柜應安放在實驗室中的什么地方比較合適：1.遠離人員活動，物品流動以及可能會擾亂氣流的地方，避免放在離門口很近的地方。2.進入生物安全柜的低速率的定向氣流，極易受到干擾，包括人員走進生物安全柜所形成的氣流、打開窗戶、送風系統(tǒng)調整以及開關門等都可能造成影響。第5頁,共45頁，2024年2月25日，星期天B.生物安全柜性能檢測

1.個體防護能力

2.樣品保護能力

3.交叉污染防護能力第6頁,共45頁，2024年2月25日，星期天

C.個體防護裝備包括：眼鏡、口罩、帽子、防護衣、手套、鞋套等。第7頁,共45頁，2024年2月25日，星期天D.微生物危害評估：

1.當建設使用傳染性或有潛在傳染性材料的實驗室前，必須進行微生物危害評估。

2.確定對象微生物應在那一級的生物安全防護實驗室中進行操作。

3.制定相應的操作規(guī)程，實驗室管理制度和緊急事故處理方法，必須形成書面文件并嚴格遵守執(zhí)行。第8頁,共45頁，2024年2月25日，星期天實驗室生物安全防護的基本原則實驗室生物安全防護的內容包括安全設備、個體防護裝置和措施（一級屏障），實驗室的特殊設計和建設要求（二級屏障），嚴格的管理制度和標準化的操作程序及規(guī)程。應將每一特定實驗室從立項、建設到使用維護的全過程中有關生物安全防護綜合措施的內容編入各實驗室的生物安全手冊中。必須設有專職的生物安全負責人。生物安全防護實驗室根據(jù)不同的微生物和防護要求分為四個生物安全防護級別。第9頁,共45頁，2024年2月25日，星期天第10頁,共45頁，2024年2月25日，星期天安全設備和個體防護（一級屏障）安全設備和個體防護是確保實驗室工作人員不與致病微生物及其毒素直接接觸的一級屏障。生物安全柜是最重要的安全設備，形成最主要的防護屏障。實驗室應按要求分別配備Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級生物安全柜。所有可能使致病微生物及其毒素濺出或產(chǎn)生氣溶膠的操作，除實際上不可實施外，都必須在生物安全柜內進行。不得用超凈工作臺代替生物安全柜。第11頁,共45頁，2024年2月25日，星期天安全設備和個體防護（一級屏障）必要時實驗室應配備其它安全設備，如設置配有排風凈化裝置的排氣罩等，或采用其它不使致病微生物逸出確保安全的設備。實驗室所配備的離心機應在生物安全柜或其它安全設備中使用，否則必須使用安全密封的專用離心杯。必須給實驗室工作人員配備必要的個體防護用品，如個人防護服、防毒面具、安全眼鏡或眼罩。第12頁,共45頁，2024年2月25日，星期天一級生物安全防護實驗室一般無須使用生物安全柜等專用安全設備工作人員在實驗室應穿工作服，帶防護眼鏡工作人員手上有皮膚破損或皮疹時應戴手套安全設施和個體防護第13頁,共45頁，2024年2月25日，星期天一級生物安全防護實驗室工作過程中禁止非工作人員進入實驗室。接觸微生物或含有微生物的物品后，脫掉手套后和離開實驗室前要洗手禁止在工作區(qū)飲食、吸煙、處理隱形眼鏡、化妝及存儲食物標準微生物操作規(guī)程第14頁,共45頁，2024年2月25日，星期天一級生物安全防護實驗室使用機械移液器吸取液體，禁止口吸制定尖銳器具的安全操作規(guī)程按照實驗室安全規(guī)程操作，降低濺出和氣溶膠的產(chǎn)生每天至少消毒一次工作臺面，活性物質濺出后要隨時消毒所有培養(yǎng)物、廢棄物在運出實驗室前須進行滅活（如高壓）。需運出實驗室滅活的物品必須放在專用密閉容器內。標準微生物操作規(guī)程第15頁,共45頁，2024年2月25日，星期天

二級生物安全防護實驗室滿足一級實驗室(標準微生物操作規(guī)程)各款要求，在此基礎上特別注意制定出入制度實驗室人口貼上生物危險標志制定實驗室特定的生物安全操作規(guī)則每年一次最新安全培訓制度每年生物安全進行評估生物危險Ⅱ級特殊微生物操作規(guī)程第16頁,共45頁，2024年2月25日，星期天二級生物安全防護實驗室

特殊微生物操作規(guī)程禁止用手處理破碎的玻璃器具。使用塑料器材代替玻璃器材。培養(yǎng)基、組織、體液及其它具有潛在危險性的廢棄物須放在防漏的容器中儲存、運輸及消毒、滅菌。用過的針頭禁止折彎、剪斷、折斷、重新蓋帽，禁止用手直接從注射器取下。用過的針頭必須直接放入防穿透的容器中。××第17頁,共45頁，2024年2月25日，星期天二級生物安全防護實驗室工作人員應接受必要的免疫接種和檢測(如乙型肝炎疫苗，卡介苗等)嚴格執(zhí)行實驗室工作人員年度采血檢測HIV抗體和備案制度。實驗設備在運出修理或維護前必須進行消毒人員暴露于感染性物質時，及時向實驗室負責人匯報，并記錄事故經(jīng)過和處理方案特殊微生物操作規(guī)程第18頁,共45頁，2024年2月25日，星期天二級生物安全防護實驗室處理以下致病微生物時應在生物安全柜(Ⅱ級)中進行，包括:

高濃度大容量有噴濺可能性上述材料的離心操作如使用密封的離心機轉子或安全離心杯，且只在生物安全柜中開閉，可在實驗室中進行。Ⅱ級生物安全柜必須每年進行一次年度現(xiàn)場檢測。安全設施和個體防護第19頁,共45頁，2024年2月25日，星期天二級生物安全防護實驗室在實驗室中應穿著工作服或罩衫等防護服，不得穿著外出。用過的工作服應先在實驗室中消毒，然后統(tǒng)一洗滌或丟棄。當手可能接觸感染材料、污染的設備時應戴手套。如可能發(fā)生感染性材料的溢出或濺出，宜戴兩副手套。不得戴著手套離開實驗室，工作完全結束后方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用。安全設施和個體防護第20頁,共45頁，2024年2月25日，星期天四、各類緊急情況處理A.手部清洗消毒

1.推薦使用肘動式或者自動式洗手開關

2.流動水沖洗手部多次，然后用液體皂滴在手上，反復撮手，在用水徹底沖洗

3.清洗完畢再用干凈的紙巾或手巾擦干

4.可用75%的酒精擦手來清除雙手的輕度污染

5.在沒有洗手池的地方，可以使用含酒精的“免洗”手部清潔產(chǎn)品代替第21頁,共45頁，2024年2月25日，星期天B.刺傷、切割傷或擦傷應急處理：一沖二擠三消毒

1.保持鎮(zhèn)靜，立即停止實驗，脫掉手套。

2.用清水或肥皂水清洗傷口。

3.盡量擠出傷口處的血液，用碘伏或75%的酒精擦洗傷口適當?shù)陌?/p>

4.及時就醫(yī)，告知醫(yī)生受傷原因及可能的微生物污染，必要時要進行醫(yī)學處理。

5.向實驗室安全員報告，進行事故記錄。第22頁,共45頁，2024年2月25日，星期天C.生物安全柜內溢出處理

1.處理溢灑物時不要將頭伸入安全柜內，也不要將臉直接面對前操作口，而應處于前視面板的后方。

2.選擇消毒劑時需要考慮消毒劑對生物安全柜的腐蝕性。

3.如果溢灑的量不足1ml時，可直接用消毒劑浸濕的紙巾擦拭。

4.如溢灑量大或容器破碎，按操作規(guī)程消毒。

5.如果溢灑物流入生物安全柜內部，則視情況，如需要可對生物安全柜進行熏蒸。第23頁,共45頁，2024年2月25日，星期天D.衣物污染：

1.盡快脫掉最外層防護衣，并注意防止感染物質進一步擴散。

2.將已污染的防護服放入黃色垃圾袋內，待高壓滅菌

3.脫掉手套，到污染區(qū)出口洗手

4.更換防護服和手套

5.必要時對發(fā)生污染的地方進行消毒處理

6.如果內衣被污染，應立即脫掉易污染的衣物，消毒處理第24頁,共45頁，2024年2月25日，星期天E.皮膚粘膜被污染

1.感染性液體外溢到皮膚（1）立即停止工作，脫掉手套（2）用75%的酒精進行皮膚消毒（2）再用大量水沖洗

2.感染性液體濺入眼睛（1）立即停止工作，脫掉手套

(2)迅速到緩沖區(qū)用洗眼器沖洗（3）用生理鹽水沖洗

3.兩種情況都應做適當?shù)念A防治療和醫(yī)學觀察，并報告實驗室主任和院感科第25頁,共45頁，2024年2月25日，星期天五、離心機內有感染性物質破裂的處理A.非封閉離心機內帶有感染性物質離心管發(fā)生破裂：

1.離心機正在運行時發(fā)生破裂或懷疑發(fā)生破裂，應關閉電源，密閉30分鐘使氣溶膠沉淀，離心機停止后發(fā)生破裂，應立即蓋上蓋子密閉30分鐘。

2.帶結實的手套或口罩（避免吸入氣溶膠）

3.使用鑷子清理玻璃碎片，或用鑷子夾著的棉花來清理。

4.破碎的離心管及離心筒、轉軸或轉子都應放在耐腐蝕性的、對相關微生物具有殺滅作用的消毒劑內浸泡60分鐘以上。第26頁,共45頁，2024年2月25日，星期天

B.在可封閉的離心筒內離心管發(fā)生破裂：

1.如果懷疑封閉的離心筒內有管子破裂，應在生物安全柜內打開離心筒蓋子查看。

2.確有破裂時，松開離心筒蓋子，但不要打開，放入黃色垃圾袋，直接高壓滅菌。

3.或者采用化學消毒法：將離心筒及內容物放到對該種微生物有效的無腐蝕性消毒劑里浸泡60分鐘以上

4.離心杯在使用消毒劑浸泡后

5.應再用清水洗凈后干燥

6.向實驗室安全員報告

7.進行事故記錄第27頁,共45頁，2024年2月25日，星期天C.運輸途中發(fā)生泄漏的應急操作：

1.現(xiàn)將污染區(qū)域隔離，物管人員撤離

2.穿好防護裝備

3.可以用土、沙或其他不燃性物質吸收漏出物質，同時避免直接接觸

4.用吸收材料覆蓋溢灑物質，從外圍向中心傾倒適當量的消毒劑，使消毒劑與溢灑物混合并作用30-60分鐘

5.將污染材料置于防漏、防穿透的廢棄物溶劑中密封

6.對溢出區(qū)域再次清潔并消毒，并消毒手套和防護衣

7.所有處理材料和防護服都放入廢棄物溶器中密封

8.向主管部門報告溢出情況和消除污染情況。出現(xiàn)嚴重泄漏時要向當?shù)丶膊☆A防疾控中心報告。第28頁,共45頁，2024年2月25日，星期天六、微生物實驗室的消毒要求

1.實驗室如果發(fā)現(xiàn)微生物污染了實驗環(huán)境應立即停下實驗，用實驗前備好的消毒劑進行消毒處理。2.如實驗室被空氣和氣溶膠傳播的微生物污染，應立即關閉實驗室進行消毒處理。3.盛裝污染微生物實驗耗材的容器應有足量的消毒劑，用過的耗材立即侵泡在消毒劑中。4.實驗結束后應立即對實驗環(huán)境進行消毒處理，擦洗、消毒工作臺面、地面，開啟紫外線燈等照射1小時以上。生物安全3級和4級實驗室、層流實驗室應在實驗結束后繼續(xù)開啟空氣循環(huán)系統(tǒng)30分鐘以上。第29頁,共45頁，2024年2月25日，星期天5.實驗廢棄物應立即進行滅菌或消毒無害化處理。6.實驗人員在實驗結束后應立即清洗消毒雙手，必要時應洗澡，更衣。7.對需消毒的物品應采取徹底的消毒措施，不留死角。8.用消毒劑浸泡消毒時要保證消毒物品全部浸沒在消毒劑中。9.用消毒劑擦拭消毒時要保證所有需要消毒的表面都被均勻的擦拭到所有消毒方法均應保證消毒時間第30頁,共45頁，2024年2月25日，星期天11.要根據(jù)消毒對象和微生物的種類選擇合適的消毒和滅菌方法：（1）對受到細菌芽孢、真菌孢子和枝桿菌污染的物品，選用高水平消毒法或滅菌法。（2）對受到真菌、親水病毒、螺旋體、支原體、衣原體和病毒微生物污染的物品，選用中水平以上的消毒方法（3）對受到一般細菌和親脂病毒等污染的物品，可選用低水平或中水平消毒法（4）對存在較多有機物的物品消毒時，應加大消毒劑的使用劑量或延長消毒作用時間。（5）消毒物品上微生物污染特比嚴重時，應加大消毒藥劑的使用劑量和延長消毒作用時間。（6）選擇表面消毒方法，應考慮表面性質，光滑表面可選擇紫外線消毒器近距照射，或體液消毒劑擦拭；多孔材料表面可采用噴霧消毒法第31頁,共45頁，2024年2月25日，星期天八、常用消毒方法A.實驗室內空氣的消毒：

1.一般可加強開窗通風，自讓通風換氣，條件許可時采用排氣扇人工機械通風，做到每小時換氣10-15次。

2.紫外線燈管適用于室內空氣，物體表面的消毒。常用的室內懸吊式紫外線燈對室內空氣消毒時安裝的數(shù)量為平均1.5W每立方米，照射時間不少于30分鐘。

3.使用等離子空氣消毒器連續(xù)開機即可起到空氣消毒作用。第32頁,共45頁，2024年2月25日，星期天B.實驗室地面物體表面消毒：

實驗室、辦公室等場所地面要濕式拖掃，禁止干拖干掃?？捎?00ppm含氯消毒劑，拖把應專用，污染區(qū)和清潔區(qū)不得混用。第33頁,共45頁，2024年2月25日，星期天C.物體表面的消毒：

1.實驗臺面、桌子、椅子、凳子、床頭柜、門把手、實驗記錄夾等可用有效氯為1.0g/L~2.0mg/L的含氯消毒劑擦拭消毒。

2.若實驗室臺面等明顯被傳染性標本污染，應立即用有效氯為1.0g/L~2.0g/L的汗氯消毒劑噴灑于污染表面，保持30~60min。第34頁,共45頁，2024年2月25日，星期天D.一般實驗器材的消毒：

1.凡直接或間接接觸臨床標本或實驗微生物的器材均應視為有傳染性，均應作消毒處理。金屬器材、玻璃器皿可用壓力蒸汽和干燥滅菌的方法使用于耐高溫、高濕的醫(yī)用器械和物品的滅菌。

2.玻璃器材使用過的玻璃吸管、試管、離心管、玻片、玻璃棒、三角瓶和平皿等應立即浸入有效氯為2.0g/L的含氯消毒劑中1小時以上，消毒后用超聲波清洗的方法洗凈瀝干，使用前再進行高壓滅菌處理。第35頁,共45頁，2024年2月25日，星期天檢驗科在醫(yī)院感染管理中的作用1.承擔我院清潔、消毒與滅菌效果監(jiān)測工作：空氣、物表、手、醫(yī)療用品、使用中的消毒劑等。2.開展病原菌耐藥監(jiān)測，為抗菌藥物臨床使用提供指導。3.對醫(yī)院感染危險因素進行監(jiān)測，為醫(yī)院感染性病例提供病原學診斷依據(jù)。4.術前檢測：乙肝、丙肝、梅毒、艾滋病等相關病原學檢查，避免醫(yī)源性感染。第36頁,共45頁，2024年2月25日，星期天檢驗科自身醫(yī)院感染控制檢驗科本身也是醫(yī)院感染的高?？剖?，在標本接收、處理、檢測等環(huán)節(jié)中均易導致醫(yī)院感染的發(fā)生；檢驗科的環(huán)境，如：工作臺面、地面，甚至檢驗報告單均可能含有大量病原微生物；檢驗科產(chǎn)生的醫(yī)療廢物中病原體的培養(yǎng)基、標本和菌毒種保存液都是高危險廢物；檢驗科開展細菌耐藥性分析，需要購進各種標準菌株，菌毒種的保存、使用、銷毀等過程可能產(chǎn)生自身感染或者交叉感染?？傊瑱z驗科自身感染控制也是院感管理的一個重要環(huán)節(jié)

第37頁,共45頁，2024年2月25日，星期天檢驗科醫(yī)院感染質量管理內容1.組織管理：規(guī)章制度和工作流程等2.環(huán)境管理：環(huán)境布局和手衛(wèi)生設施等3.手衛(wèi)生與職業(yè)防護：標準預防執(zhí)行情況等4.消毒隔離：無菌操作、消毒隔離制度執(zhí)行情況等5.臨床微生物實驗室管理：醫(yī)院感染病原微生物的培養(yǎng)、分離鑒定、藥敏試驗及特殊病原體的耐藥性監(jiān)測6.血庫的管理：對儲血柜進行生物學監(jiān)測等7.衛(wèi)生學監(jiān)測：各項監(jiān)測記錄等8.醫(yī)療廢物管理：按規(guī)定分類放置，密閉保存、運送、封口、交接登記等第38頁,共45頁，2024年2月25日，星期天檢驗科院感防控基本知識

檢驗科空氣消毒:紫外線或空氣消毒機檢驗科物體表面消毒：應保持清潔、干燥，每天進行消毒，遇明顯污染隨時去污與消毒，物體表面和地面消毒采用500mg/L有效氯的含氯消毒液擦拭或拖