生物必修一-實驗：檢測生物組織中的糖類-脂肪和蛋白質(zhì)

☆思考討論

你能舉例說出哪些植物器官的細胞中富含糖類,脂質(zhì)和蛋白質(zhì)嗎?植物葉肉細胞.果實細胞和種子細胞中通常含有較多的糖類、脂質(zhì)和蛋白質(zhì)禾谷類果實、種子：甘蔗的莖、甜菜的根：花生、芝麻種子：大豆種子：蔗糖(二糖)淀粉(多糖)脂質(zhì)2021/3/29星期一1檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)實驗第二章組成細胞的分子2021/3/29星期一2

應(yīng)用某些化學(xué)試劑能夠使生物組織中的有關(guān)有機化合物產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。實驗原理還原糖（葡萄糖、果糖、麥芽糖）+斐林試劑→磚紅色沉淀Cu2O脂肪+

蘇丹Ⅲ→橘黃色

蘇丹IV→紅色蛋白質(zhì)+雙縮脲試劑→紫色絡(luò)合物實質(zhì)：在堿性條件下，蛋白質(zhì)與Cu2+反應(yīng)生成紫色或紫紅色絡(luò)合物。2021/3/29星期一3基本步驟選材→樣液制備→加入試劑→顏色反應(yīng)

→觀察→結(jié)果→結(jié)論選材的原則實驗現(xiàn)象明顯（富含檢測之物，避免干擾）；便于處理，易獲得；經(jīng)濟節(jié)約；2021/3/29星期一4實驗一：還原性糖的鑒定1、選材：

含糖較高、顏色為白色或近于白色的植物組織，蘋果、梨最好。2、制樣：

蘋果切塊→研磨→過濾→濾液4、檢測：

3、試劑：

甲液：0.1g/mLNaOH

乙液：0.05g/mLCuSO4

組織樣液（2ml）→斐林試劑（1ml）→振蕩混勻→50℃~65℃水浴加熱2min；

→觀察試管中溶液顏色的變化2021/3/29星期一5實驗一：還原性糖的鑒定2021/3/29星期一6注意事項1.斐林試劑不穩(wěn)定，需混勻后使用！2.本實驗對試管中的溶液進行加熱時，試管底

部不要接觸燒杯底部；3.另外，試管口不要朝向?qū)嶒炚?，以免沸騰的

溶液沖出試管，造成燙傷。實驗一：還原性糖的鑒定2021/3/29星期一7還原糖的檢測結(jié)果2021/3/29星期一8檢測方法實驗二：脂肪的鑒定方法一：用蘇丹染液檢測組織樣液方法二：制作子葉臨時切片，顯微觀察子葉細胞的著色情況。特別提醒：

實驗用的花生種子需提前浸泡3-4h,浸泡時間太短，不易切片;浸泡時間太長，則組織太軟，切下的薄片不易成形。2021/3/29星期一9取材：花生種子(浸泡3～4h），將子葉削成薄片制片①取最理想的薄片②在薄片上滴蘇丹Ⅲ染液（2～3min）③去浮色（如何去浮色）④制成臨時裝片實驗二：脂肪的鑒定1-2滴體積分數(shù)為50%的酒精溶液觀察低倍鏡下尋找到已著色的圓形小顆粒，然后用高倍鏡觀察結(jié)果及結(jié)論：圓形小顆粒呈橘黃色，說明有脂肪存在。2021/3/29星期一10脂肪的檢測結(jié)果2021/3/29星期一111、選材：

2、制樣：

4、檢測：

3、試劑：

實驗三：蛋白質(zhì)的鑒定

浸泡1-2天的黃豆種子（或用豆?jié){）或用雞蛋蛋白黃豆浸泡切片→研磨→過濾→濾液A液：0.1g/mLNaOH

B液：0.01g/mLCuSO4

組織樣液（2ml）→雙縮脲試劑A

（1ml）

→雙縮脲試劑B

（4滴）→觀察溶液顏色的變化2021/3/29星期一12實驗三：蛋白質(zhì)的鑒定2021/3/29星期一13以造成堿性環(huán)境思考：為什么要先加入A液再入B液？注意事項：1、如果用雞蛋清，應(yīng)加以稀釋，若稀釋不夠，與雙縮脲試劑發(fā)生反應(yīng)后會粘固在試管內(nèi)壁上，使反應(yīng)不徹底，且試管不易洗干凈。2、鑒定之前,可以留出一部分樣液，以便與鑒定后的樣液的顏色變化作對比,這樣可以增強說服力。作對照2021/3/29星期一14蛋白質(zhì)的檢測結(jié)果2021/3/29星期一15成分待側(cè)樣品實驗記錄2021/3/29星期一161、使用雙縮脲試劑時為什么B液只能加3～4滴而不能過量？

過量的雙縮脲試劑B會與試劑A反應(yīng)，使溶液呈藍色，而掩蓋生成的紫色。2、為什么斐林試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用，不能放置太久？

時間太長，Cu(OH)2懸濁液就沉淀在試管底部而無法參與反應(yīng)。深化2021/3/29星期一17比較斐林試劑與雙縮脲試劑不同點0.1g/mlNaOH蛋白質(zhì)等量混合，現(xiàn)配現(xiàn)用先加A液1ml,創(chuàng)