糖尿病的實驗室檢

糖尿病的實驗室檢查

2021/3/29星期一1糖尿?。╠iabetesmellitus，DM）由遺傳和環(huán)境因素共同引起的一組以糖代謝紊亂為主要表現(xiàn)的臨床綜合征。2021/3/29星期一2分類1型糖尿病2型糖尿病其他特殊類型糖尿病妊娠糖尿病2021/3/29星期一3診斷標(biāo)準(zhǔn)（WHO，1999）癥狀+隨機血糖≥11.1mmol/L

空腹血糖≥7.0mmol/L75g葡萄糖負(fù)荷后2小時血糖≥11.1mmol/L2021/3/29星期一4實驗室檢查OGTT-胰島素（或C-肽）釋放試驗HbA1c胰島自身抗體尿系列蛋白2021/3/29星期一51.禁食12-14小時，早晨空腹采抗凝靜脈血2ml，測血糖，

口服75克葡萄糖（溶入200-300ml水中），3-5分鐘

內(nèi)全部服完，記錄開始服糖時間，在服糖后2小時

（2小時的血糖值是診斷糖耐量異?；蛱悄虿〉闹匾?/p>

標(biāo)）采抗凝靜脈血2ml，測血糖，必要時可采服糖后

第1、3、4小時的血。一、口服葡萄糖糖耐量試驗（OGTT）2021/3/29星期一62．正常參考值：

空腹靜脈血漿血糖﹤6.1mmol/L

服糖2小時靜脈血漿血糖﹤7.8mmol/L

3．注意事項和影響因素：

⑴試驗中禁用茶、咖啡、食物和乙醇，禁煙，可站立、

慢走和端坐，不能激烈活動。

⑵對糖代謝有影響的主要藥物包括噻嗪類利尿劑、β受體

阻斷劑、口服避孕藥、甲狀腺激素、煙酸、利福平和

水楊酸等，試驗前應(yīng)停用3天以上，正在服用糖皮質(zhì)激素

者不適于作糖耐量試驗。一、口服葡萄糖糖耐量試驗（OGTT）2021/3/29星期一7

⑶病人無急性疾病和影響試驗的慢性疾病，每天至少攝入

碳水化合物150g，3天以上。

⑷如已診斷糖尿病，可不作該試驗（除非為作胰島素或C肽釋

放試驗）。

⑸兒童服葡萄糖按每公斤體重1.75g計算，總量不超過75g。

⑹血糖測定采用葡萄糖氧化酶法，血清與血漿血糖無明顯差別，

采血后應(yīng)盡早測血糖，不要超過3時，否則血糖會降低。

⑺根據(jù)WHO糖耐量試驗要求，葡萄糖應(yīng)是75g無水葡萄糖

或82.5g含一分子水的葡萄糖。

⑻由于受體內(nèi)吸收等因素的影響糖耐量試驗的結(jié)果重復(fù)性較差。一、口服葡萄糖糖耐量試驗（OGTT）2021/3/29星期一82．試驗方法：

⑴3．正常參考值（化學(xué)發(fā)光免疫測定法）：

采用75克葡萄糖法同糖耐量試驗。

⑵采用饅頭餐法，空腹采靜脈血后，吃2兩饅頭（100克面粉）

空腹胰島素6－27mIU/L，胰島素濃度在服糖后（或饅頭

餐后）0.5-1小時達(dá)高峰，可比空腹胰島素濃度高數(shù)倍至10倍，

3小時后降至接近正常水平。

二、胰島素釋放試驗2021/3/29星期一94．注意事項和影響因素：

⑴如已確診為糖尿病，為了解胰島功能可考慮用饅頭餐試驗，

⑵對糖耐量試驗有影響的藥物和疾病同樣會影響胰島素釋放

試驗。

⑶試驗當(dāng)天早上不能使用降糖藥物和胰島素。

⑷有些藥盒不能區(qū)分胰島素原和胰島素原裂解產(chǎn)物，注射外源

性胰島素產(chǎn)生的胰島素抗體可干擾胰島素測定。

⑸正在使用胰島素的病人，特別是中長效胰島素，會影響測定

結(jié)果（測定值包括了內(nèi)源性和外源性胰島素），應(yīng)測定C-肽

水平。

⑹糖尿病人的胰島β細(xì)胞功能受糖尿病類型、體重、病程和

血糖高低等因素的影響。二、胰島素釋放試驗2021/3/29星期一10

5．臨床意義和應(yīng)用：

⑴用于了解胰島β細(xì)胞的功能，協(xié)助糖尿病的分型和指導(dǎo)治療。

典型1型糖尿病胰島素分泌曲線低平，

2型糖尿病胰島素分泌與病程、體重和血糖高低關(guān)系密切，

病程短、肥胖和血糖控制好者，胰島素分泌曲線有一定峰值，

但峰值后延。

病程長、消瘦和血糖控制差者，胰島素分泌曲線低平。

⑵用于胰島β細(xì)胞瘤的診斷，胰島β細(xì)胞瘤病人有空腹低血糖

和不適當(dāng)增高的胰島素水平。

⑶胰島素自身免疫綜合征時胰島素水平較高，體內(nèi)同時存在

胰島素自身抗體。

二、胰島素釋放試驗2021/3/29星期一11

1．原理：同胰島素釋放試驗。

2．試驗方法：

⑴75克葡萄糖法見糖耐量試驗。

⑵饅頭餐試驗見胰島素釋放試驗。

⑶胰高血糖素刺激試驗，胰高血糖素可刺激胰島β細(xì)胞分泌

胰島素，其方法如下，清晨空腹靜脈注射1mg胰高血糖素，

在注射前和注射后6分鐘采靜脈血測血糖和C肽水平。

三、C肽釋放試驗2021/3/29星期一123．正常參考值（化學(xué)發(fā)光免疫測定法）：

空腹C肽298－1324pmol/L，

⑴正常人采用75克葡萄糖法或饅頭餐試驗，C肽濃度在服糖后

（或饅頭餐后）0.5-1小時達(dá)高峰，可比空腹C肽濃度高3-5倍，

3小時后降至接近正常水平。

⑵胰高血糖素刺激后C肽峰值在6分鐘左右。

4．注意事項和影響因素：

⑴見胰島素釋放試驗。

⑵胰高血糖素刺激試驗禁用于對其成分過敏者和疑有腎上腺

腺瘤者，空腹血糖＜7mmol/L時試驗結(jié)果不好分析，胰高血

糖素刺激試驗與75克葡萄糖法或饅頭餐試驗比較重復(fù)性好、

時間短和不受慢性高血糖的影響。三、C肽釋放試驗2021/3/29星期一13

5．臨床應(yīng)用與分析：

⑴了解胰島β細(xì)胞的分泌功能,協(xié)助糖尿病的分型,特別是

正在使用胰島素的病人。

⑵幫助指導(dǎo)用藥和胰島素的使用，有報告認(rèn)為胰高血糖素

刺激后C肽水平＜600pmol/L時應(yīng)考慮用胰島素治療。

三、C肽釋放試驗2021/3/29星期一14HbA1cHbA1c是葡萄糖分子和血紅蛋白A某些部位分子經(jīng)緩慢而不可逆非酶促反應(yīng)而形成的產(chǎn)物2021/3/29星期一15血紅蛋白的糖基化Glucoseentersredbloodcellswhereitreactswiththehemoglobin2021/3/29星期一16

成人糖化和非糖化的血紅蛋白HbHbA0HbA1HbA1aHbA1bHbA1cHbA(

??)HbA2(

)HbF(

)97%0.5%2.5%AdultHbFetalHbNon-

glycatedGlycatedIsincreasedinpatients

with?-thalassemia,whileHbA1cis

reduced;inthiscaseGHbshouldbemeasured6%94%-mainglycohemoglobin-usedsince>20years

forglycemiccontrolwithHPLC5%A1aandA1b:

concentration

verylow2021/3/29星期一17

HbA1c形成的動力學(xué)壽命：120days.50%的HbA1c值與過去30天內(nèi)的平均血糖水平相關(guān)40%的HbA1c值與過去31－90天平均血糖水平相關(guān).10%HbA1c與過去91－120天平均血糖水平相關(guān).2021/3/29星期一18檢測方法陽離子交換樹脂微柱層析法

HPLC電泳法親和色譜微柱法放免法免疫比濁法免疫競爭抑制法2021/3/29星期一19影響因素

血紅蛋白分子病、地中海貧血、溶血性貧血、懷孕等紅細(xì)胞壽命縮短，從而糖化血紅蛋白的量降低；腎功能不全、慢性酒精中毒等減慢HB的代謝，使其壽命延長，從而使糖化血紅蛋白的量增加。2021/3/29星期一20診斷：優(yōu)點比血糖檢測穩(wěn)定性好，精確度高，實驗室變異系數(shù)小個體內(nèi)變異率小，日間差僅<2%（FPG日間差為12%-15%）不受急性（如應(yīng)激、疾病相關(guān)）血糖波動的影響；無需空腹或特定時間取血，檢測更便捷血中濃度在取血后保持相對穩(wěn)定（靜脈血糖濃度隨血樣留置時間延長而逐漸下降）HbA1c是反映慢性血糖水平的穩(wěn)定指標(biāo)，更符合糖尿病定義2021/3/29星期一21診斷：缺點一些血紅蛋白亞型（如HbS、HbC、HbF、HbE等）會干擾HbA1c檢測，目前許多檢測方法都可對大部分常見血紅蛋白亞型進行校正，也可采用不受血紅蛋白亞型影響的試劑任何改變紅細(xì)胞壽命的因素都將導(dǎo)致HbA1c結(jié)果不準(zhǔn)確，根據(jù)臨床情況，如果解釋HbA1c結(jié)果有疑問，應(yīng)使用傳統(tǒng)診斷方法進行檢測（如FPG、2HPG）一些臨床少見的情況（如進展迅速的1型糖尿病），HbA1c可能無法“趕上”急性血糖變化的速度，應(yīng)根據(jù)癥狀及血糖來診斷糖尿病，盡管其HbA1c未達(dá)到糖尿病診斷水平；一些地區(qū)不能承受將HbA1c作為常規(guī)檢查的費用，只能用點血糖測定。2021/3/29星期一22胰島素自身抗體A.1型糖尿病自身免疫抗原及抗體B.常用測定方法C.臨床意義2021/3/29星期一23A.1型糖尿病自身抗原及抗體1）GAD65與GADA（glutamicaciddecarboxyaseantibody,GADA）；2）IA-2與IA-2As（proteintyrosinephosphatase-likeproteinantibodies,IA-2As）3）胰島素（Insulin)與IAA(insulinautoantibody,IAA)及IA（insulinantibody）4）ICAs（isletcellantibodies,ICAs）所對應(yīng)的抗原5）其他：目前性質(zhì)還不清楚的蛋白分子。2021/3/29星期一24B.抗體的檢測方法及原理抗體的檢測方法有多種，較為常用的方法有：ELISA（酶聯(lián)免疫吸附法）：RIA（放射免疫法，放射配體檢測法，放射結(jié)合檢測法）：免疫組化法及間接免疫熒光法：2021/3/29星期一25C.自身抗體檢測的臨床意義1）對1型糖尿病的診斷與分型有重要意義在新發(fā)的1型糖尿病血清中可以檢測到多種自身抗體，這對診斷1型糖尿病有重要作用。2021/3/29星期一26

2）自身抗體對成人遲發(fā)性1型糖尿病的診斷意義

成人遲發(fā)性1型糖尿?。↙ADA)是1型糖尿病的一種，目前對其診斷指標(biāo)尚未完全統(tǒng)一。一般指發(fā)病年齡>35歲，發(fā)病時沒有酮癥，發(fā)病半年內(nèi)不需要胰島素治療，但起病后β－功能逐步衰減，一般在5－6年后大多（94%)需要都需要胰島素治療。病理上亦表現(xiàn)為胰島炎。發(fā)病時自身抗體的檢測對LADA的診斷具有重要作用，有人認(rèn)為自身抗體陽性是診斷LADA的必備條件。2021/3/29星期一27

a)5%－10％的2型糖尿病自身免疫抗體陽性；

b)58％的LADA表現(xiàn)為單一抗體陽性；

c)51％成年發(fā)病的1型糖尿病為單一抗體陽性；只有14％的兒童糖尿病為單一抗體陽性，LADA的抗體滴度明顯低于典型的1型糖尿病。

d)IA-2A在LADA檢出率低，幾乎與其他抗體同時存在。

2021/3/29星期一283)自身抗體檢測對1型糖尿病的預(yù)報作用1）自身抗體在1型糖尿病的前期就存在，而且研究發(fā)現(xiàn)自身抗體陽性者以后發(fā)生1型糖尿病的機率遠(yuǎn)高于自身抗體陰性者，因此自身抗體的檢測在預(yù)測1型糖尿病中被廣泛采用。2）研究表明無論在1型糖尿病的1級親屬還是在普通人群（兒童）中，1型糖尿病只發(fā)生在那些最初有多個抗體陽性者，目前大多報道認(rèn)為如果初查時有2個以上抗體陽性，那么6年后發(fā)生1型糖尿病的可能是50％；在多項大規(guī)模的前瞻性研究中均發(fā)現(xiàn)最初自身抗體檢測陰性者在隨訪6－8年后不發(fā)現(xiàn)1型糖尿病。3）IA－2As和GADA是最常用的作為篩查的第一線抗體。2021/3/29星期一294)自身抗體與糖尿病的治療1）典型1型糖尿病發(fā)病即需要胰島素治療，因此自身抗體對其治療指導(dǎo)作用很小；2）對成人發(fā)病的糖尿病，自身抗體的檢測可以預(yù)告其胰島β細(xì)胞功能衰竭的發(fā)生，因此在這類病人早期測定自身抗體，及時采取適當(dāng)措施，可能保護殘存的β－細(xì)胞，起到穩(wěn)定病情的作用。2021/3/29星期一305)自身抗體與1型糖尿病的預(yù)防預(yù)報1型糖尿病的目的是預(yù)防其進一步發(fā)展為糖尿病自身抗體的檢測可以預(yù)報1型糖尿病，從而為發(fā)現(xiàn)高危人群提供了手段在動物實驗，多種方法可以預(yù)防1型糖尿病的發(fā)生但在人類預(yù)防1型糖尿病的發(fā)生還需要經(jīng)過艱苦的努力2021/3/29星期一31

小結(jié)

自身抗體的檢測對1型糖尿病的診斷與分型、預(yù)報及防治等方面均具有重要作用。2021/3/29星期一32尿系列蛋白測定糖尿病