設計性試驗生物化學

設計性試驗生物化學研究目的及意義：

小鼠糖尿病模型替代人類糖尿病患者用于治療糖尿病，明確四氧嘧啶造出標準Ⅰ型糖尿病的最佳劑量、以及明確治療的機理，最終用于臨床治療，為糖尿病患者帶去福音。本實驗的目的就是為了做出一種具有臨床相似性，重復性好的小鼠糖尿病個體。研究背景：

近年來，隨著我國社會經濟條件的改善，人民生活水平的不斷提高，飲食結構的改變，勞動強度的減低，人群平均壽命延長，應激狀態(tài)增多，以及糖尿病檢測手段的改進，與世界各國一樣，糖尿病患病率在逐漸上升，糖尿病對我國人民健康的影響日趨嚴重，我國雖屬世界上糖尿病低患病率國家，但糖尿病患者的人數(shù)已居世界第二位(僅次于美國)，增加速度驚人。據(jù)初步統(tǒng)計我國糖尿病患者總數(shù)約3600萬人，其中Ⅰ型糖尿病的患者占5%，總數(shù)約200萬人，我國Ⅰ型糖尿病的發(fā)病率約為0.7～1.0/10萬。我國Ⅱ型糖尿病的患病率增長較快，據(jù)1979年在我國30萬人口中的調查，糖尿病患病率為0.6%，1989年為2.02%，年均增長0.1%左右，1994年我國普查20萬人口，患病率已上升為2.5%，目前20～75歲人群中糖尿病患病率約為3%左右。糖耐量低減患者不低于3%。Ⅰ型糖尿病：胰島B細胞受損，常導致胰島素絕對缺乏，所以需要依賴胰島素治療，也就是說患者從發(fā)病開始就需使用胰島素治療，并且終身使用。原理是？為啥子？搞不懂？1.為什么選用用四氧嘧啶？

由于四氧嘧啶誘導的大鼠糖尿病模型與人類Ⅰ型即胰島素依賴性糖尿病類似，故四氧嘧啶是制備大鼠糖尿病模型的常用藥物。2.四氧嘧啶的作用機理是什么？其作用機制是通過產生超氧自由基選擇性地破壞胰島B細胞,使細胞內DNA損傷,同時激活多聚ADP核糖體合成酶的活性,從而使輔酶Ⅰ含量下降,兩者共同作用導致mRNA功能受損,引起細胞死亡，導致血中胰島素濃度下降及高血糖產生，形成胰島素依賴性Ⅰ型糖尿病。本文主要探討四氧嘧啶在糖尿病大鼠模型中的應用,通過研究大鼠兩種不同的給藥方式致糖尿病模型差異,旨在為制造穩(wěn)定的大鼠糖尿病模型選擇一種最佳方案。3.做出與臨床一致的Ⅰ型糖尿病模型需用四氧嘧啶的最佳濃度是多少？下面我們將一起去探究？？？？？？技術路線：

實驗材料的購買實驗前的準備實驗處理方法實驗數(shù)據(jù)的收集實驗后的照顧實驗結果的處理實驗所需材料：實驗動物雄性SD大鼠80只，清潔級，體重190-220g，購自四川醫(yī)學科學院實驗動物中心。試劑四氧嘧啶（alloxan，ALX，美國Sigma公司）使用

前用生理鹽水配成不同濃度。

生理鹽水購自四川科倫醫(yī)藥公司。儀器One2touch血糖儀（穩(wěn)豪型）和血糖試紙（產品

型號HEA-21525針+25片）,美國強生公司生產。注射器購自四川省廣元市康康醫(yī)療器械有限公司。自制簡易大鼠固定器

顯微鏡購于淘寶造模前準備：在開始造模前將80只大鼠隨機分成A,B,C,D,E五組，接著五組均禁食12h。

取四氧嘧啶分別配置成為體積分數(shù)為2%，4%，6%…

接著……E不作任何處理腹腔注射生理鹽水10ml腹腔注射2%的四氧嘧啶10ml腹腔注射4%的四氧嘧啶10ml腹腔注射6%的四氧嘧啶10mlDCBA

造模后在日照時間10h以上的陽光充足的條件下飼養(yǎng)一周。

一周后分別抽取大鼠眼眶靜脈或尾靜脈血液做血糖測定，或者收集大鼠尿液做血糖測定。造模成功指標上法測定的血糖濃度高于9.99mmol/L為造模成功的Ⅰ型糖尿病大鼠

123456…16A組B組C組D組E組組別每組大鼠

編號血糖濃度可行性分析：

大鼠易得到，容易飼養(yǎng)，在科研工作中被廣

泛利用。

手術器材和設備均為實驗室常用，四氧嘧

啶購買方便

。

大鼠為哺乳類動物，與人體的構造級生理

方面比較相似，具有高的的可靠性。實驗步驟簡單。統(tǒng)計學方法分析實驗結果：將實驗數(shù)據(jù)輸入電腦軟件采用SPSS15.0軟件進行統(tǒng)計學分析。P<0.05為差異有顯著性

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