藥物分析 第六章芳酸類非甾體抗炎藥物的分析

胺芳胺芳伯氨基1羧酸芳酸2第六章芳酸類非甾體抗炎藥物的分析

3第一節(jié)典型藥物的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)4一、苯甲酸類Benzoicacid很常用的食品防腐劑，有防止變質(zhì)發(fā)酸、延長(zhǎng)保質(zhì)期的效果5丙磺舒（pKa3.4）

Probenecid

羧苯磺丙胺（1）高尿酸血癥伴慢性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎及痛風(fēng)（2）抗生素治療的輔助用藥，可抑制抗生素的排出，提高血藥濃度，維持較長(zhǎng)時(shí)間。

6甲芬那酸

Mefenamicacid

本品為非甾體抗炎鎮(zhèn)痛藥具有鎮(zhèn)痛、解熱和抗炎作用用于輕度及中等度疼痛軟組織損傷性疼痛及骨骼、關(guān)節(jié)疼痛用于痛經(jīng)、血管性頭痛及癌性疼痛等

7理化性質(zhì)Physicochemicalproperties1.酸性

直接滴定法

苯甲酸、丙磺舒、甲酚那酸及片劑、膠囊雙相滴定法

苯甲酸鈉2.苯環(huán)及其取代基

特征的紫外和紅外吸收光譜3.三氯化鐵反應(yīng)

苯甲酸及鈉鹽4.丙磺舒

受熱分解生成亞硫酸鹽8二、水楊酸類

Salicylicacid水楊酸：抗真菌、止癢、溶解角質(zhì)等作用，常與苯甲酸等配成外用制劑，治療多種慢性皮膚病

阿司匹林：

1、鎮(zhèn)痛、解熱2、抗炎、抗風(fēng)濕3、關(guān)節(jié)炎

4、抗血栓

5、兒科用于皮膚粘膜淋巴結(jié)綜合征

9氧氫鍵的極性增強(qiáng)，使其酸性較苯甲酸強(qiáng)。10結(jié)核分枝桿菌所致的肺及肺外結(jié)核病。主要用作二線抗結(jié)核藥物。僅對(duì)分枝桿菌有效必須與其他抗結(jié)核藥合用。

重氮化偶合，亞硝酸鈉滴定11貝諾酯乙酰氨基苯酚乙酰水楊酸水解后重氮化偶合，用于鑒別羥肟酸鐵反應(yīng)用于鑒別12緩解各類疼痛，包括頭痛、牙痛、神經(jīng)痛、關(guān)節(jié)痛及軟組織炎癥等中等度疼痛

13二氟尼柳適用于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、以及各種輕、中度疼痛。

1415主要性質(zhì)鄰羥基苯甲酸1.酸性強(qiáng)于苯甲酸可用直接酸堿滴定法

阿司匹林片兩步滴定法2.羥基三氯化鐵反應(yīng)163.芳伯氨基

對(duì)氨基水楊酸鈉亞硝酸鈉滴定法測(cè)含量

貝諾酯水解后顯芳伯氨基的鑒別反應(yīng)174.易水解

特殊雜質(zhì)檢查阿司匹林、貝諾酯、雙水楊酯及片劑：檢查游離水楊酸水楊酸、對(duì)氨基水楊酸鈉和貝諾酯：檢查苯酚、間氨基酚、對(duì)氨基酚18三、其他芳酸類藥物氯貝丁酯高血脂、高脂血癥其降甘油三酯作用較降膽固醇作用明顯

19布洛芬

用于緩解輕至中度疼痛如頭痛、關(guān)節(jié)痛、偏頭痛、牙痛、肌肉痛、神經(jīng)痛、痛經(jīng)。也用于普通感冒或流行性感冒引起的發(fā)熱

20主要性質(zhì)布洛芬

酸性較弱，在中性乙醇中可被氫氧化鈉直接滴定氯貝丁酯油狀液體易水解

兩步滴定法測(cè)定含量羥肟酸鐵反應(yīng)鑒別21第二節(jié)鑒別試驗(yàn)

一、與鐵鹽反應(yīng)

具酚羥基或水解后能產(chǎn)生酚羥基的藥物

直接：水楊酸（鈉）、對(duì)氨基水楊酸鈉、雙水楊酯、二氟尼柳例：水楊酸鈉[鑒別]（1）取本品的水溶液，加三氯化鐵試液1滴，即顯紫堇色。23

間接：阿司匹林、貝諾酯

阿司匹林[鑒別]（1）取本品約0.1g，加水10ml，煮沸，放冷，加三氯化鐵試液1滴，即顯紫堇色。24

苯甲酸鹽的鐵鹽反應(yīng)25

丙磺舒的鐵鹽反應(yīng)（Ferricsalt)26

布洛芬的鐵鹽反應(yīng)布洛芬高氯酸羥胺DCC溫水中20min放冷高氯酸鐵紫色N,N′-雙環(huán)己基羧二亞胺27

氯貝丁酯的鐵鹽反應(yīng)氯貝丁酯鹽酸羥胺氫氧化鉀稀鹽酸1%三氯化鐵紫色28二、重氮化—偶合反應(yīng)

Diazotizationcouplingreaction

芳香第一胺類鑒別反應(yīng)

29

直接：對(duì)氨基水楊酸鈉間接：貝諾酯

30三、氧化反應(yīng)

Oxidizingreaction

甲芬那酸△黃色（綠色熒光）重鉻酸鉀深藍(lán)色棕綠色硫酸溶液31四、水解反應(yīng)Hydrolysisreaction

阿司匹林NaCO3水楊酸鈉醋酸鈉++▲過量硫酸酸化水楊酸白色沉淀醋酸臭氣+溶于醋酸銨試液熔點(diǎn)：156-161℃32水解反應(yīng)33

五.分解產(chǎn)物的反應(yīng)Catabolitereaction

苯甲酸鹽苯甲酸鈉▲H2SO4苯甲酸升華物34

含硫的藥物可分解后鑒別丙磺舒△SO2臭氣NaOH▲NaSO3SO42-HNO335六、紫外分光光度法UV1.測(cè)定λmax法2.測(cè)定λ

max和λmin3.規(guī)定λ

max和/或λmin下測(cè)定A3.不同最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)定A的比值

甲芬那酸：在251nm和350nm有最大吸收，A分別為0.69~0.74和0.56~0.60二氟尼柳：在251nm和350nm有最大吸收，A的比值為4.2~4.6之間36

七、紅外分光光度法IR

本書中收載的原料藥均采用紅外吸收光譜法鑒別373300-2300cm-1ν-OH—羧基和羥基1660cm-1νc=O—羧基1610、1570、1480、1440cm-1νC=C—苯環(huán)775cm-1δAr-H—苯環(huán)38八、薄層色譜法TLC主要對(duì)制劑進(jìn)行分離后鑒別例：二氟尼柳膠囊硅膠ＧＦ２５４為固定相四氯化碳－丙酮－冰醋酸（２０：２：１）為展開劑，在紫外燈下檢視，主斑點(diǎn)的位置與顏色應(yīng)與對(duì)照品的一致。39九、高效液相色譜法HPLC

在含量測(cè)定的色譜圖中，供試品溶液主峰的保留時(shí)間應(yīng)與對(duì)照品溶液主峰的保留時(shí)間一致40第三節(jié)特殊雜質(zhì)檢查

※一、阿司匹林中特殊雜質(zhì)的檢查Specifiedimpuritytest

水楊酸1.雜質(zhì)來(lái)源

生產(chǎn)中乙?；煌耆?/p>

貯存過程中水解產(chǎn)生合成工藝422.檢查方法

曾經(jīng)：對(duì)照法

原理水楊酸中游離酚羥基可與高鐵鹽反應(yīng)呈紫堇色，而阿司匹林結(jié)構(gòu)中無(wú)游離酚羥基，不能發(fā)生反應(yīng)

Chp2010:HPLC-UV法ODS柱303nm外標(biāo)法，不得過0.1%43方法：取本品0.1ｇ，加乙醇1ml溶解后，加冷水適量使成50ml，立即加新制的稀硫酸鐵胺溶液1ml，搖勻；30s內(nèi)如顯色，與對(duì)照液比較，不得更深。對(duì)照液的配制：精密稱取水楊酸0.1g加水溶解后加冰醋酸1ml，搖勻，再加水使成1000ml，搖勻；精密量取1ml,加乙醇1ml，水48ml與上述新制的稀硫酸鐵胺溶液1ml，搖勻44限量(Impuritylimits)原料：0.1%；阿司匹林片：0.3%；阿司匹林腸溶片：1.5%；阿司匹林栓：3.0%（HPLC）45溶液的澄清度（Clarity）

酚、苯酯類雜質(zhì)原理：根據(jù)雜質(zhì)和阿司匹林的酸性強(qiáng)弱不同，在碳酸鈉中的溶解度也有差異。雜質(zhì)不溶于碳酸鈉試液，阿司匹林可溶。

46酚乙酸苯酯水楊酸苯酯乙酰水楊酸苯酯方法：取阿司匹林樣品0.5０ｇ，加溫?zé)嶂良s４５℃的碳酸鈉試液１０ｍｌ溶解后，溶液應(yīng)澄清。47易炭化物檢查易被硫酸炭化呈色的低分子有機(jī)物方法：取供試品0.5g，緩緩加入至含硫酸[含H2SO494.5-95.5%(g/g)]5ml的比色管中，振搖使溶解，靜置15min后觀察，溶液如顯色，與對(duì)照液相比較，不得更深48對(duì)照液比色用氯化鈷液0.25ml比色用重鉻酸鉀液0.25ml比色用硫酸銅液0.40ml加水使成5ml49第四節(jié)含量測(cè)定一、酸堿滴定法Acid-basetitration1.直接滴定法pKa3～6▲阿司匹林Ch.P（2005）

取本品約0.4g，精密稱定，加中性乙醇（對(duì)酚酞指示液顯中性）20ml，溶解后，加酚酞指示液3滴，用氫氧化鈉滴定液（0.1mo1/L）滴定。每lml的氫氧化鈉滴定液（0.1mo1/L）相當(dāng)于18.02mg的C9H8O4。5152（1）測(cè)定方法及計(jì)算反應(yīng)摩爾比為1∶1

53（2）討論

①中性乙醇溶解阿司匹林乙醇對(duì)酚酞顯酸性，可消耗氫氧化鈉滴定液使結(jié)果偏高

“中性”指對(duì)酚酞顯中性54

②優(yōu)點(diǎn)：簡(jiǎn)便、快速。

缺點(diǎn)：酯鍵水解干擾（不斷攪拌、快速滴定）；酸性雜質(zhì)干擾（如水楊酸）

55③適用范圍不能用于含水楊酸過高或制劑分析，只能用于合格原料藥的含量測(cè)定阿司匹林、苯甲酸、水楊酸、二氟尼柳、雙水楊酯、布洛芬、甲酚那酸562.水解后剩余滴定法

利用阿司匹林酯結(jié)構(gòu)在堿性溶液中易于水解的特性，加入定量過量的氫氧化鈉滴定液，加熱使酯鍵水解，剩余的氫氧化鈉滴定液用硫酸滴定液回滴定57USP（29),加入氫氧化鈉滴定液（0.5mo1/L）50.0m1，混合，緩緩煮沸10min，放冷，加酚酞指示液，用硫酸滴定液（0.25mo1/L）滴定剩余的氫氧化鈉，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml的氫氧化鈉滴定液（0.5mol/l）相當(dāng)于45.04mg的C9H8O4。582NaOH（過量）＋H2SO4Na2SO4＋2H2O剩余滴定：水解：59

氫氧化鈉與阿司匹林反應(yīng)摩爾比為2∶1

優(yōu)點(diǎn)：消除了酯鍵水解的干擾

缺點(diǎn)：酸性雜質(zhì)干擾60

3.兩步滴定法

Two-steptitrationmethod

阿司匹林片阿司匹林腸溶片氯貝丁酯

61

中和：取本品10片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于阿司匹林0.3g），置錐形瓶中，加中性乙醇（對(duì)酚酞指示液顯中性）溶解后，振搖使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）至溶液顯粉紅色62第一步中和Neutralization63水解與測(cè)定再精密加氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）40m1，置水浴上加熱15分鐘并時(shí)時(shí)振搖，迅速放冷至室溫，用硫酸滴定液（0.05mol/L）滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每lml的氫氧化鈉滴定液（0.1mo1/L）相當(dāng)于18.02mg的C9H8O4。64第二步水解后剩余滴定

Hydrolysisanddetermination

水解剩余滴定2NaOH（過量）＋H2SO4Na2SO4＋2H2O65氫氧化鈉液與阿司匹林反應(yīng)摩爾比為1∶1本法消除了酸性雜質(zhì)的干擾降低了酯鍵水解的干擾66片劑含量測(cè)定結(jié)果的計(jì)算

67剩余滴定法

68氯貝丁酯：取本品2g，精密稱定（2.0631g），加中性乙醇10ml與酚酞指示液數(shù)滴，滴加氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）至粉紅色（0.25ml),再精密加氫氧化鈉滴定液（0.5mol/L）20ml，加熱回流加酚酞指示液數(shù)滴，用鹽酸滴定液（0.5mol/L，F(xiàn)=0.9950）滴定（消耗3.36ml），將滴定結(jié)果用空白實(shí)驗(yàn)校正（消耗20.34ml）。每1mL氫氧化鈉滴定液（0.5mol/L)相當(dāng)于121.4mg

氯貝丁酯。69

（1）為什么采用兩步滴定法（2）1分子氯貝丁酯消耗幾分子氫氧化鈉（3）中性乙醇對(duì)什么顯中性？怎樣制備：為什么要采用中性乙醇作溶劑？（4）計(jì)算含量？70二、亞硝酸鈉滴定法具芳伯氨基或潛在芳伯氨基（芳酰氨基水解或硝基還原）的藥物對(duì)氨基水楊酸鈉71

三.雙相滴定法

Diphasictitration

芳酸堿金屬鹽

如苯甲酸鈉Ch.P(2005)溶劑：水——乙醚72

取本品1.5g，精密稱定，置分液漏斗中，加水25m1、乙醚50ml及甲基橙指示液2滴，用鹽酸滴定液（0.5mo1/L）滴定，隨滴隨振搖，至水層顯橙紅色，分取水層，置具塞錐形瓶中，乙醚層用水5ml洗滌，洗液并入錐形瓶中,加乙醚20m1，繼續(xù)用鹽酸滴定液0.5mo1/L)滴定，隨滴定隨振搖，至水層顯持續(xù)的橙紅色。每1ml的鹽酸滴定液（0.5mol/L）相當(dāng)于72.06mg的C7H5NaO2。

苯甲酸苯甲酸鈉73乙醚

萃取生成的苯甲酸，使水相中的中和反應(yīng)進(jìn)行到底滴定中要強(qiáng)力振搖苯甲酸不斷被萃取入有機(jī)溶劑層，使滴定反應(yīng)完全，終點(diǎn)清晰。優(yōu)點(diǎn)消除了反應(yīng)產(chǎn)物的干擾74四、紫外分光光度法直接紫外分光光度法對(duì)照品法貝諾酯

吸收系數(shù)法貝諾酯片

丙磺舒片75原料藥對(duì)照品法76紫外分光光度法吸收系數(shù)法77

取本品10片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于丙磺舒60mg），置200m1量瓶中，加乙醇150ml與鹽酸溶液（9→100）4m1，置70℃水浴上加熱30min，放冷，用乙醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液5ml，置100ml量瓶中，加鹽酸溶液（9→100）2m1，用乙醇稀釋至刻度，搖勻。78