遺傳物質(zhì)的改變

遺傳物質(zhì)的改變第一節(jié)基因突變概說(shuō)基因突變（genemutation）：是指一個(gè)基因內(nèi)部可以遺傳的結(jié)構(gòu)改變，是基因分子內(nèi)部在某種條件作用下所發(fā)生的一個(gè)或幾個(gè)核苷酸的改變，導(dǎo)致結(jié)構(gòu)蛋白或酶的改變，從而影響有機(jī)體的大小、品質(zhì)、顏色、結(jié)構(gòu)和生長(zhǎng)率等性狀的改變。基因突變一般在染色體結(jié)構(gòu)上是看不到的，所以又稱(chēng)點(diǎn)突變（pointmutation）。實(shí)際上點(diǎn)突變與染色體畸變的界限并不明確，特別是微細(xì)的畸變更是如此。第2頁(yè),共41頁(yè)，2024年2月25日，星期天一、基因突變的類(lèi)型根據(jù)誘發(fā)的原因，基因突變可分為以下兩個(gè)類(lèi)型：1.自發(fā)突變（spontaneousmutation），所謂的自發(fā)突變，是指在沒(méi)有人工特設(shè)的誘發(fā)條件下，由于外界環(huán)境的自然作用或生物體內(nèi)生理或生化變化而誘發(fā)的突變。根據(jù)這個(gè)定義，我們知道所謂的自發(fā)突變并不是沒(méi)原因的突變，而是指人工特設(shè)誘變因素以外的其它因素引起的突變。2.誘發(fā)誘變：這是指由人工特設(shè)誘發(fā)因素而引起的突變。第3頁(yè),共41頁(yè)，2024年2月25日，星期天根據(jù)突變引起的表型特征，可將突變分為：１．形態(tài)突變（morphologicalmutation），是泛指能造成外形改變的突變。例：普通綿羊的四肢有一定的長(zhǎng)度，但安康羊（Anconsheep）的四肢很短，這類(lèi)突變可在外觀上看到，稱(chēng)為可見(jiàn)突變（visiblemutations）

第4頁(yè),共41頁(yè)，2024年2月25日，星期天根據(jù)突變引起的表型特征，可將突變分為：２．致死突變（lethalmutation）：是指能造成個(gè)體死亡的突變，致死突變型又可分為全致死突變型（９０％以上死亡），亞致死突變（50%~90%％死亡）；半致死突變（10%~50%死亡）和弱致死突變（10%以下死亡）。

顯性致死：雜合態(tài)即有致死。隱性致死：純合態(tài)才有致死鐮刀形貧血癥、植物白化基因等

第5頁(yè),共41頁(yè)，2024年2月25日，星期天根據(jù)突變引起的表型特征，可將突變分為：3．條件致死突變（conditionallethalmutation)：指在一定條件下表現(xiàn)致死效應(yīng)，而在其它條件下可以存活的突變。例如：噬菌體T4的溫度敏感突變型在25℃時(shí)能在E.coli宿主中正常生長(zhǎng)，形成噬菌斑，但在42℃時(shí)就不能這樣。

4．生化突變（biochemicalmutation)：指沒(méi)有形態(tài)效應(yīng)，但導(dǎo)致某種特定生化功能改變的突變。

例：鏈孢霉的氨基酸突變型＋某種氨基酸才能生長(zhǎng)第6頁(yè),共41頁(yè)，2024年2月25日，星期天二、基因突變的一般特征基因突變表現(xiàn)出以下幾個(gè)方面的普遍特征：(一)、突變的重演性和可逆性(二)、突變的多方向性與復(fù)等位基因(三)、突變的有害性和有利性(四)、突變的平行性第7頁(yè),共41頁(yè)，2024年2月25日，星期天突變頻率：突變頻率是指生物體在每一世代中（單細(xì)胞生物以每一細(xì)胞）發(fā)生突變的頻率，也就是一定時(shí)間內(nèi)突變可能發(fā)生的次數(shù)。突變頻率一般是很低的，不同的生物，不同的基因其突變率相差較大。如果在人工誘變條件下，突變頻率可以大大提高，有時(shí)可達(dá)幾千倍。

第8頁(yè),共41頁(yè)，2024年2月25日，星期天突變發(fā)生的時(shí)期和部位：從理論上講，突變可以發(fā)生在生物個(gè)體發(fā)育的任何時(shí)期，在體細(xì)胞或性細(xì)胞中都可發(fā)生，但性細(xì)胞發(fā)生的頻率要比體細(xì)胞高些。

第9頁(yè),共41頁(yè)，2024年2月25日，星期天第10頁(yè),共41頁(yè)，2024年2月25日，星期天突變的多方向性：基因的突變可以向多個(gè)方向進(jìn)行，一個(gè)基因Ａ可以突變?yōu)閍1、a2、a3……an等而構(gòu)成所謂的復(fù)等位基因（multiplealleles）。這些復(fù)等位基因可以從野生型基因突變產(chǎn)生，也可以從其它任何一個(gè)突變基因突變產(chǎn)生。第11頁(yè),共41頁(yè)，2024年2月25日，星期天突變的重演性：指同種生物的同一基因突變?yōu)橄嗤谋硇停梢栽诓煌瑐€(gè)體間重復(fù)出現(xiàn)。例如果蠅的白眼突變就曾發(fā)生過(guò)幾次。第12頁(yè),共41頁(yè)，2024年2月25日，星期天突變的可逆性：即可發(fā)生回復(fù)突變，顯性基因Ａ可以突變?yōu)殡[性基因ａ，而隱性基因ａ也可以突變?yōu)轱@性基因Ａ，前者稱(chēng)為正向突變（forwardmutation）。后者稱(chēng)為反問(wèn)突變或回復(fù)突變（backmutation）。正向突變和反向突變的發(fā)生頻率是不一樣的。在多數(shù)情況下，正向突變率總是高于反向突變率。這是因?yàn)橐粋€(gè)野生型基因內(nèi)部的許多位點(diǎn)都可能發(fā)生改變而導(dǎo)致基因突變。但是一個(gè)基因內(nèi)部卻只有那個(gè)被改變了的結(jié)構(gòu)恢復(fù)原狀，才可發(fā)生回復(fù)突變。需要指出的是，由于缺失而引起的突變不能發(fā)生回復(fù)突變。第13頁(yè),共41頁(yè)，2024年2月25日，星期天突變的有害性與有利性：多數(shù)事例表明，突變大多數(shù)是有害的。這是因?yàn)樯锝?jīng)長(zhǎng)期的自然選擇，產(chǎn)生了與外界環(huán)境相同協(xié)調(diào)的關(guān)系，這種關(guān)系一旦因突變而改變便可能干擾內(nèi)部的生理生化過(guò)程，所以大部分突變對(duì)生物體是不利的。少數(shù)的突變能促進(jìn)和加強(qiáng)某些生命活力，所以是有利的突變。例如作物抗病性，微生物的抗藥性等，這些突變?yōu)樯镞M(jìn)化提供了最有利的條件?？顾幮酝蛔兣c藥物：微生物產(chǎn)生抗藥性突變與藥物的存在與否沒(méi)有關(guān)系。藥物的存在只是起篩選作用。第14頁(yè),共41頁(yè)，2024年2月25日，星期天第二節(jié)突變的檢出和應(yīng)用一、果蠅性連鎖突變的檢出二、鏈孢霉?fàn)I養(yǎng)缺陷型突變的檢出三、大腸桿菌營(yíng)養(yǎng)缺陷型的檢出四、人的突變的檢出第15頁(yè),共41頁(yè)，2024年2月25日，星期天一、果蠅性連鎖突變的檢出（1）鑒別果蠅X染色體上基因的隱性突變①ClB方法

ClB品系（一條X染色體上為ClB，另一條正常）

C：在X染色體上有一個(gè)大的倒位（inversion），代表Crossovesuppressor,使它不能和另一同源染色體之間發(fā)生交換。

L：是一個(gè)lethalrecessiveX-LinkedgeneB：Bareye顯性棒眼基因第16頁(yè),共41頁(yè)，2024年2月25日，星期天一、果蠅性連鎖突變的檢出

ClB方法是讓經(jīng)過(guò)不同處理后受檢的雄果蠅和ClB雌果蠅交配，F(xiàn)12♀♀：1♂，其中的半數(shù)雌蠅帶ClB染色體，它的另一條X染色體則來(lái)自父本，可能帶有隱性突變基因而不表現(xiàn)。新的隱性致死基因（l’）一般也不會(huì)是l的等位基因，故這些雌蠅仍可存活。第17頁(yè),共41頁(yè)，2024年2月25日，星期天第18頁(yè),共41頁(yè)，2024年2月25日，星期天一、果蠅性連鎖突變的檢出（1）鑒別果蠅X染色體上基因的隱性突變②Muller-5技術(shù)：檢出果蠅X染色體上的隱性突變特別是致死突變，這與ClB原理一樣。Muller-5品系的X染色體上：

B（Bar棒眼）

Wa（apricot杏色眼）

Sc(Scute,小盾片少剛毛）倒位：可抑制Mullers的X染色體

第19頁(yè),共41頁(yè)，2024年2月25日，星期天一、果蠅性連鎖突變的檢出實(shí)驗(yàn)時(shí)，把野外采集的，或經(jīng)誘變處理的雄蠅，與Muller-5雌蠅交配，得到子一代后，做單對(duì)交配，看子二代的分離情況。如有致死突變，F(xiàn)2中沒(méi)有野生型雄蠅，如有隱性的可見(jiàn)突變，則除Muller-5雄蠅外，出現(xiàn)具有可見(jiàn)突變的雄蠅。第20頁(yè),共41頁(yè)，2024年2月25日，星期天圖第21頁(yè),共41頁(yè)，2024年2月25日，星期天（2）果蠅常染色體上突變的檢出果蠅常染色體上的致死突變也可以被檢出，但要經(jīng)過(guò)三代。例如：要檢出果蠅第二染色體上的突變基因可利用平衡致死系統(tǒng)一條第二染色體上顯性基因Cy（curly,翻翅）純合致死，還有一個(gè)大倒位另一條第二染色體上顯性基因S（star,星狀眼）純合致死

Cy+×Cy++S+S

Cy++S該平衡致死系統(tǒng)，同時(shí)又是倒位雜合體。檢出過(guò)程如下：第22頁(yè),共41頁(yè)，2024年2月25日，星期天P133－1圖第23頁(yè),共41頁(yè)，2024年2月25日，星期天在子三代時(shí)：（1）如最初第2染色體上不帶致死基因，則有1/3左右的野生型（2）如最初第2染色體含有致死基因，則只有翻翅果蠅（3）如最初第2染色體上會(huì)有隱性可見(jiàn)突變，則除翻翅果蠅外，還有1/3左右的突變型。（4）如最初第2染色體上含有半致死突變，則野生型很少。第24頁(yè),共41頁(yè)，2024年2月25日，星期天二、鏈孢霉?fàn)I養(yǎng)缺陷型突變的檢出1、菌絲過(guò)濾法（可將野生型與突變型分離）

鏈孢霉不受青霉素的影響，但是可以用菌絲過(guò)濾法把野生型和突變型分離。野生型的孢子能在基本培養(yǎng)基中萌發(fā)并長(zhǎng)成菌絲，而缺陷型則一般不萌發(fā)或不能長(zhǎng)成菌絲。這些萌發(fā)的分生孢子就可以用棉花過(guò)濾去掉，未萌發(fā)的分生孢子繼續(xù)留在液體培養(yǎng)基中。第25頁(yè),共41頁(yè)，2024年2月25日，星期天二、鏈孢霉?fàn)I養(yǎng)缺陷型突變的檢出2、營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變的檢出與鑒定1945年，美國(guó)遺傳學(xué)家Beadle和生物化學(xué)家Tatium研究出檢測(cè)鏈孢霉?fàn)I養(yǎng)缺陷型突變的方法。基本根據(jù)：野生型菌株能合成一系列化合物--基本培養(yǎng)基上生長(zhǎng)；缺陷型菌株不能在基本培養(yǎng)基上生長(zhǎng);能在完全培養(yǎng)基上生長(zhǎng);能在基本培養(yǎng)基＋它所不能合成的物質(zhì)－-生長(zhǎng)。（圖）第26頁(yè),共41頁(yè)，2024年2月25日，星期天第27頁(yè),共41頁(yè)，2024年2月25日，星期天二、鏈孢霉?fàn)I養(yǎng)缺陷型突變的檢出這樣依次分析下去，就可知道是哪種AA或哪種維生素不能合成。為了進(jìn)一步確定發(fā)生的變異是由那一個(gè)基因控制的，還要將經(jīng)過(guò)上述方法檢出的突變型，跟不同交配型的野生型交配?？串a(chǎn)生的子囊孢子的發(fā)育，表現(xiàn)出來(lái)什么樣的分離現(xiàn)象，如果表現(xiàn)為1：1的分離，即4個(gè)是野生型，4個(gè)是突變型，那就表明是一個(gè)基因突變。第28頁(yè),共41頁(yè)，2024年2月25日，星期天第29頁(yè),共41頁(yè)，2024年2月25日，星期天三、大腸桿菌營(yíng)養(yǎng)缺陷型的檢出1、影印接種法（影印培養(yǎng)法Replica-platingtechnique）

E.coli誘變劑E.coli稀釋→完全培養(yǎng)基Masterplate（主平皿）→基本培養(yǎng)基上（Replicaplate）

對(duì)照Masterplate和Replicaplate相應(yīng)位置所長(zhǎng)菌落情況，在Replicaplate上相應(yīng)位置不長(zhǎng)，而在Masterplate相應(yīng)位置所長(zhǎng)的菌落即為營(yíng)養(yǎng)缺陷突變。（圖）在復(fù)制平板上（基本培養(yǎng)平板上）添加適當(dāng)?shù)奈镔|(zhì)，便能鑒別特定類(lèi)型的營(yíng)養(yǎng)缺陷型。第30頁(yè),共41頁(yè)，2024年2月25日，星期天第31頁(yè),共41頁(yè)，2024年2月25日，星期天三、大腸桿菌營(yíng)養(yǎng)缺陷型的檢出2、青霉素法這種方法只適用于細(xì)菌，當(dāng)把經(jīng)誘變處理的大腸桿菌（含突變型和野生型）培養(yǎng)在含有青霉素的基本培養(yǎng)基中時(shí)。野生型E.coli→可生長(zhǎng)繁殖，蛋白質(zhì)等物質(zhì)進(jìn)行合成，但由于青霉素作用，細(xì)胞壁不再增大，導(dǎo)致細(xì)胞破裂而死亡。營(yíng)養(yǎng)缺陷型E.coli→不能生長(zhǎng)，而避免了青霉素的致死作用，得以保存（處于休止?fàn)顟B(tài)）將青霉素除去，補(bǔ)加其他營(yíng)養(yǎng)，如氨基酸等，如果有菌落生長(zhǎng)，就說(shuō)明這些菌落是氨基酸缺陷型。第32頁(yè),共41頁(yè)，2024年2月25日，星期天四、人的突變的檢出1、家系分析（pedigreeanalysis）和出生調(diào)查常染色體隱性突變難以檢出。很可能是由于兩個(gè)雜合個(gè)體的婚配，而不是由于隱性突變。顯性突變的起源比較容易檢出。在人類(lèi)方面，突變率的估計(jì)方法之一是根據(jù)家系中有顯性性狀的患兒的出現(xiàn)。在這些家系中，祖先各代是沒(méi)有這些性狀的；如雙親一方也有同一遺傳病，則這名患兒應(yīng)除去不計(jì)。第33頁(yè),共41頁(yè)，2024年2月25日，星期天四、人的突變的檢出例如：軟骨發(fā)育不全（achondroplasia）由常染色體顯性基因引起，患者四肢粗短。MΦrch(1941)調(diào)查，在94075活產(chǎn)兒中，發(fā)現(xiàn)10例為本病患者，其中2例的一方親本也是本病患者，所以應(yīng)該除去不計(jì)，其余8例的雙親正常，可以認(rèn)為是新突變的結(jié)果。則每個(gè)基因的突變率是（10－2）

/2（94072－2）＝4.2×10-5第34頁(yè),共41頁(yè)，2024年2月25日，星期天四、人的突變的檢出下面是一個(gè)上眼瞼下垂的家系，先證者的父母表型正常，說(shuō)明是新產(chǎn)生的突變。第35頁(yè),共41頁(yè)，2024年2月25日，星期天四、人的突變的檢出2．目前用的較多的檢出人類(lèi)突變的另一方法，是篩選各種蛋白質(zhì)或酶的微小變異：例如：鐮型細(xì)胞貧血癥患者基因型HbsHbs

血紅蛋白（S）(

S

S)

正常為HbAHbA血紅蛋白（A）（

A

A)

雜合體HbsHbA具兩種血紅蛋白的A和S(

A

S)A與S兩種血紅蛋白電泳的遷移率不同，通過(guò)電泳可以分辯第36頁(yè),共41頁(yè)，2024年2月25日，星期天四、人的突變的檢出第37頁(yè),共41頁(yè)，2024年2月25日，星期天四、人的突變的檢出現(xiàn)已