藥物血漿蛋白結(jié)合與藥物代謝動(dòng)力學(xué)

藥物血漿蛋白結(jié)合與藥物代謝動(dòng)力學(xué)第一節(jié)濃度依賴性血漿蛋白結(jié)合及其引起的非線性動(dòng)力學(xué)

一、理論基礎(chǔ)

1.濃度依賴性結(jié)合的含義

與血漿蛋白有高度親和力的藥物，其結(jié)合程度與藥物濃度密切相關(guān)，這種結(jié)合稱為藥物濃度依賴性結(jié)合，簡(jiǎn)稱為濃度依賴性結(jié)合。2.濃度依賴性結(jié)合引起非線性動(dòng)力學(xué)的原理藥物與血漿蛋白結(jié)合之間的關(guān)系可根據(jù)質(zhì)量作用定律用下列方程式加以描述：

CB＝KnPCF/1+CF（7-1）

CB、CF分別為結(jié)合型及游離型藥物克分子濃度，K為結(jié)合常數(shù)，P為血漿蛋白的克分子濃度，n為結(jié)合位點(diǎn)數(shù)（假定只有一類結(jié)合點(diǎn)）。（7-1）式右側(cè)分子、分母各用K除，則：

CB＝nPCF/(1/K+CF)

（7-2）若1/K>>CF,（7-2）式可簡(jiǎn)化為

CB=nPCFK

（7-3）第2頁(yè),共22頁(yè)，2024年2月25日，星期天

由于總藥物濃度Ct為CB與CF之和，則結(jié)合型藥物分?jǐn)?shù)FB可用下式表示：

FB＝CB/Ct

＝nPCFK/nPCFK+CF

＝

nKP/1+nKP（7-4）

n、K、P均為常數(shù)。（7-4）表示1/K>>CF，即藥物與血漿蛋白親和力很低時(shí)，F(xiàn)B為一常數(shù)，其值為nKP/(1+nKP)。只有在這種情況下，結(jié)合才是線性的，即親和力很低的藥物在其濃度改變時(shí)，結(jié)合型與游離型藥物分?jǐn)?shù)（FB與Fu）均保持不變(見(jiàn)圖7-1)。結(jié)合常數(shù)僅為102mol-1的藥物，幾乎是一條與X軸平行的直線。此時(shí)消除速率常數(shù)接近一個(gè)恒定值，總藥物濃度的消除按恒比進(jìn)行，其血藥濃度的衰減符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)。但當(dāng)藥物具有高度親和力時(shí)，K值大，（7-2）式中1/K>>CF的假設(shè)不能成立，（7-4）式亦不能成立，由圖7-1可知，當(dāng)藥物濃度改變時(shí)，F(xiàn)B及Fu不恒定，隨藥物濃度而變化，結(jié)合變?yōu)榉蔷€性，即結(jié)合呈現(xiàn)明顯的濃度依賴性。當(dāng)藥物濃度隨時(shí)間衰減時(shí)，F(xiàn)u越來(lái)越小，消除變得相對(duì)越來(lái)越慢，此時(shí)總藥物濃度的衰減不按恒比進(jìn)行，即血藥濃度的經(jīng)時(shí)變化不呈一級(jí)動(dòng)力學(xué)函數(shù)關(guān)系。這表現(xiàn)在對(duì)數(shù)濃度-時(shí)間曲線發(fā)生彎曲，依據(jù)結(jié)合對(duì)清除率及表觀分布容積影響程度的不同，曲線可表現(xiàn)為下凹或上凸。第3頁(yè),共22頁(yè)，2024年2月25日，星期天血漿藥物濃度（mol·10－3）

圖7-1藥物與血漿蛋白結(jié)合的濃度依賴性

(a)結(jié)合藥物分?jǐn)?shù)(FB)與血漿藥物濃度之間的關(guān)系；(b)游離藥物分?jǐn)?shù)（Fu）與血漿藥物濃度之間的關(guān)系。曲線上的數(shù)字表示藥物與血漿蛋白的結(jié)合常數(shù)（K）第4頁(yè),共22頁(yè)，2024年2月25日，星期天二、濃度依賴性結(jié)合引起的非線性動(dòng)力學(xué)的特點(diǎn)

1.轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制的可飽和性

結(jié)合引起的非線性動(dòng)力學(xué)和代謝引起的非線性動(dòng)力學(xué)一樣，其動(dòng)力學(xué)過(guò)程亦呈現(xiàn)轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制的可飽和性。對(duì)于前者，由于血漿蛋白上的結(jié)合位點(diǎn)有限，隨濃度不斷提高，結(jié)合愈趨于飽和，F(xiàn)B變小，而Fu則變大。當(dāng)K較大（通常K>104）時(shí)，以及在藥物濃度較高時(shí)，這種結(jié)合能力的飽和現(xiàn)象愈明顯，圖7-1中的K>104的兩條曲線出現(xiàn)明顯轉(zhuǎn)折，此時(shí)濃度依賴性結(jié)合引起非線性動(dòng)力學(xué)十分顯著。2.半衰期隨劑量增加而縮短

對(duì)于高度結(jié)合的藥物，特別是親和力很強(qiáng)、結(jié)合位點(diǎn)數(shù)有限的酸性藥物，其超飽和濃度（劑量）和飽和內(nèi)濃度（劑量）相對(duì)比，有不同的動(dòng)力學(xué)特征。突出表現(xiàn)在劑量增大時(shí)，t1/2反而縮短。例如，

保泰松

低劑量時(shí)，t1/2達(dá)3天左右，高劑量時(shí)，t1/2僅3h因劑量增大，F(xiàn)u升高，可用于消除的藥物相對(duì)增加（只有游離藥物可供消除）。對(duì)于濃度依賴性結(jié)合引起的非線性動(dòng)力學(xué)來(lái)說(shuō)，結(jié)合能力的飽和并不意味著消除機(jī)制（代謝或排泄）的飽和；第5頁(yè),共22頁(yè)，2024年2月25日，星期天而對(duì)于劑量依賴性代謝引起的非線性動(dòng)力學(xué)，劑量增大，t1/2延長(zhǎng)。例如，

水楊酸劑量300mgt1/23h10g20h3.

血藥濃度及藥-時(shí)曲線下面積隨劑量增大而呈低比例增加

濃度依賴性結(jié)合還將導(dǎo)致劑量與濃度之間的非線性關(guān)系。這類藥物給藥劑量增加，血藥濃度即血漿總藥物濃度并不成比例增加，其總藥物濃度-時(shí)間曲線下面積（AUCt）與劑量亦不成比例，并低于其劑量比。丙吡胺在治療劑量時(shí)出現(xiàn)明顯的濃度依賴性結(jié)合給藥150、200、300mg，AUCt分別為100mg劑量的1.3、1.6及2.0倍，低于劑量比。在劑量依賴性代謝引起的非線性動(dòng)力學(xué)中，當(dāng)劑量超過(guò)酶代謝能力時(shí)，血藥濃度及AUC均隨劑量增加而呈現(xiàn)超比例增加，如苯妥英、水楊酰胺等。因?yàn)槊复x能力飽和后，由一級(jí)動(dòng)力學(xué)轉(zhuǎn)為零級(jí)動(dòng)力學(xué)。第6頁(yè),共22頁(yè)，2024年2月25日，星期天4.超飽和劑量的藥理作用遠(yuǎn)大于根據(jù)飽和內(nèi)劑量所預(yù)測(cè)的作用強(qiáng)度。醫(yī)藥工作者必需了解給藥方案產(chǎn)生的血藥濃度是否接近或超過(guò)血漿蛋白的最大結(jié)合能力，多數(shù)藥物的有效治療濃度遠(yuǎn)低于血漿白蛋白濃度，其劑量的改變不致超過(guò)結(jié)合飽和點(diǎn)，所引起的動(dòng)力學(xué)及藥理作用強(qiáng)度改變不明顯；但對(duì)某些藥物，例如

氯貝特

保泰松

水楊酸鹽

丙吡胺

丙戊酸對(duì)血漿蛋白具有高度親和力，在治療劑量下即可引起明顯的濃度依賴性結(jié)合，當(dāng)劑量超過(guò)血漿蛋白結(jié)合能力時(shí)藥理作用強(qiáng)度明顯增強(qiáng)，出現(xiàn)種種不良反應(yīng)。例如水楊酸治療風(fēng)濕病，每天劑量達(dá)4g，大大超過(guò)白蛋白結(jié)合能力，CF升高，使肝、腎清除機(jī)制很快飽和，容易引致水楊酸中毒。第7頁(yè),共22頁(yè)，2024年2月25日，星期天第二節(jié)藥物血漿蛋白結(jié)合對(duì)藥物代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)的影響一、結(jié)合對(duì)清除率的影響

清除率是表示機(jī)體清除藥物能力的一種重要參數(shù)?！俺浞?jǐn)嚢琛鄙硭巹?dòng)學(xué)模（“well-stirred”model）特別強(qiáng)調(diào)

清除器官血流量Q

器官內(nèi)在清除率（CLint）

血漿蛋白結(jié)合對(duì)器官清除率的影響。對(duì)于僅受單個(gè)器官（如肝臟）清除的藥物，器官清除率等于總體清除率（CL），它們之間具有下列關(guān)系：器官內(nèi)在清除率為在不受血流量限制時(shí)消除器官消除藥物的最大能力，它是藥物的固有特征，與藥物在器官中的攝?。╡xtraction）直接相關(guān)；FB為血漿中結(jié)合藥物分?jǐn)?shù)。

“充分?jǐn)嚢琛蹦Ｐ蛯⑺幬锓譃?

高攝取藥物

低攝取藥CL＝Q[FB·CLint/(Q+FB)]

（7-5）第8頁(yè),共22頁(yè)，2024年2月25日，星期天高攝取藥物利多卡因、哌替啶、嗎啡、普萘洛爾等

具有很高的內(nèi)在清除率,不論結(jié)合程度如何，在清除器官中均能全部攝取游離及結(jié)合型均可被清除。

高攝取藥物的清除率不受結(jié)合的影響，與器官血流量成正比,這類藥物

FB·Clint>>Q，方程式（7-5）則為：

CL≈Q（7-6）低攝取藥物

清除僅限于血循環(huán)中游離藥物，

內(nèi)在清除率很低，F(xiàn)BCLint<<Q。這類藥物方程式（7-5）可改寫(xiě)為：

CL≈FB·Clint

（7-7）

清除率與血漿蛋白結(jié)合率和消除器官的內(nèi)在清除率有關(guān)。從以上討論看出，血漿蛋白結(jié)合率能明顯影響低攝取藥物的清除率，但對(duì)高攝取藥物的清除率沒(méi)有影響。第9頁(yè),共22頁(yè)，2024年2月25日，星期天二、結(jié)合對(duì)藥物分布的影響

結(jié)合通常是藥物向組織分布的一種限定性因素，使較多的藥物儲(chǔ)留合于血漿中，以減弱藥物的最大作用強(qiáng)度，防止作用大幅度波動(dòng)以及延長(zhǎng)藥物作用時(shí)間。但結(jié)合對(duì)表觀分布容積Vd的影響很復(fù)雜，因不同情況可使Vd減小，增大或使藥物呈現(xiàn)選擇性分布。

1.結(jié)合使Vd減小某些藥物如華法林、保泰松、氯貝特、某些磺胺類，丙戊酸等酸類藥物在血漿pH下可解離，與白蛋白的結(jié)合點(diǎn)數(shù)雖有限，但有很高的親和力，結(jié)合百分率很高，這類藥物和白蛋白結(jié)合十分牢固，不易透過(guò)生物膜，表觀分布容積很小而半衰期長(zhǎng)，如保泰松。結(jié)合百分率為98%，K高達(dá)2.3×105，Vd只有0.09L/kg(相當(dāng)于注入的白蛋白的分布容積)，t1/2長(zhǎng)達(dá)75小時(shí)。對(duì)于這些藥物，結(jié)合將起到血漿儲(chǔ)留作用，使藥物不易進(jìn)入血管外組織被消除。第10頁(yè),共22頁(yè)，2024年2月25日，星期天2.結(jié)合使Vd增大另有一些藥物如三環(huán)抗抑郁藥，酚噻嗪類及某些中樞性鎮(zhèn)痛藥等弱堿性或非解離藥物，與血漿蛋白親和力低，但結(jié)合位點(diǎn)數(shù)多，故也有較高的結(jié)合百分率值。它們對(duì)白蛋白的結(jié)合不牢固，且其往往與許多組織結(jié)合較強(qiáng)，故分布容積大，較易為消除器官消除，半衰期較前類藥物短，如丙咪嗪結(jié)合百分率為95%，但K僅為7.0

101M－1，Vd值達(dá)40L/kg，t1/2為16小時(shí)。3.結(jié)合使藥物選擇性分布還有少數(shù)藥物如普萘洛爾為代表的高攝取藥物，結(jié)合使它們呈現(xiàn)選擇性肝臟分布。這類藥物在肝臟中與組織蛋白的親和力或結(jié)合位點(diǎn)數(shù)高于血漿蛋白，其在肝臟中的清除包括血漿中游離型及結(jié)合型藥物，這類藥物的結(jié)合實(shí)際上不損害藥物的血管外分布，而是使其選擇性地移向具有高度親和力或有較多結(jié)合位點(diǎn)數(shù)的組織，故其分布容積較大而介于上述兩類藥物之間，因易為肝臟攝取并代謝，故半衰期較上述兩類藥物均短，如普萘洛爾，結(jié)合百分率為93.2%，Vd為3.62L/kg，t1/2僅為167分鐘。第11頁(yè),共22頁(yè)，2024年2月25日，星期天三、結(jié)合對(duì)半衰期的影響

這種影響十分復(fù)雜，除與前述的許多因素有關(guān)外，還與藥物的消除機(jī)制有密切的關(guān)系。高度結(jié)合的藥物通過(guò)腎小球?yàn)V過(guò)的能力極低，這類藥物中主要通過(guò)腎小球?yàn)V過(guò)而消除者將有特別長(zhǎng)的半衰期，如二氮嗪，t1/2為30小時(shí)，某些造影劑長(zhǎng)達(dá)一年以上。但結(jié)合通常不影響藥物自腎小管的主動(dòng)分泌過(guò)程，如某些青霉素雖然結(jié)合百分率達(dá)90%以上，但仍能迅速通過(guò)腎小管分泌機(jī)制而消除，t1/2僅為0.5～1小時(shí)。結(jié)合對(duì)藥物的肝臟代謝的影響與對(duì)腎排泄類似，即通過(guò)擴(kuò)散過(guò)程進(jìn)入肝細(xì)胞被代謝的藥物的消除速率與結(jié)合程度成反比，如涉及主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制，則消除不受結(jié)合的影響。某些藥物如普萘洛爾其結(jié)合反成為一種載體系統(tǒng)，促進(jìn)藥物被運(yùn)送至消除部位，加速其消除，從而使半衰期縮短。這說(shuō)明消除僅限于游離藥物時(shí)，結(jié)合可減慢消除速率，半衰期延長(zhǎng)；反之，當(dāng)消除不限于游離藥物從而不受結(jié)合影響時(shí)，結(jié)合可加速消除，使半衰期縮短。

第12頁(yè),共22頁(yè)，2024年2月25日，星期天第三節(jié)游離藥物濃度監(jiān)測(cè)的必要性

目前，絕大多數(shù)文獻(xiàn)報(bào)告的血藥濃度監(jiān)測(cè)和藥代動(dòng)力學(xué)研究是通過(guò)測(cè)定血漿（血清）總藥物濃度（即一般所謂的血藥濃度）進(jìn)行的，因?yàn)橥ǔ２捎玫难獦又苽浞椒?，無(wú)論是蛋白沉淀法還是有機(jī)溶劑提取法，測(cè)得的藥物濃度是結(jié)合型與游離型藥物濃度的總和。這在一般情況下是可行的，因?yàn)槎鄶?shù)藥物在治療藥物濃度范圍內(nèi)血漿蛋白結(jié)合率比較恒定，總濃度的變化能夠反映游離藥物濃度的變化，另外，游離藥物濃度與總濃度比值的個(gè)體差異較藥物代謝速率的個(gè)體差異小得多。然而，在一些特殊情況下測(cè)定總濃度將使結(jié)果的解釋發(fā)生錯(cuò)誤，應(yīng)同時(shí)測(cè)定游離藥物濃度。第13頁(yè),共22頁(yè)，2024年2月25日，星期天1.濃度依賴性結(jié)合導(dǎo)致非線性動(dòng)力學(xué)高度結(jié)合的藥物的蛋白結(jié)合率隨著藥物濃度的改變而改變，總藥物濃度的變化與游離藥物濃度的變化并不平行，兩者具有不同的藥代動(dòng)力學(xué)特征，總藥物濃度不能反映游離藥物濃度，從而影響了血藥濃度-藥物效應(yīng)的相關(guān)性，此時(shí)應(yīng)測(cè)定游離型藥物濃度。丙吡胺是血漿蛋白結(jié)合引起非線性動(dòng)力學(xué)的典型藥物。該藥血漿總濃度的藥時(shí)曲線下面積（AUC）與給藥劑量不成正比，但其游離濃度的AUC卻與劑量成正比；穩(wěn)態(tài)時(shí)游離藥物的腎清除率，分布容積與心臟指數(shù)相關(guān)，不測(cè)定游離藥物的動(dòng)力學(xué)則導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)論。又發(fā)現(xiàn)將給藥速率增加4倍，其穩(wěn)態(tài)血藥濃度只增加2倍，而穩(wěn)態(tài)游離藥物濃度同樣增加4倍。通過(guò)不同藥動(dòng)力學(xué)模型研究發(fā)現(xiàn)，應(yīng)用游離藥物分?jǐn)?shù)以及游離藥物清除率計(jì)算得到的理論穩(wěn)態(tài)血藥濃度與實(shí)測(cè)結(jié)果十分相符，而應(yīng)用總濃度清除率計(jì)算則與實(shí)測(cè)結(jié)果明顯不吻合。另外，游離藥物濃度與該藥的抗心律失常作用的相關(guān)性明顯優(yōu)于總藥物濃度。由于該藥總濃度呈現(xiàn)非線性動(dòng)力學(xué)，故計(jì)算生物利用度時(shí)Dost相應(yīng)面積律不能適用，但游離藥物濃度為線性動(dòng)力學(xué)，因而有提出采用測(cè)定游離藥物濃度的AUC來(lái)計(jì)算生物利用度。2.疾病影響藥物血漿蛋白結(jié)合疾病對(duì)藥物蛋白結(jié)合的影響可致通常的血藥濃度-藥物效應(yīng)關(guān)系發(fā)生改變，如僅依據(jù)總藥物濃度調(diào)節(jié)劑量將易導(dǎo)致毒性反應(yīng)。肝、腎疾病時(shí)由于血漿白蛋白濃度降低以及內(nèi)源性蛋白結(jié)合抑制物如膽紅素、游離脂肪酸增多使許多藥物的血漿蛋白結(jié)合率降低，游離藥物分?jǐn)?shù)增加。如肝硬化病人奎尼丁的游離藥物分?jǐn)?shù)幾乎增加3倍，腎臟疾病時(shí)苯妥英，水楊酸，氯貝特等藥物的血漿蛋白結(jié)合率明顯降低，此時(shí)如仍以總濃度的治療范圍調(diào)節(jié)藥物劑量，實(shí)際上增加了游離藥物濃度，將導(dǎo)致實(shí)際上的過(guò)量中毒，已有報(bào)告在這類病人中苯妥英中毒明顯增加。此外，手術(shù)與創(chuàng)傷以及營(yíng)養(yǎng)不良等疾病狀態(tài)也可使血漿白蛋白降低，致游離藥物分?jǐn)?shù)增加。還應(yīng)指出，某些疾病如炎癥、惡性腫瘤、腎移植以及應(yīng)激狀態(tài)等，血漿

1-酸性糖蛋白（AAG）增加，可使一些與AAG有較大親和力的藥物（主要為堿性藥物）如氯丙嗪、普萘洛爾、利多卡因等的蛋白結(jié)合率升高，游離藥物濃度降低。第14頁(yè),共22頁(yè)，2024年2月25日，星期天3.藥物血漿蛋白結(jié)合存在明顯個(gè)體差異這種明顯的個(gè)體差異使血藥濃度-藥物效應(yīng)關(guān)系變得十分復(fù)雜，如奎尼丁血漿蛋白結(jié)合率范圍為50-95%，不同個(gè)體間游離藥物濃度相差可達(dá)10倍之多?？倽舛入m屬正常范圍，結(jié)合率低的患者可引起毒性反應(yīng)，結(jié)合率高的患者則可出現(xiàn)療效降低。血漿樣品先經(jīng)平衡透析或作成超濾液以除去結(jié)合型藥物后再行測(cè)定可得游離藥物濃度。近年來(lái)，測(cè)定唾液藥物濃度進(jìn)行治療藥物監(jiān)測(cè)和藥代動(dòng)力學(xué)研究者日漸增多，因唾液為一種無(wú)蛋白濾液，測(cè)得的為具有藥理活性的游離藥物濃度。目前國(guó)外已對(duì)茶堿、苯妥英，酰胺咪嗪、丙戊酸、丙吡胺以及利多卡因的游離藥物濃度監(jiān)測(cè)進(jìn)行了大量研究，其與臨床效應(yīng)的相關(guān)性均優(yōu)于總藥物濃度。但在游離藥物濃度推薦為常規(guī)臨床應(yīng)用之前仍需繼續(xù)進(jìn)行大量工作，特別是測(cè)定技術(shù)的改進(jìn)。

第15頁(yè),共22頁(yè)，2024年2月25日，星期天第4節(jié)藥物血漿蛋白結(jié)合參數(shù)的計(jì)算

通常每分子血漿蛋白（如白蛋白）可與多個(gè)藥物分子結(jié)合，即血漿蛋白分子上有多個(gè)藥物結(jié)合點(diǎn)，其中與藥物親和力特別強(qiáng)的結(jié)合點(diǎn)稱為一級(jí)結(jié)合點(diǎn)（n1），親和力較弱者稱為次級(jí)結(jié)合點(diǎn)（n2），n1大致為1~2點(diǎn)，n2約為10~20點(diǎn)，實(shí)際上對(duì)應(yīng)于n1的結(jié)合常數(shù)K1較對(duì)應(yīng)于n2的結(jié)合常數(shù)K2更為重要。假定血漿蛋白分子上只有一類結(jié)合點(diǎn)，且各點(diǎn)之間互不干擾，從（7-1）式可進(jìn)一步得到下列方程式：

r＝nKCF/1+KCF

（7-8）r為每分子血漿蛋白結(jié)合的藥物分子數(shù)。（7-8）作不同變換則可得到不同的作圖方法，從而求解藥物與血漿蛋白結(jié)合的參數(shù)。第16頁(yè),共22頁(yè)，2024年2月25日，星期天一、Scatchard法將（7-8）式進(jìn)行變換可得：

r/CF＝nK－Kr（7-9）由r/CF對(duì)r作圖得一條直線，此即所謂Scatchard作圖。例如，圖7-2為硫賁妥鈉與血漿蛋白結(jié)合的Scatchard作圖，由斜率求得K為12000，由X軸截矩得n為5，Y軸截矩求得nK為60,000。

0Kn=60,000N=5K=12,000r/CF

10-4r/CF

10-40圖7-2硫賁妥鈉與血漿蛋白的結(jié)合r：結(jié)合型藥物與白蛋白克分子比CF：游離藥物濃度實(shí)際上按（7-9）式作出的圖形有時(shí)并非直線，多數(shù)場(chǎng)合屬雙曲線，這表明蛋白分子上至少有兩類結(jié)合點(diǎn)，此時(shí)（7-8）式應(yīng)寫(xiě)為：

r＝[niKiCF/(1+KiCF)]（7-10）ii

第17頁(yè),共22頁(yè)，2024年2月25日，星期天

這種曲線可擬合為不同類型結(jié)合點(diǎn)各自產(chǎn)生的直線的總和。圖7-3為水楊酸與小牛血清白蛋白相互作用的實(shí)驗(yàn)資料，理論曲線為一雙曲線（曲線I＋I(xiàn)I），可按兩類結(jié)合點(diǎn)進(jìn)行分析，方程式（7-10）變?yōu)閞＝

，曲線I＋I(xiàn)I解析為直線I與直線II，由直線I的斜率及截矩得n1為0.72，K1為25000；由直線II得n2為5.3，K2150。由此可見(jiàn)水楊酸的一級(jí)結(jié)合點(diǎn)少于次級(jí)結(jié)合點(diǎn)，但親和力大大強(qiáng)于次級(jí)結(jié)合點(diǎn)。近年來(lái)采用電子計(jì)算機(jī)分析更有助于結(jié)合點(diǎn)性質(zhì)的闡明。

(n1K1CF/1+K1CF)+(n2K2CF/1+K2CF) 第18頁(yè),共22頁(yè)，2024年2月25日，星期天○理論曲線●實(shí)驗(yàn)點(diǎn)n1=0.72K1n1=18,000n2=5.3K2n2=800K1=25,000K2=150r圖7-3水楊酸與小牛血清白蛋白的結(jié)合曲線第19頁(yè),共22頁(yè)，2024年2月25日，星期天二、Klotz法由（7-8）式還可得到下列方程式：

1/r=1/n+1/nKCF

（7-11