紙質(zhì)版 04 臨床酶學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)

第四章臨床酶學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)

—>A型題

1.關(guān)于酶活性國(guó)際單位定義，下列敘述哪項(xiàng)是正確的

A.在特定條件下，1分鐘能轉(zhuǎn)化1微摩爾底物的酶量

B.在最適條件下，1分鐘能轉(zhuǎn)化1微摩爾底物的酶量

C.在標(biāo)準(zhǔn)條件（25℃）下，1分鐘能轉(zhuǎn)化1微摩爾底物的酶量

D.在標(biāo)準(zhǔn)條件（25C）下，1秒鐘能轉(zhuǎn)化1摩爾底物的酶量

E.在特定條件下，1秒鐘能轉(zhuǎn)化1摩爾底物的酶量

答案：A

解析：國(guó)際單位僅僅規(guī)定了時(shí)間單位和產(chǎn)物（底物）單位，時(shí)間單位為每分

鐘，產(chǎn)物（底物）單位為微摩爾，測(cè)定條件沒(méi)有明確作出規(guī)定，因此，比較不同

樣品的酶活性應(yīng)在相同的測(cè)定條件下比較。

2.酶活性國(guó)際單位和katal單位間關(guān)系正確的是

A.lU=16.67nkatal

B.lU=16.67katal

C.lU=1000nkatal

D.16.7U=1nkatal

E.16.7U=1katal

答案：A

解析：Katal單位，是指在特定條件下，每秒鐘轉(zhuǎn)化1個(gè)摩爾底物（mol/s）

的酶量。Katal單位規(guī)定了時(shí)間單位和產(chǎn)物（底物）單位都是基本量綱單位。國(guó)

際單位和katal間關(guān)系為：lU=l〃mol/rninFxlO'/60s=16.67nkatal。

3.酶促反應(yīng)最大反應(yīng)速度是指

A.足夠的底物濃度與酶結(jié)合形成絡(luò)合物使酶達(dá)到飽和狀態(tài)

B.最適pH時(shí)的反應(yīng)速度

C.最適溫度時(shí)的反應(yīng)速度

D.最適條件下的反應(yīng)速度

E.底物濃度只消耗5%以內(nèi)的反應(yīng)速度

答案：A

解析：酶促反應(yīng)最大反應(yīng)速度是指當(dāng)酶的結(jié)合位點(diǎn)與底物結(jié)合飽和時(shí)的反應(yīng)

速度，通常用V或Vmax來(lái)表示。含義是對(duì)底物濃度變量而言，底物足夠時(shí)酶促

反應(yīng)速度最大。注意與初速度和最適條件概念上的區(qū)別。

4.丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶的輔酶是

A.NADH

B.NADPH

C.FAD

D.FMN

E.5,磷酸叱哆醛

答案：E

解析：5,磷酸毗哆醛接受氨基轉(zhuǎn)變?yōu)?,磷酸毗哆胺，是氨基轉(zhuǎn)移酶的輔酶。

其他選項(xiàng)都是氧化還原酶的輔酶。有輔酶參與的反應(yīng)可以看成雙底物酶促反應(yīng)，

除氧化還原酶、氨基轉(zhuǎn)移酶外，重要的輔酶還有脫竣酶的輔酶。

5.IFCC推薦法測(cè)定AST的輔助酶是

A.G6PD

B.HK

C.POD

D.LD

E.MD

答案：D

解析：IFCC推薦法測(cè)定AST的指示酶是MD,由于草酰乙酸不穩(wěn)定，易轉(zhuǎn)

變?yōu)楸?，試劑中加入LD的作用實(shí)際上也起到指示酶的作用，但常作為輔助

酶。該反應(yīng)原理如下：

L-門(mén)冬氨酸+々-酮戊二酸一空一L-谷氨酸+L-草酰乙酸

L—草酰乙酸+M4￡W+”+MD"—蘋(píng)果酸+N4￡>+

L一丙釀］酸+24￡歸+L—孚L酸+N4￡>+

6.CK-MB主要存在于

A.腦組織

B.肝臟

C.心肌

D.骨骼肌

E.紅細(xì)胞

答案：C

解析：CK是由M、B亞基組成的二聚體，有3種同工酶：CK-MM、CK-MB、

CK-BB,主要分布在骨骼肌、心臟、腦中。其中CK-MB在心肌中的含量占總CK

的25%,而在其他組織只有1%?2%。由于CK-MB在心肌中分布最為豐富，其做

為心肌損傷標(biāo)志物具有較高的診斷特異性和敏感性。其他重要的同工酶有

LD,mAST等。

7.溶血標(biāo)本測(cè)定CK時(shí)結(jié)果明顯偏高的機(jī)制是

A.紅細(xì)胞中含豐富的CK

B.紅細(xì)胞中含AK

C.紅細(xì)胞中含Hb

D.紅細(xì)胞中含G6PD

E.紅細(xì)胞中含ADP

答案：B

解析：標(biāo)本采集不當(dāng)常引起溶血，溶血對(duì)生化分析的干擾原因有多種。雖然

紅細(xì)胞中不含CK,但含有大量AK,目前常用的測(cè)定CK的酶偶聯(lián)法反應(yīng)體系中

含有ADP,因AK能催化ADP直接轉(zhuǎn)化成ATP,生成的ATP在指示酶6-磷酸葡萄

糖脫氫酶作用下，可使NADP+生成NADPH,使CK活性假性增高。10U/L的AK

約相當(dāng)于1U/L的CK。

8.正常成年人血清LD同工酶電泳區(qū)帶的結(jié)果應(yīng)該符合

A.LD]>LD2>LD3>LD4>LD5

B.LD1<LD2<LD3<LD4<LD5

C.LD2>LD]>LD3>LD4>LD5

D.LD3>LD|>LD2>LD4>LD5

E.LD4>LD5>LD3>LD]>LD2

答案：c

解析：LD是由H、M亞基組成的四聚體，有5種同工酶，常用電泳法分離測(cè)

定。正常成年人血清LD同工酶電泳區(qū)帶特點(diǎn)是LD2〉LDL在心肌損傷時(shí)LD1〉LD2,

稱為“反轉(zhuǎn)”.血清LD同工酶主要臨床意義在心臟疾病、肺梗塞和肝臟疾病，分別

表現(xiàn)為L(zhǎng)Di、LD3、LD5的升高。

9.單底物酶促反應(yīng)的最適底物濃度的確定原則是

A.IKm

B.2Km

C.10?20Km

D.lOOKm

E.無(wú)窮大

答案：C

解析：根據(jù)Michaclis-Menten方程，若[S]=10Km,則反應(yīng)速度達(dá)到最大反應(yīng)

速度的90.9%；若[S]=20Km,則反應(yīng)速度達(dá)到最大反應(yīng)速度的95.2%；只有當(dāng)[S]

無(wú)窮大時(shí)，反應(yīng)速度才達(dá)到最大反應(yīng)速度，這在實(shí)際工作中（考慮溶解度和價(jià)格

因素）是不可能的。因此，底物濃度的確定原則是選擇[S]=10Km?20Km,此時(shí)

反應(yīng)速度基本達(dá)到最大反應(yīng)速度，測(cè)定的誤差可以接受。

10.3-竣基-Y-L-谷氨酰對(duì)硝基苯胺是測(cè)定哪個(gè)酶的底物

A.ALP

B.GGT

C.AMY

D.AFU

E.NAG

答案：B

解析：色素原底物3-竣基-y-L-谷氨酰對(duì)硝基苯胺（GCNA）,在GGT作用下，

催化生成的2-硝基-5-氨基苯甲酸在堿性環(huán)境下呈黃色，可以連續(xù)監(jiān)測(cè)。GCNA

與GNA相比，含有親水基團(tuán)默基，溶解度增加，而且底物穩(wěn)定性好，自身水解

作用小，是IFCC的推薦方法。其他選項(xiàng)常用的測(cè)定方法都屬于色素原底物方法。

11.自動(dòng)生化分析儀測(cè)定酶活性常用計(jì)算K值的主要原因是

A.方便

B.準(zhǔn)確

C.無(wú)標(biāo)準(zhǔn)品和校準(zhǔn)品

D.酶校準(zhǔn)品不準(zhǔn)確

E.酶準(zhǔn)正品不穩(wěn)定

答案：C

解析：自動(dòng)生化分析儀對(duì)測(cè)定項(xiàng)目做校準(zhǔn)時(shí)酶類(lèi)項(xiàng)目的校準(zhǔn)是個(gè)特例，因酶

類(lèi)無(wú)標(biāo)準(zhǔn)品。目前常用酶類(lèi)校準(zhǔn)品校準(zhǔn)。若有本測(cè)定系統(tǒng)的酶類(lèi)校準(zhǔn)品，其定值

必須能溯源到參考系統(tǒng)（即參考方法、酶類(lèi)參考物質(zhì)、試劑配方、儀器、分析參

數(shù)等的組合），則可以用酶類(lèi)校準(zhǔn)品定值；若產(chǎn)物是色素，也可以用色素的基準(zhǔn)

物質(zhì)測(cè)定摩爾消光系數(shù)，即采用實(shí)測(cè)K值；無(wú)標(biāo)準(zhǔn)品和校準(zhǔn)品時(shí)可以根據(jù)理論K

值計(jì)算。

12.IFCC推薦法測(cè)定ALP選用哪個(gè)緩沖液

A.乙二胺

B.AMP

C.Tris

D.甘氨酸

E.二乙醇胺

答案：B

解析：依據(jù)緩沖液對(duì)酶活性的影響分為活性緩沖液、惰性緩沖液和抑制緩沖

液三大類(lèi)，緩沖液種類(lèi)的選擇原則是盡量使用活性緩沖液。AMP緩沖液（活性

緩沖液）具有雜質(zhì)含量少，溫度依數(shù)性小等優(yōu)點(diǎn)而被IFCC推薦。與碳酸緩沖液

（惰性緩沖液）相比，活性可增高6倍。甘氨酸緩沖液對(duì)ALP而言是抑制緩沖液。

13.酶促反應(yīng)進(jìn)程曲線通?？捎糜诖_定

A.酶活性線性范圍

B.適宜的pH

C.適宜的酶量范圍

D.時(shí)間反應(yīng)曲線中呈線性的時(shí)間范圍

E.底物的濃度

答案：D

解析：酶促反應(yīng)進(jìn)程曲線是以時(shí)間做橫坐標(biāo)，反應(yīng)速度做縱坐標(biāo)作圖。主要

目的是確定延滯期和線性期。

14.哪個(gè)不是堿性磷酸酶同工酶的嚴(yán)格分類(lèi)

A.腸型

B.生殖細(xì)胞型

C.胎盤(pán)型

D.非特異組織型

E.肝型

答案：E

解析：堿性磷酸酶同工酶分為四型：腸型、生殖細(xì)胞型、胎盤(pán)型和非特異組

織型。非特異組織型是在酶蛋白合成后，經(jīng)過(guò)不同形式的修飾和加工，形成的肝

型、膽型、腎型、骨骼型等酶的多種形式。

15.自動(dòng)生化分析儀測(cè)定酶活性中的K值計(jì)算公式：K=Wlx匕中各參數(shù)的含義

ebVs

錯(cuò)誤的是

A.K值是指理論值，一般要求進(jìn)行校正

B.￡是指指示物的摩爾消光系數(shù)

C.1為反應(yīng)總體積，若有稀釋水，則包含稀釋水量

D.Vs為樣品量，若有稀釋水，則包含稀釋水量

E.b是比色皿光徑，有些儀器已換算為1cm

答案：D

解析：自動(dòng)生化分析儀測(cè)定酶活性中的K值計(jì)算公式很常用和實(shí)用，只有正

確理解各參數(shù)的含義，才能正確設(shè)置K值。V,為反應(yīng)總體積，等于樣品量、試劑

量、樣品稀釋水，試劑稀釋水量的總和，而Vs為樣品量，不包含稀釋水量。改變

M/Vs比例很容易改變K值。

二、B型題

（題1~5備選答案）將下列臨床常用的診斷酶與疾病相對(duì)應(yīng)

A.骨骼疾病

B.急性胰腺炎

C.結(jié)核性胸膜炎

D.前列腺癌

E.有機(jī)磷中毒

1.ADA

2.CHE

3.ALP

4.PAC

5.PAMY

答案：l.C,2.E,3.A,4.D,5.B

解析：胸水ADA測(cè)定對(duì)結(jié)核性胸膜炎診斷價(jià)值很大，CHE活性顯著下降對(duì)

有機(jī)磷中毒的快速診斷也有重要意義。

三、X型題

1.關(guān)于ACP與ALP的比較正確的是

A.最適pH不同

B.組織來(lái)源不同

C.所作用的底物種類(lèi)相近

D.測(cè)定時(shí)緩沖液種類(lèi)不同

E.穩(wěn)定性不同

答案：A,B,C,D,E

解析：ACP與ALP都屬于磷酸單酯酶，能水解磷酸根，對(duì)底物特異性要求

不高。兩者最適pH分別為5.0和10.5,所以測(cè)定緩沖液不同。ACP主要分布在

紅細(xì)胞和前列腺中，而ALP主要分布在小腸、生殖細(xì)胞、胎盤(pán)、肝、膽、腎、

骨骼等。ACP穩(wěn)定性較差。

2.標(biāo)本溶血對(duì)下列哪些酶測(cè)定結(jié)果有明顯影響

A.CK

B.LD

C.ALT

D.AST

E.GGT

答案：A,B,C,D

解析：紅細(xì)胞中含量高的酶如LD、ALT、AST等在樣品溶血時(shí)，造成血清

中酶活性偏高，雖然紅細(xì)胞中不含CK,但含有大量AK,干擾CK的測(cè)定，造

成假性偏高。還有一種情況，即溶血時(shí)色素干擾所有生化檢測(cè)，尤其是吸收峰在

450nm?550nm的生化檢測(cè)。GGT在紅細(xì)胞中含量不高，溶血也基本不干擾其

測(cè)定（連續(xù)監(jiān)測(cè)法），故不會(huì)造成明顯影響。

3.下列哪些組織器官在病理情況下可引起血清和/或尿液中淀粉酶增高

A.腎臟

B.胰腺

C.肺臟

D.腮腺

E.肝臟

答案：A,B,D

解析：淀粉酶主要分布在胰腺、唾液腺中，在它們病理情況時(shí)可造成血清中

酶活性的升高。淀粉酶因分子量較小，其主要清除方式是通過(guò)腎臟清除。當(dāng)腎臟

濾過(guò)功能下降時(shí)，也可造成血清中酶活性的升高。

4.酶含量的表示方法有

A.酶的活性濃度

B.正常上限升高倍數(shù)

C.酶蛋白的質(zhì)量濃度

D.酶的米氏常數(shù)

E.比活性

答案：A,B,C

解析：酶的米氏常數(shù)是指酶促反應(yīng)速度為最大反應(yīng)速度一半時(shí)的底物濃度，

是酶的特征性常數(shù)。比活性是指單位酶蛋白質(zhì)量的酶活性，是反應(yīng)酶純度的指標(biāo)。

酶含量最常用的表示方法是活性濃度。

5.哪些酶的測(cè)定方法常用免疫學(xué)方法

A.銅氧化酶（銅藍(lán)蛋白）

B.神經(jīng)元特異性烯醇化酶

C.前列腺酸性磷酸酶

D.CK-MB同工酶

E.凝血酶原

答案：A,B,C,D,E

解析：所謂酶蛋白質(zhì)量濃度，是利用酶蛋白的抗原性，制備特異性抗體后用

免疫學(xué)方法直接測(cè)定酶蛋白的濃度，以g/L或mg/L來(lái)表示。酶原因?yàn)闊o(wú)催化活性

只能用免疫學(xué)方法測(cè)定，而同工酶診斷價(jià)值較大，酶活性測(cè)定相對(duì)困難，一般也

用免疫學(xué)方法測(cè)定。

6.酶促反應(yīng)進(jìn)入非線性期的原因有

A.底物的消耗

B.可逆反應(yīng)增強(qiáng)

C.產(chǎn)物抑制作用

D.酶的變性失活

E.反應(yīng)溫度升高

答案：A,B,C,D

解析：隨著反應(yīng)時(shí)間的延長(zhǎng)，底物消耗越來(lái)越明顯，酶促反應(yīng)速度明顯下降,

偏離線性而進(jìn)入非線性期?？赡娣磻?yīng)增強(qiáng)、產(chǎn)物抑制增加、酶變性失活增加、酶

聚合或解離增加都可造成進(jìn)入非線性期。溫度升高當(dāng)然也是酶變性的一個(gè)原因，

但在反應(yīng)過(guò)程中反應(yīng)溫度基本保持恒定，不合題意。

7.酶促反應(yīng)指示物的檢測(cè)主波長(zhǎng)為405nm的有

A.NADH

B.4-硝基酚

C.5-氨基-2-硝基苯甲酸

D.2-氯酚

E.H2O2

答案：B,C,D

解析：色素4-硝基酚、5-氨基-2-硝基苯甲酸、2-氯酚的吸收峰都在401nm?

420nm之間，多數(shù)自動(dòng)生化分析儀都有405nm的波長(zhǎng)。

8.酶偶聯(lián)方法來(lái)測(cè)定酶活性的有

A.丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶

B.門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶

C.肌酸激酶

D.淀粉酶

E.膽堿酯酶

答案：A,B,C,D

解析：除人工合成色素原底物和少數(shù)氧化還原酶外，多數(shù)酶只能用酶偶聯(lián)法

測(cè)定酶活性。如ALT、AST、CK、ADA、5，-NT、AMY等。

9.以下測(cè)定方法的指示反應(yīng)產(chǎn)物是NADH或NADPH有

A.IFCC推薦法測(cè)定ALT

B.IFCC推薦法測(cè)定AST

C.IFCC推薦法測(cè)定CK

D.IFCC推薦法測(cè)定LDH

E.IFCC推薦法測(cè)定GGT

答案：A,B,C,D

解析：輔酶I系統(tǒng)是最常用的指示系統(tǒng)，根據(jù)反應(yīng)方向不同可分為正向反應(yīng)

和逆向反應(yīng)，根據(jù)產(chǎn)物是NADH(NADPH)還是NAD十分為監(jiān)測(cè)吸光度的上升速

率和下降速率。

10.以人工合成色素原底物測(cè)定酶活性的項(xiàng)目有

A.堿性磷酸酶(ALP)

B.淀粉酶(AMS)

C.a-巖藻糖昔酶(AFU)

D.擬膽堿酯酶(PCHE)

E.酸性磷酸酶(ACP)

答案：A,B,C

解析：一些水解酶類(lèi)或轉(zhuǎn)移酶類(lèi)經(jīng)過(guò)酶促反應(yīng)將化合物中的某一基團(tuán)水解或

移去，使無(wú)顏色的底物轉(zhuǎn)變?yōu)橛蓄伾漠a(chǎn)物。把這類(lèi)底物稱為色素原底物，需要

人工合成，故稱為人工合成色素原底物。PCHE、ACP也是利用人工合成底物，

但實(shí)質(zhì)上并不是色素原底物。

11.理想的酶活性測(cè)定方法，哪些與酶活性成正比例

A.最大反應(yīng)速度

B.初速度

C.酶樣品量

D.底物消耗速度

E.產(chǎn)物生成速度

答案：A,B,C,D,E

解析：酶活性用反應(yīng)速度來(lái)表示：v=-d[S]/min)=d[P]/min,可以測(cè)定底物消

耗速度或產(chǎn)物生成速度，這個(gè)速度對(duì)底物濃度而言是最大反應(yīng)速度，對(duì)測(cè)定時(shí)間

而言是初速度。根據(jù)式=[用，酶用量越多，生成產(chǎn)物越多，若時(shí)間一致

則酶活性越高。

12.底物啟動(dòng)模式與樣品啟動(dòng)模式測(cè)定酶活性，敘述正確的是

A.底物啟動(dòng)模式可以消除部分干擾物

B.IFCC推薦法測(cè)定AST采用底物啟動(dòng)模式

C.樣品啟動(dòng)模式不能消除某些干擾物

D.底物啟動(dòng)模式要求兩個(gè)試劑以上

E.IFCC推薦法測(cè)定ALT采用底物啟動(dòng)模式

答案：A,B,C,D,E

解析：底物啟動(dòng)模式是指樣品先與部分試劑(缺乏某個(gè)底物)預(yù)孵育一定時(shí)

間，然后加入這個(gè)底物，樣品中的待測(cè)酶酶促反應(yīng)才開(kāi)始啟動(dòng)。這樣做的好處是

在待測(cè)酶酶促反應(yīng)開(kāi)始之前，可以除去某些干擾物和雜酶的副反應(yīng)，包括內(nèi)源性

干擾物和外源性干擾物。需要雙試劑劑型，IFCC推薦法多采用底物啟動(dòng)模式。

樣品啟動(dòng)模式是指反應(yīng)所需的試劑先混合在一起，然后加入樣品，依靠樣品中的

待測(cè)酶來(lái)啟動(dòng)酶促反應(yīng)，只是在延滯期去除部分干擾物。

四、填空題

1.乳酸脫氫酶(lactatedehydrogenase,LD/LDH)是由、亞基組

成的四聚體，有5種同工酶。

答案：H,M

2.根據(jù)米-曼式方程計(jì)算，酶活性測(cè)定中，當(dāng)⑸=3Km時(shí)，其酶促反應(yīng)速度

Vmax。

答案：75%

3.酶促反應(yīng)進(jìn)行一定時(shí)間后，、、產(chǎn)物抑制增加、酶變性失活增

加、酶聚合或解離增加都可造成進(jìn)入非線性期。

答案：底物濃度不足，可逆反應(yīng)增強(qiáng)

4.定時(shí)法是測(cè)定酶促反應(yīng)的整個(gè)過(guò)程中的平均速度，一般包含,也可能包

含非線性期，與連續(xù)監(jiān)測(cè)法相比，測(cè)定結(jié)果（偏低/偏高）。

答案：延滯期，偏低

5.IFCC推薦法測(cè)定ALT試劑中含有,在預(yù)孵育期可將部分的酶蛋白

恢復(fù)酶活性。

答案：5、磷酸砒哆醛，脫輔基

6.酶偶聯(lián)法測(cè)定、、腺首脫氨酶等也可用Trinder反應(yīng)做指示反應(yīng)。

答案：脂肪酶，5、核甘酸酶

7.影響細(xì)胞內(nèi)酶釋放速度與數(shù)量的因素有：①；②；③酶在細(xì)胞

內(nèi)的定位和存在形式。

答案：細(xì)胞內(nèi)外酶濃度的差異；酶的相對(duì)分子量

8.血漿固有酶在血漿中發(fā)揮特定催化作用，是血漿固有的成分，它們大多數(shù)在

合成，酶濃度的程度可以反映合成該酶的實(shí)質(zhì)細(xì)胞數(shù)量的減少程度。

答案：肝臟，下降

9.小分子蛋白酶如淀粉酶的主要清除方式是,而大多數(shù)酶主要靠

清除。

答案：腎小球?yàn)V過(guò)從尿液中排出，網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)

10.ALT催化雙底物反應(yīng)遵循機(jī)制，LD催化雙底物反應(yīng)遵循機(jī)制。

答案：乒乓，序列有序

11.選定酶活性測(cè)定條件時(shí)，若要求測(cè)定上限越高，則線性期越（短/長(zhǎng)）;

而對(duì)反應(yīng)線性要求低，即非線性度越大，則線性期越_____（短/長(zhǎng)）。

答案：短，長(zhǎng)

12.EPS法測(cè)定是IFCC酶學(xué)小組臨時(shí)推薦方法,4,6-亞乙基-4-硝基酚-a-D-

麥芽七糖甘（EPS-G7）做底物，亞乙基的作用是提高底物的穩(wěn)定性，輔助酶

是o

答案：淀粉酶，多功能a-葡萄糖甘酶

13.IFCC推薦法測(cè)定ALP的緩沖液是,IFCC推薦法測(cè)定CK的激活劑

是O

答案：AMP,NAC

14.電泳法測(cè)定同工酶與一般蛋白質(zhì)電泳相比，主要不同是應(yīng)盡量保持酶活性，

故不經(jīng)步驟；區(qū)帶顯色采用（水溶性/非水溶性）產(chǎn)物設(shè)計(jì)的目的是

防止區(qū)帶擴(kuò)散。

答案：固定，非水溶性

五、名詞解釋

1.酶活性測(cè)定Vmax

答案：最大反應(yīng)速度Vmax是指當(dāng)酶的結(jié)合位點(diǎn)與底物結(jié)合飽和時(shí)的反應(yīng)速

度。含義是對(duì)底物濃度變量而言，底物足夠時(shí)酶促反應(yīng)速度最大，酶量[E]只與

Vmax成正比例。

2.酶活性正常上限升高倍數(shù)（ULN）

答案：所謂ULN是指用測(cè)得的酶活性結(jié)果除以參考范圍上限。

3.酶活性定時(shí)法測(cè)定

答案：是將酶與底物在特定條件下孵育一定時(shí)間后，用終止液終止反應(yīng)，通

過(guò)化學(xué)或生物化學(xué)的方法測(cè)出底物或產(chǎn)物的總變化量，除以時(shí)間后，計(jì)算出底物

消耗速度（-d[S]/min）或產(chǎn)物生成速度（d[P]/min）。

4.酶活性連續(xù)監(jiān)測(cè)法

答案：是將酶與底物在特定條件（緩沖液、溫度等）下孵育，每隔一定時(shí)間

連續(xù)測(cè)定酶促反應(yīng)過(guò)程中某一底物或產(chǎn)物的特征信號(hào)的變化，從而計(jì)算出每分鐘

的信號(hào)變化速率。

5.酶促反應(yīng)的零級(jí)反應(yīng)

答案：當(dāng)[S]?Km時(shí)，丫=上噌斗公式中的反應(yīng)速度與底物濃度的關(guān)系可

Km+[S]

以表示為：V=Umax=[S]°Vmax,即酶促反應(yīng)速度與底物濃度無(wú)關(guān)。

6.酶促反應(yīng)的一級(jí)反應(yīng)

答案：當(dāng)[S]?Km時(shí)，v=5噌公式中的反應(yīng)速度與底物濃度的關(guān)系可

Km-{-[S]

[S]Vmax]

以表示為：丫=三-丫?*：—二[S],即酶促反應(yīng)速度與底物濃度成正比例。

7.酶偶聯(lián)反應(yīng)

答案：當(dāng)酶促反應(yīng)的底物或產(chǎn)物無(wú)可直接檢測(cè)的特征，需要偶聯(lián)一個(gè)或多個(gè)

酶轉(zhuǎn)化為可直接檢測(cè)的產(chǎn)物，酶偶聯(lián)反應(yīng)廣泛用于酶活性測(cè)定和酶法分析代謝

物。酶偶聯(lián)反應(yīng)模式如下：

8.酶促反應(yīng)的最適條件

答案：是指能滿足酶發(fā)揮最大催化效率所需的條件。最適條件包括最適底物

濃度、最適溫度、最適pH等。

9.酶校準(zhǔn)物

答案：多是用人血清或動(dòng)物血清作基質(zhì)，與測(cè)定方法、儀器、試劑、操作程

序一起組成測(cè)定系統(tǒng)，用來(lái)校準(zhǔn)測(cè)定條件(試劑、儀器)波動(dòng)時(shí)對(duì)測(cè)定結(jié)果的影

響。如IFCC認(rèn)可的CRM酶參考物。

10.同工酶

答案：同一種屬中由不同基因或等位基因所編碼的多肽鏈單體、純聚體或雜

化體，具有相同的催化作用，但其分子構(gòu)成、空間構(gòu)像、理化性質(zhì)、生物學(xué)性質(zhì)

以及器官分布或細(xì)胞內(nèi)定位不同的一組酶稱為同工酶。

六、問(wèn)答題

1.簡(jiǎn)述連續(xù)監(jiān)測(cè)法測(cè)定臨床常用診斷酶的方法原理分哪幾類(lèi)？

答案：(1)以人工合成色素原做底物的連續(xù)監(jiān)測(cè)；

(2)以NAD(P)+=NAD(P)H的連續(xù)監(jiān)測(cè)；

(3)以Trinder反應(yīng)做指示反應(yīng)的連續(xù)監(jiān)測(cè)；