2022-2023學(xué)年江蘇省揚州市邗江區(qū)高二下學(xué)期期中調(diào)研測試生物試題（解析版）

高中生物名校試卷PAGEPAGE1江蘇省揚州市邗江區(qū)2022-2023學(xué)年高二下學(xué)期期中調(diào)研測試試題一、單項選擇題：1.如圖表示培養(yǎng)和純化X細(xì)菌的部分操作步驟，下列相關(guān)敘述正確的是（）A.對實驗操作的空間、操作者的衣著和手進(jìn)行滅菌處理B.步驟①待培養(yǎng)基溫度降至40℃左右進(jìn)行倒平板操作C.步驟③每次劃線前和劃線后都需要對接種環(huán)灼燒滅菌D.步驟③劃線結(jié)束后在皿蓋上標(biāo)注菌種及接種日期等信息〖答案〗C〖祥解〗題圖分析：①是倒平板，②是用接種環(huán)沾取菌液，③是進(jìn)行平板劃線，而后通過培養(yǎng)可獲得單菌落。【詳析】A、對實驗操作的空間、操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和消毒處理，而非滅菌，滅菌通常用較強的理化方法殺死所有微生物，培養(yǎng)基以及培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌，A錯誤；B、待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時，在酒精燈火焰附近倒平板，B錯誤；C、平板劃線法每次劃線前后都需要對接種環(huán)灼燒滅菌，C正確；D、劃線結(jié)束后在培養(yǎng)皿底部標(biāo)注菌種及接種日期等信息，D錯誤。故選C。2.某研究小組對非滅菌的一次性口罩中的微生物進(jìn)行檢測，部分操作如下：從口罩上剪取總量9cm2樣品（體積近似1mL），剪碎后加入已滅菌的生理鹽水中，定容至10mL，充分混勻，得到樣液。下列說法正確的是（）A.對培養(yǎng)基使用電熱鼓風(fēng)干燥箱滅菌處理后，倒4個平板冷卻后倒放擱置B.向前3個平板中分別加入1mL樣液，用涂布器將樣液涂布均勻C.第4個平板接種等量已滅菌的生理鹽水并培養(yǎng)，可用于檢測是否有雜菌污染D.若一段時間后，4個平板上長出的菌落數(shù)依次為31、42、35和0個，可計算出1cm2口罩樣品中菌體數(shù)量為36個〖答案〗C〖祥解〗1、待培養(yǎng)基冷卻到50℃左右時，在酒精燈附近倒平板；待平板冷卻凝固后，將平板倒過來放置，可以防止冷凝水滴落到培養(yǎng)基上，防止造成污染。2、若用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種，在涂布平板時，滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液的量一般不超過0.1mL，其原因是避免培養(yǎng)基表面的菌液出現(xiàn)積液，導(dǎo)致菌體堆積，影響分離效果。【詳析】A、對培養(yǎng)基使用高壓蒸汽滅菌法滅菌處理后，A錯誤；B、用稀釋涂布平板法統(tǒng)計細(xì)菌數(shù)量時，滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液的量一般不超過0.1mL，其原因是避免培養(yǎng)基表面的菌液出現(xiàn)積液，導(dǎo)致菌體堆積，影響分離效果，B錯誤；C、培養(yǎng)接種等量已滅菌的生理鹽水的固體培養(yǎng)基是為了作為對照組，第4個平板接種等量已滅菌的生理鹽水并與前3個平板共同培養(yǎng)，可用于檢測是否有雜菌污染，C正確；D、第4個平板沒有菌落形成，說明沒有雜菌污染，且前三個平板長出的菌落數(shù)均在30~300之間，說明操作中的稀釋倍數(shù)（10倍）是合適的。若接種的樣液是0.1mL，則9cm2口罩樣品中菌體數(shù)量為(31+42+35)÷0.1×10=3600個，則lcm2口罩樣品中菌體數(shù)量為400個，D錯誤。故選C。3.很多生活實例中蘊含著微生物發(fā)酵的原理。下列相關(guān)敘述，錯誤的是（）A.自制葡萄酒在發(fā)酵過程中隨著時間的推進(jìn)，酒精的產(chǎn)生速率先上升后趨于穩(wěn)定B.夏天開瓶后的紅酒容易變酸，是由于空氣中的醋酸菌將乙醇變成乙醛而后變?yōu)橐宜酑.用巴氏消毒法能對牛奶消毒殺死其中的絕大多數(shù)微生物，且不破壞牛奶的營養(yǎng)成分D.用白蘿卜制作泡菜時為縮短腌制時間，可向新壇中添加老壇內(nèi)已經(jīng)腌制過的泡菜汁〖答案〗A〖祥解〗1、參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型；果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的葡萄糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿幔?、泡菜的制作原理：泡菜的制作離不開乳酸菌；在無氧條件下，乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸?！驹斘觥緼、酒精發(fā)酵早期，酵母菌和底物充足，發(fā)酵速率較快，酒精的產(chǎn)生速率呈上升趨勢，隨發(fā)酵的持續(xù)進(jìn)行，酒精濃度變高，酵母菌的活性受到影響，導(dǎo)致酒精的產(chǎn)生速度下降，最后底物消耗完，停止產(chǎn)生酒精，A錯誤；B、夏天開瓶后的紅酒，在有氧的條件下，空氣中的醋酸菌將乙醇變成乙醛而后變?yōu)橐宜幔瑢?dǎo)致紅酒變酸，B正確；C、巴氏消毒法是一種低溫消毒法，用巴氏消毒法對牛奶消毒既能殺死牛奶中的絕大多數(shù)微生物，又不破壞牛奶中的營養(yǎng)成分，C正確；D、泡菜汁中含有一定量的發(fā)酵菌種，所以在腌制過程中，加入一些已經(jīng)腌制過泡菜汁可縮短腌制時間，D正確。故選A。4.下列是關(guān)于發(fā)酵工程及其應(yīng)用的敘述，錯誤的是（）A.發(fā)酵工程利用了微生物繁殖快、適應(yīng)性強、吸收多、轉(zhuǎn)化快等特定功能B.在分批發(fā)酵過程中，及時補充營養(yǎng)物質(zhì)或分離代謝產(chǎn)物能延長穩(wěn)定期C.發(fā)酵罐制作酸奶時，可先通氧氣促進(jìn)乳酸菌增殖，再密閉發(fā)酵D.發(fā)酵工程培養(yǎng)微生物細(xì)胞可選擇對數(shù)期細(xì)胞作為生產(chǎn)的“種子”〖答案〗C〖祥解〗發(fā)酵工程就是通過微生物的生命活動，把發(fā)酵原料轉(zhuǎn)化為人類所需要的微生物產(chǎn)品的工業(yè)過程?！驹斘觥緼、發(fā)酵工程利用了微生物如繁殖快、適應(yīng)性強、吸收多、轉(zhuǎn)化快等特定功能，能夠生產(chǎn)人類所需的微生物，A正確；B、在分批發(fā)酵過程中，及時分離微生物產(chǎn)生的有害代謝產(chǎn)物或補充營養(yǎng)物質(zhì)，有利于微生物的生存，故能延長穩(wěn)定期，B正確；C、乳酸菌為厭氧微生物，發(fā)酵時應(yīng)保持無氧環(huán)境，不能通入氧氣，C錯誤；D、發(fā)酵工程培養(yǎng)微生物細(xì)胞可選擇對數(shù)期細(xì)胞作為生產(chǎn)的“種子”，此時微生物細(xì)胞的變化是進(jìn)入高速繁殖狀態(tài)，利于發(fā)酵的順利進(jìn)行，D正確。故選C。5.下列關(guān)于天竺葵組織培養(yǎng)的敘述，錯誤的是（）A.天竺葵莖段培養(yǎng)前需用70%濃度的酒精和0.1%氯化汞的混合液浸泡30分鐘B.切取休眠期的莖段進(jìn)行培養(yǎng)不易形成愈傷組織是因為該部位對誘導(dǎo)反應(yīng)遲鈍C.培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分和激素種類、配比會影響愈傷組織的形成和繼續(xù)發(fā)育D.移植到蛭石中煉苗主要是因為蛭石保水透氣，有利于植物根系生長和苗的穩(wěn)定發(fā)育〖答案〗A〖祥解〗植物組織培養(yǎng)過程是：離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織，然后再分化生成根、芽，最終形成植物體。植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性?！驹斘觥緼、經(jīng)流水沖洗后的外植體先用70%濃度的酒精消毒10s，再用無菌水清洗2-3次，用無菌濾紙吸干表面水分后，在0.1%氯化汞溶液浸泡5分鐘，A錯誤；B、休眠期的莖段對誘導(dǎo)反應(yīng)遲鈍，不易獲得愈傷組織，幼嫩的莖段分裂旺盛，因而容易誘導(dǎo)形成愈傷組織，B正確；C、植物組織培養(yǎng)過程中細(xì)胞分裂素和生長素的比例不同，愈傷組織分化的方向也不同，當(dāng)生長素和細(xì)胞分裂素比例相當(dāng)時，利于愈傷組織的形成，當(dāng)生長素與細(xì)胞分裂素的比值大于1時，有利于誘導(dǎo)根的形成，當(dāng)生長素與細(xì)胞分裂素的比值小于1時，有利于誘導(dǎo)芽的形成，C正確；D、移植到蛭石中煉苗主要是因為蛭石保水透氣，可優(yōu)化土壤結(jié)構(gòu)，有利于植物根系的生長和小苗的穩(wěn)定發(fā)育，D正確。故選A。6.植物細(xì)胞工程包括植物組織培養(yǎng)、植物體細(xì)胞雜交等許多技術(shù)，具有廣泛的應(yīng)用前景和實用價值。下列對這些操作或應(yīng)用的描述錯誤的是（）A.人工種子可以解決有些作物品種繁殖能力差、結(jié)籽困難等問題B.利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)繁殖植物可以不受季節(jié)和惡劣天氣的影響C.利用植物根尖、莖尖做外植體進(jìn)行培養(yǎng)降低病毒的感染，培養(yǎng)出大量的抗毒種苗D.利用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以在生產(chǎn)藥物、食品添加劑等實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)〖答案〗C〖祥解〗人工種子的優(yōu)點：人工種子人工種子生產(chǎn)不受季節(jié)限制；人工種子人工種子加入某些成分，具有更好的營養(yǎng)供應(yīng)和抗病能力；天然種子種子減數(shù)分裂會造成遺傳性狀改變，而人工種子人工種子可以保持優(yōu)良品種的遺傳特性?！驹斘觥緼、人工種子可以解決有些作物品種繁殖能力差、結(jié)籽困難或發(fā)芽率低等問題，A正確；B、與常規(guī)的種子繁殖方法相比，利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)繁殖植物可以不受季節(jié)和惡劣天氣的影響，繁殖速度快，且能保持植物原有的遺傳特性，B正確；C、植物莖尖的分生區(qū)附近病毒極少，甚至無病毒，利用植物根尖、莖尖做外植體進(jìn)行培養(yǎng)降低病毒的感染，但不能抵抗病毒，C錯誤；D、通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)還可以用來生產(chǎn)藥物、食品添加劑、香料、色素等，D正確。故選C。7.懸浮培養(yǎng)的動物細(xì)胞會因細(xì)胞密度過大、有害代謝產(chǎn)物積累等因素而分裂受阻。生產(chǎn)上常用灌流式培養(yǎng)避免這些現(xiàn)象出現(xiàn)。灌流式培養(yǎng)是在細(xì)胞培養(yǎng)管內(nèi)，一邊不斷注入新鮮培養(yǎng)基，一邊將培養(yǎng)液的上清液不斷移出。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A.灌流式培養(yǎng)的細(xì)胞會貼壁生長，但不會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象B.灌流是在細(xì)胞密度達(dá)到一定濃度或者營養(yǎng)物質(zhì)低于一定濃度時進(jìn)行C.過高的灌流速率會導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)不能得到充分利用，造成培養(yǎng)基浪費D.配制灌流式培養(yǎng)所需培養(yǎng)基時應(yīng)考慮細(xì)胞生存的液體環(huán)境的滲透壓〖答案〗A〖祥解〗動物細(xì)胞培養(yǎng)：（1）概念：動物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動物機體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個細(xì)胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長和繁殖。（2）原理：細(xì)胞增殖。（3）動物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。【詳析】A、懸浮培養(yǎng)的動物細(xì)胞不出現(xiàn)貼壁生長現(xiàn)象，A錯誤；B、懸浮培養(yǎng)的動物細(xì)胞會因細(xì)胞密度過大、有害代謝產(chǎn)物積累等因素而分裂受阻，而灌流是在細(xì)胞密度達(dá)到一定濃度或者營養(yǎng)物質(zhì)低于一定濃度時進(jìn)行，B正確；C、過高的灌流速率，培養(yǎng)的細(xì)胞沒有及時利用營養(yǎng)物質(zhì)，會導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)不能得到充分利用，造成培養(yǎng)基浪費，C正確；D、動物細(xì)胞的細(xì)胞外液的滲透壓是相對穩(wěn)定且適宜的，配制灌流式培養(yǎng)所需培養(yǎng)基時應(yīng)考慮細(xì)胞生存的液體環(huán)境的滲透壓，D正確。故選A。8.抗體–藥物偶聯(lián)物（ADC）可以實現(xiàn)對腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷，其機理如下圖。相關(guān)敘述錯誤的是（）A.該單克隆抗體制備過程中可以用腫瘤抗原對實驗動物進(jìn)行免疫處理B.該單克隆抗體可以利用動物細(xì)胞培養(yǎng)、動物細(xì)胞融合等技術(shù)獲得C.ADC與細(xì)胞膜上的受體特異性結(jié)合，以胞吞方式進(jìn)入腫瘤細(xì)胞D.ADC中的藥物會在溶酶體中降解，從而失去對腫瘤細(xì)胞的殺傷作用〖答案〗D〖祥解〗據(jù)圖分析可知，圖中抗體-藥物偶聯(lián)物（ADC）通過將藥物與單克隆抗體結(jié)合，利用抗體與抗原的特異性結(jié)合，實現(xiàn)了對腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷。【詳析】A、該單克隆抗體制備過程中需用特定抗原注射小鼠體內(nèi)，使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞，A正確；B、單克隆抗體制備的基本步驟：對小鼠進(jìn)行免疫→提取B淋巴細(xì)胞→將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合→通過篩選、克隆化培養(yǎng)和擴大化培養(yǎng)→最終注入小鼠體內(nèi)→從腹腔腹水中提取單克隆抗體，因此該單克隆抗體可以利用動物細(xì)胞培養(yǎng)、動物細(xì)胞融合等技術(shù)獲得，B正確；C、大分子物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的方式為胞吞，ADC與細(xì)胞膜上的受體特異性結(jié)合，以胞吞方式進(jìn)入腫瘤細(xì)胞，C正確；D、圖中ADC的作用機制為：攜帶藥物的抗體與腫瘤細(xì)胞膜上的特異性受體結(jié)合，然后通過胞吞作用進(jìn)入到細(xì)胞內(nèi)，抗體被細(xì)胞內(nèi)的溶酶體裂解，釋放出藥物作用于腫瘤細(xì)胞，使腫瘤細(xì)胞凋亡，D錯誤。故選D。9.如圖表示試管鼠的基本制備流程，下列敘述正確的是（）A.處理1給4-6周齡雌鼠注射性激素進(jìn)行超數(shù)排卵處理B.處理2和處理3是分別使卵母細(xì)胞和精子獲得受精能力C.過程1和過程2均在代孕鼠體內(nèi)完成細(xì)胞的分裂和分化D.對試管鼠代孕的雌鼠需注射免疫抑制劑防止免疫排斥反應(yīng)〖答案〗B〖祥解〗圖中處理1是注射促性腺激素使性成熟的雌鼠超數(shù)排卵處理，處理2是使卵母細(xì)胞需要發(fā)育至減數(shù)第二次分裂的中期，獲得受精能力，處理3是精子進(jìn)行處理，使其獲得受精能力。過程1是胚胎的體外發(fā)育，過程2是胚胎移植?！驹斘觥緼、一般通過注射促性腺激素使性成熟的雌鼠超數(shù)排卵處理，A錯誤；B、要使精子和卵母細(xì)胞在體外成功結(jié)合，需要對精子進(jìn)行處理，使其獲能，另外培養(yǎng)的卵母細(xì)胞需要發(fā)育至減數(shù)第二次分裂的中期，使卵母細(xì)胞獲得受精能力，即圖中的處理2和處理3，B正確；C、過程1是胚胎的體外發(fā)育，在體外完成細(xì)胞的分裂和分化，C錯誤；D、一般情況下，子宮對胚胎不產(chǎn)生排斥反應(yīng)，不用注射免疫抑制劑，D錯誤。故選B。10.下列有關(guān)細(xì)胞工程和胚胎工程的敘述，錯誤的是（）A.干細(xì)胞在形態(tài)上一般細(xì)胞體積小，細(xì)胞核相對較大B.人工采集得的牛羊精子可加入肝素中來誘導(dǎo)精子獲能C.胚胎移植過程需對供體和受體母牛進(jìn)行同期發(fā)情處理D.胚胎分割的對象為桑椹胚時要將內(nèi)細(xì)胞團均等分割〖答案〗D〖祥解〗胚胎移植的基本程序主要包括：①對供、受體的選擇和處理。選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體，供體和受體是同一物種。并用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對供體母牛做超數(shù)排卵處理。②配種或人工授精。③對胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存。配種或輸精后第7天，用特制的沖卵裝置，把供體母牛子宮內(nèi)的胚胎沖洗出來（也叫沖卵）。對胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查，此時的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段。直接向受體移植或放入-196℃的液氮中保存。④對胚胎進(jìn)行移植。⑤移植后的檢查。對受體母牛進(jìn)行是否妊娠的檢查?！驹斘觥緼、干細(xì)胞的特點是細(xì)胞體積小，細(xì)胞核相對較大，A正確；B、人工采集得的牛羊精子可加入肝素中來誘導(dǎo)精子獲能，才具有受精能力，B正確；C、胚胎移植過程需對供體和受體母牛進(jìn)行同期發(fā)情處理，使供、受體達(dá)到相同的繁殖生理狀態(tài)，C正確；D、胚胎分割的對象為囊胚時要將內(nèi)細(xì)胞團均等分割，D錯誤。故選D。11.下列關(guān)于DNA粗提取與鑒定的敘述，正確的是（）A.取材時可選用豬血、洋蔥、香蕉等富含DNA的材料進(jìn)行實驗B.將白色絲狀物置于2mol/L的NaCl溶液中，會發(fā)生溶解現(xiàn)象C.可將洋蔥置于清水中，細(xì)胞吸水破裂后將DNA釋放出來D.鑒定DNA時，應(yīng)將絲狀物直接加入到二苯胺試劑中并進(jìn)行沸水浴〖答案〗B〖祥解〗DNA粗提取選材的標(biāo)準(zhǔn)：DNA含量高，并且材料易得。由于哺乳動物成熟的紅細(xì)胞中沒有細(xì)胞核和細(xì)胞器，因此不采用哺乳動物的血液。DNA粗提取和鑒定的原理：1、DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同（DNA在0.14mol/L的氯化鈉中溶解度最低，在2mol/L的氯化鈉中溶解度最大）；DNA不溶于酒精溶液，但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精。2、DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍(lán)色?！驹斘觥緼、由于哺乳動物成熟的紅細(xì)胞中沒有細(xì)胞核和細(xì)胞器，因此不采用豬血來提取DNA，A錯誤；B、DNA在0.14mol/L的氯化鈉中溶解度最低，在2mol/L的氯化鈉中溶解度最大，故將白色絲狀物置于2mol/L的NaCl溶液中，會發(fā)生溶解現(xiàn)象，B正確；C、將洋蔥置于清水中，由于細(xì)胞壁的保護(hù)，細(xì)胞吸水后不會破裂，C錯誤；D、鑒定DNA時，應(yīng)將絲狀物溶解在2mol/L的NaCl溶液中，加入二苯胺試劑并進(jìn)行沸水浴，D錯誤。故選B。12.下列有關(guān)限制酶的敘述，正確的是（）A.限制酶識別序列越短，則該序列在DNA中出現(xiàn)的幾率就越小B.—CATG↓—和—G↓GATCC—序列被限制酶切出的黏性末端堿基數(shù)相同C.只有用相同的限制酶處理含目的基因和質(zhì)粒，才能形成重組質(zhì)粒D.用限制酶切割DNA分子中部，獲得一個目的基因時被水解的磷酸二酯鍵有2個〖答案〗B〖祥解〗限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。【詳析】A、限制酶識別序列越短，則該序列在DNA中出現(xiàn)的幾率就越大，A錯誤；B、-CATG↓-和-G↓GATCC-序列被限制酶切出的黏性末端堿基數(shù)相同，都是4個，B正確；C、用不同的限制酶處理含目的基因的片段和質(zhì)粒，也可能形成相同的黏性末端，再用DNA連接酶也可能形成重組質(zhì)粒，C錯誤；D、用限制酶從一個DNA分子中部獲取一個目的基因時，需要切開兩個切口，斷裂4個磷酸二酯鍵，D錯誤。故選B。13.為提高紅豆杉細(xì)胞培養(yǎng)物中紫杉醇的產(chǎn)量，研究人員構(gòu)建紫杉醇合成關(guān)鍵酶基因（Bapt）的超表達(dá)載體，并將其導(dǎo)入紅豆杉細(xì)胞，具體流程如下圖。相關(guān)說法不正確的是（）A.p1301載體上應(yīng)含有增強Bapt基因表達(dá)的序列B.超表達(dá)載體中應(yīng)含有潮霉素抗性基因作為標(biāo)記基因C.可使用Bapt基因制成的探針檢測過程⑤是否成功D.工廠化生產(chǎn)紫杉醇需將改造后的紅豆杉細(xì)胞培養(yǎng)至愈傷組織〖答案〗C〖祥解〗據(jù)圖分析，①是逆轉(zhuǎn)錄過程，②是擴增cDNA過程，③是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，④是將重組質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌，⑤是轉(zhuǎn)化過程?！驹斘觥緼、根據(jù)題干信息“研究人員構(gòu)建紫杉醇合成關(guān)鍵酶（Bapt）基因的超表達(dá)載體來提高紫杉醇產(chǎn)量”可知，p1303載體上可能含有增強子序列，作用是促進(jìn)Bapt基因的表達(dá)，A正確；B、超表達(dá)載體中應(yīng)含有潮霉素抗性基因作為標(biāo)記基因，在含有潮霉素的培養(yǎng)基上，超表達(dá)載體能夠存活，從而起到篩選作用，B正確；C、由于紅豆杉細(xì)胞中本身存在Bapt基因，無論超表達(dá)載體是否成功導(dǎo)入，都能與Bapt基因探針形成雜交分子，因此不能通過Bapt基因探針來檢測步驟⑤是否成功，C錯誤；D、工廠化生產(chǎn)紫杉醇屬于細(xì)胞產(chǎn)物的獲得，只需要培養(yǎng)到愈傷組織階段即，D正確。故選C。14.下列有關(guān)生物技術(shù)安全及倫理性有關(guān)的問題，表述錯誤的是（）A.若轉(zhuǎn)基因生物的外源基因來自自然界，也可能存在安全性問題B.對于轉(zhuǎn)基因生物可以采用隔離帶，防止其花粉擴散或者逃逸C.生殖性克隆可以為因免疫排斥反應(yīng)造成的器官來源不足提供新的解決方案D.生物武器會對人類造成嚴(yán)重威脅和傷害，因此我國反對其技術(shù)和設(shè)備的擴散〖答案〗C〖祥解〗轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)、過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）?！驹斘觥緼、轉(zhuǎn)基因植物有可能成為“入侵的外來物種”，威脅生態(tài)系統(tǒng)中其他生物的生存，A正確；B、對于轉(zhuǎn)基因生物可以采用隔離帶，防止其花粉擴散或者逃逸，避免對生態(tài)系統(tǒng)其他生物造成威脅，B正確；C、治療性克隆可以為因免疫排斥反應(yīng)造成的器官來源不足提供新的解決方案，C錯誤；D、生物武器會對人類造成嚴(yán)重威脅和傷害，我國對于生物武器采取的態(tài)度是不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲存生物武器，并反對生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴散，D正確。故選C。二、多項選擇題：15.為探究阿莫西林（一種抗生素）對連續(xù)傳代大腸桿菌的選擇作用，某生物興趣小組采用濾紙片法測定阿莫西林的抑菌效果，圖甲、乙、丙分別是大腸桿菌第一、二、三代抑菌圈的實驗結(jié)果，下列相關(guān)敘述正確的是（）A.阿莫西林溶液不需要用高壓蒸汽法進(jìn)行滅菌處理B.擴增培養(yǎng)下一代大腸桿菌時應(yīng)在上一代培養(yǎng)基的中央挑取菌落C.培養(yǎng)基1號區(qū)域的濾紙片應(yīng)是用無菌水處理后的濾紙片D.隨著傳代次數(shù)的增加，大腸桿菌對阿莫西林出現(xiàn)耐藥性〖答案〗ACD〖祥解〗由圖可知，隨著代數(shù)增加，抑菌圈越來越小，說明阿莫西林將具有抗藥性的大腸桿菌選擇出來了?！驹斘觥緼、阿莫西林是一種抗生素，因此阿莫西林溶液不需要用高壓蒸汽法進(jìn)行滅菌處理，A正確；B、擴增培養(yǎng)下一代大腸桿菌時應(yīng)在上一代培養(yǎng)基的抑菌圈的邊緣挑取菌落，B錯誤；C、培養(yǎng)基1號區(qū)域的濾紙片在第一、二、三代抑菌圈相等（無抑菌圈），應(yīng)是用無菌水處理后的濾紙片，作為對照組，C正確；D、隨著傳代次數(shù)的增加，抑菌圈越來越小，說明大腸桿菌對阿莫西林出現(xiàn)耐藥性，D正確。故選ACD。16.原腸胚形成期被稱為人體胚胎發(fā)育的“黑匣子”時期。研究人員利用胚胎干細(xì)胞，在實驗室中制造出不能發(fā)育成完整胚胎的“擬原腸胚”模型，用來揭示人類早期胚胎發(fā)育的過程。下列說法正確的是（）A.滋養(yǎng)層細(xì)胞將來能發(fā)育成胎膜和胎盤B.利用核移植所得胚胎干細(xì)胞，可以誘導(dǎo)發(fā)育成適合移植的器官C.對原腸胚進(jìn)行胚胎分割，可以提高移植胚胎的利用率D.該模型可以研究酒精、藥物和病原體對胚胎發(fā)育的影響〖答案〗ABD〖祥解〗胚胎干細(xì)胞：1、哺乳動物的胚胎干細(xì)胞簡稱ES或EK細(xì)胞，來源于早期胚胎或從原始性腺中分離出來；2、具有胚胎細(xì)胞的特性，在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞；另外，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生分化，可進(jìn)行冷凍保存，也可進(jìn)行遺傳改造?！驹斘觥緼、滋養(yǎng)層細(xì)胞將來能發(fā)育成胎膜和胎盤，A正確；B、利用核移植所得胚胎干細(xì)胞，可以誘導(dǎo)發(fā)育成適合移植的器官，可減少免疫排斥反應(yīng)，B正確；C、胚胎分割時應(yīng)該選擇形態(tài)正常、發(fā)育良好的桑葚胚或囊胚，C錯誤；D、“擬原腸胚”模型可以研究酒精、藥物和病原體對胚胎發(fā)育的影響，D正確。故選ABD。17.對x病毒抗原快速檢測試劑盒原理如下：膠體金墊上有膠體金標(biāo)記的抗體1（足量，可移動，聚集后會呈紅色），在檢測線(T線)上有抗體2，這兩種抗體都能與抗原結(jié)合。抗抗體1抗體（抗體3）位于質(zhì)控線(C線)上，可與多余的抗體1結(jié)合。下列敘述錯誤的（）A.制備這3種抗體都需要用x病毒作為抗原B.單抗細(xì)胞株的獲得利用了動物細(xì)胞核的全能性C.雜交瘤細(xì)胞經(jīng)小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)后，可從小鼠血液中獲取大量單克隆抗體D.若檢測呈陽性，則T、C線都顯色，共發(fā)生3種抗原-抗體特異性反應(yīng)〖答案〗ABC〖祥解〗根據(jù)題意分析：抗體1、抗體2，這兩種抗體都能與抗原結(jié)合，都需要新冠病毒作為抗原?！驹斘觥緼、根據(jù)題意分析，抗體1、抗體2都能與抗原結(jié)合，需要用新冠病毒作為抗原，而抗體3是以抗體1作為抗原，A錯誤；B、單抗細(xì)胞株的獲得利用了動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，B錯誤；C、雜交瘤細(xì)胞經(jīng)小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)后，可從小鼠腹水中獲取大量單克隆抗體，C錯誤；D、根據(jù)題意可知，該試劑盒含有3中抗體，若檢測呈陽性，則T、C線都顯色，共發(fā)生3種抗原—抗體特異性反應(yīng)，D正確。故選ABC。18.PCR引物的3’端為結(jié)合模板DNA的關(guān)鍵堿基，5’端無嚴(yán)格限制，可用于添加限制酶切點等序列。下列敘述錯誤的是（）A.PCR第4個循環(huán)，消耗了15對引物B.脫氧核苷酸作為擴增的原料會依次連接到5’端C.DNA聚合酶能將單個脫氧核苷酸連續(xù)結(jié)合到引物鏈上D.用圖中引物擴增至少四個循環(huán)后才能獲得兩端均添加限制酶切點的目的產(chǎn)物〖答案〗ABD〖祥解〗PCR由變性-退火-延伸三個基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：1、模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備；2、模板DNA與引物的退火（復(fù)性）：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結(jié)合；3、延伸：DNA聚合酶由降溫時結(jié)合上的引物開始沿著DNA鏈合成互補鏈。此階段的溫度依賴于DNA聚合酶。該步驟時間依賴于聚合酶以及需要合成的DNA片段長度?！驹斘觥緼、該DNA是雙鏈，第一次循環(huán)要1對引物，第二次要2對，第三次4對，第四次要8對，即PCR第4個循環(huán)，消耗了8對引物，A錯誤；B、進(jìn)行PCR時，擴增是從引物的3'端延伸，因此脫氧核苷酸作為擴增的原料會依次連接到3'端，B錯誤；C、耐高溫的DNA聚合酶要在雙鏈DNA解鏈以后，結(jié)合到DNA上，以其中一條單鏈為模板，以一小段RNA為引物，然后將單個脫氧核苷酸連續(xù)結(jié)合到引物鏈上，合成子鏈，C正確；D、，由圖示可知，如圖所示X基因為目的基因。經(jīng)過第一輪復(fù)制以親代DNA的兩條鏈做模板，可以得到①和②兩種DNA；經(jīng)過第二輪復(fù)制可以得到①和③、②和④；經(jīng)過第三輪復(fù)制可以得到①和③、③和⑤、②和④、④和⑤；第四輪復(fù)制得到16個DNA分子，即①和③、兩個③和兩個⑤、兩個④和兩個⑤、兩個⑤得到4個⑤。綜上所述，在第三輪循環(huán)產(chǎn)物中才能開始出現(xiàn)完整的X基因（目的基因），D錯誤。故選ABD。19.蛋白酶應(yīng)用于洗滌劑、制革及絲綢工業(yè)。某研究小組利用蛋白質(zhì)工程將該蛋白酶中第188位丙氨酸替換為脯氨酸、第239位谷氨酰胺替換為精氨酸、第262位纈氨酸替換為亮氨酸，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該酶的催化活性大幅度提高。下列敘述正確的是（）A.對枯草桿菌蛋白酶進(jìn)行改造通過直接改造蛋白酶的分子結(jié)構(gòu)來實現(xiàn)B.通過基因工程和蛋白質(zhì)工程生產(chǎn)的枯草桿菌蛋白酶的氨基酸序列相同C.改造后的枯草桿菌蛋白酶可能使空間結(jié)構(gòu)發(fā)生改變導(dǎo)致其催化活性提高D.對枯草桿菌蛋白酶進(jìn)行分子設(shè)計必須從預(yù)期蛋白酶的功能特點入手〖答案〗CD〖祥解〗蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或者制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)生活需求?！驹斘觥緼、對枯草桿菌蛋白酶進(jìn)行改造通過基因來實現(xiàn)，A錯誤；B、基因工程生產(chǎn)的蛋白質(zhì)是自然界已有的蛋白質(zhì)，而蛋白質(zhì)工程能生產(chǎn)出自然界中不存在的新型蛋白質(zhì)分子，兩者的氨基酸序列不同，B錯誤；C、該蛋白酶中第188位丙氨酸替換為脯氨酸、第239位谷氨酰胺替換為精氨酸、第262位纈氨酸替換為亮氨酸，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該酶的催化活性大幅度提高，其原因可能是改變了蛋白酶的空間結(jié)構(gòu)，提高了酶與底物的親和力，C正確；D、對蛋白質(zhì)進(jìn)行分子設(shè)計應(yīng)從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，對蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行設(shè)計，D正確。故選CD。三、簡答題：20.下圖是科學(xué)家利用灘涂野耐鹽大豆和普通高產(chǎn)大豆進(jìn)行體細(xì)胞雜交，培育“耐鹽-高產(chǎn)大豆”新品種的過程，請回答下列問題。（1）圖中①過程使用了______酶去除細(xì)胞壁，獲得____。（2）過程②一般用____作為化學(xué)誘導(dǎo)劑，使兩種細(xì)胞的融合。若過程②形成的細(xì)胞均為2個細(xì)胞融合而來，則經(jīng)過該過程后，產(chǎn)生的融合細(xì)胞最多有____種。（3）圖中④⑤過程運用的技術(shù)是____，體現(xiàn)出植物細(xì)胞具有____，其中步驟⑤是____過程。（4）科學(xué)家在甲瓶的培養(yǎng)基中加入了0.6%的NaCl，發(fā)現(xiàn)僅有部分細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)橛鷤M織，未轉(zhuǎn)變?yōu)橛鷤M織的細(xì)胞是____（填“灘涂野耐鹽大豆細(xì)胞”、“普通高產(chǎn)大豆細(xì)胞”或“雜種細(xì)胞”）。經(jīng)④⑤過程得到的試管苗長期處于弱光、高濕的環(huán)境中，無法直接適應(yīng)野外生物的環(huán)境，因此需要經(jīng)過____才能移栽到大田土壤中。（5）上述體細(xì)胞雜交方法克服了灘涂野耐鹽大豆和普通高產(chǎn)大豆遠(yuǎn)緣雜交的障礙。除了上述辦法，還可以采用其他思路獲得上述新品種，請簡要列舉一種思路____。〖答案〗（1）①.纖維素酶和果膠酶②.原生質(zhì)體（2）①.聚乙二醇##PEG②.3##三（3）①植物組織培養(yǎng)②.全能性③.再分化（4）①.普通高產(chǎn)大豆細(xì)胞②.煉苗（5）提取普通高產(chǎn)大豆的高產(chǎn)基因，轉(zhuǎn)入灘涂野耐鹽大豆中培育“耐鹽-高產(chǎn)”大豆品種；或提取灘涂野耐鹽大豆的耐鹽基因，轉(zhuǎn)入普通高產(chǎn)大豆；或誘導(dǎo)灘涂野耐鹽大豆染色體數(shù)目加倍，形成多倍體〖祥解〗分析題圖：①表示去壁過程，常用酶解法；②表示誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，③表示雜種細(xì)胞再生出細(xì)胞壁，④表示脫分化過程，⑤表示再分化過程?！拘?詳析】①表示去壁過程，植物細(xì)胞壁的成分主要為纖維素和果膠，所以用纖維素酶和果膠酶去除植物的細(xì)胞壁，獲得植物的原生質(zhì)體。【小問2詳析】②表示誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，植物原生質(zhì)體間的融合，需要人工誘導(dǎo)，人工誘導(dǎo)的方法分為物理法和化學(xué)法，化學(xué)法一般用聚乙二醇作為誘導(dǎo)劑來誘導(dǎo)細(xì)胞融合；兩種細(xì)胞的原生質(zhì)體融合時有可能是兩個灘涂野耐鹽大豆細(xì)胞相互融合，也可能是兩個普通高產(chǎn)大豆相互融合，灘涂野耐鹽大豆細(xì)胞和普通高產(chǎn)大豆細(xì)胞相互融合所以有3種情況。【小問3詳析】圖中④（脫分化）⑤（再分化）過程運用的技術(shù)是植物組織培養(yǎng)技術(shù)，其體現(xiàn)的原理是植物細(xì)胞的全能性；⑤是由愈傷組織得到試管苗的過程，叫做再分化?！拘?詳析】分析題意，加入0.6%的氯化鈉以后，只有具有耐鹽特性的細(xì)胞才能生存，則普通高產(chǎn)大豆細(xì)胞不具有耐鹽特性，不能形成愈傷組織，而另外兩種細(xì)胞（灘涂野耐鹽大豆細(xì)胞和雜種細(xì)胞）都具有耐鹽特性，能夠在0.6%的氯化鈉環(huán)境中存活，所以能形成愈傷組織。為了讓試管苗適應(yīng)野外的環(huán)境，試管苗需經(jīng)過煉苗才能移栽到大田中?！拘?詳析】根據(jù)題意兩種大豆具有遠(yuǎn)緣雜交的障礙，不能采用雜交的方案來進(jìn)行，故可采用基因工程育種的方式或多倍體育種的方式，具體方法為：提取普通高產(chǎn)大豆的高產(chǎn)基因，轉(zhuǎn)入灘涂野耐鹽大豆中培育“耐鹽-高產(chǎn)”大豆品種（或提取灘涂野耐鹽大豆的耐鹽基因，轉(zhuǎn)入普通高產(chǎn)大豆；誘導(dǎo)灘涂野耐鹽大豆染色體數(shù)目加倍，形成多倍體）。21.H18雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗人肝癌單克隆抗體（HAb18）對于人體肝癌的靶向治療具有重要的意義，但H18雜交瘤細(xì)胞在培養(yǎng)過程中的凋亡現(xiàn)象制約著細(xì)胞的高密度培養(yǎng)以及生產(chǎn)能力的提高。通過基因工程可改造H18雜交瘤細(xì)胞的抗凋亡能力，相關(guān)研究步驟如下。請回答：（1）請完善表格中的實驗步驟。實驗步驟具體操作肝癌細(xì)胞的培養(yǎng)將人肝癌細(xì)胞在培養(yǎng)液中培養(yǎng)一段時間后，用①____酶處理培養(yǎng)液，漂洗后調(diào)整細(xì)胞懸液濃度為1×107個·mL－1．②____向小鼠體內(nèi)注射肝癌細(xì)胞懸液0.8mL，以后每隔2周免疫1次，共3次，最后一次免疫后3天，取脾臟制成細(xì)胞懸液備用。細(xì)胞融合及篩選將脾臟細(xì)胞懸液和③____細(xì)胞懸液進(jìn)行融合，篩選出H18雜交瘤細(xì)胞。改造H18雜交瘤細(xì)胞利用PCR技術(shù)獲得小鼠的④____基因使用⑤____酶構(gòu)建基因表達(dá)載體，通過脂質(zhì)體法導(dǎo)入H18雜交瘤細(xì)胞，再篩選出抗凋亡能力明顯提高的H18雜交瘤細(xì)胞。（2）向培養(yǎng)肝癌細(xì)胞的培養(yǎng)液中加入____，能為動物細(xì)胞生長增殖和保持動物細(xì)胞生物學(xué)性狀提供不可缺少的物質(zhì)，培養(yǎng)液中還需加入一定量抗生素的目的是____，培養(yǎng)時提供的二氧化碳?xì)怏w的目的是____。（3）在細(xì)胞融合及篩選步驟中，常用的生物誘導(dǎo)因素是____。在改造H18雜交瘤細(xì)胞時，通過脂質(zhì)體法將基因表達(dá)載體導(dǎo)入H18雜交瘤細(xì)胞的原理是利用了____。（4）與普通抗肝癌的化療藥物相比，用抗人肝癌單克隆抗體（HAb18）與相應(yīng)抗癌藥物結(jié)合制成的“生物導(dǎo)彈”治療肝癌的主要優(yōu)點是能____，減少對正常細(xì)胞的傷害，減少用藥劑量。也可以使用____標(biāo)記抗人肝癌單克隆抗體（HAb18），顯示肝癌腫瘤的位置，診斷肝癌腫瘤病灶是否轉(zhuǎn)移，以指導(dǎo)手術(shù)范圍?！即鸢浮剑?）①.胰蛋白##膠原蛋白②.能產(chǎn)生抗人肝癌單克隆抗體（HAb18）的B淋巴細(xì)胞（漿細(xì)胞）的獲?、?骨髓瘤④.抗凋亡基因⑤.限制酶和DNA連接酶（2）①.動物血清②.防止雜菌污染③.維持pH（3）①.滅活的病毒②.細(xì)胞質(zhì)膜的流動性（4）①.能將藥物定向帶到癌細(xì)胞所在部位（或?qū)δ[瘤細(xì)胞有選擇性殺傷作用）②.同位素〖祥解〗單克隆抗體是由單一B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的高度均一、僅針對某一特定抗原的抗體。通常采用雜交瘤技術(shù)來制備，雜交瘤抗體技術(shù)是在細(xì)胞融合技術(shù)的基礎(chǔ)上，將具有分泌特異性抗體能力的效應(yīng)B細(xì)胞和具有無限繁殖能力的骨髓瘤細(xì)胞融合為雜交瘤細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞既能產(chǎn)生抗體，又能無限增殖。用具備這種特性的單個雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)成細(xì)胞群，可制備針對一種抗原的特異性抗體即單克隆抗體。【小問1詳析】將人肝癌細(xì)胞在含血清的培養(yǎng)液中培養(yǎng)，一段時間后，用胰蛋白（或膠原蛋白）酶處理培養(yǎng)液，制備單細(xì)胞懸液。而后將肝癌細(xì)胞作為抗原多次注射到小鼠體內(nèi)，然后取小鼠脾臟制成細(xì)胞懸液備用，其目的是獲得能產(chǎn)生抗人肝癌單克隆抗體HAb18的B淋巴細(xì)胞（漿細(xì)胞），即表格中的第二步是能產(chǎn)生抗人肝癌單克隆抗體HAb18的B淋巴細(xì)胞（漿細(xì)胞）的獲取。將脾臟細(xì)胞懸液和骨髓瘤細(xì)胞懸液在50%PEG作用下進(jìn)行融合，篩選出H18雜交瘤細(xì)胞。而后對H18雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行改造，即先通過PCR獲得目的基因——抗凋亡基因，利用限制性內(nèi)切酶切割目的基因和質(zhì)粒，用DNA連接酶連接目的基因和質(zhì)粒，構(gòu)建表達(dá)載體，再將基因表達(dá)載體通過脂質(zhì)體法導(dǎo)入H18雜交瘤細(xì)胞，再篩選出抗凋亡能力明顯提高的H18雜交瘤細(xì)胞?！拘?詳析】由于對動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中所需要的營養(yǎng)物質(zhì)尚不明確，因此在培養(yǎng)肝癌細(xì)胞的培養(yǎng)液中加入血清，這樣可以達(dá)到補充細(xì)胞生長所需的未知營養(yǎng)物質(zhì)的目的，培養(yǎng)液中還需加入一定量抗生素，目的是制造無菌、無毒的環(huán)境，防止雜菌污染。培養(yǎng)時提供的氣體環(huán)境是95%的空氣和5%的CO2，其中后者的作用是維持pH的穩(wěn)定。【小問3詳析】在細(xì)胞融合及篩選步驟中，除了用50%PEG促進(jìn)細(xì)胞融合外，常用的生物誘導(dǎo)因素是滅活的病毒，因為滅活的病毒能引起磷脂分子的重排，在改造H18雜交瘤細(xì)胞時，通過脂質(zhì)體法將表達(dá)載體導(dǎo)入H18雜交瘤細(xì)胞的原理是利用了細(xì)胞膜的流動性，同時也運用了各種生物膜都以磷脂雙分子層為基本骨架的原理?！拘?詳析】與普通抗肝癌的化療藥物相比，用抗人肝癌單克隆抗體HAb18與相應(yīng)抗癌藥物結(jié)合制成的“生物導(dǎo)彈”治療肝癌的主要優(yōu)點表現(xiàn)在不僅能將藥物定向帶到癌細(xì)胞所在部位，同時也能減少對正常細(xì)胞的傷害，減少用藥劑量，提高治病效率。可以使用同位素標(biāo)記抗人肝癌單克隆抗體（HAb18），顯示肝癌腫瘤的位置。22.“人造精子”是一種可以替代精子使卵細(xì)胞受精的單倍體胚胎干細(xì)胞。我國科研人員利用先進(jìn)的胚胎操作技術(shù)，通過兩種方式獲得小鼠“人造精子”，流程如下圖所示。請回答下列問題。（1）方式一中常用顯微操作法對____期卵母細(xì)胞去核，再將____轉(zhuǎn)到進(jìn)去核的卵母細(xì)胞中。選擇卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞的優(yōu)點有____。（2）方式二是通過精子與卵子的受精作用“替代”核移植技術(shù)，受精作用中防止多精入卵的兩道屏障有____；在核融合之前，剔除卵細(xì)胞的____，然后就得到了只含來自精子的染色體組的胚胎干細(xì)胞，再通過相同的體外培養(yǎng)技術(shù)獲得單倍體胚胎干細(xì)胞系。（3）小鼠單倍體胚胎干細(xì)胞有____個染色體組，該類細(xì)胞可通過____方式進(jìn)行增殖，能夠長期傳代培養(yǎng)。胚胎干細(xì)胞在體外培養(yǎng)時，向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素以確保無菌環(huán)境，為避免代謝物積累過多可采取____的措施，還要維持培養(yǎng)液適宜的pH。（4）目前構(gòu)建成功的單倍體胚胎干細(xì)胞系，其細(xì)胞核內(nèi)包含的性染色體全部都是X染色體，而無包含Y染色體的細(xì)胞。已知小鼠Y染色體比X染色體短小，因此實驗無法獲得含Y染色體的單倍體胚胎干細(xì)胞，其最可能的原因是____。（5）“人造精子”由于其基因組的單倍體性，在體外幾乎能夠無限增殖且“受精”后能產(chǎn)生后代，可應(yīng)用于各種基因功能的研究。例如：正常二倍體的胚胎干細(xì)胞包含兩套完整的基因組，如果一條染色體上的基因發(fā)生隱性突變，另一條染色體上的基因可以彌補，就能保證細(xì)胞的正常生長。對于單倍體細(xì)胞來說，無論基因發(fā)生顯性突變或隱性突變，由于沒有備份基因來補償其功能的缺失，就會出現(xiàn)相應(yīng)的生理缺陷，進(jìn)而得知該基因與這一生理功能相關(guān)?；谝陨闲畔?，請從構(gòu)建基因突變小鼠模型、遺傳病的控制等角度分析“人造精子”可能具有的應(yīng)用價值____（寫出一條即可）?！即鸢浮剑?）①.MⅡ中②.精子（頭部或細(xì)胞核）③.體積大易操作、營養(yǎng)物質(zhì)豐富且細(xì)胞質(zhì)中含有促進(jìn)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)（2）①.透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)②.雌原核（3）①.1②.有絲分裂③.定期更換培養(yǎng)液（4）Y染色體上的基因無法支持單倍體胚胎干細(xì)胞的存活或Y染色體上缺少支持單倍胚胎干細(xì)胞存活的基因（5）應(yīng)用價值1：可利用具有顯性突變基因的“人造精子”與卵細(xì)胞受精，構(gòu)建各種基因突變的小鼠模型庫，進(jìn)而在個體水平上研究基因的功能。應(yīng)用價值2：若父親的精子存在基因缺陷，可利用能無限增殖且可供長時間修復(fù)操作、檢測、挑選的“人造精子”，進(jìn)行突變基因的修復(fù)?！枷榻狻?、動物細(xì)胞培養(yǎng)是從動物機體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個細(xì)胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長和增殖。2、動物核移植是指將動物的一個細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎?！拘?詳析】在核移植操作之前應(yīng)先將卵母細(xì)胞培養(yǎng)至MⅡ中期，再用顯微操作法對MⅡ中期卵母細(xì)胞去核，由題圖可知，將精子(頭部)轉(zhuǎn)移進(jìn)入了去核的卵母細(xì)胞中。與其他體細(xì)胞相比，卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞具有體積大，易操作、營養(yǎng)物質(zhì)豐富且細(xì)胞質(zhì)中含有促進(jìn)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)等優(yōu)點，故一般選擇卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞?！拘?詳析】受精作用中，卵細(xì)胞的透明帶和卵細(xì)胞膜發(fā)生生理反應(yīng)，即透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)，這兩道屏障能防止多精入卵。在體外受精時，若要得到只含來自精子的染色體組的單倍體胚胎干細(xì)胞，則需要在核融合之前，剔除卵母細(xì)胞的雌原核，這樣就得到了只含來自精子的染色體組的單倍體胚胎干細(xì)胞，再通過相同的體外培養(yǎng)技術(shù)獲得單倍體胚胎干細(xì)胞系?！拘?詳析】小鼠單倍體胚胎干細(xì)胞只含有一種配子的染色體，故只有1個染色體組，這類細(xì)胞為胚胎干細(xì)胞，分化程度低，分裂能力強，可通過有絲分裂方式進(jìn)行增殖。為了保證胚胎干細(xì)胞在體外培養(yǎng)時能正常生長和分裂，除了需要確保無菌環(huán)境，也需要確保無毒，可采用定期更換培養(yǎng)液的方法，避免代謝物積累過多對胚胎干細(xì)胞造成毒害?！拘?詳析】已知小鼠Y染色體比X染色體短小，可推測該實驗無法獲得含Y染色體的單倍體胚胎干細(xì)胞的原因最可能是Y染色體上的基因無法支持單倍體胚胎干細(xì)胞的存活(或Y染色體上缺少支持單倍體胚胎干細(xì)胞存活的基因)。【小問5詳析】結(jié)合題意可知“人造精子”由于其基因組的單倍體性，在體外幾乎能夠無限增殖且“受精”后能產(chǎn)生后代，可應(yīng)用于各種基因功能的研究。從構(gòu)建基因突變小鼠模型、遺傳病的控制等角度考慮，“人造精子”可以應(yīng)用于以下方面：可利用具有顯性突變基因的“人造精子”與卵細(xì)胞受精，構(gòu)建各種基因突變的小鼠模型庫，進(jìn)而在個體水平上研究基因的功能；若父親的精子存在基因缺陷，可利用能無限增殖且可供長時間修復(fù)操作、檢測、挑選的“人造精子”，進(jìn)行突變基因的修復(fù)等。23.病毒必須寄生在活的宿主細(xì)胞中進(jìn)行增殖，因此培養(yǎng)病毒需要先培養(yǎng)宿主細(xì)胞，再接種病毒。培養(yǎng)細(xì)菌只需要提供含有各種營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基。雙層平板法（如圖）是對噬菌體進(jìn)行檢測、計數(shù)的常用方法，該方法的操作流程為：倒底層平板→倒上層平板→培養(yǎng)→觀察→計數(shù)。請回答下列問題。（1）底層平板是含2%瓊脂的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，制備該培養(yǎng)基的一般步驟為：計算→稱量→溶化→____→分裝、包扎→____→倒平板；培養(yǎng)細(xì)菌時除了將培養(yǎng)基的pH調(diào)至中性或弱堿性外，還要考慮____等條件，因為營養(yǎng)物質(zhì)濃度太高會使細(xì)胞失水，抑制微生物的生長；濃度太低，則不能滿足微生物生長的需要。（2）某同學(xué)制作的底層平板凹凸不平，可能的原因是____________。（3）倒上層平板時，先將含1%瓊脂的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基滅菌，再冷卻至45～48℃，然后加入細(xì)菌和待測噬菌體稀釋懸液的混合液，充分混勻后迅速倒在底層平板上，隨即旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)皿。培養(yǎng)基常用的滅菌方法是____。培養(yǎng)基滅菌后，冷卻至45～48℃最主要的原因是____，旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)皿的目的是_____________。（4）培養(yǎng)一段時間后，在上層平板上可以看見一些如圖所示的空斑即噬菌斑，出現(xiàn)空斑的原因是____。稀釋度足夠高時，一個噬菌斑來自原液中的一個噬菌體，根據(jù)噬菌斑數(shù)目、____及使用稀釋懸液的體積就可推算出待測樣液中噬菌體的數(shù)量。統(tǒng)計的噬菌斑數(shù)往往比噬菌體的實際數(shù)目低，可能的原因是______________?！即鸢浮剑?）①.調(diào)pH②.滅菌③.滲透壓（2）倒平板時溫度過低，導(dǎo)致部分培養(yǎng)基已經(jīng)凝固（3）①.高壓蒸汽滅菌法（濕熱滅菌法）②.避免高溫殺死細(xì)菌和噬菌體③.使混合液分布均勻，確保平板平整（4）①.噬菌體侵染細(xì)菌使其裂解死亡②.稀釋倍數(shù)③.一個噬菌斑可能由兩個或多個噬菌體侵染而成（兩個或多個噬菌斑重疊成一個）〖祥解〗1、制備培養(yǎng)基的一般步驟為：計算→稱量→溶化→調(diào)節(jié)pH→分裝、包扎→滅菌→倒平板；2、利用稀釋涂布平板法可估算菌種數(shù)目，當(dāng)稀釋度足夠高時，一個菌落來自培養(yǎng)液中的一個菌體，根據(jù)菌落數(shù)目、稀釋倍數(shù)以及涂布平板所用的體積，就可推算出待測樣液中菌體的數(shù)量?！拘?詳析】制備培養(yǎng)基的一般步驟為：計算→稱量→溶化→調(diào)節(jié)pH→分裝、包扎→滅菌→倒平板；營養(yǎng)物質(zhì)濃度太高會使細(xì)胞失水，抑制微生物的生長；濃度太低，則不能滿足微生物生長的需要，故培養(yǎng)細(xì)菌時除了將培養(yǎng)基的pH調(diào)至中性或弱堿性外，還要考慮滲透壓等條件?！拘?詳析】滅菌后待培養(yǎng)基冷卻到50℃左右時，在酒精燈火焰附近進(jìn)行倒平板的操作。若倒平板時溫度過低，部分的培養(yǎng)基已經(jīng)凝固，會導(dǎo)致制作的培養(yǎng)基平板表明凹凸不平?！拘?詳析】培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法（濕熱滅菌法）進(jìn)行滅菌；培養(yǎng)基滅菌后，冷卻至45～48℃后再加入細(xì)菌和待測噬菌體稀釋懸液的混合液，以避免高溫殺死細(xì)菌和噬菌體；旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)皿的目的是使混合液分布均勻，確保平板平整。【小問4詳析】噬菌體寄生于細(xì)菌體內(nèi)增殖，二者混合培養(yǎng)一段時間后，在上層平板上可以看見一些如圖所示的空斑即噬菌斑，出現(xiàn)空斑是由于噬菌體侵染細(xì)菌使其裂解死亡所致；利用稀釋涂布平板法可估算菌種數(shù)目，當(dāng)稀釋度足夠高時，一個噬菌斑來自原液中的一個噬菌體，根據(jù)噬菌斑數(shù)目、稀釋倍數(shù)及使用稀釋懸液的體積就可推算出待測樣液中噬菌體的數(shù)量；由于一個噬菌斑可能由兩個或多個噬菌體侵染而成（兩個或多個噬菌斑重疊成一個），導(dǎo)致統(tǒng)計的噬菌斑數(shù)往往比噬菌體的實際數(shù)目低。24.四尾柵藻生長周期短、適應(yīng)性強，是一種高潛力生物柴油新型原料，但油脂產(chǎn)量低。研究人員從含油量高的紫蘇中提取DGAT1（催化油脂合成的關(guān)鍵酶）基因，并成功導(dǎo)入到四尾柵藻細(xì)胞內(nèi)，獲得轉(zhuǎn)基因的產(chǎn)油四尾柵藻。其制備流程如下圖所示，圖中Ampr表示氨芐青霉素抗性基因，LacZ基因可使細(xì)菌利用培養(yǎng)基中的物質(zhì)X-gal進(jìn)而使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，無該基因或該基因被破壞，菌落呈白色。請分析回答下列問題。（1）從含油量高的紫蘇組織細(xì)胞中提取總的RNA，在____酶作用下獲得cDNA，用于PCR擴增，該過程的原理是按____原則合成cDNA。（2）PCR擴增DGATI基因時，使反應(yīng)體系中的模板cDNA解旋為單鏈的條件是____。在DNA延伸的過程中，使用Taq酶而不使用大腸桿菌DNA聚合酶的主要原因是____。（3）圖中大腸桿菌是pMD19-DGAT1的理想的受體細(xì)胞，主要原因是____。構(gòu)建的pMD19-DGAT1導(dǎo)入到經(jīng)____溶液處理的感受態(tài)大腸桿菌細(xì)胞中，并接種到含____的培養(yǎng)基中培養(yǎng)。一段時間后，挑選____色的菌落以提取質(zhì)粒pMD19-DGAT1。（4）用限制酶____切割pMD19-DGAT1和pBI121，將其連接成重組表達(dá)載體pBI121-DGAT1，并將其導(dǎo)入四尾柵藻細(xì)胞中。與單酶切相比，雙酶切的優(yōu)點有____、____?！即鸢浮剑?）①.逆轉(zhuǎn)錄②.堿基互補配對（2）①.加熱至90-95℃（94℃）②.Taq酶熱穩(wěn)定性高而大腸桿菌DNA聚合酶在高溫下失活（3）①.繁殖快（或可以短時間產(chǎn)生大量質(zhì)粒）②.CaCl2③.X-gal和氨芐青霉素④.白（4）①.BamHⅠ和XbaⅠ②.使DGAT1基因能定向插入表達(dá)載體③.防止自身環(huán)化〖祥解〗圖示過程首先提取紫蘇細(xì)胞的總RNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄得到的cDNA，再獲得DGAT1基因，再將DGAT1基因與克隆質(zhì)粒pMD19結(jié)合，形成重組質(zhì)粒，然后將其導(dǎo)入到經(jīng)CaCl2處理后的處于感受態(tài)的大腸桿菌細(xì)胞，并接種到添加氨芐青霉素和X-gal的培養(yǎng)基培養(yǎng)、篩選?！拘?詳析】cDNA是逆轉(zhuǎn)錄獲得的，在逆轉(zhuǎn)錄酶作用下，以mRNA為模板按照堿基互補配對原則合成cDNA。PCR原理是DNA的復(fù)制，該過程遵循基因的互補配對原則。【小問2詳析】PCR技術(shù)，采用90-95°C高溫使雙鏈DNA解螺旋。酶大多都是蛋白質(zhì)，都需要適宜的溫度發(fā)揮催化作用，普通的大腸桿菌的DNA聚合酶的最適合溫度基本不會超過40度，但是在PCR反應(yīng)中，加熱的溫度會高達(dá)90度，此時的普通DNA聚合酶會變性失活，無法使用，而Taq酶是耐熱的DNA聚合酶，可以使用?！拘?詳析】大腸桿菌具有的特點是繁殖快、代謝旺盛、單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對較少等特點，是理想的轉(zhuǎn)基因材料，構(gòu)建的PMD19-DGATI導(dǎo)入到經(jīng)CaCl2溶液處理的感受態(tài)大腸桿菌細(xì)胞中，基因中含有LacZ基因的大腸桿菌可以利用培養(yǎng)物質(zhì)中的X-gal來使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，通過稀釋涂布平板法將大腸桿菌細(xì)胞接種到含氨芐青霉素和X-gal的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，LacZ基因成功表達(dá)目的基因的菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，成功導(dǎo)入基因的大腸桿菌菌落呈現(xiàn)白色，故一段時間后，挑選白色的菌落以提取質(zhì)粒PMD19-DGATI?！拘?詳析】目的基因應(yīng)插入啟動子和終止子之間，據(jù)圖可知，兩者之間有BamHⅠ和XbaⅠ的酶切位點，所以采用BamHⅠ和XbaⅠ進(jìn)行切割pMD19-DGAT1和pBI121。單酶切切割后的運載體兩端的黏性末端相同，可能會導(dǎo)致目的基因和運載體自身環(huán)化和反向連接，采用雙切酶切割后的運載體黏性末端不同，故可以控制外源基因插入方向，避免載體自身環(huán)化，提高重組效率。江蘇省揚州市邗江區(qū)2022-2023學(xué)年高二下學(xué)期期中調(diào)研測試試題一、單項選擇題：1.如圖表示培養(yǎng)和純化X細(xì)菌的部分操作步驟，下列相關(guān)敘述正確的是（）A.對實驗操作的空間、操作者的衣著和手進(jìn)行滅菌處理B.步驟①待培養(yǎng)基溫度降至40℃左右進(jìn)行倒平板操作C.步驟③每次劃線前和劃線后都需要對接種環(huán)灼燒滅菌D.步驟③劃線結(jié)束后在皿蓋上標(biāo)注菌種及接種日期等信息〖答案〗C〖祥解〗題圖分析：①是倒平板，②是用接種環(huán)沾取菌液，③是進(jìn)行平板劃線，而后通過培養(yǎng)可獲得單菌落。【詳析】A、對實驗操作的空間、操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和消毒處理，而非滅菌，滅菌通常用較強的理化方法殺死所有微生物，培養(yǎng)基以及培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌，A錯誤；B、待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時，在酒精燈火焰附近倒平板，B錯誤；C、平板劃線法每次劃線前后都需要對接種環(huán)灼燒滅菌，C正確；D、劃線結(jié)束后在培養(yǎng)皿底部標(biāo)注菌種及接種日期等信息，D錯誤。故選C。2.某研究小組對非滅菌的一次性口罩中的微生物進(jìn)行檢測，部分操作如下：從口罩上剪取總量9cm2樣品（體積近似1mL），剪碎后加入已滅菌的生理鹽水中，定容至10mL，充分混勻，得到樣液。下列說法正確的是（）A.對培養(yǎng)基使用電熱鼓風(fēng)干燥箱滅菌處理后，倒4個平板冷卻后倒放擱置B.向前3個平板中分別加入1mL樣液，用涂布器將樣液涂布均勻C.第4個平板接種等量已滅菌的生理鹽水并培養(yǎng)，可用于檢測是否有雜菌污染D.若一段時間后，4個平板上長出的菌落數(shù)依次為31、42、35和0個，可計算出1cm2口罩樣品中菌體數(shù)量為36個〖答案〗C〖祥解〗1、待培養(yǎng)基冷卻到50℃左右時，在酒精燈附近倒平板；待平板冷卻凝固后，將平板倒過來放置，可以防止冷凝水滴落到培養(yǎng)基上，防止造成污染。2、若用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種，在涂布平板時，滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液的量一般不超過0.1mL，其原因是避免培養(yǎng)基表面的菌液出現(xiàn)積液，導(dǎo)致菌體堆積，影響分離效果?！驹斘觥緼、對培養(yǎng)基使用高壓蒸汽滅菌法滅菌處理后，A錯誤；B、用稀釋涂布平板法統(tǒng)計細(xì)菌數(shù)量時，滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液的量一般不超過0.1mL，其原因是避免培養(yǎng)基表面的菌液出現(xiàn)積液，導(dǎo)致菌體堆積，影響分離效果，B錯誤；C、培養(yǎng)接種等量已滅菌的生理鹽水的固體培養(yǎng)基是為了作為對照組，第4個平板接種等量已滅菌的生理鹽水并與前3個平板共同培養(yǎng)，可用于檢測是否有雜菌污染，C正確；D、第4個平板沒有菌落形成，說明沒有雜菌污染，且前三個平板長出的菌落數(shù)均在30~300之間，說明操作中的稀釋倍數(shù)（10倍）是合適的。若接種的樣液是0.1mL，則9cm2口罩樣品中菌體數(shù)量為(31+42+35)÷0.1×10=3600個，則lcm2口罩樣品中菌體數(shù)量為400個，D錯誤。故選C。3.很多生活實例中蘊含著微生物發(fā)酵的原理。下列相關(guān)敘述，錯誤的是（）A.自制葡萄酒在發(fā)酵過程中隨著時間的推進(jìn)，酒精的產(chǎn)生速率先上升后趨于穩(wěn)定B.夏天開瓶后的紅酒容易變酸，是由于空氣中的醋酸菌將乙醇變成乙醛而后變?yōu)橐宜酑.用巴氏消毒法能對牛奶消毒殺死其中的絕大多數(shù)微生物，且不破壞牛奶的營養(yǎng)成分D.用白蘿卜制作泡菜時為縮短腌制時間，可向新壇中添加老壇內(nèi)已經(jīng)腌制過的泡菜汁〖答案〗A〖祥解〗1、參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型；果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的葡萄糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿幔?、泡菜的制作原理：泡菜的制作離不開乳酸菌；在無氧條件下，乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸?！驹斘觥緼、酒精發(fā)酵早期，酵母菌和底物充足，發(fā)酵速率較快，酒精的產(chǎn)生速率呈上升趨勢，隨發(fā)酵的持續(xù)進(jìn)行，酒精濃度變高，酵母菌的活性受到影響，導(dǎo)致酒精的產(chǎn)生速度下降，最后底物消耗完，停止產(chǎn)生酒精，A錯誤；B、夏天開瓶后的紅酒，在有氧的條件下，空氣中的醋酸菌將乙醇變成乙醛而后變?yōu)橐宜?，?dǎo)致紅酒變酸，B正確；C、巴氏消毒法是一種低溫消毒法，用巴氏消毒法對牛奶消毒既能殺死牛奶中的絕大多數(shù)微生物，又不破壞牛奶中的營養(yǎng)成分，C正確；D、泡菜汁中含有一定量的發(fā)酵菌種，所以在腌制過程中，加入一些已經(jīng)腌制過泡菜汁可縮短腌制時間，D正確。故選A。4.下列是關(guān)于發(fā)酵工程及其應(yīng)用的敘述，錯誤的是（）A.發(fā)酵工程利用了微生物繁殖快、適應(yīng)性強、吸收多、轉(zhuǎn)化快等特定功能B.在分批發(fā)酵過程中，及時補充營養(yǎng)物質(zhì)或分離代謝產(chǎn)物能延長穩(wěn)定期C.發(fā)酵罐制作酸奶時，可先通氧氣促進(jìn)乳酸菌增殖，再密閉發(fā)酵D.發(fā)酵工程培養(yǎng)微生物細(xì)胞可選擇對數(shù)期細(xì)胞作為生產(chǎn)的“種子”〖答案〗C〖祥解〗發(fā)酵工程就是通過微生物的生命活動，把發(fā)酵原料轉(zhuǎn)化為人類所需要的微生物產(chǎn)品的工業(yè)過程?！驹斘觥緼、發(fā)酵工程利用了微生物如繁殖快、適應(yīng)性強、吸收多、轉(zhuǎn)化快等特定功能，能夠生產(chǎn)人類所需的微生物，A正確；B、在分批發(fā)酵過程中，及時分離微生物產(chǎn)生的有害代謝產(chǎn)物或補充營養(yǎng)物質(zhì)，有利于微生物的生存，故能延長穩(wěn)定期，B正確；C、乳酸菌為厭氧微生物，發(fā)酵時應(yīng)保持無氧環(huán)境，不能通入氧氣，C錯誤；D、發(fā)酵工程培養(yǎng)微生物細(xì)胞可選擇對數(shù)期細(xì)胞作為生產(chǎn)的“種子”，此時微生物細(xì)胞的變化是進(jìn)入高速繁殖狀態(tài)，利于發(fā)酵的順利進(jìn)行，D正確。故選C。5.下列關(guān)于天竺葵組織培養(yǎng)的敘述，錯誤的是（）A.天竺葵莖段培養(yǎng)前需用70%濃度的酒精和0.1%氯化汞的混合液浸泡30分鐘B.切取休眠期的莖段進(jìn)行培養(yǎng)不易形成愈傷組織是因為該部位對誘導(dǎo)反應(yīng)遲鈍C.培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分和激素種類、配比會影響愈傷組織的形成和繼續(xù)發(fā)育D.移植到蛭石中煉苗主要是因為蛭石保水透氣，有利于植物根系生長和苗的穩(wěn)定發(fā)育〖答案〗A〖祥解〗植物組織培養(yǎng)過程是：離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織，然后再分化生成根、芽，最終形成植物體。植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性?！驹斘觥緼、經(jīng)流水沖洗后的外植體先用70%濃度的酒精消毒10s，再用無菌水清洗2-3次，用無菌濾紙吸干表面水分后，在0.1%氯化汞溶液浸泡5分鐘，A錯誤；B、休眠期的莖段對誘導(dǎo)反應(yīng)遲鈍，不易獲得愈傷組織，幼嫩的莖段分裂旺盛，因而容易誘導(dǎo)形成愈傷組織，B正確；C、植物組織培養(yǎng)過程中細(xì)胞分裂素和生長素的比例不同，愈傷組織分化的方向也不同，當(dāng)生長素和細(xì)胞分裂素比例相當(dāng)時，利于愈傷組織的形成，當(dāng)生長素與細(xì)胞分裂素的比值大于1時，有利于誘導(dǎo)根的形成，當(dāng)生長素與細(xì)胞分裂素的比值小于1時，有利于誘導(dǎo)芽的形成，C正確；D、移植到蛭石中煉苗主要是因為蛭石保水透氣，可優(yōu)化土壤結(jié)構(gòu)，有利于植物根系的生長和小苗的穩(wěn)定發(fā)育，D正確。故選A。6.植物細(xì)胞工程包括植物組織培養(yǎng)、植物體細(xì)胞雜交等許多技術(shù)，具有廣泛的應(yīng)用前景和實用價值。下列對這些操作或應(yīng)用的描述錯誤的是（）A.人工種子可以解決有些作物品種繁殖能力差、結(jié)籽困難等問題B.利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)繁殖植物可以不受季節(jié)和惡劣天氣的影響C.利用植物根尖、莖尖做外植體進(jìn)行培養(yǎng)降低病毒的感染，培養(yǎng)出大量的抗毒種苗D.利用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以在生產(chǎn)藥物、食品添加劑等實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)〖答案〗C〖祥解〗人工種子的優(yōu)點：人工種子人工種子生產(chǎn)不受季節(jié)限制；人工種子人工種子加入某些成分，具有更好的營養(yǎng)供應(yīng)和抗病能力；天然種子種子減數(shù)分裂會造成遺傳性狀改變，而人工種子人工種子可以保持優(yōu)良品種的遺傳特性?！驹斘觥緼、人工種子可以解決有些作物品種繁殖能力差、結(jié)籽困難或發(fā)芽率低等問題，A正確；B、與常規(guī)的種子繁殖方法相比，利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)繁殖植物可以不受季節(jié)和惡劣天氣的影響，繁殖速度快，且能保持植物原有的遺傳特性，B正確；C、植物莖尖的分生區(qū)附近病毒極少，甚至無病毒，利用植物根尖、莖尖做外植體進(jìn)行培養(yǎng)降低病毒的感染，但不能抵抗病毒，C錯誤；D、通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)還可以用來生產(chǎn)藥物、食品添加劑、香料、色素等，D正確。故選C。7.懸浮培養(yǎng)的動物細(xì)胞會因細(xì)胞密度過大、有害代謝產(chǎn)物積累等因素而分裂受阻。生產(chǎn)上常用灌流式培養(yǎng)避免這些現(xiàn)象出現(xiàn)。灌流式培養(yǎng)是在細(xì)胞培養(yǎng)管內(nèi)，一邊不斷注入新鮮培養(yǎng)基，一邊將培養(yǎng)液的上清液不斷移出。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A.灌流式培養(yǎng)的細(xì)胞會貼壁生長，但不會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象B.灌流是在細(xì)胞密度達(dá)到一定濃度或者營養(yǎng)物質(zhì)低于一定濃度時進(jìn)行C.過高的灌流速率會導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)不能得到充分利用，造成培養(yǎng)基浪費D.配制灌流式培養(yǎng)所需培養(yǎng)基時應(yīng)考慮細(xì)胞生存的液體環(huán)境的滲透壓〖答案〗A〖祥解〗動物細(xì)胞培養(yǎng)：（1）概念：動物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動物機體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個細(xì)胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長和繁殖。（2）原理：細(xì)胞增殖。（3）動物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)?！驹斘觥緼、懸浮培養(yǎng)的動物細(xì)胞不出現(xiàn)貼壁生長現(xiàn)象，A錯誤；B、懸浮培養(yǎng)的動物細(xì)胞會因細(xì)胞密度過大、有害代謝產(chǎn)物積累等因素而分裂受阻，而灌流是在細(xì)胞密度達(dá)到一定濃度或者營養(yǎng)物質(zhì)低于一定濃度時進(jìn)行，B正確；C、過高的灌流速率，培養(yǎng)的細(xì)胞沒有及時利用營養(yǎng)物質(zhì)，會導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)不能得到充分利用，造成培養(yǎng)基浪費，C正確；D、動物細(xì)胞的細(xì)胞外液的滲透壓是相對穩(wěn)定且適宜的，配制灌流式培養(yǎng)所需培養(yǎng)基時應(yīng)考慮細(xì)胞生存的液體環(huán)境的滲透壓，D正確。故選A。8.抗體–藥物偶聯(lián)物（ADC）可以實現(xiàn)對腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷，其機理如下圖。相關(guān)敘述錯誤的是（）A.該單克隆抗體制備過程中可以用腫瘤抗原對實驗動物進(jìn)行免疫處理B.該單克隆抗體可以利用動物細(xì)胞培養(yǎng)、動物細(xì)胞融合等技術(shù)獲得C.ADC與細(xì)胞膜上的受體特異性結(jié)合，以胞吞方式進(jìn)入腫瘤細(xì)胞D.ADC中的藥物會在溶酶體中降解，從而失去對腫瘤細(xì)胞的殺傷作用〖答案〗D〖祥解〗據(jù)圖分析可知，圖中抗體-藥物偶聯(lián)物（ADC）通過將藥物與單克隆抗體結(jié)合，利用抗體與抗原的特異性結(jié)合，實現(xiàn)了對腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷?！驹斘觥緼、該單克隆抗體制備過程中需用特定抗原注射小鼠體內(nèi)，使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞，A正確；B、單克隆抗體制備的基本步驟：對小鼠進(jìn)行免疫→提取B淋巴細(xì)胞→將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合→通過篩選、克隆化培養(yǎng)和擴大化培養(yǎng)→最終注入小鼠體內(nèi)→從腹腔腹水中提取單克隆抗體，因此該單克隆抗體可以利用動物細(xì)胞培養(yǎng)、動物細(xì)胞融合等技術(shù)獲得，B正確；C、大分子物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的方式為胞吞，ADC與細(xì)胞膜上的受體特異性結(jié)合，以胞吞方式進(jìn)入腫瘤細(xì)胞，C正確；D、圖中ADC的作用機制為：攜帶藥物的抗體與腫瘤細(xì)胞膜上的特異性受體結(jié)合，然后通過胞吞作用進(jìn)入到細(xì)胞內(nèi)，抗體被細(xì)胞內(nèi)的溶酶體裂解，釋放出藥物作用于腫瘤細(xì)胞，使腫瘤細(xì)胞凋亡，D錯誤。故選D。9.如圖表示試管鼠的基本制備流程，下列敘述正確的是（）A.處理1給4-6周齡雌鼠注射性激素進(jìn)行超數(shù)排卵處理B.處理2和處理3是分別使卵母細(xì)胞和精子獲得受精能力C.過程1和過程2均在代孕鼠體內(nèi)完成細(xì)胞的分裂和分化D.對試管鼠代孕的雌鼠需注射免疫抑制劑防止免疫排斥反應(yīng)〖答案〗B〖祥解〗圖中處理1是注射促性腺激素使性成熟的雌鼠超數(shù)排卵處理，處理2是使卵母細(xì)胞需要發(fā)育至減數(shù)第二次分裂的中期，獲得受精能力，處理3是精子進(jìn)行處理，使其獲得受精能力。過程1是胚胎的體外發(fā)育，過程2是胚胎移植?！驹斘觥緼、一般通過注射促性腺激素使性成熟的雌鼠超數(shù)排卵處理，A錯誤；B、要使精子和卵母細(xì)胞在體外成功結(jié)合，需要對精子進(jìn)行處理，使其獲能，另外培養(yǎng)的卵母細(xì)胞需要發(fā)育至減數(shù)第二次分裂的中期，使卵母細(xì)胞獲得受精能力，即圖中的處理2和處理3，B正確；C、過程1是胚胎的體外發(fā)育，在體外完成細(xì)胞的分裂和分化，C錯誤；D、一般情況下，子宮對胚胎不產(chǎn)生排斥反應(yīng)，不用注射免疫抑制劑，D錯誤。故選B。10.下列有關(guān)細(xì)胞工程和胚胎工程的敘述，錯誤的是（）A.干細(xì)胞在形態(tài)上一般細(xì)胞體積小，細(xì)胞核相對較大B.人工采集得的牛羊精子可加入肝素中來誘導(dǎo)精子獲能C.胚胎移植過程需對供體和受體母牛進(jìn)行同期發(fā)情處理D.胚胎分割的對象為桑椹胚時要將內(nèi)細(xì)胞團均等分割〖答案〗D〖祥解〗胚胎移植的基本程序主要包括：①對供、受體的選擇和處理。選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體，供體和受體是同一物種。并用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對供體母牛做超數(shù)排卵處理。②配種或人工授精。③對胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存。配種或輸精后第7天，用特制的沖卵裝置，把供體母牛子宮內(nèi)的胚胎沖洗出來（也叫沖卵）。對胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查，此時的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段。直接向受體移植或放入-196℃的液氮中保存。④對胚胎進(jìn)行移植。⑤移植后的檢查。對受體母牛進(jìn)行是否妊娠的檢查。【詳析】A、干細(xì)胞的特點是細(xì)胞體積小，細(xì)胞核相對較大，A正確；B、人工采集得的牛羊精子可加入肝素中來誘導(dǎo)精子獲能，才具有受精能力，B正確；C、胚胎移植過程需對供體和受體母牛進(jìn)行同期發(fā)情處理，使供、受體達(dá)到相同的繁殖生理狀態(tài)，C正確；D、胚胎分割的對象為囊胚時要將內(nèi)細(xì)胞團均等分割，D錯誤。故選D。11.下列關(guān)于DNA粗提取與鑒定的敘述，正確的是（）A.取材時可選用豬血、洋蔥、香蕉等富含DNA的材料進(jìn)行實驗B.將白色絲狀物置于2mol/L的NaCl溶液中，會發(fā)生溶解現(xiàn)象C.可將洋蔥置于清水中，細(xì)胞吸水破裂后將DNA釋放出來D.鑒定DNA時，應(yīng)將絲狀物直接加入到二苯胺試劑中并進(jìn)行沸水浴〖答案〗B〖祥解〗DNA粗提取選材的標(biāo)準(zhǔn)：DNA含量高，并且材料易得。由于哺乳動物成熟的紅細(xì)胞中沒有細(xì)胞核和細(xì)胞器，因此不采用哺乳動物的血液。DNA粗提取和鑒定的原理：1、DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同（DNA在0.14mol/L的氯化鈉中溶解度最低，在2mol/L的氯化鈉中溶解度最大）；DNA不溶于酒精溶液，但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精。2、DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍(lán)色?！驹斘觥緼、由于哺乳動物成熟的紅細(xì)胞中沒有細(xì)胞核和細(xì)胞器，因此不采用豬血來提取DNA，A錯誤；B、DNA在0.14mol/L的氯化鈉中溶解度最低，在2mol/L的氯化鈉中溶解度最大，故將白色絲狀物置于2mol/L的NaCl溶液中，會發(fā)生溶解現(xiàn)象，B正確；C、將洋蔥置于清水中，由于細(xì)胞壁的保護(hù)，細(xì)胞吸水后不會破裂，C錯誤；D、鑒定DNA時，應(yīng)將絲狀物溶解在2mol/L的NaCl溶液中，加入二苯胺試劑并進(jìn)行沸水浴，D錯誤。故選B。12.下列有關(guān)限制酶的敘述，正確的是（）A.限制酶識別序列越短，則該序列在DNA中出現(xiàn)的幾率就越小B.—CATG↓—和—G↓GATCC—序列被限制酶切出的黏性末端堿基數(shù)相同C.只有用相同的限制酶處理含目的基因和質(zhì)粒，才能形成重組質(zhì)粒D.用限制酶切割DNA分子中部，獲得一個目的基因時被水解的磷酸二酯鍵有2個〖答案〗B〖祥解〗限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂?！驹斘觥緼、限制酶識別序列越短，則該序列在DNA中出現(xiàn)的幾率就越大，A錯誤；B、-CATG↓-和-G↓GATCC-序列被限制酶切出的黏性末端堿基數(shù)相同，都是4個，B正確；C、用不同的限制酶處理含目的基因的片段和質(zhì)粒，也可能形成相同的黏性末端，再用DNA連接酶也可能形成重組質(zhì)粒，C錯誤；D、用限制酶從一個DNA分子中部獲取一個目的基因時，需要切開兩個切口，斷裂4個磷酸二酯鍵，D錯誤。故選B。13.為提高紅豆杉細(xì)胞培養(yǎng)物中紫杉醇的產(chǎn)量，研究人員構(gòu)建紫杉醇合成關(guān)鍵酶基因（Bapt）的超表達(dá)載體，并將其導(dǎo)入紅豆杉細(xì)胞，具體流程如下圖。相關(guān)說法不正確的是（）A.p1301載體上應(yīng)含有增強Bapt基因表達(dá)的序列B.超表達(dá)載體中應(yīng)含有潮霉素抗性基因作為標(biāo)記基因C.可使用Bapt基因制成的探針檢測過程⑤是否成功D.工廠化生產(chǎn)紫杉醇需將改造后的紅豆杉細(xì)胞培養(yǎng)至愈傷組織〖答案〗C〖祥解〗據(jù)圖分析，①是逆轉(zhuǎn)錄過程，②是擴增cDNA過程，③是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，④是將重組質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌，⑤是轉(zhuǎn)化過程?！驹斘觥緼、根據(jù)題干信息“研究人員構(gòu)建紫杉醇合成關(guān)鍵酶（Bapt）基因的超表達(dá)載體來提高紫杉醇產(chǎn)量”可知，p1303載體上可能含有增強子序列，作用是促進(jìn)Bapt基因的表達(dá)，A正確；B、超表達(dá)載體中應(yīng)含有潮霉素抗性基因作為標(biāo)記基因，在含有潮霉素的培養(yǎng)基上，超表達(dá)載體能夠存活，從而起到篩選作用，B正確；C、由于紅豆杉細(xì)胞中本身存在Bapt基因，無論超表達(dá)載體是否成功導(dǎo)入，都能與Bapt基因探針形成雜交分子，因此不能通過Bapt基因探針來檢測步驟⑤是否成功，C錯誤；D、工廠化生產(chǎn)紫杉醇屬于細(xì)胞產(chǎn)物的獲得，只需要培養(yǎng)到愈傷組織階段即，D正確。故選C。14.下列有關(guān)生物技術(shù)安全及倫理性有關(guān)的問題，表述錯誤的是（）A.若轉(zhuǎn)基因生物的外源基因來自自然界，也可能存在安全性問題B.對于轉(zhuǎn)基因生物可以采用隔離帶，防止其花粉擴散或者逃逸C.生殖性克隆可以為因免疫排斥反應(yīng)造成的器官來源不足提供新的解決方案D.生物武器會對人類造成嚴(yán)重威脅和傷害，因此我國反對其技術(shù)和設(shè)備的擴散〖答案〗C〖祥解〗轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)、過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）?！驹斘觥緼、轉(zhuǎn)基因植物有可能成為“入侵的外來物種”，威脅生態(tài)系統(tǒng)中其他生物的生存，A正確；B、對于轉(zhuǎn)基因生物可以采用隔離帶，防止其花粉擴散或者逃逸，避免對生態(tài)系統(tǒng)其他生物造成威脅，B正確；C、治療性克隆可以為因免疫排斥反應(yīng)造成的器官來源不足提供新的解決方案，C錯誤；D、生物武器會對人類造成嚴(yán)重威脅和傷害，我國對于生物武器采取的態(tài)度是不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲存生物武器，并反對生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴散，D正確。故選C。二、多項選擇題：15.為探究阿莫西林（一種抗生素）對連續(xù)傳代大腸桿菌的選擇作用，某生物興趣小組采用濾紙片法測定阿莫西林的抑菌效果，圖甲、乙、丙分別是大腸桿菌第一、二、三代抑菌圈的實驗結(jié)果，下列相關(guān)敘述正確的是（）A.阿莫西林溶液不需要用高壓蒸汽法進(jìn)行滅菌處理B.擴增培養(yǎng)下一代大腸桿菌時應(yīng)在上一代培養(yǎng)基的中央挑取菌落C.培養(yǎng)基1號區(qū)域的濾紙片應(yīng)是用無菌水處理后的濾紙片D.隨著傳代次數(shù)的增加，大腸桿菌對阿莫西林出現(xiàn)耐藥性〖答案〗ACD〖祥解〗由圖可知，隨著代數(shù)增加，抑菌圈越來越小，說明阿莫西林將具有抗藥性的大腸桿菌選擇出來了?！驹斘觥緼、阿莫西林是一種抗生素，因此阿莫西林溶液不需要用高壓蒸汽法進(jìn)行滅菌處理，A正確；B、擴增培養(yǎng)下一代大腸桿菌時應(yīng)在上一代培養(yǎng)基的抑菌圈的邊緣挑取菌落，B錯誤；C、培養(yǎng)基1號區(qū)域的濾紙片在第一、二、三代抑菌圈相等（無抑菌圈），應(yīng)是用無菌水處理后的濾紙片，作為對照組，C正確；D、隨著傳代次數(shù)的增加，抑菌圈越來越小，說明大腸桿菌對阿莫西林出現(xiàn)耐藥性，D正確。故選ACD。16.原腸胚形成期被稱為人體胚胎發(fā)育的“黑匣子”時期。研究人員利用胚胎干細(xì)胞，在實驗室中制造出不能發(fā)育成完整胚胎的“擬原腸胚”模型，用來揭示人類早期胚胎發(fā)育的過程。下列說法正確的是（）A.滋養(yǎng)層細(xì)胞將來能發(fā)育成胎膜和胎盤B.利用核移植所得胚胎干細(xì)胞，可以誘導(dǎo)發(fā)育成適合移植的器官C.對原腸胚進(jìn)行胚胎分割，可以提高移植胚胎的利用率D.該模型可以研究酒精、藥物和病原體對胚胎發(fā)育的影響〖答案〗ABD〖祥解〗胚胎干細(xì)胞：1、哺乳動物的胚胎干細(xì)胞簡稱ES或EK細(xì)胞，來源于早期胚胎或從原始性腺中分離出來；2、具有胚胎細(xì)胞的特性，