微生物制劑在蝦苗標(biāo)粗中對(duì)弧菌數(shù)量影響

近年來，海區(qū)水源富營(yíng)養(yǎng)化日趨嚴(yán)重，由于長(zhǎng)期大量使用強(qiáng)氧劑殺菌，造成水體中菌相失衡，引起水質(zhì)變化大，不利于蝦苗健康生長(zhǎng)。據(jù)了解，每年的3-5月份，福建、湛江、海南等地金剛蝦、白蝦蝦苗的小苗培育和中苗標(biāo)粗過程中，蝦苗及標(biāo)苗水體以及成蝦養(yǎng)殖水體檢測(cè)到的弧菌含量都非常高，特別綠弧菌（副溶血弧菌）超標(biāo)嚴(yán)重，造成白苗、掉苗等，小苗做不出來，標(biāo)粗不成功，排池現(xiàn)象普遍，損失慘重。因此，在對(duì)蝦育苗過程中，采用有益微生態(tài)制劑調(diào)控水體環(huán)境，以菌克菌，已成為最熱門和最受關(guān)注的技術(shù)措施。

一、材料與方法1.試驗(yàn)材料。（1）試驗(yàn)產(chǎn)品：本試驗(yàn)所使用的微生物制劑“苗康達(dá)”由廣州市欣海利生生物科技有限公司生產(chǎn)，產(chǎn)品為由枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌和糞腸球菌組成，復(fù)合芽孢桿菌≥100×108cfu/g，糞腸球菌菌量≥50×108cfu/g。（2）主要試劑和儀器：TCBS培養(yǎng)基，營(yíng)養(yǎng)瓊脂，一次性培養(yǎng)皿，玻璃勻漿器，恒溫培養(yǎng)箱，電子天平，移液槍。2.

試驗(yàn)方法。福建漳浦縣六鰲鎮(zhèn)對(duì)蝦標(biāo)苗場(chǎng)，苗場(chǎng)氣溫30℃，選取3個(gè)金剛蝦標(biāo)苗池，同批次進(jìn)苗標(biāo)粗。設(shè)置對(duì)照池和實(shí)驗(yàn)池。實(shí)驗(yàn)池1：進(jìn)苗前1天，使用“微生物制劑”15ppm打底；放苗后，每天使用5ppm“微生物制劑”，溶水后全池潑灑。實(shí)驗(yàn)池2：進(jìn)苗前1天，使用“微生物制劑”15ppm打底；放苗后，每天使用10ppm“微生物制劑”，溶水后全池潑灑。對(duì)照池正常操作。3.

檢測(cè)方法。平板涂布法：蝦苗幼體放入標(biāo)苗池前1h取水體與進(jìn)苗時(shí)取蝦體檢測(cè)最初弧菌和總菌數(shù)量。使用微生物制劑24h后取3個(gè)池水與蝦研磨處理后，分別于TCBS培養(yǎng)皿和營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)皿檢測(cè)弧菌和總菌的含量。蝦苗用濾網(wǎng)撈出，吸干水分用電子天平稱取蝦樣0.1g，加入1mL無菌水，使用玻璃勻漿器研磨破碎制備蝦樣原液，將池水和研磨后的蝦樣原液按10倍梯度稀釋，稀釋4次至10-4，每個(gè)樣品吸取100μL于培養(yǎng)皿上，均勻涂布，每個(gè)樣品2個(gè)平行，于33℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)16-18h，分別記錄平板上弧菌數(shù)與總菌數(shù)。每天檢測(cè)一次，連續(xù)6天，跟蹤弧菌、總菌數(shù)量的變化。二、結(jié)果和分析1.微生物制劑使用對(duì)弧菌的影響。實(shí)驗(yàn)開始時(shí)，實(shí)驗(yàn)組水體弧菌含量分別高達(dá)3.18×104cfu/mL、2.81×104cfu/mL，顯著高于對(duì)照組1.20×104cfu/mL。隨著使用“微生物制劑”后，兩個(gè)實(shí)驗(yàn)組水體弧菌數(shù)量逐漸減少，長(zhǎng)期低于6×103cfu/mL，后續(xù)實(shí)驗(yàn)過程中兩個(gè)實(shí)驗(yàn)組水體弧菌數(shù)量明顯比對(duì)照組低。實(shí)驗(yàn)最初，蝦體弧菌基本相同，隨著標(biāo)粗時(shí)間延長(zhǎng)，對(duì)照組蝦體弧菌數(shù)量呈明顯上升趨勢(shì)，最高達(dá)5.22×105cfu/g；兩個(gè)實(shí)驗(yàn)組蝦體弧菌先上升，隨著使用“微生物制劑”時(shí)間延長(zhǎng)，蝦體弧菌數(shù)量均呈下降趨勢(shì)，最終分別低至2×103cfu/g和8×103cfu/g。2.微生物制劑使用對(duì)總菌的影響。實(shí)驗(yàn)開始時(shí)，三個(gè)組水體和蝦體總菌濃度無明顯差異。隨著試驗(yàn)組使用“微生物制劑”，兩個(gè)試驗(yàn)組水體和蝦體總菌均呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，試驗(yàn)組水體總菌高達(dá)3.07×106cfu/mL顯著高于對(duì)照組最高的1.7×106cfu/mL；試驗(yàn)組的蝦體總菌高達(dá)1.31×108cfu/g顯著高于對(duì)照組3.7×107cfu/g。整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程兩個(gè)實(shí)驗(yàn)組水體和蝦體總菌含量均高對(duì)照組。3.分析。從以上結(jié)果可以看到，隨著試驗(yàn)進(jìn)行，由于芽孢桿菌抗逆性強(qiáng)，經(jīng)活化后迅速形成營(yíng)養(yǎng)體，產(chǎn)生大量抑菌物質(zhì)能夠有效抑制或殺滅水體中弧菌，實(shí)驗(yàn)池水體和蝦體的弧菌不斷下降，而對(duì)照池水體和蝦體弧菌數(shù)量處于較高水平。芽孢桿菌活化后在蝦體內(nèi)定植，實(shí)驗(yàn)池中水體和蝦體內(nèi)總菌不斷增加，芽孢桿菌與對(duì)蝦養(yǎng)殖環(huán)境中的其他有害菌相互競(jìng)爭(zhēng)，形成優(yōu)勢(shì)菌群。三、討論使用有益菌提前預(yù)防抑制弧菌爆發(fā)，減少弧菌對(duì)蝦苗的危害，是一條綠色可持續(xù)的發(fā)展道路。本研究采用枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌和糞腸球菌復(fù)合的微生物制劑產(chǎn)品，亦能顯著抑制蝦苗標(biāo)粗池水體和蝦體的弧菌濃度，提高總菌濃度。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，微