藥物分析第二章藥物的鑒別試驗(yàn)

藥物分析第二章藥物的鑒別試驗(yàn)

藥物的鑒別試驗(yàn)藥物的雜質(zhì)檢查藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證藥品檢驗(yàn)工作的基本規(guī)律Basicregularityofdruginspection第2頁,共42頁，2024年2月25日，星期天Identificationtestofdrug

鑒別試驗(yàn)的內(nèi)涵鑒別試驗(yàn)的項(xiàng)目鑒別試驗(yàn)的方法鑒別試驗(yàn)的條件藥物的鑒別試驗(yàn)第3頁,共42頁，2024年2月25日，星期天

根據(jù)藥物的分子結(jié)構(gòu)，采用化學(xué)、物理化學(xué)或生物學(xué)方法來判斷其真?zhèn)巍ｈb別試驗(yàn)用方法僅用于證實(shí)貯藏在有標(biāo)簽容器中的藥物是否為其所標(biāo)示的藥物，而非對(duì)未知物的鑒別。鑒別試驗(yàn)方法應(yīng)專屬，每個(gè)品種一般2～3條。鑒別試驗(yàn)的內(nèi)涵Testmeaning第4頁,共42頁，2024年2月25日，星期天ChP(2010)凡例中對(duì)藥物的鑒別的定義為：鑒別項(xiàng)下規(guī)定的實(shí)驗(yàn)方法，僅反應(yīng)該藥品某些物理、化學(xué)或生物學(xué)等性質(zhì)特征，不完全代表對(duì)該藥品化學(xué)結(jié)構(gòu)的確證。第5頁,共42頁，2024年2月25日，星期天性狀項(xiàng)和物理常數(shù)確認(rèn)

鑒別項(xiàng)下規(guī)定的試驗(yàn)

原料藥鑒別制劑鑒別鑒別試驗(yàn)的項(xiàng)目

Testitems

第6頁,共42頁，2024年2月25日，星期天性狀

（Description）定義：

反映藥物特有的物理性質(zhì)，如外觀、溶解度和物理常數(shù)等。外觀溶解度物理常數(shù)第7頁,共42頁，2024年2月25日，星期天外觀：指藥物的聚集狀態(tài)、晶型、色澤以及臭、味等性質(zhì)。如二巰基丁二鈉的描述為“本品為白色至微黃色的粉末；有類似蒜的特臭”。溶解度：一定程度上反映了藥品的純度。藥品在不同溶劑中的溶解性能用“極易溶解、易溶、溶解、略溶、微溶、極微溶解、幾乎不溶或不溶”來描述。物理常數(shù)：用于藥品鑒別，反映其純雜程度。藥典收載的物理常數(shù)包括：相對(duì)密度、餾程、熔點(diǎn)、凝點(diǎn)、比旋度、折光率、黏度、酸值、皂化值、羥值、碘值、吸收系數(shù)。

性狀

（Description）第8頁,共42頁，2024年2月25日，星期天熔點(diǎn)性狀---固體熔化成液體的溫度熔融同時(shí)分解的溫度自初熔至全熔的一段溫度物理常數(shù)第9頁,共42頁，2024年2月25日，星期天ChP(2010)收載三種熔點(diǎn)的測(cè)定方法：第一法測(cè)定易碎固體藥品第二法測(cè)定不易粉碎固體藥品（脂肪酸、石蠟）第三法測(cè)定凡士林或其他易碎物要求報(bào)告初熔和終熔的溫度第10頁,共42頁，2024年2月25日，星期天比旋度：在一定波長(589.3nm)與溫度(20℃)下，偏振光透過長1dm且每1ml中含有旋光性物質(zhì)1g的溶液時(shí)測(cè)得的旋光度。用表示。性狀---物理常數(shù)第11頁,共42頁，2024年2月25日，星期天例如：維生素C的比旋度測(cè)定：取本品，精密稱定，加水溶解，并定量稀釋成C為0.10g/ml的溶液，依法測(cè)定旋光度為+2.05°至2.15°，求=？第12頁,共42頁，2024年2月25日，星期天吸收系數(shù)：在給定的波長、溶劑和溫度等條件下，吸光物質(zhì)在單位濃度、單位液層厚度時(shí)的吸收度稱為吸收系數(shù)。中國藥典收載是。

這兩種物理常數(shù)可用以區(qū)別藥品、檢查純度或測(cè)定制劑的含量。第13頁,共42頁，2024年2月25日，星期天吸收系數(shù)吸光物質(zhì)在單位濃度、單位液層厚度時(shí)的吸收度摩爾吸收系數(shù)溶液濃度

ε

液層厚度百分吸收系數(shù)溶液濃度液層厚度第14頁,共42頁，2024年2月25日，星期天A=ECLE=A/CLC=1%或1mol/L例如鹽酸甲氧明“取本品，精密稱定，加水溶解并定量稀釋成每1ml含30ug的溶液，照分光光度法，在290nm波長處測(cè)定吸收度，吸收系數(shù)（為133-141）第15頁,共42頁，2024年2月25日，星期天依據(jù)：某一類藥物組成中的陰離子和陽離子的特殊反應(yīng)或典型的有機(jī)官能團(tuán)反應(yīng)。中國藥典附錄收載一般鑒別試驗(yàn)：無機(jī)金屬鹽類、無機(jī)酸鹽、有機(jī)酸鹽、丙二酰脲類、托烷生物堿類、芳香第一胺類、有機(jī)氟化物類等Generalidentificationtest一般鑒別試驗(yàn)無機(jī)物有機(jī)物第16頁,共42頁，2024年2月25日，星期天陰陽離子的特殊反應(yīng)酸根名稱

檢驗(yàn)試劑

現(xiàn)象

反應(yīng)方程式

SO42-

BaCl2溶液

白色↓加酸不溶

SO42-+Ba2+→BaSO4

CO32-

稀酸，Ca(OH)2

氣體使石灰水變混

CO32-+2H+→CO2↑+H2OCa2++CO32-→CaCO3↓

HCO3-

稀酸，Ca(OH)2氣體使石灰水變混

Cl-

AgNO3試液

白↓溶于氨水不溶稀硝酸

Cl-+Ag+→AgCl↓

Br-

AgNO3試液

黃↓微溶氨水不溶稀硝酸

Br-+Ag+→AgBr↓

第17頁,共42頁，2024年2月25日，星期天陰陽離子的特殊反應(yīng)離子鑒別方法鑒別原理現(xiàn)象Na+焰色反應(yīng)光譜主要譜線589nm可見光區(qū)鮮黃色（實(shí)例見⑧）K+焰色反應(yīng)光譜主要譜線766nm，769nm紫色（實(shí)例見⑧）Ca2+焰色反應(yīng)光譜主要譜線622nm可見光區(qū)磚紅色Ba2+焰色反應(yīng)光譜主要譜線553nm，500nm黃綠色Li+焰色反應(yīng)光譜主要譜線670nm胭脂紅色NH4+NaOH石蕊試液NH4++OH-→NH3↑+H2O有刺鼻氣味，濕石蕊試紙變蘭第18頁,共42頁，2024年2月25日，星期天有機(jī)氟化物

樣品經(jīng)氧瓶燃燒法進(jìn)行有機(jī)破壞后，用水和堿氫氧化鈉溶液吸收為無機(jī)氟化物，與茜素氟藍(lán)和硝酸亞鈰在PH=4.3溶液中形成藍(lán)紫色絡(luò)合物。第19頁,共42頁，2024年2月25日，星期天反應(yīng)原理第20頁,共42頁，2024年2月25日，星期天FeCl3反應(yīng)加稀HCl，沉淀分解，生成游離白色堿式苯甲酸鐵鹽（赭色沉淀）第21頁,共42頁，2024年2月25日，星期天酒石酸鹽取供試品的中性溶液于試管中，加氨制硝酸銀溶液幾滴，于水浴中加熱，有銀鏡生成。綜上所述，一般鑒別試驗(yàn)只能證實(shí)是哪一類藥物，而不能證實(shí)是哪一種藥物第22頁,共42頁，2024年2月25日，星期天依據(jù)：每種藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)的差異及引起的物理化學(xué)特性的不同，選用某些特有的靈敏的定性反應(yīng)鑒別藥物的真?zhèn)?。是證實(shí)某一種藥物的依據(jù)。

Specificidentificationtest專屬鑒別試驗(yàn)第23頁,共42頁，2024年2月25日，星期天例子

巴比妥類藥物：苯巴比妥含有苯環(huán)，司可巴比妥含有雙鍵，硫噴妥鈉含有硫原子。根據(jù)取代基的不同，采用各自專屬的反應(yīng)進(jìn)行鑒別。第24頁,共42頁，2024年2月25日，星期天例子甾體激素類藥物含有環(huán)戊烷并多氫菲母核，主要差別在A環(huán)和D環(huán)的取代基不同，可利用這些結(jié)構(gòu)特征確證。第25頁,共42頁，2024年2月25日，星期天四、鑒別方法化學(xué)鑒別法光譜鑒別法生物學(xué)法

HPLC、GC鑒別法

薄層色譜鑒別法

紙色譜鑒別法

呈色反應(yīng)鑒別法

紫外光譜鑒別法

紅外光譜鑒別法

沉淀生成反應(yīng)鑒別法

色譜鑒別法

氣體生成反應(yīng)鑒別法

測(cè)定生成物的熔點(diǎn)熒光反應(yīng)鑒別法

第26頁,共42頁，2024年2月25日，星期天1.呈色反應(yīng)鑒別法指供試品溶液中加入適當(dāng)?shù)脑噭┤芤?，在一定條件下進(jìn)行反應(yīng)，生成易于觀測(cè)的有色產(chǎn)物。（1）三氯化鐵呈色反應(yīng)：用于酚羥基或水解后產(chǎn)生酚羥基（2）異羥肟酸鐵反應(yīng)：多用于芳酸及其酯類、酰胺類（3）茚三酮呈色反應(yīng)：用于結(jié)構(gòu)中含有脂肪氨基藥物（4）重氮化-偶合顯色反應(yīng)：用于芳伯氨基或潛在芳伯氨基（5）氧化還原顯色反應(yīng)及其它顏色反應(yīng)第27頁,共42頁，2024年2月25日，星期天2.沉淀生成反應(yīng)鑒別法（1）與重金屬離子的沉淀反應(yīng)（2）與硫氰化鉻銨（雷氏鹽）的沉淀反應(yīng)（3）其它沉淀反應(yīng)。多用于生物堿及其鹽，具有芳香環(huán)的有機(jī)堿及其鹽。第28頁,共42頁，2024年2月25日，星期天常用的熒光發(fā)射形式：（1）藥物本身可在可見光下發(fā)射熒光；（2）藥物溶液加硫酸后，在可見光下發(fā)射熒光；（3）藥物和溴反應(yīng)后，于可見光下發(fā)射出熒光；3.熒光反應(yīng)鑒別法（4）藥物和間苯二酚反應(yīng)后，發(fā)射出熒光及藥物經(jīng)其它反應(yīng)后，發(fā)射熒光。第29頁,共42頁，2024年2月25日，星期天（1）大多數(shù)的胺（銨）類藥物、酰脲類藥物以及某些酰胺類藥物，可經(jīng)強(qiáng)堿處理后，加熱，產(chǎn)生氨（胺）氣。（2）化學(xué)結(jié)構(gòu)中含硫的藥物，可經(jīng)強(qiáng)酸處理后，加熱，發(fā)生硫化氫氣體。（3）含碘有機(jī)藥物，經(jīng)直火加熱，可生成紫色碘蒸氣；含醋酸酯和乙酰胺類藥物，經(jīng)硫酸水解后，加乙醇可產(chǎn)生醋酸乙酯的香味。4.氣體生成反應(yīng)鑒別法第30頁,共42頁，2024年2月25日，星期天紫外光譜鑒別法

對(duì)比吸收光譜特征參數(shù)比較吸收度比值一致性對(duì)比吸收光譜一致性第31頁,共42頁，2024年2月25日，星期天紫外法在指定溶劑中測(cè)定2-3個(gè)特定波長處的吸收度比值（峰值與峰值比，峰谷與峰谷比），以提高專屬性。例地蒽酚的鑒別取含量測(cè)定下的溶液，照分光光度法測(cè)定，于240-400nm的波長范圍測(cè)定吸收度,在257,289,356處有最大吸收.規(guī)定A257/=A289為1.06-1.10A356/=A289為0.90-0.94.第32頁,共42頁，2024年2月25日，星期天紫外光譜鑒別法(1)最大吸收波長和最小吸收波長(2)-A(3)-吸收系數(shù)(4)-A1/A2(5)化學(xué)處理后測(cè)定產(chǎn)物的吸光度值λλλλ第33頁,共42頁，2024年2月25日，星期天不同國家測(cè)定方法略有不同USP(32)

采用對(duì)照品法,把樣品與對(duì)照品按同法處理,在200-400nm波長范圍掃描，要求相同波長處有最大吸收，最小吸收，相同的吸收系數(shù)，或吸收比在規(guī)定的限度內(nèi)。JP(15)與ChP(2010)的UV測(cè)定方法相似。BP(2009)規(guī)定在一定波長范圍內(nèi)掃描，尋找最大吸收，測(cè)定吸收系數(shù)。第34頁,共42頁，2024年2月25日，星期天紅外光譜法是一種專屬性很強(qiáng)，應(yīng)用較廣（固、液、氣）的鑒別方法，主要應(yīng)用于組分單一，結(jié)構(gòu)明確的原料藥，特別適合于其他方法不易區(qū)分的同類藥物，如磺胺類、甾體激素類、半合成抗勝素。紅外光譜鑒別法第35頁,共42頁，2024年2月25日，星期天紅外光譜鑒別法對(duì)比供試品紅外吸收光譜與藥品標(biāo)準(zhǔn)紅外光譜的一致性，尤其是指紋一致性。第36頁,共42頁，2024年2月25日，星期天ChP和BP均采用標(biāo)準(zhǔn)圖譜法例中國藥典對(duì)某藥物的鑒別：本品的紅外吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照的圖譜（光譜集XX圖）一致。USP采用對(duì)照品法例阿莫西林的鑒別試驗(yàn)：取本品，經(jīng)干燥后用溴化鉀壓片法測(cè)定，所得的圖譜與USP阿莫西林參考標(biāo)準(zhǔn)品圖譜一致。第37頁,共42頁，2024年2月25日，星期天JP采用規(guī)定條件下測(cè)定一定波數(shù)處的特征吸收峰例氯羥去甲安定的測(cè)定：取本品，干燥后用