呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷

呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷1呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024第一部分標本采集第二部分細菌真菌涂片檢查第三部分細菌真菌培養(yǎng)鑒定第四部分細菌真菌耐藥性檢查第五部分真菌G和GM實驗第六部分敗血癥患者血液培養(yǎng)2呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024痰液（下呼吸道）和咽拭子（咽喉部）；可進行涂片查細菌、真菌或抗酸桿菌；可進行細菌、真菌或結核桿菌培養(yǎng)；上述檢查只要一口痰即可。懷疑膿毒血癥，抽取靜脈血進行血液培養(yǎng)。懷疑深部真菌感染，抽取靜脈血G和GM實驗。第一部分標本采集3呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024采集深部痰（sputum），不是唾液和口水；自然咳痰法(Expectoratedsputum)；最好為清晨第一口痰，用清水反復漱口用力咳出第一口痰于無菌容器內；支氣管鏡采集法（Bronchoscopy）。標本盡快送檢，室溫保存不能超過2小時。標本采集

4呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024一、革蘭染色二、抗酸染色第二部分細菌真菌涂片檢查5呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024Basicprinciple

?Peptidoglycan.Procedure

?crystalviolet,iodine,alcohol.carbofuchsinred.1Gram-stained6呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024Results,

G+orG-bacteria,cocciorbacillibacteria,bacteriaorfungi,inoilimmersionfield.1Gram-stained7呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/20248呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/20249呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/202410呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/202411呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/202412呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/202413呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/202414呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/202415呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024WBC>25/LP上皮細胞<10/LP提示炎癥培養(yǎng)結果意義大16呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024Basicprinciple?Lipid.

Procedure?carbolfuchsinred,hydrochloricacid3%alcohol,methyleneblue.2acid-faststain17呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024Results,

acid-fastbacteriared,otherbacteriaandbackgroundblue.2acid-faststain18呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024TheresultreportmodeNegative,acid-fastbacillinotfound,Positive(1or2),1or2wholevisualfield,Positive（+）,3to9wholevisualfield,Positive（++）,10to99wholevisualfield,Positive（+++）,1to9everyvisualfield,Positive（++++）,>10everyvisualfield.

19呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024抗酸陽性，約90%為結核分枝桿菌，約10%為非典型分支桿菌，建議熒光定量PCR快速鑒別；可進行結核桿菌培養(yǎng)鑒定（質譜、PCR、測序），陽性約1個月，2個月發(fā)陰性結果；為提高陽性率，建議晨痰深咳痰，并連續(xù)送檢3天；或支氣管鏡，多張刷片，送檢。抗酸染色注意事項

20呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024第三部分細菌真菌培養(yǎng)鑒定21呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024常見的細菌：金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌；肺炎鏈球菌、化膿鏈球菌；腸球菌、卡他莫拉菌；腦膜炎奈瑟菌；大腸埃希菌、克雷伯桿菌、銅綠假單胞菌；流感嗜血桿菌；軍團菌；結核分枝桿菌、非典型分枝桿菌。支原體、衣原體。痰液標本中常見的病原體

22呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024常見的真菌：白假絲酵母菌、隱球菌、曲霉菌、毛霉菌。常見的病毒：腺病毒、流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、巨細胞病毒、單純皰疹病毒、冠狀病毒和麻疹病毒。痰液標本中常見的病原體

23呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024報“分離出某種致病菌，比例，藥敏”：分離出致病菌，而不是常見的正常菌群，且具有優(yōu)勢，約占血平板菌群總數(shù)的百分比%；同一病人如痰中連續(xù)分離出同一種菌，3天內如果已經做過藥敏試驗，則不再做藥敏；同一病人痰中細菌的種類和比例，會隨著治療情況變化，也受留取痰標本的質量影響。結果報告形式

24呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024報“正常菌群”：培養(yǎng)出細菌種類較多，無優(yōu)勢菌、無致病菌；可能標本采集不合格，為口水樣痰；可能病人抵抗力弱，由條件致病菌（非致病菌）引起感染。結果報告形式

25呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024報“正常菌群”：可能病毒、支原體、衣原體等血平板無法培養(yǎng)的病原體；可能是生長緩慢或難于培養(yǎng)的細菌；未來發(fā)展方向利用高通量測序技術。結果報告形式

26呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024第四部分細菌真菌耐藥性檢查一、常用藥敏試驗方法

二、常用抗生素種類

三、藥敏試驗結果解讀27呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024一、常用藥敏試驗方法(1)MIC稀釋法(2)K-B紙片擴散法(3)E-test法28呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024MIC稀釋法一般在瓊脂或肉湯中將抗菌藥物系列對倍稀釋，定量接種待檢菌，35℃培養(yǎng)18至24小時后觀察結果；抑制檢測菌肉眼可見生長的最低藥物濃度，即最小抑菌濃度；MIC稀釋法結果以MIC（μg/ml）數(shù)值報告，數(shù)值越小越敏感，與K-B法相反；(1)MIC稀釋法29呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024MIC稀釋法藥物濃度主要包括折點濃度，可以判斷敏感、中介、耐藥，少數(shù)藥物如亞胺培南、美羅培南、頭孢他啶，萬古霉素、替考拉寧、利奈唑胺等在判斷敏感的基礎上，又增加了一些低濃度，以利于合理選用藥量，不同抗生素判斷的折點濃度不同，故不同抗生素之間的MIC值沒有可比性。30呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024(2)K-B紙片擴散法補充藥敏板沒有的抗生素，如頭孢哌酮/舒巴坦。含有定量抗菌藥物的紙片，貼在已接種待檢菌的MH平板上，紙片中所含的藥物，吸取瓊脂中的水分溶解后，不斷地向紙片周圍區(qū)域擴散，形成遞減的藥物梯度濃度。31呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024在紙片周圍抑菌濃度范圍內，細菌的生長被抑制，形成透明的抑菌圈。抑菌圈大小，反映待檢菌對測定藥物敏感程度。不同抗生素有不同的判斷標準，不同抗生素的抑菌圈大小沒有可比性。32呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024(3)E-test法結合K-B法和稀釋法的優(yōu)點；原理同稀釋法檢測，操作同K-B法簡單；試紙條上含干化、穩(wěn)定、濃度由高到低呈指數(shù)梯度分布的某種抗菌藥物。補充鑒定藥敏板沒有的抗生素，如替加環(huán)素（老虎素）。33呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024二、常用抗生素種類

臨床和實驗室標準化委員會（clinicalandlaboratorystandardsofinstitute,CLSI）系列指南，每年更新。34呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024多烯類：兩性霉素B、制霉菌素。唑類：克霉唑、咪康唑、益康唑、氟康唑、酮康唑、伊曲康唑、伏立康唑。核苷類：氟胞嘧啶。棘球白素類：卡泊芬凈。真菌藥敏試驗常用藥物35呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024三、藥敏試驗結果解讀臨床和實驗室標準化委員會（clinicalandlaboratorystandardsofinstitute,CLSI）系列指南，每年更新。36呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024敏感（Susceptible，S）是指菌株能被使用推薦劑量治療感染部位可達到的抗菌藥物濃度所抑制，推薦使用。37呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024中介（Intermediate，I）指抗菌藥物MIC接近血液和組織中通常可達到的濃度，療效低于敏感菌株。還表示藥物在生理濃集的部位具有臨床效力（如尿液中的喹諾酮類和β-內酰胺類），或者可用高于正常劑量的藥物進行治療（如β-內酰胺類）。另外，中介還作為緩沖區(qū)，以防止微小的、未受控制的技術因素導致較大的錯誤結果，特別是對那些藥物毒性范圍窄的藥物。38呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024耐藥（Resistant，R）指菌株不能被常規(guī)劑量抗菌藥物達到的濃度所抑制，和/或證明MIC或抑菌圈直徑落在某些特殊的微生物耐藥機制范圍（如β-內酰胺酶），在治療研究中表現(xiàn)抗菌藥物對菌株的臨床療效不可靠。39呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024

產超廣譜β-內酰胺酶G-桿菌(extendedspectrumβ-lactamaseG-bacillus，ESBLs)

該酶是指由質粒介導的能水解所有青霉素類、頭孢菌素類及單環(huán)β-內酰胺類氨曲南的一類酶，主要見于肺炎克雷伯菌和大腸埃希菌。40呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024

耐碳青霉烯類抗生素的G-桿菌

指對碳青霉烯類抗生素亞胺培南、美羅培南等耐藥的G-桿菌，主要為不動桿菌屬（鮑曼和非鮑曼不動桿菌）、銅綠假單胞菌，近幾年出現(xiàn)耐碳青霉烯類抗生素的腸桿菌科，需引起重視。41呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024

耐甲氧西林葡萄球菌（methecillinresistancestaphylococcus，MRS）

CLSI規(guī)定，葡萄球菌如對苯唑西林（或甲氧西林）耐藥：對青霉素類、頭孢菌素類、碳青霉烯類和含酶抑制劑的復方制劑均應報告耐藥，而不考慮體外藥敏結果。42呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024

耐高濃度慶大霉素腸球菌（HighlevelaminoglycosidesresistanceinEnterococcus）

CLSI規(guī)定，腸球菌引起的全身性嚴重感染，常聯(lián)合應用β-內酰胺類和氨基糖苷類抗生素，如果腸球菌對高濃度慶大霉素耐藥，則聯(lián)合用藥無效。耐萬古霉素腸球菌（VRE），用E-test法驗證。43呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024上述多重耐藥菌、泛耐藥菌，要求每天在檢驗單審核結束后，及時向臨床科室和醫(yī)院感染控制科報告，以及時采取相應的防控措施，避免多重耐藥菌、泛耐藥菌的擴散、流行或暴發(fā)。44呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024第五部分真菌G和GM實驗45呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024真菌（1-3）-β-D-葡聚糖檢測

（真菌G試驗）46呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024葡聚糖位于真菌細胞壁，1,3-β-D-葡聚糖占真菌壁成分50%以上，是真菌細胞壁上的特有成分。47呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024當真菌進入人體血液或深部組織后，經吞噬細胞吞噬及消化，1-3-β-D-葡聚糖可從胞壁中釋放出來，從而使血液或穿刺液中含量增高，并與真菌感染量相關。在淺部真菌感染中，(1-3)-β-D-葡聚糖不被釋放出來，故其在血液中含量不增高。真菌（1-3）-β-D-葡聚糖特性48呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024在念珠菌和曲霉菌細胞壁中含量較多。能用于檢測念珠菌、毛孢子菌、曲霉菌、鐮刀菌、卡氏肺孢子菌深部真菌感染。不能檢測隱球菌、接合菌（根霉/毛霉等）。真菌（1-3）-β-D-葡聚糖特性49呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024采用無熱原采血管；抽血后2h內送檢；血標本4-8℃最多存放48h；檢測環(huán)境應保持清潔。分析前注意事項50呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024使用纖維素膜進行血透，標本或患者暴露于紗布或其他含有葡聚糖的材料；靜脈輸注免疫球蛋白、白蛋白、凝血因子或血液制品；

以下情況可1,3-β-D-葡聚糖假陽性51呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024鏈球菌血癥；使用多糖類抗癌藥物、放化療造成的粘膜損傷導致食物中的葡聚糖或定植的念珠菌經胃腸道進入血液等也可能造成假陽性。

以下情況可1,3-β-D-葡聚糖假陽性52呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024早期診斷：侵襲性真菌感染增多且復雜，早期癥狀無特異性，往往被原發(fā)病掩蓋，病程長，發(fā)現(xiàn)較晚，死亡率高。因此對深部真菌感染治療成敗的關鍵在于早期診斷。指導用藥：快速確定真菌感染后，選擇好治療方案,有針對性使用抗真菌類藥物。為臨床選用副作用小，療效高，價格適宜的藥物提供準確的依據(jù)。真菌G試驗臨床價值53呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024評價效果：應用抗真菌藥物后，定期檢測血漿中葡聚糖濃度變化，評價選用藥物的有效性。監(jiān)護病程：監(jiān)護深部真菌感染易感人群的病發(fā)狀態(tài)。真菌G試驗臨床價值54呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024真菌半乳甘露聚糖抗原檢測（GM試驗）主要用于侵襲性曲霉菌感染的早期診斷；曲霉菌特有的細胞壁多糖成分是β（1-5）呋喃半乳糖殘基，菌絲生長時，半乳甘露聚糖從薄弱的菌絲頂端釋放，是最早釋放的抗原；GM釋放量與菌量成正比，可以反映感染程度；連續(xù)檢測GM可作為治療療效的監(jiān)測。55呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024第六部分敗血癥患者血液培養(yǎng)56呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024目前我國社會老齡化日趨嚴重，慢性病及惡性腫瘤、器官移植、愛滋病和結核病病人不斷增多，侵襲性診療技術廣泛應用，敗血癥發(fā)病率不斷增加。敗血癥病死率30%以上；早期病原學診斷和合理抗生素治療，明顯降低敗血癥病死率。57呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024血液培養(yǎng)的送檢指征：發(fā)熱>38℃，或低溫<36℃；白細胞增多>10×109/L，“核左移”白細胞增多；粒細胞減少，成熟的多核白細胞<1×109/L；血小板減少；皮膚粘膜出血；心率>90次/分；呼吸頻率>20次/分；二氧化碳分壓<32mmHg；昏迷；多器官衰竭；血清降鈣素原和C反應蛋白升高；嚴重局部感染（如嚴重肺炎同時采痰液和血液）。58呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024最好在抗生素使用前采集，若已用抗菌藥須，則盡量避開血藥濃度的高峰期，最好在下次用藥前。血液標本采集時間59呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)常見實驗檢測及常見疾病實驗診斷5/8/2024建議第一次可在病人發(fā)熱初期或高峰期采集，