流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用

免疫分型白血病的免疫分型已成為診斷血液惡性腫瘤不可缺少的重要標(biāo)準(zhǔn)之一國際上公認(rèn)的通用的方法是流式細(xì)胞術(shù)（FCM）。流式細(xì)胞術(shù)：利用熒光素標(biāo)記的單克隆抗體（McAb）探針，多參數(shù)分析細(xì)胞膜和細(xì)胞漿或細(xì)胞核的免疫表型。了解被測白血病細(xì)胞所屬細(xì)胞系列及其分化程度。5/9/20241流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用流式細(xì)胞儀診斷白血病的依據(jù)1、FCM能快速，多參數(shù)，客觀的定性又定量測定細(xì)胞膜、漿、核的抗原表達(dá)

2、至今尚未發(fā)現(xiàn)白血病的特異抗原。3、能用正常血細(xì)胞的單抗來進(jìn)行免疫分型是基于白血病形成的分化阻斷學(xué)說。5/9/20242流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用（抗原的表達(dá)與否可作為鑒別和分類血細(xì)胞的基礎(chǔ)。白血病是造血系統(tǒng)的惡性腫瘤，在形態(tài)上變化雖相當(dāng)大，但仍能表達(dá)正常血細(xì)胞所具有的抗原，因而仍可依據(jù)其抗原的表達(dá)譜對白血病進(jìn)行免疫分型。）5/9/20243流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用即白血病細(xì)胞基因異常，分化受阻于某階段形成不同亞型的白血病。這群細(xì)胞充盈于骨髓。正常血細(xì)胞從多能干細(xì)胞分化、發(fā)育、成熟為功能細(xì)胞的過程中，細(xì)胞膜、細(xì)胞漿或胞核抗原的出現(xiàn)、表達(dá)增多與減少甚至消失與血細(xì)胞的分化發(fā)育階段密切相關(guān)，而且表現(xiàn)出與細(xì)胞系列及其分化程度相關(guān)的特異性。5/9/20244流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用流式細(xì)胞儀診斷白血病的意義

1、FCM白血病免疫分型是對形態(tài)學(xué)分型的重要補(bǔ)充和進(jìn)一步深化，免疫分型對每一例急性白血病都是必不可少的（國際白血病MIC分型協(xié)作組）5/9/20245流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用5/9/20246流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用5/9/20247流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用5/9/20248流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用5/9/20249流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用5/9/202410流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用5/9/202411流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用5/9/202412流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用5/9/202413流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用1、用形態(tài)學(xué)、細(xì)胞化學(xué)染色不能肯定細(xì)胞來源的白血病。

5/9/202414流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用①、形態(tài)學(xué)為急性淋巴細(xì)胞白血?。ˋLL）②急性未分化白血?。ˋUL）但缺乏特異性淋巴細(xì)胞系列抗原標(biāo)記。

5/9/202415流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用③、混合性白血病。5/9/202416流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用④、部分髓系白血病。5/9/202417流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用⑤慢性淋巴細(xì)胞白血病。⑥微小殘留白血病。

5/9/202418流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用2.臨床預(yù)測；可根據(jù)抗原的表達(dá)情況預(yù)測病情的預(yù)后：如白血病患者有CD7+與CD34+共表達(dá)，預(yù)后不好。3.疾病監(jiān)測：可監(jiān)測病程的發(fā)展，療效，可進(jìn)行微小殘留白血病的檢測。5/9/202419流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用4、與染色體檢查共同對白血病進(jìn)行診斷5/9/202420流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用免疫分型常用的免疫標(biāo)志及其意義

1．白血病系列分化抗原

T淋巴細(xì)胞白血病：CD3、CD5、CD7。

B淋巴細(xì)胞白血?。篊D10、CD19、CD22。

NK淋巴細(xì)胞白血?。篊D16、CD56、CD57。

髓系白血?。篊D13、CD14、CD33、MPO（髓過氧化物酶）。

紅白血?。篏lyA（血型糖蛋白A）。

巨核細(xì)胞白血?。篊D41、CD42、CD61。

5/9/202421流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用白血病系列非特異性抗原CD34、HLA－DR為早期細(xì)胞抗原，無系列特異性，可與CD38聯(lián)合運(yùn)用于免疫分型。干/祖細(xì)胞CD34＋、HLA－DR＋、CD38－，原始細(xì)胞CD34＋、HLA－DR＋、CD38＋，幼稚細(xì)胞CD34－、HLA－DR－、CD38＋（如早幼粒細(xì)胞）5/9/202422流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用白血病分化階段抗原T細(xì)胞抗原CD4、CD8B細(xì)胞抗原：CD10、Cyμ（胞漿μ鏈）、

SmIg（表面膜免疫球蛋白）、

CD38和CyIg（胞漿免疫球蛋白）、

CD11C。5/9/202423流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用白細(xì)胞共同抗原CD45為白細(xì)胞共同抗原，其表達(dá)量：

淋巴細(xì)胞>單核細(xì)胞>成熟粒細(xì)胞，

CD45不表達(dá)紅細(xì)胞（中，晚幼紅細(xì)胞，成熟紅細(xì)胞）。

SSC/CD45PerCP雙參數(shù)分析鑒別骨髓和血液中的原始或成熟細(xì)胞。FSC、SSC、McAbl-FITC、McAb2-PE、CD45PerCP五參數(shù)分析，可特異地分析原幼白血病細(xì)胞的免疫表型而不受成熟細(xì)胞的干擾。5/9/202424流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用白血病及淋巴瘤免疫分型1．AML

MO：1）有低的SSC和FSC。在CD45－SSC圖上出現(xiàn)在淋巴細(xì)胞位置上，至少表達(dá)一個特異性標(biāo)志如CD13或CD16，但

MPO比CD13與CD33更靈敏。2）一般淋系標(biāo)志陰性，但也可表達(dá)CD7或CD4。3）一般HLA－DR、CD34陽性，有些研究表明CD7與CD34共表達(dá)在AML且預(yù)后差。

5/9/202425流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用5/9/202426流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用M1：1）CD13＋、CD33＋、HLA－DR－，

(CD34<M0，可能表達(dá)部分

CD15)。

M2：1）CD15>M1，CD34<M1，CD13>CD33

2）多數(shù)病例HLA－DR（-）。3）CD45－SSC圖顯示從髓系blast區(qū)至成熟骨髓細(xì)胞區(qū)的連續(xù)細(xì)胞帶，CD45－SSC圖有助于確定blasts比例。

5/9/202427流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用5/9/202428流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用5/9/202429流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用5/9/202430流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用5/9/202431流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用5/9/202432流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用5/9/202433流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用5/9/202434流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用M3、高顆粒性，具較高的SSC，

CD45<成熟C，CD34<M2、HLA－DR（-），CD13（±），可有CD2表達(dá)。

5/9/202435流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用M4與M5：兩型表型相似，CD34（＋）M4>M5FSS和SSC，CD45－SSC

M4與M5>M0、M1，CD13、CD33、HLA－DR、CD14和CD15，CD33>CD13，CD33（＋）(重要的表型)M5:CD13（－）、CD34（－），

CD56（＋）(部分)。

5/9/202436流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用M6：

HLA－DR，CD34、CD13、CD33陽性，

CD45－SSC圖顯示主要為紅系成份。M7：1）CD61（GpⅢa）和/或CD41（GpⅡb-Ⅲa）陽性。2）GpⅡb/Ⅲa與CD34以減少激活血小板的粘附。5/9/202437流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用M65/9/202438流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用5/9/202439流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用2．ALL：ALL：兒童中最常見的惡性腫瘤，約占全部腫瘤的25％在成人，ALL約占急性白血病的25％。ALL分為：B祖細(xì)胞型，CD10＋或CD10－，前B細(xì)胞型，B細(xì)胞型，T細(xì)胞型。

5/9/202440流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用5/9/202441流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用B祖細(xì)胞型ALL：在幼兒約占ALL的65％～70％，青少年為55％～60％，成人為50％。在兒童：CD10＋（約90％），在幼兒：CD10＋（<50％），blasts一般FSC、SSC很少，F(xiàn)AB：L1或L2，一般TdT(+)HLA-DR(+)，CD19(+)，為2個亞型：CD10＋和CD10－，前者預(yù)后好，多數(shù)CD24＋，CD34＋，CD20表達(dá)隨成熟度增加而增加，B祖細(xì)胞被定義為sIg-。5/9/202442流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用前B細(xì)胞型ALL兒童ALL的25％，細(xì)胞一般為CD19＋，CD24，HLA－DR＋，胞漿CD22＋，CD10＋，TdT隨CD20變化，CD34多為陰性，前B亞型被認(rèn)為比B祖型預(yù)后更差，t(1；19)出現(xiàn)相關(guān)并由此產(chǎn)生E2A－PBX1融合蛋白，表型為CD19＋、CD10＋、CD9＋，不同程度CD20表達(dá)，CD34－確認(rèn)此表型有助于診斷基因上不確定的病例。

5/9/202443流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用B細(xì)胞型ALL：

占ALL2％~5％，有更大的FSC和SSC，表型為CD19、CD20、CD22、CD24且sIg（多數(shù)為IGM）（FAB標(biāo)準(zhǔn)的L3）CD10＋（多數(shù)病例）。但成熟抗原及sIg使之區(qū)別于更早的B系A(chǔ)LL，極少數(shù)成熟B細(xì)胞ALL無FAB－L3形態(tài)。

5/9/202444流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用5/9/202445流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用T－ALL出現(xiàn)在淋系未成熟細(xì)胞和髓系未成熟細(xì)胞或單核細(xì)胞區(qū)，表現(xiàn)為胸腺亞型。1、CD1、CD2、CD5、CD7、CD4/CD8雙陽與極少膜表面CD3、TdT多為陽性。2、早期表達(dá)CD2、CD5、CD7、TdT強(qiáng)表達(dá)。3、髓質(zhì)期亞型表達(dá)CD2、CD5、CD7、與CD3＋CD4＋/CD3+CD8+,很少見TdT表達(dá)。4、前T細(xì)胞亞型，表達(dá)CD7胞漿CD3＋且無其它T細(xì)胞抗原5、特征是喪失T細(xì)胞抗原而表現(xiàn)出其它異?？乖M合。5/9/202446流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用5/9/202447流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用雜合型白血?。喊l(fā)現(xiàn)許多病例并不能嚴(yán)格劃分為淋系或髓系。真正雙表型病人多為t(9；22)或（11q23）。雜合型的誤診率很高。最重要的系特異性抗原在B系、T系、髓系CD22、CD3和MPO。

5/9/202448流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用5/9/202449流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用3．CML：

在CD45－SSC圖上除了髓系細(xì)胞占主導(dǎo)外，只顯示一個正常骨髓像，CML可確診。CML起病與發(fā)展相對緩慢，慢性期的持續(xù)1年左右最終發(fā)展為加速期和急變期。流式細(xì)胞技術(shù)對急變期亞型的診斷具有極高價值。直接影響到治療效果。

5/9/202450流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用急變期CML主要表現(xiàn)為髓系，偶為淋系，髓性急變可表現(xiàn)出多種形態(tài)包括未分化細(xì)胞。淋性急變具典型形態(tài)特征，為CD10＋B祖細(xì)胞ALL極少有T細(xì)胞型ALL。5/9/202451流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用CLLCLL細(xì)胞主要為較正常淋巴細(xì)胞稍大的小淋巴細(xì)胞。免疫分型主要為：SIgM、SIgD弱表達(dá)，B系抗原為CD19、CD20、CD43、CD79a與CD5共表達(dá)，CD23CLL（CLL：CD23＋，MCL：CD23－）

、毛細(xì)胞淋巴癌MU，CD10－、CD23－、CD11c和CD25、CD20常弱表達(dá)CLL起病慢，有染色體異常的病預(yù)后不良，最常見的三聯(lián)體trisony12、14q、13q、11q，三聯(lián)體trisony12與SIg、CD20表達(dá)量高度相關(guān)，與CD23－相關(guān)與FMC7相關(guān)。

5/9/202452流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用B型前淋巴細(xì)胞白血?。˙－PLL）流式細(xì)胞技術(shù)在區(qū)分B－PLL和CLL上發(fā)揮很大作用，B－PLL：多為CD5－，CD22＋，表達(dá)更強(qiáng)的sig。CLL：CD5＋，CD22－，Sig：B－PLL>CLL。

CLL：CD5、FMC7、CD22與SIg，CD20異常強(qiáng)表表達(dá)的病例我們要考慮是否為PLL、MCC或CLL的亞型（trisomy12）因?yàn)樗鼈兾ｋU性更大。

5/9/202453流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用流式細(xì)胞儀免疫分型實(shí)驗(yàn)

1．樣本采集、運(yùn)輸、保存和操作

⑴樣本類型：外周血、骨髓穿刺液、骨髓活檢物、淋巴樣組織活檢物、漿液、腦脊液、皮膚、黏膜（內(nèi)窺鏡活檢物）、細(xì)針穿刺物等等。

5/9/202454流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用⑵抗凝劑的選擇：外周血標(biāo)本可采用EDTA或肝素抗凝。骨髓穿刺可用肝素。其他體液用EDTA、或肝素均可，（EDTA的優(yōu)點(diǎn)是成熟髓性細(xì)胞貼壁造成的損失及血小板聚集較小，但細(xì)胞散射光特征丟失較肝素標(biāo)本快）；⑶樣本的保存：樣本的完整性和細(xì)胞活性與抗凝劑的選擇、運(yùn)輸、保存和溫度息息相關(guān)。

5/9/202455流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用理想狀態(tài)下，樣本應(yīng)在采集后立刻進(jìn)行處理和染色。

短期保存（1小時或更短）應(yīng)在室溫(18-22℃);

長時間保存血或骨髓標(biāo)本室溫即可，部分4℃為佳。

標(biāo)本保存的時間上限取決于標(biāo)本類型及其保存條件：

肝素（血和骨髓）48-72小時；

EDTA（血和骨髓）12－24小時。

對于只做胞內(nèi)染色的樣本，可固定細(xì)胞以長期保存。（固定方法取決于要分析的抗原特性和染色方式，采用之前一定要進(jìn)行新鮮標(biāo)本的對照和驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)。）5/9/202456流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用2．樣本制備

⑴單細(xì)胞懸液的制備

①血和骨髓：天然單細(xì)胞懸液。當(dāng)有血凝塊時，應(yīng)用50um尼龍網(wǎng)過濾，同時進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)和血涂片以判斷靶細(xì)胞群體是否仍然存在。

②組織塊：機(jī)械分離和酶分離兩種方法。分離不僅是要獲得最大產(chǎn)量的單細(xì)胞懸液還要盡量保證細(xì)胞結(jié)構(gòu)的完整性和抗原性。5/9/202457流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用⑵分離靶細(xì)胞群體

兩種方法：

①紅細(xì)胞裂解：較佳。操作簡單、快、并最可能保持原始標(biāo)本的白細(xì)胞分布。（最好在染色后溶血在染色前溶血，需確認(rèn)：抗原性不被溶血過程改變，所用溶血劑不含固定劑）②度梯度離心：白血病細(xì)胞回收較好并可能得到富集，同時去除死細(xì)胞。（防止靶細(xì)胞的丟失。）

5/9/202458流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用⑶估細(xì)胞懸液

①樣本外觀：有嚴(yán)重溶血和血凝塊的標(biāo)本可能會有白細(xì)胞的損壞以及細(xì)胞亞群的丟失或改變，應(yīng)棄用。

②細(xì)胞丟失和分布：確認(rèn)細(xì)胞形態(tài)和原始標(biāo)本相似。密度梯度離心之后更應(yīng)檢查細(xì)胞分布?？勺鲅科袛?。③細(xì)胞計(jì)數(shù)和濃度調(diào)整：廠家推薦的抗體濃度通常是假定靶細(xì)胞數(shù)量在正常范圍內(nèi)(500,000-1,000,000／testAb)。白細(xì)胞數(shù)量上的顯著變化會帶來染色模式的變化。5/9/202459流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用④細(xì)胞活性：死細(xì)胞對許多抗體有非特異性染色。通過染色，活細(xì)胞將拒染這些染料。通過設(shè)門，可得到活細(xì)胞的染色特性。（尤其適用于高度壞死的樣本。）5/9/202460流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用⑷細(xì)胞染色

①細(xì)胞表面染色：免疫分型的抗原多在細(xì)胞膜上。（許多抗原也同時存在細(xì)胞內(nèi)，注意保持細(xì)胞膜的完整以保證檢測的特異性。例如免疫球蛋白重鏈在細(xì)胞內(nèi)和表面的存在有著不同的意義，檢測表面標(biāo)記必須是未固定的活細(xì)胞。）②細(xì)胞內(nèi)染色：有些胞內(nèi)異性抗原的檢測對白血病的免疫分型尤為重要，（如TdT,MPO,cCD3,cCD22,以及胞漿內(nèi)Ig的表達(dá)。胞內(nèi)染色的關(guān)鍵是使細(xì)胞膜通透。）

③胞膜和胞內(nèi)的同時染色：通常，先胞膜染色，固定，膜通透和胞內(nèi)染色，最后是DNA染色。（如，用于表面標(biāo)記的熒光素應(yīng)不被隨后的固定和通透步驟所影響，而對于胞內(nèi)染色，所用的熒光素應(yīng)足夠小能穿透到胞膜內(nèi)。）5/9/202461流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用3.抗體組合的確定選擇抗體組合的技術(shù)性考慮：1）基于血液腫瘤的復(fù)雜性，提供一個通用的抗體選擇策略是不現(xiàn)實(shí)的。2）國際上迄今也沒有一致性的抗體組合。3）應(yīng)該意識到，沒有一個的抗體組合可以解決所有的臨床相關(guān)答案。4）一個局限性的小組合也可能影響對樣本的正確評估和分類。5）確認(rèn)細(xì)胞異常的能力與所用抗體的數(shù)量直接成正比。5/9/202462流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用⑴選擇抗體組合的基本原則如下1）所選的抗體組合應(yīng)足夠?qū)挘贵w的數(shù)量越多，檢測的靈敏度越高。2）抗體的選擇應(yīng)可以區(qū)分正常和異常細(xì)胞，正常細(xì)胞-內(nèi)參照，異常細(xì)胞的表達(dá)比例-準(zhǔn)確（如現(xiàn)在用CD45抗體來區(qū)分正常和幼稚細(xì)胞，此方法尤其在幼稚細(xì)胞含量少時更顯優(yōu)勢。）3）熒光強(qiáng)度和表位密度應(yīng)同時考慮。4）必要時用活性檢測排除死細(xì)胞較強(qiáng)的非特異性染色。（國外統(tǒng)計(jì)，約70%組織樣本和48%血或骨髓標(biāo)本有活性檢測結(jié)果）5）實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)了解所用抗體的反應(yīng)細(xì)胞譜，以及與特定熒光素結(jié)合后的染色模式。相同的CD編號的不同抗體可能有不同的結(jié)合模式。

5/9/202463流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用⑵常用的方案考慮1、大而全的抗體組合：全面了解抗原表達(dá)，無需額外染色，省時但費(fèi)用高。2、先用篩查試劑了解樣本的一般情況，再根據(jù)所得信息采用第二線特異性更高的抗體組。經(jīng)濟(jì)，但費(fèi)時，（只有約30%國外實(shí)驗(yàn)室采用此法。）3、選用有目標(biāo)性的抗體組合以確認(rèn)可疑的診斷或分類。5/9/202464流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用4.樣本獲取1、一般每個標(biāo)本應(yīng)獲取1-2x104個有核細(xì)胞的熒光和散射光信號，2、微小殘余病變分析則需5x104個細(xì)胞。3、惡性細(xì)胞常有較寬的大小及范圍，獲取時最好收集無門的數(shù)據(jù)以保留所有未知異常細(xì)胞群體的所有特性。4、免疫熒光信號要求對數(shù)放大和至少256的分辨率。（無論選擇對數(shù)或線性放大都要以保證異常細(xì)胞都能被檢測到。）5/9/202465流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用5.數(shù)據(jù)分析

1、多參數(shù)分析，（采用的參數(shù)越多，分析步驟越復(fù)雜，流式免疫分型的靈敏度越高。）

2、最少的要求應(yīng)是4個參數(shù)（2個光散射和2個熒光參數(shù)）。

5/9/202466流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用

分析技術(shù)：數(shù)據(jù)的分析方式隨樣本的特性、抗體組合及臨床情況的不同而變化?？偟脑瓌t：用多參數(shù)的數(shù)據(jù)可以區(qū)分正常和異常細(xì)胞的圖形，如FSCvs.SSC,FLvs.FL,等，散射光與熒光參數(shù)的綜合分析常常能提供有效的信息。

5/9/202467流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用

分析步驟：1、首先分析所有細(xì)胞的抗原表達(dá)情況，鑒別出正常細(xì)胞和異常細(xì)胞群體。2、正常細(xì)胞的表現(xiàn)可以作為整個實(shí)驗(yàn)染色過程的內(nèi)部參照，提供實(shí)驗(yàn)一致性與否的客觀證據(jù)。3、異常細(xì)胞則通過進(jìn)一步設(shè)門分析確定表型特點(diǎn)。5/9/202468流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用設(shè)門1、選擇特殊的細(xì)胞群體分析各個參數(shù)，把分析局限在門內(nèi)的細(xì)胞群體。2、不同疾病的設(shè)門策略亦不同，常用的FSCvs.SSC的設(shè)門方式在急性白血病中，CD45和SSC的雙參數(shù)顯示是鑒別幼稚細(xì)胞的一個簡單而有效的方法；在B細(xì)胞淋巴瘤中用一個全B細(xì)胞的抗體設(shè)門來看抗κ鏈和抗λ鏈的表現(xiàn)；在T細(xì)胞淋巴瘤時用一個全T細(xì)胞抗體設(shè)門使腫瘤細(xì)胞的分型更加明確。通過CD14vs.CD45的雙參數(shù)分析區(qū)分多個區(qū)域的淋巴、單核和粒細(xì)胞群體。

5/9/202469流式技術(shù)在白血病診斷的應(yīng)用分析異常細(xì)胞群體1、確定異常細(xì)胞群體后要進(jìn)一步分析其免疫分型。分析抗原表達(dá)要注意：定性的描述（陽性或陰性）只有在設(shè)門內(nèi)細(xì)胞全部是感興趣的細(xì)胞而且熒光分布的形狀可以非常清楚地區(qū)分陽性和陰性亞群的情況下，陽性百分率才有意義。某些抗原異質(zhì)表達(dá)的群體中，可進(jìn)行定性