臨床生化標(biāo)準(zhǔn)操作程序文件（臨床生化檢驗(yàn)SOP文件）　

臨床生化標(biāo)準(zhǔn)操作程序文件

（臨床生化檢驗(yàn)SOP文件）

山東德棉職工醫(yī)院檢驗(yàn)科

CS600B全自動生化分析儀

標(biāo)準(zhǔn)化操作程序文件

單位：山東德棉職工醫(yī)院

科室:檢驗(yàn)科生化室

文件編號：

版本：

批準(zhǔn)施日期：

有校期：一年

復(fù)審計(jì)劃：每年復(fù)審，測定系統(tǒng)變化時(shí)需進(jìn)行修訂

發(fā)放部門：檢驗(yàn)科生化室

編寫者：鞏建剛

審批者：

保管者：

修訂者：

CS-600B全自動生化分析儀

標(biāo)準(zhǔn)化操作程序文件

【儀器運(yùn)行條件】

為保證儀器的正常運(yùn)行，儀器必須滿足下列條件：

1.灰塵少、通風(fēng)良好的環(huán)境，避免陽光直接照射。

2.地面水00）,地面強(qiáng)度要能夠承受儀器的重量（850kg）。

3.室內(nèi)溫度保持在15~32℃,溫度變化不超過±3℃/小時(shí).

4.室內(nèi)相對濕度應(yīng)保持在45~85℃,且不結(jié)露。

5.純水供應(yīng)：反滲水或離子交換水。出水量：40升/小時(shí)，水壓：0.5~3.5kg/cm2。

6.電源供應(yīng)：220V±10%,50-60Hz,最大功率4KVA。有保10Q下）。7.放置本儀器的房間

請不要帶入以下電器：手機(jī)、對講機(jī)等發(fā)出特定電磁波的小功率電器。

【開機(jī)程序】

1）開機(jī)前檢查

1.供電系統(tǒng)（包括UPS）是否正常。

2.供水系統(tǒng)是否正常。

3.檢查樣品針、試劑針、攪拌針、清洗針是否有彎曲、堵塞、污物、漏水等，如有上述情

況發(fā)生，參照儀器維護(hù)、保養(yǎng)說明書處理。

4.檢查清洗液（迪瑞原廠供應(yīng)），包括樣品針、攪拌針、去污劑箱及試劑位45（抗菌無磷）

和45位（堿性）各種清洗液，必要時(shí)補(bǔ)足。

5.檢查打印機(jī)是否正常、打印紙是否安裝好及是否聯(lián)機(jī)（打印機(jī)上Online燈亮）。

6.儀器及操作臺面表面干凈、無污物，機(jī)房空調(diào)正常開啟。

2）開機(jī)

為保證試劑艙的冷藏作用，位于儀器右后下方的總電源（ON）可長期處于開啟狀態(tài)，同時(shí)

UPS長期處于工作狀態(tài)。

1.打開儀器右側(cè)電源（ON）開關(guān)，記錄開機(jī)時(shí)間。

2.待儀器自檢及程序裝載（15分鐘）結(jié)束，儀器至備用（Ready）狀態(tài)，如有錯(cuò)誤（Tr

ouble），根據(jù)錯(cuò)誤代碼查找維護(hù)保養(yǎng)說明書檢查原因，及時(shí)處理。

3.自動開機(jī)在自動開機(jī)程序中設(shè)置開機(jī)時(shí)間：

MAINMENUF5:DEFINEF6：DEFINEOPTIONALPARAMETERS

F2：FORAUTOMATICSTARTUPCONDITION

3）執(zhí)行開機(jī)程序Startup1或Startup2

開機(jī)程序設(shè)置：

MAINMENUF5：DEFINEF6：DEFINEOPTIONALPARAMETERS

F3：FORSTARTUP1或F4：FORSTARTUP2

開機(jī)程序至少應(yīng)包括：

1.更換儀器內(nèi)水箱純水一次。

2.更換孵育槽內(nèi)純水一次。

3.清洗管道3次。

4.清洗液清洗探針3次。

5.純水清洗探針3次。

6.清洗比色杯（酸、堿、水）。

7.測定水空白。

8.根據(jù)具體試劑空白變化情況設(shè)定試劑空白檢查周期。

9.檢查剩余試劑體積。

四、根據(jù)檢查剩余試劑體積及當(dāng)日工作量，及時(shí)補(bǔ)足當(dāng)日工作所需試劑量。

五、自動開機(jī)在自動開機(jī)程序中設(shè)置每日開機(jī)條件（同上）：

MAINMENUF5：DEFINEF6：DEFINEOPTIONALPARAMETERS

F2：FORAUTOMATICSTARTUPCONDITION

【校準(zhǔn)程序】

1.校準(zhǔn)物的準(zhǔn)備

將校準(zhǔn)物從冰箱取出，凍干校準(zhǔn)物按說明書加入蒸儲水復(fù)溶，輕輕顛倒混勻3次，不可用

力震搖，室溫放置30分鐘至完全溶解；液體校準(zhǔn)物從冰箱取出，室溫放置15分鐘以平衡

至室溫。校準(zhǔn)物的選擇盡可能選擇配套儀器廠家校準(zhǔn)品。

2.上機(jī)校準(zhǔn)程序

[1]MAINMENUFl:WORKLISTF1：ENTER+右空格鍵F4：DEFINECALIBRATIONF1：

WORKLIST1

⑵用光標(biāo)鍵選欲校準(zhǔn)項(xiàng)目，用“SELECT”鍵選擇“1”（試劑空白）及“2”（校準(zhǔn)），F(xiàn)5:

ENTERo

⑶將校準(zhǔn)品按屏幕顯示放入綠色校準(zhǔn)架相應(yīng)位置，將校準(zhǔn)架置入進(jìn)樣軌道，打開進(jìn)樣架

（FEED）o

【質(zhì)控程序】

1.質(zhì)控物的準(zhǔn)備

將質(zhì)控物從冰箱取出，凍干質(zhì)控物按說明書加入蒸鏘水復(fù)溶，輕輕顛倒混勻3次，不可用

力震搖，室溫放置30分鐘至完全溶解；液體校準(zhǔn)物從冰箱取出，室溫放置15分鐘以平衡

至室溫。至少有兩水平質(zhì)控品，8小時(shí)一次。質(zhì)控物的選擇盡可能選擇配套儀器廠家及人

血清基質(zhì)質(zhì)控材料。

2.上機(jī)質(zhì)控程序

[1]MAINMENUFl：WORKL1STFl：ENTER+右空格鍵F4：DEFINECONTROLFl：

WORKLIST1

[2]用光標(biāo)鍵及SELECT鍵選擇質(zhì)控項(xiàng)目，F(xiàn)5:ENTER。

[3]將質(zhì)控品按屏幕顯示放入黃色質(zhì)控架相應(yīng)位置，將質(zhì)控架置入進(jìn)樣軌道，打開進(jìn)樣架

（FEED）。質(zhì)控在控方可進(jìn)行標(biāo)本檢測。

【標(biāo)本檢測程序】

1.輸入標(biāo)本編號及測定項(xiàng)目：

MAINMENUFl：WORKLISTFl：ENTERFl：TESTS

[1]輸入順序號(REQUESTNO)及樣本編號(PATIENTIDNO)。

⑵輸入檢測項(xiàng)目通道號或組合分析(PROFILE)代碼

[3]F5：ENTER?

2.編輯標(biāo)本架號(COMPILE)：

[1]MAINMENUF1：WORKLISTF2：COMPILEFl：BYPATIENTS

[2]輸入起始順序號(REQUESTNO,FROM),終止順序號(REQUESTNO,TO),ROUTINE

(1),開始架號(STARTINGRACKNO)。

[3]F5：ENTER,,

3.將分離好的血清或血漿標(biāo)本置入設(shè)置好的灰色樣品架上，注意樣本不可有凝塊，樣本量

不可少于0.2ml。

4.打開進(jìn)樣架(FEED)?

5.測試完畢，執(zhí)行關(guān)機(jī)程序(SHUTDOWN)或設(shè)置自動關(guān)機(jī)。

【關(guān)機(jī)程序】

1.作好各種工作記錄登記：當(dāng)日工作量登記表，當(dāng)日校準(zhǔn)登記表，室內(nèi)質(zhì)控登記表，儀器

維護(hù)保養(yǎng)登記表。

2.執(zhí)行關(guān)機(jī)程序Shut-down

關(guān)機(jī)程序設(shè)置：

MAINMENUF5：DEFINEF6：DEFINEOPTIONALPARAMETERSF5：FORSHUTDOWN

關(guān)機(jī)程序至少應(yīng)包括：

⑴清洗管道3次。

[2]清洗液清洗探針3次。

[3]純水清洗探針3次。

[4]清洗比色杯(酸、堿、水)。

⑸測定水空白。

[6]檢查剩余試劑體積。

3.自動關(guān)機(jī)在自動關(guān)機(jī)程序中設(shè)置每日關(guān)機(jī)條件(同上)：

MAINMENUF5:DEFINEF6:DEFINEOPTIONALPARAMETERS

F2：FORAUTOMATICSTARTUPCONDITION

4.關(guān)機(jī)后維護(hù)

[1]清擦樣品針、試劑針、攪拌針、清洗針。

[2]檢查清洗液(Shimadzu原廠供應(yīng))，包括樣品針、攪拌針、去污劑箱及試劑位31

(ACID)和32位(ALKLI)各種清洗液,必要時(shí)補(bǔ)足。

[3]關(guān)閉水處理電源。

⑷記錄關(guān)機(jī)時(shí)間。

⑸及時(shí)補(bǔ)足次日工作所需試劑量。

[6]清潔儀器及操作臺面。

⑺關(guān)閉機(jī)房空調(diào)。

【維護(hù)保養(yǎng)程序】

1.日保養(yǎng)

田檢查去污劑箱清洗液(NEWCLEAN,8%)液面，及時(shí)更換。

[2]更換樣品針清洗液(NEWALKLI,5%)。

[3]更換攪拌針清洗液(NEWALKLI,5%)。

⑷更換去離子水箱純水。

⑸更換孵育槽純水。

標(biāo)本的接收與拒收

標(biāo)準(zhǔn)化操作程序文件

單位：山東德棉職工醫(yī)院

科室:檢驗(yàn)科生化室

文件編號：

版本：

批準(zhǔn)施日期：

有校期:一年

復(fù)審計(jì)劃：每年復(fù)審，測定系統(tǒng)變化時(shí)需進(jìn)行修訂

發(fā)放部門：檢驗(yàn)科生化室

編寫者：鞏建剛

審批者：

保管者：

修訂者：

標(biāo)本的接收與拒收

1病人的準(zhǔn)備

做血液檢驗(yàn)項(xiàng)目檢驗(yàn)的病人，一般要求采血前禁食12~14小時(shí)，采血的前一天避免吃高脂

肪、高蛋白類食物，避免飲酒。否則，會引起血脂及某些血清酶結(jié)果升高，甚至血清出現(xiàn)

混濁，影響整個(gè)檢驗(yàn)結(jié)果；進(jìn)行葡萄糖耐量試驗(yàn)的病人，在試驗(yàn)前3天給予適量的碳水化

學(xué)物飲食，有利于取得正確的結(jié)果；做碘131吸收試驗(yàn)者，在試驗(yàn)前一個(gè)月停服一切含碘

的藥物和含碘豐富的食物，如海產(chǎn)品類。

2采血時(shí)間

血液生化檢驗(yàn)一般要求早晨空腹安靜時(shí)采血。因?yàn)轶w內(nèi)的各種化學(xué)成份受許多因素調(diào)節(jié)：

如飲食后大量葡萄糖及脂類物質(zhì)吸收入血，使血糖和血脂上升，游離脂肪酸及無機(jī)磷降

低；運(yùn)動后會使乳酸、丙酮酸、乳酸脫氫酶、轉(zhuǎn)氨酶、肌酸激酶等升高，血糖降低；晝夜

變化大的成份有皮質(zhì)醇、血清鐵、膽紅素等；日間變化大的主要是代謝廢物成份如尿素、

尿酸等；大量飲水可致血液稀釋等等。所以，做血液生化檢驗(yàn)時(shí)應(yīng)掌握好采血時(shí)間。但是,

對重癥昏迷或急癥病例，可隨時(shí)采血送檢糖、鉀、鈉、鈣、血?dú)夥治?、淀粉酶等?xiàng)目。但

在輸液時(shí)采血應(yīng)避免送檢項(xiàng)目受輸液成份的影響，如輸液中補(bǔ)鉀、補(bǔ)糖、補(bǔ)磴時(shí)送檢，對

血鉀、血糖、二氧化碳結(jié)合力等項(xiàng)目均有影響。

3采血部位

成人一般取肘部靜脈，肥胖者可用腕背靜脈；嬰兒常用頸部靜脈、股動脈或前鹵靜脈竇；

剛出生的嬰兒可收集臍帶血；尸體解剖者取心臟血；血?dú)夥治鲆话悴蓜用}血；檢驗(yàn)只需微

量全血時(shí)，成人從耳垂或指尖取血，嬰兒從大腳趾或腳跟取血；輸液病人采血應(yīng)避免在輸

液的同一側(cè)上肢或下肢采血，燒傷患者采血應(yīng)避免穿剌炎癥或水腫部，以免影響結(jié)果。

4采血操作及送檢的注意事項(xiàng)

4.1采血器械：采血用的注射器、試管必須干燥清潔。注射器及針頭不宜用酒精消毒。目

前多用一次性注射器及試管。

4.2采血操作：必須按無菌操作，采血部位皮膚必須干燥，止血帶不可縛扎過久，抽血時(shí)

速度不可過快，以免血細(xì)胞破裂，采血后應(yīng)卸下針頭再將血液沿管壁徐徐注入試管內(nèi)。

4.3防止氣體逸散：采集血?dú)夥治鰳颖荆檠獣r(shí)注射器內(nèi)不能有空泡，抽出后立即用小橡

皮密封針頭，隔絕空氣。因空氣中的氧分壓高于動脈血，二氧化碳分壓低于動脈血；作二

氧化碳結(jié)力測定時(shí)，盛血標(biāo)本的容器亦應(yīng)加塞蓋緊，避免血液與空氣接觸過久，影響檢驗(yàn)

結(jié)果。

4.4防止分解及自身變化：采血后應(yīng)盡快送檢。因血液中有些化學(xué)成份于離體后極易分解,

使其含量改變，如血糖及酶類測定，時(shí)間過久，血細(xì)胞酵解可使血糖下降，醐活力變化等。

有些化學(xué)成份在細(xì)胞內(nèi)外相差懸株，離體時(shí)間過長，細(xì)胞內(nèi)外濃度會發(fā)生變化，影響測定

結(jié)果。如肌酸激酶、乳酸脫氫酶、電解質(zhì)等。

4.5防止污染：有些檢查項(xiàng)目要求極嚴(yán)格，其采血器具及標(biāo)本容器必須經(jīng)過化學(xué)清潔。如

血氨、銅、鋅、鐵等項(xiàng)目，因其含量極低，稍有污染即影響結(jié)果。作淀粉能測定時(shí)，要防

止唾液污染，因唾液中含有大量的淀粉酶，污染后會引起假性淀粉酶升高。

4.6防止溶血：作各類生化檢驗(yàn)，要防止血細(xì)胞破裂溶血，因溶血引起細(xì)胞內(nèi)外濃度改變,

可使鉀、膽紅素、氯化物、無機(jī)磷、ALT、AST、LDH等升高，鈉、鈣、AKP等降低，溶

血對某些實(shí)驗(yàn)的反應(yīng)過程干擾：如血紅蛋白可直接抑制脂肪酶的活性，使脂肪醐降低。溶

血可影響呈色反應(yīng)終點(diǎn)為紅色的實(shí)驗(yàn)，如酶法測定血糖、膽固醇、甘油三酯、膽紅素的重

氮反應(yīng)、尿素的二乙酰月虧法等。

5抗凝劑的選擇

生化檢驗(yàn)大部份項(xiàng)目都采用血清，但有些項(xiàng)目需用血漿或全血，采集的血液必須加入抗凝

劑?？鼓齽┑姆N類較多，如選擇不當(dāng)，亦會影響檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。下面介紹幾種生化檢

驗(yàn)常用的抗凝劑及其用途：

5.1草酸鉀：常用于尿素、肌酊、纖維蛋白原等測定，不能用鉀、鈣等測定，對LDH、丙

酮酸激酶、AKP和淀粉酶有抑制作用。

5.2肝素：常用于電解質(zhì)、血?dú)夥治?、血氨等測定。其鈉鹽可使淀粉酶升高。

5.3氟化鈉：常用氟化鈉一草酸鈉混合抗凝劑作血糖測定的抗凝劑，它可抑制血細(xì)胞葡萄

糖酵解酶的作用，延長標(biāo)本的保存時(shí)間。

5.4二乙胺四乙酸鈉鹽（EDTA-Na2）：生化常用的抗凝劑，但不能用于鈣、鈉、及含氮物

質(zhì)的測定，對淀粉酶、肌酸激酶、AKP、ACP、5'-核甘酸酶等可抑制，對丙酮酸激酶有明

顯升高的作用。

正確的血液收集方法

采集步驟：

查看檢驗(yàn)單，詢問病史，查對檢驗(yàn)單上病人姓名、性別、年齡等項(xiàng)目與病人是否吻合，耐

心檢查需要空腹血檢驗(yàn)項(xiàng)目要詢問病人是否8小時(shí)以內(nèi)沒有能量攝入，詢問病人在檢驗(yàn)前

是否有足夠的休息；需要增添項(xiàng)目時(shí)先與出具檢驗(yàn)申請單的醫(yī)生聯(lián)系。

請患者準(zhǔn)備。（“請將左手衣袖挽起，手伸直平放，拳頭握緊J）對孩子應(yīng)多哄勸，避免劇

烈躁動、哭鬧。對于緊張或有暈血史的病人要進(jìn)行安慰（“您可以側(cè)過身去，不看很快會

好”）。

采血器材準(zhǔn)備，選擇相應(yīng)的真空采血管；并記錄采集時(shí)間。

選擇穿刺血管：扎好壓脈帶，觀察血管走向，選擇穿刺點(diǎn)，松開壓脈帶（壓脈帶壓迫時(shí)間

不能超過1分鐘），正在輸液的病人絕對不可同側(cè)采血，更不可以利用原有的輸液針頭采

血。

消毒：以穿刺點(diǎn)為圓心，用蘸有碘伏的棉簽由內(nèi)到外螺旋型涂抹，消毒范圍為直徑大約

3厘米，注意消毒過的地方不能重復(fù)涂抹，在涂抹的過程中棉簽必須也要同時(shí)旋轉(zhuǎn)。

采樣及混勻：等待碘伏干了以后（必須等到干了以后，否則達(dá)不到消毒效果），再次扎好

壓脈帶，將針頭平面朝上與手臂成15°穿刺，最好一針見血。拔出采血管后立即進(jìn)行顛倒

8次混勻。在抽血時(shí)要詢問病人感受（如有無心慌，頭暈等情況），當(dāng)出現(xiàn)異常時(shí)如：？病

人出汗、面色蒼白、暈倒時(shí)立即拔出針并急救?操作失敗，取得病人諒解，再次進(jìn)行操作

（“對不起，由于……的原因需要再取一次血，請?jiān)彙保?。采樣盡量在1分鐘內(nèi)完成。

止血：采血結(jié)束后，解開壓脈帶，退針后請病人“手指壓住棉球，手伸直抬高于心臟，保

持兩分鐘”（如果是有出血傾向患者如紫瘢，ITP,血液病等要壓迫5?10分鐘直到無血滲

出）。

標(biāo)本前處理：將采血管與相應(yīng)的檢驗(yàn)單裹好，分類，盡快送檢驗(yàn)項(xiàng)目所對應(yīng)的采血管：

1.生化檢驗(yàn)黃頭管

2.凝血試驗(yàn)藍(lán)頭管

3.血常規(guī)紫頭管

采血順序：紅頭管一藍(lán)頭管一紫頭管一黃頭管，注：除紅頭管外，其他各種采血管均須顛

倒混勻8次。

以下檢驗(yàn)項(xiàng)目須特別注意

1.所有生化項(xiàng)目、微量元素、血沉必須用空腹血；乙肝三對最好用空腹血。

2.糖耐量試驗(yàn)：（方法一）空腹抽血一吃飯（3分鐘內(nèi)進(jìn)食75克葡萄糖或二兩饅頭一個(gè)）一

飯后30分鐘抽血一飯后60分鐘抽血一飯后120分鐘抽血

（方法二）空腹抽血f吃飯（3分鐘內(nèi)進(jìn)食50克葡萄糖）一飯后60分鐘抽血注：血糖正

常的人吃葡萄糖，高血糖的人吃饅頭.

3.激素檢查：病人必須空腹且在抽血前要靜坐30分鐘，激素全套要抽血5ml。

臨床化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本的采集和處理

臨床檢驗(yàn)的目的是為臨床提供準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)診斷依據(jù)。為了保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性，在

檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中必須堅(jiān)持全面質(zhì)量控制（totalqualitycontrol,TQC?即指對影響臨床檢驗(yàn)結(jié)果可

靠性的各方面因素及各個(gè)環(huán)節(jié)進(jìn)行質(zhì)量控制）和全過程質(zhì)量控制（即指對實(shí)驗(yàn)工作的全過

程進(jìn)行質(zhì)量控制和質(zhì)量管理）.全過程質(zhì)量控制包括實(shí)驗(yàn)前（分析前）、實(shí)驗(yàn)中（分析中）

和實(shí)驗(yàn)后（分析后）三個(gè)階段的質(zhì)量控制。在實(shí)驗(yàn)誤差中實(shí)驗(yàn)前誤差占70%,因而實(shí)驗(yàn)前

質(zhì)量保證對減少實(shí)驗(yàn)誤差顯得尤其重要。

實(shí)驗(yàn)前質(zhì)量保證包括病人準(zhǔn)備、標(biāo)本收集、處理、貯存和運(yùn)輸?shù)?，因而能否正確地、規(guī)范

化地采集和處理標(biāo)本，是能否做到實(shí)驗(yàn)前質(zhì)量保證的重要內(nèi)容。在臨床化學(xué)檢驗(yàn)中，血液

標(biāo)本是最多應(yīng)用的生物體液，血液標(biāo)本因素是影響臨床化學(xué)分析準(zhǔn)確性和可靠性的最重要、

最直接的因素。我國從我們的國情出發(fā)，參考了美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會（NCCLS）

的有關(guān)規(guī)定，對臨床化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本的有關(guān)問題也提出了相應(yīng)的要求。我國衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)技

術(shù)委員會臨床檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)專業(yè)委員會（CCCLS）已對“臨床化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本的收集與處理”

提出了“中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)”，旨在通過標(biāo)本方面的質(zhì)量控制達(dá)到臨床化學(xué)分析

的質(zhì)量保證。目前該“標(biāo)準(zhǔn)”文件正在待批中。

一、臨床化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本的定義

臨床化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本是指為完成某項(xiàng)或多項(xiàng)臨床化學(xué)檢驗(yàn)項(xiàng)目而采集的一定量的血液，

包括抗凝及非抗凝血。

二、血液標(biāo)本的采取

（-）采取部位

1?靜脈采血：應(yīng)用最多的采血方式。常用的靜脈為肘前靜脈、腕背靜脈，小兒和新生兒

有時(shí)用頸靜脈和前囪靜脈。

2.動脈采血：主要用于血?dú)夥治鰰r(shí)。常用的動脈為股動脈、肱動脈、槎動脈和臍動脈。

3.毛細(xì)血管采血：適用于僅需微量血液的試驗(yàn)或嬰幼兒。常用部位為耳垂、指端，小兒

有時(shí)為大趾和足跟。采血針刺入皮膚深.5mm）,采血局部應(yīng)無炎癥、水腫等。

（二）標(biāo)本類型

臨床化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本分為血清、血漿和全血3種。血清和血漿為臨床常用，除前者不含

纖維蛋白原外，其余多數(shù)化學(xué)成分無差異；全血只有在紅細(xì)胞內(nèi)成分與血漿成分相似時(shí)才

用；血?dú)夥治?、血紅蛋白電泳等時(shí)用全血，一般臨床化學(xué)分析多不用全血。

三、全血處理為血清或血漿

血液標(biāo)本采取后應(yīng)盡可能早地自然地使血清（漿）從與血細(xì)胞接觸的全血中分離出來。一

般應(yīng)于采血后2h內(nèi)分離出血清或血漿。全血處理為血清或血漿分為離心前、離心中和離

心后三個(gè)階段，對各不同階段均有具體要求。

（一）離心前階段

即指標(biāo)本采集到離心處理前的一段時(shí)間。

1.血清：標(biāo)本離心前一般應(yīng)令其自行凝集，不可用木棍等剝離凝血塊。通常于室溫

（22-25oC）放置30~60min血標(biāo)本可自發(fā)完全凝集；冷藏標(biāo)本凝集緩慢；加促凝劑時(shí)凝

集加快（標(biāo)本采集后應(yīng)輕輕顛倒混合5~10次，以確保促凝劑作用）。

2.血漿：需用血漿標(biāo)本時(shí)，必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，而且采血后必須立即

輕輕顛倒采血管混合5~10次（以確?？鼓齽┌l(fā)揮作用），5~10min后即可分離出血漿。

3.冷藏標(biāo)本：標(biāo)本冷藏可抑制細(xì)胞代謝，穩(wěn)定某些溫度依賴性成分

但全血標(biāo)本一般不能冷臧；血鉀測定標(biāo)本冷藏不得超過2h。血液中兒茶酚胺、pH/血

氣、氨、乳酸、丙酮酸、胃泌素、甲狀腺激素等檢測時(shí)需用制冷的標(biāo)本。

標(biāo)本需要冷藏（2~8oC）時(shí)，標(biāo)本采取后應(yīng)立即將標(biāo)本置于冰屑或冰水混合物（不可用大

冰塊），并且必須保證標(biāo)本與制冷物充分接觸，保證制冷物達(dá)到標(biāo)本的高度。

4.代謝抑制劑和防腐劑：某些添加劑加入血液標(biāo)本中能抑制細(xì)胞代謝，可以防止血液標(biāo)

本貯存時(shí)分析物濃度的變化。血液葡萄糖測定時(shí)，如在血液中加入氟化鈉，在血細(xì)胞未分

離的情況下，葡萄糖在22~250c時(shí)可穩(wěn)定24h,2~80c時(shí)可以穩(wěn)定48h；但在新生兒和兒

童標(biāo)本，由于紅細(xì)胞壓積高，用氟化鈉難以控制細(xì)胞的糖酵解作用；甲醛一草酸鉀抗凝保

存劑不適合血糖測定；氟化鈉一麝香草酚混合劑因能抑制酶活性，不適用于酶學(xué)測定。

5.標(biāo)本采集現(xiàn)場：⑴標(biāo)本采集后應(yīng)盡快送往實(shí)驗(yàn)室，尤其當(dāng)收集區(qū)溫度超過22oC時(shí)此

點(diǎn)更為重要；⑵血液標(biāo)本采集后血管必須加塞、管口向上、垂直放置，以減少管中內(nèi)容物

振動，促進(jìn)凝血完全，防止標(biāo)本蒸發(fā)、污染和外濺等；（3）已收集的血液標(biāo)本應(yīng)溫和地處理,

要防止標(biāo)本管振蕩所造成的溶血；溶血可影響測定結(jié)果。有嚴(yán)重影響（使結(jié)果升高）的項(xiàng)

目有：乳酸脫氫酶、血清門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、血清鉀和血紅蛋白；引起值得注意的影響

的項(xiàng)目有：血清鐵（t）、血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（t）和血清甲狀腺素（I）;輕度受影

響（增加）的有：總蛋白、白蛋白、血清磷、血清鎂、血清鈣和酸性磷酸酶；⑷應(yīng)避免對

光線敏感的分析物暴露在人造光或太陽光（紫外線）照射下。如VA、VB6、B—胡蘿卜

素、嚇咻、膽紅素等測定時(shí)，標(biāo)本管應(yīng)該用鋁箔或類似物質(zhì)包裹保護(hù)起來。

6.標(biāo)本運(yùn)送：全血標(biāo)本應(yīng)盡快從采血現(xiàn)場運(yùn)送至實(shí)驗(yàn)室，如果運(yùn)送距離較遠(yuǎn)，特別是因

分析物穩(wěn)定性有影響，必要時(shí)可于采血現(xiàn)場分離出血清或血漿后，再送往實(shí)驗(yàn)室；標(biāo)本運(yùn)

送過程中要注意標(biāo)本的包裝、溫度要求、處理方法等，要確保分析成分的穩(wěn)定性；標(biāo)本管

在運(yùn)送過程中要保持管口封閉、向上垂直放置。

7.實(shí)驗(yàn)室接受標(biāo)本及離心標(biāo)本準(zhǔn)備：⑴要有標(biāo)本收取記錄（應(yīng)認(rèn)真核對檢驗(yàn)中清單，對

有關(guān)情況要認(rèn)真記錄，標(biāo)本接收及處理應(yīng)簽字登記）；（2）對接受的標(biāo)本要予以分類準(zhǔn)備

離心；（3）實(shí)驗(yàn)室接受標(biāo)本后應(yīng)仍保持標(biāo)本管于密閉封口、管口向上，垂直位放置。管塞移

去后血中C02丟失，會造成pH增加，離子鈣和酸性磷酸酶減少，尤其PH變化會影響某

些檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性；⑷標(biāo)本凝集時(shí)間要充分；加抗凝劑的血液標(biāo)本可以立即離心；加促

凝劑的標(biāo)本可于采血后5~15min盡早離心；抗凝的全血標(biāo)本（鋅、鋰、原嚇琳等測定時(shí)）

可以不離心；⑸冷藏（2-8oC）標(biāo)本應(yīng)保持這個(gè)溫度直到準(zhǔn)備離心。推薦用溫度控制離心

機(jī)；（6）離心標(biāo)本前不主張用小木棒或類似器材去剝離附著于試管壁和管塞上的凝塊，人為

剝離會誘導(dǎo)溶血。如果必須露出試管壁或取下管塞時(shí)，一定要十分注意，動作一定要輕柔。

（二）離心階段

即指標(biāo)本處于離心機(jī)里的一段時(shí)間。

1.離心時(shí)間和相對離心力（RCF）：臨床化學(xué)分析血液標(biāo)本離心時(shí)，RCF（1000~1200）Xg,

離心時(shí)間為5~10min。

2.溫度控制離心：離心時(shí)產(chǎn)熱不利于分析物穩(wěn)定，臨床化學(xué)分析血液標(biāo)本離心時(shí)必須采

用溫度控制離心機(jī)。一些溫度依賴性分析物（如促腎上腺皮質(zhì)激素、環(huán)腺甘酸、兒茶酚

胺等）應(yīng)在40c分離；無特殊溫度要求的分析物，離心溫度應(yīng)設(shè)定在20oC~22℃；溫度低

于15oC可以人為地使血鉀測定值增高；冷藏運(yùn)送的標(biāo)本必須在要求的溫度下離心。

3.關(guān)于再離心：標(biāo)本離心最好一次完成，若需再次離心，應(yīng)距上次離心相隔時(shí)間很短；

對于含有分離物質(zhì)的血標(biāo)本絕不可以再離心。

（三）離心后階段

指標(biāo)本離心后和用于檢測的血清或血漿被取出一定量之前的一段時(shí)間。

1.血清或血漿與接觸的血細(xì)胞和凝塊的分離應(yīng)在采血后盡快（2h內(nèi)）完成。

2.分離的血清或血漿的貯存：實(shí)驗(yàn)室的室溫和血清或血漿的貯存溫度、時(shí)間，是分析物

穩(wěn)定性和測定結(jié)果準(zhǔn)確性的重要參數(shù)。⑴于22oC~25oC血清或血漿的保存不超過8h；⑵

實(shí)驗(yàn)于8h內(nèi)不能完成時(shí)，血清或血漿應(yīng)置2oC~80c保存；⑶48h內(nèi)不能完成的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目，

或分離的血清或血漿需貯存48h以上時(shí)，應(yīng)于-20oC保存；⑷標(biāo)本不可反復(fù)凍融（只能凍

融一次），且不可貯存于無霜冰箱（可造成樣品溫度變化）；⑸離心后分離凝膠（凝膠屏障）

上面的血清可保存2~5天，但必須保證凝膠的完整性；但應(yīng)用非凝膠分離物質(zhì)時(shí)，離心后

必須立即將血清或血漿移出。（6）血清或血漿必須保存于密閉的試管中。

四、血清或血漿分離物質(zhì)

是指將血清或血漿從全血中分離出來的物質(zhì)，包括凝膠物質(zhì)與非凝膠物質(zhì)。

（-）凝膠物質(zhì)

為一類具有特定粘度和特殊比重（介于血清或血漿與凝塊之間的比重）的惰性凝膠物質(zhì)，

用（1000~1100）XgRCF離心10min,能在血清或血漿與凝塊之間形成不可穿透的凝膠

屏障，從而將血清或血漿與其接觸的血細(xì)胞、凝塊分開。

（-）非凝膠物質(zhì)

是由惰性物質(zhì)（玻璃、塑料、纖維、毛氈等）構(gòu)成的小珠、盤、濾器、纖維塞等組成。具

有介于血清或血漿與凝塊之間的比重，將其輕輕加入血管中，用（1000~1100）XgRCF離

心10min時(shí)，可透過血液移動至血清或血漿與血細(xì)胞、凝塊之間，形成一個(gè)界面，使血清

或血漿被分離出來。

（三）完整的凝膠管系統(tǒng)

該系統(tǒng)是由一個(gè)真空采血管（硅化塑料管）、內(nèi)含惰性凝膠物質(zhì)、促凝劑或抗凝劑組成。使

用時(shí)要注意該產(chǎn)品必須具有相應(yīng)性能證書和有效期，并且必須在其有效期內(nèi)正確使用。

隨著檢驗(yàn)方法日益完善，高精檔次的自動化儀器的大量應(yīng)用，以及檢驗(yàn)的科學(xué)管理和檢驗(yàn)

工作人員技術(shù)水平不斷提高，明顯降低檢測過程中的影響因素和干擾，而分析檢測前的各

類影響或干擾因素相對增多。現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)對檢測標(biāo)本的留取與收集提出較高的要求，而

廣大就診患者也必需了解留取標(biāo)本的基本知識，遵照囑托，配合檢驗(yàn)人員，以使檢驗(yàn)結(jié)果

更準(zhǔn)確準(zhǔn)確可靠。

門診檢驗(yàn)常見的標(biāo)本一般包括血液（指血，靜脈血）、尿、糞便、腦脊液、胸水、腹水、前

列腺液、精液、陰道分泌物等，這些標(biāo)本收集的時(shí)間、方法和保存都有一定的要求。

標(biāo)本采集注意事項(xiàng)

一、血液標(biāo)本

盡量避免生理因素的影響，有些生理因素，如吸煙、進(jìn)食、運(yùn)動、情緒波動、妊娠、體位

等均可影響血液中某些成分的變化，有些甚至還有晝夜變化。采集血液標(biāo)本的條件應(yīng)盡量

一致為宜，如無法避免，應(yīng)說明在標(biāo)本上注明該因素。

1.外周血

一般選取左手無名指內(nèi)側(cè)采血，該部位應(yīng)無凍瘡，炎癥，水腫，破損。如該部位不符合要

求，以其他手指部位代替。對燒傷病人，可選擇皮膚完整處采血。由于部分血液常規(guī)檢測

（如白細(xì)胞計(jì)數(shù)、分類等）受生理因素影響波動過大，比較時(shí)宜便條件盡量一致。出、凝血

功能的檢測項(xiàng)目（如血小板計(jì)數(shù)，出血時(shí)間或凝血時(shí)間等）的檢測，不宜服用抗凝、促凝藥

物，以免影響測定結(jié)果。

2.靜脈血

除涉及各種止血和血栓檢測等項(xiàng)目需采用抗凝靜脈血血漿外，目前絕大多數(shù)檢測項(xiàng)目的分

析檢測可直接采用靜脈血的血清。在血清檢測項(xiàng)目中，有些（如血糖，血脂等）受飲食及晝

夜因素影響較大，一般以清晨空腹血標(biāo)本為宜，有些在血中衰變較快（血清酶活性測定如

ACP活性等），0?4℃貯存活性減弱也不一，這些項(xiàng)目的檢測必須及時(shí)而快速，有些（如肌

酸激酶等）受運(yùn)動等因素影響較大。抽血時(shí)避免溶血的發(fā)生也十分重要，尤其涉及血鉀，

LDH等的測定。切忌在輸液的同側(cè)靜脈抽血做各項(xiàng)檢驗(yàn)。

二、尿液標(biāo)本

同血標(biāo)本一樣，尿液標(biāo)本受飲食、運(yùn)動、藥物量等因素的影響也較大，特別是飲食的影

響，故一般來說晨尿優(yōu)于隨機(jī)尿。晨尿是指清晨起床后的第一次尿標(biāo)本，較濃縮和酸化，

有形成分（如血細(xì)胞，上皮細(xì)胞，管形）相對集中便于觀察。隨機(jī)尿即隨意一次尿，留取方

便，但受飲食、運(yùn)動、藥物影響較甚，易于出現(xiàn)假陽性和假陰性結(jié)果，如飲食性蛋白尿，

飲食性糖尿，維生素C干擾潛血結(jié)果等。餐后尿（午餐后2小時(shí)收集的患者尿液）適用于尿

糖，尿蛋白和尿膽原的檢查，此時(shí)的尿標(biāo)本可增加試驗(yàn)敏感性，檢出較輕微的病變。12小

時(shí)尿細(xì)胞計(jì)數(shù)，即Addis（前晚8時(shí)排空膀胱后留取至次日8時(shí)的所有尿液），因時(shí)間較長,

細(xì)菌易繁殖，須加入防腐劑甲醛。

24小時(shí)尿（第一天晨8時(shí)排空膀胱后留取至次日晨8時(shí)的所有尿液）中化學(xué)物質(zhì)的定量，包

括蛋白，糖，Ca2十等，檢測不同的物質(zhì)，選擇不同的防腐劑防腐。清潔中段尿多用于尿

細(xì)菌培養(yǎng)，要求無菌，沖洗外明后留取標(biāo)本。所有尿標(biāo)本的收集都應(yīng)足量，最少12ml,

最好50ml,定時(shí)尿須全部收集，對女性患者應(yīng)避免陰道分泌物、經(jīng)血污染尿標(biāo)本。

三、糞便標(biāo)本

糞便標(biāo)本的檢測對判斷消化系統(tǒng)疾病有重要參考價(jià)值。采集時(shí)要求用干凈的件簽選取含有

粘液、膿血等異常病變成分的糞便，對外觀無異常的糞便須從表面、深處及糞端多處取材。

找寄生蟲蟲體及作蟲卵計(jì)數(shù)應(yīng)收集24小時(shí)糞便。查痢疾阿米巴滋養(yǎng)體應(yīng)于排便后立即檢

查，從有膿血和稀軟處取材，保溫送檢。

查日本血吸蟲蟲卵時(shí)應(yīng)取粘液、膿血部分，孵化毛蝴時(shí)至少留取30g糞便，且需盡快處理。

檢查蛻蟲卵須用透明薄膜拭子于晚12時(shí)或清晨排便前自肛門周圍皺處處拭取并立即鏡檢。

隱血試驗(yàn)（化學(xué)法），試驗(yàn)前3日禁食肉類及含動物血食物并禁服鐵劑，維生素C等。所有

糞便標(biāo)本采集后1小時(shí)內(nèi)應(yīng)檢查完畢，以防止有形成分受消化醐及pH的破壞。

四、腦脊液標(biāo)本

腦脊液標(biāo)本采集后立即送檢，放置過久將影響檢驗(yàn)結(jié)果：如細(xì)胞變性，破壞，導(dǎo)致計(jì)數(shù)和

分類不被：有些化學(xué)物質(zhì)如葡萄糖等將分解含量減少：細(xì)菌發(fā)生自溶影響細(xì)菌的檢出率。

腦脊液抽取后一般分裝三個(gè)無菌管，第一管作細(xì)菌培養(yǎng)，第二管作化學(xué)分析和免疫學(xué)檢查,

第三管作一般性狀及顯微鏡檢查，三管順序不宜顛倒。因標(biāo)本采集較難，全部送檢和檢測

過程應(yīng)注意安全。

五、胸腹水標(biāo)本

與腦脊液標(biāo)本一樣，采集后的標(biāo)本注意安全，及時(shí)送檢。一般也分裝三管，一管作常規(guī)細(xì)

胞學(xué)檢查，一管生化檢查，一管細(xì)菌培養(yǎng)，順序以與腦脊液相同為宜。

六、前列腺液標(biāo)本

前列腺液標(biāo)本由前列腺按摩后采集，液量少時(shí)直接滴在載玻片上及時(shí)送檢，須注意防止標(biāo)

本蒸干，量多時(shí)收集在潔凈干燥的試管中。若按摩不出前列腺液，可檢查按摩后的尿液沉

渣。

七、陰道分秘物標(biāo)本

陰道標(biāo)本采集前24小時(shí)應(yīng)禁止房事、盆浴、明道檢查、明道灌洗及局部上藥等.取材所用

器械需要清潔。一般用鹽水浸濕棉拭子自陰道或陰道彎后部、宮頸管口取材，制生理鹽水

涂片后觀察分泌物標(biāo)本，經(jīng)期的女性患者不宜檢查陰道分泌物標(biāo)本。

天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（速率法）

標(biāo)準(zhǔn)化操作程序文件

單位：山東德棉職工醫(yī)院

科室:檢驗(yàn)科生化室

文件編號：

版本：

批準(zhǔn)施日期：

有校期：一年

復(fù)審計(jì)劃：每年復(fù)審，測定系統(tǒng)變化時(shí)需進(jìn)行修訂

發(fā)放部門：檢驗(yàn)科生化室

編寫者：鞏建剛

審批者：

保管者：

修訂者：

天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（速率法）

1概述

AST廣泛分布于人體，在心，肝，骨骼肌，腎和紅細(xì)胞內(nèi)有較高的濃度，這些

組織的損傷或疾病，如心肌梗死，病毒性肝炎，肝壞死，肝硬化，和肌營養(yǎng)不

良等癥均會引起血清或血漿AST水平的升高。

2樣本收集

新鮮無溶血標(biāo)本，血清或血漿樣本均不溶血。血漿樣本只能采用肝素或

EDTA抗凝。樣本在4攝氏度可穩(wěn)定7天。采血前病人應(yīng)禁食12小時(shí)，采集靜

脈3ml,待凝固后（最好放在37攝氏度水浴箱內(nèi)45分鐘）通常為加抗凝劑的血

液在30-60分鐘凝血析出血清。3000r/min離心5-10分鐘，分離出血清備用。

不建議采用血漿標(biāo)本。

3方法原理

L-天冬氨酸+a-酮戊二酸-------草酰乙酸+L-古氨酸

草酰乙酸+NADH+H+----------L-蘋果酸+NAD+

4劑來源，配置及儲存

試劑來源：迪瑞

試劑配置：試劑一和試劑二均為液體試劑，可直接使用。啟用后在2-8度可穩(wěn)

定30天。若試劑混濁，或以蒸儲水為空白在340nm處的光吸收值低于1.1A,應(yīng)

予丟棄。

試劑儲存：試劑避光儲存2-8攝氏度可穩(wěn)定至標(biāo)簽所示失效期。

5分析儀器

CS-600B全自動生化分析儀

分析參數(shù)：樣品量15u/l試劑量：第一試劑240u/l（R1）；第二試劑60u/I

測光點(diǎn)23—38測定模式：速率5負(fù)反應(yīng)

分析波長：340nm/405nm（主波長/副波長）

6計(jì)算方法

樣本濃度（U/L）=樣本管吸光度的變化X校準(zhǔn)液濃度（U/L）

校正管吸光度的變化

7線性范圍3--1000U/L

8參考范圍:0-40u/

新生兒和嬰兒的AST大約是成人的二倍，六個(gè)月以后降至成人水平。

9失控控理

1：立即重測同一質(zhì)控品，如重測后結(jié)果仍不再允許范圍，請進(jìn)行下一步。

2：新開一瓶質(zhì)控品，重測失控項(xiàng)目，如新開的質(zhì)控血清結(jié)果正常，那么原來

質(zhì)控血清可能過期或在室溫防止時(shí)間過長而變質(zhì)，如結(jié)果仍不再允許范圍，則

進(jìn)行下一步。

3：進(jìn)行儀器維護(hù)，重測失控項(xiàng)目。檢查儀器狀態(tài)，查明光源是否更換，比色

杯是否需要清洗或更換？對儀器進(jìn)行清洗等維護(hù)。另外還要檢查試劑，此時(shí)可

更換試劑已查明原因。如果結(jié)果仍不再允許范圍內(nèi)，則進(jìn)行下一步。

4：重新校準(zhǔn)。重測失控項(xiàng)目。用新的校準(zhǔn)液校準(zhǔn)儀器，排除校準(zhǔn)液的原因。

5：請專家?guī)椭?。如果前五步都為能得到在控結(jié)果，那可能是儀器或試劑已查

明原因，只有和儀器或試劑廠家聯(lián)系請求他們的技術(shù)支援。

10注意事項(xiàng)

1：試劑和樣本用量可根據(jù)不同儀器要求按比例改變。

2：如測試結(jié)果超出線性范圍，樣本應(yīng)稀釋后測試，調(diào)整因子數(shù)或?qū)⒔Y(jié)果乘以稀

釋倍數(shù)。

3：結(jié)果的準(zhǔn)確性儀器校正和測定溫度，時(shí)間的控制。

4：高血脂或黃疸樣本在340nm處有較高的吸光度值。這類樣本的高值A(chǔ)ST

耗盡底物后，在34Onm處仍維持較高的吸光度值，此時(shí)樣本應(yīng)稀釋后在進(jìn)行

測定。

5：NADH在334nm和365nm處的毫摩爾消光系數(shù)分別為6.18和3.4.

6：若試劑混濁，或以水為空白在340nm處吸光度值低于1.1時(shí)，則不能使用。

7：由醫(yī)生根據(jù)臨床癥狀和其他實(shí)驗(yàn)結(jié)果做出臨床診斷

8：樣本與廢液等有潛在生物傳染性危險(xiǎn)，操作者穎遵守實(shí)驗(yàn)室安全操作規(guī)定

并按當(dāng)?shù)蒯t(yī)療廢棄物，感染性廢棄物，產(chǎn)業(yè)廢棄物等規(guī)定處理廢液。

11：臨床意義

AST在心肌細(xì)胞內(nèi)含量較多，當(dāng)心肌梗死時(shí)，血清中AST活力增高，在發(fā)病后

6-12小時(shí)之內(nèi)顯著升高，在48小時(shí)達(dá)到高峰，約在3-5天恢復(fù)正常。血清中

AST也可來源于肝細(xì)胞，各種肝病可引起血清AST升高，有時(shí)可達(dá)1200單位,

中毒性肝炎還可更高。肌炎，胸膜炎，腎炎及肺炎等也可引起血清AST升高。

臨床上還可通過計(jì)算AST/ALT對肝病進(jìn)行診斷和鑒別診斷

酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)測定(速率丙氨法)

標(biāo)準(zhǔn)化操作程序文件

單位：山東德棉職工醫(yī)院

科室:檢驗(yàn)科生化室

文件編號：

版本：

批準(zhǔn)施日期：

有校期：一年

復(fù)審計(jì)劃：每年復(fù)審，測定系統(tǒng)變化時(shí)需進(jìn)行修訂

發(fā)放部門：檢驗(yàn)科生化室

編寫者：鞏建剛

審批者：

保管者：

修訂者：

丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)測定(速率法)

1概述

肝臟內(nèi)含有豐富的酶系統(tǒng)，以維持機(jī)體的正常生理代謝過程。不少酶是由

肝臟合成并由肝膽系統(tǒng)排泄，當(dāng)肝臟有病時(shí)，可由于酶生成亢進(jìn)或釋出異常，

引起血清內(nèi)酶的活性改變。這些改變在一定程度內(nèi)反映了肝臟的功能狀況。人

體轉(zhuǎn)氨酶的種類甚多，而以血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶，血清天門冬氨酸轉(zhuǎn)換酶活

性最強(qiáng)。此兩種酶廣泛在于機(jī)體組織細(xì)胞內(nèi)，以肝臟，心臟，腎臟及骨骼肌中

較多。在肝臟中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)的含量最多，AST以心肌含量最多，此

兩種轉(zhuǎn)氨酶較多地釋放在血液中，使血清中兩種酶活性增高。

2樣本收集

新鮮無溶血標(biāo)本，血清或血漿樣本均不溶血。血漿樣本只能采用肝素或

EDTA抗凝。樣本在4攝氏度可穩(wěn)定7天。采血前病人應(yīng)禁食12小時(shí)，采集靜

脈3ml,待凝固后(最好放在37攝氏度水浴箱內(nèi)45分鐘)通常為加抗凝劑的血

液在30-60分鐘凝血析出血清。3000r/min離心5-10分鐘，分離出血清備用。

不建議采用血漿標(biāo)本。

3方法原理

L-丙氨酸+a-酮戊二酸---------->丙酮酸+L-谷氨酸

丙酮酸+NADH--------------------L-乳酸+NAD+

4劑來源，配置及儲存

試劑來源：迪瑞

試劑配置：試劑一和試劑二均為液體試劑，可直接使用。啟用后在2-8度可穩(wěn)

定30天。若試劑混濁，或以蒸儲水為空白在340nm處的光吸收值低于1.0A,應(yīng)

予丟棄。

試劑儲存：試劑避光儲存2-8攝氏度可穩(wěn)定至標(biāo)簽所示失效期。

5分析儀器

CS-600B全自動生化分析儀

分析參數(shù)：樣品量15u/l試劑量:第一試劑240u/l(R1)；第二試劑60u/l

測光點(diǎn)23-38測定模式：速率法負(fù)反應(yīng)

分析波長：340nm/405nm(主波長/副波長)

6計(jì)算方法

樣本濃度(U/L)=樣本管吸光度的變化義校準(zhǔn)液濃度(U/L)

校正管吸光度的變化

7線性范圍：本實(shí)驗(yàn)的線性范圍：4—-1000U/L

8參考范圍：男性；：5—40U/L女性：5--35U/L

9失控控理

1：立即重測同一質(zhì)控品，如重測后結(jié)果仍不再允許范圍，請進(jìn)行下一步。

2：新開一瓶質(zhì)控品，重測失控項(xiàng)目，如新開的質(zhì)控血清結(jié)果正常，那么原來質(zhì)

控血清可能過期或在室溫防止時(shí)間過長而變質(zhì)，如結(jié)果仍不再允許范圍，則進(jìn)

行下一步。

3：進(jìn)行儀器維護(hù)，重測失控項(xiàng)目。檢查儀器狀態(tài)，查明光源是否更換，比色

杯是否需要清洗或更換？對儀器進(jìn)行清洗等維護(hù)。另外還要檢查試劑，此時(shí)可

更換試劑已查明原因。如果結(jié)果仍不再允許范圍內(nèi)，則進(jìn)行下一步。

4：重新校準(zhǔn)。重測失控項(xiàng)目。用新的校準(zhǔn)液校準(zhǔn)儀器，排除校準(zhǔn)液的原因。

5：請專家?guī)椭Ｈ绻拔宀蕉紴槟艿玫皆诳亟Y(jié)果，那可能是儀器或試劑已查明

原因，只有和儀器或試劑廠家聯(lián)系請求他們的技術(shù)支援。

10注意事項(xiàng)

1：試劑和樣本用量可根據(jù)不同儀器要求按比例改變。

2：如測試結(jié)果超出線性范圍，樣本應(yīng)稀釋后測試，調(diào)整因子數(shù)或?qū)⒔Y(jié)果乘以稀

釋倍數(shù)。

3：結(jié)果的準(zhǔn)確性儀器校正和測定溫度，時(shí)間的控制。

4：高血脂或黃疸樣本在340nm處有較高的吸光度值。這類樣本的高值A(chǔ)LT耗

盡底物后，在340nm處仍維持較高的吸光度值，此時(shí)樣本應(yīng)稀釋后在進(jìn)行測定。

5：由醫(yī)生根據(jù)臨床癥狀和其他實(shí)驗(yàn)結(jié)果做出臨床診斷。

11臨床意義

ALT活性高

1.肝膽疾病傳染性肝炎、中毒性肝炎、脂肪肝和膽管炎等。

2.心血管疾病心肌梗死、心肌炎、心力衰竭時(shí)肝淤血和腦出血等。

3.藥物和毒物氯丙嗪，異脫、奎寧、水楊酸制劑及乙醇，鉛、

ALT活性降低磷酸吐多醛缺乏癥。

Y-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶（速率法）

標(biāo)準(zhǔn)化操作程序文件

單位：山東德棉職工醫(yī)院

科室:檢驗(yàn)科生化室

文件編號：

版本：

批準(zhǔn)施日期：

有校期：一年

復(fù)審計(jì)劃：每年復(fù)審，測定系統(tǒng)變化時(shí)需進(jìn)行修訂

發(fā)放部門：檢驗(yàn)科生化室

編寫者：鞏建剛

審批者：

保管者：

修訂者：

Y-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶（速率法）

1：概述

健康人血清Y-GT水平甚低（＜40單位），主要來自肝臟，少許由

腎、胰、小腸產(chǎn)生。

Y-GT在反映肝細(xì)胞壞死損害方面不及ALT,但在黃疸鑒別方面有一定

意義，肝臟內(nèi)排泄不暢（肝內(nèi)梗阻）和肝外梗阻（如膽道系統(tǒng)阻塞）以及肝

硬化、肝腫瘤中毒性肝病、酒精性肝病、脂肪肝等均可升高。？

丫一谷氨酰轉(zhuǎn)移酶（Y—GT）在人體細(xì)胞的微粒體中合成。某些藥物和

酒精可使其合成增加。它的主要功能是參與體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝，旦廣泛存在于

人體各組織及器官中，以腎臟最為豐富，其次是胰肝等處。在肝臟主要存在

于肝細(xì)胞漿和膽管上皮細(xì)胞中。正常成年人血清中Y-GT活性很低，主要來

源于肝臟。。

2樣本收集

新鮮無溶血標(biāo)本，血清或血漿樣本均不溶血。血漿樣本只能采用肝素或

EDTA抗凝。樣本在4攝氏度可穩(wěn)定7天。采血前病人應(yīng)禁食12小時(shí)，采集靜

脈3ml,待凝固后（最好放在37攝氏度水浴箱內(nèi)45分鐘）通常為加抗凝劑的血

液在30-60分鐘凝血析出血清。3000r/min離心5-10分鐘，分離出血清備用。

不建議采用血漿標(biāo)本。

3方法原理

試劑中L-Y-谷氨酰-3羥基-4硝基苯胺和甘氨酸在樣品中丫一谷氨酰轉(zhuǎn)移酶

的催化作用下，生成色產(chǎn)物5-氨基-2硝基苯甲酸鹽，引起405nm處的吸光

值升高，通過監(jiān)測405nm處光吸收值上升的速率，可以測定丫一谷氨酰轉(zhuǎn)移

酶的活力。

4劑來源，配置及儲存

試劑來源：迪瑞

試劑配置：試劑一和試劑二均為液體試劑，可直接使用。啟用后在2-8度可穩(wěn)

定30天。若試劑混濁，或以蒸儲水為空白在405nm處的光吸收值低于0.8A,應(yīng)

予丟棄。

試劑儲存：試劑避光儲存2-8攝氏度可穩(wěn)定至標(biāo)簽所示失效期。

5分析儀器

CS-600B全自動生化分析儀

分析參數(shù):樣品量50u/l試劑量：第一試劑200u/l（R1）；第二試劑50u/l

測光點(diǎn)23-38測定模式：速率法正反應(yīng)

分析波長：405nm/505nm(主波長/副波長)

6計(jì)算方法

Y-GT(U/L)=(A/min*Tv*1000)(9.5*Sv*P)

式中

Tv=總反應(yīng)體積

5丫=樣本體積

9.5=NADH在34Onm處的毫摩爾消光系數(shù)

P=比色杯光徑(cm)

7線性范圍0-450U/L

8參考范圍:0-40U/L

新生兒和嬰兒的AST大約是成人的二倍，六個(gè)月以后降至成人水平。

9失控控理

1：立即重測同一質(zhì)控品，如重測后結(jié)果仍不再允許范圍，請進(jìn)行下一步。

2：新開一瓶質(zhì)控品，重測失控項(xiàng)目，如新開的質(zhì)控血清結(jié)果正常，那么原來

質(zhì)控血清可能過期或在室溫防止時(shí)間過長而變質(zhì)，如結(jié)果仍不再允許范圍，則

進(jìn)行下一步。

3：進(jìn)行儀器維護(hù)，重測失控項(xiàng)目。檢查儀器狀態(tài)，查明光源是否更換，比色

杯是否需要清洗或更換？對儀器進(jìn)行清洗等維護(hù)。另外還要檢查試劑，此時(shí)可

更換試劑已查明原因。如果結(jié)果仍不再允許范圍內(nèi)，則進(jìn)行下一步。

4：重新校準(zhǔn)。重測失控項(xiàng)目。用新的校準(zhǔn)液校準(zhǔn)儀器，排除校準(zhǔn)液的原因。

5：請專家?guī)椭?。如果前五步都為能得到在控結(jié)果，那可能是儀器或試劑已查

明原因，只有和儀器或試劑廠家聯(lián)系請求他們的技術(shù)支援。

10注意事項(xiàng)

1：試劑和樣本用量可根據(jù)不同儀器要求按比例改變。

2：如測試結(jié)果超出線性范圍，樣本應(yīng)稀釋后測試，調(diào)整因子數(shù)或?qū)⒔Y(jié)果乘以

稀釋倍數(shù)。

3：結(jié)果的準(zhǔn)確性儀器校正和測定溫度，時(shí)間的控制。

4：若試劑混濁，或以水為空白在405nm處吸光度值低于0.8時(shí)，則不能使用。

5：由醫(yī)生根據(jù)臨床癥狀和其他實(shí)驗(yàn)結(jié)果做出臨床診斷

6：樣本與廢液等有潛在生物傳染性危險(xiǎn)，操作者穎遵守實(shí)驗(yàn)室安全操作規(guī)定

并按當(dāng)?shù)蒯t(yī)療廢棄物，感染性廢棄物，產(chǎn)業(yè)廢棄物等規(guī)定處理廢液。

11：臨床意義

1、急性病毒性肝炎是否轉(zhuǎn)為慢性。急性肝炎常引起轉(zhuǎn)氨酶(GPT、GOT)升高。

隨著病情好轉(zhuǎn)，轉(zhuǎn)氨酶逐漸恢復(fù)正常，如果丫-GT持續(xù)不降，多表示肝炎轉(zhuǎn)為

慢性。

2、慢性肝炎和肝硬化病人Y-GT持續(xù)升高表示病情不穩(wěn)定或呈惡化傾向；若逐

漸下降提示肝病轉(zhuǎn)向不活動。

3、酒精性肝病轉(zhuǎn)氨酶雖輕度上升，而Y-GT可中度升高。急性酒精肝病丫-GT

升高達(dá)1000單位。經(jīng)常飲酒者Y-GT常在80單位左右。

4、原發(fā)性肝癌膽內(nèi)阻塞膽汁淤滯時(shí)，Y-GT多明顯升高，數(shù)倍或數(shù)十倍于常量。

5、間斷動態(tài)檢測Y-GT,可查出肝外其他臟器腫瘤是否轉(zhuǎn)移至肝臟。

6、阻塞性黃疸查Y-GT,常發(fā)現(xiàn)Y-GT升高程度與黃疸深度呈平行關(guān)系：黃疸

越深，Y-GT越高。

堿性磷酸酶（ALP）測定（速率法）

標(biāo)準(zhǔn)化操作程序文件

單位：山東德棉職工醫(yī)院

科室:檢驗(yàn)科生化室

文件編號：

版本：

批準(zhǔn)施日期：

有校期：一年

復(fù)審計(jì)劃：每年復(fù)審，測定系統(tǒng)變化時(shí)需進(jìn)行修訂

發(fā)放部門：檢驗(yàn)科生化室

編寫者：鞏建剛

審批者：

保管者：

修訂者：

堿性磷酸酶（ALP）測定（速率法）

1：概述

9.6.一堿性磷酸酶英文簡稱AKP或ALP,是廣泛分布于人體各臟器器官中，其

中以肝臟為最多其次為腎臟，骨骼、腸、和胎盤等組織,。它不是單一的酶，而

是一組同功酶。目前已發(fā)現(xiàn)有AKP1、AKP2、AKP3、AKP4、AKP5與

AKP6六種同功酶。堿性磷酸酶（ALP）：是從牛腸粘膜或大腸桿菌中提取。從大腸桿菌

提取的AP分子量為80kD,酶作用的最適pH為8.0；用小牛腸黏膜提取的AP分子量為

lOOkD,最適pH為般采用對硝基苯磷酸酯（p-NPP）作為底物。它可制成片狀試劑，使用方

便。產(chǎn)物為黃色的對硝基酚，在405nm有吸收峰。用NaOH終止酶反應(yīng)后，黃色可穩(wěn)定一

段時(shí)間。2標(biāo)本的收集

新鮮無溶血標(biāo)本，血清或血漿樣本均不溶血。血漿樣本只能采用肝素或EDTA抗凝。

樣本在4攝氏度可穩(wěn)定7天。采血前病人應(yīng)禁食12小時(shí)，采集靜脈3ml,待凝固后（最好

放在37攝氏度水浴箱內(nèi)45分鐘）通常為加抗凝劑的血液在30-60分鐘凝血析出血清。

3000r/min離心5-10分鐘，分離出血清備用。不建議采用血漿標(biāo)本。

3:方法原理

樣本中的堿性磷酸酶催化水解磷酸對硝基苯酚，生成游離的對硝基苯酚和磷酸，

引起405nm處的光吸收值升高，，通過檢測405nm處光吸收值上升的速率，

可以測定堿性磷酸酶的活力。

4劑來源，配置及儲存

試劑來源：迪瑞

試劑配置：試劑一和試劑二均為液體試劑，可直接使用。啟用后在2-8度可穩(wěn)定30天。

若試劑混濁，或以蒸儲水為空白在405nm處的光吸收值低于0.8A,應(yīng)予丟棄。

試劑儲存：試劑避光儲存2-8攝氏度可穩(wěn)定至標(biāo)簽所示失效期。

5分析儀器

CS-600B全自動生化分析儀

分析參數(shù)：樣品量4u/l試劑量：第一試劑200U/I（R1）；第二試劑50U/I

測光點(diǎn)23-38測定模式：速率法正反應(yīng)

分析波長：405nm/505nm（主波長/副波長）

6計(jì)算方法

ALP(U/L)=(A/min*Tv*1000)(18.8*Sv*P)

式中

Tv=總反應(yīng)體積

5丫=樣本體積

18.8=NADH在405nm處的毫摩爾消光系數(shù)

P=比色杯光徑(cm)

7線性范圍：本實(shí)驗(yàn)的線性范圍：0—-850U/L

8參考范圍:男性:1—12歲《500U/L

12-15歲《750U/L

》25歲40-150U/L

女性：1--12歲《500U/L

》15歲40-150U/L

9失控控理

1：立即重測同一質(zhì)控品，如重測后結(jié)果仍不再允許范圍，請進(jìn)行下一步。

2：新開一瓶質(zhì)控品，重測失控項(xiàng)目，如新開的質(zhì)控血清結(jié)果正常，那么原來質(zhì)控血清可

能過期或在室溫防止時(shí)間過長而變質(zhì)，如結(jié)果仍不再允許范圍，則進(jìn)行下一步。

3：進(jìn)行儀器維護(hù)，重測失控項(xiàng)目。檢查儀器狀態(tài)，查明光源是否更換，比色杯是否需要

清洗或更換？對儀器進(jìn)行清洗等維護(hù)。另外還要檢查試劑，此時(shí)可更換試劑已查明原因。

如果結(jié)果仍不再允許范圍內(nèi)，則進(jìn)行下一步。

4：重新校準(zhǔn)。重測失控項(xiàng)目。用新的校準(zhǔn)液校準(zhǔn)儀器，排除校準(zhǔn)液的原因。

5:請專家?guī)椭?。如果前五步都為能得到在控結(jié)果，那可能是儀器或試劑已查明原因，只

有和儀器或試劑廠家聯(lián)系請求他們的技術(shù)支援。

10注意事項(xiàng)

1：試劑和樣本用量可根據(jù)不同儀器要求按比例改變。

2:如測試結(jié)果超出線性范圍，樣本應(yīng)稀釋后測試，調(diào)整因子數(shù)或?qū)⒔Y(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。

3：結(jié)果的準(zhǔn)確性儀器校正和測定溫度，時(shí)間的控制。

4：由醫(yī)生根據(jù)臨床癥狀和其他實(shí)驗(yàn)結(jié)果做出臨床診斷。

11：臨床意義

臨床上測定ALP主要用于骨骼、肝膽系統(tǒng)疾病的診斷和鑒別診斷，尤其是黃疸的鑒別診

斷。對于不明原因的高ALP血清水平，可測定同工酶以協(xié)助明確其器官來源。

1.生理性增高：兒童在生理性的骨骼發(fā)育期，堿性磷酸酶活力可比正常人高1?2倍。

處于生長期的青少年，以及孕婦和進(jìn)食脂肪含量高的食物后均可以升高。

2.病理性升高：(1)骨骼疾病如佝僂病、軟骨病、骨惡性腫瘤、惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移等；

(2)肝膽疾病如肝外膽道阻塞、肝癌、肝硬化、毛細(xì)膽管性肝炎等；

(3)其他疾病如甲狀旁腺機(jī)能亢進(jìn)。

3.病理性降低：見于重癥慢性腎炎、兒童甲狀腺機(jī)能不全、貧血等。

總膽紅素（重氮鹽法）

標(biāo)準(zhǔn)化操作程序文件

單位：山東德棉職工醫(yī)院

科室:檢驗(yàn)科生化室

文件編號：

版本：

批準(zhǔn)施日期：

有校期：一年

復(fù)審計(jì)劃：每年復(fù)審，測定系統(tǒng)變化時(shí)需進(jìn)行修訂

發(fā)放部門：檢驗(yàn)科生化室

編寫者：鞏建剛

審批者：

保管者：

修訂者

:總膽紅素（重氮鹽法）

1:概述

血清中的［膽紅素大部分來源于衰老紅細(xì)胞被破壞后產(chǎn)生出來的血紅蛋白衍化而

成，在肝內(nèi)經(jīng)過葡萄糖醛酸化的叫做直接膽紅素，未在肝內(nèi)經(jīng)過葡萄糖醛酸化

的叫做間接膽紅素，二者的和就是總膽紅素。

2標(biāo)本的收集

新鮮無溶血標(biāo)本，血清或血漿樣本均不溶血。血漿樣本只能采用肝素或

EDTA抗凝。樣本在4攝氏度可穩(wěn)定7天。采血前病人應(yīng)禁食12小時(shí)，采集靜

脈3ml,待凝固后（最好放在37攝氏度水浴箱內(nèi)45分鐘）通常為加抗凝劑的血

液在30-60分鐘凝血析出血清。3000r/min離心5-10分鐘，分離出血清備用。

不建議采用血漿標(biāo)本。

3：方法原理

本試劑采用表面活性劑作為增溶劑，樣品中結(jié)合膽紅素和經(jīng)增溶的未結(jié)合膽紅

素與重氮對氨基苯磺酸反應(yīng)，生成酸性偶氮膽紅素，其在570nm處吸收值的

增加與樣品中膽紅素的濃度成正比，通過測定570nm處吸光度值的變化，即

可計(jì)算出樣品中總膽紅素的濃度。

4劑來源，配置及儲存

試劑來源：迪瑞

試劑配置：。試劑一和試劑二按100:1的比例。即10ml試劑一加0.1ml試劑二，混合后

即成工作液

試劑儲存：試劑避光儲存2-8攝氏度可穩(wěn)定至標(biāo)簽所示失效期。

5分析儀器

CS-600B全自動生化分析儀

分析參數(shù)：樣品量25u/l試劑量：250u/l

測光點(diǎn)0-41測定模式：1點(diǎn)終點(diǎn)法正反應(yīng)

分析波長：570nm/660nm（主波長/副波長）

6計(jì)算方法

總膽紅素濃度gmol/L）=樣本管吸光度義校準(zhǔn)液濃度（pmol/L）

校正管吸光度

7線性范圍：本實(shí)驗(yàn)的線性范圍：0--300|imol/L

8參考范圍成人1.7—21Hmol/L

新生兒20—200^mol/L

9失控控理

1：立即重測同一質(zhì)控品，如重測后結(jié)果仍不再允許范圍，請進(jìn)行下一步。

2：新開一瓶質(zhì)控品，重測失控項(xiàng)目，如新開的質(zhì)控血清結(jié)果正常，那么原來

質(zhì)控血清可能過期或在室溫防止時(shí)間過長而變質(zhì)，如結(jié)果仍不再允許范圍，則

進(jìn)行下一步。

3：進(jìn)行儀器維護(hù)，重測失控項(xiàng)目。檢查儀器狀態(tài)，查明光源是否更換，比色

杯是否需要清洗或更換？對儀器進(jìn)行清洗等維護(hù)。另外還要檢查試劑，此時(shí)可

更換試劑已查明原因。如果結(jié)果仍不再允許范圍內(nèi)，則進(jìn)行下一步。

4：重新校準(zhǔn)。重測失控項(xiàng)目。用新的校準(zhǔn)液校準(zhǔn)儀器，排除校準(zhǔn)液的原因。

5：請專家?guī)椭Ｈ绻拔宀蕉紴槟艿玫皆诳亟Y(jié)果，那可能是儀器或試劑已查

明原因，只有和儀器或試劑廠家聯(lián)系請求他們的技術(shù)支援。

10注意事項(xiàng)

1：試劑和樣本用量可根據(jù)不同儀器要求按比例改變。

2：如測試結(jié)果超出線性范圍，樣本應(yīng)稀釋后測試，調(diào)整因子數(shù)或?qū)⒔Y(jié)果乘以

稀釋倍數(shù)。

3：結(jié)果的準(zhǔn)確性儀器校正和