高考2007-2012年生物高考題按知識(shí)點(diǎn)分類(lèi)匯編：基因工程的原理及技術(shù)

[高考]2007-2012年生物高考題按知識(shí)點(diǎn)分類(lèi)匯編：基因工程的原理及技術(shù)“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)基因工程的原理及技術(shù)本卷整理:【吉】七七(李偉吉林省舒蘭市第二中學(xué))2012山東35、(8分)【生物—現(xiàn)代生物科技專(zhuān)題】毛角蛋白II型中間絲(KIFII)基因與絨山羊的羊絨質(zhì)量密切相關(guān)。獲得轉(zhuǎn)KIFII基因的高絨質(zhì)絨山羊的簡(jiǎn)單流程如圖。(1)過(guò)程?中最常用的運(yùn)載工具是__________，所需要的酶是限制酶和_____________。(2)在過(guò)程?中，用__________處理將皮膚組織塊分散成單個(gè)成纖維細(xì)胞。在培養(yǎng)過(guò)程中，將成纖維細(xì)胞置于5%CO的氣體環(huán)境中，CO的作用是________________。22(3)在過(guò)程?中，用___________處理以獲得更多的卵(母)細(xì)胞。成熟卵(母)細(xì)胞在核移植前需要進(jìn)行____________處理。(4)從重組細(xì)胞到早期胚胎過(guò)程中所用的胚胎工程技術(shù)是______________________。在胚胎移植前，通過(guò)____________技術(shù)可獲得較多胚胎?！敬鸢浮?1)質(zhì)粒;DNA連接酶(2)胰蛋白酶(或膠原蛋白酶);維持培養(yǎng)基(液)的PH穩(wěn)定(3)促性腺激素(或促濾泡素，孕馬血清);去核(4)(早期)胚胎培養(yǎng)胚胎分割【解析】熟練掌握基因工程和胚胎工程的基本知識(shí)就能解答本題.(1)運(yùn)載工具(體)包括質(zhì)粒、噬菌體衍生物及動(dòng)植物病毒,其中質(zhì)粒是主要運(yùn)載體;所需工具酶是限制酶和DNA連接酶。(2)分散皮膚組織塊成單個(gè)細(xì)胞使用胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)。在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，CO的2作用是維持培養(yǎng)液pH的相對(duì)穩(wěn)定。(3)要得到更多的卵(母)細(xì)胞需用促性腺激素進(jìn)行超數(shù)排卵處理;成熟卵(母)細(xì)胞在核移植前需“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)要進(jìn)行去核處理，以保證克隆后代的遺傳性狀主要了來(lái)自供體核。(4)把重組細(xì)胞培養(yǎng)到早期胚胎叫早期胚胎培養(yǎng)技術(shù);在胚胎移植前，通過(guò)胚胎分割技術(shù)可獲得較多胚胎?！驹囶}評(píng)價(jià)】本題考查了基因工程的操作工具、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程和條件、超數(shù)排卵的方法、核移植技術(shù)、胚胎工程中早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等知識(shí)，基礎(chǔ)性強(qiáng)，難度不大。2012天津7.(13分)生物分子間特異性結(jié)合的性質(zhì)廣泛用于生命科學(xué)研究。以下實(shí)例為體外處理“蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合體”獲得DNA片段信息的過(guò)程圖。據(jù)圖回答:(1)過(guò)程?酶作用的部位是鍵，此過(guò)程只發(fā)生在非結(jié)合區(qū)DNA，過(guò)程?酶作用的部位是鍵。(2)?、?兩過(guò)程利用了酶的特性。(3)若將得到的DNA片段用于構(gòu)建重組質(zhì)粒，需要過(guò)程?的測(cè)序結(jié)果與酶的識(shí)別序列確定選用何種酶。進(jìn)行對(duì)比，以(4)如果復(fù)合體中的蛋白質(zhì)為RNA酶聚合，則其識(shí)別、結(jié)合DNA序列區(qū)為基因的。(5)以下研究利用了生物分子間的特異性結(jié)合的有(多選)A.分離得到核糖體，用蛋白酶酶解后提取rRNAB.用無(wú)水乙醇處理菠菜葉片，提取葉綠體基粒膜上的光合色素C(通過(guò)分子雜交手段，用熒光物質(zhì)標(biāo)記的目的基因進(jìn)行染色體定位D(將抑制成熟基因?qū)敕?，其mRNA與催化成熟酶基因的mRNA互補(bǔ)結(jié)合，終止后者翻譯，延遲果實(shí)成熟?！敬鸢浮?1)磷酸二酯，肽(2)專(zhuān)一性(3)限制性核酸內(nèi)切酶(4)啟動(dòng)子(或轉(zhuǎn)錄起始區(qū))(5)A、C、D【解析】(1)DNA酶作用的部位是DNA的磷酸二酯鍵，蛋白酶作用的部位是肽鍵。(2)??過(guò)程利用了各種酶催化一種或一類(lèi)化學(xué)反應(yīng)的特性，即專(zhuān)一性。(3)DNA要構(gòu)建重組質(zhì)粒，需要用限制性核酸內(nèi)切酶切割，再與質(zhì)粒重組。(4)RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合在基因的啟動(dòng)子上，驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄。(5)蛋白酶能特異性的酶解蛋白質(zhì)，分子雜交手段也是利用各物質(zhì)分子結(jié)合的特異性，抑制成熟基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA與催化成熟酶基因的mRNA堿基互補(bǔ)結(jié)合，也具有特異性，光和色素易溶于有機(jī)溶劑，與酒精并不是特異性的溶解，所以選ACD?！驹囶}點(diǎn)評(píng)】本題考查了基因工程的想過(guò)知識(shí)，主要考查學(xué)生對(duì)知識(shí)的理解和應(yīng)用能力，難度較小。2012天津8.(20分)黃曲霉毒素B(AFB)存在于被黃曲霉菌污染的飼料中，它可以通過(guò)食物鏈11進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)并蓄積，引起瘤變。某些微生物能表達(dá)AFB解毒酶(將該酶添加在飼料中可以降解AFB，11清除其毒性?！皾h水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)回答下列問(wèn)題:(1)AFB屬于類(lèi)致癌因子。1(2)AFB能結(jié)合在DNA的G上，使該位點(diǎn)受損傷變?yōu)镚'，在DNA復(fù)制中，G'會(huì)與A配對(duì)。現(xiàn)有受1損傷部位的序列為，經(jīng)兩次復(fù)制后，該序列突變?yōu)椤?3)下圖為采用基因工程技術(shù)生產(chǎn)AFB解毒酶的流程圖1據(jù)圖回答問(wèn)題:?在甲、乙條件下培養(yǎng)含AFB解毒酶基因的菌株，經(jīng)測(cè)定，甲菌液細(xì)胞密度小、細(xì)胞含解毒酶:乙1菌液細(xì)胞密度大、細(xì)胞不含解毒酶(過(guò)程l應(yīng)選擇菌液的細(xì)胞提取總RNA，理由是?過(guò)程?中，與引物結(jié)合的模版是?檢測(cè)酵母菌工程菌是否合成了AFB解毒酶，應(yīng)采用方法。1(4)選取不含AFB的飼料和某種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為材料，探究該AFB解毒酶在飼料中的解毒效果。實(shí)驗(yàn)11設(shè)計(jì)及測(cè)定結(jié)果見(jiàn)下表:據(jù)表回答問(wèn)題:?本實(shí)驗(yàn)的兩個(gè)自變量，分別為。?本實(shí)驗(yàn)中，反映AFB解毒酶的解毒效果的對(duì)照組是。1?經(jīng)測(cè)定，某污染飼料中AFB含量為100μg/kg，則每千克飼料應(yīng)添加克AFB1解毒酶(解1毒效果最好(同時(shí)節(jié)的了成本。(5)采用蛋白質(zhì)工程進(jìn)一步改造該酶的基本途徑是:從提高每的活性出發(fā)，設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列，找到相對(duì)應(yīng)的序列?！敬鸢浮?1)化學(xué)(2)(3)?甲甲菌液細(xì)胞的AFB解毒酶基因已轉(zhuǎn)錄生成了mRNA，而在乙菌液細(xì)胞中該基因未轉(zhuǎn)錄1?AFB解毒酶基因的cDNA.?抗原-抗體雜交1(4)?AFB1的有無(wú)和AFB1解毒酶的含量。?B組(或B組+A組)?5(5)脫氧核苷酸序列?！窘馕觥奎S曲霉毒素B1(AFB1)存在于被黃曲霉菌污染的飼料中，它可以通過(guò)食物鏈進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)并蓄積，引起瘤變。某些微生物能表達(dá)AFB1解毒酶(將該酶添加在飼料中可以降解AFB1，清除其毒性。(1)黃曲霉毒素B1(AFB1)是化學(xué)物質(zhì)，AFB1屬于化學(xué)類(lèi)致癌因子?！皾h水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)(2)AFB1能結(jié)合在DNA的G上(使該位點(diǎn)受損傷變?yōu)镚'，在DNA復(fù)制中，G'會(huì)與A配對(duì)?，F(xiàn)有受損傷部位的序列為，經(jīng)兩次復(fù)制后，該序列突變?yōu)椤?3)?在甲、乙條件下培養(yǎng)含AFB1解毒酶基因的菌株(經(jīng)測(cè)定(甲菌液細(xì)胞密度小、細(xì)胞含解毒酶:乙菌液細(xì)胞密度大、細(xì)胞不含解毒酶(過(guò)程l應(yīng)選擇甲菌液的細(xì)胞提取總RNA，理由是因?yàn)榧拙杭?xì)胞含解毒酶，意味著完成了基因的表達(dá)，所以應(yīng)選擇甲菌液的細(xì)胞提取總RNA?過(guò)程?中，根據(jù)圖示，可以看出與引物結(jié)合的模版是cDNA.?檢測(cè)酵母菌工程菌是否合成了AFB1解毒酶，檢測(cè)對(duì)象為蛋白質(zhì)，應(yīng)采用抗原-抗體雜交方法。(4)?本實(shí)驗(yàn)的兩個(gè)自變量，分別為AFB1的有無(wú)和AFB1解毒酶的含量。?本實(shí)驗(yàn)中(反映AFB1解毒酶的解毒效果的對(duì)照組是B組。?經(jīng)測(cè)定，某污染飼料中AFB1含量為100μg/kg，則每千克飼料應(yīng)添加5克AFB1解毒酶(AFB1的殘留量最少，解毒效果最好(繼續(xù)添加AFB1解毒酶解解毒效果不變，因此節(jié)約了成本。(5)采用蛋白質(zhì)工程進(jìn)一步改造該酶的基本途徑是:從提高酶的活性出發(fā)，設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列，找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列?！驹囶}點(diǎn)評(píng)】本題以“黃曲霉毒素B1”為材料背景，考查了致癌因子，DNA復(fù)制，基因工程，蛋白質(zhì)工程和實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，是一道很好的綜合題，考查學(xué)生的知識(shí)的理解和運(yùn)用能力，以及對(duì)實(shí)驗(yàn)分析能力和分析探究能力。難度適中。2012浙江6.天然的玫瑰沒(méi)有藍(lán)色花，這是由于缺少控制藍(lán)色色素合成的基因B，而開(kāi)藍(lán)色花的矮牽牛中存在序列已知的基因B?，F(xiàn)用基因工程技術(shù)培育藍(lán)玫瑰，下列操作正確的是()A.提取矮牽牛藍(lán)色花的mRNA，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄獲得互補(bǔ)的DNA，再擴(kuò)增基因BB.利用限制性核酸內(nèi)切酶從開(kāi)藍(lán)色花矮牽牛的基因文庫(kù)中獲取基因BC.利用DNA聚合酶將基因B與質(zhì)粒連接后導(dǎo)入玫瑰細(xì)胞D.將基因B直接導(dǎo)入大腸桿菌，然后感染并轉(zhuǎn)入玫瑰細(xì)胞【解析】提取矮牽牛藍(lán)色花的mRNA，逆轉(zhuǎn)錄得到DNA，然后擴(kuò)增，可獲得大量的基因B，A正確;從基因文庫(kù)中獲取目的基因，只要根據(jù)目的基因的相關(guān)信息和基因文庫(kù)中的信息進(jìn)行篩選對(duì)比即可，不需要用限制酶進(jìn)行切割，B錯(cuò)誤;目的基因與質(zhì)粒的連接需要用DNA連接酶，而不是DNA聚合酶，C錯(cuò)誤;目的基因需要和運(yùn)載體連接后形成重組質(zhì)粒再導(dǎo)入，而且應(yīng)該用農(nóng)桿菌進(jìn)行感染，而不是大腸桿菌，D錯(cuò)誤。【答案】A【試題點(diǎn)評(píng)】本題主要考查基因工程，在這部分，工具酶的選擇和操作過(guò)程是?？純?nèi)容，難度適中。2012新課標(biāo)40、根據(jù)基因工程的有關(guān)知識(shí)，回答下列問(wèn)題:(1)限制性?xún)?nèi)切酶切割,,,分子后產(chǎn)生的片段，其末端類(lèi)型有和。(2)質(zhì)粒運(yùn)載體用EcoR?切割后產(chǎn)生的片段如下:為使運(yùn)載體與目的基因相連，含有目的基因的DNA除可用EcoR?切割外，還可用另一種限制性?xún)?nèi)切酶切割，該酶必須具有的特點(diǎn)是。(3)按其來(lái)源不同，基因工程中所使用的DNA連接酶有兩類(lèi)，即DNA連接酶和DNA連接酶。(4)反轉(zhuǎn)錄作用的模板是，產(chǎn)物是。若要在體外獲得大量反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，常采用技術(shù)?！皾h水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)(5)基因工程中除質(zhì)粒外，和也可作為運(yùn)載體。(6)若用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌，一般情況下，不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細(xì)胞，原因是?！敬鸢浮?1)黏性末端平末端(2)切割產(chǎn)生的DNA片段末端與EcoR?切割產(chǎn)生的相同(3)E?coliT4(4)mRNA(或RNA)cDNA(或DNA)PCR(5)噬菌體動(dòng)植物病毒(6)未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒(外源DNA)的能力極弱【解析】(1)當(dāng)限制酶在它識(shí)別序列的中心軸線(xiàn)兩側(cè)將DNA的兩條鏈分別切開(kāi)時(shí)，產(chǎn)生的是黏性末端，而當(dāng)限制酶在它識(shí)別序列的中心軸線(xiàn)處切開(kāi)時(shí)，產(chǎn)生的則是平末端。(2)為使運(yùn)載體與目的基因相連，不同的限制酶應(yīng)切割出相同的黏性末端，它們必須要能識(shí)別相同的核苷酸序列，并且使每條鏈中相同的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開(kāi)。(3)DNA連接酶，根據(jù)酶的來(lái)源不同，可以將這些酶分為兩類(lèi):一類(lèi)是從大腸桿菌中分離得到的，稱(chēng)為E?coliDNA連接酶;另一類(lèi)是從T4噬菌體中分離出來(lái)的，稱(chēng)為T(mén)4DNA連接酶。(4)反轉(zhuǎn)錄是以RNA為模版來(lái)合成DNA的過(guò)程?？梢栽隗w外短時(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增DNA的技術(shù)叫PCR(多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))(5)基因工程中除質(zhì)粒外，還有λ噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒等。2+(6)大腸桿菌細(xì)胞外有細(xì)胞壁和細(xì)胞膜，能阻止其他物質(zhì)的進(jìn)入，只能通過(guò)Ca處理細(xì)胞，使細(xì)胞處于能吸收周?chē)h(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，這種細(xì)胞稱(chēng)為感受態(tài)細(xì)胞?！驹囶}評(píng)價(jià)】通過(guò)基因工程的操作過(guò)程及基因工程的工具及工具酶的作用，考查學(xué)生識(shí)記能力與理解分析能力。難度較小。2012上海55(如圖18所示，若用兩種識(shí)別切割序列完全不同的限制酶E和F從基因組DNA上切下目的基因，并將之取代質(zhì)粒pZHZ1(3.7kb，1kb=1000對(duì)堿基)上相應(yīng)的E—F區(qū)域(0.2kb)，那么所形成的重組質(zhì)粒pZHZ2___________。A(既能被E也能被F切開(kāi)B(能被E但不能被F切開(kāi)C(既不能被E也不能被F切開(kāi)D(能被F但不能被E切開(kāi)【答案】55.A【解析】.用限制酶從基因組DNA上切下目的基因，并取代質(zhì)粒pZHZ1(3.7kb，1kb=1000對(duì)堿基)上相應(yīng)的E—F區(qū)域(0.2kb)，用DNA連接酶連接后形成重組質(zhì)粒，則在重組質(zhì)粒中仍然含有限制酶E和限制酶F的切割位點(diǎn)，形成的重組質(zhì)粒pZHZ2既能被E也能被F切開(kāi)，故本題選A。“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)2012上海56(已知在質(zhì)粒pZHZl中，限制酶G切割位點(diǎn)距限制酶E切割位點(diǎn)0(8kb，限制酶H切割位點(diǎn)距限制酶F切割位點(diǎn)O(5kb。若分別用限制酶G和H酶切兩份重組質(zhì)粒pZHZ2樣品，據(jù)表4所列酶切結(jié)果判斷目的基因的大小為kb;并將目的基因內(nèi)部的限制酶G和H切割位點(diǎn)標(biāo)注在圖19中。56.1.2見(jiàn)右圖【解析】56.根據(jù)題中信息，原來(lái)質(zhì)粒長(zhǎng)度為3.7kb切去EF之間的還有3.5kb，插入目的基因后構(gòu)成重組質(zhì)粒，重組質(zhì)粒長(zhǎng)度為1.6+3.1=1.2+3.5=4.7kb，可推導(dǎo)出目的基因長(zhǎng)度為1.2kb。重組質(zhì)粒中G的切割位點(diǎn)距E的切割位點(diǎn)0.8kb，單獨(dú)用限制酶G切割后產(chǎn)生1.6kb和3.1kb的兩種片段，說(shuō)明在重組質(zhì)粒中除了圖中標(biāo)示出來(lái)的G酶識(shí)別位點(diǎn)外，還有一個(gè)G酶識(shí)別位點(diǎn);H的酶切位點(diǎn)距F0.5kb，用H單獨(dú)酶切產(chǎn)生1.2kb和3.5kb兩種片段，說(shuō)明在重組質(zhì)粒中含有另外一個(gè)H的酶切位點(diǎn)，根據(jù)題中信息提示“將目的基因內(nèi)部的限制酶G和H的識(shí)別位點(diǎn)標(biāo)注在圖19中”，可確定在EF之間分別含有G和H的一個(gè)識(shí)別位點(diǎn)?？蓴喽℅的識(shí)別位點(diǎn)，在舉例E點(diǎn)右側(cè)0.8kb處，H的識(shí)別位點(diǎn)在距F左側(cè)0.7kb處。2012上海57(若想在山羊的乳汁中收獲上述目的基因的表達(dá)產(chǎn)物，則需將重組質(zhì)粒pZHZ2導(dǎo)入至山羊的______細(xì)胞中。若pZHZ2進(jìn)入細(xì)胞后插入在一條染色體DNA上，那么獲得轉(zhuǎn)基因純合子山羊的方式是__________。57.受精卵轉(zhuǎn)基因山羊間相互交配【解析】57.將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞中，通常以受精卵作為受體細(xì)胞，當(dāng)受精卵發(fā)育成山羊后，在雌性山羊的乳汁中可以提取到目的基因的表達(dá)產(chǎn)物。重組質(zhì)粒插入在一條染色體DNA上，可通過(guò)雌雄轉(zhuǎn)基因山羊雜交的方法來(lái)獲取轉(zhuǎn)基因純合子山羊。2012廣東28((16分)子葉黃色(Y，野生型)和綠色(y，突變型)是孟德?tīng)栄芯康耐愣瓜鄬?duì)性狀之一。野生型豌豆成熟后，子葉由綠色變?yōu)辄S色。1)在黑暗條件下，野生型和突變型豌豆的葉片總?cè)~綠素含量的變化見(jiàn)圖10。其中，反映突變型豌(豆葉片總?cè)~綠素含量變化的曲線(xiàn)是____________?！皾h水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)Yy(2)Y基因和y基因的翻譯產(chǎn)物分別是SGR蛋白和SGR蛋白，其部分氨基酸序列見(jiàn)圖11。據(jù)圖Y11推測(cè)，Y基因突變?yōu)閥基因的原因是發(fā)生了堿基對(duì)的_______和_______。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，SGR蛋白y和SGR蛋白都能進(jìn)入葉綠體?？赏茰y(cè)，位點(diǎn)_______的突變導(dǎo)致了該蛋白的功能異常，從而使該蛋白調(diào)控葉綠素降解的能力減弱，最終使突變型豌豆子葉和葉片維持“常綠”。3)水稻Y基因發(fā)生突變，也出現(xiàn)了類(lèi)似的“常綠”突變植株y2，其葉片衰老后仍為綠色。為驗(yàn)證水(稻Y基因的功能，設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)完善。(一)培育轉(zhuǎn)基因植株:?(植株甲:用含有空載體的農(nóng)桿菌感染________的細(xì)胞，培育并獲得純合植株。?(植株乙:________，培育并獲得含有目的基因的純合植株。(二)預(yù)測(cè)轉(zhuǎn)基因植株的表現(xiàn)型:植株甲:________維持“常綠”;植株乙:________。(三)推測(cè)結(jié)論:________?！敬鸢浮?1)A(2)替換增加?(3)(一)突變植株y2用含有Y基因的農(nóng)桿菌感染純合突變植株y2(二)能不能維持“常綠”(三)Y基因能使子葉由綠色變?yōu)辄S色【解析】(1)根據(jù)題干所給信息“野生型豌豆成熟后，子葉由綠色變?yōu)辄S色”，可推測(cè)出野生型豌豆成熟后，子葉發(fā)育成的葉片中葉綠素含量降低。分析圖10，B從第六天開(kāi)始總?cè)~綠素含量明顯下降，因此B代表野生型豌豆，A為突變型豌豆。yY(2)根據(jù)圖11可以看出，突變型的SGR蛋白和野生型的SGR有3處變異，?處氨基酸由T變成S，?處氨基酸由N變成K，可以確定是基因相應(yīng)的堿基對(duì)發(fā)生了替換，?處多了一個(gè)氨基酸，所以可以Y確定是發(fā)生了堿基對(duì)的增添;從圖11中可以看出SGR蛋白的第12和38個(gè)氨基酸所在的區(qū)域的功能是引yY導(dǎo)該蛋白進(jìn)入葉綠體，根據(jù)題意，SGR和SGR都能進(jìn)入葉綠體，說(shuō)明?、?處的變異沒(méi)有改變其功能;y所以突變型的SGR蛋白功能的改變就是由?處變異引起的。(3)本實(shí)驗(yàn)通過(guò)具體情境考查對(duì)照實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)能力。欲通過(guò)轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)驗(yàn)證Y基因“能使子葉由綠色變?yōu)辄S色”的功能，首先應(yīng)培育純合的常綠突變植株y2，然后用含有Y基因的農(nóng)桿菌感染純合的常綠突變植株y2，培育出含有目的基因的純合植株觀察其葉片顏色變化。為了排除農(nóng)桿菌感染對(duì)植株的影響，應(yīng)用含有空載體的農(nóng)桿菌感染常綠突變植株y2作為對(duì)照?！驹囶}點(diǎn)評(píng)】本題考查生物體的變異、遺傳定律的綜合應(yīng)用、遺傳學(xué)的探究實(shí)驗(yàn)等內(nèi)容和學(xué)生提取信息的能力，難度中等。2012江蘇32.(9分)圖1表示含有目的基因D的DNA片段長(zhǎng)度(bp即堿基對(duì))和部分堿基序列，“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)圖2表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列?，F(xiàn)有MspI、BamHI、MboI、SmaI4種限制性核酸內(nèi)切酶，它????們識(shí)別的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別為CCGG、GGATCC、GATC、CCCGGG。請(qǐng)回答下列問(wèn)題(1)圖1的一條脫氧核苷酸鏈中相鄰兩個(gè)堿基之間依次由連接。(2)若用限制酶SmaI完全切割圖1中DNA片段，產(chǎn)生的末端是末端，其產(chǎn)物長(zhǎng)度為。(3)若圖1中虛線(xiàn)方框內(nèi)的堿基對(duì)被T-A堿基對(duì)替換，那么基因D就突變?yōu)榛騞。從雜合子中分離出圖1及其對(duì)應(yīng)的DNA片段，用限制酶SmaI完全切割，產(chǎn)物中共有種不同長(zhǎng)度的DNA片段。(4)若將圖2中質(zhì)粒和目的基因D通過(guò)同種限制酶處理后進(jìn)行連接，形成重組質(zhì)粒，那么應(yīng)選用的限制酶是。在導(dǎo)入重組質(zhì)粒后，為了篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌，一般需要用添加的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。經(jīng)檢測(cè)，部分含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌菌株中目的基因D不能正確表達(dá)，其最可能的原因是?！敬鸢浮?1)脫氧核糖、磷酸、脫氧核糖(2)平537bp、790bp、661bp(3)4(4)BamHI抗生素B同種限制酶切割形成的末端相同，部分目的基因D與質(zhì)粒反向鏈接【解析】(1)DNA單鏈中相鄰兩個(gè)堿基之間通過(guò)“脫氧核糖—磷酸—脫氧核糖”連接。(2)SmaI識(shí)別的序列為GGGCCC，切割后會(huì)產(chǎn)生平末端;圖1所示的DNA分子中含有兩個(gè)SmaI的識(shí)別位點(diǎn)，第一個(gè)識(shí)別位點(diǎn)在左端534bp序列向右三個(gè)堿基對(duì)的位置;第二個(gè)識(shí)別位點(diǎn)在右端658bp序列向左三個(gè)堿基對(duì)的位置，從這兩個(gè)位點(diǎn)切割后產(chǎn)生的DNA片段長(zhǎng)度分別為534+3，796-3-3，658+3，即得到的DNA片段長(zhǎng)度分別為537bp、790bp和661bp。(3)在雜合子體內(nèi)含有基因D和基因d，基因D的序列中含有兩個(gè)識(shí)別位點(diǎn)，經(jīng)過(guò)SmaI完全切割會(huì)產(chǎn)生537bp、790bp和661bp三種不同長(zhǎng)度的片段，基因d的序列中含有一個(gè)識(shí)別位點(diǎn)，經(jīng)過(guò)切割后會(huì)產(chǎn)生1327bp和661bp兩種長(zhǎng)度的片段，綜上，雜合子中分離到該基因的DNA片段經(jīng)過(guò)切割后會(huì)產(chǎn)生4種不同長(zhǎng)度的片段。(4)能夠獲取目的基因并切開(kāi)質(zhì)粒的限制酶有識(shí)別序列為GGATCC的BamHI和識(shí)別序列為GATC的MboI，若使用MboI會(huì)同時(shí)破壞質(zhì)粒中的抗生素A抗性基因和抗生素B抗性基因，所以要用BamHI來(lái)切割目的基因和質(zhì)粒，切割后保留了完整的抗生素B抗性基因，便于篩選出含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌。因?yàn)槟康幕蚝瓦\(yùn)載體是用同種限制酶切割的，目的基因兩端的末端和質(zhì)粒切割后的兩個(gè)末端都能進(jìn)行互補(bǔ)，可能出現(xiàn)目的基因反向連接在運(yùn)載體上的情況，導(dǎo)致基因D不能正確表達(dá)?！驹囶}點(diǎn)評(píng)】本題主要考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，主要基因工程的基本操作過(guò)程限制酶的作用、目的基因的檢測(cè)和篩選等。尤其本題中所涉及的限制酶的內(nèi)容，難度大，要求能準(zhǔn)確分析其產(chǎn)物的長(zhǎng)度。學(xué)生必須具備很好的識(shí)圖、分析推理能力才能成功作答。2012福建32(【生物—現(xiàn)代生物科技專(zhuān)題】必答題(10分)肺細(xì)胞中的let-7基因表達(dá)減弱，癌基因RAS表達(dá)增強(qiáng)，會(huì)引發(fā)肺癌。研究人員利用基因工程技術(shù)將let-7基因?qū)敕伟┘?xì)胞實(shí)現(xiàn)表達(dá)，發(fā)現(xiàn)肺癌細(xì)胞的增殖受到抑制。該基因工程技術(shù)基本流程如圖,?！皾h水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)請(qǐng)回答:(,)進(jìn)行過(guò)程?時(shí)，需用酶切開(kāi)載體以插入let-7基因。載體應(yīng)用RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，以驅(qū)動(dòng)let-7基因轉(zhuǎn)錄，該部位稱(chēng)為。(,)進(jìn)行過(guò)程?時(shí)，需用酶處理貼附在培養(yǎng)皿壁上的細(xì)胞，以利于傳代培養(yǎng)。(,)研究發(fā)現(xiàn)，let-7基因能影響癌基因RAS的表達(dá)，其影響機(jī)理如圖,。據(jù)圖分析，可從細(xì)胞提取進(jìn)行分子雜交，以直接檢測(cè)let-7基因是否轉(zhuǎn)錄。肺癌細(xì)胞增殖受到抑制，可能是由于細(xì)胞中(RASmRNA/RAS蛋白)含量減少引起的。【答案】(10分)(1)限制性核酸內(nèi)切酶(或限制)啟動(dòng)子(2)胰蛋白(3)RNARAS蛋白【解析】(1)過(guò)程?表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，在該過(guò)程中需要用限制酶對(duì)載體進(jìn)行切割以便于目的基因的插入(限制性核酸內(nèi)切酶，簡(jiǎn)稱(chēng)限制酶，寫(xiě)其他的不得分);啟動(dòng)子是一段特殊的DNA序列，是RNA聚合酶結(jié)合和識(shí)別的位點(diǎn)，RNA聚合酶結(jié)合到該位點(diǎn)，可驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄過(guò)程。(2)過(guò)程?表示動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，培養(yǎng)過(guò)程中出現(xiàn)接觸抑制后可以用胰蛋白酶處理，使之分散成單個(gè)的細(xì)胞，之后分裝到其他培養(yǎng)瓶里面進(jìn)行傳代培養(yǎng)。(3)判斷目的基因是否在受體細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄，可用分子雜交技術(shù)來(lái)進(jìn)行，從細(xì)胞中提取mRNA和用放射性同位素或者熒光標(biāo)記的目的基因單鏈DNA片段進(jìn)行雜交。根據(jù)題中信息“肺組織細(xì)胞中的let-7基因表達(dá)減弱，癌基因RAS表達(dá)就增強(qiáng)，引發(fā)肺癌”導(dǎo)入let7基因后，肺癌細(xì)胞受到抑制，說(shuō)明RAS基因表達(dá)減弱，導(dǎo)致細(xì)胞中的RAS蛋白質(zhì)含量減少進(jìn)而導(dǎo)致癌細(xì)胞受抑制?！驹囶}點(diǎn)評(píng)】本題主要考查選修3中有關(guān)基因工程和細(xì)胞工程中的知識(shí)，涉及的知識(shí)點(diǎn)主要有表達(dá)載體的構(gòu)建.目的基因的檢測(cè).動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等。試題難度不大。2012安徽31((24分)甲型血友病是由X染色體上的隱性基因?qū)е碌倪z傳病(H對(duì)h為顯性)。圖1中兩個(gè)家系都有血友病發(fā)病史，III2和III3婚后生下一個(gè)性染色體組成是XXY的非血友病兒子(IV2)，家系中的其他成員性染色體組成均正常?！皾h水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)圖1(1)根據(jù)圖1，(填“能”或“不能”)確定IV2兩條X染色體的來(lái)源;III4與正常女子結(jié)婚，推斷其女兒患血友病的概率是。(2)兩個(gè)家系的甲型血友病均由凝血因子VIII(簡(jiǎn)稱(chēng)F8，即抗血友病球蛋白)基因堿基對(duì)缺失所致。為探明IV2的病因，對(duì)家系的第III、IV代成員F8基因的特異片段進(jìn)行了PCR擴(kuò)增，其產(chǎn)物電泳結(jié)果如圖2所示，結(jié)合圖I，推斷III3的基因型是。請(qǐng)用圖解和必要的文字說(shuō)明IV2非血友病XXY的形成原因。(7)現(xiàn)III3再次懷孕，產(chǎn)前診斷顯示胎兒(IV3)細(xì)胞的染色體為46，XY;F8基因的PCR檢測(cè)結(jié)果如圖2所示。由此建議III3。圖2(4)補(bǔ)給F8可治療甲型血友病。采用凝膠色譜法從血液中分離純化F8時(shí)，在凝膠裝填色譜柱后，需要用緩沖液處理較長(zhǎng)時(shí)間，其目的是;若F8比某些雜蛋白先收集到，說(shuō)明F8的相對(duì)分子質(zhì)量較這些雜蛋白。(5)利用轉(zhuǎn)基因豬乳腺生物反應(yīng)器可生產(chǎn)F8。要使乳腺細(xì)胞合成F8，構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)，必須將F8基因cDNA與豬乳腺蛋白基因的等調(diào)控組件重組在一起。F8基因cDNA可通過(guò)克隆篩選獲得，該cDNA比染色體上的F8基因短，原因是該cDNA沒(méi)有。(6)為獲得更多的轉(zhuǎn)基因母豬，可以采用體細(xì)胞克隆技術(shù)，將純合轉(zhuǎn)基因母豬的體細(xì)胞核注入，構(gòu)成重組胚胎進(jìn)行繁殖。【答案】(1)不能0Hh(2)XX，遺傳圖解如下:“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)h產(chǎn)生異常的XY說(shuō)明:?2精子和?產(chǎn)生正常的卵細(xì)3HHh胞X結(jié)合而成XXY在III3形成卵細(xì)胞過(guò)程中的減數(shù)第二次分裂后期，帶有基因H的姐妹染色單體移向細(xì)胞的同一極，形HHHHHH成XX卵細(xì)胞，XX卵細(xì)胞與正常精子結(jié)合形成XXY受精卵。(3)終止妊娠。(4)洗滌平衡凝膠，并使凝膠裝填緊密大(5)啟動(dòng)子內(nèi)含子(6)去核的卵母細(xì)胞【解析】HHHhH(1)因?yàn)?2的染色體組成可能是XX，也可能是XXY，所以不能確定，?4的基因型為XY，所以后代女性中沒(méi)有患病個(gè)體。Hh(2)由圖可知第一條帶是顯性，第二條帶是隱性，所以?3基因型為XX，圖解如下:在III3形成卵細(xì)胞過(guò)程中的減數(shù)第二次分裂后期，帶有基因H的姐妹染色單體移向細(xì)胞的同一極，形HHHHHH成XX卵細(xì)胞，XX卵細(xì)胞與正常精子結(jié)合形成XXY受精卵。(3)由題可知，IV3是血友病患者，所以建議III3終止妊娠。(4)采用凝膠色譜法從血液中分離純化F8時(shí)，在凝膠裝填色譜柱后，需要用緩沖液處理較長(zhǎng)時(shí)間，其目的是洗滌平衡凝膠，并使凝膠裝填緊密;若F8比某些雜蛋白先收集到，說(shuō)明F8的相對(duì)分子質(zhì)量較這些雜蛋白較大。(5)要使乳腺細(xì)胞合成F8，構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)，必須將F8基因cDNA與豬乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子和“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)終止子等調(diào)控組件重組在一起。F8基因cDNA可通過(guò)克隆篩選獲得，該cDNA比染色體上的F8基因短，原因是該cDNA沒(méi)有內(nèi)含子。(6)為獲得更多的轉(zhuǎn)基因母豬，可以采用體細(xì)胞克隆技術(shù)，將純合轉(zhuǎn)基因母豬的體細(xì)胞核注入去核卵細(xì)胞，構(gòu)成重組胚胎進(jìn)行繁殖。【試題點(diǎn)評(píng)】本題考查了遺傳規(guī)律，減數(shù)分裂，血紅蛋白的提取，基因工程，胚胎工程;遺傳規(guī)律是近幾年的考查熱點(diǎn)，但每年考查的都有區(qū)別，在解遺傳題時(shí)，要記住一些常用解題方法，減數(shù)分裂的圖示是高中生物的基本技能，會(huì)畫(huà)，能理解，能夠?qū)z傳規(guī)律有個(gè)很高的認(rèn)識(shí)，遺傳實(shí)質(zhì)都體現(xiàn)在其中。至于選修部分，基因工程、胚胎工程是近幾年的考查熱點(diǎn)，而血紅蛋白的提取，是今年生物考試說(shuō)明中有，意味著我們要認(rèn)真閱讀考試說(shuō)明?？傮w來(lái)說(shuō)，該題是本試卷中的難題，原因是，遺傳本身對(duì)于學(xué)生來(lái)說(shuō)就難，加之選修部分題目較偏僻，從該題可以看出，安徽高考對(duì)于選修的考查，與必修部分建立了聯(lián)系，進(jìn)行了學(xué)科內(nèi)的綜合，希望學(xué)生在備考的過(guò)程中多加注意。((6分)高中生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中，在接種時(shí)不進(jìn)行嚴(yán)格無(wú)菌操作對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響最大的一項(xiàng)是2012北京5A(將少許干酵母加入到新鮮的葡萄汁中B(將毛霉菌液接種在切成小塊的鮮豆腐上C(將轉(zhuǎn)基因植物葉片接種到無(wú)菌培養(yǎng)基上D(將土壤浸出液涂布在無(wú)菌的選擇培養(yǎng)基上【答案】C【解析】植物組織培養(yǎng)中的外植體必須在嚴(yán)格的無(wú)菌環(huán)境中進(jìn)行培養(yǎng)，而且操作的各環(huán)節(jié)都要注意嚴(yán)格滅菌，必須無(wú)菌操作，C對(duì);葡萄酒的制作原理是利用酵母菌無(wú)氧發(fā)酵時(shí)產(chǎn)生酒精，在無(wú)氧條件下，大部分微生物都不能生存，隨著發(fā)酵的進(jìn)行，酒精度增大，也有殺菌的作用;而制作腐乳時(shí)，主要是將毛霉等微生物接種在豆腐上，此過(guò)程的加鹽、加鹵湯等操作均有一定的殺菌作用;選擇培養(yǎng)基只能允許目的菌生長(zhǎng)，會(huì)抑制其他雜菌生長(zhǎng)，因此不是嚴(yán)格無(wú)菌操作時(shí)A、B、D選項(xiàng)的情況下比C選項(xiàng)的受影響要小?！驹囶}點(diǎn)評(píng)】本題考查對(duì)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用、微生物的培養(yǎng)和植物培養(yǎng)技術(shù)中無(wú)菌操作的掌握。重點(diǎn)要求考生熟悉相應(yīng)操作過(guò)程中的注意事項(xiàng)，這種類(lèi)型的題目考查的內(nèi)容相對(duì)固定，重點(diǎn)放在細(xì)節(jié)，難度中等。2012海南31.【生物——選修3:現(xiàn)代生物科技專(zhuān)題】(15分).已知甲種農(nóng)作物因受到乙種昆蟲(chóng)危害而減產(chǎn)，乙種昆蟲(chóng)食用某種原核生物分泌的丙種蛋白質(zhì)后死亡。因此，可將丙種蛋白質(zhì)基因轉(zhuǎn)入到甲種農(nóng)作物體內(nèi)，使甲種農(nóng)作物獲得抗乙種昆蟲(chóng)危害的能力?；卮鹣铝袉?wèn)題:(1)為了獲得丙中蛋白質(zhì)的基因，在已知丙種蛋白質(zhì)氨基酸序列的基礎(chǔ)上，推測(cè)出丙中蛋白質(zhì)的序列，據(jù)此可利用方法合成目的基因。獲得丙中蛋白質(zhì)的基因還可用、方法。(2)在利用上述丙中蛋白質(zhì)基因和質(zhì)粒載體構(gòu)建重組質(zhì)粒的過(guò)程中，常需使用酶和。(3)將含有重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌與甲種農(nóng)作物的愈傷組織共培養(yǎng)，篩選出含有丙種蛋白質(zhì)的愈傷組織，由該愈傷組織培養(yǎng)成的再生植株可抵抗的危害。(4)若用含有重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌直接感染甲種農(nóng)作物植株葉片傷口，則該植株的種子(填“含有”或“不含”)丙種蛋白質(zhì)基因。【答案】(15分)(1)基因化學(xué)基因文庫(kù)PCR(每空2分，共8分，其他合理答案也給分)(2)限制DNA連接(每空1分，共2分)“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)(3)乙種昆蟲(chóng)(2分)(4)不含(3分)?！窘馕觥?1)在已知蛋白質(zhì)的氨基酸序列的情況下，可根據(jù)氨基酸和堿基的對(duì)應(yīng)關(guān)系，推出合成該蛋白質(zhì)的基因序列，然后用DNA合成儀通過(guò)化學(xué)方法來(lái)合成目的基因。此外也可以從基因文庫(kù)中獲取目的基因，也可通過(guò)PCR方法獲取目的基因。(2)構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，需要用限制酶將運(yùn)載體切開(kāi)，并用DNA連接酶將目的基因連接到運(yùn)載體上，從而構(gòu)建基因表達(dá)載體。(3)愈傷組織中含有丙蛋白，說(shuō)明丙蛋白的基因得到了表達(dá)，在培養(yǎng)成的植株體內(nèi)也含有丙蛋白，乙昆蟲(chóng)食用丙蛋白后會(huì)死亡，則該植株可抵抗乙昆蟲(chóng)的危害。(4)直接用含有重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌直接感染甲種農(nóng)作物植株葉片傷口，僅僅在該葉片內(nèi)部分細(xì)胞中能合成丙蛋白，該植株的種子和其他的營(yíng)養(yǎng)器官均不含有重組質(zhì)粒，也就不含有丙中蛋白質(zhì)的基因?！驹囶}點(diǎn)評(píng)】本題以農(nóng)作物蟲(chóng)害防治為背景考查基因工程的操作流程、基因工程所用的工具、獲取目的基因的方法、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、目的基因的篩選等內(nèi)容，難度不大。2011重慶31.(16分)擬南芥是遺傳學(xué)研究的模式植物，某突變體可用于驗(yàn)證相關(guān)的基因的功能。野生型擬南芥的種皮為深褐色(TT)，某突變體的種皮為黃色(tt),下圖是利用該突變體驗(yàn)證油菜種皮顏色基因(T)功能的流程示意圖。n(1)與擬南芥t基因的mRNA相比，若油菜T基因的mRNA中UGA變?yōu)?,,，其末端序列成為“,n,,,,,,,,,,,,,,,,,,”，則T比,多編碼個(gè)氨基酸(起始密碼子位置相n同，,,,、,,,為終止密碼子)。(,)圖中?應(yīng)為。若?不能在含抗生素,,,的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，則原因是.若?的種皮顏色為，則說(shuō)明油菜基因與擬南芥T基因的功能相同。(3)假設(shè)該油菜T基因連接到擬南芥染色體并替換其中一個(gè)t基因，則?中進(jìn)行減數(shù)分裂的細(xì)胞在n聯(lián)會(huì)時(shí)的基因型為;同時(shí)，?的葉片卷曲(葉片正常對(duì)葉片卷曲為顯性，且與種皮性狀獨(dú)立遺傳)，用它與種皮深褐色、葉片正常的雙雜合體擬南芥雜交，其后代中所占比例最小的個(gè)體表現(xiàn)型為;取?的莖尖培養(yǎng)成16顆植株，其性狀通常(填“不變”或“改變”)。(4)所得的轉(zhuǎn)基因擬南芥與野生型擬南芥(填是或者不是)同一個(gè)物種?！敬鸢浮?16分)(1)2(2)重組質(zhì)粒(重組DNA分子);重組質(zhì)粒未導(dǎo)入;深褐色(3)TTtt;黃色正常;黃色卷曲;不變nn(4)是【解析】本題以一個(gè)陌生的基因工程材料考查相關(guān)知識(shí)，包括基因的功能、遺傳規(guī)律、基因工程操作步驟以及生物進(jìn)化的物種鑒定。對(duì)題干信息的獲取、理解以及對(duì)陌生材料的快速適應(yīng)將是考生的最大障礙。(1)Ta基因的mRNA末端序列為“-AGCGCGACCAGACUCUAA”，它是t基因的mRNA的UGA變成了AGA，所以t基因的mRNA的末端序列應(yīng)為“-AGCGCGACCUGA”。所以Ta基因比t基因編碼的蛋白質(zhì)中就多AGA“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)和CUC對(duì)應(yīng)的2個(gè)氨基酸。(2)目的基因與運(yùn)載體(質(zhì)粒)結(jié)合形成重組質(zhì)粒;質(zhì)粒上有抗生素kan抗性基因，導(dǎo)入了質(zhì)粒或重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌都能在含抗生素kan的培養(yǎng)基上生長(zhǎng);擬南芥T基因控制其種皮深褐色。(3)轉(zhuǎn)基因擬南芥體細(xì)胞基因型為T(mén)at,減數(shù)分裂細(xì)胞聯(lián)會(huì)是已完成DNA復(fù)制，所以此時(shí)細(xì)胞中相應(yīng)基因組成為T(mén)aTatt;假設(shè)控制擬南芥葉片形狀的基因?yàn)锽、b，則Tatbb×TtBb?3/8深褐色正常、3/8深褐色卷曲、1/8黃色正常、1/8黃色卷曲;植物組織培養(yǎng)屬于無(wú)性繁殖技術(shù)，其特點(diǎn)是保持親本的一切性狀。(4)轉(zhuǎn)基因擬南芥與野生型擬南芥之間沒(méi)有生殖隔離，屬于同一物種。2011江蘇14((2分)關(guān)于現(xiàn)代生物技術(shù)應(yīng)用的敘述，錯(cuò)誤的是()A(蛋白質(zhì)工程可合成自然界中不存在的蛋白質(zhì)B(體細(xì)胞雜交技術(shù)可用于克隆動(dòng)物和制備單克隆抗體C(植物組織培養(yǎng)技術(shù)可用于植物莖尖脫毒D(動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的培育【答案】C2011江蘇33((8分)請(qǐng)回答基因工程方面的有關(guān)問(wèn)題:(1)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，其原理與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制類(lèi)似(如下圖所示)。圖中引物為單鏈DNA片段，它是子鏈合成延伸的基礎(chǔ)。?從理論上推測(cè)，第四輪循環(huán)產(chǎn)物中含有引物A的DNA片段所占的比例為。?在第輪循環(huán)產(chǎn)物中開(kāi)始出現(xiàn)兩條脫氧核苷酸鏈等長(zhǎng)的DNA片段。(2)設(shè)計(jì)引物是PCR技術(shù)關(guān)鍵步驟之一。某同學(xué)設(shè)計(jì)的兩組引物(只標(biāo)注了部分堿基序列)都不合理(如下圖)，請(qǐng)分別說(shuō)明理由。?1組:;??第2組:。(3)PCR反應(yīng)體系中含有熱穩(wěn)定DNA聚合酶，下面的表達(dá)式不能正確反映DNA聚合酶的功能，這是因?yàn)椤?4)用限制酶EcoRV、Mbol單獨(dú)或聯(lián)合切割同一種質(zhì)粒，得到的DNA片段長(zhǎng)度如下圖(1kb即1000個(gè)堿基對(duì))，請(qǐng)?jiān)诖痤}卡的指定位置畫(huà)出質(zhì)粒上EcoRV、Mbol的切割位點(diǎn)?！敬鸢浮?3((8分)“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)(1)?15/16?三(2)?引物I和引物?局部發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì)而失效?引物I’自身折疊后會(huì)出現(xiàn)局部堿基互補(bǔ)配對(duì)而失效(3)DNA聚合酶只能將單個(gè)脫氧核苷酸連續(xù)結(jié)合到雙鏈DNA片段的引物鏈上(4)見(jiàn)右圖2011福建32.[生物----現(xiàn)代生物科技專(zhuān)題]必答題(10分)一對(duì)表現(xiàn)型正常的夫婦，生了一個(gè)鐮刀型細(xì)胞貧血癥(常染色體隱性遺傳病)患兒。在他們欲生育第二胎時(shí)，發(fā)現(xiàn)妻子的雙側(cè)輸卵管完全堵塞，不能完成體內(nèi)受精。醫(yī)生為該夫婦實(shí)施了體外受精和產(chǎn)前基因診斷，過(guò)程如右圖。請(qǐng)回答:(1)過(guò)程?是指在體外進(jìn)行的處理，從而使精子與卵子結(jié)合形成受精卵;過(guò)程?稱(chēng)為。(2)在對(duì)胎兒進(jìn)行鐮刀型細(xì)胞貧血癥的產(chǎn)前基因診斷時(shí)，要先從羊水中的胎兒細(xì)胞提取物質(zhì)?進(jìn)行PCR擴(kuò)增。然后用?對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行切割，產(chǎn)生多個(gè)片段的Mst酶切產(chǎn)物。據(jù)此判斷，?是一種酶。Mst(3)不同長(zhǎng)度的酶切產(chǎn)物在電泳時(shí)移動(dòng)的速率不同，形成不同的電泳條帶。該家庭成員的鐮刀型細(xì)胞貧血癥基因分析的電泳帶譜如?，據(jù)此判斷胎兒為(正常/患者/攜帶者)?！敬鸢浮?10分)(1)精子獲能;胚胎移植(2)DNA;限制酶(3)正常2011北京31.(16分)T-DNA可隨機(jī)插入植物基因組內(nèi)，導(dǎo)致被插入基因發(fā)生突變。用此方法誘導(dǎo)擬南芥產(chǎn)生突變體的過(guò)程如下:種植野生型擬南芥，待植株形成花蕾時(shí)，將地上部分浸入農(nóng)桿菌(其中的T-DNA上帶有抗除草劑基因)懸浮液中以實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)化。在適宜條件下培養(yǎng)，收獲種子(稱(chēng)為T(mén)代)。1(1)為促進(jìn)植株側(cè)枝發(fā)育以形成更多的花蕾，需要去除，因?yàn)楹笳弋a(chǎn)生的會(huì)抑制側(cè)芽的生長(zhǎng)。(2)為篩選出已轉(zhuǎn)化的個(gè)體，需將T代播種在含的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，成熟后自交，收獲種子(稱(chēng)1為T(mén)代)。2(3)為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將T代播種在含2的培養(yǎng)基上，獲得所需個(gè)體。(4)經(jīng)過(guò)多代種植獲得能穩(wěn)定遺傳的抗鹽突變體。為確定抗鹽性狀是否由單基因突變引起，需將該突變體與植株進(jìn)行雜交，再自交代后統(tǒng)計(jì)性狀分離比。(5)若上述T-DNA的插入造成了基因功能喪失，從該突變體的表現(xiàn)型可以推測(cè)野生型基因的存在導(dǎo)致植物的抗鹽性?！皾h水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)(6)根據(jù)T-DNA的已知序列，利用PCR技術(shù)可以擴(kuò)增出被插入的基因片段。其過(guò)程是:提取植株的DNA，用限制酶處理后，再用將獲得的DNA片段連接成環(huán)(如右圖)以此為模板，從圖中A、B、C、D四種單鏈DNA片斷中選取作為引物進(jìn)行擴(kuò)增，得到的片段將用于獲取該基因的全序列信息。【答案】(16分)(1)頂芽;生長(zhǎng)素(2)(一定濃度的)除草劑(3)(一定濃度的)鹽(4)野生型(5)降低(6)突變體;DNA連接酶;B、C2011廣東27.(16分)登革熱病毒感染蚊子后，可在蚊子唾液腺中大量繁殖。蚊子在叮咬人時(shí)將病毒傳染給人，可引起病人發(fā)熱、出血甚至休克?？茖W(xué)家擬用以下方法控制病毒的傳播。(1)將S基因轉(zhuǎn)入蚊子體內(nèi)，使蚊子的唾液腺細(xì)胞大量表達(dá)S蛋白，該蛋白可以抑制登革熱病毒的復(fù)制。為了獲得轉(zhuǎn)基因蚊子，需要將攜帶S基因的載體導(dǎo)入蚊子的______細(xì)胞。如果轉(zhuǎn)基因成功，在轉(zhuǎn)基因蚊子體內(nèi)可檢測(cè)出_______、__________和__________。(2)科學(xué)家獲得一種顯性突變蚊子(AABB)，A、B基因位于非同源染色體上，只有A基因或B基因的胚胎致死。若純合的雄蚊(AABB)與野生型雌蚊(aabb)交配，F(xiàn)群1體中A基因頻率是________，F(xiàn)群體中A基因頻率是__________。2(3)將S基因分別插入到A、B基因的緊鄰位置(如圖11)，將該純合的轉(zhuǎn)基因雄蚊釋放到野生型群體中，群體中蚊子體內(nèi)病毒的平均數(shù)目會(huì)逐代_________，原因是_______________。【答案】(16分)(1)受精卵;S基因、由S基因轉(zhuǎn)錄的mRNA;S蛋白(2)50%;60%(3)減少;S基因表達(dá)的S蛋白會(huì)抑制登革熱病毒復(fù)制2011四川5.(6分)北極比目魚(yú)中有抗凍基因，其編號(hào)的抗凍蛋白具有11個(gè)氨基酸的重復(fù)序列，該序列重復(fù)次數(shù)越多，抗凍能力越強(qiáng)，下圖是獲取轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株的過(guò)程示意圖，有關(guān)敘述正確的是A過(guò)程?獲取的目的基因，可用于基因工程和比目魚(yú)基因組測(cè)序B多個(gè)抗凍基因編碼區(qū)依次相連成能表達(dá)的新基因，不能得到抗凍性增強(qiáng)的抗凍蛋白，C過(guò)程?構(gòu)成的重組質(zhì)粒缺乏標(biāo)記基因，需要轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌才能進(jìn)行篩選D應(yīng)用DNA探針技術(shù)，可以檢測(cè)轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其完全表達(dá)【答案】(6分)B【解析】過(guò)程1獲得的目的基因已不含非編碼區(qū)和內(nèi)含子，因此不能用于比目魚(yú)基因組測(cè)序，因此A錯(cuò)。導(dǎo)入農(nóng)桿菌是為了擴(kuò)增和更易導(dǎo)入蕃茄細(xì)胞，C錯(cuò)。DNA探針技術(shù)不能檢測(cè)基因是否完全表達(dá)，目的基因的完全表達(dá)應(yīng)該檢測(cè)表達(dá)產(chǎn)物蛋白質(zhì)，D錯(cuò)。2011上海(九)回答下列有關(guān)基因工程的問(wèn)題。(10分)57(基因工程中使用的限制酶，其特點(diǎn)是,,,,,,,,,,,,,,?！皾h水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)rr下圖四種質(zhì)粒含有E1和E2兩種限制酶的識(shí)別，Ap表示抗青霉素的抗性基因，Tc表示抗四環(huán)素的抗性基因。r58(將兩端用E1切開(kāi)的Tc基因與用E1切開(kāi)的質(zhì)粒X,1混合連接，連接后獲得的質(zhì)粒類(lèi)型有,,,,,,,,,。(可多選)A(X,1B(X,2C(X,3D(X,459(若將上圖所示X,1、X,2、X,3、X,4四種質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌，然后分別涂布在含有青霉素或四環(huán)素的兩種培養(yǎng)基上。在這兩種培養(yǎng)上均不能生長(zhǎng)的大腸桿菌細(xì)胞類(lèi)型有,,,,,,,,,、,,,,,,,,,。r60(如果X,1用E1酶切，產(chǎn)生850對(duì)堿基和3550對(duì)堿基兩種片段:那么質(zhì)粒X,2(Tc基因的長(zhǎng)度為1200對(duì)堿基)用E2酶切后的片段長(zhǎng)度為,,,,,,,,,對(duì)堿基。r61(若將外源的Tc基因兩端用E2切開(kāi)，再與用E2切開(kāi)的X,1混合連接，并導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞，結(jié)果顯示，含X,4的細(xì)胞數(shù)與含X,1的細(xì)胞數(shù)之比為1:3，增大DNA連接酶用量能否提高上述比值,,,。原因是,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,?！敬鸢浮?10分)57.特異性地識(shí)別和切割DNA(1分)58.ABC(2分)59.無(wú)質(zhì)粒細(xì)胞(1分);含X,3的細(xì)胞(1分)60.4750(2分)61.不能(1分);DNA連接酶對(duì)DNA片段沒(méi)有選擇性/兩段DNA末端相同(2分)2011天津1((6分)下列有關(guān)酶的敘述正確的是()A(酶的基本組成單位是氨基酸和脫氧核糖核苷酸B(酶通過(guò)為反應(yīng)物供能和降低活化能來(lái)提高化學(xué)反應(yīng)速率C(在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中，胰蛋白酶可將組織分散成單個(gè)細(xì)胞D(DNA連接酶可連接DNA雙鏈的氫鍵，使雙鏈延伸【答案】(6分)C2011安徽31.?.(9分)家蠶細(xì)胞具有高效表達(dá)外源基因能力。將人干擾素基因?qū)爰倚Q細(xì)胞并大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取干擾素用于制藥。(1)進(jìn)行轉(zhuǎn)基因操作前，需用___________酶短時(shí)處理幼蠶組織，以便獲得單個(gè)細(xì)胞。(2)為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達(dá)，需要把來(lái)自cDNA文庫(kù)的干擾素基因片段正確插入表達(dá)載體的_________和___________之間。(3)采用PCR技術(shù)可驗(yàn)證干擾素基因是否已經(jīng)導(dǎo)入家蠶細(xì)胞。該P(yáng)CR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)該包含:2+擴(kuò)增緩沖液(含Mg)、水，4種脫氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和_________________。(4)利用生物反應(yīng)器培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時(shí)，貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生接觸抑制。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中，這樣可以_________________增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量，也有利于空氣交換。【答案】(9分)(1)胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)(2)啟動(dòng)子終止子“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)(3)TaqDNA聚合酶;對(duì)干擾素基因特異性的DNA引物對(duì)(4)增大細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)的附著面積【解析】考查的知識(shí)點(diǎn)為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和基因工程.(1)為了使組織分散開(kāi)為單個(gè)細(xì)胞通常用胰蛋白酶或膠原蛋白酶。(2)啟動(dòng)子位于目的基因的首端，終止子位于目的基因的尾端。(3)PCR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)擴(kuò)增緩沖液(含Mg2+)、水，4種脫氧核糖苷酸、模板DNA、TaqDNA聚合酶、兩種引物。(4)細(xì)胞離體培養(yǎng)時(shí)通常表現(xiàn)出:貼壁生長(zhǎng)和接觸抑制，多孔的中空薄壁小玻璃珠能增大貼壁生長(zhǎng)的附著面積，增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量.2011山東35.(8分)【生物—現(xiàn)代生物科技專(zhuān)題】人類(lèi)疾病的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型常用于致病機(jī)理的探討及治療藥物的篩選。利用正常大鼠制備遺傳性高血壓轉(zhuǎn)基因模型大鼠的流程如圖所示。(1)卵母細(xì)胞除從活體輸卵管中采集外，還可從已處死的雌鼠________中獲取。(2)圖中的高血壓相關(guān)基因作為_(kāi)_________，質(zhì)粒作為_(kāi)________,二者需用________切割后連接成重組載體，該過(guò)程與質(zhì)粒上含有________有關(guān)。(3)子代大鼠如果________和__________，即可分別在分子水平和個(gè)體水平上說(shuō)明高血壓相關(guān)基因已成功表達(dá)，然后可用其建立高血壓轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型。(4)在上述轉(zhuǎn)基因大鼠的培育過(guò)程中，所用到的主要胚胎工程技術(shù)是___________、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植?！敬鸢浮?8分)(1)卵巢(2)目的基因運(yùn)載體同一種限制酶限制酶識(shí)別位點(diǎn)(3)檢測(cè)到相應(yīng)蛋白質(zhì)出現(xiàn)高血壓(4)體外受精2011浙江6.(6分)將ada(腺苷酸脫氨酶基因)通過(guò)質(zhì)粒pET28b導(dǎo)入大腸桿菌并成功表達(dá)腺苷酸脫氨酶。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.每個(gè)大腸桿菌細(xì)胞至少含一個(gè)重細(xì)胞質(zhì)粒B.每個(gè)重組質(zhì)粒至少含一個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)C.每個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)至少插入一個(gè)adaD.每個(gè)插入的ada至少表達(dá)一個(gè)腺苷酸脫氨酶分子【答案】(6分)C2010山東35.(8分)【生物-現(xiàn)代生物科技專(zhuān)題】胚胎工程是一項(xiàng)綜合性的動(dòng)物繁育技術(shù)，可在畜牧業(yè)和制藥業(yè)等領(lǐng)域發(fā)揮重要作用。下圖是通過(guò)胚胎工程培育試管牛的過(guò)程?！皾h水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)(1)從良種母牛采集的卵母細(xì)胞，都需要進(jìn)行體外培養(yǎng)，其目的是_____;從良種公牛采集的精子需_____后才能進(jìn)行受精作用。(2)在體外培養(yǎng)受精卵時(shí)，除了給予一定量的O以維持細(xì)胞呼吸外，還需要提供____氣體以維持____。2(3)圖中過(guò)程A稱(chēng)為_(kāi)____，它在胚胎工程中的意義在于_____。(4)研制能夠產(chǎn)生人類(lèi)白細(xì)胞介素的牛乳腺生物反應(yīng)器，需將目的的基因?qū)肱Ｊ芫?，最常?獲得轉(zhuǎn)基因母牛后，如果_____即說(shuō)明目的基因已經(jīng)表達(dá)。的導(dǎo)入方法是____【答案】(8分)(1)使卵母細(xì)胞成熟(或使卵母細(xì)胞獲得受精能力);獲能(2)CO;培養(yǎng)液(基)的pH2(3)胚胎移植提高優(yōu)良母畜的繁殖率。(4)顯微注射法牛奶中含有人類(lèi)白細(xì)胞介素(或:牛乳腺細(xì)胞已合成人類(lèi)白細(xì)胞介素)2010海南26((18分),選修模塊3:現(xiàn)代生物科技專(zhuān)題,請(qǐng)回答胚胎工程和基因工程方面的問(wèn)題:(1)應(yīng)用胚胎工程技術(shù)可以培育出“試管?！?。試管牛的培育需經(jīng)過(guò)體外受精、、,,,,,以及在母體中發(fā)育和產(chǎn)出等過(guò)程。(2)在“試管?！钡呐嘤^(guò)程中，要使精子和卵母細(xì)胞在體外成功結(jié)合，需要對(duì)精子進(jìn)行處理，使其。另外，培養(yǎng)的卵母細(xì)胞需要發(fā)育至減數(shù)第二次分裂的中期，該時(shí)期在顯微鏡下可觀察到次級(jí)卵母細(xì)胞和。(3)通常奶牛每次排出一枚卵母細(xì)胞，采用激素處理可使其一次排出多枚卵母細(xì)胞，常使用的激素是。(4)利用基因工程可以獲得轉(zhuǎn)基因牛，從而改良奶牛的某些性狀?；蚬こ痰乃膫€(gè)基本操作步驟是、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、和。若要獲得的轉(zhuǎn)基因牛分泌的乳汁中含有人干擾素，則所構(gòu)建的基因表達(dá)載體必須包括:某種牛乳腺分泌蛋白基因及其啟動(dòng)子、,,,,、,,,,、,,,,和復(fù)制原點(diǎn)等。將該基因表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞所采用的方法是,,,,,(顯微注射法、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法)，為獲得能大量產(chǎn)生人干擾素的轉(zhuǎn)基因牛，該基因表達(dá)載體應(yīng)導(dǎo)入的受體細(xì)胞是,,,,,(受精卵、乳腺細(xì)胞)?！敬鸢浮?18分)(1)早期胚胎培養(yǎng)(1分);胚胎移植(2分)(2)獲能;第一極體(每空1分，共2分)(3)促性腺激素(其他合理答案也給分)(2分)(4)獲取目的基因(2分);將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞(2分);目的基因的檢測(cè)與鑒定(2分);人干擾素基因(或目的基因)(1分);終止子(1分);標(biāo)記基因(1分);顯微注射法(1分);受精卵(1分)2010上海(七)分析有關(guān)基因表達(dá)的資料，回答問(wèn)題。(9分)取同種生物的不同類(lèi)型細(xì)胞，檢測(cè)其基因表達(dá)，結(jié)果如右圖。“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)45.基因1,8中有一個(gè)是控制核糖體蛋白質(zhì)合成的基因，則該基因最有可能是基因。46.圖所示細(xì)胞中功能最為近似的是細(xì)胞。A.1與6B.2與5C.2與3D.4與547.判斷圖中細(xì)胞功能近似程度的依據(jù)是。48.現(xiàn)欲研究基因1和基因7連接后形成的新基因的功能，導(dǎo)入質(zhì)粒前，用限制酶切割的正確位置是。右上圖是表達(dá)新基因用的質(zhì)粒的示意圖，若要將新基因插入到質(zhì)粒上的A處，則切割基因時(shí)可用的限49.制酶是。A.Hind?B.EcoRIC.EcoBD.PstI50.新基因與質(zhì)粒重組后的DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞的概率很小，因此需進(jìn)行，才能確定受體細(xì)胞已含有目的基因。51.在已確定含有目的基因的受體細(xì)胞中，若質(zhì)粒的抗青霉素基因缺失了兩個(gè)堿基，將這樣的受體細(xì)胞接種到含有青霉素的培養(yǎng)基中，該細(xì)胞中可能出現(xiàn)的結(jié)果是()A.抗青霉素基因不能轉(zhuǎn)錄B.基因1和7沒(méi)有表達(dá)C.基因1和7不能連接D.質(zhì)粒上的酶切位置發(fā)生改變【答案】(9分)45.246.A47.表達(dá)的相同基因最多，差異表達(dá)的基因最少48.B49.C50.篩選51.BD2010全國(guó)卷?5.(6分)下列敘述符合基因工程概念的是()A(B淋巴細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞融合，雜交瘤細(xì)胞中含有B淋巴細(xì)胞中的抗體基因B(將人的干擾素基因重組到質(zhì)粒后導(dǎo)入大腸桿菌，獲得能產(chǎn)生人干擾素的菌株C(用紫外線(xiàn)照射青霉菌，使其DNA發(fā)生改變，通過(guò)篩選獲得青霉素高產(chǎn)菌株D(自然界中天然存在的噬菌體自行感染細(xì)菌后其DNA整合到細(xì)菌DNA上【答案】(6分)B2010天津7.?.(14分)“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)R下圖是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線(xiàn)。圖中tet表示四環(huán)素抗性基因，Ramp表示氨芐青霉素抗性金銀，BamHI、HindIII、SmaI直線(xiàn)所示為三種限制酶的酶切位點(diǎn)。據(jù)圖回答:(1)圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體，需用限制酶同時(shí)酶切載體和人乳鐵蛋白基因。篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含的培養(yǎng)基上進(jìn)行。(2)能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列是(填字母代號(hào))。RRA.啟動(dòng)子B.tetC.復(fù)制原點(diǎn)D.amp(3)過(guò)程?可采用的操作方法是(填字母代號(hào))。A.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法B.大腸桿菌轉(zhuǎn)化法C.顯微注射法D.細(xì)胞融合(4)過(guò)程?可采用的生物技術(shù)是。(5)對(duì)早期胚胎進(jìn)行切割，經(jīng)過(guò)程?可獲得多個(gè)新個(gè)體。這利用了細(xì)胞的性。(6)為檢測(cè)人乳鐵蛋白是否成功表達(dá)，可采用(填字母代號(hào))技術(shù)。A.核酸分子雜交B.基因序列分析C.抗原—抗體雜交D.PCR【答案】?.(14分)(1)Hind?和BamH?;氨芐青霉素(2)A(3)C(4)胚胎移植技術(shù)(5)全能(6)C【解析】I(1)據(jù)圖，僅將人乳鐵蛋白基因切割出來(lái)，需要在人乳鐵蛋白基因的左側(cè)用BanHIR切割，右側(cè)用HindIII切割。當(dāng)人乳鐵蛋白基因和質(zhì)粒連接成重組質(zhì)粒后，TET基因被人乳R鐵蛋白基因隔開(kāi)，不是完整的，而anp基因是完整的，所以篩選含有重組載體的大腸肝菌首先需要字含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上進(jìn)行。(2)基因表達(dá)的調(diào)控序列在啟動(dòng)子上。(3)將重組質(zhì)粒導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞，常采用顯微鏡的方法。(4)過(guò)程?的左側(cè)是早期胚胎，右側(cè)是代孕牛，過(guò)程?采用的生物技術(shù)是胚胎移植。(5)將細(xì)胞培養(yǎng)為個(gè)體，利用了細(xì)胞的全能性。(6)檢測(cè)目的基因在手提細(xì)胞中是否表達(dá)，常采用抗原-抗體雜交技術(shù)?！皾h水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)2010福建32.[生物-現(xiàn)代生物科技專(zhuān)題](10分)紅細(xì)胞生成素(EPO)是體內(nèi)促進(jìn)紅細(xì)胞生成的一種糖蛋白，可用于治療腎衰性貧血等疾病。由于天然EPO來(lái)源極為有限，目前臨床上使用的紅細(xì)胞生成素主要來(lái)自于基因工程技術(shù)生產(chǎn)的重組人紅細(xì)胞生成素(rhEPO)，其簡(jiǎn)要生產(chǎn)流程如右圖。請(qǐng)回答:(1)圖中?所指的是技術(shù)。(2)圖中?所指的物質(zhì)是，?所指的物質(zhì)是。(3)培養(yǎng)重組CHO細(xì)胞時(shí)，為便于清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害，應(yīng)定期更換。(4)檢測(cè)rhEPO的體外活性需要抗rhEPO的單克隆抗體。分泌該單克隆抗體的細(xì)胞，可由rhEPO免疫過(guò)的小鼠B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合而成。【答案】(10分)(1)PCR2)mRNA;rhEPO((3)培養(yǎng)液(4)雜交瘤2010浙江(6分)2.在用基因工程技術(shù)構(gòu)建抗除草劑的轉(zhuǎn)基因煙草過(guò)程中，下列操作錯(cuò)誤的是()A.用限制性核酸內(nèi)切酶切割煙草花葉病毒的核酸B.用DNA連接酶連接經(jīng)切割的抗除草劑基因和載體C.將重組DNA分子導(dǎo)入原生質(zhì)體D.用含除草劑的培養(yǎng)基篩選轉(zhuǎn)基因煙草細(xì)胞【答案】(6分)A【解析】本題考查基因工程的有關(guān)知識(shí)，基因工程的一般過(guò)程:?用限制性核酸內(nèi)切酶切割含目的基因的DNA分子(除草劑基因)和運(yùn)載體(質(zhì)粒)，?用DNA連接酶連接切割好的目的基因和運(yùn)載體?重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞，因?yàn)槭侵参锟梢哉f(shuō)是原生質(zhì)體?用相應(yīng)的試劑和病原體帥選轉(zhuǎn)基因細(xì)胞?用植物組織培養(yǎng)技術(shù)抗除草劑的轉(zhuǎn)基因煙草(表達(dá))。所以答案A。2010江蘇27((8分)下表中列出了幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)，圖l、圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)(1)一個(gè)圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)Sma?切割前后，分別含有個(gè)游離的磷酸基團(tuán)。(2)若對(duì)圖中質(zhì)粒進(jìn)行改造，插入的Sma?酶切位點(diǎn)越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越。(3)用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用Sma?切割，原因是。(4)與只使用EcoRI相比較，使用BamH?和Hind?兩種限制酶同時(shí)處理質(zhì)粒、外源DNA的優(yōu)點(diǎn)在。于可以防止(5)為了獲取重組質(zhì)粒，將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合，并加入酶。(6)重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了。(7)為了從cDNA文庫(kù)中分離獲取蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因，將重組質(zhì)粒導(dǎo)入喪失吸收蔗糖能力的大腸桿菌突變體，然后在的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，以完成目的基因表達(dá)的初步檢測(cè)?！敬鸢浮?8分)(1)0、2(2)高(3)Sma?會(huì)破壞質(zhì)粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因(4)質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化(5)DNA連接(6)鑒別和篩選含有目的基因的細(xì)胞(7)蔗糖為唯一含碳營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)【解析】本題考查基因工程的限制性?xún)?nèi)切酶的作用特點(diǎn)(1)質(zhì)粒切割前是雙鏈環(huán)狀DNA分子，所有磷酸基團(tuán)參與形成磷酸二酯鍵，故不含游離的磷酸基團(tuán)。從圖1可以看出，質(zhì)粒上只含有一個(gè)Sma?的切點(diǎn)，因此被改酶切割后，質(zhì)粒變?yōu)榫€(xiàn)性雙鏈DNA分子，因每條鏈上含有一個(gè)游離的磷酸基團(tuán)，因此切割后含有兩個(gè)游離的磷酸基團(tuán)。(2)由題目可知，Sma?識(shí)別的DNA序列只有G和C，而G和C之間可以形成三個(gè)氫鍵，A和T之間可以形成二個(gè)氫鍵，所以Sma?酶切位點(diǎn)越多，熱穩(wěn)定性就越高(3)質(zhì)?？股乜剐曰?yàn)闃?biāo)記基因，由圖2可知，標(biāo)記基因和外源DNA目的基因中均含有Sma?酶切位點(diǎn)，都可以被Sma?破壞，故不能使用該酶剪切含有目的基因的DNA(4)只使用EcoRI，則質(zhì)粒和目的基因兩端的粘性末端相同，用連接酶連接時(shí)，會(huì)產(chǎn)生質(zhì)粒和目的基因自身連接物，而利用BamH?和Hind?剪切時(shí)，質(zhì)粒和目的基因兩端的粘性末端不同，用DNA連接酶連接時(shí)，不會(huì)產(chǎn)生自身連接產(chǎn)物。(5)質(zhì)粒和目的基因連接后獲得重組質(zhì)粒，該過(guò)程需要連接酶作用，故混合后加入DNA連接酶。(6)質(zhì)粒上的抗性基因?yàn)闃?biāo)記基因，用于鑒別和篩選含有重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞。“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)(7)將重組質(zhì)粒導(dǎo)入喪失吸收蔗糖能力的大腸桿菌突變體后，含有重組質(zhì)粒的個(gè)體才能吸收蔗糖，因此可利用蔗糖作為唯一碳源的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)受體細(xì)胞，含有重組質(zhì)粒的細(xì)胞才能存活，不含有重組質(zhì)粒的因不能獲得碳源而死亡，從而達(dá)到篩選目的。2009年浙江3((6分)下列關(guān)于基因工程的敘述，錯(cuò)誤的是()((A(目的基因和受體細(xì)胞均可來(lái)自動(dòng)、植物或微生物B(限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶是兩類(lèi)常用的工具酶C(人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原無(wú)生物活性D(載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞和促進(jìn)目的基因的表達(dá)【答案】D【解析】基因工程中目的基因和受體細(xì)胞均可來(lái)自動(dòng)、植物或微生物;常用的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶;人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原無(wú)生物活性，只有經(jīng)過(guò)一定的物質(zhì)激活以后，才有生物活性。載體上的抗性基因主要是有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞，不能促進(jìn)目的基因的表達(dá)。所以D錯(cuò)誤。2009年山東35.(8分)(生物一現(xiàn)代生物科技專(zhuān)題)人類(lèi)在預(yù)防與診療傳染性疾病過(guò)程中，經(jīng)常使用疫苗和抗體。已知某傳染性疾病的病原體為RNA病毒，該病毒表面的A蛋白為主要抗原，且疫苗生產(chǎn)和抗體制備的流程之一如下圖:請(qǐng)回答:(1)過(guò)程?代表的是。(2)過(guò)程?構(gòu)建A基因表達(dá)載體時(shí)，必須使用和兩種工具酶。(3)過(guò)程?采用的實(shí)驗(yàn)技術(shù)是，獲得的X是。(4)對(duì)健康人進(jìn)行該傳染病免疫預(yù)防時(shí)，可選用圖中基因工程生產(chǎn)的所制備的疫苗。對(duì)該傳染病疑似患者確診時(shí)，可以疑似患者體內(nèi)分離病毒，與已知病毒進(jìn)行比較;或用圖中的進(jìn)行特異性結(jié)合檢測(cè)?！敬鸢浮?8分)(1)逆(反)轉(zhuǎn)錄(2)限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶、限制性?xún)?nèi)切酶)DNA連接酶(兩空可以互換)(3)細(xì)胞融合雜交瘤細(xì)胞(4)A蛋白核酸(基因)序列抗A蛋白的單克隆抗體【解析】本題以圖展示了疫苗的生產(chǎn)和單克隆抗體的制備的過(guò)程，考察了中心法則、基因工程、動(dòng)物細(xì)胞工程等現(xiàn)代生物科技。(1)中心法則中，對(duì)于少數(shù)的以RNA為遺傳物質(zhì)的病毒，其遺傳信息的傳遞過(guò)程需要補(bǔ)充的過(guò)程有RNA的逆轉(zhuǎn)錄和RNA的復(fù)制的過(guò)程，圖中過(guò)程?正代表的是逆轉(zhuǎn)錄的過(guò)程(2)基因工程的步驟是:目的基因的提取——構(gòu)建基因表達(dá)載體——導(dǎo)入受體細(xì)胞——目的基因的檢測(cè)和表達(dá)，其中構(gòu)建基因表達(dá)載體中需要限制酶來(lái)切割以獲取目的基因，同時(shí)需要相同的限制酶切割運(yùn)載體以獲取與目的基因相同的黏性末端，再通過(guò)DNA連接酶連接目的基因和運(yùn)載體。(3)過(guò)程?是將瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合的過(guò)程，獲得的叫雜交瘤細(xì)胞，其具備了瘤細(xì)胞的無(wú)限增“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)殖的特性和B淋巴細(xì)胞的產(chǎn)生抗體的特性，從而制備單克隆抗體。(4)本題考察了免疫預(yù)防的操作過(guò)程，以及欲確診疑似患者而采取的方法。本題中提示該RNA病毒表面的A蛋白為主要的抗原，故而可選用通過(guò)基因工程生產(chǎn)的A蛋白制備疫苗;確診時(shí)為判斷該病毒是否為題目中的RNA病毒，可以進(jìn)行核酸序列的比對(duì)，也可以利用單克隆抗體具備特異性，利用抗A蛋白的特異性單克隆抗體通過(guò)能否特異性結(jié)合判斷病毒表面是否有A蛋白的存在進(jìn)一步進(jìn)行檢測(cè)是否為目的RNA病毒。2009年四川31((20分)大豆是兩性花植物。下面是大豆某些性狀的遺傳實(shí)驗(yàn):(1)大豆子葉顏色(BB表現(xiàn)深綠;Bb表現(xiàn)淺綠;bb呈黃色，幼苗階段死亡)和花葉病的抗性(由R、r基因控制)遺傳的實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表:組合母本父本F的表現(xiàn)型及植株數(shù)1一子葉深綠不抗病子葉淺綠抗病子葉深綠抗病220株;子葉淺綠抗病217株子葉深綠抗病110株;子葉深綠不抗病109株;二子葉深綠不抗病子葉淺綠抗病子葉淺綠抗病108株;子葉淺綠不抗病113株?組合一中父本的基因型是_____________，組合二中父本的基因型是_______________。?用表中F的子葉淺綠抗病植株自交，在F的成熟植株中，表現(xiàn)型的種類(lèi)有_____，12其比例為_(kāi)__________。?用子葉深綠與子葉淺綠植株雜交得F，F(xiàn)隨機(jī)交配得到的F成熟群體中，B基因的基因頻率為_(kāi)________。112?將表中F的子葉淺綠抗病植株的花粉培養(yǎng)成單倍體植株，再將這些植株的葉肉細(xì)胞制成不同的原生質(zhì)1體。如要得到子葉深綠抗病植株，需要用_________________基因型的原生質(zhì)體進(jìn)行融合。?請(qǐng)選用表中植物材料設(shè)計(jì)一個(gè)雜育種方案，要求在最短的時(shí)間內(nèi)選育出純合的子葉深綠抗病大豆材料。(2)有人試圖利用細(xì)菌的抗病毒基因?qū)Σ豢共〈蠖惯M(jìn)行遺傳改良，以獲得抗病大豆品種。?構(gòu)建含外源抗病毒基因的重組DNA分子時(shí)，使用的酶有______________________。?判斷轉(zhuǎn)基因大豆遺傳改良成功的標(biāo)準(zhǔn)是__________________________________，具體的檢測(cè)方法_________________________。(3)有人發(fā)現(xiàn)了一種受細(xì)胞質(zhì)基因控制的大豆芽黃突變體(其幼苗葉片明顯黃化，長(zhǎng)大后與正常綠色植株無(wú)差異)。請(qǐng)你以該芽黃突變體和正常綠色植株為材料，用雜交實(shí)驗(yàn)的方法，驗(yàn)證芽黃性狀屬于細(xì)胞質(zhì)遺傳。(要求:用遺傳圖解表示)【答案】(20分)(1)?BbRR;BbRr(2分)?子葉深綠抗病:子葉深綠不抗病:子葉淺綠抗病:子葉淺綠不抗病(1分);3:1:6:2(2分)?80,(2分)?BR與BR、BR與Br(3分)?用組合一的父本植株自交，在子代中選出子葉深綠類(lèi)型即為純合的子葉深綠抗病大豆材料。(2分)(2)?限制性?xún)?nèi)切酶和DNA連接酶(1分)?培育的植株具有病毒抗體(1分)用病毒分別感染轉(zhuǎn)基因大豆植株和不抗病植株，觀察比較植株的抗病性(2分)(3)(4分)2009福建32.(10分)轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育過(guò)程如圖所示。質(zhì)粒上有Pst?、Sma?、EcoR?、Apa“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)?等四種限制酶切割位點(diǎn)。請(qǐng)回答:(1)構(gòu)建含抗病基因的表達(dá)載體A時(shí)，應(yīng)選用限制酶，對(duì)進(jìn)行切割。(2)培養(yǎng)基中的卡那霉素會(huì)抑制香蕉愈傷組織細(xì)胞的生長(zhǎng)，欲利用該培養(yǎng)篩選已導(dǎo)入抗病基因的香蕉細(xì)胞，應(yīng)使基因表達(dá)載體A中含有，作為標(biāo)記基因。(3)香蕉組織細(xì)胞具有，因此，可以利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)入抗病基因的香蕉組織細(xì)胞培育成植株。圖中?、?依次表示組織培養(yǎng)過(guò)程中香蕉組織細(xì)胞的?！敬鸢浮?10分)1)PstI、EcoRI含抗病基因的DNA、質(zhì)粒((2)抗卡那霉素基因(3)全能性脫分化、再分化2009年天津8((30分)水稻種子中70,的磷以植酸形式存在。植酸易同鐵、鈣等金屬離子或蛋白質(zhì)結(jié)合排出體外，是多種動(dòng)物的抗?fàn)I養(yǎng)因子;同時(shí)，排出的大量磷進(jìn)入水體易引起水華。(1)磷元素除了形成植酸外，還可以出現(xiàn)在下列_____________分子或結(jié)構(gòu)中(多選)。A.核糖B.ATPC.核糖體D.核膜(2)種植蘆葦能有效抑制水華的發(fā)生，表明蘆葦與引起水華的藻類(lèi)關(guān)系是_______。(3)植酸酶可降解植酸，在谷物類(lèi)飼料中添加植酸酶可提高飼料的_____________利用率。(4)酵母菌中植酸的活性較高。下圖是從不同類(lèi)型酵母菌的發(fā)酵液中提取植酸酶的工藝流程。據(jù)圖回答:?植酸酶________________(?/?)屬于分泌蛋白。?若植酸酶?和?的肽鏈組成不同，其差異體現(xiàn)在________________。?提純的植酸酶需做活性條件測(cè)定。右圖為測(cè)定結(jié)果。圖中的自變量可為_(kāi)_____________________(答一種);因變量可以通過(guò)測(cè)定______________________來(lái)表示。(5)為從根本上解決水稻中的高植酸問(wèn)題，可將植酸酶基因?qū)胨?，培育低植酸轉(zhuǎn)基因水稻品種。下圖是獲取植酸酶基因的流程。據(jù)圖回答:“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)?圖中基因組文庫(kù)____________(小于,等于,大于)cDNA文庫(kù)。?B過(guò)程需要的酶是______________;A、C過(guò)程中_____________(可以,不可以)使用同一種探針篩選含目的基因的菌株。?目的基因?和?除從構(gòu)建的文庫(kù)中分離外，還可以分別利用圖中___________。和_____________為模板直接進(jìn)行PCR擴(kuò)增，該過(guò)程中所用酶的顯著特點(diǎn)是_________________。(6)已獲得的轉(zhuǎn)植酸酶基因水稻品系植酸含量低，但易感病，下圖為選育低植酸抗病水稻品種的過(guò)程。圖中兩對(duì)相對(duì)性形狀分別由兩對(duì)基因控制，并獨(dú)立遺傳。采用上圖育種過(guò)程，需從________代開(kāi)始篩選，經(jīng)篩選淘汰后，在選留的植株中低植酸抗病純合體所占的比例是______________。選留植株多代自交，經(jīng)篩選可獲得低植酸抗病性狀穩(wěn)定的品種?！敬鸢浮?30分)(1)BCD(2)競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系(3)營(yíng)養(yǎng)成分(4)?I;?氨基酸的種類(lèi)、數(shù)量和排列順序不同;?溫度(或PH)單位時(shí)間內(nèi)植酸的降解量(或植酸降解產(chǎn)物的生成量)(5)?大于;?逆轉(zhuǎn)錄酶可以;?DNAcDNA耐高溫(6)F1/92【解析】本題考查物質(zhì)的元素組成、生物的種間關(guān)系、蛋白質(zhì)、酶、基因工程、遺傳定律的相關(guān)知識(shí)，涉及的知識(shí)點(diǎn)較多，綜合性很強(qiáng)。?只有核糖中不含磷元素，ATP(磷酸基團(tuán))、核糖體(含RNA)、核膜(含磷脂)中均含有磷元素。(2)蘆葦能抑制水華的發(fā)生，表明蘆葦與水華的藻類(lèi)關(guān)系是競(jìng)爭(zhēng)。(3)植酸易同鐵、鈣等金屬離子或蛋白質(zhì)結(jié)合排出體外，是多種動(dòng)物的抗?fàn)I養(yǎng)因子，而植酸酶可降解植酸，因此在谷物類(lèi)飼料中添加植酸酶可提高飼料的營(yíng)養(yǎng)成分的利用率。(4)分析圖可知，植酸酶?需要經(jīng)過(guò)兩次離