凝血檢測質量保證課件

2024/5/12凝血檢測質量保證炮制雖繁必不敢省人工

品味雖貴必不敢減物力臨床實驗室的質量控制全面質量控制室內質控室內比對室間比對室間質評分析前質量控制分析后質量控制1、抗凝劑：109mmol/L枸櫞酸鈉抗凝。與鈣離子形成可溶性螯合物而起到抗凝作用有效阻止凝血因子FV、FVIII的降解不受肝素影響，以用于肝素治療的監(jiān)測EDTA：抑制或干擾纖維蛋白凝塊形成纖維蛋白單體聚合，對FV保護性差。肝素：可與AT-Ⅲ作用抑制凝血因子的反應。草酸鹽：與鈣離子形成不溶性沉淀物，影響血凝儀的光電終點。

分析前2、采血管順序（CLSIH3-A6）：①血培養(yǎng)管，②凝血項目管（如：藍帽）③含有或不含促凝劑、含有或不含分離膠的血清管（如：紅帽）④含有或不含分離膠的肝素血漿管（如：綠帽）⑤含有或不含分離膠的EDTA管（如：紫帽或珍珠色帽）⑥含酵解抑制劑管（如：灰帽）對于凝血項目該文件改變了第一管必須棄置的要求，當凝血管為第一管時，無論是正常人或口服華法令患者其PT或INR均不受影響，正常人的APTT不受影響。但是尚不知其它凝血項目是否受到影響，因此對其它凝血項目，還是建議第二管采集。分析前3、采血管：內壁應硅化，而且死腔量越小越好。4、采血量：通常按1：9的抗凝比例采血。但對于HCT＞55%的患者，血漿相對于抗凝劑量會減少，使凝血試驗的結果延長，應調整采血量。需取出抗凝劑量(ml)=0.3-[血量（ml）×0.00185×(100-HCT%)]5、標本送檢條件：室溫下2小時內送檢，低溫會損傷血小板活化因子，使PT結果降低。6、標本保存時間：2-8℃4小時，-20℃1周，-80℃6個月。7、凝血、溶血標本為不合格標本。分析前造成標本溶血的原因室內質控

室內質控的功能：查找分析測定中的誤差，即用室內質控物的檢測結果去確認常規(guī)標本檢測結果的有效性，如果確認通過，此時的常規(guī)標本檢驗結果才可用于疾病的診斷、治療及預后觀察等室內質控質控品的選擇

1.1檢測系統(tǒng)配套的質控品1.2第三方質控品1.3質控品要求自動質控！室內質控室內質控項目、質控頻度2.1室內質控項目PT、INR、APTT、Fbg、TT、DD、FDP2.2質控頻度允許CV建立與評估2012年凝血允許CV評估失控率儀器失控率項目失控率室內質控質控目標的確立失控限警告限室內質控質控靶值及SD的累積

4.1靶值設定？質控廠商提供的數(shù)據(jù)僅供參考！

不同儀器對同一批號質控的反應程度不一樣！

4.2SD設定？室內質控質控規(guī)則（Westgard多規(guī)則）/5.1警告：12s、10x、41s5.2失控：22s、13s、R4s室內質控6.室內質控月報表、失控處理記錄

允許誤差本室標準PT15%15%APTT15%15%TTNA15%FBG20%10%DD3SD20%室內比對1、頻率：每年2次。2、參與儀器：所有儀器，以參加EQA的儀器為參考儀器。3、執(zhí)行人員：當班人員、質控員；組長、主任簽字確認。4、比對血漿：收集高、中、低水平新鮮血漿共20份。5、比對項目：PT、INR、APTT、FBG、TT、DD。6、數(shù)據(jù)處理：錄入專用的EXCEL表格，統(tǒng)計r、bias%。7、判斷標準：PT、INR、APTT、FBG、DD各項r≥0.975，并且80%的樣本bias%在下列標準范圍內為合格。8、比對試驗不合格的儀器需啟用校準程序。室內比對********WFH衛(wèi)生部、北京市CAPWFH（世界血友病聯(lián)盟）EQASPT/INR、APTT、Fbg、TT（衛(wèi)生部，北京市）PT/INR、APTT、Fbg、DDimer、FDP、凝血因子、狼瘡抗凝物、蛋白S/C、AT-III、vWF：Ag室間質評室間質評室間質評室間質評失控處理********室間質評室間質評失控處理-1********室間質評室間質評失控處理-2********************室間質評室間質評失控處理-3APTT、TT無定標項目1、訂貨量；2、東西兩院保持批號一致；3、試劑更換批號后進行標本傳遞（質控品、標本），觀察批間差。2014/1/7PT舊試劑新試劑CS5100CA7000-2CA7000-3CA7000-4143.342.643.64043220.920.72219.720.9316.616.717.915.816.9436.435.235.433.735.5511.511.812.111.212.1

INR舊試劑新試劑CS5100CA7000-2CA7000-3CA7000-413.713.83.653.683.7221.821.861.831.791.8231.451.511.491.431.4843.133.152.963.063.0851.011.071.001.011.06室間質評標本傳遞舉例怎么來？怎么用？APTT≥100s或≤15s；Fbg≤1.0g/L；FDP≥40μg/ml，同時Fbg≤1.0g/L；PT≥70s或≤9s；TT≥150s；危急值分析后分析后華法林—凝血酶原時間（ProthrombinTime,PT）PT=各國貨幣INR=美金INR=（患者PT/MNPT）ISILocalISIISI值確定？ISI是什么：反映試劑對VitaminK依賴的凝血因子水平的敏感程度，通過國際參考品（Internationalreferencepreparation，IRP）來溯源。參考試劑BCA校正用戶所用批號的試劑LocalISI=MNPTPTINRISI預先ISI賦值的促凝血酶原活酶試劑，LocalISI校準。用戶預先測定MNPT計算MNPT和ISI值PT-INR系統(tǒng)校準LocalISI

MNPT3、凍干標準血漿1、儀器/廠商數(shù)據(jù)地域、人群差異2、凍干正常水平質控4、20例正常新鮮血漿PT幾何均數(shù)潛在問題：工作量較大LocalISI直接INR測定用5–6個濃度的認證血漿（不同系統(tǒng)的定值不一樣）產(chǎn)生本實驗室的校準線。使用本實驗的凝血活酶/聯(lián)合試劑測定認證血漿的PT值，將所得的結果和認證血漿的INR賦值繪成對數(shù)圖。可以用線性的或正交的回歸方法繪制校準線，從校準線上讀取患者的INR值。這種方法與ISI和正常人PT均值（MNPT）無關。所有的本地因素都被消除了。

給每個批號試劑校準INRMNPT2,03,04,05,01,010203040=1/ISIINRPT

(sec)PT-INR系統(tǒng)校準LocalISI用參考血漿對試劑進行定標作校準曲線，根據(jù)定標曲線直接得到INR室間的變異可以大大降低多點定標進行的校準更加精密準確所有的當?shù)匾蛩囟急幌薒ocalISI采用INR定值血漿校準當?shù)氐腜T/INR檢測系統(tǒng)，不僅使INR結果更加準確，而且加強了實驗室間的INR結果的一致性，使口服抗凝劑的監(jiān)測更加有效。LocalISI定標:PT-INR的標準化絕不僅僅是對某一儀器或某一試劑的校準，從實驗室角度出發(fā)是對整個系統(tǒng)（System）的標準化！“一個樣本，一個結果”，不同系統(tǒng)結果趨于一致。LocalISI性能驗證的目的確保正確的選擇實驗室方法，并在方法使用前進行充分、有效的評價，以保證方法的可靠性對實驗室正在使用的檢驗系統(tǒng)/方法進行定期的、有效的驗證，以保證所使用的檢驗系統(tǒng)/方法能夠滿足臨床和患者的需求，并保證檢驗系統(tǒng)/方法的可靠性定量方法的性能驗證精密度準確度評價線性攜帶污染方法學比較參考范圍驗證分析干擾及稀釋驗證性能驗證內容批內不精密度

參數(shù)PTAPTT TTFibD-dimerFDP水平1判定標準%2.002.005.004.005.005.00水平2判定標準%4.004.0010.008.0010.0010.00性能驗證內容日間精密度

參數(shù)PTAPTTTTFibD-dimerFDP判定標準CV≤%5.005.006.676.676.676.67性能驗證內容準確度：是測量結果中系統(tǒng)誤差與隨機誤差的綜合，表示測量結果與真值的一致程度。保證檢驗結果準確性最有效的手段是建立和保證檢驗結果的溯源性計算定值參考物質或校準品的測定值（測定三次取均值）與靶值的偏差判斷標準：小于1/2CLIA88允許變異性能驗證內容線性：選取一份接近預期上限的高值血漿樣本（H），分別按100%、90%、75%、50%、25%的比例進行稀釋，每個稀釋度重復測定2次，計算均值。將實測值與預測值作比較（偏離應小于10%），計算y=ax+b，驗證線性范圍。判斷結果：a值在1±0.1范圍內，相關系數(shù)R2≥0.95性能驗證內容攜帶污染：指分析物含量高的標本對分析物含量低的標本其測定結果的影響攜帶污染率=(L1-L3)/(H3-L3)*100% 攜帶污染率<±3%性能驗證內容

稀釋驗證：選取高值樣本，分別以儀器自動稀釋和手工法兩種方式，按照

原倍、1/2、1/4、1/8、1/16、1/32的比例進行稀釋，將兩次結果比較，偏離應小于10%。 性能驗證內容參考范圍驗證： 收集20例健康人血漿，年齡20-70歲，男10例，女10例 計算檢測系統(tǒng)的R值（R值=落在參考范圍內的樣本數(shù)/總樣本數(shù)）。要求R＞0.9性能驗證內容方法學比對：為保證檢驗結果的可比性，使用實驗室的不同分析系統(tǒng)和/或公認的參考方法同時檢測一批病人標本，從測定結果的差異了