醫(yī)學(xué)微生物學(xué)重點(diǎn)

緒論

微生物分三型八大類(lèi)

真核細(xì)胞型微生物(eukaryote)——細(xì)胞核分化程度高，有核膜和核仁，細(xì)胞器完整。如真

菌。

原核細(xì)胞型微生物(prokaryote)——細(xì)胞核的分化較低，僅有原始核，無(wú)核膜、核仁。細(xì)胞器

很不完善。DNA和RNA同時(shí)存在。這類(lèi)微生物眾多，有細(xì)菌、放線菌、支原體、衣原體、

立克次體、螺旋體。

非細(xì)胞型微生物(nonecell)——是最小的一類(lèi)微生物。無(wú)典型的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，只有核心和蛋白

衣殼，核酸類(lèi)型為DNA或RNA。只能在活細(xì)胞內(nèi)生長(zhǎng)繁殖。病毒屬之。

微生物在自然界是普遍存在的，和人類(lèi)的關(guān)系密切，大多數(shù)微生物是對(duì)人類(lèi)有意的，只

有少數(shù)的微生物多人有害。能引起人類(lèi)及動(dòng)物、植物疾病的微生物稱(chēng)為病原微生物。這部分

是醫(yī)學(xué)微生物學(xué)講述的部分。

第一章細(xì)菌的形態(tài)和結(jié)構(gòu)

第一節(jié)細(xì)菌的大小和形態(tài)

細(xì)菌(bacterium)

廣義——所有原核細(xì)胞型微生物(細(xì)菌、支原體衣原體、立克次體、螺旋體、放線菌)

共性：有細(xì)胞壁、原始核質(zhì)、二分裂、對(duì)抗生素敏感

狹義——專(zhuān)指其中的細(xì)菌

觀察細(xì)菌常用光學(xué)顯微鏡，其大小用測(cè)微尺在顯微鏡下進(jìn)行測(cè)量，以微米(um)為單位。不

同種類(lèi)的細(xì)菌大小不一，同一種細(xì)菌也因菌齡和環(huán)境因素的影響而有差異。

細(xì)菌按其外形,主要有球菌(coccus)、桿菌(bacillus)、螺形菌(spiralbacterium)。

球菌根據(jù)細(xì)菌分裂的平面和菌體之間的排列方式分雙球菌、鏈球菌和葡萄球菌等。

不同桿菌的大小、長(zhǎng)短、粗細(xì)很不一致

桿菌不同桿菌的大小、長(zhǎng)短、粗細(xì)很不一致

螺形菌根據(jù)菌體的彎曲分為弧菌和螺菌

第二節(jié)細(xì)菌的結(jié)構(gòu)

一、細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)

包括：細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、核質(zhì)

細(xì)胞壁是位于細(xì)菌細(xì)胞最外層，包繞在細(xì)胞膜周?chē)瑹o(wú)色透明、堅(jiān)韌而富有彈性的膜狀結(jié)

構(gòu)。平均厚度為12——30nm,組成較復(fù)雜，并隨不同菌種而異。主要成分是肽聚糖。

不同細(xì)菌細(xì)胞壁的組成不同，根據(jù)革蘭染色法將細(xì)菌分為兩大類(lèi)：革蘭陽(yáng)性菌和革蘭陰

性菌。

革蘭陽(yáng)性菌：肽聚糖(peptidoglycan)一聚糖骨架、四肽側(cè)鏈、五肽交聯(lián)橋(三維立體結(jié)

構(gòu))。聚糖骨架是山N-乙酰葡萄糖胺和N-乙酰胞壁酸經(jīng)B-1,4糖背鍵連接，在N-乙酰胞壁

酸分子上連接四肽側(cè)鏈，四肽側(cè)鏈再由五肽交聯(lián)橋組成。革蘭陽(yáng)性菌細(xì)胞壁肽聚糖經(jīng)這樣的

三級(jí)鏈接，構(gòu)成了交叉的、機(jī)械強(qiáng)度相當(dāng)大的空間框架結(jié)構(gòu)，交聯(lián)率為75%,堅(jiān)固而致密。

這種三維立體結(jié)構(gòu)的肽聚糖在革蘭陽(yáng)性菌中高達(dá)50層，為其細(xì)胞壁主要成分。

溶菌酶能切斷B-1,4糖背鍵，引起細(xì)菌裂解。青霉素能干擾四肽側(cè)鏈和五肽交聯(lián)橋的

連接，使細(xì)菌不能合成完成的細(xì)胞壁，可導(dǎo)致細(xì)菌死亡。

革蘭陰性菌：肽聚糖(peptidoglycan)一聚糖骨架、四肽側(cè)鏈(二維平面結(jié)構(gòu))。聚糖骨架

組成與陽(yáng)性菌相同，也是由N-乙酰葡萄糖胺和N-乙酰胞壁酸經(jīng)P-1,4糖昔鍵連接，但是

缺乏交聯(lián)橋，只能形成二維平面結(jié)構(gòu)，而且交聯(lián)率低，只有25%,故多數(shù)側(cè)鏈呈游離狀。這

種二維平面的肽聚糖在革蘭陰性菌中只有1——2層，只作為其細(xì)胞壁的組成成分之一。

革蘭陽(yáng)性菌細(xì)胞壁特殊組分——磷壁酸(teichoicacid)磷壁酸為革蘭陽(yáng)性菌特有成分，

按結(jié)合部位不同分為壁磷壁酸和膜磷壁酸兩種。壁磷壁酸結(jié)合在細(xì)胞壁的肽聚糖的胞壁酸

上，另一端游離于細(xì)胞外；膜磷壁酸結(jié)合在細(xì)胞膜上。另一端游離。

革蘭陰性菌細(xì)胞壁特殊組分——外膜(outermembrane)外膜位于肽聚糖外側(cè)，由內(nèi)向外

由脂蛋白、脂質(zhì)雙層和脂多糖三部分組成。

革蘭陰性菌與革蘭陽(yáng)性菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)比較

細(xì)胞壁強(qiáng)度厚度肽聚糖肽聚糖含磷壁脂質(zhì)雙脂蛋白脂多糖

層數(shù)量酸層

革蘭陽(yáng)較堅(jiān)韌20-80nm可多達(dá)占細(xì)胞壁+———

性菌50層干重

50%-80%

革蘭陰較疏松10-15nm1-2層占細(xì)胞壁—+++

性菌干重

5%-20%

細(xì)胞壁的功能

維持菌體固有的形態(tài)：細(xì)菌一旦失去細(xì)胞壁，就變得多形。

保護(hù)細(xì)菌抵抗低滲環(huán)境：菌體內(nèi)的大氣壓是外界的5~25倍，沒(méi)有細(xì)胞壁，必將漲破。

參與菌體內(nèi)外的物質(zhì)交換：與細(xì)胞膜一起參與物質(zhì)交換，細(xì)胞壁上有很多小孔，容許小

分子物質(zhì)通過(guò)。

菌體表面帶有多種抗原分子，可誘發(fā)機(jī)體的免疫應(yīng)答。

細(xì)菌細(xì)胞壁缺陷型或L型(bacterialLform)：細(xì)胞壁的肽聚糖結(jié)構(gòu)受到理化或生物因素

的直接破壞或合成被抑制，受損后的細(xì)菌在高滲環(huán)境下仍可存活的細(xì)菌。

某些L型仍有一定的致病力，通常引起慢性感染。

細(xì)菌L型呈高度多形性，大小不-?著色不勻，無(wú)論其原為革蘭陽(yáng)性或陰性菌，形成L

型大多染成革蘭陰性。細(xì)菌L型生長(zhǎng)緩慢，營(yíng)養(yǎng)要求高，對(duì)滲透壓敏感，普通營(yíng)養(yǎng)基上不

能生長(zhǎng)，培養(yǎng)時(shí)必須用高滲的含血清的培養(yǎng)基。

細(xì)菌L型在高滲的含血清的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)后形成三種類(lèi)型的菌落

細(xì)胞膜

細(xì)菌細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)與真核細(xì)胞者基本相同，由磷脂和多種蛋白質(zhì)組成，但不含膽固醇。

細(xì)菌細(xì)胞膜的功能與真核細(xì)胞者類(lèi)似，主要有物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)、生物合成、分泌和呼吸等作用。

細(xì)菌細(xì)胞膜可形成一種特有的結(jié)構(gòu)，稱(chēng)為中介體。中介體：是部分細(xì)胞膜內(nèi)陷、折疊、

卷曲形成的囊狀物，多見(jiàn)于革蘭陽(yáng)性菌。其功能類(lèi)似于真核細(xì)胞的線粒體，故亦稱(chēng)為擬線粒

體。

細(xì)胞質(zhì)

核糖體(ribosome)：細(xì)菌合成蛋白質(zhì)的場(chǎng)所，游離存在于蛋白質(zhì)中。

質(zhì)粒(plasmid)：染色體外的遺傳物質(zhì)，存在于細(xì)胞質(zhì)中。為閉合環(huán)狀的雙鏈DNA,控

制細(xì)菌某些特定的遺傳特性。

細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)中含有多種顆粒，大多為貯藏的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。其中有一種主要成分是RNA

和多偏磷酸鹽的顆粒，其嗜堿性強(qiáng)，用亞甲藍(lán)染色時(shí)著色較深呈紫色，稱(chēng)為異染顆粒

(metachromaticgranule)?常見(jiàn)于白喉棒狀桿菌，位于菌體兩端，故又稱(chēng)極體(polarbody),有

助于鑒定。

核質(zhì)

核質(zhì)由單一密閉環(huán)狀DNA分子反復(fù)回旋卷曲盤(pán)繞組成松散網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。細(xì)菌是原核細(xì)胞,

不具有成形的核。細(xì)菌的遺傳物質(zhì)稱(chēng)為核質(zhì)或擬核，無(wú)核膜、核仁和有絲分裂器。功能與真

核細(xì)胞的染色體相似——決定細(xì)菌各種遺傳性狀。

二、特殊結(jié)構(gòu)

莢膜：某些細(xì)菌在其細(xì)胞壁外包繞一層粘液性物質(zhì)，當(dāng)其厚度＞=0.2口m,邊界明顯，光

鏡下可見(jiàn)時(shí)，稱(chēng)為莢膜。厚度＜0.2Hm者稱(chēng)為微莢膜。其成分為疏水性多糖或蛋白質(zhì)的多聚

體，用理化方法去除后并不影響細(xì)胞的生命活動(dòng)。

莢膜的功能一與細(xì)菌的致病性有關(guān)，抗吞噬作用；；粘附作用；抗有害物質(zhì)的損傷作用。

鞭毛：許多細(xì)菌在菌體上附有細(xì)長(zhǎng)并呈波狀彎曲的絲狀物，稱(chēng)為鞭毛，是細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)器官。

鞭毛需用電子顯微鏡觀察，或經(jīng)特殊染色法使鞭毛增粗后才能在光鏡下看到。

菌毛：許多革蘭陰性菌和少數(shù)革蘭陽(yáng)性菌菌體表面存在著一種比鞭毛更細(xì)、更短而直硬的絲

狀物，與細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)無(wú)關(guān)。根據(jù)功能不同，菌毛可分為普通菌毛和性菌毛兩類(lèi)。普通菌毛是

細(xì)菌的黏附結(jié)構(gòu)，性菌毛參與F質(zhì)粒的接合傳遞。菌毛在普通光學(xué)顯微鏡下看不到，必須

用電子顯微鏡觀察。

芽胞：某些細(xì)菌在一定的環(huán)境條件下，能在菌體內(nèi)部形成一個(gè)圓形或卵圓形小體，是細(xì)菌的

休眠形式。芽胞形成后細(xì)菌即失去繁殖能力，不能再進(jìn)行二分裂繁殖。產(chǎn)生芽胞的都是革蘭

陽(yáng)性菌。芽抱折光性強(qiáng)、壁厚、不易著色，經(jīng)特殊染色光鏡下可見(jiàn)。芽胞的大小、形狀、位

置等隨菌種而異，有重要的鑒別意義。芽胞的抵抗力強(qiáng)，可在自然界中存在多年，是重要的

傳染源。但芽胞并不直接引起疾病，只有發(fā)芽成為繁殖體后，才能迅速大量繁殖而致病。芽

胞抵抗力強(qiáng)，故應(yīng)以殺滅芽胞作為可靠的滅菌指標(biāo)。高壓蒸汽滅菌法是殺滅芽抱最有效的方

法。

第二章細(xì)菌的生理

第一節(jié)細(xì)菌的理化性狀

細(xì)菌的物理性狀

光學(xué)性質(zhì)——細(xì)菌為半透明體。

表面積---細(xì)菌體積微小，相對(duì)表面積大。

帶電現(xiàn)象——均帶負(fù)電。

半透性——細(xì)菌的細(xì)胞壁和細(xì)胞膜都有半透性。

滲透壓——菌體內(nèi)為高滲透壓。

細(xì)菌的化學(xué)組成：水、無(wú)機(jī)鹽、蛋白質(zhì)、糖類(lèi)、脂質(zhì)和核酸等。

第二節(jié)細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)與生長(zhǎng)繁殖

一、細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型

根據(jù)細(xì)菌所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不同，將細(xì)菌分為兩大營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型——自養(yǎng)菌和異養(yǎng)菌。

,自養(yǎng)菌(autotroph)：以簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)物為原料，合成菌體成分。

?異養(yǎng)菌(heterotroph)：以多種有機(jī)物為原料，合成菌體成分并獲得能量。異養(yǎng)菌包括腐

生菌(saprophyte)和寄生菌(parasite)。所有的病原菌都是異養(yǎng)菌，大部分屬寄生菌。

二、細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)

營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽及生長(zhǎng)因子為細(xì)菌的代謝及生長(zhǎng)繁殖提供必需的原料和

充足的能量。

三、細(xì)菌攝取營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的機(jī)制

被動(dòng)擴(kuò)散：順濃度梯度，不需能量

主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)：逆濃度梯度，需要能量

四、影響細(xì)菌生長(zhǎng)的環(huán)境因素

營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽及生長(zhǎng)因子為細(xì)菌的代謝及生長(zhǎng)繁殖提供必需的原料和

充足的能量

酸堿度(pH)：多數(shù)病原菌最適PH為7.2--7.6

溫度：病原菌最適溫度為37度

氣體：

02：根據(jù)細(xì)菌代謝時(shí)對(duì)氧氣的需要與否分四類(lèi)：

專(zhuān)性需氧菌：具有完善的呼吸酶系統(tǒng)，需要分子氧作為受氫體以完成需氧呼吸，僅能在有氧環(huán)

境下生長(zhǎng)。

微需氧菌：在低氧壓(5%-6%)生長(zhǎng)最好。

兼性厭氧菌：兼有有氧呼吸和無(wú)氧發(fā)酵兩種功能，在有氧、無(wú)氧環(huán)境中均能生長(zhǎng)，但以有氧時(shí)

生長(zhǎng)較好。大多數(shù)病原菌屬于此。

專(zhuān)性厭氧菌：缺乏完善的呼吸酶系統(tǒng)，只能進(jìn)行無(wú)氧發(fā)酵，必須在無(wú)氧環(huán)境中生長(zhǎng)。

CO2:對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)也很重要，大部分細(xì)菌在代謝中產(chǎn)生的CO?可滿足需要，個(gè)別細(xì)菌初次

分離時(shí)需人工供給5-10%C02

滲透壓

五、細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖

1,細(xì)菌個(gè)體的生長(zhǎng)繁殖

繁殖方式--細(xì)菌以簡(jiǎn)單的二分裂方式進(jìn)行繁殖。

繁殖速度--繁殖一代所需時(shí)間(代時(shí))約20-30min。

但少數(shù)細(xì)菌代時(shí)較長(zhǎng)，如結(jié)核分枝桿菌代時(shí)為18小時(shí)。

2、細(xì)菌群體的生長(zhǎng)繁殖

繁殖規(guī)律—生長(zhǎng)曲線(growthcurve)

遲緩期(lagphase),對(duì)數(shù)期(logarithmicphase)

穩(wěn)定期(stationaryphase),哀退期(declinephase)

遲緩期：細(xì)菌被接種培養(yǎng)基的最初一段時(shí)間，主要是適應(yīng)新環(huán)境，同時(shí)為分裂繁殖作物質(zhì)準(zhǔn)

備，此時(shí)細(xì)菌體積比較大，含有豐富的能和中間代謝產(chǎn)物。

對(duì)數(shù)期：細(xì)菌分裂繁殖最快的時(shí)期，菌數(shù)以幾何級(jí)數(shù)增長(zhǎng)，研究細(xì)菌的最佳時(shí)期

穩(wěn)定期：由于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗，代謝產(chǎn)物的堆積，繁殖數(shù)與死亡數(shù)兒乎相等。活菌數(shù)保持穩(wěn)

定。

衰退期：繁殖變慢，死菌數(shù)超過(guò)活菌數(shù)。細(xì)菌形態(tài)發(fā)生改變，生理活動(dòng)趨于停滯。

第三節(jié)細(xì)菌的新陳代謝和能量轉(zhuǎn)換

一、細(xì)菌的能量代謝

?發(fā)酵：無(wú)氧時(shí)，以有機(jī)物(lactate,ethanol)為受氫體。1Glucose02ethanol+2co2+2ATP

呼吸：以無(wú)機(jī)物為受氫體。

?有氧呼吸：以氧為受氫體。lGlucose+60206CO2+6H2O+38ATP

厭氧呼吸：無(wú)氧時(shí)，以其它無(wú)機(jī)物(CO2,SO42-,NO3-)為受氫體。lGlucose02ATP

二、細(xì)菌的代謝產(chǎn)物

(-)分解代謝產(chǎn)物和細(xì)菌的生化反應(yīng)

細(xì)菌種類(lèi)不同——細(xì)菌酶不同——分解物質(zhì)能力不同——代謝產(chǎn)物不同——鑒別作用.

1、糖發(fā)酵試驗(yàn)：

2、VP試驗(yàn)：

3、甲基紅試驗(yàn)：

4、枸椽酸鹽利用(citrateutilization)試驗(yàn)

5、吧晚試驗(yàn)

叫味⑴，甲基紅(M),VP(V),枸檬酸鹽利用(C)試驗(yàn)，常用于鑒定腸道桿菌，合稱(chēng)IMViC

試驗(yàn)。

大腸桿菌的結(jié)果是：++--

產(chǎn)氣桿菌的結(jié)果是：--++

6、H2s試驗(yàn)

7、尿素醐試驗(yàn)

(-)細(xì)菌的合成代謝產(chǎn)物

＞熱原質(zhì)(pyrogen)：或稱(chēng)致熱原。是細(xì)菌合成的，?種注入人體或動(dòng)物體內(nèi)能引起發(fā)熱

反應(yīng)物質(zhì)。產(chǎn)生熱原質(zhì)的細(xì)菌大多是革蘭陰性菌，熱原質(zhì)即其細(xì)胞壁的脂多糖。

＞毒素與侵襲性酶：細(xì)菌產(chǎn)生外毒素和內(nèi)毒素兩類(lèi)毒素。外毒素(exotoxin)是多數(shù)革蘭

陽(yáng)性菌和少數(shù)革蘭陰性菌在生長(zhǎng)繁殖過(guò)程中釋放到菌體外的蛋白質(zhì)；內(nèi)毒素

(endotoxin)是革蘭陰性菌的脂多糖。

＞色素：細(xì)菌的色素有兩類(lèi)——水溶性色素，能彌散到培養(yǎng)基或周?chē)M織。脂溶性色

素，不溶于水，只存在于菌體，使菌落顯色而培養(yǎng)基顏色不變。

＞抗生素：某些微生物代謝過(guò)程中產(chǎn)生的一類(lèi)能抑制或殺死某些其他微生物或腫瘤細(xì)

胞的物質(zhì)。

＞細(xì)菌素：某些菌株產(chǎn)生的一類(lèi)具有抗菌作用的蛋白質(zhì)。

＞維生素：細(xì)菌能合成某些維生素除供自身需要外，還能分泌至周?chē)h(huán)境中。

第四節(jié)細(xì)菌的人工培養(yǎng)

第三章消毒滅菌與病原實(shí)驗(yàn)室生物安全

第一節(jié)消毒滅菌的常用術(shù)語(yǔ)

*消毒(disinfection)：殺死物體上病原微生物的方法，并不一定能殺死含芽胞的細(xì)菌或

非病原微生物。用以消毒的藥品稱(chēng)為消毒劑(disinfectant)。

*滅菌(sterilization)：殺滅物體上所有微生物的方法。滅菌比消毒要求高，包括殺滅細(xì)

菌芽胞在內(nèi)的全部病原微生物和非病原微生物。

*抑菌(bacteriostasis)：抑制體內(nèi)或體外細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖。常用的抑菌劑為各種抗生素。

*防腐(antisepsis)：防止或抑制體外細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的方法。細(xì)菌一般不死亡。

*無(wú)菌(asepsis)：不存在活菌，多是滅菌的結(jié)果。

*無(wú)菌操作(antiseptictechnique)防止微生物進(jìn)入人體或物體的操作技術(shù)。

第二節(jié)消毒滅菌的方法

一、物理消毒滅菌法

(-)熱力滅菌法

1、干熱滅菌法

*焚燒：廢棄物、尸體

*灼燒：接種環(huán)、試管口

*干烤：(160~170℃,2h)玻璃器皿

*紅外線(0.7~1000um波長(zhǎng)的電磁波)：醫(yī)療器械

2、濕熱滅菌法

—巴氏消毒法:61.1-62.8℃30min或71.7氏15-30s,主要用于牛乳消毒。

—煮沸法(100°C,5min)食具、注射器等消毒

—流動(dòng)蒸汽消毒法(100℃15-30min)

—間歇蒸汽滅菌法(100℃5-30min,37℃24hX3天)

-高壓蒸汽滅菌法

*壓力-103.4KPa(1.05Kg/cm2)

*溫度-121.3℃

*時(shí)間-15-20min

*效果一殺滅包括芽抱在內(nèi)所有微生物

*應(yīng)用一所有耐高溫、高壓、耐濕的物品

濕熱滅菌法與干熱火菌法效果比較

結(jié)論一同樣溫度下，濕熱比干熱滅菌效果好

原因：

一蛋白含水量多時(shí)易凝固變性

一濕熱穿透力比干熱大

一濕熱的蒸汽具有潛熱

（-）輻射殺菌法

1、紫外線

*原理：波長(zhǎng)200-300nm的紫外線具有殺菌作用。其中260~266nm波長(zhǎng)UV與DNA吸

收光譜一致。其主要作用于DNA,使一條DNA鏈上相鄰的兩個(gè)胸腺喀噓共價(jià)結(jié)合

形成二聚體，干擾DNA復(fù)制與轉(zhuǎn)錄，導(dǎo)致細(xì)菌變異和死亡，并可殺滅病毒。

*特點(diǎn)：穿透力較弱

*應(yīng)用：物體表面及空氣消毒

2、電離輻射

高速電子、X射線、Y射線

3、微波

（三）濾過(guò)除菌法

——用物理阻留的方法除去液體或空氣中的細(xì)菌，真菌。

常用濾器：薄膜濾器、玻璃濾器、石棉濾器（Seitz）

*特點(diǎn)：只能除去細(xì)菌，真菌，不能除去病毒、支原體、L型細(xì)菌。

?應(yīng)用：用于一些不耐高溫滅菌的血清、毒素、抗生素，以及空氣的除菌。

（四）干燥低溫抑菌法

*干燥法

*低溫法：低溫可使細(xì)菌的新陳代謝減慢，常用作保冷凍真空干燥法是目前保存菌種

最好的方法目前保存菌種的最好方法。

二、化學(xué)消毒滅菌法

*消毒機(jī)制：

*引起菌體蛋白凝固變性

*干擾細(xì)菌的酶系統(tǒng)

*損傷細(xì)菌的細(xì)胞膜

*消毒劑的種類(lèi)：酚類(lèi)、醇類(lèi)、重金屬鹽類(lèi)、氧化劑、表面活性劑、烷化劑。

*消毒劑的特點(diǎn)：作用無(wú)選擇性對(duì)人體細(xì)胞有損傷故只能外用不能內(nèi)服

*消毒劑的應(yīng)用：病人排泄物與分泌物、皮膚、粘膜、飲水、廁所、空氣、手、器械、

*環(huán)境。

第三節(jié)消毒滅菌的應(yīng)用

一、醫(yī)療器械物品的消毒滅菌

■高危器械物品:用時(shí)需進(jìn)入無(wú)菌組織的物品。所有這些物品都應(yīng)該滅菌。（腹腔鏡、

關(guān)節(jié)鏡、宮腔鏡等）。

■中危器械物品:用時(shí)不進(jìn)入無(wú)菌組織但接觸黏膜的器械。采用消毒即可。（氣管鏡、

胃鏡、腸鏡等）

■低危器械物品:只接觸未損傷皮膚，但不進(jìn)入無(wú)菌組織和不接觸黏膜的物品。一般用后

清洗、消毒即可（食品器皿等）。

■快速周轉(zhuǎn)的醫(yī)療器械：

?手機(jī)機(jī)頭，車(chē)針要求高壓蒸汽滅菌，

防止肝炎病毒，艾滋病毒等的傳染.

?消毒劑:2%戊二醛，浸泡10小忖達(dá)到滅菌.

第四節(jié)影響消毒滅菌效果的因素

?微生物的種類(lèi)：敏感性由高到低依次為：真菌、細(xì)菌繁殖體、有包膜病毒、無(wú)包膜

病毒、分枝桿菌、細(xì)菌芽胞。

?微生物的物理狀態(tài)：營(yíng)養(yǎng)差，抵抗力強(qiáng)；細(xì)菌自穩(wěn)定期開(kāi)始，抵抗力差.

微生物的數(shù)量：

消毒劑的性質(zhì)、濃度與作用時(shí)間（70%乙醇）

溫度：

酸堿度：

?有機(jī)物：膿汁、痰

第五節(jié)病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全

一、病原微生物的分類(lèi)

根據(jù)傳染性、感染后對(duì)個(gè)體或者群體的危害程度，病原微生物分為四類(lèi)：

第一類(lèi)是指能夠引起人類(lèi)或者動(dòng)物非常嚴(yán)重疾病的微生物，以及我國(guó)尚未發(fā)現(xiàn)或者己經(jīng)宣布

消滅的微生物。天花病毒,新疆出血熱病毒，埃博拉病毒等.

第二類(lèi)是指能夠引起人類(lèi)或者動(dòng)物嚴(yán)重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動(dòng)物與人、

動(dòng)物與動(dòng)物間傳播的微生物。艾滋病毒，霍亂弧菌,結(jié)核桿菌等.

第三類(lèi)是指能夠引起人或動(dòng)物疾病，但一般情況下對(duì)人、動(dòng)物或環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害，傳

播風(fēng)險(xiǎn)有限，實(shí)驗(yàn)室感染后很少引起嚴(yán)重疾病，并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物。肝

炎病毒，流感病毒，金黃色葡萄球菌，傷寒沙門(mén)菌等.

第四類(lèi)是指在通常情況下不會(huì)引起人或動(dòng)物疾病的微生物。如小鼠白血病病毒等。

第一類(lèi)、第二類(lèi)統(tǒng)稱(chēng)為高致病性病原微生物

二、病原微生物實(shí)驗(yàn)室的分級(jí)

一、二級(jí)實(shí)驗(yàn)室不得從事高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)。三級(jí)、四級(jí)實(shí)驗(yàn)室從事高致病性病

原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)。

從事高致病性病原微生物相關(guān)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)應(yīng)當(dāng)有2名以上的工作人員共同進(jìn)行。在同一個(gè)實(shí)驗(yàn)

室的同一個(gè)獨(dú)立安全區(qū)域內(nèi)，只能同時(shí)從事一種高致病性病原微生物的相關(guān)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)。應(yīng)有

健全安全保衛(wèi)制度。

第四章噬菌體

★噬菌體是感染細(xì)菌、真菌、放線菌或螺旋體等微生物的病毒；

★個(gè)體微小，可以通過(guò)細(xì)菌濾器；

★無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu)，主要由衣殼（蛋白質(zhì)）和核酸組成；

★只能在活的微生物細(xì)胞內(nèi)復(fù)制增殖，是一種專(zhuān)性胞內(nèi)寄生的微生物。

★噬菌體分布極廣。

第一節(jié)噬菌體的生物學(xué)性狀

1、形態(tài)與結(jié)構(gòu)

噬菌體很小，在光鏡下看不見(jiàn)，需用電鏡觀察。不同的噬菌體在電鏡下有三種形態(tài)：蝌蚪形、

微球形和絲形。大多數(shù)噬菌體呈蝌蚪形，由頭部和尾部?jī)刹糠纸M成。

抗原性：噬菌體具有抗原性，能刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性抗體。

抵抗力：噬菌體對(duì)理化因素及多數(shù)化學(xué)消毒劑的抵抗力比?般細(xì)菌的繁殖體強(qiáng)，75℃30min

滅活。噬菌體能耐受低溫和冰凍，但對(duì)紫外線和X射線敏感。

第二節(jié)毒性噬菌體

噬菌體感染細(xì)菌有兩種結(jié)果：

毒性噬菌體能在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制增殖，產(chǎn)生許多

(virulentphage)：子代噬菌體，并最終裂解細(xì)菌，建立溶菌周期。

溫和噬菌體(temperatephage)：噬菌體基因與宿主染色體整合，成為前噬菌體，細(xì)菌變成溶

原性菌，不產(chǎn)生子代噬菌體，但噬菌體DNA能隨細(xì)菌DNA復(fù)制，并隨細(xì)菌的分裂而傳代,

建立溶原狀態(tài)。

毒性噬菌體

毒性噬菌體在敏感菌內(nèi)以復(fù)制方式進(jìn)行增殖，增殖過(guò)程包括：吸附、穿入、生物合

成、成熟和釋放。

液體培養(yǎng)基噬菌現(xiàn)象可使渾濁菌液變得澄清。

固體培養(yǎng)基若用適量的噬菌體和宿主菌液混合后接種培養(yǎng)，培養(yǎng)基表面可有透亮的溶菌空

斑出現(xiàn)。一個(gè)空斑系由一個(gè)噬菌體復(fù)制增殖并裂解細(xì)菌后形成，稱(chēng)為噬斑(pl叫ue),不同噬菌

體噬斑的形態(tài)與大小不盡相同。

若將噬菌體按一定倍數(shù)稀釋?zhuān)ㄟ^(guò)噬斑計(jì)數(shù)，可測(cè)定一定體積內(nèi)的噬斑形成單位(plaque

formingunits,pfu)數(shù)目，即噬菌體的數(shù)目。

第三節(jié)溫和噬菌體

溫和噬菌體的基因組能與宿主菌基因組整合，并隨細(xì)菌分裂傳至子代細(xì)菌的基因組中，不引

起細(xì)菌裂解。整合在細(xì)菌基因組中的噬菌體基因組稱(chēng)為前噬菌體(prophage)。帶有前噬菌體

基因組的細(xì)菌稱(chēng)為溶原性細(xì)菌。

溶原性轉(zhuǎn)換(lysogenicconversion)：某些前噬菌體可導(dǎo)致細(xì)菌基因型和性狀發(fā)生改變。例

如白喉棒狀桿菌產(chǎn)生白喉毒素的機(jī)理。

第五章細(xì)菌的遺傳與變異

■遺傳(heredity)：使微生物的性狀保持相對(duì)穩(wěn)定，子代與親代生物學(xué)的性狀基

本相同，且代代相傳。

■變異(variation)；在一定條件下，子代與親代之間以及子代與子代之間的生

物學(xué)性狀出現(xiàn)的差異，有利于物種的進(jìn)化。

,基因型(genotype):細(xì)菌的遺傳物質(zhì).

■表型(phenotype):基因表現(xiàn)出的各種性狀.

遺傳性變異：是細(xì)菌的基因結(jié)構(gòu)發(fā)生了改變，故又稱(chēng)基因型變異。常發(fā)生于個(gè)別的細(xì)

菌，不受環(huán)境因素的影響，變異發(fā)生后是不可逆的，產(chǎn)生的新性狀可穩(wěn)定地遺傳給后代。

非遺傳性變異：細(xì)菌在一定的環(huán)境條件影響卜一產(chǎn)生的變異，其基因結(jié)構(gòu)未改變，稱(chēng)為表型變

異。易受到環(huán)境因素的影響，凡在此環(huán)境因素作用下的所有細(xì)菌都出現(xiàn)變異，而且當(dāng)環(huán)境中

的影響因素去除后，變異的性狀又可復(fù)原，表型變異不能遺傳。

第一節(jié)細(xì)菌的遺傳物質(zhì)

?DNA的結(jié)構(gòu)與功能

0結(jié)構(gòu)——兩條互相平行而方向相反的多核苜酸鏈

0功能——儲(chǔ)存、復(fù)制和傳遞遺傳信息

0復(fù)制——半保留復(fù)制

0特點(diǎn)——復(fù)制中易發(fā)生錯(cuò)誤一基因突變

0蛋白合成——分子生物學(xué)中心法則（DNA-RNA-蛋白質(zhì)）

-基因與基因的轉(zhuǎn)錄

結(jié)構(gòu)基因——編碼結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)

0基因結(jié)構(gòu)

非結(jié)構(gòu)基因——編碼功能蛋白質(zhì)

0基因轉(zhuǎn)錄

?遺傳信息的硼譯

第二節(jié)細(xì)菌的遺傳與變異

一、染色體（chromosome）

■一條環(huán)狀雙螺旋DNA長(zhǎng)鏈，按一定構(gòu)型反復(fù)回旋形成松散的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)；

■缺乏組蛋白，無(wú)核膜包裹；

■約含有5000個(gè)基因；

二、質(zhì)粒

是細(xì)菌染色體以外的遺傳物質(zhì)，是閉合環(huán)狀的雙鏈DNA。

質(zhì)粒的特征：

質(zhì)粒具有自我復(fù)制的能力。

?質(zhì)粒DNA所編碼的基因產(chǎn)物賦予細(xì)菌某些性狀特征。

質(zhì)?？勺孕衼G失與消除。

?質(zhì)粒的轉(zhuǎn)移性。

?質(zhì)?？煞譃橄嗳菪耘c不相容性?xún)煞N

質(zhì)粒的分類(lèi)

■根據(jù)質(zhì)粒能否通過(guò)細(xì)菌的接合作用進(jìn)行傳遞

1接合性質(zhì)粒

2非接合性質(zhì)粒

■根據(jù)質(zhì)粒在細(xì)菌內(nèi)拷貝數(shù)多少

1嚴(yán)緊型質(zhì)粒

2松弛型質(zhì)粒

■根據(jù)相容性

1相容性——幾種質(zhì)粒同時(shí)共存于同一菌體內(nèi)

2不相容性——不能同時(shí)共存

可借此對(duì)質(zhì)粒進(jìn)行分組、分群

■根據(jù)所編碼的生物學(xué)性狀

質(zhì)粒基因可編碼多種重要的生物學(xué)性狀：

■致育質(zhì)粒（fertilityplasmid、F質(zhì)粒）編碼性菌毛，介導(dǎo)細(xì)菌之間的接合傳遞；

■耐藥性質(zhì)粒（resistanceplasmid,R質(zhì)粒）編碼細(xì)菌對(duì)抗菌藥物或重金屬鹽類(lèi)的耐

藥性。分兩類(lèi)，一是接合性耐藥質(zhì)粒（R質(zhì)粒），另一是非接合耐藥性質(zhì)粒（r質(zhì)粒）:

■毒力質(zhì)粒（Vi質(zhì)粒）編碼與該菌致病性有關(guān)的毒力因子；

■細(xì)菌素質(zhì)粒編碼細(xì)菌產(chǎn)生細(xì)菌素；

■代謝質(zhì)粒編碼產(chǎn)生相關(guān)的代謝酶。

三、轉(zhuǎn)位因子

/轉(zhuǎn)位因子（transposableelement）：是,,類(lèi)在細(xì)菌染色體、質(zhì)?；蚴删w之間可自行

移動(dòng)的一段特異的具有轉(zhuǎn)位特性的核甘酸序列片段，又稱(chēng)移動(dòng)基因。

/轉(zhuǎn)座子有二類(lèi)：

插入序列（insertionsequence,IS）：最小，不超過(guò)2kb,只攜帶與轉(zhuǎn)座功能有關(guān)的基因。

轉(zhuǎn)座子(transposon,Tn)：長(zhǎng)度一般超過(guò)2kb,除攜帶與轉(zhuǎn)位有關(guān)的基因外還攜帶其他基因(如

耐藥性、毒素基因等)。

四、整合子

定位：細(xì)菌染色體、質(zhì)?；蜣D(zhuǎn)座子上.

基本結(jié)構(gòu)：兩端為保守末端(m〃,59-be),中間為可變區(qū)(orf1),含一個(gè)或多個(gè)基因盒.

功能元件：重組位點(diǎn)(attl,59-be)；整合酶基因(加外；啟動(dòng)子(Pc).

功能：通過(guò)轉(zhuǎn)座子或接合性質(zhì)粒，使多種耐藥基因在細(xì)菌中進(jìn)行水平傳播.

第三節(jié)基因的轉(zhuǎn)移與重組

＞基因轉(zhuǎn)移(genetransfer)：外源性的遺傳物質(zhì)由供體菌進(jìn)入某受體菌細(xì)胞內(nèi)的過(guò)程。

＞基因重組(recombination)：轉(zhuǎn)移的基因與受體菌DNA整合在一起，使受體菌獲得供

體菌某些特性。

＞細(xì)菌的基因轉(zhuǎn)移和重組方式：轉(zhuǎn)化、接合、轉(zhuǎn)導(dǎo)、溶原性轉(zhuǎn)換、原生質(zhì)體融合。

I.轉(zhuǎn)化(transformation):受體菌直接攝取供體菌游離的DNA片段獲得新的遺傳性狀的過(guò)程稱(chēng)

為轉(zhuǎn)化。

2.接合(conjugation)

接合：是細(xì)菌通過(guò)性菌毛相互連接溝通，將遺傳物質(zhì)(主要是質(zhì)粒DNA)從供體菌轉(zhuǎn)移給

受體菌。能通過(guò)結(jié)合方式轉(zhuǎn)移的質(zhì)粒稱(chēng)為接合性質(zhì)粒，不能通過(guò)性菌毛在細(xì)菌間轉(zhuǎn)移的質(zhì)粒

為非接合性質(zhì)粒。

F質(zhì)粒的接合

■F+——即F質(zhì)粒，編碼性菌毛，稱(chēng)雄性菌

■Hft—F質(zhì)粒整合到細(xì)菌染色體上，使細(xì)菌能高效地轉(zhuǎn)移染色體上的基因，故稱(chēng)高

頻重組菌

■F'——Hfr菌中的F質(zhì)?？蓮娜旧w上脫離下來(lái)，并帶染色體上幾個(gè)鄰近的基因，

故稱(chēng)F'

三者均有性菌毛，均可發(fā)生接合

R質(zhì)粒的接合

＞細(xì)菌的耐藥性與耐藥性的基因突變及R質(zhì)粒的接合轉(zhuǎn)移等有關(guān)。

＞R質(zhì)粒有耐藥傳遞因子(RTF)和耐藥決定子(r)兩部分組成。RTF的功能與F質(zhì)粒相似,

可編碼性菌毛的產(chǎn)生和通過(guò)接合轉(zhuǎn)移；R決定子能編碼對(duì)抗菌藥物的耐藥性。

3.轉(zhuǎn)導(dǎo)(transduction)

＞轉(zhuǎn)導(dǎo)：是以溫和噬菌體為載體，將供體菌的一段DNA轉(zhuǎn)移到受體菌內(nèi)，使受體菌

獲得新的性狀。

＞根據(jù)轉(zhuǎn)導(dǎo)基因片段的范圍，可將轉(zhuǎn)導(dǎo)分為兩類(lèi)：普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)(轉(zhuǎn)導(dǎo)的DNA可是供

菌染色體上的任何部分)、局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)(轉(zhuǎn)導(dǎo)的DNA只限供菌染色體上的特定基因)。

4.溶原性轉(zhuǎn)換(lysogenicconversion)

溶原性細(xì)菌因染色體上整合有前噬菌體而獲得新的遺傳性狀稱(chēng)為溶原性轉(zhuǎn)換。

5.原生質(zhì)體融合(protoplastfusion)

G+菌形成原生質(zhì)體后，在聚乙二醇(PEG)作用下，可使兩種不同的細(xì)菌細(xì)胞發(fā)生融合的

過(guò)程。

融合后形成雙倍體細(xì)胞，可短期生存，染色體重組，獲得多種不同表型的重組融合體。

人為實(shí)驗(yàn)基因轉(zhuǎn)移與重組。

第四節(jié)基因突變

一基因突變規(guī)律：

■突變可以自然發(fā)生為：自發(fā)突變.具自發(fā)性，隨機(jī)性.

■人工誘導(dǎo)產(chǎn)生的突變?yōu)檎T發(fā)突變，可提高突變率.

彷徨試驗(yàn)（fluctuationtest,波動(dòng)試驗(yàn)）：隨機(jī)的、非定向的突變是在接觸噬菌體之前就已發(fā)生,

噬菌體對(duì)突變僅起篩選而不是誘導(dǎo)作用。

影印試驗(yàn)（replicaplating）:耐藥突變株在接觸藥物之前出現(xiàn)，藥物的作用是選擇耐藥株，淘汰

敏感株

■野生型（wildtype）:未發(fā)生突變的菌株.

■突變型（mutanttype）:相對(duì)于野生型，某一性狀發(fā)生改變的菌株.

■回復(fù)突變（reversemutation）:有時(shí)突變株經(jīng)過(guò)又?次突變可恢復(fù)為野生型的性狀

第七章細(xì)菌的感染與免疫

第一節(jié)正常菌群與機(jī)會(huì)致病菌

一、正常菌群

自然界中，土壤、空氣、水及各種物體廣泛存在著大量的，多種多樣的微生物。人及動(dòng)植物

的體表及其外界相通的腔道中也存在不同種類(lèi)和數(shù)量的微生物，當(dāng)人體免疫功能正常時(shí)，這

些微生物對(duì)宿主無(wú)害，有些對(duì)人還有利，是為正常微生物群，通稱(chēng)正常菌群（normalflora）

（IO14）,

寄生部位：皮膚、口腔、鼻咽腔、外耳道、眼結(jié)膜、胃、腸道、尿道、陰道，但是血液及組

織器官正常情況下是無(wú)菌的

正常菌群的生理學(xué)意義：

*生物拮抗：受體競(jìng)爭(zhēng)；產(chǎn)生有害代謝產(chǎn)物；營(yíng)養(yǎng)競(jìng)爭(zhēng)

*營(yíng)養(yǎng)作用：促進(jìn)消化吸收；參與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)化；合成維生素供人體利用

*免疫作用

*抗衰老作用：雙歧桿菌、乳桿菌及腸球菌等產(chǎn)生過(guò)氧化物歧化酶（SOD）,消除自山

基CO2'）毒性，抗氧化損傷，抗衰老

*抗腫瘤作用：降解致癌物質(zhì)；激活巨噬細(xì)胞——抑制腫瘤細(xì)胞

二、機(jī)會(huì)感染

正常菌群與宿主間的生態(tài)平衡在某些情況下可被打破，原來(lái)在正常時(shí)不致病的正常菌群

就成了條件致病菌（機(jī)會(huì)性致病菌）而引起宿主發(fā)病。常見(jiàn)的情況有：寄居部位的改變；宿

主免疫功能低下；菌群失調(diào)，如：長(zhǎng)期大量應(yīng)用抗生素。

三、微生態(tài)平衡與失調(diào)

醫(yī)學(xué)微生態(tài)學(xué)：人體正常菌群及機(jī)會(huì)感染菌，

微生態(tài)平衡——指正常微生物群與宿主生態(tài)環(huán)境在長(zhǎng)期進(jìn)化過(guò)程中形成的生理性組合的動(dòng)

態(tài)平衡。

影響因素：

*宿主因素（年齡、飲食、激素水平等）

*正常微生物群（定位、定性、定量）

*外界環(huán)境

微生態(tài)失調(diào)——指正常微生物群在宿主之間的平衡，在外界環(huán)境因素影響卜.被破壞，由生理

性組合轉(zhuǎn)變?yōu)椴±硇越M合。

誘發(fā)因素

*使用抗生素

*正常菌群寄生部位轉(zhuǎn)移（外科手術(shù)、腔鏡檢查等）

*機(jī)體免疫功能下降

第二節(jié)細(xì)菌的致病作用

感染（infection）微生物侵入宿主體內(nèi)，與宿主相互作用，并導(dǎo)致不同程度的病理變化的過(guò)程。

致病菌或病原菌（pathogen）：能感染或引起宿主疾病的細(xì)菌（具有致病性的細(xì)菌）。

致病性（pathogenicity）或病原性：細(xì)菌能引起感染的能力或性質(zhì)。

毒力（virulence）：致病菌的致病性強(qiáng)弱程度。是細(xì)菌致病性量的概念。

一、毒力

細(xì)菌的毒力因子包括：侵襲力和毒素。

我們首先來(lái)講侵襲力。

（-）侵襲力是指病原菌具有突破防御、侵入定居、繁殖擴(kuò)散的能力，包括莢膜、黏附

素和侵襲性物質(zhì)。

1.黏附素：黏附與定植是感染的第一步，與致病性密切相關(guān)。正常情況下，呼吸道的纖

毛運(yùn)動(dòng)、腸蠕動(dòng)等均不利于細(xì)菌的定植，所以粘附很必要。

黏附機(jī)制：主要為配體和受體的結(jié)合，細(xì)菌配體與宿主細(xì)胞受體結(jié)合，大多具有組織趨

向性。

2.莢膜：

3.侵襲性物質(zhì)：侵襲素和侵襲類(lèi)酶類(lèi)

4.生物被膜：細(xì)菌附著在有生命或無(wú)生命的材料表面后，由細(xì)菌及其分泌的胞外多聚物

共同組成的呈膜狀的細(xì)菌群體一一保護(hù)性存在形式。

（二）毒素

病原菌產(chǎn)生的毒性物質(zhì)，可直接引起宿主的組織損傷或生理功能紊亂。

L外毒素主要由革蘭陽(yáng)性菌和部分革蘭陰性菌產(chǎn)生并釋放到菌體外，主要是蛋白質(zhì)，

革蘭陰性菌能產(chǎn)生外毒素的主要有銅綠假單胞菌、痢疾桿菌、霍亂弧菌等。

特征：（1）毒性蛋白質(zhì)，大多A—B型毒素；

（2）毒性作用強(qiáng)，具有選擇性；如肉毒毒素，對(duì)人的致死量為l~2ug。

（3）對(duì)理化因素不穩(wěn)定；主要不耐熱，加熱可以喪失活性。

（4）抗原性強(qiáng)，可刺激機(jī)體產(chǎn)生抗毒素，甲醛脫毒形成類(lèi)毒素；我們用人工的方

法脫毒，保留了抗原性，就是疫苗。

（5）種類(lèi)多、機(jī)制復(fù)雜，包括神經(jīng)毒素、細(xì)胞毒素、腸毒素。神經(jīng)毒素主要

「擾神經(jīng)沖動(dòng)的傳遞；細(xì)胞毒素可抑制細(xì)胞蛋白合成等；腸毒素作用于內(nèi)皮細(xì)胞或

者嘔吐中樞。

2.內(nèi)毒素

G一菌細(xì)胞壁的脂多糖成分，菌細(xì)胞破解后才能釋放出來(lái)。

特征：產(chǎn)生于G一菌；

化學(xué)性質(zhì)為L(zhǎng)PS,對(duì)理化因素穩(wěn)定；

毒性作用相對(duì)較弱，無(wú)選擇性；

抗原性較弱，不能人工處理為類(lèi)毒素。

內(nèi)毒素的生物學(xué)作用：

致熱反應(yīng)；

白細(xì)胞反應(yīng)；

Shwartzman現(xiàn)象與DIC；

內(nèi)毒素血癥與休克；

免疫調(diào)節(jié)作用。

二者區(qū)別

來(lái)源

外毒素：革蘭陽(yáng)性菌與部分革蘭陰性菌

內(nèi)毒素：革蘭陰性菌

存在部分

外毒素：從活菌分泌出，少數(shù)菌崩解后釋放

內(nèi)毒素：細(xì)胞壁組分，菌裂解后釋放

化學(xué)成分

外毒素：蛋白質(zhì)

內(nèi)毒素：脂多糖

穩(wěn)定性

外毒素：60-80℃,30min被破壞

內(nèi)毒素：160℃,2-4h才被破壞

毒性作用

外毒素：強(qiáng)，對(duì)組織器官有選擇性毒害效應(yīng)，引起特殊臨床表現(xiàn)

內(nèi)毒素：較弱，各菌的毒性效應(yīng)大致相同，引起發(fā)熱、白細(xì)胞增多、微循環(huán)障礙、休克、

DIC等

抗原性

外毒素：強(qiáng)，刺激機(jī)體產(chǎn)生抗毒素：甲醛液處理脫毒形成類(lèi)毒素

內(nèi)毒素：弱，刺激機(jī)體產(chǎn)生的中和抗體作用弱；甲醛處理不形成類(lèi)毒素

超抗原(superantigen):微生物產(chǎn)生的某些蛋白具有激活免疫反應(yīng)的高度生物學(xué)活性，以

產(chǎn)生大量T細(xì)胞和細(xì)胞因子為特征，主要表現(xiàn)為致病作用，這些毒素抗原稱(chēng)為超抗原。如:

金葡的腸毒素，毒性休克綜合征毒素；鏈球菌的猩紅熱毒素.

二、細(xì)菌侵入的數(shù)量：毒力越強(qiáng)，需要的數(shù)量越少。

三、細(xì)菌侵入的途徑：呼吸道、消化道等。

第三節(jié)宿主的免疫防御機(jī)制

一、非特異性免疫機(jī)制

(-)屏障結(jié)構(gòu)

皮膚與黏膜屏障：機(jī)械阻擋、纖毛運(yùn)動(dòng)；分泌殺菌物質(zhì)；菌群拮抗作用

血腦屏障：軟腦膜+脈絡(luò)膜+腦毛細(xì)血管+星狀膠質(zhì)細(xì)胞

胎盤(pán)屏障：母體子宮內(nèi)膜的基蛻膜+胎兒絨毛膜

(二)吞噬作用

大吞噬細(xì)胞：血液中單核細(xì)胞和組織中巨噬細(xì)胞

吞噬細(xì)胞：

小吞噬細(xì)胞：血液中中性粒細(xì)胞

1.吞噬殺傷過(guò)程：

趨化一接觸一吞入一殺滅與消化一殘?jiān)懦?/p>

2.殺傷機(jī)制

依氧殺菌機(jī)制

①呼吸爆發(fā)（需分子氧參加）

②髓過(guò)氧化物酶（MPO）：存在于溶酶體中，與H2O2及氯化物的共同參與，對(duì)細(xì)菌、真

菌等具有強(qiáng)大殺傷活性。

非依氧殺菌機(jī)制

>酸性作用：糖分解產(chǎn)酸而導(dǎo)致pH下降，抑制細(xì)菌生長(zhǎng)而殺菌。

>溶酶體酶及殺菌蛋白：溶酶體、乳鐵蛋白、蛋白水解酶、核酸酶、酯酶等,

對(duì)細(xì)菌有殺傷、消化、分解作用。

3.吞噬作用的后果

*完全吞噬：病原體在吞噬溶酶體內(nèi)被殺滅、消化、排除殘?jiān)倪^(guò)程。（5-10分

鐘死亡，30-60分鐘破壞）

*不完全吞噬：只被吞噬，卻不被殺死。

*組織損傷：吞噬過(guò)程中，溶酶體酶（水解酶）也能破壞鄰近的正常組織，造

成組織損傷和炎癥反應(yīng)。

（三）體液因素

補(bǔ)體：調(diào)理，溶菌.

?溶菌酶:存在于血清，唾液，淚液，乳汁.主要作用于G+菌.

防御素：多肽，破壞胞外菌細(xì)胞膜.

二、特異性免疫

（一）體液免疫——抗體的作用

1.抑制病原體黏附

2.調(diào)理吞噬作用

3.中和細(xì)菌外毒素

4.溶菌作用

5.抗體依賴(lài)性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用（ADCC）

（-）細(xì)胞免疫

*細(xì)胞毒T細(xì)胞（CTL）直接殺傷靶細(xì)胞

效應(yīng)T細(xì)胞（Thl）產(chǎn)生細(xì)胞因子發(fā)揮作用

（三）黏膜免疫（mucosalimmunesystem,MIS）

三、抗細(xì)菌感染免疫的特點(diǎn)

（-）抗胞外菌感染的免疫

■胞外菌:指寄生在宿主細(xì)胞外的組織間隙和血液、淋巴液和組織液中的細(xì)胞。

如葡萄球菌.

■靠非特異免疫；但主要是體液免疫發(fā)揮作用

?吞噬作用（非特異）

?抗體和補(bǔ)體的作用：阻止細(xì)菌定植（黏附）

調(diào)理吞噬

激活補(bǔ)體溶菌

中和細(xì)菌外毒素

?細(xì)胞免疫（Th2）:輔助B細(xì)胞產(chǎn)生抗體；產(chǎn)生細(xì)胞因子，促進(jìn)吞噬.

（二）抗胞內(nèi)菌感染的免疫

胞內(nèi)菌：寄生在細(xì)胞內(nèi)的細(xì)菌，分專(zhuān)性胞內(nèi)菌（立克次體，衣原體）、兼性胞內(nèi)菌（結(jié)核分

枝桿菌，麻風(fēng)分枝桿菌，傷寒沙門(mén)菌，布氏桿菌，肺炎軍團(tuán)菌，李斯特菌）.

特點(diǎn)：胞內(nèi)寄生、毒性低、呈慢性感染、免疫病理?yè)p傷，主要靠細(xì)胞免疫功能。

吞噬作用：起一定作用

細(xì)胞免疫(CTL):主要作用

局部黏膜免疫：細(xì)菌未進(jìn)細(xì)胞前由slgA阻止其黏附，使其不能侵入細(xì)胞內(nèi)。

第四節(jié)感染的發(fā)生與發(fā)展

一、細(xì)菌感染的來(lái)源與傳播

外源性感染：引起感染的細(xì)菌來(lái)源于宿主體外，主要有病人及帶菌者、患病及帶菌動(dòng)物。

其中帶菌者在流行中意義重大。

內(nèi)源性感染：來(lái)自宿主自身的細(xì)菌感染，主要指曾經(jīng)感染過(guò)而潛伏下來(lái)的微生物重新感

染。比如結(jié)核分支桿菌。也常見(jiàn)于機(jī)體免疫力下降時(shí)。

(二)傳播途徑

＞呼吸道比如：結(jié)核分枝桿菌、流腦病毒等。

＞消化道腸道桿菌。

＞皮膚(創(chuàng)傷)破傷風(fēng)梭菌、氣性壞疽病原菌等。

＞血液梅毒和乙型肝炎病毒

＞人畜共患疾病的傳播(蟲(chóng)媒傳播)流行性斑疹傷寒立克次體。

＞性傳播---性傳播性疾病(sexuallytransmitteddiseases,STD)

二、細(xì)菌性感染的類(lèi)型

(-)隱性感染：當(dāng)機(jī)體抗感染免疫力較強(qiáng)或入侵的細(xì)菌數(shù)量不多、毒力較弱，感染后

損害較輕，使機(jī)體不出現(xiàn)或出現(xiàn)不明顯的臨床癥狀者。一般在一次傳染病流行中，大多數(shù)人

為隱性感染，如結(jié)核。

(二)顯性感染

當(dāng)病原菌毒力強(qiáng)，數(shù)量多且宿主機(jī)體抗感染免疫力相對(duì)較弱，機(jī)體受到嚴(yán)重?fù)p害，出現(xiàn)

明顯臨床癥狀者。

顯性感染分急性感染和慢性感染，也可分為局部感染和全身感染

急性感染：突然起病，癥狀明顯，病程短，?般病愈后，病原體從體內(nèi)消失。

慢性感染：病情緩慢，病程長(zhǎng)，可持續(xù)數(shù)月至數(shù)年。

(三)全身細(xì)菌性感染：胞外菌的急性感染，病毒菌及其毒素或毒性代謝產(chǎn)物出現(xiàn)在血

液并向全身擴(kuò)散引起的全身急性癥狀。

毒血癥(toxemia)：病原菌在局部生長(zhǎng)繁殖，但不侵入血流，僅細(xì)菌產(chǎn)生的外毒素進(jìn)入

血流引起全身中毒癥狀者。

菌血癥(bacteremia)：病原菌由原發(fā)部位一過(guò)性或間斷性入血，到達(dá)其他部位繼續(xù)繁殖，

但不在血中繁殖者。

敗血癥(septicemia)：病原菌侵入血流并在血中大量繁殖產(chǎn)生大量毒性產(chǎn)物，引起全身

中毒癥狀者。

膿毒血癥(pyemia)：化膿性細(xì)菌侵入血流，在其中大量繁殖，并通過(guò)血流擴(kuò)散到其他

組織或器官，產(chǎn)生新的化膿性病灶者。

內(nèi)毒素血癥(endotoxemia)：革蘭陰性菌入血并在血中繁殖，死亡崩解后釋放大量?jī)?nèi)毒

素，或局部病灶內(nèi)大量革蘭陰性菌死亡，釋放的內(nèi)毒素入血而引起全身中毒癥狀者。

感染的輕重除取決于致病菌和宿主外，環(huán)境因素和社會(huì)因素也有明顯影響.冬季易發(fā)呼

吸系統(tǒng)感染，戰(zhàn)亂易發(fā)傳染病。

第五節(jié)醫(yī)院感染

一、醫(yī)院感染(hospitalacquiredinfection)：患者在住院期間發(fā)生的感染或醫(yī)院內(nèi)獲得而出院

后發(fā)生的感染，或與前次住院有關(guān)的感染(不包括入院前已處于潛伏期的感染)。

二、醫(yī)院感染的分類(lèi)

按微生物來(lái)源

*內(nèi)源性醫(yī)院感染——由自身正常菌群轉(zhuǎn)變成機(jī)會(huì)性致病菌所致

特定條件——寄居部位改變

——免疫功能下降

——菌群失調(diào)

*外源性醫(yī)院感染（交叉感染）——患者遭受醫(yī)院內(nèi)非自身存在的病原體侵襲而發(fā)生的

感染。病人之間、醫(yī)患之間、污染醫(yī)護(hù)用品或診治設(shè)備、環(huán)境空氣等，也稱(chēng)醫(yī)院內(nèi)

感染。

按感染部位分類(lèi)——全身各部位均可發(fā)生

三、醫(yī)院感染的微生物特征

*主要是機(jī)會(huì)性致病菌（常為內(nèi)源性感染）

*常為耐藥菌

*新的病原菌不斷出現(xiàn)種類(lèi)變遷

*主要是細(xì)菌，其次為病毒和真菌

四、醫(yī)院感染的危險(xiǎn)因素

*易感對(duì)象：年齡因素（老人、嬰幼兒）；基礎(chǔ)疾病（抗感染能力下降）

*診療技術(shù)及侵入性檢查與治療因素：器官移植；血液透析和腹膜透析；介入檢查和治

療

*損傷免疫系統(tǒng)的因素：放射治療；化學(xué)治療；激素治療

*其他因素：抗生素使用不當(dāng)；外科手術(shù)及各種引流；住院時(shí)間過(guò)長(zhǎng)

五、醫(yī)院感染的預(yù)防和控制

*消毒滅菌

*隔離預(yù)防

*合理使用抗生素

第八章細(xì)菌感染的檢查方法與防治原則

第一節(jié)細(xì)菌感染的診斷

包括；

細(xì)菌學(xué)診斷——檢測(cè)病原菌及其抗原，產(chǎn)物或核酸

血清學(xué)診斷——檢測(cè)患者血清中特異性抗體

一、病原菌檢測(cè)

?早期采集應(yīng)在使用抗菌藥物前采集標(biāo)本，否則注明藥物種類(lèi)。

無(wú)菌采集盡量避免雜菌污染。

?根據(jù)不同疾病以及疾病不同時(shí)期采取不同標(biāo)本。

?標(biāo)本必須盡快送檢，或冷藏送檢。

?標(biāo)本做好標(biāo)記，詳細(xì)填寫(xiě)化驗(yàn)單，保證各環(huán)節(jié)的準(zhǔn)確無(wú)誤。

二、血清學(xué)診斷

*人體受致病菌感染后，其免疫系統(tǒng)被刺激后發(fā)生免疫應(yīng)答而產(chǎn)生特異性抗體?？贵w的

量常隨感染過(guò)程而增多，表現(xiàn)為效價(jià)（滴度）的升高。因此，用已知的細(xì)菌或其特

異性抗原檢測(cè)患者體液中有無(wú)相應(yīng)特異抗體和其效價(jià)的動(dòng)態(tài)變化，可作為某些傳染

病的輔助診斷。一般采取病人的血清進(jìn)行試驗(yàn)，故稱(chēng)為血清學(xué)診斷（serological

diagnosis）o

*血清學(xué)診斷試驗(yàn)最好取患者急性期和恢復(fù)期雙份血清標(biāo)本，當(dāng)后者的抗體效價(jià)比前者

升高大于等于4倍時(shí)方有意義。

*常用方法：直接凝集試驗(yàn)、乳膠凝集試驗(yàn)、沉淀試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、中和試驗(yàn)、

ELISA。

第二節(jié)細(xì)菌感染的特異性預(yù)防

一、人工主動(dòng)免疫(artificialactiveimmunization)：將疫苗(vaccine)或類(lèi)毒素接種于人體，刺

激機(jī)體免疫系統(tǒng)，使機(jī)體主動(dòng)產(chǎn)生獲得性免疫力的一種防治微生物感染的措施，主要用于特

異性預(yù)防。

主要有：死疫苗；活疫苗

二、人工被動(dòng)免疫

人工被動(dòng)免疫(artificialpasstiveimmunization)：注射含有特異性抗體的免疫血清、純化免疫

球蛋白抗體，或細(xì)胞因子等免疫制劑，使機(jī)體立即獲得特異性免疫的過(guò)程。但這些免疫物質(zhì)

不是病人自己產(chǎn)生的，故維持時(shí)間短。主要用于緊急預(yù)防或治療。

第九章球菌

球菌：革蘭氏陽(yáng)性球菌——主要介紹葡萄球菌、鏈球菌、肺炎球菌；

革蘭氏陰性球菌——主要介紹腦膜炎雙球菌、淋球菌。

化膿性細(xì)菌——能感染人體并引起化膿性炎癥的細(xì)菌

第一節(jié)葡萄球菌屬

分布非常廣泛。病原性葡萄球菌是最常見(jiàn)的化膿性細(xì)菌，醫(yī)務(wù)人員的帶菌率70%vs正常

30%o主要包括三個(gè)菌種：金黃色葡萄球菌(s.aureus)、表皮葡萄球菌(s.epidermidis)及腐生

葡萄球菌(s.saprophyticus)。

一、金黃色葡萄球菌

(-)生物學(xué)特性

1、形態(tài)染色：?jiǎn)蝹€(gè)菌體呈球形，呈葡萄串狀排列，直徑平均1um,G+菌，無(wú)鞭毛，無(wú)芽

抱；

2、培養(yǎng)特性：營(yíng)養(yǎng)要求不高，普通培養(yǎng)基即可生長(zhǎng)，中等大小S型菌落，并因種不同出現(xiàn)

金黃色、白色、檸檬色脂溶性色素，金萄菌溶血毒素在血平板上形成B溶血。

3、生化反應(yīng)：觸酶陽(yáng)性致病菌株分解甘露糖。

4、抗原結(jié)構(gòu)

葡萄球菌A蛋白(SPA)：存在于細(xì)胞壁上的表面抗原，可與IgG的Fc段結(jié)合，可進(jìn)行協(xié)同

凝集，并具有抗吞噬等生物學(xué)活性。

莢膜：有利于黏附和抗吞噬。

多糖抗原(磷壁酸抗原)：黏附。

5、分類(lèi)

6、抵抗力

是無(wú)芽胞細(xì)菌中最強(qiáng)的。

/對(duì)熱、干燥、消毒劑、UV等因素均有較強(qiáng)抵抗力

/耐鹽，在10~15%NaCl培養(yǎng)基中生長(zhǎng)(選擇)

/對(duì)染料及龍膽紫敏感

/對(duì)青霉素、金霉素、紅霉素等抗生素均高度敏感，但對(duì)青霉素的耐藥菌株90%

(二)致病性

致病物質(zhì)

1、凝固酶(coagulase)：能使人和兔血漿發(fā)生凝固的酶類(lèi)。

?與致病性相關(guān)，保護(hù)細(xì)菌抵抗吞噬及其它殺菌物質(zhì)作用。

?決定了金黃色葡萄球菌引起化膿性感染時(shí)的感染特點(diǎn)：病灶局限、

不易擴(kuò)散、而且膿汁粘稠。

2、葡萄球菌溶素(staphylolysin)：a溶素為主要致病因子，溶解紅細(xì)胞，破壞白細(xì)胞，

血小板及多種其它組織細(xì)胞。

3、殺白細(xì)胞素(panton-valentine,PV)：破壞中性粒細(xì)胞和吞噬細(xì)胞、抗吞噬、增強(qiáng)病菌侵

襲力。

4、腸毒素(enterotoxin)：部分金葡菌產(chǎn)生，可引起急性胃腸炎。其特點(diǎn)：

——耐熱，100℃30min

一一引起毒素性食物中毒

——不受胃腸液中蛋白酶影響

5、表皮剝脫毒素(exfoliativetoxin,exfoliatin)：

具有蛋白酶功能，裂解表皮組織的棘狀顆粒層，破壞細(xì)胞間連接，表皮與真皮脫落——燙傷

樣皮膚綜合征(staphylococcalscaldedskinsyndrome.SSSS)

6、毒性休克綜合征-1(toxicshocksyndrometoxinI,TSST-1)：

引起發(fā)熱、休克、腎衰、皮疹等多個(gè)器官功能紊亂，毒性休克綜合征(TSS)

7、其它

所致疾病

1、化膿性感染：

?局部感染

?全身感染(敗血癥、膿毒血癥)

2、毒素性疾?。?/p>

?食物中毒

?假膜性腸炎(菌群失調(diào)癥)

?燙傷樣皮膚綜合征

?毒性休克綜合征

(三)微生物學(xué)檢查

標(biāo)本的采集——直接涂片鏡檢——分離培養(yǎng)——鑒定

致病性葡萄球菌的鑒定依據(jù)：產(chǎn)生血漿凝固酶、耐熱核酸酶、金黃色色素、溶血素、發(fā)酵甘

露醇。

(四)防治

預(yù)防很重要，醫(yī)務(wù)人員的帶菌率高達(dá)70%,是院內(nèi)交叉感染的重要傳染源；注意個(gè)人衛(wèi)生、

公共衛(wèi)生，不濫用抗生素；治療應(yīng)選擇敏感藥物；自身菌苗的脫敏療法。

二、凝固酶陰性葡萄球菌(coagulasenegativestaphylococcus,CNS)

■過(guò)去認(rèn)為不致病，但目前已成為醫(yī)源性感染的常見(jiàn)菌，而且耐藥菌株為金葡更為多

見(jiàn)。

■CNS十余種與致病有關(guān)，最多是表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌。

■常引起泌尿系統(tǒng)感染、細(xì)菌性心內(nèi)膜炎、敗血癥及術(shù)后感染。

第二節(jié)鏈球菌屬(streptococcus)

鏈球菌屬分類(lèi)

根據(jù)血平板上溶血現(xiàn)象分類(lèi)

1.甲型溶血性鏈球菌：菌落外1~2mm寬草綠色不完全溶血環(huán)(a溶血)，為條件致病菌。

2.乙型溶血性鏈球菌：菌落外2~3mm寬透明的完全溶血環(huán)(B溶血)，致病力最強(qiáng)。

3.丙型鏈球菌：不溶血，不致病。

根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)的分類(lèi)

細(xì)胞壁多糖抗原一C抗原分群：A、B、C等20群，對(duì)人致病的90%屬A群。同一群又分若

干型，如：A群根據(jù)M型抗原分成約100型。

根據(jù)氧的需要分類(lèi)

需氧鏈球菌及兼性厭氧鏈球菌：致病

厭氧鏈球菌：條件致病菌

一、A群鏈球菌

（-）生物學(xué)特性

1、形態(tài)染色：?jiǎn)蝹€(gè)菌體呈球形，G+,鏈狀排列，無(wú)芽胞，無(wú)鞭毛，有菌毛，幼齡時(shí)有莢膜;

與葡萄球菌比較，菌體略小，在其卵圓端連接：

2、培養(yǎng)特性：營(yíng)養(yǎng)要求較高，普通培養(yǎng)基生長(zhǎng)不良，需加入血液、血清、葡萄糖等；

血清肉湯——易形成長(zhǎng)鏈，呈沉淀生長(zhǎng)

血平板——灰白色，半透明細(xì)小S型菌落，有B溶血。

3、生化反應(yīng)

觸酶一而葡萄球菌+

菊糖發(fā)酵一、膽汁溶解一而肺炎鏈球菌十

4、抵抗力：不強(qiáng)。青霉素首選，極少產(chǎn)生耐藥性。

（二）致病性

1、致病物質(zhì)

（1）細(xì)胞壁成分

脂磷壁酸（LTA）——增強(qiáng)細(xì)菌對(duì)細(xì)胞的黏附（表面受體）

?M蛋白

——抗吞噬

——與人類(lèi)心肌、腎小球基底膜有共同抗原，引起超敏反應(yīng)性疾病

（2）外毒素類(lèi)

致熱外毒素（紅疹毒素）——發(fā)熱、紅色皮疹（猩紅熱）

?鏈球菌溶血素：根據(jù)對(duì)02的穩(wěn)定性分為SLO和SLS。

（1）SL0

——含有-SH蛋白質(zhì)，對(duì)02敏感，還原后具有溶血作用

——破壞紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板，對(duì)心肌、神經(jīng)細(xì)胞也有毒性作用

一抗原性強(qiáng)，2~3周出現(xiàn)抗“0”抗體，維持?jǐn)?shù)月至1年，其效價(jià)＞1：400可做為新近感染