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PAGEii眼部精油的制備和應(yīng)用研究摘要:實(shí)驗(yàn)為制備出一款具有抗氧化性、美白淡斑、保濕祛皺等功效的眼部精油。選用了玫瑰精油、薰衣草精油、百里香精油、胡蘿卜籽精油和乳香精油搭配基礎(chǔ)油霍霍巴油和甜杏仁油的復(fù)配精油。其中用水蒸氣蒸餾法從乳香樹(shù)脂中提取乳香精油。通過(guò)DPPH清除自由基率比較五種精油的抗氧化性,百里香精油>玫瑰精油>乳香精油>胡蘿卜籽精油>薰衣草精油,按照抗氧化性強(qiáng)弱制備復(fù)配比例,并測(cè)試復(fù)配精油的抗氧化性,調(diào)整以達(dá)最好效果。找到最佳配比為玫瑰精油:百里香精油:乳香精油:胡蘿卜籽精油:薰衣草精油=2:4:1:1:1。與基礎(chǔ)油搭配的比例為復(fù)配精油:基礎(chǔ)油=1:200。關(guān)鍵詞: 精油;復(fù)配精油;眼部精油;水蒸氣蒸餾;抗氧化性;美白目錄摘要 PAGEREF摘要\*romaniAbstract PAGEREFAbstract\*romaniTOC\o"2-3"\h\z\t"標(biāo)題1,1,次標(biāo)題,1"目錄 ii1 緒論 11.1 精油概述 11.1.1 七種植物精油 21.1.2 精油制備 31.2 化妝品功效檢測(cè) 32 分析 52.1 水蒸氣蒸餾法 52.2 抗衰功效評(píng)價(jià) 52.3 精油復(fù)配 53 設(shè)計(jì) 63.1 水蒸氣蒸餾法提取乳香精油 63.1.1 水蒸氣蒸餾實(shí)驗(yàn)原理 63.1.2 水蒸氣蒸餾法實(shí)驗(yàn)內(nèi)容 63.2 精油DPPH自由基清除能力測(cè)定 73.2.1 DPPH清除自由基實(shí)驗(yàn)原理 73.2.2 測(cè)定DPPH自由基清除率實(shí)驗(yàn)步驟 73.3 復(fù)配精油功效測(cè)定 84 結(jié)論 94.1 乳香精油提取率 94.2 精油抗氧化性能力 94.2.1 玫瑰精油 94.2.2 薰衣草精油 104.2.3 胡蘿卜籽精油 114.2.4 乳香精油 114.2.5 百里香精油 124.2.6 對(duì)照實(shí)驗(yàn)VC 134.2.7 數(shù)據(jù)總結(jié) 134.3 搭配基礎(chǔ)油的復(fù)配精油功效 134.3.1 預(yù)實(shí)驗(yàn) 134.3.2 復(fù)配精油測(cè)試 144.4 實(shí)驗(yàn)感想和討論 15致謝 17參考文獻(xiàn) 18緒論醫(yī)學(xué)界曾有證明說(shuō)眼睛周?chē)钠つw大約有0.03cm-0.05cm的厚度,另外面部皮膚大約在0.08cm-0.15cm這樣的厚度,他們之間差了不止3倍。因?yàn)橛腥绱说牟町?,所以?huì)導(dǎo)致眼周肌膚要比面部肌膚提早衰老將近八年。因此眼睛周?chē)募∧w需要得到更高的重視需要更加細(xì)心的愛(ài)護(hù)和保護(hù)。這就是人們常說(shuō)的最能暴露衰老的地方便是眼睛。而人們常常對(duì)眼睛有過(guò)度的消耗,對(duì)于工作或是學(xué)習(xí)的人來(lái)說(shuō),長(zhǎng)期熬夜、手機(jī)和電腦這些電子產(chǎn)品的使用,都會(huì)讓輻射給眼睛帶來(lái)許多壓力。所以也有數(shù)據(jù)報(bào)告顯示,人們對(duì)眼部護(hù)理化妝品的需求量越來(lái)越大,其所需的功效也越來(lái)越多,人們已經(jīng)不局限于使用最常見(jiàn)的眼霜、眼部精華了。精油是通過(guò)水蒸氣蒸餾法、擠壓法、冷浸法或溶劑萃取法等方法從植物的花、莖、葉、根或果實(shí)中提煉萃取的具有揮發(fā)性的芳香物質(zhì)。眾所周知,精油具有較好的揮發(fā)性,與空氣接觸便會(huì)容易在短時(shí)間內(nèi)揮發(fā),所以精油常用深褐色玻璃瓶來(lái)存放。另外,精油可分為復(fù)方精油和單方精油,復(fù)方精油與單方精油的最大不同點(diǎn)在于復(fù)方精油是經(jīng)過(guò)稀釋的,可以直接涂抹于皮膚之上。最許多文獻(xiàn)參考或報(bào)道研究中都有提到,植物精油是一種由多種成分組合而成的混合物,是天然的,具有抗氧化、抑菌等作用,時(shí)常被廣泛應(yīng)用于化妝品、護(hù)膚品、日常洗護(hù)用品、食品、煙酒、醫(yī)藥或其他工業(yè)用香精中[1]。眼部精油的研究仍待補(bǔ)充和發(fā)展,市面上的售賣(mài)選擇有限,使用情況普及率不高。但眼部精油的療效其實(shí)是非常顯著的,首先對(duì)于眼部的肌膚具有很好的護(hù)理功效,尤其是眼部皮膚很難吸收充分的營(yíng)養(yǎng),使用眼部精油能夠?qū)⑤^優(yōu)的營(yíng)養(yǎng)部分選擇吸收。最關(guān)鍵的是有保濕補(bǔ)水、抗衰老、祛皺、促進(jìn)血液循環(huán)和細(xì)胞再生、清除自由基、抗氧化、修復(fù)屏障功能等多種功效。選取濃度合適的復(fù)方精油,這樣眼部精油的涂抹按摩吸收不會(huì)給眼部皮膚帶來(lái)超負(fù)荷,對(duì)身心都有幫助。因此此實(shí)驗(yàn)具有較好的市場(chǎng)前景和研究方向,繼續(xù)開(kāi)拓眼部精油的發(fā)展,讓眼部精油得到安全有效的測(cè)試,獲得更多的成果。精油概述精油是指純天然的植物提取物,而非人工合成的香精[2]。又稱(chēng)芳香油,植物精油。植物精油廣泛用來(lái)制造各種香水、香精、化妝品、護(hù)膚品、美容品、沐浴液、洗發(fā)水、香皂、牙膏、清新劑、殺菌劑、清潔劑,還可用作香薰療法的原料等。植物精油還大量用于飲料、食品加工,用于香煙、酒類(lèi),也是保障人體健康的天然藥品,可用于治療多種皮膚病、多類(lèi)創(chuàng)傷。本實(shí)驗(yàn)為精油在眼部的化妝品應(yīng)用研究,眼部精油選用了玫瑰精油、薰衣草精油、百里香精油、胡蘿卜籽精油和乳香精油搭配基礎(chǔ)油霍霍巴油的復(fù)配精油,并通過(guò)水蒸氣蒸餾法制備乳香精油。復(fù)配精油指幾種單方精油已搭配好再加上基礎(chǔ)油調(diào)配而成,可供立即使用的配方精油。復(fù)配精油的效果和皮膚吸收度遠(yuǎn)大于單方精油。七種植物精油玫瑰精油玫瑰精油是植物精油的典型代表,也是芳香精油中的精品,玫瑰精油呈黃褐色,有獨(dú)特香味,廣泛應(yīng)用于日化、醫(yī)藥、食品等行業(yè),有很大的實(shí)用價(jià)值[3]。玫瑰精油含有十幾種天然植物的美白的成分,運(yùn)用于化妝品具有改善皮膚干燥;恢復(fù)皮膚彈性;美白;促進(jìn)黑色素分解等作用,能于不同階段防止細(xì)胞黑素的產(chǎn)生。百里香精油百里香精油是從百里香植株中提取,一般蒸餾其葉子以及花,顏色淡黃,有著香甜而強(qiáng)烈的藥草味,擴(kuò)散性很好。研究發(fā)現(xiàn),百里香精油具有保健功能,且安全無(wú)毒[4],是一種天然的抗氧化性劑,廣泛應(yīng)用于食品、化妝品等行業(yè)中。百里香精油可抗菌、抗病毒,保護(hù)皮膚免受有害細(xì)菌和真菌感染;能加速皮膚痊愈;可刺激血液循環(huán)等。特別注意百里香精油屬于強(qiáng)勁精油,不能大量高濃度的長(zhǎng)期使用,否則會(huì)刺激皮膚與黏膜組織。乳香精油乳香精油用乳香樹(shù)脂萃取得來(lái),散發(fā)著清純的木質(zhì)香氣,又透露著淡淡的果香,精油顏色為淡黃色,精油除了木頭香外,還帶有一點(diǎn)水果香調(diào)。乳香的現(xiàn)代藥理活性研究證實(shí)部分品種具有抗炎癥、抗腫瘤、抗真菌及抗氧化性等作用[5]。乳香精油也具有豐富的美容功效和應(yīng)用,具有抗菌,促進(jìn)傷口結(jié)疤,淡化疤痕、皺紋,增強(qiáng)細(xì)胞活性,鎮(zhèn)靜補(bǔ)水,調(diào)理干燥、老化、暗沉的肌膚,恢復(fù)肌膚彈性、收緊毛孔等作用。與玫瑰精油混合會(huì)產(chǎn)生相當(dāng)甜美的香氣。薰衣草精油薰衣草精油由薰衣草提取出來(lái),有著快速滲透毛囊消毒抗菌,清新潔凈皮膚油脂,祛斑美白,祛除皺紋、使皮膚變嫩,祛除眼袋和黑眼圈的功能,還能促進(jìn)細(xì)胞再生,恢復(fù)皮膚結(jié)締組織,舒緩修復(fù)敏感肌膚(過(guò)敏性膚質(zhì))、收斂毛孔、補(bǔ)充肌膚水分,恢復(fù)肌膚水油平衡等護(hù)膚功能。具有抗氧化性、鎮(zhèn)定、松弛平滑肌、抗真菌等功效[6]。薰衣草精油的安全性、滲透性和多效性讓它在化妝品行業(yè)得到廣泛應(yīng)用。是少數(shù)可以不用稀釋?zhuān)軌蛑苯油磕ǖ木?。胡蘿卜籽精油胡蘿卜籽精油是從野蘿卜中蒸餾而得,呈淡黃色,有著略微苦澀而干燥的氣味。可以改善膚色,使皮膚更緊實(shí)有彈性,還可淡化老人斑,可預(yù)防皺紋的生成,常用來(lái)抗皮膚早衰,還可以促進(jìn)表皮細(xì)胞再生,促進(jìn)傷口結(jié)疤,解決皮膚粗硬干燥等功效。長(zhǎng)久以來(lái)胡蘿卜一直與保持視力良好連在一起,讓胡蘿卜在處理皮膚問(wèn)題,尤其是眼部肌膚上有著更廣泛的應(yīng)用。霍霍巴油霍霍巴油取自西蒙得木果實(shí),有良好的穩(wěn)定性,極易與皮膚融合,具有超凡的抗氧化性;另外,霍霍巴油還含有豐富的維生素,具有滋養(yǎng)軟化肌膚的功效?;艋舭陀褪鞘謨?yōu)質(zhì)的基礎(chǔ)油,除了可以供給皮膚所需要的營(yíng)養(yǎng)成分,而且對(duì)于皮膚也有一定的理療效果。并且霍霍巴油適用于所有膚質(zhì),質(zhì)地清爽細(xì)膩,具有相當(dāng)好的親膚性,不會(huì)給皮膚造成負(fù)擔(dān)。甜杏仁油甜杏仁油最為最常用的基礎(chǔ)油之一,通過(guò)杏仁果實(shí)壓榨制得,精油呈淡黃色,味道輕柔。十分溫和,具有良好的親膚性;甜杏仁油能柔軟皮膚角質(zhì)、抗皺、美白、促進(jìn)治愈傷疤和細(xì)胞再生,可以直接用于皮膚按摩,也可以通過(guò)作為基礎(chǔ)油搭配在復(fù)方精油中使用。甜杏仁油具有豐富的vitamin,同時(shí)通過(guò)易吸收的特質(zhì)讓皮膚補(bǔ)水得到滋養(yǎng)。精油制備從植物中提取植物精油的方法有多種,如壓榨法、吸附法、超臨界萃取法、亞臨界萃取法、浸提法、水蒸氣蒸餾法等。各種提取方法都有特定條件和特定范圍,而使用最多的水蒸氣蒸餾工藝,絕大多數(shù)品種的植物精油都可以用水蒸氣蒸餾技術(shù)和水蒸氣蒸餾的方法來(lái)提取[7]。古代乳香的應(yīng)用形式主要為香料、水煎劑、藥酒和軟膏等,這些古代的應(yīng)用形式發(fā)展到現(xiàn)代,就演變成如今的乳香純露、精油、浸膏及藥丸等。乳香作為傳統(tǒng)香料沿用至今,主要是其中的芳香物質(zhì)深受關(guān)注,而精油便包含了其中的揮發(fā)性芳香物質(zhì),即植物提取物。通常植物提取物的提取方式主要有水蒸氣蒸餾法、有機(jī)溶劑萃取法和超臨界CO2萃取法等[5]。本實(shí)驗(yàn)選用水蒸氣蒸餾法提取乳香精油,水蒸氣蒸餾效率高,過(guò)程簡(jiǎn)單,精油香氣濃郁,含較少蠟質(zhì),質(zhì)量好[8]?;瘖y品功效檢測(cè)化妝品的功能性評(píng)價(jià)方法有皮膚保濕效果測(cè)定、防紫外線效果的測(cè)定、皮膚增白效果的測(cè)定、抑制黑色素產(chǎn)生效果的測(cè)定、護(hù)發(fā)-育發(fā)效果的測(cè)定、抗頭皮屑效果的測(cè)定、化學(xué)燙發(fā)劑的卷發(fā)效果測(cè)定等,在本實(shí)驗(yàn)中可以借鑒的有皮膚保濕效果測(cè)定、皮膚角質(zhì)層再生速度的測(cè)定、皮膚皺紋的測(cè)定、皮膚脂質(zhì)的測(cè)定、皮膚溫度和皮膚血流的測(cè)定[9]。精油的吸收與代謝,通過(guò)細(xì)胞代謝以及抗原抗體反應(yīng),精油可以產(chǎn)生一定的生理功能,通過(guò)皮膚進(jìn)入機(jī)體的精油有助于活化細(xì)胞,去污排毒;精油與血液循環(huán)系統(tǒng),精油是易揮發(fā)的小分子芳香物質(zhì)的混合物,大部分的精油組分具有生物活性可以輕易通過(guò)皮膚進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)并隨血液流遍全身[10]。隨著化妝品科學(xué)與技術(shù)的不斷發(fā)展化妝品被賦予了很多特定的護(hù)理功效,這些護(hù)理功效即為化妝品的功效性。消費(fèi)者對(duì)化妝品的消費(fèi)理念正在逐漸理性化,對(duì)化妝品的安全性和功效性的要求越來(lái)越高,如化妝品的保濕、防曬、祛斑美白、抗衰老等方面都有需求[11]。分析首先制備提取其中所需的植物精油,然后對(duì)五種單方植物精油進(jìn)行抗衰功效評(píng)價(jià),比較后選擇較優(yōu)抗氧化性的精油為主要精油,較弱抗氧化性精油為輔助精油,同時(shí)搭配兩種基礎(chǔ)油制定出復(fù)配比例后制備復(fù)配精油,進(jìn)行不同比例的多組實(shí)驗(yàn),對(duì)復(fù)配精油再次進(jìn)行功效評(píng)價(jià),比較不同復(fù)配比例的復(fù)配精油,選出最優(yōu)配比。水蒸氣蒸餾法精油是從植物內(nèi)提取出來(lái)的具有揮發(fā)性的芳香化合物。植物的花、葉、種子和根莖等各部分都可以用來(lái)提取精油。提取部位決定了精油的不同性質(zhì)。水蒸氣蒸餾法是指將含有揮發(fā)性成分的植物材料與水共蒸餾,使揮發(fā)性成分隨水蒸氣一并餾出,經(jīng)冷凝分取揮發(fā)性成分的浸提方法??顾スπгu(píng)價(jià)[7]根據(jù)皮膚的衰老機(jī)制概括出抗衰老的途徑有保護(hù)皮膚免受外界環(huán)境刺激;清楚細(xì)胞內(nèi)的多余自由基;對(duì)皮膚細(xì)胞進(jìn)行修復(fù)和補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)等。抗衰老化妝品的評(píng)價(jià),根據(jù)自由基傷害理論,自由基過(guò)量產(chǎn)生導(dǎo)致皮膚自然衰老和光致老化的主要原因。減少自由基的產(chǎn)生和清除老化代謝產(chǎn)物已成為目前延緩皮膚衰老的有效方法。目前評(píng)價(jià)清除自由基的能力的指標(biāo)主要有:清除二苯代苦味?;杂苫芰?、清除超氧陰離子能力、清楚羥自由基能力。精油復(fù)配復(fù)配精油是將兩種以上的單方精油和基礎(chǔ)油按照一定的比例混合以此達(dá)到所需的特定功效,不同的精油之間是互相協(xié)調(diào)融合的,更有精油之間的融合還能夠增強(qiáng)效果比起一個(gè)一個(gè)的單方精油來(lái)說(shuō),這就達(dá)到了復(fù)配的真正目的。若復(fù)配精油要用于皮膚上,去提前用大量基礎(chǔ)油進(jìn)行混合,所以往往復(fù)配精油可以直接涂抹的原因就是已經(jīng)將多種單方精油與基礎(chǔ)油按照一定比例調(diào)和過(guò)了。復(fù)配精油與單方精油有著不同的使用效果和不同的使用方法。復(fù)配精油的功效針對(duì)性很強(qiáng),潤(rùn)澤保濕、嫩白補(bǔ)水、煥膚美目、活化抗皺、美顏緊致、抗痘凈化、祛斑除印等等。根據(jù)所需要達(dá)到的功效,來(lái)選擇合適的精油進(jìn)行復(fù)配。復(fù)配精油的調(diào)配方法是指用基礎(chǔ)油稀釋后的單方精油百分比含量,其含量一般不能超過(guò)3%。本實(shí)驗(yàn)為涂抹于眼部所以將濃度控制在0.5%,即植物精油:基礎(chǔ)油=1:200。設(shè)計(jì)水蒸氣蒸餾法提取乳香精油水蒸氣蒸餾實(shí)驗(yàn)原理所依據(jù)的是道爾頓分壓定律,2種液體獨(dú)立存在時(shí)候的蒸氣壓相加之后的和就是這2種液體混合物的蒸氣壓,且這兩種液體有著互不相溶的特性。這就是當(dāng)大氣壓力小于兩液體混合物的蒸氣壓的和時(shí)此混合物開(kāi)始沸騰的原因。因此,1種物質(zhì)單獨(dú)存在時(shí)的沸點(diǎn)要比這種混合物的沸點(diǎn)高得多。所以進(jìn)行水蒸氣蒸餾時(shí),不僅要選用不與水反應(yīng)的有機(jī)溶液,還要比蒸餾的物質(zhì)沸點(diǎn)低許多的溫度才行,同時(shí)還要保證在一百攝氏度以下的溫度就可以讓水與該物質(zhì)一同被蒸出來(lái)。圖3-1水蒸氣蒸餾裝置簡(jiǎn)圖水蒸氣蒸餾法實(shí)驗(yàn)內(nèi)容提前先用50g乳香樹(shù)脂做一次水蒸氣蒸餾提取乳香精油的預(yù)實(shí)驗(yàn),測(cè)試傳統(tǒng)水蒸氣蒸餾法能否提取出精油,同時(shí)確定所設(shè)定的蒸餾條件,其蒸餾水與反應(yīng)物的用量、蒸餾時(shí)間、蒸餾溫度、提取時(shí)間、提前浸泡時(shí)間,觀察是否需要更改。在預(yù)實(shí)驗(yàn)后確定實(shí)驗(yàn)條件,實(shí)驗(yàn)裝置如圖3-1所示,具體操作如下:用電子天平精密稱(chēng)取150g乳香樹(shù)脂與1000mL三口燒瓶,加入450mL水,室溫浸泡1h,加入2-3顆沸石,以防蒸餾到一定溫度時(shí)液體沖出,將蒸餾燒瓶置于油浴鍋內(nèi)加熱,蒸餾溫度為220℃,蒸餾提取時(shí)間為4h。蒸餾時(shí)產(chǎn)生的蒸汽上升遇冷凝管回流,油水混合物將積于回收錐形瓶中,后轉(zhuǎn)移至分液漏斗中,靜置等待混合物分為兩層,旋轉(zhuǎn)活塞放出下層水,并收集上層所得精油,將分離下來(lái)的純露多次沖洗錐形瓶,使錐形瓶中的精油盡量多的倒在分液漏斗中能夠被收集,稱(chēng)重,并進(jìn)行三次重復(fù)實(shí)驗(yàn),計(jì)算傳統(tǒng)水蒸氣蒸餾法所制得的乳香精油的平均提取率。因?yàn)榇藢?shí)驗(yàn)需要準(zhǔn)確控制溫度在220℃,所以選用油浴鍋。精油DPPH自由基清除能力測(cè)定DPPH清除自由基實(shí)驗(yàn)原理DPPH即1,1-二苯基-2-苦基肼基自由基。其分子中,因?yàn)榇嬖谠S多個(gè)吸電子的-NO2和苯環(huán)的大π鍵,因此,氮自由基可以存在,并且十分穩(wěn)定。DPPH分析法是1種清除劑用于篩選自由基,評(píng)價(jià)抗氧化活性的方法。DPPH的乙醇溶液呈紫色,最大吸收波長(zhǎng)為517nm。當(dāng)DPPH溶液中加入自由基清除劑,孤對(duì)電子被配對(duì)時(shí),吸收消失或減弱,以此致使溶液顏色變淺,慢慢呈黃色,同時(shí)在517nm處的吸光度變小,其顏色褪色程度與自由基清除力強(qiáng)度呈線性關(guān)系,所以能夠用分光光度計(jì)法進(jìn)行定量分析。清除率越大,則說(shuō)明這個(gè)物質(zhì)的清除能力越強(qiáng)[6]。測(cè)定DPPH自由基清除率實(shí)驗(yàn)步驟DPPH測(cè)試液的配制取0.002gDPPH溶于35mL乙醇中,超聲粉碎15min,充分振搖,務(wù)必使上下各部分均勻。取1mL該DPPH溶液,在517nm波長(zhǎng)處測(cè)量A值,使A值為1.2-1.3之間最佳。若超過(guò)1.3則加入乙醇后震蕩再次測(cè)量直至A值達(dá)到最佳位置。注意配制的DPPH溶液需避光保存(使用錫紙包裝),且當(dāng)天使用完畢。樣品液配制將精油用乙醇稀釋?zhuān)渲瞥?mg/mL濃度。預(yù)試取DPPH溶液2mL,往其中加入少量樣品液,加樣時(shí),先少后漸多,邊加邊混合,并觀察溶液的褪色情況,當(dāng)溶液顏色基本褪去時(shí),記下樣品量的加樣量。此加樣量為樣品的最大用量,再次最大用量的基礎(chǔ)上,往前設(shè)置5個(gè)用量,即設(shè)置5個(gè)濃度梯度。測(cè)量按照試驗(yàn)加樣表(表3-1),在試管中加入2mL0.1mmol/LDPPH溶液和2mL無(wú)水乙醇,測(cè)定517nm處吸光度A1;在試管中加入2mL0.1mmol/LDPPH溶液,分別加入不同濃度的樣品2mL,震蕩混合均勻,在室溫避光條件下反應(yīng)30min,在517nm處測(cè)定吸光度A2;另取試管加入不同濃度的待測(cè)樣品2mL,分別加入2mL的無(wú)水乙醇,測(cè)定517nm處吸光度A3。參比溶液為無(wú)水乙醇,進(jìn)行3次平行實(shí)驗(yàn),取平均值。清除率按公式(3-1)計(jì)算。清除率(%)=[A1-(A2-A3)]/A3×100%(3-1)表3-1清除DPPH自由基試劑加樣表Table3-1ReactionsystemofscavengingDPPHradical溶液體積/mLA1A2A3DPPH22-樣品-22無(wú)水乙醇2-2五種植物精油分別進(jìn)行單因素測(cè)量,每種精油使用以上方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn),每次實(shí)驗(yàn)找出其IC50值,并且將清除率一直進(jìn)行至90%以上,記錄數(shù)據(jù),繪制成圖表分析。IC50計(jì)算方法:使用SPSS計(jì)算,打開(kāi)SPSS,建立三個(gè)變量,分別是濃度,抑制率和總數(shù)。小數(shù)位數(shù)選擇小數(shù)點(diǎn)后三位,在輸入數(shù)據(jù)后,開(kāi)始計(jì)算。復(fù)配精油功效測(cè)定根據(jù)精油單因素的的DPPH清除自由基能力測(cè)定,比較五種精油的抗氧化性,再根據(jù)精油抗氧化性的強(qiáng)弱制定復(fù)配比例。用基礎(chǔ)油稀釋復(fù)配精油后,測(cè)試復(fù)配精油的抗氧化性,選擇出最有配比。具體測(cè)量方法:按照試驗(yàn)加樣表(表3-2),在試管中加入2mL0.1mmol/LDPPH溶液和2mL無(wú)水乙醇,測(cè)定517nm處吸光度B1;在試管中加入2mL0.1mmol/LDPPH溶液,分別加入不同濃度的樣品2mL,震蕩混合均勻,在室溫避光條件下反應(yīng)30min,在517nm處測(cè)定吸光度B2;另取試管加入不同濃度的待測(cè)樣品2mL,分別加入2mL的無(wú)水乙醇,測(cè)定517nm處吸光度B3。進(jìn)行3次平行實(shí)驗(yàn),取平均值。清除率按公式(3-1)計(jì)算.表3-2清除DPPH自由基試劑加樣表Table3-2ReactionsystemofscavengingDPPHradical溶液體積/mLB1B2B3DPPH22-樣品-22無(wú)水乙醇2-2結(jié)論乳香精油提取率500g乳香樹(shù)脂水蒸氣蒸餾法提取乳香精油總共制得8.7mL,三次重復(fù)提取所得平均提取率為1.55%,呈淡黃色近無(wú)色,透明澄清,易流動(dòng);提取出來(lái)的乳香精油散發(fā)清純的木質(zhì)香氣,同時(shí)伴有淡淡的清甜果香,聞起來(lái)十分舒適愜意。乳香樹(shù)脂質(zhì)地堅(jiān)硬不易直接提取,所以在進(jìn)行提取實(shí)驗(yàn)操作之前應(yīng)先對(duì)其進(jìn)行浸泡處理,使乳香樹(shù)脂和水分充分接觸,會(huì)使乳香樹(shù)脂變得膨脹粘稠,與水融合后水變得渾濁,以此方便蒸餾提取。同時(shí)嘗試過(guò)將乳香樹(shù)脂徹底粉碎后進(jìn)行提取,發(fā)現(xiàn)乳香樹(shù)脂與水融合加熱后會(huì)變成十分粘稠的液體,使得三口燒瓶?jī)?nèi)變成焦黃,不僅不利于精油的餾出,也不利于燒瓶實(shí)驗(yàn)過(guò)后的清洗。在停止加熱后,殘留的粘稠液體會(huì)變成堅(jiān)硬的焦黃色固體,只能加入乙酸乙酯溶劑同時(shí)加熱1小時(shí)以上才能充分溶解。所以呈顆粒感的塊狀乳香樹(shù)脂更加利于蒸餾。還有一點(diǎn)注意便是沸石一定要在加熱前就放進(jìn)蒸餾瓶中,一旦開(kāi)始加熱了再放進(jìn)沸石便不會(huì)再有效果,如此便會(huì)讓蒸餾液體噴出進(jìn)入冷凝管和回流管中,甚至頂出玻璃塞噴出液體十分危險(xiǎn)。若已經(jīng)開(kāi)始加熱出現(xiàn)噴濺的現(xiàn)象,應(yīng)立即停止加熱,待蒸餾液冷卻后再放入沸石。精油抗氧化性能力玫瑰精油圖4-1玫瑰精油DPPH自由基清除能力的測(cè)定CapabilityofscavengingDPPHfreeradicalsofroseessentialoil試驗(yàn)如圖4-1所示:在測(cè)定范圍內(nèi),玫瑰精油的對(duì)DPPH的清除率隨著濃度的升高而增加。當(dāng)玫瑰精油濃度從0.64mg/mL到1.16mg/mL,其DPPH自由基清除率快速增加,從48.36%增加到69.4%;當(dāng)玫瑰精油濃度繼續(xù)增加至2.57mg/mL,其DPPH自由基清除率增加趨勢(shì)變緩,達(dá)到85.1%;相同繼續(xù)增加至3.86mg/mL,趨勢(shì)更加緩慢,達(dá)到91.23%。其中當(dāng)濃度為0.77mg/mL時(shí),其DPPH自由基清除率為56.19%。通過(guò)SPSS計(jì)算得到玫瑰精油IC50=0.648。薰衣草精油圖4-2薰衣草精油DPPH自由基清除能力的測(cè)定CapabilityofscavengingDPPHfreeradicalsoflavenderessentialoil試驗(yàn)如圖4-2所示:在測(cè)定范圍內(nèi),薰衣草精油的對(duì)DPPH的清除率隨著濃度的升高而增加。當(dāng)薰衣草精油濃度從132.3mg/mL到264.6mg/mL,其DPPH自由基清除率快速增加,從34.52%增加到82.4%;當(dāng)薰衣草精油濃度繼續(xù)增加至441mg/mL,其DPPH自由基清除率增加趨勢(shì)變緩,達(dá)到93.68%。其中當(dāng)濃度為176.4mg/mL時(shí),其DPPH自由基清除率為50.92%;濃度為220.5mg/mL時(shí),消除率達(dá)67.59%;濃度為352.8mg/mL時(shí),清除率達(dá)85.77%。通過(guò)SPSS計(jì)算得到薰衣草精油IC50=168.172。胡蘿卜籽精油圖4-3胡蘿卜籽精油DPPH自由基清除能力的測(cè)定CapabilityofscavengingDPPHfreeradicalsofcarrotseedessentialoil試驗(yàn)如圖4-3所示:在測(cè)定范圍內(nèi),胡蘿卜籽精油對(duì)DPPH的清除率隨著濃度的升高而增加。當(dāng)胡蘿卜籽精油濃度從18.22mg/mL到136.65mg/mL,其DPPH自由基清除率快速增加,從5.73%增加到54.96%;當(dāng)胡蘿卜籽精油濃度繼續(xù)增加至303.67mg/mL,其DPPH自由基清除率增加趨勢(shì)變緩,達(dá)到82.91%;相同繼續(xù)增加至439.08mg/mL,趨勢(shì)更加緩慢,達(dá)到93.25%。其中當(dāng)濃度為60.73mg/mL時(shí),其DPPH自由基清除率為26.26%;濃度為121.47mg/mL時(shí),消除率達(dá)46.64%。通過(guò)SPSS計(jì)算得到胡蘿卜籽精油IC50=117.627乳香精油圖4-4乳香精油DPPH自由基清除能力的測(cè)定CapabilityofscavengingDPPHfreeradicalsoffrankincenseessentialoil試驗(yàn)如圖4-4所示:在測(cè)定范圍內(nèi),乳香精油對(duì)DPPH的清除率隨著濃度的升高而增加。當(dāng)乳香精油濃度從35.16mg/mL到175.8mg/mL,其DPPH自由基清除率快速增加,從37.63%增加到73.49%;當(dāng)胡蘿卜籽精油濃度繼續(xù)增加至263.7mg/mL,其DPPH自由基清除率達(dá)到90.57%;繼續(xù)增加至307.65mg/mL,趨勢(shì)緩慢,達(dá)到91.97%。其中當(dāng)濃度為87.9mg/mL時(shí),其DPPH自由基清除率為56.3%;濃度為263.7mg/mL時(shí),消除率達(dá)90.57%。 通過(guò)SPSS計(jì)算得到乳香精油IC50=60.658百里香精油圖4-5百里香精油DPPH自由基清除能力的測(cè)定CapabilityofscavengingDPPHfreeradicalsofthymeessentialoil試驗(yàn)如圖4-5所示:在測(cè)定范圍內(nèi),百里香精油對(duì)DPPH的清除率隨著濃度的升高而增加。當(dāng)百里香精油濃度從0.229mg/mL到0.524mg/mL,其DPPH自由基清除率極速增加,從34.24%增加到74.62%;當(dāng)百里香精油濃度繼續(xù)增加至1.834mg/mL,其DPPH自由基清除率達(dá)到95.09%。其中當(dāng)濃度為0.37mg/mL時(shí),其DPPH自由基清除率為50.45%;濃度為0.46mg/mL時(shí),消除率達(dá)64.32%。通過(guò)SPSS計(jì)算得到百里香精油IC50=0.331對(duì)照實(shí)驗(yàn)VC圖4-6VCDPPH自由基清除能力的測(cè)定CapabilityofscavengingDPPHfreeradicalsofVC試驗(yàn)如圖4-6所示:在測(cè)定范圍內(nèi),VC對(duì)DPPH的清除率隨著濃度的升高而增加。當(dāng)VC濃度從0.001mg/mL到0.0075mg/mL,其DPPH自由基清除率極速增加,從17.89%增加到88.56%;當(dāng)VC濃度繼續(xù)增加至0.01mg/mL,其DPPH自由基清除率達(dá)到92.45%。其中當(dāng)VC濃度為0.0025時(shí)其DPPH自由基達(dá)到32.76%;濃度為0.005時(shí)達(dá)到62.25%。通過(guò)SPSS計(jì)算得到VCIC50=0.003。數(shù)據(jù)總結(jié)將五種精油與VC的抗氧化性進(jìn)行比較,可以看出玫瑰精油和百里香精油具有較強(qiáng)的抗氧化性,而相比較之下薰衣草精油、胡蘿卜籽精油、乳香精油的抗氧化性就相對(duì)弱一點(diǎn)。因此通過(guò)DPPH清除自由基率比較五種精油的抗氧化性,得到百里香精油>玫瑰精油>乳香精油>胡蘿卜籽精油>薰衣草精油。搭配基礎(chǔ)油的復(fù)配精油功效預(yù)實(shí)驗(yàn)嘗試用正交設(shè)計(jì)進(jìn)行復(fù)配實(shí)驗(yàn),來(lái)確定抗氧化性強(qiáng)的用量多少是否決定了復(fù)配精油的抗氧化性。在五個(gè)精油中選擇抗氧化性較強(qiáng)的三個(gè)精油進(jìn)行正交,設(shè)計(jì)三因素三水平的正交試驗(yàn),共九組,選用抗氧化性較好的玫瑰精油、乳香精油和百里香精油進(jìn)行正交試驗(yàn)測(cè)試。表4-1正交設(shè)計(jì)表編號(hào)玫瑰精油乳香精油百里香精油111121233132421352226231731283219333正交設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,抗氧化性最好的百里香精油占濃度比例高時(shí),其復(fù)配精油的抗氧化性也最高,反之,相對(duì)較弱的乳香精油濃度比例高時(shí),其復(fù)配精油的抗氧化性也最弱;相同比例的三者精油其復(fù)配精油的抗氧化性基本一致。所以可以基本按照抗氧化性較好的精油占比高,抗氧化性弱的適量加占比小這樣的規(guī)律來(lái)制定復(fù)配精油的配比組合,即將百里香精油占比最高,其次為玫瑰精油,其余較弱抗氧化性的精油適量加入占比最小。復(fù)配精油測(cè)試選擇制定出四組合適配比的復(fù)配精油,其后測(cè)試了四組復(fù)配精油的抗氧化性,提高百里香精油和玫瑰精油的比例,尤其是抗氧化性最強(qiáng)的百里香精油,同時(shí)降低乳香精油、薰衣草精油和胡蘿卜籽精油的占比。另外考慮到百里香精油具有一定的刺激性,是比較強(qiáng)勁的精油,不可長(zhǎng)期大量的高濃度使用,所以在復(fù)配精油中的占比也不可過(guò)高。同時(shí)搭配大量極易融合吸收的霍霍巴油和具有一定抗敏作用的甜杏仁油作為基礎(chǔ)油,起到稀釋和穩(wěn)定的作用,其中薰衣草精油也有一定舒緩、修復(fù)敏感肌膚的功效,所以也更好地搭配百里香精油,以此完成最終的復(fù)配精油的最終配方。注意混合復(fù)配精油時(shí)用玻璃棒以相同方向常溫、低速攪拌,使五種精油原料充分混合調(diào)整均勻,并且不產(chǎn)生氣泡后,再加入一定比例的基礎(chǔ)油,同方向低速攪拌,充分稀釋融合后完成。選用于眼部精油其植物精油和基礎(chǔ)油的比例設(shè)定為1:200,即濃度為0.5%,比起正常適用于皮膚的復(fù)配精油濃度已經(jīng)低了許多,以此能夠更好的讓眼部肌膚吸收,并且更加安全地使用。表4-2復(fù)配精油比例與抗氧化性編號(hào)玫瑰精油百里香精油乳香精油薰衣草精油胡蘿卜籽精油清除率13611197.56%23622297.71%32411197.43%44511193.36%基礎(chǔ)油添加量為五種植物精油總和的200倍,例如植物精油12份則需要2400份基礎(chǔ)油稀釋。如圖4-2所示,能看出總體四組復(fù)配精油抗氧化性效果都很好,前三組復(fù)配精油的效果尤其更高。那么在基本一致的清除率下,選擇成本最低,也就是用量最低的一組第三組2:4:1:1:1的復(fù)配比例。實(shí)驗(yàn)感想和討論近年來(lái),以化妝品的抗皺、保濕、增白、育發(fā)為代表的功能性化妝品迎合了消費(fèi)者的心意。時(shí)至今日,化妝品已經(jīng)深入到千家萬(wàn)戶(hù),成為人們洗發(fā)、護(hù)膚、清潔、美容的日常生活必需品,因此化妝品的安全性、穩(wěn)定性、使用性和功能性越發(fā)重要。這也是每一位消費(fèi)者所考慮和重視的地方。因此本實(shí)驗(yàn)主要研究眼部精油的制備和應(yīng)用研究,不僅迎合大眾市場(chǎng)的需求,而且在眼部精油方面的研究發(fā)展并不廣泛,還需要有更多的研究和探索,來(lái)開(kāi)發(fā)這一化妝品板塊,充實(shí)化妝品行業(yè)。同時(shí)也對(duì)已有的眼部精油專(zhuān)利進(jìn)行了解分析,例如由玫瑰精油、乳香精油、依蘭精油、天竺葵精油、薰衣草精油、小麥胚芽油組成的1種復(fù)方精油[12],其主要目的為淡化眼睛周?chē)募?xì)小皺紋。具有讓皮膚緊實(shí)、舒緩的特性,滋養(yǎng)皮膚,防皺保濕,改善皮膚松弛有深層凈化和收斂效果,平衡皮脂分泌,促進(jìn)新陳代謝和皮膚更新,消除疤痕等功效。這項(xiàng)專(zhuān)利研究尤其透過(guò)現(xiàn)象看本質(zhì),結(jié)合了生理的循環(huán)系統(tǒng)并通過(guò)滲透作用致以將這款眼部精油發(fā)揮出最大作用。再有,以菩提花精油、德國(guó)洋甘菊精油、羅勒精油、玫瑰精油、霍霍巴油的配方所合成的眼部護(hù)理復(fù)配精油[13]。具有調(diào)理、舒緩敏感肌膚,消炎抗過(guò)敏,消除浮腫,改善松垮、老化皮膚,清潔皮脂,滋養(yǎng)皮膚等功效。與別的眼部精油相比較此專(zhuān)利研究中特別添加了復(fù)合抗氧化劑后,大大延長(zhǎng)了產(chǎn)品的保質(zhì)期。這樣會(huì)讓本就功效十足的眼部復(fù)配精油的效果更上一層樓。此款產(chǎn)品中羅勒精油對(duì)敏感肌膚具有一定的刺激作用,因此搭配具有抗敏的德國(guó)洋甘菊精油,相輔相成。本實(shí)驗(yàn)中選用了玫瑰精油、百里香精油、薰衣草精油、乳香精油、胡蘿卜籽精油、甜杏仁油和霍霍巴油制成了
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