生化分析儀的校準

生化分析儀的校準

重慶醫(yī)科大學附一院陳宏礎一個實驗室測定結果的可靠性是由其精密度、準確性及可比性所決定的，一般必需從下幾方面著手。

1.選好測定方法；2.購買質量過硬的試劑盒；3.要有質優(yōu)的測試儀器；必需進行正確的校準；還要規(guī)范化操作；搞好過硬的室內質量控制；積極參加室間質評活動；還要有一支素質高的隊伍；

現就生化分析儀的校準問題提出個人看法。一、校準的重要性和必要性首先必須明確生化分析儀不論如何先進，它還是一個比較器，它測試出來的標本結果是隨著標準限的設置不同而變化的。二、確立測定系統(tǒng)的概念

對于一個臨床檢測項目，測定系統(tǒng)包括測定原理、試劑、儀器、校準品四要素。在全自動生化分析儀上使用配套的試劑和標準品，即日立7170使用寶靈曼的試劑和校準品（c.f.a.s），在貝克曼CX-7生化分析儀上使用貝克曼的試劑和校準品等。各儀器廠家均有自己的標準測定系統(tǒng)。對于校準品不能亂用，如絕對不能用貝克曼的校準品校準日立生化儀，同樣也不能用寶靈曼的校準品去校準貝克曼生化儀。三、校準品和質控品

校準品（Calibrationmaterials）含有已知量的欲測物，用以校準該測定方法的數值，它與該方法及試劑、儀器是相關聯(lián)的。校準品的作用是為了減少或消除儀器、試劑等造成的系統(tǒng)誤差。因此最好為人血清基質，以減少基質效應造成的誤差。質控品（Controlmaterials）只用于和待測標本同時測定的，為了控制標本的測定誤差，因此要求保存時間十分穩(wěn)定。前者是校準其值而后者是控制誤差用的。四、校準前準備

1.了解燈泡已使用多久？檢查飄移是否合乎要求；2.檢查比色杯的清潔及磨損情況？必要時進行更換；3.用清潔劑泡洗管道4.測定儀器的精密度及線性是否達到儀器性能要求？

五、定值質控血清是否可以校準儀器？

我們在相同條件下，同時用五個進口產品，每家兩種不同濃度的定值如TP、ALB、UREA、UA、ALP、GGT、CK、HBDH、LD、AMY等。表不同廠家定值質控對TP、ALB、、AST、ALP結果與靶值比較

TPALBUREAT偏差%T偏差%T偏差%汽巴康寧1574.392905.04.5汽巴康寧2464.89242.0819.3-5.76寶靈曼1502.034.8-5.178.960.45寶靈曼248.62.8833.7-5.0424-6.77RANDOX159.76.3640.83.887.674.3RANDOX2398.3326.95.9821.6-5.67Human1724.1846.7-4.183.785.16Human229.8-2.6829.8-2.7625.1-5.08Bio-Red1630391.287.10Bio-Red2421.7927018.0-4.44ASTALPT偏差%T偏差%汽巴康寧143-10.5964.2汽巴康寧2184-11.72650.2寶靈曼158.3-11.22422.7寶靈曼214.-12.33842.7RANDOX162-17.7214-16.1RANDOX2144-12.7394-17.7Human133.5-7.5168-2.2Human2151-11.7287-9.1Bio-Red124-14.62522Bio-Red2201-14.32980.84通過上述結果比較，說明不同廠家生產的定值質控血清靶值之間有的相差較大，提示我們決不能用定值質控血清代替校準品作校準用。

六、校準方法例如日立(Hitachi)系列您必須購買寶靈曼(Boehringer)的試劑及其校準品c.f.a.s.(Calibratorforautomatedsystems)，同時準備10至20份新鮮血清。按寶靈曼試劑盒內的說明書設置參數，用c.f.a.s.校準血清進行校準，即可獲得各項目的校準K值，同時觀察一下各項目測定時反應進程圖，檢查各項目參數設置是否在最佳位置，如不在最佳位置應予以重新設置并測定。此時得到的K值即為準確的校準K值，然后測定待測的10至20份新鮮血清三次取其平均值，應該說此結果是用Hitachi-Boehringer檢測系統(tǒng)所獲的測定值。然后用此血清值校準其它測定系統(tǒng)。TPALBALTASTCreaUreaUAMen3017

694302327741475626731543SD86

6.69

6347.9

144850.216.1CV%

2.8

1.0

2.11.7

9.8

1.9

1.1表日立7170、BM試劑每天進行校準(n=81)K值的變化TGCholGluCaCKGGTMean11721449174459238642603SD16.917.4

18.156.8

61.167.9CV%

1.4

1.2

1.0

9.6

1.6

2.6表日立7170、BM試劑每天進行校準(n=81)K值的變化七、關于酶活性測定校準問題

酶活力（u/l）=△A/min×V×106/(ε×v×1)令k=V×106/（ε×v）則酶活力（u/l）=△A/min×ka)

理論K值：根據理論摩爾消光系數（ε）來計算，如NADH為6.22×103b)

實測K值：由于儀器波長的精密及半寬度不同，而應根據實測ε值來設定K值c)

廠家給的K值：廠家生產試劑盒說明書上提供的K值（有的廠家提供6.3×103）d)

校準K值：通過校準物直接校準得到的K值

常用K值有以下幾種：

在日立7170A全自動生化分析儀上

可以得到幾種不同的酶K值，見下表

在日立7170A全自動生化分析儀上

可以得到幾種不同的酶K值，見下表表日立7170A全自動生化分析儀上用不同方法

得到幾種酶的K值

指示物波長理論K值實測K值校準K值ALTNADH340nm244426422（8.1%）3026（23.8%）ASTNADH340mm24442642（8.1%）2775（13.5%）CKNADPH340mm38783878（8.1%）3886（8.3%）GGT4NA405mm14181539（8.5%）1612（13.7%）GGT4NB405mm14751739（17.9%）——ALP4NA（PH10）405mm757825（8.9%）——注：1校準物為寶靈曼c.f.a.s，試劑也用寶靈曼的配套試劑。2括號內數字是該K值與理論K值相比的變化率825（8.9%）以上摘自張克堅文章中*從上述K值中不難發(fā)現實測K值大于理論K值，這說明生化分析儀的測光系統(tǒng)還存在著一定誤差，如波長、半寬度及光徑等偏差，使儀器達不到理論上的最佳狀態(tài)；*校準K值與實測K值之間也存在一定的差距，即使指示物和儀器相同，其差異可能由試劑及校準品造成的；*作者認為最好使用校準K值，但必須由兩個先決條件：1必須使用配套的試劑；2必須使用配套的高質量的校準品，但校準K值應有其溯源性。關于酶活標準品，歐洲標準局（BCR）和美國國家標準技術研究院（NIST）均發(fā)表了人血清基質的酶活性標準物，相信不久將會有公認的標準（校準）品問世。八、必須擬訂校準計劃（文件）

校準工作不是僅進行一次就可萬事無憂一勞永逸，而必須經常化。按照“臨床實驗室質量控制（QC）的要求（草案）”必須要求擬定校準計劃，其內容包括：1．建立校準方法⑴選擇合適（配套）的校準品，包括校準品數目、類型和濃度；⑵如有可能校準品應溯源到參考方法或參考物質；⑶確定校準的頻度。至少每六個月進行一次校準；*改變試劑的種類，或者批號更換了。如果實驗室能說明改變試劑批號并不影響結果的范圍，則可以不進行校準；*儀器或者檢