獸醫(yī)免疫學(xué)(教案)

免疫學(xué)在近20多年來有一個飛躍的發(fā)展，究其原因除它直接關(guān)系到人類的生、老、病、死外，還具有其他生物學(xué)所沒有的特點(diǎn)。首先它能從不同層次、不同水平上研究生命現(xiàn)象，把細(xì)胞學(xué)、生理學(xué)、遺傳學(xué)、生物化學(xué)以及分子生物學(xué)等這些不同的學(xué)科、不同范疇的生物學(xué)有機(jī)地聯(lián)系起來，統(tǒng)一在一起。當(dāng)然它并非是唯一的、全部的，更不能取而代之。自然界各物種之間之所以保留至今，必須具備兩個條件，即個體生存和種的延續(xù)。這首先要求任何生命個體必須適應(yīng)外界環(huán)境，特別是要具有抵抗其他生物侵害的能力。動物（主要指脊椎動物）在抗御病原微生物侵害的自主調(diào)節(jié)過程中形成了免疫系統(tǒng)。在這一系統(tǒng)中有各種不同性質(zhì)的免疫器官和包括淋巴細(xì)胞在內(nèi)的各種免疫活性細(xì)胞。當(dāng)免疫系統(tǒng)的中樞免疫器官分化成熟后，又賦予它分化發(fā)育各種免疫活性細(xì)胞的功能。機(jī)體的免疫功能是多種多樣的，執(zhí)行這些功能的是免疫活性細(xì)胞，對這類細(xì)胞生物活性的研究，無疑地更豐富了細(xì)胞研究的范疇。在免疫系統(tǒng)中有一種很重要的細(xì)胞，就是巨噬細(xì)胞。巨噬細(xì)胞是機(jī)體內(nèi)存在的體重吞噬細(xì)胞。奇怪的是，它能識別各種各樣的病原微生物，甚至包括灰塵和碳粒。更為奇怪的是它不只是簡單地吞噬這些異物，他還要把這些吞噬的微生物進(jìn)行嚴(yán)格的、復(fù)雜的加工處理。在細(xì)胞內(nèi)存在一類特異的蛋白酶，它能將抗原物質(zhì)剪切得恰到好處，既保留了抗原的特異部位——活性多肽，又能適時地把它呈遞出來激活淋巴細(xì)胞。為了保證呈遞的抗原只能激活自身的淋巴細(xì)胞，在巨噬細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生一種自身特有的、只能被自身淋巴細(xì)胞識別的蛋白質(zhì)——組織相容性分子?？乖嚯呐c它結(jié)合后被運(yùn)送到細(xì)胞膜上，其結(jié)果是只有同時識別抗原多肽和組織相容性分子的自身淋巴細(xì)胞才能被激活。細(xì)胞產(chǎn)生組織相容性抗原時，還產(chǎn)生一種伴侶蛋白。伴侶蛋白的作用是保證組織相容性分子特定的構(gòu)象和構(gòu)象的穩(wěn)定，同時也避免了與細(xì)胞內(nèi)自身的蛋白質(zhì)肽的結(jié)合。這樣一來一個簡單的抗原呈遞，卻引發(fā)了復(fù)雜的細(xì)胞學(xué)、生物化學(xué)過程，成為細(xì)胞學(xué)、生物化學(xué)、分子免疫學(xué)的交叉點(diǎn)和研究熱點(diǎn)之一。第一節(jié)免疫概念的演變一、免疫的傳統(tǒng)概念免疫（immune）一詞是來自于拉丁文“immunis”。很早以前，人們就注意到傳染病患者痊愈后，對該病即產(chǎn)生不同程度的不感應(yīng)性，即所抗御病原微生物在機(jī)體內(nèi)生長繁殖，解除毒素或毒性酶等有害代謝產(chǎn)物的毒害作用。因此，在相當(dāng)長的時期內(nèi)，就將這種不感受性稱為“免疫”，意即免除感染、免除疫病。免疫學(xué)從一開始就是伴隨著抗傳染病的研究而發(fā)展起來的。這就是說免疫與微生物密切相關(guān)，使人們認(rèn)為免疫僅指機(jī)體抗感染的防御功能，而且免疫對機(jī)體都是有利的。二、免疫的現(xiàn)代概念隨著更多現(xiàn)象的觀察，這種傳統(tǒng)的概念逐漸動搖了。如注射異種動物的血清引起的血清病，同種異體間組織移植發(fā)生的排斥現(xiàn)象，血型不符的輸血引起的輸血反應(yīng)，有些物質(zhì)引起的過敏反等。這顯然不是感染和抗感染造成的。由于這些觀察的積累及對其科學(xué)的分析，使人們對傳統(tǒng)免疫學(xué)的認(rèn)識發(fā)生了改變。這些觀念的改變包括：1、免疫應(yīng)答不一定由病原因子引起（如花粉），免疫功能不局限在抗感染方面；2、免疫應(yīng)答不一定對機(jī)體有利，也可以有害。這就形成了現(xiàn)代免疫概念：免疫（immunity）是機(jī)體識別和排除抗原異物，維持機(jī)體生理平衡和穩(wěn)定的保護(hù)性反應(yīng)，具有三方面的功能，對機(jī)體有利，但在一定條件下，也對機(jī)體不利，將引起機(jī)體損傷。三、機(jī)體免疫的功能機(jī)體免疫功能包括免疫防御、自身穩(wěn)定和免疫監(jiān)視。免疫防御（immunologicaldefence）病原微生物或其有害產(chǎn)物侵入機(jī)體后，機(jī)體通過免疫系統(tǒng)的免疫應(yīng)答，產(chǎn)生免疫物質(zhì)，消除侵入機(jī)體內(nèi)的病原微生物或其有害產(chǎn)物的致病作用。此功能正常時，保護(hù)機(jī)體免除傳染病。功能低下時，機(jī)體受反復(fù)感染，甚至死亡。功能過高時成為變態(tài)反應(yīng)，引起機(jī)體損傷。自身穩(wěn)定（immunologicalhomeostasis）機(jī)體通過免疫系統(tǒng)的免疫反應(yīng)，保證機(jī)體組織和細(xì)胞進(jìn)行正常的代謝活動，不斷清除自身衰老和損傷的組織細(xì)胞，使機(jī)體內(nèi)部的細(xì)胞保持均一性，以防發(fā)生自身免疫病。功能正常時，維持自身組織和生理功能的穩(wěn)定和平衡。功能失調(diào)時，易引起自身免疫病。免疫監(jiān)視（immunologicalsurveillance）機(jī)體內(nèi)細(xì)胞由于受理化因素或病毒等作用，或由于遺傳誤差，經(jīng)常會產(chǎn)生非正常型的突變細(xì)胞，其機(jī)率可達(dá)十億分之一。機(jī)體內(nèi)的免疫細(xì)胞主要是T細(xì)胞，能及時識別并通過免疫反應(yīng)消滅自身出現(xiàn)的變異細(xì)胞。這些變異細(xì)胞有惡性增生的特性，若這一功能失調(diào)可發(fā)生腫瘤。機(jī)體的上述三大功能，必然與機(jī)體的神經(jīng)—體液系統(tǒng)密切相關(guān)，受神經(jīng)系統(tǒng)的興奮與抑制調(diào)節(jié)，依靠腦下垂體—腎上腺皮質(zhì)系統(tǒng)的作用，來維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境的相對穩(wěn)定。表1機(jī)體的免疫功能功能功能正常功能異常免疫防御抵抗感染反復(fù)感染或變態(tài)反應(yīng)自身穩(wěn)定清除衰老損傷的細(xì)胞自身免疫病免疫監(jiān)視清除突變的細(xì)胞腫瘤發(fā)生獸醫(yī)應(yīng)用免疫學(xué)的基本內(nèi)容動物機(jī)體的免疫應(yīng)答是免疫系統(tǒng)對抗原進(jìn)行的復(fù)雜反應(yīng)。免疫學(xué)是研究機(jī)體免疫應(yīng)答和體內(nèi)外免疫反應(yīng)原理和規(guī)律的科學(xué)。免疫學(xué)的理論和實驗技術(shù)應(yīng)用到其它各個生物學(xué)科，形成了醫(yī)學(xué)免疫學(xué)、獸醫(yī)免疫學(xué)、免疫病理學(xué)、免疫藥理學(xué)等許多分支學(xué)科。獸醫(yī)免疫學(xué)是研究畜、禽、小動物等動物機(jī)體的免疫系統(tǒng)與抗原免疫反應(yīng)的科學(xué)。本課程的基本內(nèi)容包括免疫學(xué)基礎(chǔ)理論和應(yīng)用兩部分?；A(chǔ)理論部分包括機(jī)體的非特異性免疫，免疫系統(tǒng)，抗原，特異性免疫概述，細(xì)胞免疫，體液免疫，免疫應(yīng)答的影響因素及調(diào)節(jié)和變態(tài)反應(yīng)等內(nèi)容。學(xué)習(xí)獸醫(yī)免疫學(xué)將為進(jìn)行動物傳染病的免疫學(xué)預(yù)防、診斷和治療打下基礎(chǔ)，因而它是獸醫(yī)專業(yè)中一門重要的基礎(chǔ)課程，也是獸醫(yī)行業(yè)人士必須具備的基本知識。免疫系統(tǒng)免疫系統(tǒng)（immunesystem）是動物機(jī)體內(nèi)執(zhí)行免疫功能的器官和細(xì)胞。免疫系統(tǒng)由免疫器官和免疫細(xì)胞組成。免疫器官免疫器官包括中樞免疫器官和外周免疫器官。一、中樞免疫器官是源生免疫細(xì)胞的器官。包括骨髓，胸腺和禽類的法氏囊。它們的功能和特點(diǎn)是：I、發(fā)生、發(fā)育較早；II、是造血干細(xì)胞增殖發(fā)育分化為T、B淋巴細(xì)胞的場所，淋巴細(xì)胞在此增殖不需要抗原的刺激；III、它們向外周免疫器官輸送T、B細(xì)胞，決定著外周免疫器官的發(fā)育。1、骨髓（bonemarrow）骨髓主要是四肢長骨骨髓，是造血器官，是紅細(xì)胞，粒細(xì)胞，單核吞噬細(xì)胞和淋巴干細(xì)胞的發(fā)源地。哺乳動物的B細(xì)胞就是骨髓中淋巴干細(xì)胞分化成熟而成，并在骨髓中與抗原反應(yīng)產(chǎn)生特異性抗體，所以骨髓也是抗體產(chǎn)生的主要器官。若骨髓功能受損，將引起嚴(yán)重的免疫缺陷。2、胸腺（thymus）哺乳動物的胸腺位于胸腔前部縱膈內(nèi)，狗、馬、豬及牛等的胸腺向頸部伸展至甲狀腺。胸腺隨年齡的增大而增長，到性成熟期為最大，以后逐漸退化、萎縮。應(yīng)激狀態(tài)，嚴(yán)重營養(yǎng)不良，長期患病等均會導(dǎo)致胸腺迅速萎縮。骨髓的淋巴干細(xì)胞經(jīng)血液到達(dá)胸腺內(nèi)，在胸腺素（thymosin）和胸腺生成素（thymopietin）等誘導(dǎo)下分化增殖，大部分經(jīng)2~3天死亡，少部分成熟為胸腺誘導(dǎo)細(xì)胞（thymusderived），簡稱為T細(xì)胞。T細(xì)胞隨血液遷移到外周免疫器官的胸腺依賴區(qū)定居，參與細(xì)胞免疫應(yīng)答，也輔助和調(diào)節(jié)體液免疫應(yīng)答。動物幼齡期，胸腺對細(xì)胞成熟至關(guān)重要，此時切除胸腺可造成嚴(yán)重的T細(xì)胞免疫缺陷病。成年動物切除胸腺的后果沒那么嚴(yán)重，切除幾個月后細(xì)胞免疫功能才逐漸減弱。某些病毒感染也可損害胸腺功能，引起相似的免疫缺陷病。3、法氏囊（bursaofFabricius）位于幼禽泄殖腔背側(cè)，性成熟前生長到最大，以后逐漸退化、萎縮、消失。法氏囊是禽類特有的淋巴器官。骨髓的淋巴干細(xì)胞到達(dá)法氏囊被誘導(dǎo)分化成熟為囊誘導(dǎo)（bursaderived）細(xì)胞，簡稱為B細(xì)胞。B細(xì)胞經(jīng)淋巴和血液循環(huán)移到外周免疫器官，參加體液免疫應(yīng)答。雛雞切除法氏囊，B細(xì)胞成熟受影響，接種抗原不能產(chǎn)生抗體。性成熟前的幼雞，感染傳染性法氏囊炎病毒，法氏囊將受破壞、萎縮，將嚴(yán)重影響體液免疫應(yīng)答。二、外周免疫器官外周免疫器官是巨噬細(xì)胞，T細(xì)胞和B細(xì)胞分布的場所，也是對抗原進(jìn)行免疫應(yīng)答的部位。外周免疫器官包括淋巴結(jié)、脾臟和粘膜相關(guān)淋巴樣組織。1．淋巴結(jié)（lymphnode）淋巴結(jié)分布全身各部位淋巴管的徑路上，定居著大量的巨噬細(xì)胞，T細(xì)胞和B細(xì)胞，其中T細(xì)胞占75%，B細(xì)胞占25%，起過濾捕捉淋巴液中的抗原，并進(jìn)行免疫應(yīng)答的作用。淋巴結(jié)分皮質(zhì)和髓質(zhì)及兩個區(qū)域間的副皮質(zhì)區(qū)。皮質(zhì)中主要聚居B細(xì)胞，排列成小結(jié)稱為初級濾泡。B細(xì)胞受抗原刺激后不斷分裂增殖，形成生發(fā)中心，稱二級濾泡。皮質(zhì)區(qū)也有一些T細(xì)胞分散于各個生發(fā)中心之間。副皮質(zhì)區(qū)中主要定居的是T細(xì)胞，排列成界限不清的小結(jié)，稱為三級濾泡。初生時期切除了胸腺的動物，副皮質(zhì)區(qū)缺失T細(xì)胞，所以稱副皮質(zhì)區(qū)為胸腺依賴區(qū)。髓質(zhì)區(qū)由B細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、網(wǎng)狀細(xì)胞和漿細(xì)胞排列成髓索。進(jìn)入淋巴結(jié)的抗原，被髓質(zhì)內(nèi)的巨噬細(xì)胞捕捉、吞噬、加工，傳給副皮質(zhì)區(qū)的T細(xì)胞，T細(xì)胞轉(zhuǎn)化為大形的母細(xì)胞，母細(xì)胞增殖成更多的小淋巴細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞免疫應(yīng)答。巨噬細(xì)胞將抗原傳給皮質(zhì)區(qū)的一級濾泡內(nèi)的B細(xì)胞，引起增殖，形成生發(fā)中心，并引起抗體產(chǎn)生的體液免疫應(yīng)答。2．脾臟（Spleen）脾臟是造血、儲血、濾血和淋巴細(xì)胞分布及進(jìn)行免疫應(yīng)答，產(chǎn)生抗體的器官。脾臟由紅髓和白髓兩部分組成，紅髓中分布網(wǎng)狀細(xì)胞。巨噬細(xì)胞，稱為脾的胸腺依賴區(qū)。脾小結(jié)內(nèi)有散在的B細(xì)胞，受抗原刺激后也形成生發(fā)中心。白髓與紅髓之間分布較多的巨噬細(xì)胞，淋巴細(xì)胞和豐富的血管。在脾臟中B細(xì)胞占65%，血流中的大部分抗原在脾臟中被巨噬細(xì)胞吞噬，加工并傳遞給B細(xì)胞，刺激B細(xì)胞分化增殖形成生發(fā)中心，并產(chǎn)生抗體。3．粘膜相關(guān)淋巴樣組織（MALT）包括腸相關(guān)淋巴樣組織（GALT）、氣管相關(guān)淋巴樣組織（BALT）、Peyers淋巴集結(jié)（PP）、腸系膜淋巴結(jié)（MLT）、闌尾、腮腺、淚腺和乳腺等的淋巴組織，共同組成一個粘膜免疫應(yīng)答網(wǎng)絡(luò)，又稱為粘膜免疫系統(tǒng)。據(jù)研究，這一系統(tǒng)的淋巴細(xì)胞比脾臟和淋巴結(jié)還要多，疫苗抗原到達(dá)粘膜淋巴組織，引起免疫應(yīng)答，大量產(chǎn)生IgA抗體，分泌在粘膜表面，形成第一道特異性免疫保護(hù)防線，尤其對經(jīng)呼吸道感染的病原微生物，粘膜免疫作用至關(guān)重要。免疫細(xì)胞是指一切參與免疫應(yīng)答或與免疫有關(guān)的細(xì)胞統(tǒng)稱為免疫細(xì)胞（immunocyte）。它包括單核—吞噬細(xì)胞系統(tǒng)，淋巴細(xì)胞、粒細(xì)胞和肥大細(xì)胞等。其中能接受抗原刺激而活化、增殖、分化發(fā)生特異性免疫應(yīng)答的淋巴細(xì)胞稱為抗原特異性淋巴細(xì)胞（antigenspecificlymphocyte），或稱免疫活性細(xì)胞（immunocompetentcell,ICC），即T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞（簡稱T、B細(xì)胞）。單核—吞噬細(xì)胞系統(tǒng)單核—吞噬細(xì)胞系統(tǒng)（Mononuclearphagocytesystem）由骨髓中的干細(xì)胞發(fā)育而成，進(jìn)入血液循環(huán)和各個組織中。在血液中的細(xì)胞稱為單核細(xì)胞（monocyte），各組織中定居的細(xì)胞稱為巨噬細(xì)胞（macrophage,Mφ），不同組織中的巨噬細(xì)胞具有不同名稱。單核吞噬細(xì)胞具有多種膜受體，多種生物學(xué)功能。單核—吞噬細(xì)胞的膜抗原和膜受體膜Ia抗原有的Mφ細(xì)胞膜上與B細(xì)胞T細(xì)胞一樣，具有兩條由免疫應(yīng)答基因（immuneresponsegene,Ir）編碼表達(dá)的多肽鏈，稱為Ia抗原（Immune-associatedantigen）。這類Ia+Mφ具有遞呈抗原的功能，但吞噬功能較弱；另一種Ia-Mφ不能遞呈抗原，而吞噬功能較強(qiáng)。膜受體單核吞噬細(xì)胞上具有IgG、IgA、IgM、IgE各類免疫球蛋白的Fc受體，補(bǔ)體C3b受體和免疫干擾素（IFN-γ）受體。通過這些受體，Mφ可與各類Ig、補(bǔ)體C3b和IFN-γ結(jié)合，在體外進(jìn)行EA玫瑰花環(huán)試驗，EAC玫瑰花環(huán)試驗等。單核吞噬細(xì)胞的功能1．分泌功能單核吞噬細(xì)胞具有強(qiáng)大的分泌功能，它們分泌的產(chǎn)物現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)近百種。單核吞噬細(xì)胞通過這些眾多的分泌產(chǎn)物，在機(jī)體的血液生成、凝固、炎癥過程、非特異性防御、特異性免疫應(yīng)答、殺傷腫瘤細(xì)胞、修復(fù)和再生等過程中，均發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)控制作用。2．吞噬消化功能單核細(xì)胞和Ia-Mφ具有強(qiáng)大吞噬消化異物、微生物及機(jī)體自身衰老細(xì)胞的功能。3．遞呈抗原功能Ia+的Mφ具備遞呈抗原功能，其遞呈過程是，Mφ通過免疫球蛋白的Fc受體和C3b受體攝取抗原，吞入胞內(nèi)形成吞噬小體（endosome），吞噬小體內(nèi)的抗原大部分被溶酶體的酶類消化、降解，存下的抗原決定簇，一方面與胞內(nèi)的Ia抗原偶聯(lián)成Ag-Ia，此時抗原的免疫原性比原來的提高1000倍；另一方面激活胞內(nèi)的免疫基因，轉(zhuǎn)錄出mRNA，與少量抗原決定簇偶聯(lián)成免疫原性也很強(qiáng)的免疫核糖核酸（immune，RNA，iRNA），稱為超級抗原（superantigen）。Ag-Ia轉(zhuǎn)移到Mφ細(xì)胞膜上，與輔助性T細(xì)胞（TH）膜上的Ia抗原識別后將Ag-Ia復(fù)合物提交給TH細(xì)胞為第一信號，同時由Mφ分泌的白細(xì)胞介素-I（IL-1）作用于TH細(xì)胞為第二信號，使TH激活，激活的TH再激活其它T細(xì)胞、B細(xì)胞，使之分化、增殖，產(chǎn)生細(xì)胞免疫與體液免疫。Mφ不但有遞呈抗原，激發(fā)免疫的作用，而且由于其被激活程度不同，分泌活性物質(zhì)不同，而具有增強(qiáng)或抑制機(jī)體免疫的調(diào)節(jié)作用。4．殺腫瘤與助瘤作用Mφ分泌的TNF、水解蛋白酶、精氨酸酶及過氧化物等，有抑制或殺滅腫瘤細(xì)胞的功能。但有些Mφ受腫瘤細(xì)胞趨化因子（tumorderivedchemotacticfactor.TDCF）的招引，進(jìn)入腫瘤組織內(nèi)，反而產(chǎn)生腫瘤血管因子（tumorangiogenesisfactor,TAF）等，有助瘤生長或轉(zhuǎn)移的作用。T細(xì)胞T細(xì)胞是在胸腺內(nèi)分化發(fā)育成熟的。進(jìn)入胸腺的前T細(xì)胞（T系淋巴干細(xì)胞）在胸腺激素和由胸腺保育細(xì)胞合成的神經(jīng)肽、催產(chǎn)素（ocytocin）、精氨酸加壓素（argininevasopressin,AVP）、白細(xì)胞介素—2（interleukin2,IL-2）等多種激素的作用下進(jìn)一步發(fā)育，其實對自身成分起應(yīng)答反應(yīng)的“禁忌細(xì)胞株”（forbiddenclone）被抑制或消除，僅不到5%的T細(xì)胞發(fā)育成熟。這些T細(xì)胞稱為胸腺依賴性淋巴細(xì)胞（thymusdependentlymphocyte）。在T細(xì)胞發(fā)育的不同階段，其細(xì)胞表達(dá)不同種類的分子，成熟T細(xì)胞在靜止期和活化期其細(xì)胞表面表達(dá)的分子種類及數(shù)目也都不同，它們涉及T細(xì)胞對抗原的識別、細(xì)胞的活化、信息的傳遞、細(xì)胞因子的接受和繼發(fā)的增殖和分化過程，正是由于這些差異，T細(xì)胞在功能上才有所不同。1．T細(xì)胞的來源及分布在胚胎期來源于卵黃囊和肝。出生后來源于骨髓多能干細(xì)胞，進(jìn)入胸腺后在胸腺素等誘導(dǎo)下，經(jīng)過10~30天分化、增殖，成熟為T細(xì)胞。T細(xì)胞經(jīng)血流，有的分布于己于人淋巴結(jié)的胸腺依賴區(qū)，在淋巴結(jié)中，T細(xì)胞占淋巴細(xì)胞總數(shù)的75%，有的分布于脾臟白髓中央小動脈周圍，占脾臟中淋巴細(xì)胞總數(shù)35%。T細(xì)胞可反復(fù)經(jīng)全身血液→外周免疫器官→淋巴管→胸導(dǎo)管→血液，稱為淋巴細(xì)胞的再循環(huán)。由于再循環(huán)，T細(xì)胞在外周血液中約占淋巴細(xì)胞總數(shù)的60%~70%，在胸導(dǎo)管中則高達(dá)95%。再循環(huán)使更好發(fā)揮和擴(kuò)大T細(xì)胞的細(xì)胞免疫效應(yīng)和免疫調(diào)節(jié)作用。2．T細(xì)胞的表面標(biāo)志T細(xì)胞、B細(xì)胞用染色方法，在光學(xué)顯微鏡中看起來沒有差異，但它們的細(xì)胞膜上球蛋白的特性有明顯的差異，表現(xiàn)不同的表面受體和表面抗原，具有不同的作用，統(tǒng)稱為表面標(biāo)志（surfacemarker）。T細(xì)胞的表面受體抗原受體（Tcellreceptor）T細(xì)胞的表面抗原受體由兩條肽鏈組成，每條肽鏈有可變區(qū)和恒定區(qū)，不同的T細(xì)胞，其抗原受體裁的可變區(qū)不同，從而決定T細(xì)胞識別抗原和免疫應(yīng)答的特異性。E受體（erythrocytereceptor）犬、馬、豬、牛、羊等動物的T細(xì)胞表面有異種動物紅細(xì)胞（erythrocyte）受體。T細(xì)胞通過E受體可與異種動物紅細(xì)胞形成E玫瑰花環(huán)，B細(xì)胞沒有E受體，因而應(yīng)用E花環(huán)試驗（E.rosettetest）可以區(qū)分T細(xì)胞和B細(xì)胞，檢測動物血液中T細(xì)胞的數(shù)量。致有絲分裂原受體（mitogenreceptor）有些物質(zhì)能刺激細(xì)胞發(fā)生有絲分裂，稱為有絲分裂原。例如植物血凝素（PHAphytohemagglutinin）、刀豆素A（concanavalinA.ConA）等。T細(xì)胞具有PHA和CcnA的受體，B細(xì)胞沒有。PHA或ConA能與T細(xì)胞的相應(yīng)受體結(jié)合并刺激T細(xì)胞轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞，因此，應(yīng)用淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗也可以區(qū)分T細(xì)胞和B細(xì)胞，并了解機(jī)體的細(xì)胞免疫功能狀態(tài)。此外，T細(xì)胞表面尚有麻疹病毒受體，少量IgM、IgG的Fc受體，多種細(xì)胞因子（IL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-6等）受體。T細(xì)胞的表面抗原T細(xì)胞的表面抗原隨T細(xì)胞分化程度而異，故稱為T細(xì)胞的分化抗原。1982年以前，分別命名為OKT1、OKT2、……。1982年第一屆人類白細(xì)胞分化抗原國際會議建議用分化群（clusterofdifferentiation.CD），即CD1、CD2、……命名。3．T細(xì)胞的亞群及其功能按T細(xì)胞的表型（phenotype）即表面抗原（CD）及功能，可分為細(xì)胞毒性T細(xì)胞（cytotoxicT，TC）、抑制性T細(xì)胞（suppresorT，TS）、輔助性T細(xì)胞（helperT，TH）和遲發(fā)型超敏反應(yīng)T細(xì)胞（delayedtypehypersensitivityT，TD）四個亞群。它們的表型及功能見表4。表4T細(xì)胞亞群T細(xì)胞亞群表型功能TC細(xì)胞CD3+CD4-CD8+殺傷靶細(xì)胞，分泌IFN-γTS細(xì)胞CD3+CD4-CD8+抑制靶細(xì)胞功能，分泌TSFTH細(xì)胞CD3+CD4+CD8-分泌淋巴因子細(xì)胞，輔助T、B細(xì)胞和Mф的作用TD細(xì)胞CD3+CD4+CD8-分泌MIF，IFN-γB細(xì)胞B細(xì)胞是在鳥類的法氏囊、哺乳動物和人類的骨髓內(nèi)分化發(fā)育成熟的。來自卵黃囊血島經(jīng)胚肝或骨髓轉(zhuǎn)移到法氏囊的B系干細(xì)胞，開始在皮質(zhì)部位發(fā)育成前B細(xì)胞，繼而進(jìn)入髓質(zhì)，在髓質(zhì)上皮細(xì)胞產(chǎn)生的囊生長素（bursopoitin）等激素的培育和誘導(dǎo)下發(fā)育成“不成熟B細(xì)胞”（immature），最后在髓質(zhì)內(nèi)發(fā)育為成熟的B細(xì)胞。B細(xì)胞的壽命較短，幾天至幾周，有的定居于淋巴結(jié)皮質(zhì)區(qū)、淋巴小結(jié)和生發(fā)中心，在淋巴結(jié)的B細(xì)胞較少，約占25%；有的分布于脾臟髓索，約占脾內(nèi)淋巴細(xì)胞的60%。參加再循環(huán)的B細(xì)胞很少，在正常機(jī)體血液中，B細(xì)胞僅占淋巴細(xì)胞的20%~30%。1.B細(xì)胞的表面受體A．抗原受體B細(xì)胞的抗原受體是B細(xì)胞分化過程中表達(dá)在膜表面的免疫球蛋白（Surfacemembraneimmunoglobulin,SmIg），每個B細(xì)胞約有105個SmIg，大部分是IgM和IgD，以它們的Fc段嵌插在細(xì)胞膜內(nèi)，F(xiàn)ab段向外游離，由于Fab段的多樣性，故可識別并結(jié)合相應(yīng)抗原。B細(xì)胞發(fā)育早期只帶SmIgM，與抗原結(jié)合后繼續(xù)發(fā)育受阻，易產(chǎn)生免疫耐受性。發(fā)育至同時帶有SmIgM和SmIgD的B細(xì)胞，與抗原結(jié)合后被活化分泌IgM抗體。表面只有SmIgD的B細(xì)胞，與抗原結(jié)合后分化的漿細(xì)胞產(chǎn)生各類抗體。B．Fc受體B細(xì)胞膜上有一種糖蛋白，能與免疫球蛋白的Fc段結(jié)合，稱為Fc受體。當(dāng)紅細(xì)胞與相應(yīng)抗體結(jié)合后，抗體的Fc段可與B細(xì)胞膜上的Fc受體結(jié)合，形成EA-玫瑰花環(huán)（erythroeyteantibodynosette），該試驗稱為EA-玫瑰花環(huán)試驗，可用于檢測機(jī)體的B細(xì)胞。C．C3b受體B淋巴細(xì)胞表面與單核-吞噬細(xì)胞一樣，具有補(bǔ)體C3b片段的受體，也可以應(yīng)用EAC-玫瑰花環(huán)試驗，檢測機(jī)體的B細(xì)胞。此外，B細(xì)胞膜上也有致有絲分裂原-美洲商陸、脂多糖（LPS）、金黃色葡萄球菌CowanI的受體，多種細(xì)胞因子受體和EB病毒受體，必要時也可通過這些受體鑒別T細(xì)胞和B細(xì)胞。2．B細(xì)胞的亞群及功能目前主要按B細(xì)胞產(chǎn)生抗體時是否需要TH細(xì)胞的輔助分為B1、B2兩個亞群。亞群不需要TH輔助，可直接依賴T細(xì)胞抗原（TLAg）的刺激，產(chǎn)生免疫應(yīng)答。亞群接受依賴T細(xì)胞抗原（TDAg）的刺激，必須TH的輔助才產(chǎn)生抗體。K細(xì)胞（Killercell）K細(xì)胞直接從骨髓干細(xì)胞分化而成熟。K細(xì)胞上具有IgG的Fc受體，能發(fā)揮抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒（antibody-dependentcell-mediatedcytotoxicity.ADCC）作用，殺傷寄生蟲、癌細(xì)胞等帶抗原的靶細(xì)胞。其過程為靶細(xì)胞在體內(nèi)與特異的IgG抗體結(jié)合后，IgG的Fc段被活化，與K細(xì)胞膜上的Fc受體結(jié)合，K細(xì)胞被激活，發(fā)揮細(xì)胞毒作用，殺傷靶細(xì)胞。K細(xì)胞在動物體內(nèi)不多，僅占淋巴細(xì)胞總數(shù)的10%左右，但在少量特異抗體介導(dǎo)下具有強(qiáng)大的殺傷力，這是因為K細(xì)胞的Fc受體活性很高，在EA玫瑰花環(huán)試驗中，如將抗體稀釋1：8000后，與綿羊紅細(xì)胞結(jié)合的復(fù)合物，僅與K細(xì)胞，而不與B細(xì)胞形成EA-玫瑰花環(huán)。故有人稱K細(xì)胞為高活力EA-玫瑰花環(huán)形成細(xì)胞（HighavidityEArosetteformingcell）。五、NK細(xì)胞（Naturalkillercell）目前認(rèn)為NK細(xì)胞也直接從骨髓干細(xì)胞分化而來，約占外周血中淋巴細(xì)胞總數(shù)7%，胞漿中有嗜天青顆粒，故稱為大顆粒淋巴細(xì)胞（Largegranularlymphocyte.LGL）。NK細(xì)胞無需抗體和補(bǔ)體的協(xié)助可自發(fā)識別并溶解某些腫瘤細(xì)胞及病毒感染細(xì)胞。所以NK細(xì)胞在免疫監(jiān)視和抗病毒感染中起重要作用。據(jù)報道干擾素（IFN）和白介素2（IL-2）可增強(qiáng)NK細(xì)胞的殺傷作用。此外NK細(xì)胞可能還參與免疫調(diào)節(jié)，在維持和穩(wěn)定特異性免疫中起重要作用。六、其它細(xì)胞粒細(xì)胞和肥大細(xì)胞它們不直接參與免疫應(yīng)答，但在特異性免疫的效應(yīng)階段，可發(fā)揮一定的作用；例如中型粒細(xì)胞膜上也有IgG的Fc受體，也能發(fā)揮ADCC作用；粒細(xì)胞也具有補(bǔ)體受體，參與免疫調(diào)理作用；嗜酸性粒細(xì)胞在寄生蟲免疫、殺滅寄生蟲方面起作用；嗜堿性粒細(xì)胞和肥大細(xì)胞在I型變態(tài)反應(yīng)中發(fā)揮作用。七、免疫細(xì)胞的凋亡細(xì)胞的凋亡（apoptosis）又稱細(xì)胞程序性死亡（programmedcelldeath.PCD），是指為維護(hù)機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，由基因控制的，在生理條件下，細(xì)胞自主性的、不引起局部炎癥的死亡過程。這是Kerr于1972年首先提出的，有別于過去通常所指的細(xì)胞死亡的一種新概念。過去的概念認(rèn)為，細(xì)胞的死亡是細(xì)胞受到損傷時，細(xì)胞腫脹、破裂壞死，細(xì)胞漿釋放到外部環(huán)境，細(xì)胞死亡過程時將引起一系列的炎癥反應(yīng)的病理過程。細(xì)胞凋亡的過程是胞漿內(nèi)Ca++、CAMP升高，RNA和蛋白質(zhì)合成增加，內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶激活，自身染色體DNA被降解，降解后的胞核和胞漿成分由膜性成分包裹成凋亡小體（apoptosisbodies），引起細(xì)胞膜的變化，可被吞噬細(xì)胞表面粘液分子等快速識別，吞噬并降低，因而不引起局部炎癥反應(yīng)。第二章抗原抗原（Antigen）是指能刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)中的T細(xì)胞，B細(xì)胞發(fā)生免疫應(yīng)答，產(chǎn)生免疫產(chǎn)物，并能與免疫產(chǎn)物發(fā)生特異性反應(yīng)的物質(zhì)?？乖艽碳C(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答和免疫產(chǎn)物的性質(zhì)稱為免疫原性（immunogenicity）?？乖c其相應(yīng)的免疫產(chǎn)物發(fā)生反應(yīng)的性質(zhì)稱為反應(yīng)原性（reactionogenicity）。大多數(shù)抗原既具有免疫原性又具有反應(yīng)原性，這些抗原稱為完全抗原（completeantigen）。少數(shù)分子量小，結(jié)構(gòu)簡單的抗原，不能引起機(jī)體的免疫應(yīng)答，但能與相應(yīng)的免疫產(chǎn)物（抗體）發(fā)生特異性反應(yīng)，這些抗原則稱為不完全抗原（incompleteantigen），或半抗原（hepten），半抗原與蛋白質(zhì)載體結(jié)合后，將成為完全抗原，刺激機(jī)體產(chǎn)生的抗體能與半抗原結(jié)合。構(gòu)成抗原的條件異物性對免疫動物而言，抗原應(yīng)是非自身的物質(zhì)，稱為異物性（）。親緣關(guān)系愈遠(yuǎn)的物質(zhì)，免疫原性愈強(qiáng)。這是因為機(jī)體在胚胎發(fā)育時期形成各種淋巴細(xì)胞，凡與自身組織成分或外來接觸過的淋巴細(xì)胞，在機(jī)體出生后正常情況下都不起免疫應(yīng)答作用，稱為“天然免疫耐受”。機(jī)體出生后僅存在與非自身物質(zhì)起反應(yīng)的淋巴細(xì)胞，故自身組織沒有免疫原性。但是，自身組織若受燒傷、電離輻射或感染，結(jié)構(gòu)和成分發(fā)生改變后，便成了抗原，這種抗原稱為自身抗原。一些產(chǎn)生較遲的組織，如眼球晶體蛋白，精子蛋白和甲狀腺蛋白等，機(jī)體內(nèi)具有與之反應(yīng)的淋巴細(xì)胞，但因上述組織處于體內(nèi)封閉地方，隱蔽狀態(tài)，一旦因外傷感染等原因，使之進(jìn)入血流，接觸到淋巴細(xì)胞，也能引起免疫應(yīng)答，這類抗原被稱為“隱蔽抗原”。分子大小通常免疫原性好的抗原分子量都在10000以上。蛋白質(zhì)是大分子膠體，所以通常都是良好的抗原，蛋白質(zhì)被消化成胨后，分子變小便失去免疫原性?；瘜W(xué)組成，結(jié)構(gòu)復(fù)雜抗原除了大分子量更重要的要有較復(fù)雜的化學(xué)組成和分子結(jié)構(gòu)。化學(xué)組成和分子結(jié)構(gòu)越復(fù)雜的抗原，免疫原性越強(qiáng)，對蛋白質(zhì)抗原而言含有苯環(huán)氨基酸或雜環(huán)氨基酸者，免疫原性好，例如胰島素分子量雖然只5.734d，但其組成成分和結(jié)構(gòu)較復(fù)雜乃是一種良好的抗原。但是明膠雖然分子量高達(dá)10萬，但其化學(xué)組成主要是直鏈氨基酸，穩(wěn)定性差，在體內(nèi)容易被降解，所以免疫原性很弱。脂類、碳水化合物和核酸是化學(xué)組成和結(jié)構(gòu)較簡單的大聚合物，所以免疫原性也較差?？乖瓫Q定簇抗原決定簇（antigenicdeterminants）又稱表位（epitope），是指抗原表面決定抗原特異性的某些特定的化學(xué)結(jié)構(gòu)（包括化學(xué)基團(tuán)和分子構(gòu)象），抗原以此與相應(yīng)淋巴細(xì)胞表面的抗原受體結(jié)合，進(jìn)而引起免疫應(yīng)答和免疫反應(yīng)。研究表明：1、抗原不是以整個分子形式起作用，而是在它表面的某些化學(xué)基團(tuán)或特定的構(gòu)象——決定簇起作用。2、決定簇決定抗原特異性，是與相應(yīng)抗體和相應(yīng)淋巴細(xì)胞表面受體的結(jié)合部位。3、決定簇是抗原分子上具有免疫原性的部位。一個抗原決定簇激活一種淋巴細(xì)胞，產(chǎn)生一類抗體。作為大分子的天然蛋白質(zhì)有許多個抗原決定簇，誘發(fā)機(jī)體產(chǎn)生的抗體是多克隆循環(huán)抗體。抗原與抗體是以非共價鍵形式結(jié)合的，結(jié)合的力是分子間的親和力，它依賴于抗原決定簇與抗體結(jié)合位點(diǎn)之間細(xì)致的空間互補(bǔ)關(guān)系。決定簇的大小和結(jié)構(gòu)特點(diǎn)的研究，是了解抗原抗體分子間結(jié)合特性，即抗原特異性的基礎(chǔ)，也是誘導(dǎo)、激活免疫活性細(xì)胞的分子基礎(chǔ)。所以無論對抗原的免疫原性，還是抗原的免疫反應(yīng)性的研究，都是有其意義的。決定簇的大小可用抗原抗體反應(yīng)被抑制的程度加以確定。4、順序決定簇和構(gòu)象決定簇：抗原決定簇依賴于它的化學(xué)結(jié)構(gòu)，包括一級結(jié)構(gòu)的序列—稱為順序決定簇（sequentialdeterminant）；和空間構(gòu)象—稱為構(gòu)象決定簇（conformationaldeterminant）抗原的分類根據(jù)抗原的免疫原性根據(jù)抗原有無免疫原性分為完全抗原(completeantigen)與不完全抗原（半抗原）(hapten)。根據(jù)抗原的來源1．異種抗原（xenoantigen）它指來自與被免疫動物不同種屬的抗原。大部分的天然抗原屬此類抗原，例如各種細(xì)菌、病毒、疫苗、異種動物的細(xì)胞和血清等。2．同種抗原（alloantigenorhomoantigen）這是指來自被免疫動物同種屬的抗原。如同種動物不同個體的血型抗原和細(xì)胞的組織相容性抗原。3．自身抗原（autoantigen）機(jī)體在燒傷、電離輻射和感染等條件下產(chǎn)生的“自身抗原”?；蚍懦龅摹半[蔽抗原”。4．異嗜性抗原（heterophileantigen）這是一類在彼此無血緣關(guān)系的動物，微生物的細(xì)胞和體液內(nèi)存在的抗原，它們的抗原性很相近，以致其中任何一種抗原的抗體能對這一類的其他抗原起強(qiáng)烈的交叉反應(yīng)。這一類抗原總稱為異嗜性抗原或稱為共同抗原（）。如在豚鼠肝、脾細(xì)胞、綿羊紅細(xì)胞之間；馬、狗、貓和小鼠紅細(xì)胞之間；部分細(xì)菌之間等存在有免疫原性相同或相近的抗原。這類抗原首先是由Forssman發(fā)現(xiàn)的，故又稱Forssman抗原。異嗜性抗原的發(fā)現(xiàn)對分析自身免疫病的病因和血清學(xué)實驗交叉反應(yīng)具有意義。例如溶血性鏈球菌與人的腎小球基底膜及心肌組織之間有異嗜性抗原，反復(fù)感染鏈球菌后產(chǎn)生的抗體，可對腎小球和心肌產(chǎn)生免疫效應(yīng)，導(dǎo)致腎小球炎或心肌炎。根據(jù)抗原對T細(xì)胞的依賴性1．胸腺依賴性抗原（ThymusdependentantigenTDAg）這類抗原刺激B細(xì)胞產(chǎn)生抗體時需要輔助性T細(xì)胞的協(xié)助，稱為胸腺依賴性抗原或T細(xì)胞依賴性抗原。絕大多數(shù)天然抗原屬此類。2．非胸腺依賴性抗原（ThymusindependentantigenTIAg）少數(shù)抗原不需要T細(xì)胞的協(xié)助就能直接刺激B細(xì)胞產(chǎn)生抗體，稱為非胸腺依賴性抗原。例如大腸桿菌脂多糖（LPS），肺炎球菌莢膜多糖（SSS）等。根據(jù)抗原顆粒大小和溶解性分類1．顆粒抗原包括細(xì)菌、支原體、紅細(xì)胞、病毒等。它們相對顆粒較大，當(dāng)與相應(yīng)抗體結(jié)合后可出現(xiàn)凝集現(xiàn)象。即凝集反應(yīng)。2．可溶性抗原包括蛋白質(zhì)、多糖、結(jié)合蛋白（糖蛋白、脂蛋白、核蛋白等）。它們作為大分子顆粒，在水溶液中溶解形成親水膠體。與相應(yīng)抗體結(jié)合后形成抗原-抗體復(fù)合物，在一定條件下出現(xiàn)可見的沉淀，即沉淀反應(yīng)。根據(jù)抗原的來源和制備方法1．天然抗原指自然界存在的蛋白質(zhì)、多糖和結(jié)合蛋白。這類抗原相對分子量較大、結(jié)構(gòu)復(fù)雜，研究其免疫原性和抗原特異性有較大的困難，是疫苗、類毒素等研制的基礎(chǔ)，也是抗遠(yuǎn)誘導(dǎo)機(jī)體免疫應(yīng)答的免疫學(xué)基本理論研究的重要內(nèi)容。2．人工抗原指通過人工合成的方法，將一個有機(jī)分子（半抗原）結(jié)合到蛋白質(zhì)大分子上形成的完全抗原。通過對這類抗原的研究，對抗原抗體結(jié)合特性分子基礎(chǔ)的了解是有價值的。3．合成抗原指人工合成的多肽類抗原。在天然蛋白質(zhì)抗原因其結(jié)構(gòu)復(fù)雜而尚未清楚以前，或是利用它易于合成和改造，以此分析蛋白質(zhì)抗原決定簇的位置、大小、序列和構(gòu)象對免疫原性和抗原特異性的影響。獸醫(yī)學(xué)中重要的天然抗原微生物抗原細(xì)菌、病毒等微生物的化學(xué)組成和結(jié)構(gòu)相當(dāng)復(fù)雜，進(jìn)入動物機(jī)體都是很好的抗原。（一）細(xì)菌抗原細(xì)菌的抗原結(jié)構(gòu)主要有菌體抗原（O抗原），鞭毛抗原（H抗原），莢膜抗原（K抗原）和菌毛抗原。各種抗原又有多種抗原決定簇。例如大腸桿菌已知有164種O抗原、64種H抗原和103種K抗原。沙門氏菌后58種O抗原、63種H抗原。每一種細(xì)菌都有自己的抗原結(jié)構(gòu)，又稱血清型，例如沙門氏菌屬的血清型達(dá)2200多種。根據(jù)細(xì)菌的抗原結(jié)構(gòu)，用對應(yīng)抗體血清做凝集試驗，可對細(xì)菌作血清學(xué)堅定。若不同細(xì)菌具有部分相同的抗原結(jié)構(gòu)，稱為共同抗原或類屬抗原，它們可與對應(yīng)抗血清之間發(fā)生交叉凝集反應(yīng)。有些細(xì)菌如破傷風(fēng)桿菌，能產(chǎn)生并釋放毒力很強(qiáng)的外毒素（exotoxin），外毒素是蛋白質(zhì)，具有很強(qiáng)的免疫原性。外毒素經(jīng)0.3~0.4%甲醛處理后失去毒力，保持免疫原性，制成類毒素（toxoid），注射動物機(jī)體后可刺激機(jī)體產(chǎn)生抗外毒素的抗體，稱為抗毒素。（二）病毒抗原每種病毒都有各自的化學(xué)組成和結(jié)構(gòu)，因而都有各自的抗原結(jié)構(gòu)和夜以繼日性。無囊膜的病毒其抗原性和特異性主要由衣殼的殼粒蛋白決定；有囊膜的病毒冊主要由囊膜上的纖突蛋白所決定。例如流感病毒外膜上的血凝素（H）和神經(jīng)氨酸酶（N）都具有很強(qiáng)的抗原性和特異性，通常以HN表示流感病毒的血清亞型分類。動物抗原（一）異種動物紅細(xì)胞異種動物紅細(xì)胞都具有很強(qiáng)的免疫原性。免疫學(xué)實驗中，常將綿羊紅血球注射家兔制成抗綿羊紅細(xì)胞血清，稱為溶血素，將其與綿羊紅細(xì)胞及補(bǔ)體加在一起，可使綿羊紅細(xì)胞溶解。（二）異種組織細(xì)胞和血清異種組織細(xì)胞和血清都也是具有很好的免疫原性。應(yīng)用含有異種動物組織的疫苗時應(yīng)注意，例如反復(fù)注射兔腦和羊腦制備的狂犬病疫苗可能引起變態(tài)反應(yīng)性腦脊髓炎。應(yīng)用異源免疫血清作治療時，反復(fù)注射也可能引起過敏反應(yīng)。佐劑預(yù)先注射于機(jī)體或與抗原混合應(yīng)用，能非特異性地增強(qiáng)機(jī)體對該抗原的特異性免疫應(yīng)答或改變免疫類型，稱此類物質(zhì)為免疫佐劑（immunoadjuvant）,簡稱佐劑（adjuvant）。用于疫苗的佐劑細(xì)菌、病毒的滅活疫苗、亞單位疫苗或基因工程亞單位疫苗，免疫原性較差，為提高它們的免疫效果都加一定比例佐劑。目前疫苗中常用的是氫氧化鋁膠。當(dāng)疫苗與鋁膠混合后，一方面抗原吸附于膠鹽上被濃縮，形成凝聚性大顆?？乖?，易被細(xì)胞吞噬；另一方面抗原可較長時期存在注射部位，持久地釋放抗原，提高免疫效果。加這種抗原佐劑的疫苗若注射到皮下，往往引起局部腫脹，甚至肉芽腫，但注射到肌肉則無不良反應(yīng)。此外，近幾年來也常用10號白油，65號佐劑（水花生油乳劑），蜂膠等作疫苗佐劑，這些佐劑的作用與下面介紹的弗氏佐劑相同，但不發(fā)生肉芽腫。用于試驗動物制被高免血清的抗原佐劑為制備蛋白質(zhì)抗原或病毒抗原的高免血清，用弗氏不完全佐劑（Freund’sincompleteadjuvant,FIA）和弗氏完全佐劑（Freund’scompleteadjuvant,FCA）。這兩種弗氏佐劑由美籍匈牙利細(xì)菌學(xué)家Freund于1951年研制成功，一直沿用至今。FIA是將抗原水溶液，加石臘油或植物油后，以羊毛脂T80乳化成油包抗原水溶液的狀態(tài)，注入機(jī)體，因抗原受油的保護(hù)，一方面油滴緩慢分解，抗原持久釋放，發(fā)揮長期的刺激作用；另一方面石臘油在注射部位刺激、形成肉芽腫，集中大量巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞，大大促進(jìn)抗體的產(chǎn)生。FCA是在FIA中再加殺死的分枝桿菌而成。分枝桿菌能刺激骨髓的多能干細(xì)胞發(fā)育成熟為免疫活性細(xì)胞，促進(jìn)T細(xì)胞、B細(xì)胞的分化增重，增強(qiáng)巨嗜細(xì)胞的功能。故FCA增強(qiáng)免疫的作用比FIA更強(qiáng)。弗氏佐劑在接種部位產(chǎn)生的肉芽腫，進(jìn)而發(fā)展成潰瘍，此外，礦物油不能代謝分解，也影響動物的肉質(zhì)，所以弗氏佐劑不適用于疫苗應(yīng)用，只適用于作為實驗動物制備高免血清的抗原。非特異性免疫非特異性免疫（nonspecificimmunity）是指機(jī)體一出生就具有的，無特殊針對性的對多種病原微生物的一定程度的天然抵抗力。又稱先天免疫或天然免疫。嚴(yán)格說來它不屬于定義所指的免疫，即特異性免疫。但是，特異性免疫中少不了非特異性免疫因素的參與。非特異性免疫是在生物進(jìn)化過程中逐步形成、建立起來的天然防御功能，所以不只是某個體所特有的，是種系所共有的，可遺傳的。它與機(jī)體的組織結(jié)構(gòu)和生理功能有密切關(guān)系。在抗感染過程中，它發(fā)揮作用快、范圍廣泛，是抗感染的第一道防線。非特異性免疫主要包括以下五個方面：皮膚、粘膜和屏障結(jié)構(gòu)的屏障作用；淋巴組織的過濾作用；血清、體液和組織分泌物的殺菌作用；單核—吞噬系統(tǒng)的吞噬作用；炎癥反應(yīng)的病理防御作用。皮膚、粘膜和屏障結(jié)構(gòu)的屏障作用皮膚、粘膜和屏障結(jié)構(gòu)的屏障作用由三方面的作用共同構(gòu)成機(jī)體的第一防線。（一）機(jī)械阻擋體表皮膚由多層細(xì)胞構(gòu)成，能阻擋一般病原微生物的侵入。但是一些侵襲力強(qiáng)的細(xì)菌，可以侵入正常的皮膚。消化道、呼吸道、泌尿生殖道等粘膜由單層柱狀細(xì)胞構(gòu)成，其機(jī)械阻擋作用不如皮膚，但粘膜分泌的粘液，呼吸道粘膜的纖毛運(yùn)動等，有助于排除微生物。當(dāng)粘膜受冷或有害物質(zhì)或氣體刺激損傷時，易發(fā)生呼吸道或消化道感染性疾病。體內(nèi)存在很多抗感染的屏障結(jié)構(gòu)，如血腦、血胎、血液神經(jīng)、血液胸腺等屏障。屏障的構(gòu)成主要依靠組織結(jié)構(gòu)致密、細(xì)胞間連接緊密、胞飲作用微弱的特點(diǎn)，阻擋病原體及其有毒產(chǎn)物從血液進(jìn)入組織細(xì)胞內(nèi)。血腦屏障主要由腦毛細(xì)血管壁和神經(jīng)膠質(zhì)膜構(gòu)成，是防止中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)生感染的重要防線結(jié)構(gòu)。幼齡動物血腦屏障尚未完全發(fā)育成熟，容易發(fā)生腦內(nèi)感染。（二）化學(xué)作用皮膚汗腺分泌的乳酸能抑制病原菌，皮脂腺分泌的脂肪酸有殺滅細(xì)菌和真菌的作用。淚腺、唾液腺、乳腺及鼻氣管粘膜分泌的溶菌酶能溶解革蘭氏陽性菌；粘多糖能滅活一些病毒；胃粘膜分泌的鹽酸有很強(qiáng)的殺菌作用；腸粘膜分泌的多種蛋白酶也有消化殺菌作用。（三）生物學(xué)作用正常動物皮膚上、口腔、腸道和陰道內(nèi)都寄居有一定種類的微生物，稱為正常菌群。它們一方面占據(jù)表面，另一方面產(chǎn)生代謝產(chǎn)物，防止病原微生物的入侵。例如皮膚上的丙酸菌產(chǎn)生脂類，可抑制化膿性細(xì)菌的生長；腸道內(nèi)的大腸桿菌分泌大腸菌素及分解糖后產(chǎn)生的酸能抑制痢疾桿菌的生長；腸道中的厭氧菌產(chǎn)生的脂肪酸能抑制沙門氏菌的生長。淋巴組織的過濾作用具有過濾作用的淋巴組織是指外周淋巴器官，如淋巴結(jié)、脾等。它可將侵入血液及組織液中的病原物和混入的損傷細(xì)胞、衰老細(xì)胞和代謝廢物濾在淋巴組織內(nèi)。在淋巴組織內(nèi)的巨噬細(xì)胞可將其吞噬清除，并就地將抗原提呈給淋巴細(xì)胞。所以外手淋巴器官也是免疫系統(tǒng)對抗原應(yīng)答的場所。在腫瘤患者中，出現(xiàn)淋巴轉(zhuǎn)移現(xiàn)象是由于免疫系統(tǒng)企圖控制癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移而過濾在淋巴結(jié)內(nèi)的結(jié)果。雖然在淋巴結(jié)內(nèi)的吞噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞都不能徹底消滅癌細(xì)胞，但癌細(xì)胞分裂增殖也因此有所減緩。血清、體液和組織分泌物的殺菌作用在健康機(jī)體的血清、體液和組織細(xì)胞中存在有多種抑菌、殺菌或溶菌作用的物質(zhì)（表2），當(dāng)病原微生物通過皮膚、粘膜屏障進(jìn)入組織細(xì)胞或血液中時，它們在其它因素配合下發(fā)揮非特異性的殺菌抗感染作用。表2正常體液和組織中的抗菌物質(zhì)名稱來源或存在部位化學(xué)性質(zhì)作用對象補(bǔ)體血清球蛋白革蘭氏陰性菌溶菌素吞噬細(xì)胞溶酶體、淚腺、唾液、乳汁堿性多肽革蘭氏陽性菌乙型溶素血清堿性多肽革蘭氏陽性菌吞噬細(xì)胞殺菌素中性粒細(xì)胞堿性多肽革蘭氏陽性菌白細(xì)胞素中性粒細(xì)胞堿性多肽革蘭氏陽性菌血小板血小板堿性多肽革蘭氏陽性菌正鐵血紅素紅細(xì)胞含鐵卟啉革蘭氏陽性菌精素、精胺堿胰、腎、前列腺堿性多肽革蘭氏陽性菌乳素乳汁蛋白質(zhì)革蘭氏陽性菌這里重點(diǎn)介紹補(bǔ)體系統(tǒng)和溶菌酶。（一）補(bǔ)體系統(tǒng)補(bǔ)體（complement）是一組球蛋白存在于正常機(jī)體血清之中，具有類似酶活性的一組蛋白質(zhì)，具有潛在的免疫活性，激活后能表現(xiàn)出一系列的免疫生物學(xué)活性，能夠協(xié)同其它免疫物質(zhì)直接殺傷靶細(xì)胞和加強(qiáng)細(xì)胞免疫功能。所以又稱為補(bǔ)體系統(tǒng)（complementsystem）。補(bǔ)體不耐熱，加熱56℃1.補(bǔ)體系統(tǒng)的組成完整的補(bǔ)體系統(tǒng)由9種成分11種球蛋白組成，按發(fā)現(xiàn)的先后分別命名為C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9。其中C1成分由3種亞單位蛋白C1q、C1r、和C1s組成。2．補(bǔ)體系統(tǒng)的激活補(bǔ)體激活途徑有2種。一是從C1開始的經(jīng)典激活途徑（classicalpathway）；另一種是從C3開始的替代激活途徑（alternatinepathway）。1）、經(jīng)典激活途徑又稱C1激活途徑，其過程如圖1所示?？贵wIgG1、2、3和IgM的CH2區(qū)有補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)，以抗細(xì)菌的IgG和IgM為例，當(dāng)它們與相應(yīng)的細(xì)菌發(fā)生特異性結(jié)合后，補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)暴露，血清中的C1的C1q首先與補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)結(jié)合并引起C1r、C1s的構(gòu)型改變，完成C1的激活（以C1表示）。C1作用C4和C2，使它們激活變成C42。C42使C3激活，變成C423b和C3a。C423b使C5激活，變成C5a和C5b，C5b與C6結(jié)合成C56，C56再與C7結(jié)合成有活性的C567。C567再與C8和6個C9結(jié)合成一個C5-9的大分子復(fù)合物，使細(xì)菌細(xì)胞壁上的損傷加重，形成直徑80~100A的穿孔，導(dǎo)致細(xì)菌的溶解。在補(bǔ)體的激活過程中，形成一些小分子活性物質(zhì)，例如C3a和C5a，具有吸引吞噬細(xì)胞的趨化作用及加強(qiáng)吞噬的作用。C2、C4有類似激肽作用。C1激活途徑（傳統(tǒng)途徑）：C3激活途徑（旁路途徑）：IgG1、2、3及IgM的免疫復(fù)合物細(xì)菌脂多糖、酵母多糖及IgG4、IgA的免疫復(fù)合物↓Ca++↓Mg++C1→C1C3PA轉(zhuǎn)化酶（D因子）←↓Mg++C3↓C2+C4→C4b2a→↓←C3激活劑（Bb）←C3PAC423b+C3a↓C5→C5b+C6→C56+C7→C567+C8+C9→C5-9+↓C5a靶細(xì)胞溶解圖1補(bǔ)體激活的兩條途徑2）、替代激活途徑又稱C3激活途徑。一些物質(zhì)如細(xì)菌內(nèi)毒素、酵母多糖及無補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)的IgG4和IgA，與相應(yīng)抗原的免疫復(fù)合物等，可經(jīng)C1途徑，參與C3的直接激活，再完成與經(jīng)典途徑相同的C5–C9的激活。3、補(bǔ)體系統(tǒng)的生物學(xué)作用1）、溶解細(xì)菌細(xì)胞或中和病毒通過經(jīng)典或替代激活途徑，補(bǔ)體能協(xié)助抗體溶解相應(yīng)細(xì)菌或中和病毒。2）、調(diào)理作用補(bǔ)體C3激活的裂解產(chǎn)物C3b,一端與細(xì)菌結(jié)合，另一端與吞噬細(xì)胞膜上的C3b受體結(jié)合，起調(diào)理作用，促進(jìn)吞噬細(xì)胞消化細(xì)菌。3）、趨化作用補(bǔ)體激活過程產(chǎn)生的C3a和C5a和C567都能吸引吞噬細(xì)胞向微生物侵入部位移動，以利吞噬。4）、過敏毒素作用C3a和C5a還可使肥大細(xì)胞脫顆粒，釋放組胺，導(dǎo)致平滑肌收縮和血管通透性增高。（二）溶菌酶溶菌酶主要是由單核吞噬細(xì)胞產(chǎn)生的一種低分子堿性蛋白質(zhì)。廣泛分布于眼淚、唾液、鼻液、血清和乳汁中。溶菌酶能水解細(xì)菌細(xì)胞壁的肽聚糖，使細(xì)菌細(xì)胞壁崩解而溶菌。革蘭氏陽性菌僅一層肽聚糖，故易被溶菌酶酶解殺滅。革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁在肽聚糖層外還有脂多糖、脂蛋白包圍，所以不易受溶菌酶的作用。炎癥反應(yīng)的病理防御作用炎癥發(fā)生的原因有多種，人或高等動物因感染病原體而引起的炎癥是一種病理過程，也是一種防御、消滅病原體的積極方式，它是宿主對病原體的非特異性免疫反應(yīng)的一種單核—巨噬細(xì)胞系統(tǒng)的吞噬作用吞噬細(xì)胞包括大吞噬細(xì)胞（即單核巨噬細(xì)胞）和小吞噬細(xì)胞（即中性粒細(xì)胞）。它們分別屬于內(nèi)皮細(xì)胞系和網(wǎng)狀細(xì)胞，1924年將其命名為網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)（reticuloendothelialsystem,RES）。后經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)RES的吞噬功能主要是巨噬細(xì)胞而非網(wǎng)狀細(xì)胞，故改稱為單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)（mononaclearphagocyticsystem,MPS）。后來發(fā)現(xiàn)單核—巨噬細(xì)胞除具有吞噬功能外，還可加工和提呈抗原給淋巴細(xì)胞，所以它既是免疫效應(yīng)細(xì)胞，也是輔佐免疫應(yīng)答的細(xì)胞。它與樹突狀細(xì)胞（dendriticcell,簡稱D細(xì)胞）和郎·罕細(xì)胞（Langerhanscell,簡稱L細(xì)胞）及B淋巴細(xì)胞統(tǒng)稱為抗原提呈細(xì)胞（antigenpresentingcell,APC）,或統(tǒng)稱輔佐細(xì)胞（accessorycell,簡稱A細(xì)胞）。單核—巨噬細(xì)胞的吞噬功能及其特點(diǎn)單核巨噬細(xì)胞具有多種免疫功能，它可吞噬消滅入侵的病原體、有害異物，清除損傷、衰老、死亡和突變細(xì)胞及其代謝廢物，能加工、提呈抗原給淋巴細(xì)胞。所以特異性免疫功能是建立在非特異性免疫功能基礎(chǔ)上，使機(jī)體免疫功能進(jìn)一步完善。巨噬細(xì)胞之所以能完成這些功能是由于它具有三個特點(diǎn)：1、巨噬細(xì)胞是機(jī)體最早識別外來異物的細(xì)胞。巨噬細(xì)胞可以識別和吞噬各種各樣的外來干涉的或“自身”的物質(zhì)，沒有這種廣泛而有效的識別，也就談不上免疫系統(tǒng)對抗原物質(zhì)的免疫應(yīng)答和有效保護(hù)。這種能力是在物種系統(tǒng)發(fā)生中逐漸形成的。2、巨噬細(xì)胞具有多種胞內(nèi)酶和胞外酶，使之有效地消化、殺滅被吞噬進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的病原體及異物。3、巨噬細(xì)胞還可以分泌很多活性物質(zhì)，其分泌產(chǎn)物之多可與肝細(xì)胞相比。這些分泌產(chǎn)物對組織、細(xì)胞起著重要調(diào)節(jié)作用。第四章特異性免疫概述抗原進(jìn)入機(jī)體與免疫系統(tǒng)的免疫細(xì)胞作用，可能產(chǎn)生三種結(jié)果：1：正常免疫應(yīng)答，機(jī)體建立特異性免疫。2：免疫耐受性，機(jī)體不發(fā)生正常免疫應(yīng)答。3：變態(tài)反應(yīng)，機(jī)體發(fā)生免疫應(yīng)答案的同時發(fā)生組織損傷。特異性免疫的概念特異性免疫（specificimmune）是動物機(jī)體出生后，受過某種抗原刺激產(chǎn)生的針對該抗原的抵抗能力。特異性免疫是機(jī)體對抗原經(jīng)過免疫應(yīng)答而獲得的，又稱為獲得性免疫（acquiredimmunity）。免疫應(yīng)答（immuneresponse）是抗原進(jìn)入機(jī)體后，免疫系統(tǒng)中單核吞噬細(xì)胞：T細(xì)胞、B細(xì)胞等對其進(jìn)行一系列反應(yīng)，產(chǎn)生免疫活性產(chǎn)物，發(fā)揮免疫效應(yīng)，清除同種抗原的過程。第二節(jié)免疫應(yīng)答的基本過程和特征機(jī)體的免疫應(yīng)答過程相當(dāng)復(fù)雜，可劃分為三個階段：致敏階段；反應(yīng)階段；效應(yīng)階段1．致敏階段（Sensitizationstage）進(jìn)入體內(nèi)的抗原，除少數(shù)TI抗原可直接激活相應(yīng)的B細(xì)胞外，大多數(shù)TD抗遠(yuǎn)由巨噬細(xì)胞吞噬加工后，將抗原決定簇遞呈給TH細(xì)胞，再由TH細(xì)胞一方面遞呈給相應(yīng)的T細(xì)胞，使T細(xì)胞激活，另一方面遞呈給帶相應(yīng)SmIg的B細(xì)胞，B細(xì)胞被活化。2．反應(yīng)階段（reactivestage）激活的T細(xì)胞轉(zhuǎn)化成母細(xì)胞，分化增殖成細(xì)胞毒性T細(xì)胞，遲發(fā)型超敏反應(yīng)T細(xì)胞和少量記憶細(xì)胞，超敏反應(yīng)T細(xì)胞受到同種抗原的作用，產(chǎn)生各種淋巴體內(nèi)子?；罨腂細(xì)胞經(jīng)分化增殖成大量漿細(xì)胞和少量記憶細(xì)胞，漿細(xì)胞產(chǎn)生各類免疫球蛋白，稱為抗體。3．效應(yīng)階段（effectivestage）具有殺傷性的效應(yīng)T細(xì)胞和各種淋巴因子，共同將存在體內(nèi)的特異性抗原清除，稱為細(xì)胞免疫效應(yīng)?？贵w分布于體液（血清、淋巴液、組織液）中，直接發(fā)揮作用或在吞噬細(xì)胞、K細(xì)胞、補(bǔ)體等協(xié)助下消滅響應(yīng)抗原，稱為體液免疫效應(yīng)。T細(xì)胞、B細(xì)胞反應(yīng)過程中產(chǎn)生的記憶細(xì)胞，暫時不產(chǎn)生免疫產(chǎn)物，保留在機(jī)體中，當(dāng)有同種抗原再次進(jìn)入體內(nèi)、作用到它們時，它們將迅速增殖，大量產(chǎn)生淋巴因子或抗體，發(fā)揮免疫效應(yīng)。綜上所述，機(jī)體的特異性免疫應(yīng)答過程都可能同時進(jìn)行細(xì)胞免疫應(yīng)答和體液免疫應(yīng)答，抗原的特性不同，引起兩方面的免疫應(yīng)答側(cè)重可能不同。機(jī)體的免疫應(yīng)答具有突出的特征：1：嚴(yán)格的自我識別。即對自身正常組織不引起免疫應(yīng)答；2：對抗原具有高度民主特異性；3：具有免疫記憶性。免疫耐受性免疫耐受性（tolerance）是指機(jī)體接觸抗原后建立的特異性無應(yīng)答狀態(tài)。機(jī)體免疫耐受性的建立與正常免疫應(yīng)答具有共性，都需要抗原誘導(dǎo)，均具有特異性和記憶性。已建立對某一抗原耐受的個體，當(dāng)再次接觸同一抗原時不應(yīng)答，但對其它抗原仍具有免疫應(yīng)答能力。免疫耐受性的建立受機(jī)體和抗原兩方面的因素影響。機(jī)體方面1．與動物種屬、品系有關(guān)例如，兔和有蹄獸、靈長類只在胚胎期才能誘導(dǎo)建立耐受性，小鼠和大鼠在胚胎期和新生期都可以。給C57BL/b小鼠注射0.1mg丙種球蛋白即可誘導(dǎo)耐受性，但對BALB/c小鼠注射10mg也難誘導(dǎo)成功。2．與年齡有關(guān)免疫耐受性建立的難易與免疫細(xì)胞發(fā)育與功能完善程度密切相關(guān)，總的規(guī)律是胚胎期接觸抗原容易建立耐受性，新生期次之，成年期難于建立?？乖矫婺苷T導(dǎo)昌盛免疫耐受性的抗原稱為耐受原。一般小分子可溶性抗原（血清蛋白、多糖、脂多糖等）較易成為耐受原。TI抗原只有高劑量才能誘導(dǎo)耐受性，TD抗原在低劑量和高劑量時均可成為耐受原?？乖瓲顟B(tài)及接觸方式對誘導(dǎo)耐受性難易次序為：不加佐劑抗原﹥加佐劑抗原；靜脈注射﹥腹腔注射﹥皮下注射。解釋免疫耐受性形成機(jī)制的學(xué)說有多種，尚未達(dá)到同意認(rèn)識。其可能與耐受原識別和反應(yīng)的淋巴細(xì)胞克隆“排除”或“流產(chǎn)”，或SmIg被封閉，或受TS細(xì)胞抑制等有關(guān)。了解和研究免疫耐受性，對全面闡明免疫應(yīng)答機(jī)理，提高疫苗免疫效果，預(yù)防自身免疫病、變態(tài)反應(yīng)性疾病和腫瘤發(fā)生等，在理論和實踐上均具有意義。第四節(jié)細(xì)胞免疫細(xì)胞免疫是抗原進(jìn)入機(jī)體后刺激T細(xì)胞產(chǎn)生免疫應(yīng)答過程，又稱細(xì)胞介導(dǎo)的免疫(cell-mediatedimmunityCMI)一細(xì)胞免疫應(yīng)答的基本過程細(xì)胞免疫應(yīng)答基本過程是：抗原進(jìn)入機(jī)體后，經(jīng)Mφ吞噬，降解處理，將抗原決定簇遞呈給TH細(xì)胞，和抗原特異性T細(xì)胞。TH細(xì)胞同時在Mφ分泌的白細(xì)胞介素（IL-1）作用下活化為效應(yīng)性TH細(xì)胞，通過分泌白介素II的作用，輔助抗原特異的T細(xì)胞，使之分化、增殖，產(chǎn)生大量抗原特異的細(xì)胞毒性T細(xì)胞（TC）和遲發(fā)型T細(xì)胞（TD）。TC對抗原發(fā)揮特異性殺傷作用，TD與同種抗原結(jié)合后，釋放多種具有生物學(xué)活性的淋巴因子（Lymphokine,LK）。有的LK能吸引吞噬細(xì)胞，有的能激活吞噬細(xì)胞和白細(xì)胞，引起慢性炎癥反應(yīng)，消除抗原。二TC細(xì)胞的細(xì)胞毒作用TC細(xì)胞對帶有特異性抗原的細(xì)胞（靶細(xì)胞）能起直接殺傷和重復(fù)殺傷作用，在抗病毒感染、同種異體移植排斥反應(yīng)和抗腫瘤免疫中發(fā)揮重要作用。TC細(xì)胞與抗原緊密結(jié)合在一起，在37℃有Mg++存在的條件下，此過程只需要幾分鐘。接著TC細(xì)胞在有Ca++存在的環(huán)境中，使靶細(xì)胞膜發(fā)生進(jìn)行性溶解，造成不可逆的損傷，此過程約需要10分鐘。隨之大量水分進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，細(xì)胞質(zhì)向外流失。細(xì)胞裂解成碎片，此過程約1小時。TC完成對靶細(xì)胞的殺傷后保持完整無損，又可攻擊其它特異靶細(xì)胞，一個TC三淋巴因子TD細(xì)胞受相應(yīng)抗原作用后，釋放的許多具有生物學(xué)活性的可溶性蛋白質(zhì)總稱為淋巴因子（Lymphokine,LK）。LK是細(xì)胞免疫的主要介質(zhì)，目前已發(fā)現(xiàn)50多種，以其生物學(xué)作用命名，多數(shù)LK非特異性地作用于其它細(xì)胞，發(fā)揮其功能。表5主要的淋巴因子及其作用淋巴因子作用巨噬細(xì)胞移動抑制因子（MIF）抑制巨噬細(xì)胞隨機(jī)移動，停聚炎癥部位，增強(qiáng)吞噬作用巨噬細(xì)胞趨化因子（MCF）吸引巨噬細(xì)胞至局部巨噬細(xì)胞聚集因子（MAF）使巨噬細(xì)胞集中巨噬細(xì)胞活化因子（MAggF）激活和加強(qiáng)巨噬細(xì)胞溶菌和殺瘤細(xì)胞作用淋巴細(xì)胞生長因子類（IL-2，BCGF，IL-3等）誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞的DNA合成過程，促進(jìn)其生長增殖趨化因子類（CFs）分別吸引各種不同粒細(xì)胞白細(xì)胞移動抑制因子（LIF）抑制中性粒細(xì)胞的隨機(jī)移動淋巴毒素（LT）對腫瘤細(xì)胞和病毒感染的靶細(xì)胞有選擇性殺傷作用γ干擾素（IFN-γ）防止病毒在靶細(xì)胞內(nèi)復(fù)制，可激活NK細(xì)胞，加強(qiáng)巨噬細(xì)胞的溶菌能力Ia抗原誘導(dǎo)因子誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞表達(dá)I抗原轉(zhuǎn)移因子（TF）使已致敏機(jī)體內(nèi)其它正常淋巴細(xì)胞獲得相應(yīng)特異性細(xì)胞免疫的能力，也可將之轉(zhuǎn)移給其它正常個體皮膚反應(yīng)因子（SRF）引起血管擴(kuò)張，增加血管通透性有絲分裂原因子（MF）非特異性地使淋巴細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂，以擴(kuò)大免疫應(yīng)答的后備力量四細(xì)胞免疫的作用細(xì)胞免疫在對胞內(nèi)寄生病原體的抗感染方面具有重要作用。例如胞內(nèi)寄生菌（結(jié)核桿菌、布氏桿菌、馬鼻疽桿菌、人的麻風(fēng)病桿菌等），被吞噬細(xì)胞吞噬后形成不完全吞噬；各種病毒或血液原蟲感染進(jìn)宿主細(xì)胞內(nèi)，體液免疫的抗體都不能發(fā)揮作用，靠機(jī)體細(xì)胞免疫應(yīng)答產(chǎn)生的TC細(xì)胞和各種淋巴因子，共同把胞內(nèi)菌、病毒或原蟲消滅。此外，細(xì)胞免疫在抗腫瘤免疫方面也具有重要作用。機(jī)體的細(xì)胞免疫應(yīng)答也可引起同種異體移植物的排斥反應(yīng)。這是因為同種動物不同個體組織細(xì)胞的組織相容性抗原除同卵雙生的兩個個體之間相同以外，其他個體之間都不相同。不同的個體間進(jìn)行組織移植后，受體的淋巴細(xì)胞均回識別非自身的供體組織，進(jìn)行細(xì)胞免疫應(yīng)答，通過產(chǎn)生的TC細(xì)胞直接殺傷，和淋巴因子引起的炎癥反應(yīng)將移植物排斥脫落。機(jī)體對某些胞內(nèi)菌的細(xì)胞免疫應(yīng)答，也同時可引起遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)。第五節(jié)體液免疫抗原進(jìn)入機(jī)體后，引起B(yǎng)細(xì)胞的免疫應(yīng)答，產(chǎn)生抗體，分布于體液（血液、淋巴液、組織液）中，通過中和作用或在補(bǔ)體、吞噬細(xì)胞、K細(xì)胞等協(xié)助下，特異性地消除抗原的過程，稱為體液免疫。體液免疫可通過免疫血清從已免疫的個體轉(zhuǎn)移給未免疫的個體。一體液免疫應(yīng)答過程TD抗原和TI抗原引起的體液免疫應(yīng)答過程不同。前者必須有T細(xì)胞的輔助，后者無需T細(xì)胞的輔助。大多數(shù)的天然蛋白質(zhì)抗原都屬TD抗原，本節(jié)主要介紹TD抗原引起的體液免疫應(yīng)答過程。TD抗原進(jìn)入機(jī)體后，在外周免疫器官中，或在肉芽腫部位，具有抗原遞呈作用的Mφ將抗原捕捉、吞噬、消化、加工、處理后，將抗原決定簇轉(zhuǎn)運(yùn)到Mφ表面，遞呈給TH細(xì)胞，Mφ同時釋放白細(xì)胞介素1（IL-1）等細(xì)胞因子。IL-1也作用于TH細(xì)胞。TH細(xì)胞接受抗原決定簇和IL-1的刺激后母細(xì)胞化，合成分泌白細(xì)胞介素2（IL-2），并在細(xì)胞膜上表達(dá)IL-2受體，IL-2與IL-2受體結(jié)合后TH細(xì)胞增殖成效應(yīng)TH。效應(yīng)TH產(chǎn)生B細(xì)胞生長因子（BCellgrouthfactor，BCGF）和B細(xì)胞分化因子（Bcelldifferentiationfactor,BCDF）。B淋巴細(xì)胞通過SmIg特異地識別和結(jié)合Mφ遞呈抗原決定簇，并受到BCGF和BCDF的作用后開始活化增殖，分化為合成分泌不同類型免疫球蛋白的漿細(xì)胞，初期的漿細(xì)胞分泌IgM，中期的分泌IgG，后期的分泌IgA。B細(xì)胞分化中形成部分記憶性B細(xì)胞，其壽命較長，參加再循環(huán)帶有特異的SmIg，當(dāng)機(jī)體再次進(jìn)入同種抗原與其SmIg結(jié)合后，它將迅速分裂增殖分化為產(chǎn)生IgG的漿細(xì)胞，大量分泌IgG。B細(xì)胞產(chǎn)生的各類Ig在體液中與抗原特異結(jié)合后，通過中和作用或補(bǔ)體結(jié)合，免疫調(diào)理，ADCC等作用發(fā)揮效應(yīng)，消除抗原。但在一定條件下也可引起I、II、III型變態(tài)反應(yīng)導(dǎo)致機(jī)體的功能紊亂或組織損傷。至于少數(shù)TI抗原通常都是相同分子的簡單聚合物，例如肺炎球菌莢膜多糖抗原，其表面相同的抗原決定簇重復(fù)排列，更與相應(yīng)B細(xì)胞的SmIg發(fā)生牢固交叉聯(lián)結(jié)而活化B細(xì)胞，分化、增殖成漿細(xì)胞，只產(chǎn)生少量的IgM，也不產(chǎn)生記憶細(xì)胞，無再次應(yīng)答反應(yīng)。二抗體抗體是漿細(xì)胞合成分泌的各類免疫球蛋白（immunoglobulin,Ig）的總稱，是體液免疫中發(fā)揮免疫效應(yīng)的免疫活性物質(zhì)。到目前發(fā)現(xiàn)人的Ig有5類：IgM、IgG、IgA、IgE和IgD；家畜和小動物有4類：IgM、IgG、IgA和IgE，尚未證實有IgD；禽類主要有3類：IgM、IgG和IgA。（一）免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)用抗原免疫動物所產(chǎn)生的免疫血清是針對各種決定簇的很不均一的免疫球蛋白的混合物，很難用于研究免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)。但是，在狗、貓或小鼠等體內(nèi)，在一定的條件下可發(fā)生由一個B細(xì)胞演變的癌性漿細(xì)胞系，稱為骨髓瘤，這些癌性漿細(xì)胞分泌的免疫球蛋白稱為骨髓瘤蛋白，它們的結(jié)構(gòu)是均一的與IgG單體相似的，骨髓瘤蛋白可以大量獲得，為研究免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)提供了很好的材料，目前了解的免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)知識都是通過對骨髓瘤蛋白的研究獲得的。免疫球蛋白的基本結(jié)構(gòu)Ig由兩條相同的輕鏈（lightchain,L鏈）和兩條相同的重鏈（heavychain,H）組成。L鏈與H鏈之間，H鏈與H鏈之間，由二硫鍵連接成一個單體Ig分子，呈“Y”字型。每條L鏈由210~230個氨基酸組成，分子量約23000d，每條H鏈由420~446個氨基酸組成，分子量50，000~70，000d，H鏈中含有糖基，故Ig屬糖蛋白。L鏈從N端起，1~108個氨基酸的組成是多變的，稱為L鏈的可變區(qū)（variableregion），簡稱VL。H鏈從N端起1~107或130個氨基酸的組成同樣是多變的，稱為H鏈的可變區(qū)，簡稱為VH。VL和VH共同組成與相應(yīng)抗原決定簇特異性結(jié)合的立體構(gòu)型。L鏈的其余1/2段的氨基酸組成比較穩(wěn)定，稱為L鏈的恒定區(qū)（contantregion），簡稱CL。所有Ig的CL僅發(fā)現(xiàn)兩個類型（type），κ型和λ型。每一個Ig分子的兩條L鏈均是同一個型，即同是κ型或λ型。H鏈的其余3/4段的氨基酸組成和排列也較穩(wěn)定，稱為H鏈恒定區(qū)，簡稱CH。CH按氨基酸組成不同，表現(xiàn)抗原性有5類（class）：μ、γ、α、ε和δ。依此Ig分為5類即：IgM(μ)、IgG(γ)、IgA(α)、IgE(ε)和IgD(δ)。每類Ig依其CH內(nèi)個別氨基酸的差異和H鏈間二硫鍵位置不同，又分為亞類圖2抗體4條肽鏈的結(jié)構(gòu)示意圖H鏈和L鏈內(nèi)每約110個氨基酸區(qū)段內(nèi)含有一個鏈內(nèi)二硫鍵，連接相距約60個氨基酸的兩個半胱氨酸形成一個環(huán)狀結(jié)構(gòu)，稱為功能區(qū)（domain）。所有Ig的L鏈內(nèi)有VL、CL兩個功能區(qū)，IgG、IgA和IgD的H鏈內(nèi)有VH、CH1、CH2、和CH3四個功能區(qū)；（圖3）。IgM和IgE的重鏈則多一個CH4功能區(qū)。各個功能區(qū)表現(xiàn)一定的功能，例如IgG和IgM的CH2的區(qū)有補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)，平時被隱蔽，當(dāng)Ig的VL與VH與相應(yīng)抗原決定簇特異性結(jié)合后，補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)暴露，并識別結(jié)合補(bǔ)體C1引起補(bǔ)體系統(tǒng)的傳統(tǒng)激活。在CH1和CH2之間，有一段約含30個氨基酸的肽鏈，稱為絞鏈區(qū)（hingeregion）。其富含脯氨酸，具有伸縮性，利于Ig的張合，與不同位置和距離的相應(yīng)抗原決定簇結(jié)合，同時暴露補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)。絞鏈區(qū)中所含的二硫鍵對木瓜蛋白酶和胃蛋白酶的作用敏感，易被酶水解斷裂。2．Ig的水解片段用木瓜蛋白酶水解IgG，可將IgG的H鏈的鏈間二硫鍵近N端處切斷，得到三個片段，（見圖3），兩個相同的片段，每個片段含有一條完整的L鏈和一段H鏈的部分，這兩個片段均能與相應(yīng)的抗原決定簇結(jié)合，稱為抗原結(jié)合片段（fragmentantigenbinding），簡稱Fab段。另一段含有兩條H鏈C端的一半，可以結(jié)晶，稱為可結(jié)晶片段（fragmentcrystallization），簡稱Fc段。Fc段保留了H鏈原有的功能區(qū)的生物學(xué)活性及H鏈原有的抗原性。圖3蛋白酶裂解Ig示意圖若用胃蛋白酶水解IgG，則可以將H鏈的鏈間近C端處切斷，得到含兩個Fab段的大片段，稱為F(ab)2片段，見圖3，F(xiàn)(ab)2能與兩個抗原決定簇特異結(jié)合。其余的Ig被切成多個小分子多肽碎片，失去了任何生物學(xué)活性。通過對Ig水解片段的研究，了解了上述Ig的結(jié)構(gòu)和各功能區(qū)的生物學(xué)活性。應(yīng)用胃蛋白酶水解去除抗毒素血清中Ig的Fc片段，保留F(ab)2獲得抗毒素精制品，仍具有中和毒素的作用，但消除了使用完整Ig分子引起過敏性血清病發(fā)生的危險。三、五類免疫球蛋白的主要特性1、IgMIgM是抗原初次進(jìn)入機(jī)體后體液免疫應(yīng)答中最先產(chǎn)生的抗體。由5個單體分子通過J鏈連接聚合在一起（圖4）。沉降系數(shù)19S，分子量90，000d，是最大的Ig，稱為巨球蛋白。IgM因為是五聚體，所以主要在血管內(nèi)，它們有5~10個抗原結(jié)合價（Ig每一個與相應(yīng)抗原決定簇結(jié)合的部位，稱為一價），并有10個補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)，所以盡管IgM的生成數(shù)量不多，但在激活補(bǔ)體、中和病毒、凝集作用和調(diào)理作用等方面的效率，比IgG高很多。IgM是血管內(nèi)消除大顆粒抗原的主要抗體，在一定條件下IgM也參與II型或III型變態(tài)反應(yīng)。B細(xì)胞膜上的固定的IgM是7s的單體，起抗原受體作用，識別抗原決定簇。2．IgGIgG大量產(chǎn)生于抗原再次進(jìn)入機(jī)體引起的再次免疫應(yīng)答期，單體Ig沉降系數(shù)7s，分子量180，000d，在血液中含量最高，占Ig總量的70~80%，其分子小，可分布到全身的組織液，人體和兔的IgG可通過胎盤從母體進(jìn)入胎兒，但其他動物的IgG，因母體胎盤與胎兒胎盤的結(jié)構(gòu)層數(shù)較多，不能通過胎盤。IgG具有激活補(bǔ)體，中和病毒或毒素，調(diào)理作用等多種活性，是全身抗感染的主要抗體，IgG也參與II、III型變態(tài)反應(yīng)，某些腫瘤抗原誘導(dǎo)產(chǎn)生的IgG，可能是腫瘤的封閉因子。3．IgAIgA有兩種存在形式，一種是單體，存在于血清中，稱為血清型IgA。另一種為雙體，由J鏈連接兩個單體，并結(jié)合一個分泌片（secretorycomponent,SC），分布于各種粘膜表面，稱為分泌型IgA（secretoryIgA,SigA）。血清型IgA由骨髓內(nèi)漿細(xì)胞產(chǎn)生，進(jìn)入血液循環(huán)中，沉降系數(shù)7s，分子量170，000d，在血清中含量不高，生物學(xué)作用尚不太清楚。粘膜相關(guān)淋巴樣組織（MALT）中的漿細(xì)胞分泌IgA，腺體附近的漿細(xì)胞合成J鏈，將IgA連接為二聚體，腺上皮細(xì)胞產(chǎn)生SC，當(dāng)二聚體IgA轉(zhuǎn)運(yùn)到粘膜上時連接上一個SC分子，成為完整的SIgA。SC的重要作用是使IgA對蛋白酶的敏感性下降，并使粘液粘稠，增強(qiáng)對IgA的粘附作用，從而保護(hù)SIgA不受消化道蛋白酶的破壞，并更好地在粘膜局部附著發(fā)揮免疫防護(hù)作用。SIgA是呼吸道分泌液，胃腸道消化液，乳汁尤其初乳，淚液，唾液，尿液等外分泌液中，粘膜局部抗感染的重要抗體。SIgA具有中和病毒和凝集顆粒性抗原作用，但沒有傳統(tǒng)激活補(bǔ)體作用和調(diào)理作用。在粘膜表面發(fā)揮防御作用的機(jī)制尚不完全清楚，其可能是通過阻止細(xì)菌或病毒粘附于上皮表面而發(fā)揮“免疫排除”作用。4．IgEIgE是主要由上皮表面附近的漿細(xì)胞產(chǎn)生的單體IgE，沉降系數(shù)8s，分子量196，000d，不耐熱，加熱56℃30分鐘將破壞。IgE的Fc區(qū)易與肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞結(jié)合，引起I型超敏反應(yīng)（過敏反應(yīng)），故曾被稱為親細(xì)胞性抗體和反應(yīng)素?；ǚ鄣忍貏e容易刺激機(jī)體產(chǎn)生IgE。許多動物及人，在抗原的刺激下產(chǎn)生IgE的能力與遺傳有關(guān)，易產(chǎn)生IgE5．IgD人的IgD主要存在于一些B細(xì)胞膜表面，沉降系數(shù)7s，分子量185，000d，在B細(xì)胞上起識別抗原決定簇的作用。在家畜中未證實IgD的存在。圖4五類Ig結(jié)構(gòu)示意圖四.抗體的分類抗體依其化學(xué)結(jié)構(gòu)和自身表現(xiàn)的抗原性分為IgM、IgG、IgA、IgE和IgD五類外，尚可根據(jù)如下及個方面進(jìn)行分類。根據(jù)與抗原反應(yīng)的性質(zhì)分為完全抗體與不完全抗體。1.完全抗體（completeantibody）這類抗體具有兩個或多個抗原決定簇結(jié)合部位，又稱雙價抗體或多價抗體。它們在生理鹽水中與相應(yīng)抗原特異性反應(yīng)后出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象或凝集現(xiàn)象。2.不完全抗體（incompleteantibody）此類抗體僅有一個與抗原結(jié)合的部位，又稱單價抗體。其只能與相應(yīng)抗原結(jié)合，不能出現(xiàn)沉淀反應(yīng)或凝集反應(yīng)。單價抗體含量大多、多時將封閉抗原的抗原決定簇，阻斷抗原與完全抗體的沉淀反應(yīng)或凝集反應(yīng)。根據(jù)抗原的來源分為異種抗體、同種抗體、自身抗體和異嗜抗體。1．異種抗體（heteroantibody）來自免疫動物以外的異種抗原免疫所產(chǎn)生的抗體。例如抗菌抗體、抗病毒抗體等2.同種抗體（alloantibody或Homoantibody）同種屬動物不同個體之間的天然存在的抗體或相互免疫所產(chǎn)生的抗體。例如A型血的人，其血清中天然存在的抗B血型的抗體。3.自身抗體（autoantobody）動物機(jī)體對自身抗原免疫反應(yīng)所產(chǎn)生的抗體。4.異嗜抗體（heterophileantibody）由異嗜性抗原引起的抗體。根據(jù)抗體與抗原反應(yīng)的結(jié)果分為沉淀抗體、凝集抗體、補(bǔ)體結(jié)合抗體、中和抗體、溶血素、調(diào)理素和溶菌素。1.沉淀抗體（precipitatingantibody）能與相應(yīng)的可溶性抗原發(fā)生沉淀反應(yīng)的抗體，又稱沉淀素（precipitin）。2.凝集抗體（agglutinateantibody）能與相應(yīng)的顆粒性抗原發(fā)生凝集反應(yīng)的抗體，又稱凝集素（agglutinin）。3.補(bǔ)體結(jié)合抗體（complementfixingantibody）與相應(yīng)抗原結(jié)合后，能引起補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)的抗體。4.中和抗體（neutralizingantibody）與相應(yīng)病毒或與相應(yīng)的外毒素結(jié)合后，失去感染力或使外毒素事物毒性的抗體。5.溶血素（hemolysin）由紅細(xì)胞免疫機(jī)體產(chǎn)生的抗體?？贵w與紅細(xì)胞特異性結(jié)合后，在補(bǔ)體參與下可出現(xiàn)紅細(xì)胞溶解。6．調(diào)理素（opsonin）與抗原特異性結(jié)合后，在補(bǔ)體系統(tǒng)的協(xié)助下，促進(jìn)吞噬細(xì)胞對抗原的吞噬活性的抗體。7．溶菌素（bacteriolysin）與細(xì)菌特異性結(jié)合后在補(bǔ)體參與下，可使細(xì)菌溶解的抗菌抗體。根據(jù)抗體的均一性，分為多克隆抗體和單克隆抗體。1.多克隆抗體動物的免疫血清屬多克隆抗體。因為抗原都含有多種抗原決定簇，每種抗原決定簇都誘導(dǎo)機(jī)體內(nèi)具有特異性抗原受體的B細(xì)胞產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，所以動物免疫血清是很不均一的多克隆抗體的混合物。2、單克隆抗體（monoclonalantibody，McAb）意指一個克隆B細(xì)胞，受一種抗原決定簇作用后，分化、增殖的漿細(xì)胞分泌的，結(jié)構(gòu)均一的抗體。但實際上，目