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微生物學(xué)
Microbiology教學(xué)安排地點(diǎn):理工4-206,207時(shí)間:周三3-4節(jié)(單周);
周五5-6節(jié)(1-19周)學(xué)時(shí):共75學(xué)時(shí),41學(xué)時(shí)理論,實(shí)驗(yàn)34學(xué)時(shí)教材:周德慶,《微生物學(xué)教程》,高等教育出版社沈萍,《微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)》,高等教育出版社?
課堂講授為主,PowerPoint演板;課堂聽講為主,筆記,即時(shí)理解;自學(xué)為輔??偝煽?jī):平時(shí)成績(jī)(30%)+期末考試(70%)平時(shí)成績(jī):出勤、提問與討論、作業(yè)、實(shí)驗(yàn)課程說明
微生物學(xué)是生命科學(xué)中重要的基礎(chǔ)學(xué)科之一,其知識(shí)面覆蓋微觀世界和宏觀世界兩方面,內(nèi)容涉及微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)、生理生化、遺傳變異、生態(tài)分布以及食品與微生物的關(guān)系等方面。該課程有利于學(xué)生全面、系統(tǒng)地理解微生物學(xué)的基本知識(shí)和基本理論,熟練掌握微生物的基本操作技能,初步具有分析和解決有關(guān)實(shí)際問題的能力,同時(shí)也為后繼專業(yè)課的學(xué)習(xí)打下良好的基礎(chǔ)。緒論
一、什么是微生物
微生物(microorganism,microbe)是一切肉眼看不見的或看不清的微小生物的總稱。
微生物的種類很多主要包括:細(xì)菌、放線菌、藍(lán)細(xì)菌、支原體、立克次氏體、衣原體、真菌(酵母菌、霉菌及蕈菌)、原生動(dòng)物、單細(xì)胞藻類、病毒、亞病毒等。
微生物根據(jù)其不同的進(jìn)化水平和性準(zhǔn)上的明顯差別可分為三大類群:
原核類:細(xì)菌、放線菌、藍(lán)細(xì)菌、支原體、衣原體、立克次氏體
真核類:真菌(酵母菌、霉菌及蕈菌)、原生動(dòng)物、顯微藻類
非細(xì)胞類:病毒、亞病毒原核生物真核生物病毒、亞病毒古生菌真細(xì)菌真菌原生生物植物動(dòng)物微生物細(xì)胞生物非細(xì)胞生物----------生物
二、人類對(duì)微生物世界的認(rèn)識(shí)過程(一)難以認(rèn)識(shí)的微生物世界原因:1、個(gè)體微小
2、外貌不顯
3、雜居混生
4、因果難聯(lián)微生物學(xué)歷史發(fā)展的早期,就是圍繞著如何克服這四大障礙而開展各種研究工作的。(二)人類揭開微生物世界奧秘的歷史微生物學(xué)的發(fā)展歷史可分為五個(gè)時(shí)期:
1、史前期
2、初創(chuàng)期
3、奠基期
4、發(fā)展期
5、成熟期
1.史前期(朦朧階段)
史前期是指人類還未見到微生物個(gè)體,尤其是細(xì)菌細(xì)胞前的一段漫長(zhǎng)的歷史時(shí)期,大約在距今8000年~1676年間。
開創(chuàng)者:各國(guó)勞動(dòng)人民,其中尤以我國(guó)的制曲、釀酒技術(shù)著稱。
特點(diǎn):未見細(xì)菌等微生物個(gè)體;憑實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)利用微生物的有益活動(dòng)(釀酒、制醬、釀醋、漚肥、發(fā)面)。2.初創(chuàng)期(形態(tài)描述階段)時(shí)間:1676~
1861開創(chuàng)者:Leeuwenhoek(列文虎克)特點(diǎn):自制的單式顯微鏡觀察到細(xì)菌的個(gè)體;對(duì)一些微生物形態(tài)進(jìn)行描述。
1676年,微生物學(xué)的先驅(qū)荷蘭人列文虎克首次觀察到了細(xì)菌。他沒有上過大學(xué),是一個(gè)只會(huì)荷蘭語的小商人,但卻在1680
年被選為英國(guó)皇家學(xué)會(huì)的會(huì)員。3.奠基期(生理水平研究階段)時(shí)間:1861~
1897開創(chuàng)者:Pasteur(巴斯德)和Koch(科赫)特點(diǎn):①建立了一系列研究微生物所必要的獨(dú)特方法;②借助于良好的研究方法,開創(chuàng)了尋找病原微生物的“黃金時(shí)期”;③把微生物的研究從形態(tài)描述推進(jìn)到生理學(xué)研究的新水平;④微生物學(xué)以獨(dú)立的學(xué)科形式開始形成。
巴斯德(LouisPasteur)——微生物學(xué)奠基人
(1)發(fā)現(xiàn)并證實(shí)發(fā)酵是由微生物引起的酒精發(fā)酵是一個(gè)由微生物引起的生物過程還是一個(gè)純粹的化學(xué)反應(yīng)過程,曾是化學(xué)家和微生物學(xué)家激烈爭(zhēng)論的問題。巴斯德認(rèn)為一切發(fā)酵作用都可能和微生物的生長(zhǎng)繁殖有關(guān)。不同的發(fā)酵是由不同的微生物引起的。經(jīng)不斷地努力,終于證實(shí)酒精發(fā)酵是由酵母菌引起的。
(2)徹底否定了“自然發(fā)生”學(xué)說
著名的曲頸瓶試驗(yàn)無可辯駁地證實(shí),空氣內(nèi)確實(shí)含有微生物,是它們引起有機(jī)質(zhì)的腐敗。
(3)免疫學(xué)——預(yù)防接種(鈍化病原體可誘發(fā)免疫性和預(yù)防疾?。?/p>
首次制成狂犬疫苗
(4)其他貢獻(xiàn)
巴斯德消毒法:60~65℃作短時(shí)間加熱處理,殺死有害微生物科赫(RobertKoch)——細(xì)菌學(xué)奠基人(1)微生物學(xué)基本操作技術(shù)方面的貢獻(xiàn)
a)細(xì)菌純培養(yǎng)方法的建立劃線法混合倒平板法
b)設(shè)計(jì)了各種培養(yǎng)基,實(shí)現(xiàn)了在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)對(duì)各種微生物的培養(yǎng)
c)流動(dòng)蒸汽滅菌
d)染色觀察和顯微攝影(2)對(duì)病原細(xì)菌的研究作出了突出的貢獻(xiàn):
a)具體證實(shí)了炭疽桿菌是炭疽病的病原菌;
炭疽桿菌b)發(fā)現(xiàn)了肺結(jié)核病的病原菌(1905年獲諾貝爾獎(jiǎng));結(jié)核桿菌c)證明某種微生物是否為某種疾病病原體的基本原則——著名的柯赫原則某一種微生物,當(dāng)被懷疑是病原體時(shí),它一定伴隨著病害而存在;要從寄主分離出這樣的微生物并在培養(yǎng)基中培養(yǎng)出來;用這種微生物的純培養(yǎng)接種健康而敏感的寄主,同樣的疾病會(huì)重復(fù)發(fā)生;從試驗(yàn)發(fā)病的寄主中能再度分離培養(yǎng)出這種微生物來。4.發(fā)展期(生化水平研究階段)時(shí)間:1897~
1953開創(chuàng)者:Büchner——生物化學(xué)奠基人特點(diǎn):①進(jìn)入微生物生化水平的研究;②應(yīng)用微生物的分支學(xué)科更為擴(kuò)大,出現(xiàn)了抗生素等學(xué)科;③開始尋找各種有益微生物代謝產(chǎn)物;④普通微生物學(xué)開始形成;⑤各相關(guān)學(xué)科和技術(shù)方法相互滲透,相互促進(jìn),加速了微生物學(xué)的發(fā)展。5.成熟期(分子生物學(xué)水平研究階段)時(shí)間:
1953~至今開創(chuàng)者:
Watson
和
Crick——分子生物學(xué)奠基人特點(diǎn):①微生物學(xué)從一門在生命科學(xué)中較為孤立的以應(yīng)用為主的學(xué)科,成為一門十分熱門的前沿基礎(chǔ)學(xué)科;②在基礎(chǔ)理論的研究方面,逐步進(jìn)入到分子水平的研究,微生物迅速成為分子生物學(xué)研究中的最主要的對(duì)象;③在應(yīng)用研究方面,向著更自覺、更有效和可人為控制的方向發(fā)展。三、微生物的作用
1.微生物與糧食
糧食生產(chǎn)是全人類生存中至關(guān)重要的大事。微生物在提高土壤肥力、改進(jìn)作物特性(如構(gòu)建固氮植物)、促進(jìn)糧食增產(chǎn)、防治糧食作物的病蟲害、防止糧食霉腐變質(zhì)以及把多余糧食轉(zhuǎn)化為糖、單細(xì)胞蛋白、各種飲料和調(diào)味品等方面,都可大顯身手。2.微生物與能源①把自然界蘊(yùn)藏量極其豐富的纖維素轉(zhuǎn)化成乙醇;②利用產(chǎn)甲烷菌把自然界蘊(yùn)藏量最豐富的可再生資源轉(zhuǎn)化成甲烷;③利用光合細(xì)菌、藍(lán)細(xì)菌或厭氧梭菌等微生物生產(chǎn)“清潔能源”--氫氣;④通過微生物發(fā)酵產(chǎn)氣或其代謝產(chǎn)物來提高石油采收率;⑤研制微生物電池使之實(shí)用化。
3.微生物與資源
微生物能將地球上永不枯竭的纖維素等可再生資源轉(zhuǎn)化成各種化工、輕工和制藥等工業(yè)原料。傳統(tǒng)的:乙醇、丙醇、丁醇、乙酸、甘油、乳酸、蘋果酸等;現(xiàn)代的:水楊酸、烏頭酸、已二酸、丙烯酸、長(zhǎng)鏈脂肪酸、亞麻酸油和聚羥基丁酸酯(PHB)等;另外:微生物在金屬礦藏資源的開發(fā)和利用上也有獨(dú)特的作用。
4.微生物與環(huán)境保護(hù)利用微生物肥料、微生物殺蟲劑或農(nóng)用抗生素來取代會(huì)造成環(huán)境惡化的各種化學(xué)肥料或化學(xué)農(nóng)藥;
利用微生物生產(chǎn)的PHB(聚-?-羥丁酸)制造易降解的醫(yī)用塑料制品、手術(shù)針和縫線以減少環(huán)境污染;利用微生物來凈化生活污水和有毒工業(yè)污水;利用微生物技術(shù)來監(jiān)察環(huán)境的污染度等。
5.微生物與人類健康
防治各類疾病的主要手段是各種微生物產(chǎn)生的藥物:抗生素、干擾素和白細(xì)胞介素等高效藥物紛紛轉(zhuǎn)向由“工程菌”來生產(chǎn)。
此外,一大批與人類健康、長(zhǎng)壽有關(guān)的生物制品,如疫苗、類毒素等均是微生物產(chǎn)品。
人體體表及體內(nèi)存在大量的微生物:皮膚表面:平均10萬個(gè)細(xì)菌/平方厘米;口腔:細(xì)菌種類超過500種;腸道:微生物總量達(dá)100萬億,糞便干重的1/3是細(xì)菌,每克糞便的細(xì)菌總數(shù)為:1000億個(gè);每個(gè)噴嚏的飛沫含4500-150000個(gè)細(xì)菌,重感冒患者為8500萬個(gè);人和動(dòng)物60%的傳染性疾病是由病毒引起,如天花、麻疹、流行性感冒、脊髓灰質(zhì)炎、乙型腦炎、肝炎、AIDS和SARS等。少數(shù)寄生型放線菌可引起人、動(dòng)物(如皮膚、腦、肺和腳部感染)、植物(如馬鈴薯和甜菜的瘡痂?。┑募膊 A⒖舜问象w大多是人獸共患的病原體,主要以節(jié)肢動(dòng)物(虱、蚤、蜱、螨)為媒介,引起人類疾病如流行性斑疹傷寒、恙蟲熱、Q熱等。沙眼衣原體是人類砂眼的病原體,甚至引起結(jié)膜炎、角膜炎、角膜血管翳等臨床癥狀,成為致盲的重要原因。部分真菌寄生在人、動(dòng)物和植物體內(nèi),可引起許多疾病。如人的頭癬、灰指甲、腳癬(香港腳)均是真菌引起的。四、微生物學(xué)的基本研究方法
1.顯微鏡技術(shù)
光學(xué)顯微鏡的誕生,它將肉眼的分辨率提高到微米級(jí)水平,而電子顯微鏡的出現(xiàn)使人眼分辨達(dá)到納米水平。列文虎克是第一個(gè)用顯微鏡來觀察和描述微生物的人。
2.無菌技術(shù)
無菌技術(shù)是在分離、轉(zhuǎn)接及培養(yǎng)純培養(yǎng)物時(shí)防止其被其他微生物污染的技術(shù)。而對(duì)滅菌技術(shù)的原理等作出科學(xué)解釋的是巴斯德,他所進(jìn)行的舉世聞名的曲頸瓶實(shí)驗(yàn),不僅徹底否定了當(dāng)時(shí)十分流行的“生命自然發(fā)生學(xué)說”,而且為微生物學(xué)中的無菌技術(shù)的創(chuàng)立和發(fā)展奠定了理論和實(shí)踐基礎(chǔ)。
3.純種培養(yǎng)技術(shù)
微生物純種培養(yǎng)技術(shù)在科學(xué)實(shí)驗(yàn)和生產(chǎn)實(shí)踐中有著極其重大的理論與實(shí)踐意義。若為微生物提供一個(gè)初級(jí)培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)方法并不復(fù)雜,但要使微生物在大規(guī)模生產(chǎn)中良好地生長(zhǎng)或累積代謝產(chǎn)物,就得考慮一些最為合理的培養(yǎng)裝置和有效的工藝條件,并且還要在整個(gè)微生物的發(fā)酵過程中嚴(yán)防其他微生物的干擾,即防止雜菌污染。發(fā)酵罐的發(fā)明及大規(guī)模地普及使用,為生物工程學(xué)開辟了嶄新的前景。同時(shí)微生物發(fā)酵工業(yè)也已成為國(guó)民經(jīng)濟(jì)的重要支柱之一。
五、微生物的五大特點(diǎn)
1.體積小、面積大
微生物的個(gè)體極其微小,要測(cè)量它們,必須用μm或nm作單位。如一個(gè)典型的球菌體積僅為1μm3。
最近芬蘭科學(xué)家Kajander等發(fā)現(xiàn)了一種能引起尿結(jié)石的納米細(xì)菌,其直徑最小僅為50nm,甚至比最大的病毒更小一些。這種細(xì)菌分裂緩慢,三天才分裂一次,是目前所知的最小的具有細(xì)胞壁的細(xì)菌。它們的結(jié)構(gòu)也是非常簡(jiǎn)單的,大多數(shù)微生物為單細(xì)胞,只有少數(shù)為簡(jiǎn)單的多細(xì)胞。又如PSTV由359個(gè)核苷酸組成的RNA,長(zhǎng)度為50nm;朊病毒僅蛋白質(zhì)分子組成。比表面積=表面積/體積乳酸桿菌120,000豌豆6.0雞蛋1.5體重200磅的人0.3
2.吸收多,轉(zhuǎn)化快
科學(xué)家研究發(fā)現(xiàn)微生物吸收和轉(zhuǎn)化物質(zhì)的能力比動(dòng)物、植物要高很多倍,如在合適的環(huán)境下,Escherichiacoli每小時(shí)內(nèi)可消耗其自重1000倍~10000倍的乳糖。
Candidautilis(產(chǎn)朊假絲酵母)合成蛋白質(zhì)的能力比大豆強(qiáng)100倍,比食用公牛強(qiáng)10萬倍。
微生物的這個(gè)特性為它們的高速生長(zhǎng)繁殖和產(chǎn)生大量代謝產(chǎn)物提供了充分的物質(zhì)基礎(chǔ),從而使微生物有可能更好地發(fā)揮“活的化工廠”的作用,人類對(duì)微生物的利用主要體現(xiàn)在它們的生物化學(xué)轉(zhuǎn)化能力上。
3.生長(zhǎng)旺,繁殖快
生物界中,微生物具有驚人的生長(zhǎng)繁殖速度,其中二等分裂的細(xì)菌尤為突出。人們研究得最透砌的微生物是Escherichiacoli,其細(xì)胞在合適的生長(zhǎng)條件下,每分裂一次的時(shí)間是12.5~20.0分鐘。如按20分鐘分裂一次計(jì),則每小時(shí)分裂3次,24小時(shí)可達(dá)到4.722×1024個(gè)。具強(qiáng)大的合成能力,可利用農(nóng)產(chǎn)品廢棄物、石油甚至CO2等為原料合成有機(jī)物。微生物合成蛋白質(zhì)的速度比植物快500倍,比動(dòng)物快2000倍。
若干微生物的代時(shí)及每日增殖率微生物名稱代時(shí)每日分裂次數(shù)溫度每日增殖率乳酸菌38分38252.7×1011大腸桿菌18分80371.2×1024
根瘤菌110分13258.2×103枯草桿菌31分46307.0×1013光合細(xì)菌144分10301.0×103釀酒酵母120分12304.1×103小球藻7小時(shí)3.42510.6念珠藻*23小時(shí)1.04252.1硅藻17小時(shí)1.4202.64草履蟲10.4小時(shí)2.3264.92*為念珠藍(lán)菌屬(Nostoc)的舊稱,與細(xì)菌同屬原核生物。
由于條件的限制,細(xì)菌的指數(shù)分裂速度只能維持?jǐn)?shù)小時(shí),而在液體培養(yǎng)基中,細(xì)菌細(xì)胞的濃度一般僅能達(dá)到108~109個(gè)/ml。
微生物的這一特性在發(fā)酵工業(yè)上體現(xiàn)在:生產(chǎn)效率高、發(fā)酵周期短。在生物學(xué)基本理論的研究上的優(yōu)越性:科研周期大大縮短、經(jīng)費(fèi)減少、效率提高。
當(dāng)然,對(duì)于危害人、畜和植物等的病原微生物或使物品發(fā)霉的微生物來說,它們的這個(gè)特性就會(huì)給人類帶來極大的麻煩甚至嚴(yán)重的禍害,因而需要認(rèn)真對(duì)待。4.適應(yīng)強(qiáng)、易變異
微生物有極其靈活的適應(yīng)性,這是高等動(dòng)植物無法比擬的,諸如抗熱性、抗寒性、抗鹽性、抗酸性、抗壓力等能力。例如:在海洋深處的某些硫細(xì)菌可在250℃~300℃之間生長(zhǎng);嗜鹽細(xì)菌可在飽和鹽水中正常生長(zhǎng)繁殖;Thiobacillusthioo
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