（高清版）GBZT 332-2024 尿中硫氰酸根測(cè)定標(biāo)準(zhǔn) 離子色譜法

ICS13.100CCSC52中華人民共和國(guó)國(guó)家職業(yè)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)代替WS/T39—1996Determinationstandardofthiocyanateinurine—Ionchromatographym2024-05-092024-11-012024-05-092024-11-01IGBZ/T332—2024本標(biāo)準(zhǔn)為推薦性標(biāo)準(zhǔn)。本標(biāo)準(zhǔn)代替WS/T39—1996《尿中硫氰酸鹽的吡啶-巴比妥酸分光光度測(cè)定方法》，與WS/T39—1996相比，除結(jié)構(gòu)調(diào)整和編輯性改動(dòng)外，主要技術(shù)變化如下：——?jiǎng)h除了尿中硫氰酸鹽的吡啶-巴比妥酸分光光度測(cè)定方法（見(jiàn)1996年版——增加了尿中硫氰酸根的離子色譜測(cè)定方法（見(jiàn)第4章）。本標(biāo)準(zhǔn)由國(guó)家衛(wèi)生健康標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)職業(yè)健康標(biāo)準(zhǔn)專(zhuān)業(yè)委員會(huì)負(fù)責(zé)技術(shù)審查和技術(shù)咨詢(xún)，由中國(guó)疾病預(yù)防控制中心負(fù)責(zé)協(xié)調(diào)性和格式審查，由國(guó)家衛(wèi)生健康委職業(yè)健康司負(fù)責(zé)業(yè)務(wù)管理、法規(guī)司負(fù)責(zé)統(tǒng)籌管本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：中國(guó)疾病預(yù)防控制中心職業(yè)衛(wèi)生與中毒控制所、包鋼（集團(tuán)）公司預(yù)防保健中心、北京市化工職業(yè)病防治院（北京市職業(yè)病防治研究院）、國(guó)家衛(wèi)生健康委職業(yè)安全衛(wèi)生研究中心、北京鐵路疾病預(yù)防醫(yī)學(xué)研究中心、蘇州市疾病預(yù)防控制中心。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：趙瑋、王升、宋爽、閆慧芳、潘興富、丁春光、劉曉東、鄭玉橋、高美佳、張付剛。本標(biāo)準(zhǔn)及其所代替標(biāo)準(zhǔn)的歷次版本發(fā)布情況為：——1996年首次發(fā)布為WS/T39—1996；——本次為第一次修訂。1GBZ/T332—2024尿中硫氰酸根測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)離子色譜法本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了測(cè)定尿中硫氰酸根的離子色譜法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于職業(yè)接觸氰化物人員尿中硫氰酸根濃度的測(cè)定。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本標(biāo)準(zhǔn)必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本標(biāo)準(zhǔn)。GBZ/T210.5職業(yè)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)制定指南第5部分：生物材料中化學(xué)物質(zhì)測(cè)定方法GBZ/T224職業(yè)衛(wèi)生名詞術(shù)語(yǔ)GBZ/T295職業(yè)人群生物監(jiān)測(cè)方法總則WS/T97尿中肌酐分光光度測(cè)定方法WS/T98尿中肌酐的反相高效液相色譜測(cè)定方法3術(shù)語(yǔ)和定義GBZ/T224和GBZ/T295界定的術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。4原理尿樣用水稀釋并經(jīng)固相萃取柱過(guò)濾后，硫氰酸根由離子色譜柱分離，電導(dǎo)檢測(cè)器檢測(cè)，以保留時(shí)間定性，用外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法定量。5儀器5.1電子天平：感量0.1mg。5.2離心機(jī)：4000r/min。5.3渦旋混勻器。5.4固相萃取柱：C18，200mg/3mL。5.5離心管：15mL。5.6具蓋聚乙烯瓶或螺口離心管：50mL～100mL。5.7容量瓶：10mL，100mL。5.8樣品瓶：2mL～10mL。5.9離子色譜儀：配電導(dǎo)檢測(cè)器。儀器操作參考條件：a）色譜柱：親水性較強(qiáng)的高容量陰離子交換柱，分離柱(250mm×4mm)，保護(hù)柱（50mm×4mmb）淋洗液：氫氧化鉀淋洗液，或其他氫氧根體系淋洗液；2GBZ/T332—2024c）淋洗液濃度：35mmol/L；d）流速：1.0mL/min；e）抑制器：陰離子抑制器（4mm電流：87mA；f）進(jìn)樣體積：25μL；g）柱溫：30℃;h）電導(dǎo)池溫度：35℃。6試劑6.1實(shí)驗(yàn)用水：去離子水，電阻率大于18.2MΩ.cm，離子色譜鑒定無(wú)干擾峰。6.2甲醇（CH3OH）：色譜純。6.3氫氧化鉀（KOH）：優(yōu)級(jí)純。6.4硫氰酸鉀（KSCN）或硫氰酸鈉（NaSCN）：純度≥99.5%。6.5硫氰酸根（SCN-）標(biāo)準(zhǔn)溶液：將硫氰酸鉀（或硫氰酸鈉）于80℃烘箱內(nèi)烘干2h，準(zhǔn)確稱(chēng)取0.1673g干燥后的硫氰酸鉀（或0.1397g干燥后的硫氰酸鈉），溶于少量去離子水中，轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中，用去離子水定容至刻度并混勻，此溶液為1.00mg/mL的硫氰酸根（SCN-）標(biāo)準(zhǔn)貯備液，于4℃條件下可保存1個(gè)月。臨用前，用去離子水稀釋成10.0μg/mL的硫氰酸根（SCN-）標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液。7樣品的采集、運(yùn)輸和保存7.1樣品的采集：按GBZ/T295要求用具蓋聚乙烯瓶或螺口離心管采集班后尿，混勻后盡快測(cè)定尿肌酐或比重。7.2樣品空白的采集：在樣品采集過(guò)程中，同時(shí)制備3份樣品空白。隨機(jī)抽取3份尿樣采集容器，加入與尿樣等體積的去離子水，并與樣品同時(shí)運(yùn)輸和儲(chǔ)存。7.3將采集后的樣品和樣品空白置于清潔容器中冷藏運(yùn)輸，尿樣置于4℃條件下可保存7d；置于-20℃條件下可保存14d。8分析步驟8.1標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的配制與測(cè)定取10mL容量瓶，分別吸取不同體積標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液，用去離子水定容至刻度，配制成0.0μg/mL~10.0μg/mL的硫氰酸根離子標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。參照儀器操作參考條件，分別測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。以測(cè)得的峰面積與對(duì)應(yīng)硫氰酸根濃度(μg/mL）計(jì)算回歸方程。8.2樣品處理將尿樣從冰箱中取出，放置恢復(fù)到室溫后，充分搖勻。準(zhǔn)確吸取1.00mL尿樣，用去離子水稀釋并定容至10.0mL，充分混勻，以4000r/min離心10min。吸取離心后上清尿樣備用。同時(shí)做試劑空白，用去離子水代替尿樣，處理方法同樣品。8.3樣品凈化向C18固相萃取柱中依次加入2.0mL甲醇和2.0mL去離子水進(jìn)行活化，自然淋洗通過(guò)柱體并棄去濾液，靜置5min。取上述上清尿樣3.0mL加入活化好的固相萃取柱用以平衡萃取柱，使樣品因重力作用自然通過(guò)柱體，棄去濾液，靜置3min～5min；再次取上清尿樣3.0mL加入固相萃取柱，收集濾液于樣品瓶中待測(cè)。樣品空白與樣品按同樣方法處理。3GBZ/T332—20248.4樣品測(cè)定用測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的儀器操作條件測(cè)定樣品、樣品空白和試劑空白，以保留時(shí)間定性，測(cè)得峰面積后由回歸方程計(jì)算尿液樣品中硫氰酸根的濃度(μg/mL）。若尿液樣品中硫氰酸根的濃度超出測(cè)定范圍，可以增加尿液樣品的稀釋倍數(shù)，計(jì)算時(shí)乘以稀釋倍數(shù)。8.5質(zhì)量控制檢測(cè)過(guò)程質(zhì)量控制應(yīng)按照GBZ/T295的要求進(jìn)行。樣品空白和試劑空白測(cè)定結(jié)果應(yīng)小于方法檢出9計(jì)算9.1按式（1）計(jì)算樣品中硫氰酸根的濃度：式中：ρ——樣品中硫氰酸根的濃度，單位為微克每毫升(μg/mLf——稀釋倍數(shù)；ρ0——由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)回歸方程得到的樣品溶液中硫氰酸根的濃度，單位為微克每毫升(μg/mL）。9.2根據(jù)生物接觸限值的要求，對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比重或肌酐校正。尿比重按GBZ/T295方法測(cè)定；尿肌酐按WS/T97或WS/T98方法測(cè)定。10.1本法按照GBZ/T210.5的方法和要求進(jìn)行研制。10.2本法的檢出限為0.5μg/mL（以尿樣稀釋10倍計(jì)），定量下限為1.7μg/mL（以尿樣稀釋10倍計(jì)）；方法測(cè)定范圍為1.7μg/mL～100μg/mL；批內(nèi)精密度范圍為2.0%～3.7%，批間精密度范圍為2.1%～5.1%，加標(biāo)回收率范圍為96.6%～101.9%（尿樣加標(biāo)濃度范圍為5.0μg/mL～40.0μg/mL,10.3本法可使用AS16型色譜柱和AG16型保護(hù)柱，或等效的其他離子色譜柱。也可使用等效的其他型號(hào)陰離子抑制器。10.4為保護(hù)離子色譜柱，測(cè)定雜質(zhì)濃度較高的尿樣時(shí)，可在硫氰酸根出峰后將淋洗液的濃度提高到70mmol/L淋洗5min～10min以除去殘留雜質(zhì)。10.5尿樣中可能共存的氯離子（Cl-）、氟離子（F-）、碳酸根（CO32-）、硝酸根（NO3-）、硫酸根（SO42-）、溴離子（Br-）、碘離子（I-）、乙酸根（CH3COO-）、氰根（CN-