分子體外診斷檢驗(yàn) 尿液靜脈血清和血漿代謝組學(xué)檢驗(yàn)前過程的規(guī)范

ICS11.100.10

CCSC44

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/TXXXXX—XXXX/ISO23118:2021

ISO23118:2021

`

分子體外診斷檢驗(yàn)?zāi)蛞?，靜脈血清和血漿

代謝組學(xué)檢驗(yàn)前過程的規(guī)范

Molecularinvitrodiagnosticexaminations—Specificationsfor

pre-examinationprocessesinmetabolomicsinurine,venousbloodserum

andplasma

(ISO23118:2021)

征求意見稿

XXXX-XX-XX發(fā)布XXXX-XX-XX實(shí)施

引言

代謝組學(xué)是研究代謝物特征的“組學(xué)”科學(xué)，因而也被定義為特定生物系統(tǒng)如細(xì)胞、組織、器官或

整個(gè)生物系統(tǒng)中的所有小分子(分子質(zhì)量<2000Da)的集合[1]。其分析主要通過兩種分析技術(shù)進(jìn)行，即

質(zhì)譜(MS)和核磁共振(NMR)[2][3][4]。前者的靈敏度可低至皮摩爾級(jí)別，需要針對(duì)特定種類化合物，

開展多次樣品制備及質(zhì)譜檢測(cè)。后者測(cè)量濃度在1μM以上的代謝物，主要用于非靶向分析，所有濃度

高于檢出限的代謝物可以同時(shí)被檢測(cè)到，不依賴于其化學(xué)性質(zhì)，也無需任何額外的分離方法。

代謝組是動(dòng)態(tài)的，對(duì)擾動(dòng)非常敏感。代謝組在原始樣本采集、運(yùn)輸、儲(chǔ)存和處理過程中可能會(huì)發(fā)生

顯著變化。因此，診斷和研究測(cè)量的結(jié)果可能并不能真實(shí)地代表特定的生理狀態(tài)或時(shí)間點(diǎn)，所描述出的

只是檢測(cè)前的各個(gè)過程人為引入的變化。分析前的變異主要有兩個(gè)來源：

a)樣品中的酶活性，主要與細(xì)胞的存在有關(guān)；

b)代謝物之間或代謝物與氧之間的化學(xué)反應(yīng)(如氧化還原反應(yīng))，見文獻(xiàn)[5]至[11]。

此外，添加劑的使用或污染物的引入都會(huì)影響分析結(jié)果，因此選擇合適的采集管和塑料器皿也是檢

驗(yàn)前處理的一個(gè)重要方面。

許多研究通過找出影響代謝物組成的關(guān)鍵步驟和參數(shù)，來維持樣品的代謝組原貌，從而制定最佳的

檢驗(yàn)前過程規(guī)范。此外，需要對(duì)整個(gè)檢驗(yàn)前過程進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化，以確保多中心研究的可比性。在目前的研

究中，還沒有統(tǒng)一的代謝組學(xué)樣品檢驗(yàn)前過程規(guī)范。因此，各中心采用的不同的流程會(huì)給樣品代謝組帶

來了不同程度的影響，，使得多中心數(shù)據(jù)比較變得不可靠。而應(yīng)用此份測(cè)試前規(guī)范要求，將使代謝組分

析中結(jié)果的比較和評(píng)價(jià)成為可能。

本文件借鑒這些研究，將尿液、血清和血漿代謝組學(xué)分析檢驗(yàn)前過程的各步驟進(jìn)行整理和標(biāo)準(zhǔn)化。

II

分子體外診斷檢驗(yàn)?zāi)蛞海o脈血清和血漿代謝組學(xué)檢驗(yàn)前處理的

規(guī)范

1范圍

本文件對(duì)擬用于代謝組學(xué)分析的尿液、靜脈血血漿和血清的標(biāo)本處理、記錄和加工等檢驗(yàn)前處理規(guī)

范提出了要求和建議。本文件適用于代謝組學(xué)檢測(cè)，可供生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室、實(shí)驗(yàn)室客戶、體外診斷開發(fā)

商和生產(chǎn)商、從事生物醫(yī)學(xué)研究的機(jī)構(gòu)和公司、生物樣品庫(kù)和監(jiān)管部門使用。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB/T22576.1—2018醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力的要求第1部分通用要求；

GB19781醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室安全要求

3術(shù)語和定義

ISO15189界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。

ISO以及IEC用于標(biāo)準(zhǔn)化的術(shù)語數(shù)據(jù)庫(kù)維護(hù)在如下網(wǎng)址：

—ISO在線瀏覽平臺(tái):https://www.iso.org/obp

—IEC電子百科:http://www.electropedia.org/

3.1

生物體液biofluid

可排出(如尿液或汗液)、分泌(如母乳、唾液或膽汁)、通過取樣針頭獲取(如血液或腦脊液)、或由于

病理過程而產(chǎn)生(如水泡或囊腫液)的生物液體。

3.2

檢驗(yàn)examination

以確定一個(gè)特性的值或特征為目標(biāo)的一組操作。

注1：從分離的分析物開始并包括各種用于定性或定量檢驗(yàn)的參數(shù)測(cè)試或化學(xué)操作的過程。

注2：對(duì)于代謝組分析，分析物的分離不是必需的。

[來源：ISO20166-1：2018，3.10；有修改，刪除原術(shù)語“分析檢測(cè)”增加注2]

3.3

1

禁食fasting

停止攝入除水之外的任何固體或液體食物至少8小時(shí)。

3.4

質(zhì)譜法massspectrometry

基于化合物的質(zhì)荷比而對(duì)其進(jìn)行分析的方法。

3.5

代謝譜分析metabolicprofiling

利用分析平臺(tái)同時(shí)測(cè)量生物體系中的代謝物成分集合，這些代謝物可通過所使用（或所選定的）技

術(shù)來進(jìn)行測(cè)量。

示例：相關(guān)的測(cè)量技術(shù)如核磁共振波譜和質(zhì)譜。

3.6

代謝物metabolites

宿主生物體、微生物群落的小分子代謝中間產(chǎn)物和/或終產(chǎn)物（≤2000Da），它們來自于食物、飲

料、藥物或污染物。

注：更多信息參見參考文獻(xiàn)[1]。

3.7

代謝組metabolome

在生物體或生物樣品中發(fā)現(xiàn)的完整的代謝物集合。

注：更多信息參見參考文獻(xiàn)。

3.8

代謝組學(xué)metabolomics

代謝物組學(xué)

對(duì)生物標(biāo)品（如生物體、細(xì)胞、組織或生物體液）代謝組的全面分析。

3.9

基于質(zhì)譜的代謝組學(xué)MS-basedmetabolomics

利用質(zhì)譜法測(cè)量生物樣品中的代謝物

3.10

核磁共振波譜法nuclearmagneticresonancespectroscopy

NMR

基于在固定磁場(chǎng)作用下原子核對(duì)射頻輻射選擇性吸收的原理的一種方法。

注：NMR提供分子的化學(xué)和結(jié)構(gòu)性質(zhì)。

3.11

基于核磁共振的代謝組學(xué)NMR-basedmetabolomics

useofNMRspectroscopy(3.10)tomeasuremetabolites(3.6)inbiologicalsamples

利用核磁共振波譜法測(cè)量生物樣品中的代謝物。

2

3.12

血漿plasma

未凝固血液的液體部分。

注：血漿樣本可含有抗凝劑。

3.13

檢驗(yàn)前過程pre-examinationprocess

分析前階段preanalyticalphase

分析前工作流程preanalyticalworkflow

按時(shí)間順序從臨床醫(yī)生的申請(qǐng)開始，包括檢驗(yàn)(3.2)申請(qǐng)、病人的準(zhǔn)備和身份識(shí)別、原始樣品的采集、

臨時(shí)貯存、在分析實(shí)驗(yàn)室內(nèi)和實(shí)驗(yàn)室間進(jìn)行運(yùn)輸、分裝、檢索。

注：分析前階段包括影響預(yù)期檢驗(yàn)(3.2)結(jié)果的準(zhǔn)備流程。

[來源：GB/T22576.1-2018，3.15，有修改——“分析前工作流程”被添加為首選術(shù)語，添加了更

多細(xì)節(jié)](ISO15189:2012，IDT)

3.14

原始樣品primarysample

標(biāo)本specimen

為檢驗(yàn)、研究或分析一種或多種量或特性而取出的認(rèn)為可代表全部的一獨(dú)立部分的體液、呼出氣、

頭發(fā)或組織。

[來源：GB/T22576.1-2018，3.16，刪除原注釋。](ISO15189:2012，IDT)

3.15

室溫roomtemperature

本文件中是指18℃~25℃。

3.16

血清serum

可以從凝固的血液中分離出來的液體。

3.17

穩(wěn)定性stability

標(biāo)準(zhǔn)樣品在規(guī)定條件下貯存時(shí)的特性，其某個(gè)規(guī)定特性值在規(guī)定時(shí)間內(nèi)保持在規(guī)定限制范圍內(nèi)。

[來源：GB/T15000.2-2019,2.1.15；刪去原注]（ISOGuide30:2015，IDT）

4總體要求

有關(guān)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理體系的一般說明，特別是關(guān)于標(biāo)本收集、接收和處理（包括避免交叉污染）

的一般說明，可參見GB/T22576.1或GB/T27020。對(duì)實(shí)驗(yàn)室設(shè)備、試劑和消耗品的要求應(yīng)遵循GB/T

22576.1及GB/T27020的相關(guān)要求也能適用。

診斷工作流程的所有步驟都可能影響最終的分析測(cè)試結(jié)果，應(yīng)對(duì)其進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估（參見GB/T42062）。

針對(duì)已確定的風(fēng)險(xiǎn)，應(yīng)針對(duì)需要之處建立緩解措施進(jìn)行消除或減少，以保證檢驗(yàn)的性能表現(xiàn)。尤其應(yīng)研

究并確保待測(cè)代謝物不會(huì)因?yàn)槿魏斡绊憴z測(cè)結(jié)果的行為而發(fā)生變化?？梢酝ㄟ^如下方式做到這一點(diǎn)，例

3

如，對(duì)標(biāo)本/樣品的檢測(cè)前步驟進(jìn)行逐一的時(shí)間曲線分析（比如運(yùn)輸和儲(chǔ)存），然后識(shí)別出這些分析前

變量對(duì)相應(yīng)檢測(cè)造成的影響，并采取措施防止或減少這些影響。

在沒有合適的標(biāo)本穩(wěn)定技術(shù)的情況下，代謝組學(xué)的標(biāo)本采集應(yīng)在具備即時(shí)可用的合適的生物體液處

理程序的醫(yī)院場(chǎng)所或機(jī)構(gòu)進(jìn)行。

對(duì)于擬進(jìn)行代謝組學(xué)分析的樣本，以下事項(xiàng)應(yīng)考慮到：

a)患者的預(yù)處理（禁食，治療等）；

b)從患者那里采集的標(biāo)本；

c)采集容器和包裝的選擇（例如收集管，冷卻箱，用于存儲(chǔ)和運(yùn)輸?shù)南洌?

d)穩(wěn)定程序的選擇（例如為穩(wěn)定樣品而添加的任何化合物）;

e)對(duì)標(biāo)本的任何添加或處理行為的記錄；

f)標(biāo)本類型、數(shù)量以及描述的記錄。

設(shè)施、運(yùn)輸和處理的安全要求應(yīng)遵守GB/T22576.1、GB19781的要求。WHO關(guān)于傳染性物質(zhì)和診斷

標(biāo)本安全運(yùn)送準(zhǔn)則[14]的要求也宜遵循。

5尿液

5.1實(shí)驗(yàn)室外

5.1.1尿液采集

通則

標(biāo)本的采集要求應(yīng)根據(jù)擬實(shí)施的分子檢驗(yàn)需求（如疾病類型、收集的尿量）而定。

可參見GB/T22576.1要求。

標(biāo)本供體/患者信息

記錄應(yīng)包括標(biāo)本供體/患者的身份信息，可以用編碼表示。

記錄宜包括但不限于下述信息：

a)尿液供體的健康狀況和相關(guān)的生活方式情況（例如健康狀況、患病類型、并發(fā)疾病）；

b)人口統(tǒng)計(jì)學(xué)信息（例如年齡，性別）；

c)藥物治療和尿液采集前任何診療的信息（如麻醉劑、藥物、診斷程序）；

d)標(biāo)本采集時(shí)間，包括標(biāo)本采集前禁食及活動(dòng)等信息。

e)標(biāo)本供體/患者的知情同意。

標(biāo)本采集容器的選擇和標(biāo)示

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)規(guī)定其尿液標(biāo)本采集的容器。

由于容器中添加劑可能會(huì)干擾分析，通常使用不含有添加劑的采尿管。如果因?yàn)槟承┰虼_實(shí)需

要添加，則應(yīng)分析添加劑對(duì)分析性能和結(jié)果的影響。采尿管中的某些添加劑可能對(duì)患者構(gòu)成風(fēng)險(xiǎn)（例如

毒性或腐蝕性）。

應(yīng)使用常規(guī)程序（可參見GB/T22576.1）或帶有附加信息的程序（如二維碼）標(biāo)示采尿管（標(biāo)本識(shí)

別）。

尿液標(biāo)本的采集和接收

.1通則

4

應(yīng)向標(biāo)本供體提供采集尿液標(biāo)本的指導(dǎo)說明，包括在使用含有有害添加劑的收集容器時(shí)必須采取的

安全措施。宜檢查所有尿液采集裝置與代謝組學(xué)的兼容性，比如避免尿液采集裝置對(duì)代謝組學(xué)圖譜的任

何干擾。

注：對(duì)于未經(jīng)如廁訓(xùn)練的兒童，最常用的非侵入性方法是使用清潔收集法，并且英國(guó)國(guó)家衛(wèi)生與臨床優(yōu)化研究所

（NationalInstituteforHealthandClinicalExcellence，NICE）于2007年將其定義為金標(biāo)準(zhǔn)。該法主要是通過將無

菌標(biāo)本瓶放置在尿流中來收集樣品。尿液收集袋和尿液收集墊也可用于采集尿液。NICE建議將尿液收集墊作為

清潔收集法的下一個(gè)最佳選擇。

早晨的首次中段尿宜在至少禁食8小時(shí)后進(jìn)行采集。飲酒會(huì)影響尿液中代謝產(chǎn)物的濃度。這一點(diǎn)需

要規(guī)范化。是在不同時(shí)間采集尿液還是進(jìn)行24小時(shí)尿液采集需明確說明。對(duì)規(guī)定操作的任何變更均應(yīng)得

到確認(rèn)。禁食后進(jìn)行的尿液代謝組學(xué)分析可以更同步反映標(biāo)本供體的代謝狀況。研究或特定的分析檢測(cè)

可能需要不同的患者情況。

應(yīng)根據(jù)分析前準(zhǔn)備步驟和分析檢測(cè)的要求采集足夠量的尿液標(biāo)本。

應(yīng)記錄任何影響標(biāo)本采集的臨床程序。

采集的總量也應(yīng)記錄。

.2尿液標(biāo)本信息及在尿液采集地點(diǎn)的貯存要求

由于尿液采集后代謝譜可能發(fā)生變化，從而影響分析結(jié)果的有效性和可靠性，因此原始尿液標(biāo)本上

應(yīng)標(biāo)示尿液采集的日期和時(shí)間。

尿液標(biāo)本宜在2℃至8℃下冷藏至多2小時(shí)，且不應(yīng)在離心和/或過濾之前進(jìn)行冷凍，以避免形成冰

晶破壞細(xì)胞，除非檢測(cè)中另有規(guī)定。

尿液標(biāo)本允許的總貯存時(shí)間包括標(biāo)本在采集點(diǎn)貯存時(shí)間、運(yùn)輸?shù)綑z測(cè)實(shí)驗(yàn)室的時(shí)間以及在檢測(cè)實(shí)驗(yàn)

室或其他機(jī)構(gòu)進(jìn)一步貯存的時(shí)間。

5.1.2運(yùn)輸要求

運(yùn)輸過程中，宜將尿液標(biāo)本在低溫環(huán)境中保存（溫度范圍為2℃~8℃）。

應(yīng)采取適當(dāng)措施以確保運(yùn)輸過程中溫度始終滿足要求并減少標(biāo)本傳送時(shí)間。宜在標(biāo)本采集后2小時(shí)

內(nèi)完成運(yùn)輸。

應(yīng)記錄標(biāo)本運(yùn)輸過程與規(guī)定的符合情況。任何偏離規(guī)定的情況都應(yīng)予以描述和記錄。

宜遵循世界衛(wèi)生組織頒布的《傳染性物質(zhì)和診斷標(biāo)本安全運(yùn)輸指南》[14]。

5.2實(shí)驗(yàn)室內(nèi)

5.2.1標(biāo)本接收

應(yīng)記錄尿液標(biāo)本的接收時(shí)間和情況（如標(biāo)簽、運(yùn)輸條件、體積、泄漏和沉淀）。標(biāo)簽、運(yùn)輸條件、

尿液體積與尿液采集或樣本制備要求中不一致的地方也應(yīng)予以記錄。

如果標(biāo)本運(yùn)輸條件、總貯存時(shí)間、運(yùn)輸時(shí)間或尿液采集量不符合要求，可能影響分析檢測(cè)結(jié)果的有

效性和可靠性[7][8][9]，則宜重新采集標(biāo)本。

如果分析檢測(cè)需要，宜評(píng)估標(biāo)本的特性（如pH值、肌酐濃度、血液和/或細(xì)菌污染情況）。

5.2.2貯存要求

應(yīng)記錄從接收標(biāo)本到處理標(biāo)本之間的時(shí)間間隔以及標(biāo)本的貯存溫度。

貯存溫度宜符合.2的規(guī)定。

尿液標(biāo)本的總貯存時(shí)間應(yīng)包括在尿液采集地點(diǎn)的貯存時(shí)間（見.2），運(yùn)輸?shù)綄?shí)驗(yàn)室的時(shí)間（見

5.1.2）以及在實(shí)驗(yàn)室或其他機(jī)構(gòu)的進(jìn)一步貯存時(shí)間。

5

一些檢驗(yàn)需要特殊的尿液貯存/庫(kù)存條件。應(yīng)遵循制造商/提供者的說明。應(yīng)采取適當(dāng)措施以確保

符合溫度要求。

5.2.3尿液樣品處理

先離心（推薦：2℃~8℃，1000g~3000g離心5分鐘），然后過濾（如使用0.20μm過濾器）以去除

顆粒物和細(xì)胞。

也可以只進(jìn)行過濾，并記錄。

應(yīng)證明過濾器的材料和裝置既不吸收也不釋放代謝物或干擾代謝組學(xué)分析。

注：為避免因細(xì)胞破裂而導(dǎo)致的標(biāo)本污染，上述離心/過濾操作十分重要[7][8][9]。

其他替代處理程序應(yīng)在確認(rèn)后方可使用。

5.2.4尿液樣品的長(zhǎng)期貯存要求

應(yīng)記錄樣品接收、樣品處理和處理后樣品的冷凍等步驟之間的溫度和耗時(shí)。

如果處理后的樣品打算冷凍保存，則宜先對(duì)其對(duì)代謝組學(xué)分析的影響進(jìn)行確認(rèn)。經(jīng)過處理的樣品宜

根據(jù)滿足代謝組學(xué)分析所需的體積等分保存到凍存瓶中。最小分裝體積根據(jù)分析檢測(cè)需求來確定。應(yīng)檢

測(cè)樣品瓶性質(zhì)以避免樣品污染（如鄰苯二甲酸酯類增塑劑帶來的污染）。

樣品宜按照5.2.3的要求去除細(xì)胞后方可冷凍?？刹捎贸绦蛐跃徛禍?，來控制冷卻速率，對(duì)樣品進(jìn)

行冷凍處理。

如果嚴(yán)格遵守離心/過濾程序（參見5.2.3要求），于-70℃條件下貯存的樣品，至少5年內(nèi)，仍可滿

足基于NMR的代謝組學(xué)分析對(duì)樣品穩(wěn)定性的要求[9]。

如果基于MS分析非常規(guī)代謝產(chǎn)物，則在沒有具體建議的情況下，建議低于-130℃的溫度貯存樣品

以確保更長(zhǎng)的穩(wěn)定性[15]。對(duì)于特定的代謝物，宜檢查其長(zhǎng)期穩(wěn)定性。

5.2.5尿液復(fù)融

建議在冰上復(fù)融尿液樣品。應(yīng)記錄復(fù)融時(shí)間及復(fù)融后直至分析前的時(shí)間。

復(fù)融程序和復(fù)融后直到后續(xù)分析前的持續(xù)時(shí)間應(yīng)經(jīng)過確認(rèn)。

6血液

6.1實(shí)驗(yàn)室外

6.1.1原始樣品采集

通則

標(biāo)本的采集要求應(yīng)根據(jù)擬實(shí)施的分子檢驗(yàn)需求（如疾病類型、采集血量）而定。

可參見GB/T22576.1要求。

標(biāo)本供體/患者信息

記錄應(yīng)包括標(biāo)本供體/患者的身份信息，可以用編碼表示。

記錄宜包括但不限于下述信息：

a)血液供體的健康狀況和生活方式情況（例如是否健康、患病類型、并發(fā)疾病）；

b)人口統(tǒng)計(jì)學(xué)信息（例如年齡，性別）；

6

c)血液采集前血液供體所接受的任何診療的信息（如麻醉劑、藥物、診斷程序）；

d)標(biāo)本采集時(shí)間，包括標(biāo)本采集前禁食及活動(dòng)情況。

e)標(biāo)本供體/患者的知情同意。

采血管的選擇

應(yīng)選擇可抽取足夠量靜脈血的采血管。采血管的大小取決于執(zhí)行分析前和分析程序所需的靜脈血量。

應(yīng)根據(jù)后續(xù)代謝譜分析的需求選擇適用于采集血漿或采集血清的特定采血管。

對(duì)于血漿，可以選擇EDTA、氟化鈉或檸檬酸鈉用作抗凝劑。EDTA是基于NMR的代謝組學(xué)以及大

多數(shù)基于MS研究的首選方法[2][7][9]。在基于NMR的代謝組學(xué)中，使用肝素管會(huì)對(duì)分析結(jié)果產(chǎn)生影響。

在基于NMR分析肝素管采集的血漿樣品時(shí)，盡管圖譜未發(fā)生顯著改變，但肝素信號(hào)可能會(huì)使其他信號(hào)

共振復(fù)雜化，包括脂蛋白亞類的共振。同樣地，使用高分子量的分子（如肝素）可能會(huì)影響基于MS的

分析。因此，宜選擇不影響后續(xù)分析的抗凝劑進(jìn)行采樣。

常用的采樣管還可以包含其他添加劑，例如采集血清時(shí)采用的促凝劑，或有利于促進(jìn)血漿/血清與

細(xì)胞成分分離的聚合物凝膠（分離膠）。

應(yīng)記錄抗凝劑和任何其他添加劑的使用情況，因?yàn)樗鼈兛赡軙?huì)干擾檢測(cè)（示例參見附件A）[9][16]。

標(biāo)本供體的血液采集

采集患者血液標(biāo)本進(jìn)行代謝組學(xué)研究，應(yīng)符合下列要求。

a)應(yīng)按GB/T22576.1要求記錄采樣時(shí)間。

b)應(yīng)使用常規(guī)程序（可參見GB/T22576.1）或帶有附加信息的程序（如二維碼）標(biāo)示采血管（標(biāo)

本識(shí)別）。

c)宜在禁食至少8小時(shí)后進(jìn)行采血。若需在其他情況或非空腹情況下采血，則說明情況并做好

記錄。

d)應(yīng)使用標(biāo)準(zhǔn)的靜脈穿刺技術(shù)進(jìn)行采血?？梢圆扇”匾拇胧┓乐狗戳靼l(fā)生。應(yīng)根據(jù)采血管說

明書中建議的采血技術(shù)進(jìn)行采血。在某些情況下，可以采用其它技術(shù)。

e)應(yīng)根據(jù)采血管說明書進(jìn)行采血，并應(yīng)注意在抽血過程中采血管的正確位置以及所需血量。

f)應(yīng)根據(jù)采血管說明書中關(guān)于在采血后立即混合或倒置試管的說明進(jìn)行操作。

應(yīng)證明采血管既不會(huì)吸收也不會(huì)釋放代謝物從而不會(huì)干擾代謝組學(xué)分析。

注：若未將添加劑與血樣混合均勻，則可能會(huì)發(fā)生影響代謝譜的情況，從而影響分析檢測(cè)結(jié)果的有效性和可靠性。

血液標(biāo)本的預(yù)處理

血液標(biāo)本的記錄應(yīng)包括采血時(shí)間。

（如果樣本保存在室溫下）應(yīng)在血液標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)開始處理（見6.2.2）[9]。如果采血管說

明書中規(guī)定了其它時(shí)間，則宜對(duì)該時(shí)間做好記錄。

如果分析特定代謝物，且處理方式經(jīng)過確認(rèn)，則也可以在更長(zhǎng)時(shí)間范圍內(nèi)操作。

應(yīng)確認(rèn)并記錄標(biāo)本預(yù)處理的所有操作。

6.1.2預(yù)處理過的樣本運(yùn)輸至實(shí)驗(yàn)室

如果在采血點(diǎn)未處理原始血樣，則應(yīng)按照（）的規(guī)定對(duì)血液標(biāo)本進(jìn)行運(yùn)輸和確認(rèn)。

宜在對(duì)氣動(dòng)管道傳輸系統(tǒng)進(jìn)行性能確認(rèn)后再行使用，因?yàn)樵撓到y(tǒng)中高加速/減速力會(huì)影響標(biāo)本質(zhì)量

[17]。

應(yīng)采取適當(dāng)措施以確保運(yùn)輸溫度符合要求，并盡量縮短標(biāo)本運(yùn)輸時(shí)間。

6.2實(shí)驗(yàn)室內(nèi)

7

6.2.1標(biāo)本接收

應(yīng)記錄血液標(biāo)本的接收時(shí)間和情況（如標(biāo)簽、運(yùn)輸條件、血量、是否發(fā)生泄漏/破碎管）。標(biāo)簽、

運(yùn)輸條件、血量與血液標(biāo)本采集或制備與規(guī)定不一致的地方也應(yīng)予以記錄。

如果運(yùn)輸條件、總貯存時(shí)間、運(yùn)輸時(shí)間或血量不符合規(guī)定，可能影響分析檢測(cè)結(jié)果的有效性和可靠

性[7][8][9]，則宜重新采集標(biāo)本。

6.2.2樣品處理

（室溫下）宜在血液標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)開始處理標(biāo)本標(biāo)本（參見）。應(yīng)根據(jù)規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)流

程制備血清和血漿標(biāo)本。為盡可能去除可循環(huán)的細(xì)胞污染物，可針對(duì)血漿標(biāo)本采用特定制備方法。

注1：這種方法的一個(gè)示例是采用兩步離心法。第二次離心通常是超速離心。

宜考察標(biāo)本制備過程中所遵循的規(guī)定流程產(chǎn)生的影響并確認(rèn)應(yīng)采取的標(biāo)本制備流程。

注2：采用超速離心會(huì)造成如脂蛋白譜顯著改變等變化，從而顯著影響基于NMR代謝組的結(jié)果。

制備血清標(biāo)本，應(yīng)先將血液在室溫下放置約30分鐘，待血液凝固后方可離心進(jìn)行制備。若血液凝固

發(fā)生異常，宜加注說明。

如果打算將處理后的樣品冷凍保存（參見6.2.4），宜根據(jù)滿足代謝組學(xué)分析所需的體積等分保存到

凍存瓶中。最小分裝體積根據(jù)分析檢測(cè)需求確定。應(yīng)檢測(cè)樣品瓶的性質(zhì)以避免樣品污染（如鄰苯二甲酸

酯類增塑劑帶來的污染）。

6.2.3預(yù)處理過的樣本運(yùn)輸至代謝組學(xué)分析實(shí)驗(yàn)室或生物樣品庫(kù)

如果將樣品運(yùn)輸?shù)綄?shí)驗(yàn)室后即時(shí)分析，宜對(duì)運(yùn)輸條件是否符合要求進(jìn)行確認(rèn)。

如果適用，標(biāo)本宜以冷凍狀態(tài)下進(jìn)出生物樣品庫(kù)（見6.2.4）。

接收樣品后，記錄血清或血漿樣品接收時(shí)間和情況（如標(biāo)簽、運(yùn)輸條件、血量、泄漏情況）。發(fā)現(xiàn)

標(biāo)簽、運(yùn)輸條件、血量與采集管與規(guī)定不符，以及任何可能影響檢測(cè)的改變，均應(yīng)做好記錄。

如果存在運(yùn)輸條件、總貯存時(shí)間、運(yùn)輸時(shí)間不符合規(guī)定以及其它因素可能影響檢測(cè)結(jié)果有效性和可

靠性，則宜盡可能重新采樣。

宜遵循世界衛(wèi)生組織頒布的《傳染性物質(zhì)和診斷標(biāo)本安全運(yùn)輸指南》[14]。

6.2.4長(zhǎng)期貯存要求

應(yīng)記錄樣品接收、樣品處理和處理后樣品的冷凍等步驟之間的溫度和時(shí)間。

可以采用控制速率方式進(jìn)行冷凍。

如果嚴(yán)格遵守離心程序（參見6.2.2），則在-70℃下貯存可足以確保代謝組的NMR可檢測(cè)部分至少

穩(wěn)定5年[9]。

對(duì)于基于MS分析非常規(guī)代謝產(chǎn)物，，則在沒有具體建議的情況下，建議采用低于-130℃的溫度以

確保更長(zhǎng)的穩(wěn)定性[16]。對(duì)于特定的代謝物，宜檢查其長(zhǎng)期穩(wěn)定性。

6.2.5血清和血漿復(fù)融和使用

檢測(cè)標(biāo)本時(shí)，應(yīng)將標(biāo)本復(fù)融。建議將標(biāo)本置于冰上復(fù)融。應(yīng)確認(rèn)復(fù)融流程及從復(fù)融至開始進(jìn)行后續(xù)

分析前的耗時(shí)。

8

A

A

附錄A

（資料性）

代謝組的不穩(wěn)定性

A.1通則

據(jù)文獻(xiàn)可知，離體生物體液的代謝組穩(wěn)定性有兩個(gè)主要的關(guān)鍵方面：

a)由于細(xì)胞的存在而引起的采集后改變，主要與酶促反應(yīng)有關(guān)。

b)在小分子和溶解氧的復(fù)雜混合物中發(fā)生的化學(xué)反應(yīng)，導(dǎo)致采集后的改變。

在這里，我們提供了觀察到的尿液和血清/血漿中組分改變的示例，這些示例可以用作評(píng)估內(nèi)部程

序的工具。

A.2尿液

a)由于細(xì)胞的存在而引起的采集后變化。

收集了三個(gè)具有不同細(xì)胞含量的尿樣（1-非常高；2-中；3低），分成2個(gè)等分試樣品，其中一個(gè)

（標(biāo)記為R）正常進(jìn)行分析，將另一個(gè)（標(biāo)記為P）則在分析之前進(jìn)行溫和離心。細(xì)胞含量可通過

對(duì)P樣品進(jìn)行溫和預(yù)離心后的沉淀物進(jìn)行目測(cè)來估算。

通過獲取樣品在采集后不同時(shí)間點(diǎn)（0小時(shí)、1小時(shí)、2小時(shí)、4小時(shí)、6小時(shí)、8小時(shí)）的NMR譜圖

（600MHz，300K下的1HNOESY實(shí)驗(yàn)），監(jiān)測(cè)P和R尿液中代謝組隨時(shí)間的穩(wěn)定性，最長(zhǎng)時(shí)間點(diǎn)為20至

24小時(shí)，用過夜（ON，overnight）表示（見圖A.1）。在兩次核磁譜采集之間的時(shí)間段，樣品需保存在4℃。

與原始代謝組的偏差是通過每個(gè)時(shí)間點(diǎn)獲得的譜圖與0時(shí)間點(diǎn)的譜圖之間的歐幾里得距離進(jìn)行評(píng)估。

兩個(gè)光譜之間的歐幾里得距離被計(jì)算為n維空間中的距離，其中n對(duì)應(yīng)于每個(gè)譜圖的點(diǎn)數(shù)。

標(biāo)引序號(hào)說明

t：時(shí)間，以小時(shí)(h)為單位

dE:歐幾里得距離

注：紅箭頭表示0時(shí)間點(diǎn)

9

圖A.1不同細(xì)胞含量的樣品代謝譜隨時(shí)間的偏差

樣品3的曲線在P和R尿液中都非常穩(wěn)定。相反，樣品2-R和1-R的輪廓與P對(duì)應(yīng)的輪廓隨著時(shí)間的推

移逐漸變得不穩(wěn)定。這些數(shù)據(jù)表明，使用溫和的離心和/或過濾去除新鮮尿液中的細(xì)胞可確保樣品的一

致性和穩(wěn)定性。該處理步驟的重要性取決于每個(gè)樣品中的細(xì)胞含量，每個(gè)患者的細(xì)胞含量都不同。細(xì)胞

數(shù)越高，觀察到的變化程度越大。應(yīng)避免在去除細(xì)胞之前凍結(jié)，以防止細(xì)胞破裂和釋放細(xì)胞內(nèi)內(nèi)容物。

b)樣品采集后由于化學(xué)反應(yīng)而發(fā)生的變化。

跟蹤預(yù)處理后尿液中代謝組的穩(wěn)定性24小時(shí)，每2小時(shí)獲取一次NMR譜圖。在兩次數(shù)據(jù)采集之間

時(shí)間段，樣品需在4℃保存。在預(yù)處理（0小時(shí)、1小時(shí)、2小時(shí)、4小時(shí)、6小時(shí)、8小時(shí)）之后的不同時(shí)

間點(diǎn)以600MHz，300K記錄1HNOESY實(shí)驗(yàn)，最長(zhǎng)時(shí)間點(diǎn)為20至24小時(shí)，以過夜（ON，overnight）表示。

標(biāo)引序號(hào)說明

藍(lán)線：t=0h

綠線：t=1h

紅線：t＝2h

橙線：t＝4h

暗紅線：t=6h

紫線：t=8h

青線：t=ON（過夜）

a琥珀酸鹽

b丙酮酸鹽

c醋酸鹽

d抗壞血酸鹽

e肌酸

δ1H：質(zhì)子化學(xué)位移，以Hz/MHz為單位（此處以Hz/MHz表示的化學(xué)位移，通常稱為ppm。）

注：箭頭指示隨時(shí)間變化的方向。

圖A.2尿液樣品中與處理階段無關(guān)的影響

10

去除細(xì)胞后，代謝譜仍可能發(fā)生一系列改變，這歸因于（酶促或非酶促的）氧化還原反應(yīng)。琥珀酸

鹽、丙酮酸鹽、醋酸鹽、抗壞血酸鹽和肌酸包含在（觀測(cè)到的）受影響最大的代謝物之中（見圖A.2）。

為了保持最敏感代謝物的含量水平，樣品在處理前宜始終放在冰上，并立即在-80℃下冷凍。由于反復(fù)

凍融可觀察到類似的改變，因此應(yīng)避免。

A.3血清/血漿Bloodserum/plasma

a)由于細(xì)胞的存在而引起的采集后改變。從5位健康供體中收集血漿-EDTA樣品。對(duì)于每個(gè)供體的

樣品，在6個(gè)時(shí)間點(diǎn)（0小時(shí)、6小時(shí)、24小時(shí)、48小時(shí)、72小時(shí)和144小時(shí)）進(jìn)行處理。在處理之

前，將樣品保存在室溫下。處理后的樣品立即冷凍并在分析前解凍。進(jìn)行600MHz，310K的1HNOESY

實(shí)驗(yàn)。代謝物水平的變化是通過對(duì)代表性的1HNMR信號(hào)進(jìn)行積分來確定的。

標(biāo)引序號(hào)說明

t時(shí)間，以小時(shí)為單位

I相對(duì)強(qiáng)度（任意單位）

δ1H質(zhì)子化學(xué)位移，以Hz/MHz為單位

圖A.3血漿樣品預(yù)處理后葡萄糖（左圖）和乳酸（右圖）水平的變化

在血液采集和處理之間，整體代謝組譜圖中幾種代謝物濃度發(fā)生了變化。最顯著的變化包括葡萄糖

的減少和乳酸的增加（見圖A.3），這主要?dú)w因于紅細(xì)胞的作用。因此，盡快處理樣品至關(guān)重要。

b)樣品采集后由于化學(xué)反應(yīng)而發(fā)生的改變。

追蹤血清代謝組的穩(wěn)定性12小時(shí)，每4h（0小時(shí)、4小時(shí)、8小時(shí)、12小時(shí)）獲取NMR光譜。在

兩次數(shù)據(jù)采集之間將樣品保存在4℃。在600MHz，310K條件下進(jìn)行1HNOESY實(shí)驗(yàn)。

11

標(biāo)引序號(hào)說明

紅線：0h；

青線：4h；

紫線：8h；

綠線：12h；

δ1H質(zhì)子化學(xué)位移，單位為Hz/MHz

注：箭頭表示隨時(shí)間變化的方向。

圖A.4血清樣品處理后檸檬酸根水平的變化

當(dāng)樣品在4℃下保持12小時(shí)時(shí)，檸檬酸鹽的信號(hào)完全消失(見圖A.4)。這種變化可歸因于氧化還原反

應(yīng)。在獲得血清后立即在-80℃凍存足以淬滅該反應(yīng)。因此，這些結(jié)果表明，血液處理后，產(chǎn)生的血清

和血漿樣本應(yīng)立即凍存，以避免這種變化。

在反復(fù)凍融循環(huán)的結(jié)果中也觀察到樣品受類似的影響，因此應(yīng)加以避免。

A.4采集管和塑料制品的選擇

選擇合適的采集管會(huì)影響下游分析測(cè)量的結(jié)果。例如，真空管可以包含添加劑，例如抗凝劑（EDTA，

檸檬酸鈉，肝素）或聚合物凝膠（分離膠），可促進(jìn)血漿/血清與細(xì)胞成分的分離。就分析結(jié)果而言，

它們的存在不是“中立的”。

例如，對(duì)以檸檬酸鈉為抗凝劑、以多糖為細(xì)胞分離劑的血漿樣品和裝有抗凝劑和細(xì)胞分離基質(zhì)的市

售試管中添加有血漿常規(guī)分析用緩沖液的空白樣品，均獲取1HNOESY光譜（600MHz，310K）（見圖

A.5）。

12

標(biāo)引序號(hào)說明

上部綠線：檸檬酸鈉，F(xiàn)icoll?Hypaque?溶液中的血漿樣品，在磷酸鹽NMR緩沖液中

底部黑線：磷酸鹽NMR緩沖液已添加到檸檬酸鹽Ficoll?Hypaque?溶液管中

δ1H：質(zhì)子化學(xué)位移，以Hz/MHz為單位

圖A.5在血漿檸檬酸鹽，F(xiàn)icoll?Hypaque?溶液中獲得的1HNMR光譜1)

這表明宜避免使用分離介質(zhì)來采集血漿，因?yàn)樗鼤?huì)引入許多新的干擾信號(hào)，其中一些信號(hào)豐度非常

強(qiáng)且具有不同的線寬，從而嚴(yán)重降低了可用譜峰面積和可用于后續(xù)分析的代謝物的數(shù)量。在實(shí)踐中，

由于添加劑的強(qiáng)信號(hào)的掩蓋，會(huì)使得幾乎30％的有效譜圖區(qū)域變得無用。因此需要使用適當(dāng)?shù)牟杉埽?/p>

以避免其干擾分析方法。不同采集管的可行性應(yīng)參照所選的分析平臺(tái)進(jìn)行檢查。

在整個(gè)分析前工作流程中使用的塑料制品也會(huì)將污染物釋放到樣品中。通常，宜在在使用前對(duì)所

有材料進(jìn)行確認(rèn)。

始終運(yùn)行一些在工作流程中被使用物料的空白樣本。

1)Ficoll?和Hypaque?是可商購(gòu)的合適產(chǎn)品的示例。提供此信息是為了方便本文檔的用戶，并不構(gòu)成ISO對(duì)這些產(chǎn)品的認(rèn)可。

13

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14

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

本文件等同采用ISO23118:2021《分子體外診斷檢驗(yàn)?zāi)蛞海o脈血清和血漿代謝組學(xué)檢驗(yàn)前處理

的規(guī)范》。

請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。

本文件由國(guó)家藥品監(jiān)督管理局提出。

本文件由全國(guó)醫(yī)用臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室和體外診斷系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)（SAC/TC136）歸口。

本文件起草單位：XXXXX

本文件主要起草人：XXXXX

I

分子體外診斷檢驗(yàn)?zāi)蛞海o脈血清和血漿代謝組學(xué)檢驗(yàn)前處理的

規(guī)范

1范圍

本文件對(duì)擬用于代謝組學(xué)分析的尿液、靜脈血血漿和血清的標(biāo)本處理、記錄和加工等檢驗(yàn)前處理規(guī)

范提出了要求和建議。本文件適用于代謝組學(xué)檢測(cè)，可供生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室、實(shí)驗(yàn)室客戶、體外診斷開發(fā)

商和生產(chǎn)商、從事生物醫(yī)學(xué)研究的機(jī)構(gòu)和公司、生物樣品庫(kù)和監(jiān)管部門使用。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB/T22576.1—2018醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力的要求第1部分通用要求；

GB19781醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室安全要求

3術(shù)語和定義

ISO15189界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。

ISO以及IEC用于標(biāo)準(zhǔn)化的術(shù)語數(shù)據(jù)庫(kù)維護(hù)在如下網(wǎng)址：

—ISO在線瀏覽平臺(tái):https://www.iso.org/obp

—IEC電子百科:http://www.electropedia.org/

3.1

生物體液biofluid

可排出(如尿液或汗液)、分泌(如母乳、唾液或膽汁)、通過取樣針頭獲取(如血液或腦脊液)、或由于

病理過程而產(chǎn)生(如水泡或囊腫液)的生物液體。

3.2

檢驗(yàn)examination

以確定一個(gè)特性的值或特征為目標(biāo)的一組操作。

注1：從分離的分析物開始并包括各種用于定性或定量檢驗(yàn)的參數(shù)測(cè)試或化學(xué)操作的過程。

注2：對(duì)于代謝組分析，分析物的分離不是必需的。

[來源：ISO20166-1：2018，3.10；有修改，刪除原術(shù)語“分析檢測(cè)”增加注2]

3.3

1

禁食fasting

停止攝入除水之外的任何固體或液體食物至少8小時(shí)。

3.4

質(zhì)譜法massspectrometry

基于化合物的質(zhì)荷比而對(duì)其進(jìn)行分析的方法。

3.5

代謝譜分析metabolicprofiling

利用分析平臺(tái)同時(shí)測(cè)量生物體系中的代謝物成分集合，這些代謝物可通過所使用（或所選定的）技

術(shù)來進(jìn)行測(cè)量。

示例：相關(guān)的測(cè)量技術(shù)如核磁共振波譜和質(zhì)譜。

3.6

代謝物metabolites

宿主生物體、微生物群落的小分子代謝中間產(chǎn)物和/或終產(chǎn)物（≤2000Da），它們來自于食物、飲

料、藥物或污染物。

注：更多信息參見參考文獻(xiàn)[1]。

3.7

代謝組metabolome

在生物體或生物樣品中發(fā)現(xiàn)的完整的代謝物集合。

注：更多信息參見參考文獻(xiàn)。

3.8

代謝組學(xué)metabolomics

代謝物組學(xué)

對(duì)生物標(biāo)品（如生物體、細(xì)胞、組織或生物體液）代謝組的全面分析。

3.9

基于質(zhì)譜的代謝組學(xué)MS-basedmetabolomics

利用質(zhì)譜法測(cè)量生物樣品中的代謝物

3.10

核磁共振波譜法nuclearmagneticresonancespectroscopy

NMR

基于在固定磁場(chǎng)作用下原子核對(duì)射頻輻射選擇性吸收的原理的一種方法。

注：NMR提供分子的化學(xué)和結(jié)構(gòu)性質(zhì)。

3.11

基于核磁共振的代謝組學(xué)NMR-basedmetabolomics

useofNMRspectroscopy(3.10)tomeasuremetabolites(3.6)inbiologicalsamples

利用核磁共振波譜法測(cè)量生物樣品中的代謝物。

2

3.12

血漿plasma

未凝固血液的液體部分。

注：血漿樣本可含有抗凝劑。

3.13

檢驗(yàn)前過程pre-examinationprocess

分析前階段preanalyticalphase

分析前工作流程preanalyticalworkflow

按時(shí)間順序從臨床醫(yī)生的申請(qǐng)開始，包括檢驗(yàn)(3.2)申請(qǐng)、病人的準(zhǔn)備和身份識(shí)別、原始樣品的采集、

臨時(shí)貯存、在分析實(shí)驗(yàn)室內(nèi)和實(shí)驗(yàn)室間進(jìn)行運(yùn)輸、分裝、檢索。

注：分析前階段包括影響預(yù)期檢驗(yàn)(3.2)結(jié)果的準(zhǔn)備流程。

[來源：GB/T22576.1-2018，3.15，有修改——“分析前工作流程”被添加為首選術(shù)語，添加了更

多細(xì)節(jié)](ISO15189:2012，IDT)

3.14

原始樣品primarysample

標(biāo)本specimen

為檢驗(yàn)、研究或分析一種或多種量或特性而取出的認(rèn)為可代表全部的一獨(dú)立部分的體液、呼出氣、

頭發(fā)或組織。

[來源：GB/T22576.1-2018，3.16，刪除原注釋。](ISO15189:2012，IDT)

3.15

室溫roomtemperature

本文件中是指18℃~25℃。

3.16

血清serum

可以從凝固的血液中分離出來的液體。

3.17

穩(wěn)定性stability

標(biāo)準(zhǔn)樣品在規(guī)定條件下貯存時(shí)的特性，其某個(gè)規(guī)定特性值在規(guī)定時(shí)間內(nèi)保持在規(guī)定限制范圍內(nèi)。

[來源：GB/T15000.2-2019,2.1.15；刪去原注]（ISOGuide30:2015，IDT）

4總體要求

有關(guān)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理體系的一般說明，特別是關(guān)于標(biāo)本收集、接收和處理（包括避免交叉污染）

的一般說明，可參見GB/T22576.1或GB/T27020。對(duì)實(shí)驗(yàn)室設(shè)備、試劑和消耗品的要求應(yīng)遵循GB/T

22576.1及GB/T27020的相關(guān)要求也能適用。

診斷工作流程的所有步驟都可能影響最終的分析測(cè)試結(jié)果，應(yīng)對(duì)其進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估（參見GB/T42062）。

針對(duì)已確定的風(fēng)險(xiǎn)，應(yīng)針對(duì)需要之處建立緩解措施進(jìn)行消除或減少，以保證檢驗(yàn)的性能表現(xiàn)。尤其應(yīng)研

究并確保待測(cè)代謝物不會(huì)因?yàn)槿魏斡绊憴z測(cè)結(jié)果的行為而發(fā)生變化?？梢酝ㄟ^如下方式做到這一點(diǎn)，例

3

如，對(duì)標(biāo)本/樣品的檢測(cè)前步驟進(jìn)行逐一的時(shí)間曲線分析（比如運(yùn)輸和儲(chǔ)存），然后識(shí)別出這些分析前

變量對(duì)相應(yīng)檢測(cè)造成的影響，并采取措施防止或減少這些影響。

在沒有合適的標(biāo)本穩(wěn)定技術(shù)的情況下，代謝組學(xué)的標(biāo)本采集應(yīng)在具備即時(shí)可用的合適的生物體液處

理程序的醫(yī)院場(chǎng)所或機(jī)構(gòu)進(jìn)行。

對(duì)于擬進(jìn)行代謝組學(xué)分析的樣本，以下事項(xiàng)應(yīng)考慮到：

a)患者的預(yù)處理（禁食，治療等）；

b)從患者那里采集的標(biāo)本；

c)采集容器和包裝的選擇（例如收集管，冷卻箱，用于存儲(chǔ)和運(yùn)輸?shù)南洌?

d)穩(wěn)定程序的選擇（例如為穩(wěn)定樣品而添加的任何化合物）;

e)對(duì)標(biāo)本的任何添加或處理行為的記錄；

f)標(biāo)本類型、數(shù)量以及描述的記錄。

設(shè)施、運(yùn)輸和處理的安全要求應(yīng)遵守GB/T22576.1、GB19781的要求。WHO關(guān)于傳染性物質(zhì)和診斷

標(biāo)本安全運(yùn)送準(zhǔn)則[14]的要求也宜遵循。

5尿液

5.1實(shí)驗(yàn)室外

5.1.1尿液采集

通則

標(biāo)本的采集要求應(yīng)根據(jù)擬實(shí)施的分子檢驗(yàn)需求（如疾病類型、收集的尿量）而定。

可參見GB/T22576.1要求。

標(biāo)本供體/患者信息

記錄應(yīng)包括標(biāo)本供體/患者的身份信息，可以用編碼表示。

記錄宜包括但不限于下述信息：

a)尿液供體的健康狀況和相關(guān)的生活方式情況（例如健康狀況、患病類型、并發(fā)疾?。?；

b)人口統(tǒng)計(jì)學(xué)信息（例如年齡，性別）；

c)藥物治療和尿液采集前任何診療的信息（如麻醉劑、藥物、診斷程序）；

d)標(biāo)本采集時(shí)間，包括標(biāo)本采集前禁食及活動(dòng)等信息。

e)標(biāo)本供體/患者的知情同意。

標(biāo)本采集容器的選擇和標(biāo)示

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)規(guī)定其尿液標(biāo)本采集的容器。

由于容器中添加劑可能會(huì)干擾分析，通常使用不含有添加劑的采尿管。如果因?yàn)槟承┰虼_實(shí)需

要添加，則應(yīng)分析添加劑對(duì)分析性能和結(jié)果的影響。采尿管中的某些添加劑可能對(duì)患者構(gòu)成風(fēng)險(xiǎn)（例如

毒性或腐蝕性）。

應(yīng)使用常規(guī)程序（可參見GB/T22576.1）或帶有附加信息的程序（如二維碼）標(biāo)示采尿管（標(biāo)本識(shí)

別）。

尿液標(biāo)本的采集和接收

.1通則

4

應(yīng)向標(biāo)本供體提供采集尿液標(biāo)本的指導(dǎo)說明，包括在使用含有有害添加劑的收集容器時(shí)必須采取的

安全措施。宜檢查所有尿液采集裝置與代謝組學(xué)的兼容性，比如避免尿液采集裝置對(duì)代謝組學(xué)圖譜的任

何干擾。

注：對(duì)于未經(jīng)如廁訓(xùn)練的兒童，最常用的非侵入性方法是使用清潔收集法，并且英國(guó)國(guó)家衛(wèi)生與臨床優(yōu)化研究所

（NationalInstituteforHealthandClinicalExcellence，NICE）于2007年將其定義為金標(biāo)準(zhǔn)。該法主要是通過將無

菌標(biāo)本瓶放置在尿流中來收集樣品。尿液收集袋和尿液收集墊也可用于采集尿液。NICE建議將尿液收集墊作為

清潔收集法的下一個(gè)最佳選擇。

早晨的首次中段尿宜在至少禁食8小時(shí)后進(jìn)行采集。飲酒會(huì)影響尿液中代謝產(chǎn)物的濃度。這一點(diǎn)需

要規(guī)范化。是在不同時(shí)間采集尿液還是進(jìn)行24小時(shí)尿液采集需明確說明。對(duì)規(guī)定操作的任何變更均應(yīng)得

到確認(rèn)。禁食后進(jìn)行的尿液代謝組學(xué)分析可以更同步反映標(biāo)本供體的代謝狀況。研究或特定的分析檢測(cè)

可能需要不同的患者情況。

應(yīng)根據(jù)分析前準(zhǔn)備步驟和分析檢測(cè)的要求采集足夠量的尿液標(biāo)本。

應(yīng)記錄任何影響標(biāo)本采集的臨床程序。

采集的總量也應(yīng)記錄。

.2尿液標(biāo)本信息及在尿液采集地點(diǎn)的貯存要求

由于尿液采集后代謝譜可能發(fā)生變化，從而影響分析結(jié)果的有效性和可靠性，因此原始尿液標(biāo)本上

應(yīng)標(biāo)示尿液采集的日期和時(shí)間。

尿液標(biāo)本宜在2℃至8℃下冷藏至多2小時(shí)，且不應(yīng)在離心和/或過濾之前進(jìn)行冷凍，以避免形成冰

晶破壞細(xì)胞，除非檢測(cè)中另有規(guī)定。

尿液標(biāo)本允許的總貯存時(shí)間包括標(biāo)本在采集點(diǎn)貯存時(shí)間、運(yùn)輸?shù)綑z測(cè)實(shí)驗(yàn)室的時(shí)間以及在檢測(cè)實(shí)驗(yàn)

室或其他機(jī)構(gòu)進(jìn)一步貯存的時(shí)間。

5.1.2運(yùn)輸要求

運(yùn)輸過程中，宜將尿液標(biāo)本在低溫環(huán)境中保存（溫度范圍為2℃~8℃）。

應(yīng)采取適當(dāng)措施以確保運(yùn)輸過程中溫度始終滿足要求并減少標(biāo)本傳送時(shí)間。宜在標(biāo)本采集后2小時(shí)

內(nèi)完成運(yùn)輸。

應(yīng)記錄標(biāo)本運(yùn)輸過程與規(guī)定的符合情況。任何偏離規(guī)定的情況都應(yīng)予以描述和記錄。

宜遵循世界衛(wèi)生組織頒布的《傳染性物質(zhì)和診斷標(biāo)本安全運(yùn)輸指南》[14]。

5.2實(shí)驗(yàn)室內(nèi)

5.2.1標(biāo)本接收

應(yīng)記錄尿液標(biāo)本的接收時(shí)間和情況（如標(biāo)簽、運(yùn)輸條件、體積、泄漏和沉淀）。標(biāo)簽、運(yùn)輸條件、

尿液體積與尿液采集或樣本制備要求中不一致的地方也應(yīng)予以記錄。

如果標(biāo)本運(yùn)輸條件、總貯存時(shí)間、運(yùn)輸時(shí)間或尿液采集量不符合要求，可能影響分析檢測(cè)結(jié)果的有

效性和可靠性[7][8][9]，則宜重新采集標(biāo)本。

如果分析檢測(cè)需要，宜評(píng)估標(biāo)本的特性（如pH值、肌酐濃度、血液和/或細(xì)菌污染情況）。

5.2.2貯存要求

應(yīng)記錄從接收標(biāo)本到處理標(biāo)本之間的時(shí)間間隔以及標(biāo)本的貯存溫度。

貯存溫度宜符合.