土壤總磷有機(jī)磷無機(jī)磷含量測定試劑盒說明書

第第頁土壤總磷/有機(jī)磷/無機(jī)磷含量測定試劑盒說明書土壤總磷/有機(jī)磷/無機(jī)磷含量測定試劑盒說明書微量法100T/96S注意：正式測定之前選擇23個預(yù)期差別大的樣本做猜測定。測定意義：土壤總磷包含有機(jī)磷和無機(jī)磷，其中無機(jī)磷能夠直接被植物利用。土壤有機(jī)磷經(jīng)過礦化分解而轉(zhuǎn)化為無機(jī)磷。同時測定土壤總磷、有機(jī)磷和無機(jī)磷，可以全面反映土壤磷營養(yǎng)情形。測定原理：利用鉬藍(lán)法定磷。取一份土樣，通過浸提法測定土壤無機(jī)磷含量；另外取一份土樣，經(jīng)高溫灼燒后，土壤有機(jī)磷轉(zhuǎn)化為無機(jī)磷，測得土壤總磷含量；總磷含量減去無機(jī)磷含量，即可計算出有機(jī)磷含量。自備儀器和用品：可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、臺式離心機(jī)、可調(diào)式水浴鍋，分析天平、可調(diào)式移液器、550℃高溫電爐、蒸餾水、100目篩子（可更?。?。試劑構(gòu)成和配制：試劑一：液體×1瓶，4℃保管。臨用前用蒸餾水稀釋10倍后再用。試劑二：液體×1瓶，4℃保管。試劑三：粉劑×1瓶，4℃避光保管。臨用前配制，加入8mL蒸餾水，充分溶解后加入4mL試劑二，混勻。標(biāo)準(zhǔn)品：液體×1支，20μmol/L無機(jī)磷標(biāo)準(zhǔn)品，4℃保管。土壤不同形態(tài)磷提?。?.無機(jī)磷：稱取通過100目篩子的風(fēng)干土樣0.01g，轉(zhuǎn)移到1mL離心管，加入1mL試劑一，震蕩混勻，然后置于45℃水浴1h，8000g，25℃離心10min，取上清液一，用于無機(jī)磷含量測定。2.總磷提?。喝⊥ㄟ^100目篩子的風(fēng)干土樣，550℃灼燒1h，冷卻后稱取約0.01g，轉(zhuǎn)移到1mL離心管，加入1mL試劑一，震蕩混勻，然后置于45℃水浴1h，8000g，25℃離心10min，取上清液二，用于總磷含量測定。測定步驟：1.分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min，調(diào)整波長到660nm，蒸餾水調(diào)零。2.打開水浴鍋，調(diào)整溫度到40℃。3.空白管：取EP管，依次加入100μL蒸餾水，100μL試劑三，混勻后置于40℃水浴保溫10min，室溫冷卻10min后于660nm測定吸光度，記為A空白管。4.標(biāo)準(zhǔn)管：取EP管，依次加入10μL標(biāo)準(zhǔn)液，90μL蒸餾水，100μL試劑三，混勻后置于40℃水浴保溫10min，室溫冷卻10min后于660nm測定吸光度，記為A標(biāo)準(zhǔn)管。5.測定管：取EP管，依次加入10μL上清液一或者上清液二，90μL蒸餾水，100μL試劑三，混勻后置于40℃水浴保溫10min，室溫冷卻10min后于660nm測定吸光度，記為A測定管。注意：空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測定一次。土壤磷含量計算：a.使用微量石英比色皿測定的計算公式如下1.土壤無機(jī)磷含量（μmol/g干重）=[C標(biāo)準(zhǔn)液×（A測定—A空白）÷（A標(biāo)準(zhǔn)—A空白）]×V總÷W=0.02×（A測定—A空白）÷（A標(biāo)準(zhǔn)—A空白）÷WC標(biāo)準(zhǔn)液：20μmol/L；W：土壤樣品質(zhì)量，g；V總：上清液一總體積，1mL=0.001L。2.土壤總磷含量（μmol/g干重）=[C標(biāo)準(zhǔn)液×（A測定—A空白）÷（A標(biāo)準(zhǔn)—A空白）]×V總÷W=0.02×（A測定—A空白）÷（A標(biāo)準(zhǔn)—A空白）÷WC標(biāo)準(zhǔn)液：20μmol/L；W：土壤樣品質(zhì)量，g；V總：上清液二總體積，1mL=0.001L。3.土壤有機(jī)磷（μmol/g干重）=土壤總磷土壤無機(jī)磷4.b.使用96孔板測定的計算公式如下1.土壤無機(jī)磷含量（μmol/g干重）=[C標(biāo)準(zhǔn)液×（A測定—A空白）÷（A標(biāo)準(zhǔn)—A空白）]×V總÷W=0.02×（A測定—A空白）÷（A標(biāo)準(zhǔn)—A空白）÷WC標(biāo)準(zhǔn)液：20μmol/L；W：土壤樣品質(zhì)量，g；V總：上清液一總體積，1mL=0.001L。2.土壤總磷含量（μmol/g干重）=[C標(biāo)準(zhǔn)液×（A測定—A空白）÷（A標(biāo)準(zhǔn)—A空白）]×V總÷W=0.02×（A測定—A空白）÷（A標(biāo)準(zhǔn)—A空白）÷WC標(biāo)準(zhǔn)液：20μmol/L；W：土壤樣品質(zhì)量，g；V總：上清液二總體積，1