《中國(guó)藥典》2010年版生物安全性檢查-國(guó)明

《中國(guó)藥典》2010年版

生物平安性檢查山東省藥品檢驗(yàn)所藥理室20山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl內(nèi)容山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl藥理及生物檢定方法修訂概況注射劑平安性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原那么 中藥生物活性測(cè)定指導(dǎo)原那么山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl藥品生物檢定概況一、藥理及生物檢定方法修訂概況生物檢定法是利用生物體包括整體、離體組織、器官、細(xì)胞和微生物等評(píng)估藥物生物活性的一種方法。它以藥物的藥理作用為根底，以生物統(tǒng)計(jì)為工具，運(yùn)用特定的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)在一定條件下比較供試品和相當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌匪a(chǎn)生的特定反響，通過(guò)等反響劑量間比例的運(yùn)算或限值劑量引起的生物反響程度，從而測(cè)定供試品的效價(jià)、生物活性或雜質(zhì)引起的毒性。

山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl藥品生物檢定概況一、藥理及生物檢定方法修訂概況體內(nèi)測(cè)定〔invivo〕以整體動(dòng)物生物體評(píng)價(jià)藥品的生物活性〔藥效、活力或毒力〕體外測(cè)定〔inbitro〕以離體器官、組織、微生物、酶和細(xì)胞〔原代細(xì)胞、傳代細(xì)胞〕為生物體，利用這些生物體評(píng)價(jià)藥品的生物活性〔藥效、活力或毒力〕山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl藥品生物檢定概況-應(yīng)用范圍一、藥理及生物檢定方法修訂概況如生化藥物：一般是從生物體別離、純化所得，如肝素鈉、魚精蛋白、促腎上腺皮質(zhì)激素。中藥：洋地黃制劑、人工麝香、水蛭等。藥品〔生化藥品、中藥〕生物制品〔疫苗、血液制品〕平安性檢查對(duì)從動(dòng)物臟器、微生物或體液等提取的，有效成分不夠確切，多組分、結(jié)構(gòu)復(fù)雜，理化方法不能有效鑒定并具有生物活性的天然生化藥物、中藥，以及有些生物技術(shù)藥物，由于空間結(jié)構(gòu)的細(xì)微變化，影響藥物的活性中心位點(diǎn)，目前質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中仍應(yīng)用生物檢定法評(píng)估藥物的生物活性。山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl藥品生物檢定概況-作用一、藥理及生物檢定方法修訂概況工藝與方法驗(yàn)證效價(jià)與活性鑒別山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl藥品生物檢定概況-作用一、藥理及生物檢定方法修訂概況工藝與方法驗(yàn)證對(duì)于新生產(chǎn)工藝、新檢測(cè)方法的改進(jìn)、變更，往往需要生物檢定來(lái)驗(yàn)證核對(duì)。中、外藥典在重組人生長(zhǎng)激素〔rhGH〕重組人胰高血糖素質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中明確規(guī)定，在生產(chǎn)研發(fā)階段，“生產(chǎn)過(guò)程中的產(chǎn)品必須用體內(nèi)生物檢定方法測(cè)定其生物效價(jià)”，直到生產(chǎn)穩(wěn)定為止。山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl藥品生物檢定概況-作用一、藥理及生物檢定方法修訂概況效價(jià)與活性當(dāng)采用理化方法測(cè)定如HPLC替代胰島素等原有的生物效價(jià)測(cè)定法時(shí)，仍需作大量的方法比對(duì)、相關(guān)性研究等工作。

定量的測(cè)定方法半定量的測(cè)定方法山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl藥品生物檢定概況-作用一、藥理及生物檢定方法修訂概況效價(jià)與活性定量的測(cè)定方法效價(jià)〔potency〕測(cè)定是生物檢定的主要內(nèi)容，它是以藥理為根底，生物統(tǒng)計(jì)為工具，運(yùn)用特定的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，利用生物體在一定條件下比較供試品與相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌匪a(chǎn)生的特定反響〔可測(cè)量、量化的生理指標(biāo)或生物藥效或毒力〕的一種定量的方法，因而被稱為定量藥理學(xué)。山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl藥品生物檢定概況-作用一、藥理及生物檢定方法修訂概況效價(jià)與活性定量的測(cè)定方法胰島素升壓素縮宮素硫酸魚精蛋白肝素洋地黃卵泡刺激素生長(zhǎng)激素黃體生成素降鈣素山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl藥品生物檢定概況-作用一、藥理及生物檢定方法修訂概況效價(jià)與活性半定量的測(cè)定方法〔活性檢查〕當(dāng)理化測(cè)定占主導(dǎo)地位，效價(jià)測(cè)定一般來(lái)講可以不必精確，可歸于活性檢查項(xiàng)，采用半定量方法，設(shè)定限值，不需精密生物統(tǒng)計(jì)，盡可能減少實(shí)驗(yàn)動(dòng)物用量或其他生物體用量；甚至只用于定性的鑒別。例如：新藥重組人胰高血糖素類多肽是治療糖尿病用藥，其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中即采用該法〔限值為小鼠血糖降低大于20%〕進(jìn)行活性檢查。山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl藥品生物檢定概況-作用一、藥理及生物檢定方法修訂概況鑒別隨著對(duì)動(dòng)物保護(hù)意識(shí)提高，對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物減少、替代、優(yōu)化〔3R：Reduction、Replacement、Refinement〕的實(shí)施，對(duì)能用理化測(cè)定的藥品，生物效價(jià)測(cè)定逐漸降為鑒別項(xiàng)的定性或半定量測(cè)定。如USP升壓素大鼠血壓升高法用于鑒別。2010年中國(guó)藥典縮宮素注射液將子宮收縮法放入鑒別項(xiàng)。一、藥理及生物檢定方法修訂概況

山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl附錄檢查法或指導(dǎo)原則增修訂情況一部二部熱原檢查法修訂修訂細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法修訂修訂異常毒性檢查法新增修訂溶血與凝聚檢查法新增新增過(guò)敏反應(yīng)檢查法新增修訂降壓物質(zhì)檢查法新增修訂生物檢定統(tǒng)計(jì)法/

修訂中藥注射劑安全性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原則修訂/

化學(xué)藥品注射劑安全性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原則/

新增中藥生物活性測(cè)定指導(dǎo)原則新增/

山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl一、藥理及生物檢定方法修訂概況附錄增修訂主要特點(diǎn)中藥質(zhì)量控制評(píng)價(jià)模式轉(zhuǎn)變充分驗(yàn)證完善提高充分體現(xiàn)了“3R”原則

山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl一、藥理及生物檢定方法修訂概況附錄增修訂主要特點(diǎn)中藥質(zhì)量控制評(píng)價(jià)模式轉(zhuǎn)變生物活性引入實(shí)現(xiàn)了中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)由單一指標(biāo)成分定性定量向活性有效成分及生物測(cè)定的綜合檢測(cè)轉(zhuǎn)變。

山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl一、藥理及生物檢定方法修訂概況附錄增修訂主要特點(diǎn)充分驗(yàn)證遵循科學(xué)性、合理性、可操作性，新建或新設(shè)立工程必須經(jīng)不同實(shí)驗(yàn)室的共同驗(yàn)證或適用性研究，如注射劑平安性指導(dǎo)原那么對(duì)方法學(xué)的適用性研究；中藥生物活性指導(dǎo)原那么要求對(duì)方法的專屬性、準(zhǔn)確性、精密度〔重復(fù)性、中間精密度、重現(xiàn)性〕、適用性、科學(xué)性進(jìn)行了研究。

山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl一、藥理及生物檢定方法修訂概況附錄增修訂主要特點(diǎn)完善提高對(duì)2010藥典一、二部檢查法和指導(dǎo)原那么進(jìn)行修訂和改進(jìn)，對(duì)影響結(jié)果準(zhǔn)確性的實(shí)驗(yàn)條件提出了要求，如熱原檢查法、溶血與凝聚、降壓物質(zhì)檢查法、過(guò)敏試驗(yàn)。

山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl一、藥理及生物檢定方法修訂概況附錄增修訂主要特點(diǎn)表達(dá)了“3R”原那么replace、reduce、refine如熱原檢查法取消家兔使用次數(shù)和體重上限規(guī)定。中藥生物活性指導(dǎo)原那么中對(duì)動(dòng)物的使用等。一、藥理及生物檢定方法修訂概況

山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl中藥生物活性測(cè)定指導(dǎo)原則化藥注射劑安全性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原則中藥注射劑安全性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原則生物檢定統(tǒng)計(jì)法降壓物質(zhì)檢查法過(guò)敏反應(yīng)檢查法溶血與凝聚檢查法異常毒性檢查法細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法熱原檢查法附錄增修訂主要內(nèi)容二、注射劑平安性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原那么-中藥 山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl中藥平安性檢查工程的設(shè)定平安性檢查方法和檢查限值確定山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl二、注射劑平安性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原那么-中藥 本指導(dǎo)原那么為中藥注射劑臨床使用的平安性和制劑質(zhì)量可控性而定。中藥注射劑平安性檢查包括：熱原〔或細(xì)菌內(nèi)毒素〕、異常毒性、降壓物質(zhì)、過(guò)敏反響物質(zhì)、溶血與凝聚等項(xiàng)。根據(jù)處方、工藝、用法及用量等設(shè)定相應(yīng)檢查工程進(jìn)行適用性研究。山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl二、注射劑平安性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原那么-中藥 中藥注射劑平安性檢查工程的設(shè)定中藥注射劑項(xiàng)目的設(shè)定備注靜脈用設(shè)熱原（或細(xì)菌內(nèi)毒素）、異常毒性、過(guò)敏反應(yīng)、溶血與凝聚等安全性檢查項(xiàng)，必要時(shí)考慮降壓物質(zhì)檢查項(xiàng)。（功能主治中具有與升壓相關(guān)內(nèi)容的注射劑除外）中藥注射劑中致熱成分復(fù)雜，可能干擾細(xì)菌內(nèi)毒素檢查，一般首選熱原檢查項(xiàng)，如該藥本身具有清熱的藥理作用或?qū)彝糜卸拘苑磻?yīng)，也可選擇細(xì)菌內(nèi)毒素檢查項(xiàng)。肌內(nèi)注射用設(shè)異常毒性、過(guò)敏反應(yīng)等檢查項(xiàng)山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl二、注射劑平安性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原那么-中藥 中藥注射劑平安性檢查方法和檢查限值確定方法適用性〔設(shè)定限值前研究〕應(yīng)進(jìn)行三批以上供試品的檢查驗(yàn)證確定限值

山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl熱原-細(xì)菌內(nèi)毒素檢查二、注射劑平安性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原那么-中藥 方法適用性（設(shè)定限值前研究）檢查方法熱原檢查應(yīng)做適用性研究，求得對(duì)家兔無(wú)毒性反應(yīng)、不影響正常體溫和無(wú)解熱作用的劑量。細(xì)菌內(nèi)毒素檢查應(yīng)進(jìn)行干擾試驗(yàn)，求得最大無(wú)干擾濃度。參照熱原檢查法（附錄ⅩⅢA）或細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法（附錄ⅩⅢD）。品種項(xiàng)下可以增加稀釋濃度、調(diào)節(jié)pH和滲透壓或緩慢注射等排除干擾或影響的特殊規(guī)定。

山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl熱原-細(xì)菌內(nèi)毒素檢查二、注射劑平安性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原那么-中藥 設(shè)定限值--熱原檢查設(shè)定限值--內(nèi)毒素檢查限值根據(jù)臨床一小時(shí)內(nèi)最大用藥劑量計(jì)算。熱原檢查限值可參照臨床劑量計(jì)算，一般為人用每公斤體重每小時(shí)最大供試品劑量的3～5倍，供試品注射體積每公斤體重一般不少于0.5mL，不超過(guò)10mL。限值劑量應(yīng)不影響正常體溫。限值根據(jù)臨床一小時(shí)內(nèi)最大用藥劑量計(jì)算內(nèi)毒素檢查限值按規(guī)定要求計(jì)算，由于藥物和適應(yīng)癥(如抗感染、抗腫瘤、心血管藥等急重病癥用藥、兒童老人用藥、復(fù)合用藥、大輸液等)的不同，限值可適當(dāng)嚴(yán)格，至計(jì)算值的1/3～1/2，以保證安全用藥。細(xì)菌內(nèi)毒素測(cè)定濃度應(yīng)無(wú)干擾反應(yīng)。

山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl二、注射劑平安性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原那么-中藥 異常毒性檢查方法適用性（設(shè)定限值前研究）檢查方法可參考文獻(xiàn)數(shù)據(jù)，并經(jīng)單次靜脈注射給藥毒性試驗(yàn)確定該注射劑的急性毒性數(shù)據(jù)（LD50或LD1及其可信限）?？捎啥鄠€(gè)實(shí)驗(yàn)室或多種來(lái)源動(dòng)物試驗(yàn)求得LD50和LD1數(shù)據(jù)。注射速度0.1ml/秒，觀察時(shí)間為72小時(shí)。如其它給藥途徑或延長(zhǎng)觀察時(shí)間應(yīng)進(jìn)行相應(yīng)途徑或相應(yīng)觀察時(shí)間的急性毒性試驗(yàn)。參照異常毒性檢查法（附錄ⅩⅢE）。對(duì)動(dòng)物、給藥途徑和給藥次數(shù)、觀察指標(biāo)和時(shí)間等，方法和限值有特殊要求時(shí)，可在品種項(xiàng)下另作規(guī)定。山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl限值應(yīng)低于該注射劑本身毒性的最低致死劑量考慮到實(shí)驗(yàn)室間差異、動(dòng)物反響差異和制劑的差異，建議限值至少應(yīng)小于LD1可信限下限的1/3(建議采用1/3～1/6)，如難以計(jì)算最低致死量，可采用LD50可信限下限的1/4(建議采用1/4～1/8)。如半數(shù)致死量與臨床體重劑量之比小于20，可采用LD50可信限下限的1/4或LD1可信限下限的1/3。靜脈注射最大劑量0.8ml/20g仍未見毒性反響或死亡，可以此作為檢查限值。二、注射劑平安性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原那么-中藥 設(shè)定限值異常毒性檢查山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl降壓物質(zhì)檢查方法適用性〔設(shè)定限值前研究〕供試品按一定注射速度靜脈注射不同劑量，觀察供試品對(duì)貓血壓反響的劑量反響關(guān)系。供試品與對(duì)照品注射體積應(yīng)相同，通常為0.2～1ml/kg，求得供試品降壓物質(zhì)檢查符合規(guī)定的最大劑量〔最大無(wú)降壓反響劑量〕。檢查方法參照降壓物質(zhì)檢查法〔附錄ⅩⅢF〕。二、注射劑平安性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原那么-中藥 山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl設(shè)定限值臨床單次用藥劑量的1/5～5倍作為降壓反響物質(zhì)檢查劑量限值，急重病癥用藥盡可能采用高限。特殊情況下，如供試品有一定降壓作用，那么可按最大無(wú)降壓反響劑量的1/2-1/4作為限值劑量。供試品原液靜脈注射1ml/kg劑量未見降壓反響，該劑量可作為給藥限值二、注射劑平安性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原那么-中藥 二、注射劑平安性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原那么-中藥

山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl過(guò)敏反響檢查方法適用性〔設(shè)定限值前研究〕測(cè)定供試品對(duì)豚鼠腹腔(或皮下)和靜脈給藥的無(wú)毒性反響劑量。可采用注射劑的半成品原輔料進(jìn)行致敏和激發(fā)研究，確定致敏方式和次數(shù)在首次給藥后14、21、28天中選擇最正確激發(fā)時(shí)間。檢查方法參照過(guò)敏反響檢查法〔附錄ⅩⅢG〕。二、注射劑平安性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原那么-中藥

山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl設(shè)定限值致敏和激發(fā)劑量應(yīng)小于該途徑的急性毒性反響劑量,適當(dāng)參考臨床劑量一般激發(fā)劑量大于致敏劑量。常用腹腔或鼠鼷部皮下注射途徑致敏，每次每只0.5ml,每只1ml靜脈注射激發(fā)。如致敏劑量較小，可適當(dāng)增加致敏次數(shù)，方法和限值的特殊要求應(yīng)在品種項(xiàng)下規(guī)定。過(guò)敏反響檢查二、注射劑平安性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原那么-中藥

山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl溶血與凝聚檢查方法適用性〔設(shè)定限值前研究〕對(duì)注射劑原液和稀釋液進(jìn)行溶血與凝聚實(shí)驗(yàn)研究,指標(biāo)除目測(cè)外，可增加比色法和顯微鏡下紅細(xì)胞計(jì)數(shù)方法,確定無(wú)溶血和或凝聚的最大濃度檢查方法參照溶血與凝聚檢查法〔附錄ⅩⅢH〕。二、注射劑平安性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原那么-中藥

山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl設(shè)定限值以無(wú)溶血和凝聚的最大濃度的1/2作為限值濃度一般應(yīng)高于臨床最大使用濃度過(guò)敏反響檢查二、注射劑平安性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原那么-中藥

山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl修訂背景1、增加了中藥平安性檢查工程的設(shè)定原那么。2、增加了限制前研究〔即方法適用性研究〕，使方法更具科學(xué)性、可操作性。3、平安性檢查法內(nèi)容省略，檢查限值設(shè)定更加具體明確。4、家兔熱原檢查法檢查限值由人用每公斤體重每小時(shí)最大供試品劑量的1-3倍修改為3-5倍。二、注射劑平安性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原那么-化藥

山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl化學(xué)藥品注射劑平安性檢查法

應(yīng)用指導(dǎo)原那么化學(xué)藥品〔包括抗生素、生化藥品〕平安性檢查工程的設(shè)定平安性檢查方法和檢查限值確定化藥與中藥注射劑平安性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原那么的異同點(diǎn)二、注射劑平安性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原那么-化藥

山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl化學(xué)藥品注射劑平安性檢查法

應(yīng)用指導(dǎo)原那么本指導(dǎo)原那么為化學(xué)藥品注射劑臨床使用的平安性和制劑質(zhì)量可控性而定。化學(xué)藥注射劑平安性檢查包括異常毒性、細(xì)菌內(nèi)毒素〔或熱原〕、降壓物質(zhì)〔或組胺物質(zhì)〕、過(guò)敏反響等項(xiàng)。根據(jù)處方、工藝、用法及用量等設(shè)定相應(yīng)的檢查工程進(jìn)行適用性研究。二、注射劑平安性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原那么-化藥

山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl應(yīng)設(shè)細(xì)菌內(nèi)毒素〔或熱原〕檢查項(xiàng)。所用原料系動(dòng)物來(lái)源或微生物發(fā)酵液提取物，組分結(jié)構(gòu)不清晰或有可能污染毒性雜質(zhì)，且又缺乏有效的理化分析方法的靜脈用注射劑，應(yīng)考慮設(shè)立異常毒性檢查項(xiàng)。檢查工程的設(shè)定靜脈用注射劑二、注射劑平安性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原那么-化藥

山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl所用原料系動(dòng)物來(lái)源或微生物發(fā)酵提取物時(shí),組分結(jié)構(gòu)不清晰或有可能污染毒性雜質(zhì)，且又缺乏有效的理化分析方法的肌內(nèi)注射用注射劑，應(yīng)考慮設(shè)立異常毒性檢查項(xiàng)。檢查工程的設(shè)定肌內(nèi)注射用注射劑二、注射劑平安性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原那么-化藥

山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl所用原料系動(dòng)物來(lái)源或微生物發(fā)酵提取物時(shí),組分結(jié)構(gòu)不清晰或有可能污染異源蛋白或未知過(guò)敏反響物質(zhì)的肌內(nèi)注射用注射劑，如缺乏相關(guān)理化分析方法且臨床發(fā)現(xiàn)過(guò)敏反響，應(yīng)考慮設(shè)立過(guò)敏反響檢查項(xiàng)。臨床用藥劑量較大，生產(chǎn)工藝易污染細(xì)菌內(nèi)毒素的肌內(nèi)注射用注射劑，應(yīng)考慮設(shè)細(xì)菌內(nèi)毒素檢查項(xiàng)檢查工程的設(shè)定肌內(nèi)注射用注射劑二、注射劑平安性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原那么-化藥

山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl椎管內(nèi)、腹腔、眼內(nèi)等特殊途徑的注射劑，其平安性檢查工程一般應(yīng)符合靜脈用注射劑的要求，必要時(shí)增加其它平安性檢查工程，如刺激性檢查、細(xì)胞毒性檢查。檢查工程的設(shè)定特殊途徑的注射劑二、注射劑平安性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原那么-化藥

山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl注射劑輔料使用面廣，用量大，來(lái)源復(fù)雜，與藥品的平安性直接相關(guān)。在質(zhì)量控制中，應(yīng)根據(jù)輔料來(lái)源、性質(zhì)、用途、用法用量，配合理化分析方法，設(shè)立必要的平安性檢查工程。檢查工程的設(shè)定注射劑輔料二、注射劑平安性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原那么-化藥

山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl原料和生產(chǎn)工藝特殊的注射劑必要時(shí)應(yīng)增加特殊的平安性檢查工程，如病毒檢查、細(xì)胞毒性檢查等。檢查工程的設(shè)定其它二、注射劑平安性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原那么-化藥

山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl定義：本法系將一定濃度的供試品和組胺對(duì)照品分別觀察出現(xiàn)的收縮反響幅度并加以比較，以判定供試品是否符合規(guī)定的一種方法。不合格供試品說(shuō)明含有組胺和類組胺物質(zhì)，在臨床上可能引起血壓下降和類似過(guò)敏反響等嚴(yán)重的不良反響。檢查方法和限值確定組胺檢查法二、注射劑平安性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原那么-化藥

山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl干擾試驗(yàn)按組胺類物質(zhì)檢查法，依以下順序準(zhǔn)確注入供試品稀釋液加對(duì)照品稀釋液低劑量、對(duì)照品稀釋液低劑量、供試品稀釋液加對(duì)照品稀釋液高劑量、對(duì)照品稀釋液高劑量〔dSL+T、dSL、dSH+T、dSH〕，重復(fù)一次，如dSL+T及dSH+T所致的反響值與dSL及dSH所致的反響值根本一致，可認(rèn)為供試品不干擾組胺物質(zhì)檢查；同時(shí)應(yīng)進(jìn)行本法與降壓物質(zhì)檢查法符合性的研究。否那么該品種不適合設(shè)立組胺物質(zhì)檢查項(xiàng)，建議設(shè)立降壓物質(zhì)檢查項(xiàng)。檢查方法和限值確定組胺檢查法二、注射劑平安性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原那么-化藥

山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl限值確定除特殊要求外，原那么上與降壓物質(zhì)檢查限值一致，以臨床單次用藥劑量的1/5～5倍量和每千克體重0.1μg組胺劑量計(jì)算注射劑含組胺類物質(zhì)檢查限值，其計(jì)算公式為：限值L=K/M，其中K值為人每千克體重接受的組胺量〔0.1μg/kg〕，M為降壓物質(zhì)檢查限值〔mg/kg、ml/kg、IU/kg〕。供試品劑量應(yīng)低于最大無(wú)收縮干擾劑量?？鼓[瘤藥、心血管病藥等急重病癥用藥應(yīng)采用高限。檢查方法和限值確定組胺檢查法

山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl增訂背景二、注射劑平安性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原那么-中藥 降壓物質(zhì)檢查法使用的動(dòng)物為貓，現(xiàn)在貓來(lái)源復(fù)雜、而且難以得到，動(dòng)物數(shù)量、質(zhì)量都難以保證。因此使用組胺檢查法作為體外替代方法。

許多中藥注射劑品種在做降壓物質(zhì)檢查時(shí)，存在一過(guò)性降壓現(xiàn)象，如清開靈注射液、復(fù)方苦參注射液等，但在臨床使用時(shí)并不存在降壓現(xiàn)象；

還有一些活血化瘀類中藥注射劑品種如紅花注射液，丹參注射液，紅花黃色素注射液等，本身具有擴(kuò)張血管的作用，在做降壓物質(zhì)檢查時(shí)，在與臨床劑量等同的情況下，血壓出現(xiàn)大幅度下降的情況。究其原因，是中藥注射劑的成分復(fù)雜，還是其本身擴(kuò)張血管的作用，尚不清楚。

因此，在中藥注射液的平安性評(píng)價(jià)中是否增加降壓物質(zhì)檢查項(xiàng)一直存在爭(zhēng)議。

山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl增訂背景二、注射劑平安性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原那么-中藥 組胺檢查法是豚鼠離體回腸收縮法在藥品檢驗(yàn)領(lǐng)域的應(yīng)用。豚鼠離體回腸收縮法本身是一種成熟的藥理實(shí)驗(yàn)方法，在根底藥理研究領(lǐng)域應(yīng)用廣泛，其作用機(jī)制、拮抗劑與沖動(dòng)劑的類型與劑量等根底研究均細(xì)致深入。本法在借鑒的根底上，對(duì)試驗(yàn)條件、結(jié)果判定等進(jìn)行了明確與改進(jìn)。

山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl附組胺檢查法二、注射劑平安性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原那么-中藥 營(yíng)養(yǎng)液組成特點(diǎn)

A液：試驗(yàn)當(dāng)日，取氯化鈉160.0g、氯化鉀4.0g、氯化鈣〔按無(wú)水物計(jì)算〕2.0g、氯化鎂〔按無(wú)水物計(jì)算〕1.0g與磷酸氫二鈉〔含12個(gè)結(jié)晶水〕0.10g，加注射用水700ml使溶解，再參加注射用水適量，使成1000ml。

B液：取硫酸阿托品0.5mg、碳酸氫鈉1.0g、葡萄糖〔含1個(gè)結(jié)晶水〕0.5g，加適量注射用水使溶解，加A液50.0ml，混合后加注射用水使成1000ml。B液應(yīng)臨用前配制，并在24h內(nèi)應(yīng)用。

山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl附組胺檢查法二、注射劑平安性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原那么-中藥 結(jié)果判定方法如供試品溶液引起回腸收縮：那么分別計(jì)算dSL、dT所致反響的平均值。假設(shè)dT所致反響的均值不大于dSL所致反響的均值，即判定供試品組胺類物質(zhì)檢查符合規(guī)定；假設(shè)dT所致反響的均值大于dSL所致反響的均值，即判定供試品組胺類物質(zhì)檢查不符合規(guī)定。

山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl附組胺檢查法二、注射劑平安性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原那么-中藥 結(jié)果判定方法如供試品不引起回腸收縮：那么在供試品溶液中參加組胺對(duì)照品高、低劑量，并按以下次序準(zhǔn)確注入dSH、dSL+T、dSH+T、dSL,重復(fù)一次。假設(shè)供試品組胺溶液產(chǎn)生的收縮與對(duì)應(yīng)組胺對(duì)照液高、低劑量的收縮根本一致，可判定供試品組胺類物質(zhì)檢查符合規(guī)定；假設(shè)供試品組胺溶液產(chǎn)生的收縮與對(duì)應(yīng)組胺對(duì)照液高、低劑量產(chǎn)生的收縮不相符，即減少或無(wú)收縮，或不能重復(fù)出現(xiàn)，那么此檢查結(jié)果無(wú)效，應(yīng)進(jìn)行供試品的降壓物質(zhì)檢查。二、注射劑平安性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原那么-化藥

山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl1、實(shí)驗(yàn)證實(shí)純種動(dòng)物對(duì)組胺的反響更為靈敏，收縮值高，靈敏度也較為穩(wěn)定。因此使用純種動(dòng)物是保證實(shí)驗(yàn)順利的根底。2、動(dòng)物體重應(yīng)嚴(yán)格控制在250-350g，動(dòng)物體重過(guò)大、過(guò)小靈敏度均難以重復(fù)。3、禁食時(shí)間對(duì)豚鼠的腸道平滑肌功能有直接影響，故動(dòng)物禁食應(yīng)控制在24h左右，禁食后未使用的動(dòng)物近期內(nèi)不應(yīng)用于本實(shí)驗(yàn)。動(dòng)物要求附組胺檢查法-本卷須知二、注射劑平安性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原那么-化藥

山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl1、剖腹取出回腸一段〔選用遠(yuǎn)端小腸，因?yàn)榇硕巫蠲舾小?，注意防止因牽拉使回腸受損，腸系膜不必要全局部離，容易損傷腸管，少帶一些血管組織，腸管更有活力。2、新鮮取出的腸管宜立刻浸泡至營(yíng)養(yǎng)液B中。3、腸管剪取2～3cm長(zhǎng)，具體長(zhǎng)度應(yīng)依據(jù)浴桶高度取舍。4、剪取后立即使其在營(yíng)養(yǎng)中平衡一段時(shí)間，并在20分鐘內(nèi)開始給予組胺。5、離體腸管可以保存于B液中，至2-8℃冰箱中冷藏，通入氧氣，24h內(nèi)可以使用。冰箱中保存的離體腸管使用時(shí)宜掛在浴桶內(nèi)1h左右后再開始試驗(yàn)。腸管處置附組胺檢查法-本卷須知二、注射劑平安性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原那么-化藥

山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl對(duì)于準(zhǔn)確記錄組胺引起的回腸收縮值十分重要，調(diào)零后應(yīng)預(yù)加負(fù)荷1g左右，調(diào)節(jié)使其對(duì)收縮的反響最為靈敏。在腸管平衡的過(guò)程中，因腸管松弛，預(yù)加的負(fù)荷值會(huì)降低，必要時(shí)應(yīng)調(diào)整使其對(duì)收縮的反響最為靈敏。但在確定了dSH、dSL后，那么不應(yīng)調(diào)整，否那么可能引起dSH、dSL的收縮高度改變，失去意義。預(yù)負(fù)荷附組胺檢查法-本卷須知二、注射劑平安性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原那么-化藥

山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl干擾的判斷是試驗(yàn)過(guò)程的重要影響因素。試驗(yàn)中有時(shí)靈敏度的下降與樣品干擾引起的回腸收縮降低難以區(qū)分，應(yīng)靜置或沖洗浴筒使靈敏度恢復(fù)后重新試驗(yàn)。建議先取一段腸管，以組胺對(duì)照液10-9、10-8、10-7、10-6g/ml…依次給予，觀察腸管收縮，以確定所用動(dòng)物的最正確劑量范圍；要注意的是如果組胺對(duì)照液的濃度過(guò)高，有可能使腸管收縮難以恢復(fù)，應(yīng)更換腸管。干擾的判斷附組胺檢查法-本卷須知二、注射劑平安性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原那么-化藥

山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl平安性檢查法和檢查限值確定中異常毒性檢查、細(xì)菌內(nèi)毒素、熱原檢查、降壓物質(zhì)檢查、過(guò)敏反響檢查兩者一致。2.化學(xué)平安性檢查工程設(shè)定原那么中增加了特殊途徑的注射劑、注射劑輔料及其它。3.化學(xué)注射劑增加了組胺類物質(zhì)檢查項(xiàng),而中藥注射劑增加了溶血與凝聚檢查?；幣c中藥注射劑平安性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原那么的異同點(diǎn)三、中藥生物活性測(cè)定指導(dǎo)原那么山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl生物活性測(cè)定法是以藥物的生物效應(yīng)為根底，以生物統(tǒng)計(jì)為工具，運(yùn)用特定的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，測(cè)定藥物有效性的一種方法，從而到達(dá)控制藥品質(zhì)量的作用。其測(cè)定方法包括生物效價(jià)測(cè)定法和生物活性限值測(cè)定法。三、中藥生物活性測(cè)定指導(dǎo)原那么山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl控制中藥有效性的一種方法；方法根底：生物效應(yīng)；方法工具：統(tǒng)計(jì)學(xué)；目的：控制質(zhì)量；分類：定量法—生物效價(jià)測(cè)定法定性法—生物活性限值測(cè)定法概念三、中藥生物活性測(cè)定指導(dǎo)原那么山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl中藥的藥材來(lái)源廣泛、多變，制備工藝復(fù)雜，使得中藥制劑的質(zhì)量控制相對(duì)困難中藥往往含有多種活性成分和具有多種藥理作用，僅僅控制少數(shù)成分不能完全控制其質(zhì)量和反映臨床療效為了使中藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)能更好地保證每批藥品的臨床使用平安有效，有必要在現(xiàn)有含量測(cè)定的根底上增加生物活性測(cè)定，以綜合評(píng)價(jià)其質(zhì)量。背景三、中藥生物活性測(cè)定指導(dǎo)原那么山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl背景-中藥質(zhì)量控制模式歷史現(xiàn)狀大致分為三個(gè)階段：外觀形態(tài)鑒別為主和內(nèi)在成分監(jiān)測(cè)為主。第一階段1985年前，包括傳統(tǒng)的外觀形態(tài)鑒別〔即經(jīng)典的看、嗅、嘗、試、量五法〕和顯微鑒別，沒有確切的定量指標(biāo)，缺乏專屬性鑒別工程。第二階段1985年后，中藥質(zhì)量控制向微觀內(nèi)在成分監(jiān)測(cè)的方向開展，開始使用化學(xué)和儀器分析的方法來(lái)對(duì)中藥成分進(jìn)行鑒別和含量測(cè)定。薄層色譜法的應(yīng)用，實(shí)現(xiàn)了中藥的專屬性鑒別；現(xiàn)代儀器分析方法來(lái)測(cè)定中藥活性成分和指標(biāo)成分的含量，結(jié)束了中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中沒有定量指標(biāo)的歷史。第三階段近年來(lái)，歐共體在草藥質(zhì)量指南中稱：草藥及其制劑是以整體為活性物質(zhì)，單靠測(cè)定其中的某種有效成分來(lái)考查質(zhì)量的穩(wěn)定性是不夠的。因此，具有“整體”特征的指紋圖譜檢測(cè)方法得到推廣，中藥質(zhì)量控制由單一指標(biāo)成分定性定量向活性有效成分及生物測(cè)定的綜合檢測(cè)的方向開展，是中藥質(zhì)量控制的里程碑。三、中藥生物活性測(cè)定指導(dǎo)原那么山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl背景-必要性中藥成分的復(fù)雜多變不確定性導(dǎo)致生物活性的變化中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的局限性現(xiàn)行的中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)主要是參照化學(xué)合成藥模式，通過(guò)某一個(gè)或幾個(gè)指標(biāo)有效成分的定性檢測(cè)與含量測(cè)定來(lái)對(duì)中藥的質(zhì)量加以控制。由于該指標(biāo)成分不一定是藥品的藥效成分或?qū)傩猿煞郑词篂橹饕幮С煞?，且其卑微的含量限度與臨床有效劑量間缺乏相關(guān)性，其量效關(guān)系、毒效關(guān)系目前尚不清楚。質(zhì)量控制的需要三、中藥生物活性測(cè)定指導(dǎo)原那么山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl符合藥理學(xué)研究根本原那么應(yīng)符合藥理學(xué)研究隨機(jī)、對(duì)照、重復(fù)的根本原那么；具備簡(jiǎn)單、精確特點(diǎn)；判斷標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)明確。表達(dá)中醫(yī)藥特點(diǎn)建立的方法，其測(cè)定指標(biāo)應(yīng)與該中藥的“功能與主治”相一致。品種選擇合理研究的中藥材或中成藥應(yīng)功能主治明確，優(yōu)先考慮適應(yīng)癥明確，成分單一的中藥注射劑品種，對(duì)急重癥用藥、保護(hù)品種應(yīng)重點(diǎn)進(jìn)行研究。方法科學(xué)可靠?jī)?yōu)先選用生物效價(jià)測(cè)定法，不能建立生物效價(jià)測(cè)定的品種可考慮采用生物活性限值測(cè)定法基本原那么三、中藥生物活性測(cè)定指導(dǎo)原那么山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl基

本

原

那么品種選擇合理表達(dá)中醫(yī)藥特色方法科學(xué)可靠難度大；判定指標(biāo)和中醫(yī)的“功能主治”如何銜接？多功能主治中藥指標(biāo)的選擇。功能主治明確；適應(yīng)癥單一；中藥注射劑；急重癥用藥；保護(hù)品種；新藥？生物效價(jià)法生物活性限值測(cè)定法三、中藥生物活性測(cè)定指導(dǎo)原那么山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl基本內(nèi)容--實(shí)驗(yàn)條件試驗(yàn)系選擇供試品選擇標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌愤x擇應(yīng)與試驗(yàn)原理和測(cè)定指標(biāo)密切相關(guān)；背景資料清楚、影響因素少、檢測(cè)指標(biāo)靈敏、成本低廉；實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的要求。盡可能使用小鼠和大鼠，應(yīng)遵循“優(yōu)化、減少、替代”的“3R”原則。工藝穩(wěn)定、質(zhì)量合格（目前的標(biāo)準(zhǔn)要求）；飲片應(yīng)基源清楚；使用三批供試品（方法學(xué)研究時(shí)）。首選中藥標(biāo)準(zhǔn)品；可考慮化學(xué)藥作為對(duì)照品；生物效價(jià)測(cè)定法必須要有標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)定相對(duì)效價(jià)；生物活性限值測(cè)定法用對(duì)照品作為驗(yàn)證。三、中藥生物活性測(cè)定指導(dǎo)原那么

山東省藥品檢驗(yàn)所ShandongInstituteforDrugControl基本內(nèi)容--實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)設(shè)計(jì)原理設(shè)計(jì)類型劑量設(shè)計(jì)給藥途徑給藥次數(shù)指標(biāo)選擇所選實(shí)驗(yàn)方法的原理應(yīng)明確；所選擇的檢測(cè)指標(biāo)應(yīng)客觀、專屬性強(qiáng)；能夠體現(xiàn)供試品的功能與主治或藥理作用；如果選擇機(jī)理研究也應(yīng)考慮指標(biāo)的專屬性采用生物效價(jià)測(cè)定法，應(yīng)按CP二部“生物檢定統(tǒng)計(jì)法”要求進(jìn)行設(shè)計(jì)研究；采用生物活性限值測(cè)定法，