食品中添加劑含量的測定（食品理化分析課件）

食品中糖精鈉含量的測定

Theteachingresourcelibraryoffoodqualityandsafety理解食品中糖精鈉測定的基本原理正確配制實驗所需試劑和標準溶液掌握食品中糖精鈉含量測定的方法教學目標123糖精鈉，俗稱糖精，自1878年被美國科學家發(fā)現(xiàn)后，很快就被食品工業(yè)界和消費者接受，是目前使用歷史最長的一種甜味劑。膀胱癌糖精鈉爭議01020305帶殼熟制堅果腌漬蔬菜蜜餞涼果涼果類果醬041.2g/Kg5.0g/Kg0.15g/Kg0.2g/Kg1.0g/Kg糖精鈉的最大使用量12345液相色譜法實驗原理儀器和設備結果處理試劑和材料分析步驟PART01實驗原理12樣品用水提取高脂肪樣品：正己烷脫脂；高蛋白樣品：經(jīng)蛋白質沉淀

劑淀蛋白；3經(jīng)液相色譜分離、紫外檢測器檢測4用外標法定量PART02試劑和材料試劑1.氨水溶液(1+99)：取氨水1mL，加到99mL水中，混勻。2.亞鐵氰化鉀溶液(92g/L):稱取106g亞鐵氰化鉀，加入適量水溶解，用水定容至1000mL。3.乙酸鋅溶液(183g/L)：稱取220g乙酸鋅溶于少量水中，加入30mL冰乙酸，用水定容至1000mL。4.乙酸銨溶液(20mmol/L)：稱取1.54g乙酸銨，加入適量水溶解，用水定容至1000mL，經(jīng)0.22μm水相微孔濾膜過濾后備用。5.甲酸-乙酸銨溶液(2mmol/L甲酸+20mmol/L乙酸銨)：稱取1.54g乙酸銨，加入適量水溶解，再加入75.2μL甲酸，用水定容至1000mL，經(jīng)0.22μm水相微孔濾膜過濾后備用。6.標準溶液配制

（1）標準儲備溶液：0.117g糖精鈉標準品100mL（4℃貯存/6個月)。（2）標準中間溶液：10.0mL標準儲備溶液50mL（4℃貯存/3個月)。水水（3）標準系列工作溶液：管號（10ml容量瓶）12345678糖精鈉標準中間溶液(mL)00.050.250.501.002.505.0010.0加水定容至10mL標準系列工作溶液（mg/L）01.005.0010.020.050.0100200VS水相微孔濾膜0.22μm塑料離心管50mL材料PART03儀器和設備VS1、高效液相色譜儀（配紫外檢測器）2、渦旋振蕩器3、超聲波發(fā)生器4、分析天平（0.001~0.0001g）5、勻漿機6、離心機7、恒溫水浴鍋PART04分析步驟一、試樣制備

均勻液態(tài)試樣取多個預包裝的飲料、液態(tài)奶等均勻樣品直接混合。固體樣品用研磨機充分粉碎并攪拌均勻奶酪、黃油、巧克力等50℃~60℃加熱熔融,并趁熱充分攪拌均勻。01020403非均勻的液態(tài)、半固態(tài)樣品用組織勻漿機勻漿。取其中的200g裝入玻璃容器中,密封,液體試樣于4℃保存,其他試樣于-18℃保存。二、試樣提取（一般試樣）準確稱取約2g（精確到0.001g）試樣于50mL具塞離心管中，加水約25mL，渦旋混勻，于50℃水浴超聲20min。冷卻至室溫后加亞鐵氰化鉀溶液2mL和乙酸鋅溶液2mL，混勻，于8000r/min離心5min，將水相轉移至50mL容量瓶中。于殘渣中加水20mL，渦旋混勻后超聲5min，于8000r/min離心5min，將水相轉移到同一50mL容量瓶中，并用水定容至刻度，混勻。取適量上清液過0.22μm濾膜，待液相色譜測定。12準確稱取約2g（精確到0.001g）試樣于50mL具塞離心管中加水約25mL，渦旋混勻3于70℃水浴加熱溶解試樣4于50℃水浴超聲20min5之后的操作同一般試樣二、試樣提取（含膠基的果凍、糖果等）二、試樣提?。逃汀⑶煽肆Φ雀哂椭嚇樱蚀_稱取約2g(精確到0.001g)試樣于50mL具塞離心管中，加正己烷10mL。60℃水浴加熱約5min，并不時輕搖以溶解脂肪，然后加氨水溶液(1+99)25mL，乙醇1mL，渦旋混勻。

于8000r/min離心5min,棄去有機相，水相轉移至50mL容量瓶中，殘渣與一般樣品處理方法相同，再提取一次后測定。50℃水浴超聲20min，冷卻至室溫后，加亞鐵氰化鉀溶液2mL和乙酸鋅溶液2mL，混勻。01020304三、儀器參考條件色譜柱

C18柱（柱長250mm/內(nèi)徑4.6mm/粒徑5μm），或等效色譜柱。檢測波長230nm流速1mL/min01020503流動相甲醇+乙酸銨溶液=5+9504進樣量10

μL1標準系列測定2標準曲線繪制將混合標準系列工作溶液分別注入液相色譜儀中，測定相應的峰面積。以混合標準系列工作溶液的質量濃度為橫坐標，以峰面積為縱坐標,繪制標準曲線。四、標準曲線的制作標準系列測定標準曲線繪制將混合標準系列工作溶液分別注入液相色譜儀中，依次進行測定。以混合標準系列工作溶液的質量濃度為橫坐標，以峰面積為縱坐標,繪制標準曲線。五、標準曲線的制作將試樣溶液注入液相色譜儀中測得峰面積根據(jù)標準曲線得到待測液中糖精鈉的質量濃度213五、試樣溶液測定PART05結果處理式中：X——試樣中待測組分含量(g/kg)；ρ——由標準曲線得出的試樣液中待測物的質量濃度(mg/L)；V——試樣定容體積(mL)；m——試樣質量(g)；1000——由mg/kg轉換為g/kg的換算因子。結果保留3位有效數(shù)字。教學小結010203介紹測定糖精鈉的實驗原理講解試劑及標準溶液配制方法介紹糖精鈉的測定方法教學小結食品中甜味劑測定的基礎知識Theteachingresourcelibraryoffoodqualityandsafety甜味劑的定義1甜味劑的分類2甜味劑的強度3常見的甜味劑45甜味劑的測定PART01甜味劑定義12賦予食品以甜味感的非糖類物質甜度高用量少3熱值低PART02甜味劑分類天然甜味劑人工合成甜味劑甜菊糖甘草提取物糖精糖精鈉甜蜜素安賽蜜三氯蔗糖甜味素（阿巴斯甜）34PART03甜味劑強度34請輸入您的文字對實際情況進行說明甜味劑甜味的高低、強弱稱為甜度。甜度的測定到目前為止還只能憑人們的味覺來判斷，不能用物理或化學方法來定量測定。一般以蔗糖為標準甜度，來得到其它甜味劑的相對甜度?；鶞嗜缦拢?0℃條件下，味覺細胞感覺到5%或10%蔗糖的甜度為1（或100%）。PART04常見的甜味劑甘草和甘草提取物甜菊糖苷糖精鈉天門冬酰苯丙氨酸甲酯甜蜜素甜味劑PART05甜味劑的測定氣相色譜法液相色譜法奶粉中亞硝酸鹽的測定

Theteachingresourcelibraryoffoodqualityandsafety實驗原理分析步驟結果計算教學內(nèi)容123PART01實驗原理奶粉中亞硝酸鹽的測定試樣經(jīng)沉淀蛋白質、除去脂肪后,在弱酸條件下,亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸重氮化后,再與鹽酸萘乙二胺偶合形成紫紅色染料,外標法測得亞硝酸鹽含量。PART02分析步驟樣液測定樣品預處理奶粉中亞硝酸鹽的測定1.稱取10g混合均勻的奶粉樣品,置于150mL具塞錐形瓶中,加12.5mL50g/L飽和硼砂溶液。2.加入70℃左右的水約150mL,混勻。3.于沸水浴中加熱15min。4.取出置冷水浴中冷卻,并放置至室溫。樣液測定樣品預處理奶粉中亞硝酸鹽的測定1.定量轉移上述提取液至200mL容量瓶中。2.加入5mL106g/L亞鐵氰化鉀溶液,搖勻，再加入5mL220g/L乙酸鋅溶液，以沉淀蛋白質。乙酸鋅亞鐵氰化鉀樣液測定樣品預處理奶粉中亞硝酸鹽的測定加水至刻度,搖勻,放置30min除去上層脂肪，上清液用濾紙過濾，棄去初濾液30mL，濾液備用。奶粉中亞硝酸鹽的測定吸取40.0mL上述濾液于50mL帶塞比色管中。向0~8號50mL帶塞比色管中分別加入0.00mL、0.20mL、0.40mL、0.60mL、0.80mL、1.00mL、1.50mL、2.00mL、2.50mL濃度為5.0μg/mL亞硝酸鈉標準使用液。向每個比色管中加入2mL4g/L對氨基苯磺酸溶液，混勻，靜置3min~5min。向每個比色管中加入1mL2g/L鹽酸萘乙二胺溶液，加水至刻度，混勻，靜置15min。用1cm比色杯,以零管調節(jié)零點,于波長538nm處。測吸光度,繪制標準曲線比較。同時做試劑空白。管號012345678亞硝酸鈉標準液0.00.20.40.60.81.01.52.02.5對氨基苯磺酸溶液2.02.02.02.02.02.02.02.02.0鹽酸萘乙二胺溶液1.01.01.01.01.01.01.01.01.0加去離子水至50ml樣品40.0mL樣品濾液2mL對氨基苯磺酸1mL