主管檢驗技師考試臨床血液學(xué)檢驗講義第十二章自身免疫性溶血性貧血及其實驗診斷

資料收集于網(wǎng)絡(luò)，如有侵權(quán)請聯(lián)系網(wǎng)站刪除第十二章自身免疫性溶血性貧血及其實驗診斷一、自身免疫性溶血的檢驗及其應(yīng)用二、自身免疫性溶血性貧血的實驗診斷一、自身免疫性溶血的檢驗及其應(yīng)用1.免疫性溶血性貧血的定義和分類免疫性溶血性貧血是由抗體參與的溶血反應(yīng)所致的貧血。這類免疫反應(yīng)是由于紅細(xì)胞表面抗原，或與外來的抗原（如藥物等）相結(jié)合，在相應(yīng)抗體（IgG或IgM）作用下，或激活補體的參與，導(dǎo)致紅細(xì)胞凝集或破壞而發(fā)生溶血；或在脾或肝臟內(nèi)的單核-巨噬細(xì)胞的吞噬作用下被破壞。免疫性溶血性貧血的分類見下表。免疫性溶血性貧血的分類分類抗體型別自身免疫性溶血性貧血通常為溫抗體，IgG為主溫反應(yīng)性抗體型以溫抗體IgG為主，少部分IgA、C3冷反應(yīng)性抗體型通常為IgG、補體冷凝集素綜合征幾乎均為IgM陣發(fā)性冷性血紅蛋白尿癥一般為IgG藥物免疫性溶血免疫復(fù)合物型、IgG、IgM等同種免疫新生兒溶血癥ABO、Rh、MN型血型不合輸血ABO、Rh型）法和間接（DATGIATG）法。包括直接（抗人球蛋白試驗2.）。分為檢測紅細(xì)胞表面有無不完全抗）原理：用于檢測自身免疫性溶血性貧血的自身抗體（1IgG（），以前者DAGT體的直接抗人球蛋白試驗（IAGT）和檢測血清中有無不完全抗體的間接抗人球蛋白試驗（最常用。分子結(jié)合，如紅細(xì)胞表面存抗和（或）IgG抗[直接試驗應(yīng)用抗人球蛋白試劑與紅細(xì)胞表面的IgGC3d]在自身抗體，出現(xiàn)凝集反應(yīng)。只供學(xué)習(xí)與交流．資料收集于網(wǎng)絡(luò)，如有侵權(quán)請聯(lián)系網(wǎng)站刪除抗人球蛋白直接試驗原理示意圖及結(jié)果觀察（玻片法）間接試驗應(yīng)用Rh（D）陽性O(shè)型正常人紅細(xì)胞與受檢血清混合孵育，如血清中存在不完全抗體，紅細(xì)胞致敏，再加入抗人球蛋白血清，可出現(xiàn)凝集。間接試驗原理示意圖及結(jié)果觀察（試管法）抗人球蛋白結(jié)果：健康人直接和間接抗人球蛋白試驗均為陰性。（2）臨床意義：陽性見于自身免疫性溶血性貧血、冷凝集素綜合征、陣發(fā)性寒冷性血紅蛋白尿、藥物致免疫性溶血性貧血、輸血引起溶血性貧血和新生兒同種免疫性溶血性貧血。陰性不能排除免疫性溶血性貧血。3.冷凝集素試驗（1）原理：冷凝集素為IgM類完全抗體，在低溫時可使自身紅細(xì)胞、O型紅細(xì)胞或與受檢者血型相同的紅細(xì)胞發(fā)生凝集。凝集反應(yīng)的高峰在0～4℃，當(dāng)溫度回升到37℃時凝集消失。參考值：正常人血清抗紅細(xì)胞抗原的IgM冷凝集素效價＜1:32（4℃）。（2）臨床意義：陽性見于冷凝集素綜合征（＞1:1000），支原體肺炎、傳染性單核細(xì)胞增多癥、瘧疾、肝硬化、淋巴瘤及多發(fā)性骨髓瘤者亦可增高，但不超過1:1000。4.冷熱溶血試驗（1）原理：陣發(fā)性寒冷性血紅蛋白尿癥患者血清中有一種特殊的冷反應(yīng)抗體（Donath-Landsteiner抗體），在20℃以下（常為0～4℃）時與紅細(xì)胞結(jié)合，同時吸附補體，但不溶血。當(dāng)溫度升至37℃時，補體激活，紅細(xì)胞膜破壞而發(fā)生急性血管內(nèi)溶血。結(jié)果：陰性。（2）臨床意義：陣發(fā)性寒冷性血紅蛋白尿癥患者呈陽性，D-L抗體效價可高于1:40。病毒感染可出現(xiàn)陽性反應(yīng)。只供學(xué)習(xí)與交流．資料收集于網(wǎng)絡(luò)，如有侵權(quán)請聯(lián)系網(wǎng)站刪除二、自身免疫性溶血性貧血的實驗診斷1.溫抗體型自身免疫性溶血性貧血（WAIHA）；血紅蛋白降至20g/L×0.810/L，（1）血象：紅細(xì)胞和血紅蛋白：急性型迅速下降，紅細(xì)胞甚至可低至，表面凹凸不平，可見紅細(xì)胞自身凝集、碎片，偶見。周圍血片紅細(xì)胞呈小球形多在40～80g/L慢性型Hb。白細(xì)胞常增高，急性型可紅細(xì)胞被吞噬現(xiàn)象，常見有核和嗜多色性紅細(xì)胞。網(wǎng)織紅細(xì)胞增多，可超過10%，慢性型可更高，兩型也都可減少。急性溶血期有早、中、晚幼粒細(xì)胞出現(xiàn)，甚至并發(fā)類白/L50×10超過血病反應(yīng)。部分患者血小板減少。溫抗體型自免溶貧患者外周血中可見球形紅細(xì)胞溫抗體（主要）與紅細(xì)胞結(jié)合抗體Fc端構(gòu)型變化易被吞噬細(xì)胞所吞噬破壞或部分吞噬成為球形細(xì)胞最后在脾索內(nèi)被破壞。溫抗體型自免溶貧球形紅細(xì)胞形成機制示意圖（2）骨髓象：骨髓粒紅比例縮小或倒置，呈現(xiàn)幼紅細(xì)胞增生，偶見紅細(xì)胞系統(tǒng)輕度巨幼樣變。再障危象發(fā)生時，全血細(xì)胞減少，遷延數(shù)周。（3）抗人球蛋白試驗：是本病重要的診斷方法，最好同時作直接和間接法。直接法的意義更大，具有半定量測定價值，可作為病情程度變化和隨訪的指標(biāo)。臨床上常分為三型：①多數(shù)是抗IgG及抗C3型，預(yù)后差，治療困難；②抗IgG型；③少數(shù)是抗C3型，預(yù)后好?？笽gA型偶見。間接試驗用正常O型或Rb（D）或與被檢者（ABO）同型紅細(xì)胞檢測患者血清中游離的自身抗體或補體，發(fā)生凝集為陽性。直接抗人球蛋白試驗陰性，并不能排除AIHA的診斷。遇可疑結(jié)果應(yīng)重復(fù)檢測。另外，紅細(xì)胞脆性試驗陽性，自身溶血試驗陽性，且能被ATP糾正。2.冷凝集素綜合征（CAS）冷凝集素綜合征又名冷凝集素病，是另一種自身免疫性溶血性貧血。（1）血象：血片紅細(xì)胞大小不等、異形、嗜多色、紅細(xì)胞呈緡錢狀及自身凝結(jié)現(xiàn)象，制備血片特別困只供學(xué)習(xí)與交流．資料收集于網(wǎng)絡(luò)，如有侵權(quán)請聯(lián)系網(wǎng)站刪除難。網(wǎng)織紅細(xì)胞增高，有時也可下降。（2）骨髓象：骨髓增生活躍，幼紅細(xì)胞增生顯著。（3）冷凝集素試驗：陽性，抗體幾乎均為IgM，抗體效價甚至高至少1:1000～1:16000，但也有報告IgG或IgA增高，故廣譜抗人球蛋白直接反應(yīng)是陽性?！婺?；冷凝集素綜合征患者試管中的血樣在4A.B.毛細(xì)吸管中的血樣在4℃凝集（下），置于37℃時，凝集消失（上）；C.血片中可見凝集成片的紅細(xì)胞。3.陣發(fā)性冷性血紅蛋白尿（1）血象：中至重度貧血，血片中紅細(xì)胞大小不等，呈球形、異形、碎片、嗜堿性點彩和有核紅細(xì)胞。白細(xì)胞輕度增高，血小板正常。（2）骨髓象：骨髓增生活躍，主要為幼紅細(xì)胞系統(tǒng)增高，粒紅比例縮小或倒置。（3）確診試驗：①抗人球蛋白試驗陽性，屬低溫IgG型，有雙相溶血素（D-L抗體），具有抗-P血型特異性，抗C3陽性；②冷熱溶血試驗陽性。不同類型溶血性貧血試驗選擇主要溶疑及的溶血性篩選/排除試驗確診試驗貧血疾病名稱血部位高滲冷溶血試驗紅細(xì)胞形態(tài)檢查遺傳;遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥膜蛋白電泳分析膜脂滲透脆性試驗性橢圓形紅細(xì)胞增多癥質(zhì)分析酸化甘油溶血試驗血管外自身溶血試驗?zāi)さ鞍谆蚍治鲞z傳性口形紅Coombs紅細(xì)胞腺苷三磷酸活性，家系調(diào)查細(xì)胞增多癥試驗高鐵血紅蛋白還原試驗活性測G6PD熒光斑點試驗G-6-PD葡萄糖6-磷酸紅細(xì)胞定；基因分析硝基四氮唑藍(lán)試驗脫氫酶缺陷癥Heinz小體生成試驗血管外紅細(xì)胞形態(tài)檢查PK活性定量測定熒光斑點試驗紅細(xì)胞形態(tài)檢PK丙酮酸激酶缺乏癥中間代謝產(chǎn)物測定Ret查；-5嘧啶嘧啶核苷酸比率嘧啶核苷酶缺乏癥′--′-5核苷酶只供學(xué)習(xí)與交流．資料收集于網(wǎng)絡(luò)，如有侵權(quán)請聯(lián)系網(wǎng)站刪除活性測定血管外血紅蛋珠蛋白生成障礙性貧血；紅細(xì)胞形態(tài)檢查紅細(xì)胞包涵體試驗異丙醇沉淀試驗熱變性試驗Heinz小體生成試驗紅細(xì)胞鐮變試驗血紅蛋白電泳珠蛋白肽鏈分析基因分析吸收光譜測定白病溫抗體型自身免疫性溶貧紅細(xì)胞形態(tài)檢查紅細(xì)胞形態(tài)檢查Coombs試驗Coombs試驗冷凝集素試驗冷凝集素綜合征（半抗藥物致免疫性溶血性貧血原型、自身免疫型）紅細(xì)胞形態(tài)檢查Coombs試驗IAGT加藥后血管外新生兒同種免疫性溶血癥；膽紅素Ret紅細(xì)胞形態(tài)檢查；代謝檢查；血型鑒定試驗；Coombs孕婦產(chǎn)前免疫性抗體檢查遲發(fā)性溶血性輸血反應(yīng)；紅細(xì)胞形態(tài)檢查；Ret進(jìn)一步的血型鑒定Coombs試驗聚凝胺試驗血管內(nèi)陣發(fā)性睡眠性Rous試驗?zāi)螂[血試驗蔗糖溶血試驗試驗Ham蛇毒溶血因子試驗補體敏感性試驗血紅蛋白尿癥蠶豆病高鐵血紅蛋白還原試驗G-6-PD熒光斑點試驗硝基四氮唑藍(lán)試驗Heinz小體生成試驗活性測紅細(xì)胞G-6-PD定；基因分析血管內(nèi)陣發(fā)性冷性試驗；RousCoombs試驗試驗Coombs冷熱溶血試驗IAGT及加藥后的IAGT血紅蛋白尿癥藥物致免疫性溶血性貧血（奎尼丁型）急發(fā)性溶血性輸血反應(yīng)Coombs試驗血型鑒定及不同方法的交叉配血試驗微血管病性溶血性貧血紅細(xì)胞形態(tài)檢查；Ret；血小板計數(shù)；血漿游離血紅蛋白測定等止血與血栓實驗室檢查及其他相關(guān)檢查習(xí)題紅細(xì)胞膜異常導(dǎo)致的貧血是A.丙酮酸激酶缺乏癥-6-葡萄糖B.磷酸脫氫酶缺乏癥C.陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥D.珠蛋白生成障礙性貧血E.血紅蛋白病只供學(xué)習(xí)與交流．資料收集于網(wǎng)絡(luò)，如有侵權(quán)請聯(lián)系網(wǎng)站刪除『正確答案』C『答案解析』丙酮酸激酶缺乏癥和葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥屬于酶缺陷異常導(dǎo)致的貧血。珠蛋白生成障礙性貧血和血紅蛋白病屬于血紅蛋白異常導(dǎo)致的貧血。關(guān)于尿含鐵血黃素試驗，下列敘述哪項不正確A.陰性結(jié)果可排除血管內(nèi)溶血存在B.亦稱Rous試驗C.陽性對慢性血管內(nèi)溶血的診斷價值最大D.用普魯士藍(lán)反應(yīng)顯示含鐵血黃素E.陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿常為陽性『正確答案』A『答案解析』尿含鐵血黃素試驗慢性血管內(nèi)溶血時陽性，陰性結(jié)果不可以排除血管內(nèi)溶血存在。多種溶血的特殊檢查，下列哪一組是錯誤的A.Coombs試驗-自身免疫性溶血性貧血B.Ham試驗-PNHC.蠶豆病-機體對蠶豆的變態(tài)反應(yīng)D.外周血中出現(xiàn)大量靶形紅細(xì)胞-珠蛋白生成障礙性貧血E.紅細(xì)胞滲透脆性增高-遺傳性球形細(xì)胞增多癥『正確答案』C『答案解析』蠶豆病是因為缺乏G-6-PD導(dǎo)致的。有關(guān)血管內(nèi)溶血的敘述，下列錯誤的是A.急性發(fā)作B.血紅蛋白血癥和血紅蛋白尿C.肝脾常大D.多為獲得者E.肝脾不大『正確答案』C『答案解析』血管內(nèi)溶血肝脾腫大少見。與血管外溶血不符合的是A.常為慢性經(jīng)過B.脾不大C.常為先天性D.破壞的紅細(xì)胞被單核-巨噬系統(tǒng)吞噬E.紅細(xì)胞形態(tài)改變多見『正確答案』B『答案解析』血管外溶血肝脾腫大常見。下列哪項不符合溶血性貧血的診斷A.網(wǎng)織紅細(xì)胞增高B.膽紅素明顯升高C.尿膽原≥1:40只供學(xué)習(xí)與交流．資料收集于網(wǎng)絡(luò)，如有侵權(quán)請聯(lián)系網(wǎng)站刪除D.Hb尿陰性E.Rous試驗陽性『正確答案』D『答案解析』血管內(nèi)溶血時血紅蛋白尿常見，血管外溶血時血紅蛋白尿無或較輕。下列不屬于先天性溶血性貧血的疾病是A.遺傳性紅細(xì)胞增多癥B.丙酮酸激酶缺陷癥C.鐮狀細(xì)胞貧血D.不穩(wěn)定血紅蛋白病E.陣發(fā)性寒冷性血紅蛋白尿癥『正確答案』E『答案解析』陣發(fā)性寒冷性血紅蛋白尿癥屬于獲得性溶血性貧血。關(guān)于冷凝集素試驗，下列哪項是正確的A.冷凝集綜合征患者陽性，效價在1:1000以上B.37℃凝集反應(yīng)最強C.0～4℃凝集現(xiàn)象消失D.抗體IgGE.為不完全抗體『正確答案』A『答案解析』冷凝集素為IgM類完全抗體，在低溫時可使自身紅細(xì)胞、O型紅細(xì)胞或與受檢者血型相同的紅細(xì)胞發(fā)生凝集。凝集反應(yīng)的高峰在0～4℃，當(dāng)溫度回升到37℃時凝集消失。珠蛋白生成障礙性貧血的主要診斷依據(jù)是A.網(wǎng)織紅細(xì)胞增高B.血紅蛋白尿C.外周血出現(xiàn)有核紅細(xì)胞D.血紅蛋白電泳異常E.骨髓中幼稚紅細(xì)胞明顯增高『正確答案』D『答案解析』血紅蛋白電泳：HbA增多，見于β珠蛋白合成障礙性貧血，為雜合子的重要實驗室診斷指標(biāo)。HbE病時也在HbA區(qū)帶位置處增加，但含量很大（在10%以上）。HbA輕度增加亦可見于肝病、腫瘤和某些血液病。下列哪些可導(dǎo)致變性珠蛋白小體增高A.化學(xué)物質(zhì)中毒B.HbHC.G-6-PD缺陷D.還原型谷胱甘肽缺乏癥E.以上都是『正確答案』E『答案解析』變性珠蛋白小體試驗：G-6-PD缺乏癥常高于45%，故可作為G-6-PD缺乏的篩檢試驗。但還原型谷胱甘肽缺乏癥也增高；不穩(wěn)定血紅蛋白病含小體的細(xì)胞百分率為75%～84%，HbH病和化學(xué)物只供學(xué)習(xí)與交流．資料收集于網(wǎng)絡(luò)，如有侵權(quán)請聯(lián)系網(wǎng)站刪除質(zhì)中毒時也增高。下列屬于獲得性溶血性貧血疾病的是A.遺傳性橢圓形紅細(xì)胞增多癥B.珠蛋白生成障礙性貧血C.葡萄糖磷酸異構(gòu)酶缺陷征D.冷凝集素綜合征E.遺傳性口形紅細(xì)胞增多癥『正確答案』D『答案解析』冷凝集素綜合征是由免疫因素引起的獲得性溶血性貧血?？谷饲虻鞍自囼炛苯臃ㄏ铝心捻検钦_的A.檢查紅細(xì)胞表面不完全抗體B.加抗人球蛋白血清發(fā)生凝集C.直接試驗陽性并有溶血者，其間接試驗可能是陰性D.直接試驗陽性不一定發(fā)生溶血E.以上都是『正確答案』E『答案解析』用于檢測自身免疫性溶血性貧血的自身抗體（IgG）。分為檢測紅細(xì)胞表面有無不完全抗體的直接抗人球蛋白試驗（DAGT）和檢測血清中有無不完全抗體的間接抗人球蛋白試驗（IAGT），以前者最常用。直接試驗應(yīng)用抗人球蛋白試劑[抗IgG和（或）抗C]與紅細(xì)胞表面的IgG分子結(jié)合，如紅細(xì)胞表面存在自身抗體，出現(xiàn)凝集反應(yīng)。間接試驗應(yīng)用Rh（D）陽性O(shè)型正常人紅細(xì)胞與受檢血清混合孵育，如血清中存在不完全抗體，紅細(xì)胞致敏，再加入抗人球蛋白血清，可出現(xiàn)凝集。某男，18歲，反復(fù)鞏膜黃染4年。體檢：鞏膜輕度黃染，肝肋下2cm，脾肋下7.2cm，檢驗結(jié)果：血紅蛋白：75g/L，白細(xì)胞、血小板正常，Ret：9%；總膽紅素：34μmol/L，間接膽紅素28μmol/L，HBsAg：（＋），Coombs試驗：陰性，紅細(xì)胞滲透脆性增加，最有可能的診斷是A.先天性非溶血性黃疸B.慢性肝病性貧血C.遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥D.珠蛋白生成障礙性貧血E.自身免疫性溶血性貧血『正確答案』C『答案解析』由題干可知該患者肝脾腫大，由此可推斷該疾病為血管外溶血；Coombs試驗陰性可排除自身免疫性溶血性貧血；紅細(xì)胞滲透脆性增加可判斷出該疾病為遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥。患者，女，24歲，貧血貌，皮膚鞏膜黃染；化驗檢查：網(wǎng)織紅細(xì)胞12%，直接Coombs陽性，最有可能的診斷為