食品衛(wèi)生指標菌的檢驗-食品中菌落總數檢驗技術（食品微生物檢驗課件）

菌落總數定義及檢驗意義GB4789.2-2016LOREMIPSUMDOLOR菌落總數aerobicplatecount

食品檢樣經過處理，在一定條件下（如培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時間等）培養(yǎng)后，所得每g(mL)檢樣中形成的微生物菌落總數。一、菌落總數的概念GB4789.2-2016一、菌落總數的概念菌落：Colony，單個微生物在合適固體培養(yǎng)基表面或內部生長繁殖到一定程度，形成肉眼可見有一定細菌群落。CFU：ColonyFormingUnits,菌落形成單位。鑒于食品的細菌細胞是以單個、成雙、鏈狀、葡萄狀或成堆的形式存在，因而在平板上出現的菌落可以來源于細胞塊，也可來源于單個細胞，因而平板上所得菌落的數字不應報告活菌數，而應以單位重量、容積或表面積內的菌落數或菌落形成單位（CFU）報告。食品中菌落總數檢驗過程GB4789.2-2016一、菌落總數操作流程圖一、菌落總數操作流程圖培養(yǎng)條件：一般食品：36℃±1℃，培養(yǎng)48h±2h水產品：30℃±1℃，培養(yǎng)72h±3h二、培養(yǎng)條件未加工水產品受到海洋和陸地細菌的污染，水產品的培養(yǎng)溫度，由于其生活環(huán)境水溫較低，檢驗時應采用30℃±1℃。水產品定義見GB2760或GB2762此處并非指水產制品ACB每個樣品從開始稀釋到傾注平皿耗時≦15min，防止細菌增殖和產生片狀菌落。（腸桿菌繁殖一代20min）樣液與瓊脂應充分混合，避免將混合物濺到平皿壁和皿蓋上。平皿內瓊脂凝固后，不要長時間放置，然后倒置培養(yǎng)，可避免菌落蔓延生長。檢樣過程中應用稀釋劑做空白對照，用以判定稀釋液、培養(yǎng)基、平皿或吸管可能存在的污染。應為吸取1mL空白稀釋液加入到兩個無菌平皿內，可表示為空白對照平皿結果0/0。三、注意事項1稱量、稀釋的量應盡量準確，以減少誤差。23樣品稀釋時，每步稀釋應更換吸管或吸頭。操作中必須注意無菌操作，所用玻璃器皿必須是完全滅菌的，不得殘留有細菌或抑菌物質；剪刀、鑷子等也必須經消毒處理；樣品包裝應用75%酒精在包裝開口處擦拭后取樣。三、注意事項4在進行連續(xù)稀釋時，應將吸管內液體沿管壁流入，勿使吸管尖端伸入稀釋液內，以免吸管外部粘附的檢液溶于其內。56傾注用培養(yǎng)基應在46℃水浴內保溫，溫度過高會影響細菌生長，過低瓊脂易于凝固而不能與菌液充分混勻。如無水浴，應以皮膚感受較熱而不燙為宜。傾注培養(yǎng)基的量一般以15mL~20mL較為適宜，平板過厚可影響觀察，太薄又易于干裂。三、注意事項菌落總數檢驗結果及報告GB4789.2-20160201若其中一個平板有較大片狀菌落生長時，則不宜采用，而應以無片狀菌落生長的平板書作為該稀釋度的菌落數。若片狀菌落不到平板的一半，而其余一半菌落分布均勻，可計算半個平板后乘以2代表整個平皿菌落數。選取菌落數在30-300之間的平板作為菌落總數測定標準。1.平板菌落數的選擇一、菌落計算方法無明顯界限鏈狀菌落每個單鏈視為一個菌落（可采用覆蓋方式減少菌落蔓延，如對水產、蜂蜜樣品時）0201若只有一個稀釋度平板在30-300CFU之間，則計算兩平行平板的均數，乘以稀釋倍數報告之。若所有稀釋度都大于300，則按稀釋度最高的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之。2.計算方法一、菌落計算方法040305若所有稀釋度都小于30，則按稀釋度最低的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之。若所有稀釋度都無菌落生長，則以小于1乘以最低稀釋倍數報告之。若所有稀釋度均不在30-300之間，則以近30或300的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之。2.計算方法一、菌落計算方法06若有兩個連續(xù)稀釋度平板在30-300CFU之間，則按一下公式：2.計算方法一、菌落計算方法1:100（第一稀釋度）232,2441:1000（第二稀釋度）33,35舉例1：一、菌落計算方法1:1000（第一稀釋度）232,2441:10000（第二稀釋度）33,29舉例2：一、菌落計算方法例子稀釋度及菌落數描述菌落總數/(cfu/g)或（cfu/mL）報告方式/(cfu/g)或（cfu/mL）10-110-210-31多不可計16420有一個稀釋度在30~300之間1640016000/1.6×1042多不可計29546兩個稀釋度在30~300之間3775038000/3.8×1043多不可計多不可計313所有稀釋度都大于30031300310000/3.1×105427115所有稀釋度都小于30270270/2.7×1025000所有平板無菌落<10<106多不可計30512所有平板都不在30~300之間有大于300，有小于303050031000/3.1×104稀釋度的選擇及菌落數據報告方式一、菌落計算方法例子稀釋度及菌落數菌落總數/(cfu/g)或（cfu/mL）報告方式/(cfu/g)或（cfu/mL）10-110-210-31多不可計248，