中藥藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)講義2

中弟弟理學(xué)賣(mài)齡轉(zhuǎn)能

成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院藥理

2005,12

中藥藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)講義

主編曾南

主審沈映君

編委

曾南王平徐世軍謝宇環(huán)

王張楊旋熊靜悅楊莉娟

童妍周楨昊李佳川

第一章中藥藥理實(shí)驗(yàn)基本知識(shí)

一、中藥藥理實(shí)驗(yàn)報(bào)告基本要求

1.實(shí)驗(yàn)前應(yīng)仔細(xì)閱讀實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)，做到心中有數(shù)。結(jié)合實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，復(fù)習(xí)有理論知識(shí)。

科研實(shí)驗(yàn)還應(yīng)查閱有關(guān)文獻(xiàn)資料，吸取他人經(jīng)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)中應(yīng)認(rèn)真、仔細(xì)、耐心地觀

察所出現(xiàn)的各種現(xiàn)象，實(shí)事求是記錄，切忌夾雜主觀因素。應(yīng)堅(jiān)持一絲不茍，嚴(yán)謹(jǐn)

的科學(xué)作風(fēng)，決不允許抄襲別人的實(shí)驗(yàn)結(jié)果寫(xiě)報(bào)告。

2.教學(xué)實(shí)驗(yàn)往往每次是取一種動(dòng)物，一種方法寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告?？蒲袑?shí)驗(yàn)則應(yīng)事先設(shè)

計(jì)好實(shí)驗(yàn)動(dòng)物數(shù)，隨機(jī)分組。新藥研制還應(yīng)設(shè)空白與已知藥物對(duì)照組?？蒲袑?shí)驗(yàn)要

說(shuō)明的某一個(gè)作用，至少設(shè)2?3個(gè)以上計(jì)量組，要兩種以上的實(shí)驗(yàn)方法等。

3.實(shí)驗(yàn)條件應(yīng)詳細(xì)、明確，如儀器型號(hào)、試劑的濃度、中藥的品種、復(fù)方的組成、

提取方法、濃度和劑量、給藥途徑、動(dòng)物的來(lái)源、品種、體重、年齡、性別、如何

分組等都應(yīng)寫(xiě)出。

4.實(shí)驗(yàn)方法可簡(jiǎn)明扼要地?cái)⑹觯P(guān)鍵環(huán)節(jié)必須寫(xiě)清楚。科研報(bào)告還可以引用文

獻(xiàn)上的方法，以節(jié)省文字。

5.實(shí)驗(yàn)結(jié)果應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)獲得的數(shù)據(jù)進(jìn)行整理，對(duì)一個(gè)教學(xué)實(shí)驗(yàn)小組或全實(shí)驗(yàn)室的

數(shù)據(jù)進(jìn)行整理、歸納、分析和對(duì)比，盡量總結(jié)出各種圖表，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。

6.討論部分包括實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析、思考題的探討、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、實(shí)驗(yàn)方法及實(shí)驗(yàn)中

出現(xiàn)異?，F(xiàn)象的分析、認(rèn)識(shí)、體會(huì)和建議等。討論應(yīng)注意結(jié)合中醫(yī)藥理論?？蒲袌?bào)

告還可對(duì)比前人的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行分析，闡明從本實(shí)驗(yàn)獲得的新發(fā)現(xiàn)或尚存在問(wèn)題。

7.實(shí)驗(yàn)結(jié)束應(yīng)及時(shí)地整理和總結(jié)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，寫(xiě)出報(bào)告。實(shí)驗(yàn)報(bào)告內(nèi)容應(yīng)包括實(shí)驗(yàn)

名稱、目的、原理、材料（包括儀器、藥品、動(dòng)物）、方法、結(jié)果、討論及結(jié)論?？?/p>

研實(shí)驗(yàn)報(bào)告還應(yīng)有前言，說(shuō)明課題來(lái)源及本實(shí)驗(yàn)要解決的問(wèn)題；報(bào)告后應(yīng)附有參考

文獻(xiàn)。

二、中藥藥理實(shí)驗(yàn)樣品注意事項(xiàng)

在進(jìn)行單味中藥或復(fù)方中藥藥理實(shí)驗(yàn)時(shí)，由于中藥不同于西藥，多數(shù)不是單一

化學(xué)成分，而是多種成分的綜合作用或多種中藥的綜合作用。因此，在有效成分不

明確的情況下，制備藥理實(shí)驗(yàn)用的中藥樣品，應(yīng)注意多種因素的干擾，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)

果。

1.藥材選擇：中藥品種、產(chǎn)地、采收季節(jié)、炮制加工、霉變蟲(chóng)蛀等多種因素可以

影響重要藥理作用的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，所以制備中藥制劑應(yīng)首先對(duì)中藥樣品經(jīng)過(guò)鑒定，選

擇合格中藥材進(jìn)行制備。如果是研究中藥新藥，受試藥物應(yīng)是處方固定，生產(chǎn)工藝

及質(zhì)量穩(wěn)定，與臨床研究用藥劑型相同，并應(yīng)符合臨床用藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

2.口服制劑：整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)口服或十二指腸給藥，對(duì)藥材加工的中成藥制劑，如

沖劑、浸膏、丸、丹、片劑等，可用蒸用水或生理鹽水配制成水溶液劑、混懸劑，

必要時(shí)可加入增溶劑和助懸劑。糖衣片可先剝除包衣再配制。含揮發(fā)油的藥材應(yīng)先

蒸儲(chǔ)取得揮發(fā)油，然后助溶或制成乳劑、混懸劑進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。若含有麝香、牛黃

之類不便提取加工的藥材，可直接和水煎液配制成混懸液給藥。

藥效學(xué)研究

3.離體實(shí)驗(yàn)和靜脈注射：對(duì)于離體實(shí)驗(yàn)和注射給藥的中藥制劑，進(jìn)行藥效學(xué)研究

時(shí)，用不含賦形劑的提取物，應(yīng)注意藥物中的雜質(zhì)、不溶物質(zhì)、無(wú)機(jī)離子及酸堿度

對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾。如制劑中含鈣離子進(jìn)行心臟強(qiáng)心試驗(yàn)，含鉀離子進(jìn)行離體心臟和平

滑肌試驗(yàn)，含糅質(zhì)進(jìn)行局部止血試驗(yàn)和抗菌試驗(yàn)，含膽堿、腺甘、糅質(zhì)、和無(wú)機(jī)離

子靜脈注射進(jìn)行血壓試驗(yàn)和血流動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)，獲得陽(yáng)性結(jié)果應(yīng)持謹(jǐn)慎態(tài)度，常常不

能反映藥物的真實(shí)作用，可能為假陽(yáng)性結(jié)果。因此，最好經(jīng)過(guò)提取和處理。例如為

防止陽(yáng)離子干擾，提取物可通過(guò)陽(yáng)離子樹(shù)脂處理。必要時(shí)可提取有效部位或有效單

體進(jìn)行試驗(yàn)。血管內(nèi)注射如用乳劑實(shí)驗(yàn)，乳劑為油/水型分散相粒子直徑不能大于4

umo油性注射劑，混懸劑則不可靜脈給藥。腦室和脊椎腔（椎管）注射用注射劑必

須以純水為溶媒，不能加入任何助溶劑及抑菌劑。眼用混懸劑藥物微粒不能大于50

limo一些藥理實(shí)驗(yàn)為了除去供試藥物中的糅質(zhì)、樹(shù)脂、淀粉及其它雜質(zhì)，水提取物

加入高濃度的乙醇進(jìn)行沉淀處理，注意這樣同時(shí)也除去了多糖和蛋白質(zhì)，如果進(jìn)行

免疫試驗(yàn)時(shí)，可能是該被試藥物的有效成分。最好是根據(jù)中藥含有不同的有效成分,

采用不同的提取方法和處理方法，制備藥理試驗(yàn)樣品。

4.特殊成分處理：如果要研究某中藥的多肽、蛋白質(zhì)、酶、糖蛋白和其它不穩(wěn)定

成分的藥理作用，則需要在低溫下制成被試藥物或制成凍干劑。臨用時(shí)加注射用水

或生理鹽水進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

中藥樣品制備和配制的具體方法，可參考陳奇主編的《中藥藥理研究方法學(xué)》（人

民衛(wèi)生出版社，1993年）以及其它中藥化學(xué)、中藥藥劑學(xué)參考書(shū)。

三、中藥藥理實(shí)驗(yàn)制劑的濃度表示法

中藥單味和復(fù)方制劑，一般以生藥量濃度表示法。中藥制劑名稱在前，濃度在

后，通常以g/ml表示液體制劑，以g/g表示固體制劑。如生附子水煎液0.125g/ml

表示每毫升制劑中相當(dāng)于喊生附子量為0.125g,人生總皂忒25mg/片表示每片中含人

參總皂或25mgo

四逆湯水煎液3g/ml（附子9g、干姜9g、甘草12g,煎成10ml）,表示每毫升制

劑含有四逆湯總量的3g。

對(duì)分子量已經(jīng)明確的有效單體可用mol/L濃度表示。

四、常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇、捉持和給藥方法

藥理實(shí)驗(yàn)常用的動(dòng)物有小白鼠、大白鼠、豚鼠、家兔、貓和犬，某些實(shí)驗(yàn)還可

以用青蛙、蟾蛛以及鴿、雞、猴等。由于各種試驗(yàn)的觀察目的和內(nèi)容不同，對(duì)動(dòng)物

的選擇也有不同。下面介紹幾種常用動(dòng)物的選擇、捉拿固定法和給藥途徑。

（-）小白鼠

小白鼠是藥理實(shí)驗(yàn)常用的一種動(dòng)物，常用于藥物的篩選、LD50ED5。的測(cè)定、中樞神

經(jīng)系統(tǒng)藥試驗(yàn)、抗炎免疫藥試驗(yàn)、避孕藥、抗腫瘤以及抗衰老藥試驗(yàn)等。常用體重

18?22g。

1.捉拿方法右手提起鼠尾，放在粗糙物（如鼠籠）上面，輕向后拉其尾，用

左手拇指和食指捏住其頭部皮膚及雙耳，將小白鼠固定在掌中，使其腹部朝上，然

后以第四指和小指夾住鼠尾。

2.給藥途徑：

（1）經(jīng)口給藥法：

口服（P0）：將受試藥物放入飼料或溶于飲用水中，由動(dòng)物自由提取的一種方法。

缺點(diǎn)是攝入劑量不夠準(zhǔn)確。

灌胃（IG）：將小鼠固定后，右手持裝有灌胃針頭的注射器，自口角插入口腔，沿上

腭插入食道。如遇阻力，可將針頭抽出再另插，以免穿破食道或誤入氣管。灌注量

為0.l~0.3ml/10g體重。

（2）皮下注射（SC）：常在背部皮下注射。一手固定動(dòng)物，另一手注射，注射量為

0.TO.3ml/10g體重。

（3）肌內(nèi)注射（IM）：多注射于后肢股部肌肉，每側(cè)不超過(guò)0.1ml.

（4）腹腔注射（IP）：左手固定小鼠，右手持注射器，從下腹部外側(cè)進(jìn)針約夕5mm,

呈45°角刺入腹腔，注射量0.l~0.2ml/10g體重。

（5）靜脈注射（IV）：將小鼠至于固定筒內(nèi)，使尾巴露在外面，用70~75%酒精棉球

擦尾部，或?qū)⑹笪步?5~50℃溫水中。待尾部左右側(cè)靜脈擴(kuò)張后，左手拉尾，右手

進(jìn)針。注射量不超過(guò)0.5ml/只。

（二）大白鼠

用途與小白鼠相似，常用作抗關(guān)節(jié)炎藥物試驗(yàn)、血壓測(cè)定、利膽藥實(shí)驗(yàn)等。常用

體重150"200go

1.捉拿方法：基本上同小白鼠。將其放在粗糙物上，右手輕拉其尾，左手中指

和拇指放在大鼠左右前肢腋下，食指放入頸部，使大鼠伸開(kāi)兩前肢，便能將其握住。

2.給藥途徑：灌胃、腹腔注射、皮下注射、靜脈注射均同小白鼠，給藥量為小

白鼠的2~3倍。

（三）豚鼠

豚鼠對(duì)組胺很敏感，研究平喘藥和抗組胺藥時(shí)常選用。常用體重300~500g。

1.捉拿方法：豚鼠性溫和，不咬人。捉拿是以拇指和中指從豚鼠背部伸入腋下,

另一手放在臀部，托起即可。

2.給藥途徑：

（1）皮下、肌肉及腹腔注射。方法基本同小白鼠，給藥量分別為0.0.3飛.5ml、

2^4mlo

（2）靜脈注射：可選用后腿掌外側(cè)的靜脈或外頸靜脈進(jìn)行注射。采用前法，可由一

人抓持豚鼠并固定一條后腿，另一人剪去注射部位的毛，酒精棉球涂擦使血管擴(kuò)張。

以小兒頭皮針頭刺入血管推注藥物。注射量通常為2?4ml。

（四）家兔

家兔常用作觀察藥物對(duì)呼吸、心臟、血管、腸肌運(yùn)動(dòng)的影響，或用作解熱藥試

驗(yàn)及熱源檢查。雌兔常用作避孕藥研究及觀察藥物對(duì)子宮的影響，以用于長(zhǎng)期毒性

試驗(yàn)。常用體重為1.5~2.5kg。

1.捉拿方法：一手抓住頸背部皮膚，輕輕將兔提起，另一手托其臀部，或?qū)⑵?/p>

置于固定箱內(nèi)。

2.給藥途徑：

（1）灌胃：二人合作。一人坐好，將兔夾于兩腿之間，左手緊握雙耳、固定頭部，

右手抓住兩前肢。另一人將開(kāi)口器橫放于兔口中，壓在舌頭上面，用一8號(hào)導(dǎo)尿管

從開(kāi)口器中央孔插入口內(nèi)，再慢慢插入食道和胃。為避免誤入氣管，可將胃管外口

端放入清水中，如無(wú)氣泡出現(xiàn)，即證明在胃內(nèi)。然后灌入藥液，給藥量通常為10ml/kgo

（2）耳緣靜脈注射：用酒精棉球涂擦兔耳或手指彈兔耳，使局部血管擴(kuò)張。以手指

在耳根部壓住靜脈，然后注入藥液。注射量為2ml/kg。

（3）皮下、肌肉、腹腔注射方法與鼠類基本相同，最大給藥量分別為0.5ml,1.0ml

和5.Oml/kgo

（五）犬

犬常用于慢性實(shí)驗(yàn)，如高血壓試驗(yàn)治療、胃瘦、腸痰，用于觀察藥物對(duì)冠狀血

流的影響、利尿藥實(shí)驗(yàn)以及長(zhǎng)期毒性實(shí)驗(yàn)等。常用體重為5~15kg。

1.捉拿方法：一人用長(zhǎng)柄鉗式捕狗夾夾住犬頸，另一人將犬嘴綁住。綁嘴方法

是將繩帶從嘴下面繞上來(lái)，在鼻子上面打一結(jié)，再將繩帶繞到最下面打一結(jié)，然后

將繩帶拉到耳后頸部打結(jié)固定。

2.給藥途徑:

（1）腹腔注射：將犬夾住，用力將頭、頸部壓在地上。一人提起一側(cè)后肢并將藥液

注入腹腔。

（2）靜脈注射：多從后肢外側(cè)小隱靜脈或前肢皮下頭靜脈注射。以手或橡皮管把靜

脈向心端扎緊，使血管充盈，剪毛，酒精消毒，針向近心端刺入靜脈?；爻獒?biāo)ǎ?/p>

如見(jiàn)回血，表示針頭在靜脈內(nèi)，即可推注藥物。

五、中藥藥理實(shí)驗(yàn)研究設(shè)計(jì)的基本知識(shí)

實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)是實(shí)驗(yàn)過(guò)程的依據(jù)，是實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理的前提，也是提高實(shí)驗(yàn)研究質(zhì)量

的一個(gè)重要保證。嚴(yán)密而合理的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，不但可以對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果和誤差有比較準(zhǔn)確

的估計(jì)，最大限度地獲得豐富而可靠的資料，而且還可以減少人力，節(jié)省物理和時(shí)

間，提高工作效率。因此，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，從實(shí)驗(yàn)的研究過(guò)程來(lái)看，具有非常重要的意

義。

（-）實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的原則和內(nèi)容

1.明確實(shí)驗(yàn)研究目的：實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，首先應(yīng)考慮的就是明確實(shí)驗(yàn)研究目的。根

據(jù)實(shí)驗(yàn)的中心問(wèn)題，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)內(nèi)容設(shè)計(jì)，做到心中有數(shù)，有的放矢。

2.確定實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組：實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組之間除了處理不同，其他條件均應(yīng)

相同，保持實(shí)驗(yàn)條件均衡或齊同條件對(duì)比的原則。

3.確定實(shí)驗(yàn)方法、項(xiàng)目和指標(biāo)：在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中要求觀察的指標(biāo)、項(xiàng)目和方法

等都要有明確的規(guī)定和說(shuō)明。要注意選擇能反映被研究問(wèn)題的本質(zhì)（藥物作用及其

機(jī)理）的關(guān)鍵指標(biāo)；且能用客觀方法，定性或定量地加以測(cè)量，取得準(zhǔn)確可靠的數(shù)

據(jù)。

4.確定實(shí)驗(yàn)對(duì)象數(shù)量：中藥藥理實(shí)驗(yàn)對(duì)象包括正常動(dòng)物、麻醉動(dòng)物及病理模

型；既有整體動(dòng)物，又有離體器官、組織和細(xì)胞等。盡量研究各種接近中醫(yī)臨床的

動(dòng)物病理模型；按中醫(yī)治療原則，觀察中藥療效。動(dòng)物模型必須具備主要癥狀、體

征，經(jīng)化驗(yàn)和病理組織學(xué)等證實(shí)。但也不排除對(duì)正常動(dòng)物或離體器官等的作用分析。

由于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床觀察畢竟有差別，因此考慮用不同動(dòng)物多種模型，往往也是必

要的。要根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、方法和指?biāo)的要求決定實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、樣本及數(shù)量。在教學(xué)實(shí)

驗(yàn)中則可以將全實(shí)驗(yàn)各組結(jié)果合并統(tǒng)計(jì)處理，以保證樣本數(shù)量上的要求。一般小動(dòng)

物（大、小鼠）每組8?12只，較大動(dòng)物（兔、狗）每組5?8只，但總量應(yīng)符合統(tǒng)

計(jì)要求。

5.資料整理：將記錄的資料進(jìn)行必要的整理、分析，經(jīng)過(guò)正確的統(tǒng)計(jì)處理，作出

結(jié)論。

（二）實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的基本要求

實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的三大原則就是隨機(jī)、重復(fù)和對(duì)照。

1.隨機(jī)：就是使每一個(gè)體在實(shí)驗(yàn)中都有同等機(jī)會(huì)均衡地分配到各組或處理。

以減少主觀因素的影響或避免影響或避免偏性誤差，使樣本的生物差異均衡地分配

到各組中去。隨機(jī)話的手段可采用編號(hào)抽簽法，隨機(jī)數(shù)字表和計(jì)算器的隨機(jī)數(shù)字鍵。

近年提出“均衡下的隨機(jī)“，即將可控制的因素（如體重、性別等）先均衡地歸類分

檔，然后在每一檔中隨機(jī)地取出等量動(dòng)物分到各組，使難控制的因素（如活波、饑

飽、疲勞程度及性周期等）得到隨機(jī)化的分配。

2.重復(fù)：能在同樣條件下，把實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)出來(lái)，才算是可靠的實(shí)驗(yàn)。重復(fù)

除可增加可靠性外，也可知道實(shí)驗(yàn)變異情況。重復(fù)次數(shù)多少要根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求和性質(zhì),

主要藥效指標(biāo)穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)，一般重復(fù)2?3次。

3.對(duì)照：比較研究是科學(xué)實(shí)驗(yàn)不可少的條件，任何實(shí)驗(yàn)都要求都不能缺少對(duì)

照組研究，只有對(duì)照菜油比較的基礎(chǔ)。沒(méi)有比較，就難以鑒別，也就缺乏科學(xué)性，

所以實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)必須設(shè)立對(duì)照組。對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組之間除用以實(shí)驗(yàn)的藥物給予或不給

予處理的區(qū)別之外，其他條件，如實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、實(shí)驗(yàn)方法、儀器、環(huán)境及時(shí)間等應(yīng)一

致。特別注意在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組要求挑選種屬、性別、窩別、年齡、體

重、健康狀況等方面相同的動(dòng)物，保證的出藥物作用的準(zhǔn)確結(jié)果。

根據(jù)實(shí)驗(yàn)研究的內(nèi)容不同，可選用不同的對(duì)照形式，常用方法有以下4種：

（1）空白對(duì)照:是指在模擬實(shí)驗(yàn)組處理的“空白”條件下進(jìn)行觀察的對(duì)照。即

除不用被研究的藥物外，對(duì)照組的動(dòng)物要經(jīng)過(guò)同樣的處理，如給予生理鹽水或不含

藥物的溶媒。這種對(duì)照又可稱“陰性對(duì)照”。其優(yōu)點(diǎn)是可比性較好。有時(shí)，也在不給

任何處理的對(duì)象上取得觀測(cè)值，例如各生理常數(shù)，稱之為正常對(duì)照。

（2）標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照：指以標(biāo)準(zhǔn)值或正常值作為對(duì)照，在標(biāo)準(zhǔn)條件下，將已知經(jīng)典藥

物與實(shí)驗(yàn)藥進(jìn)行對(duì)照。又稱“陽(yáng)性對(duì)照”，必要時(shí)可設(shè)兩個(gè)作用機(jī)理不同的陽(yáng)性對(duì)照

藥物。

（3）同因素不同水平的對(duì)照：系在實(shí)驗(yàn)組分若干劑量組互為對(duì)照進(jìn)行對(duì)比，說(shuō)

明量效關(guān)系或藥效的劑量依賴性，一般設(shè)2?3個(gè)劑量組。

（4）自身前后對(duì)照：上述三種對(duì)照組都屬于組間對(duì)照。有的實(shí)驗(yàn)可在對(duì)象自身

上進(jìn)行給藥前后的對(duì)照比較，其前提是前后條件一致，且指標(biāo)對(duì)時(shí)間穩(wěn)定。這在急

性實(shí)驗(yàn)時(shí)易于滿足，但慢性實(shí)驗(yàn)時(shí)，難以保證，故尚需作為組間對(duì)照來(lái)說(shuō)明問(wèn)題。

（三）常用的設(shè)計(jì)方法

1.單組比較設(shè)計(jì)：這種設(shè)計(jì)是以動(dòng)物作為自身對(duì)照，即在同一個(gè)體上觀察給藥前

后某中觀測(cè)指標(biāo)的變化，如藥物對(duì)體重、血壓、體溫等的給藥前后比較。本法優(yōu)點(diǎn)

是能消除個(gè)體生物差異。

2.配對(duì)比較設(shè)計(jì)：這種設(shè)計(jì)是以動(dòng)物按性別、體重、年齡、窩別或其他有關(guān)因素

加以配對(duì)，以基本相同的兩個(gè)動(dòng)物為一對(duì)，配成若干對(duì)，然后將每一對(duì)動(dòng)物隨機(jī)分

配于兩組中。兩組的動(dòng)物數(shù)、性別、體重等情況基本相同，取得均衡減少誤差及動(dòng)

物的個(gè)體差異。

3.隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)：是配對(duì)比較設(shè)計(jì)法的擴(kuò)大。將全部動(dòng)物按體重、性別及在其他

條件等分為若干個(gè)組。每組中動(dòng)物數(shù)目應(yīng)與擬劃分的組數(shù)相等或?yàn)槠浔稊?shù)；體質(zhì)條

件相似；再把每個(gè)區(qū)組中的每一只動(dòng)物進(jìn)行編號(hào)，利用隨機(jī)數(shù)字表將其分配到各組。

如把小鼠24只，按隨機(jī)區(qū)組分成A、B、C、D4組。先按小鼠的性別、年齡、

體重等分成6個(gè)區(qū)組，每組有4只情況相似的小鼠。依次編號(hào)，第一區(qū)組4只小鼠

編為1、2、3、4號(hào)，第二組編為5、6、7、8號(hào)，余類推。接著在隨機(jī)數(shù)字表任意

指定一個(gè)起點(diǎn)，如指定20行第一個(gè)數(shù)字為起點(diǎn)，從橫的方向抄錄數(shù)字，先抄三個(gè)數(shù)

字31、16、93為隨機(jī)分配第一區(qū)組小鼠之用。然后將這三個(gè)數(shù)字分別以4（組數(shù)）、

3、2（3、2為余下組數(shù)）除之求余數(shù)，若能整除是，余數(shù)取除數(shù)。則第一個(gè)數(shù)31,

除以4,余數(shù)為3,將1號(hào)鼠分到C組（第三組）；第二個(gè)數(shù)16,除以3,余數(shù)為1,

將2號(hào)分到A、B、D、三個(gè)組的A組（第一組）；第三個(gè)數(shù)3,除以2,余數(shù)為1,將

3號(hào)鼠分到剩余B、D組B組（第二組）；最后將4號(hào)鼠分到剩余D組（第四組）。第

一區(qū)分配完后，再繼續(xù)抄錄隨機(jī)數(shù)字，用相同方法將其余各區(qū)組小鼠分到各組中（第

20行數(shù)字抄錄完后繼續(xù)抄第21行數(shù)字）。結(jié)果如表2-1。

A組動(dòng)物號(hào)為：2、6、11、15、17、22；

B組動(dòng)物號(hào)為：3、8、10、14、19、24；

C組動(dòng)物號(hào)為：1、7、9、13、20、23；

D組動(dòng)物號(hào)為：4、5、12、16、18、21；

4.完全隨機(jī)設(shè)計(jì)：就是將每個(gè)實(shí)驗(yàn)對(duì)象隨機(jī)分配在各組，并從個(gè)組實(shí)驗(yàn)結(jié)果的

比較中得出結(jié)論。通常用隨機(jī)數(shù)進(jìn)行完全隨機(jī)化分組的方法。此法的優(yōu)點(diǎn)是設(shè)計(jì)和

統(tǒng)計(jì)的處理都較簡(jiǎn)單，但隸書(shū)較少時(shí)，往往不能保證組間的一致性。

設(shè)有小鼠14只，用隨機(jī)數(shù)字表將其分成兩組。先將小鼠編為1、2、3……14號(hào),

然后任意指定隨機(jī)數(shù)字表的某一行某一數(shù)字開(kāi)始。如自第6行第一個(gè)數(shù)開(kāi)始，按橫

的方向抄錄，得16……23第14個(gè)數(shù)。令單數(shù)代表A組，結(jié)果列入A組的小鼠有8

只，列入B組的小鼠有6只，如表2-2所示。

按上表分配，兩組鼠數(shù)不相等，如要使其相等，需將A組小鼠減少1只，分進(jìn)B

組。應(yīng)將哪1只鼠分進(jìn)B組，可用隨機(jī)數(shù)字表，從表中第6行里繼續(xù)抄錄一個(gè)數(shù)字

78。因?yàn)闅wA入組的小鼠有8只，故以8除之，得余數(shù)6。故把第六個(gè)A,即動(dòng)物編

號(hào)為2的小鼠分進(jìn)B組。經(jīng)過(guò)調(diào)整后兩組小鼠的分配是：

A組動(dòng)物編號(hào)為3、5、6、8、11、13、14；

B組動(dòng)物編號(hào)為1、2、4、12、7、9、10；

如隨機(jī)分成3組，設(shè)有動(dòng)物15只，編號(hào)后應(yīng)用隨機(jī)數(shù)字表分配。如果從第十一

行第1個(gè)數(shù)字開(kāi)始，按斜角線抄下15個(gè)數(shù)字，每個(gè)數(shù)均以3除之，用余數(shù)1、2、3

代表A、B、C組結(jié)果分入A組的動(dòng)物6只，分入B組的動(dòng)物4只，分入C組的動(dòng)物5

只。結(jié)果如表2-3。

如3組動(dòng)物數(shù)相等，則需將原歸A組的6只動(dòng)物中的1只改分入B組。可以隨

機(jī)數(shù)字表繼續(xù)按斜角線抄錄一個(gè)數(shù)字，得60,以6除之，余數(shù)為零，視，就可以將

第六個(gè)A,即編號(hào)為12的動(dòng)物改為B組。

A組動(dòng)物編號(hào)為3、4、6、9、10；

B組動(dòng)物編號(hào)為2、7、8、11、12；

C組動(dòng)物編號(hào)為1、5、13、14、15；

按照完全隨機(jī)設(shè)計(jì)所得資料，如為兩組對(duì)比的測(cè)量資料，可用成組比較的測(cè)驗(yàn)。

如果兩組以上的資料，可以用相應(yīng)的方差分析處理。

5.拉丁方設(shè)計(jì)：指由拉丁字母所組成的正方形排列，在同一橫行與同一直列中

都沒(méi)有重復(fù)的字母，適用于多因素的均衡隨機(jī)。在藥效統(tǒng)計(jì)分析中拉丁方是一種效

率很高的設(shè)計(jì)方法，可以用較少例數(shù)實(shí)驗(yàn)獲得較多的信息。如測(cè)定某藥的作用，要

求用4種劑量，1、2、3、4號(hào)動(dòng)物均各注射1次，而且在第一、二、三、四周每次

注射時(shí)都必須有這4種劑量，并要避免給藥時(shí)間先后帶來(lái)的影響。一般先將4種劑

量編成A、B、C、D四個(gè)號(hào)碼，再按4X4拉丁方進(jìn)行。每個(gè)動(dòng)物（縱列）沒(méi)有重復(fù)

使用的劑量，同一日期（橫行）也沒(méi)有重復(fù)使用的劑量。這樣既可控制動(dòng)物間的個(gè)

體差異，也可避免了注射日期先后帶來(lái)的實(shí)驗(yàn)誤差。若樣本是5,6……個(gè)，則可采

用5X5或6X6拉丁方等。同一拉丁方可方便的轉(zhuǎn)化成種形式，如：

6.正交設(shè)計(jì)：正交設(shè)計(jì)是用“正交表”作為因素分析的一種高效設(shè)計(jì)法，在中

藥復(fù)方研究中頗為重要，可分析其中組分的主次，各藥間的交互作用，找出最佳組

合和最優(yōu)劑量。例如，某中藥付方有甲、乙、丙、丁4藥組成，每藥可選用大、中、

小3個(gè)劑量。欲分析各藥對(duì)付方療效的影響，可使用“Lg（31）正交表”。L表示“正

交表”，9表示作為9次實(shí)驗(yàn)，3’表示4種因素（甲、乙、丙、丁4味中藥）各3個(gè)

水平（大、中、小3個(gè)劑量）。按理有81種組合（3'），應(yīng)進(jìn)行81次實(shí)驗(yàn)，但喲奶奶

感正交設(shè)計(jì)作9次實(shí)驗(yàn)即可解決問(wèn)題，可稱高效率的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。

從表2-4可以看出：甲藥用大劑量較大為好，是主藥，大小劑量間藥效之比

（Ea/E^.15/1.15=1.87）最大，乙藥大劑量為好；丙藥小劑量（水平2）為宜，丁藥

不用更好。因此，可選擇“甲、乙大劑量，丙小量而不用丁”的組合（盡管這一組

合在實(shí)驗(yàn)室中并未顯現(xiàn)）來(lái)安排復(fù)試，加以驗(yàn)證作為可能的最佳方案。

7.序貫設(shè)計(jì)：序貫設(shè)計(jì)系循環(huán)逐個(gè)或逐對(duì)地進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，適用于能及時(shí)判斷死活

或在較短時(shí)間內(nèi)作出反應(yīng)的藥物。可同時(shí)用作圖法或查表法隨時(shí)了解統(tǒng)計(jì)結(jié)果，一

旦能做出統(tǒng)計(jì)結(jié)論即可停止實(shí)驗(yàn)，因此可節(jié)省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和時(shí)間，一般20?30只動(dòng)物

即可測(cè)定LDs。。具體例證請(qǐng)參閱本書(shū)實(shí)驗(yàn)16-1。

8.優(yōu)選法設(shè)計(jì)：是一快速、簡(jiǎn)便的最優(yōu)條件選擇法。設(shè)計(jì)方法有多種，如單因

素優(yōu)選法、對(duì)分法等。前者是用于選擇最佳劑量和濃度的常用法，對(duì)分法在中藥復(fù)

方拆方研究中廣泛應(yīng)用，可借此確定各組分的藥理作用并找出其中的有效成分。

9.順序均衡隨機(jī)設(shè)計(jì)：主要用于中藥臨床研究。是先將對(duì)藥效影響較大的因素

（如病情、病程等）列在分組表左側(cè)，使這些因素在各組中分布均衡，再按就診順

序隨機(jī)分組的設(shè)計(jì)法。

（四）中藥藥理實(shí)驗(yàn)研究設(shè)計(jì)的特殊性

中藥藥理實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)應(yīng)注意其特殊性。尤其是要以中醫(yī)藥的基本理論為指導(dǎo)，開(kāi)

創(chuàng)既保留中醫(yī)藥傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)，又應(yīng)有中西醫(yī)藥結(jié)合特色的方法。

中藥研究的方法、內(nèi)容及藥理作用的闡明，與一般藥物的研究不盡相同，通過(guò)

長(zhǎng)期的醫(yī)療實(shí)踐，中藥逐步積累和總結(jié)一套具有獨(dú)特體系的藥物作用規(guī)律，如藥物

的四氣五味、歸經(jīng)、升降沉浮、補(bǔ)瀉及配伍等。既要運(yùn)用現(xiàn)代科學(xué)原理和方法對(duì)這

些規(guī)律進(jìn)一步加以論證和闡明，又應(yīng)注意繼承與發(fā)展傳統(tǒng)醫(yī)藥的特點(diǎn)。中藥藥理實(shí)

驗(yàn)設(shè)計(jì)需要考慮下列各點(diǎn)。

1.中藥質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)化，避免各種影響因素：中藥生藥品種復(fù)雜，如不經(jīng)過(guò)品種

鑒定，其實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果就很不可靠。還有不同的藥用部位、產(chǎn)地、采集季節(jié)、貯藏

以及加工炮制等可能會(huì)影響到其主要成分的含量和藥理作用。因此，有時(shí)雖為同一

名稱的中藥，其實(shí)驗(yàn)結(jié)果各地報(bào)導(dǎo)可能不同，甚至相反。除了考慮實(shí)驗(yàn)方法、實(shí)驗(yàn)

對(duì)象的差異外，上述各因素也應(yīng)重視。

2.結(jié)合中醫(yī)藥基本理論，注意中醫(yī)藥特色：中藥藥理的實(shí)驗(yàn)研究，目前尚未形

成獨(dú)立的系統(tǒng)方法，可以應(yīng)用現(xiàn)代藥理實(shí)驗(yàn)方法來(lái)進(jìn)行。但若脫離了中醫(yī)藥理論與

傳統(tǒng)的經(jīng)驗(yàn)，則往往丟失了中醫(yī)藥的特色。若只能強(qiáng)調(diào)提取中藥的有效成分，采用

分析的實(shí)驗(yàn)方法，就容易忽視中藥復(fù)方與整體的綜合性實(shí)驗(yàn)研究。中醫(yī)的辨證論治

與組成復(fù)方用藥的特點(diǎn)，在中藥藥理實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中應(yīng)予重視。目前比較成熟的方法創(chuàng)

制類似臨床各“證”的動(dòng)物病理或生理模型來(lái)實(shí)驗(yàn)研究中藥及復(fù)方的藥理作用。例

如腎陽(yáng)虛表現(xiàn)為下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)軸的功能下降，運(yùn)用補(bǔ)補(bǔ)腎陽(yáng)藥治療后上

述功能可得到恢復(fù)，這樣既論證了藥理作用，又闡明了中醫(yī)藥理論，對(duì)中醫(yī)腎陽(yáng)虛

與補(bǔ)腎陽(yáng)藥的實(shí)質(zhì)有所了解，有利于保持與發(fā)展中醫(yī)藥特色。

3.加強(qiáng)多學(xué)科配合，理論密切聯(lián)系實(shí)際：中藥藥理研究既驗(yàn)證中醫(yī)藥理論與經(jīng)

驗(yàn)，又要有所創(chuàng)新。對(duì)單味中藥或復(fù)方進(jìn)行初篩時(shí)，可從粗制著手，進(jìn)一步可深入

探討其有效成分，發(fā)現(xiàn)新的藥理作用與用途。改進(jìn)制劑，降低毒性，豐富與提高中

醫(yī)藥水平。這些應(yīng)與臨床使用結(jié)合，與多學(xué)科配合才能實(shí)現(xiàn)。

4.采用現(xiàn)代化的儀器設(shè)備與方法，不斷提高實(shí)驗(yàn)研究的質(zhì)量與水平：中藥藥理

的實(shí)驗(yàn)研究除采用傳統(tǒng)的一般藥理等指標(biāo)外，尚需要運(yùn)用生化、免疫、分子生物、

生物物理及臨床等新方法，采用各種現(xiàn)代化的儀器設(shè)備，放射性同位素、高效液相

分析儀、電子計(jì)算機(jī)等高新技術(shù)，觀察指標(biāo)從整體、組織器官、細(xì)胞、亞細(xì)胞和分

子向縱向發(fā)展，有利于闡明中藥作用的本質(zhì)和規(guī)律。例如分析“證”的病理生理模

型時(shí)，常測(cè)定各組組織器官cAMP、cGMP、前列腺素及各種遞質(zhì)的含量，體內(nèi)或排泄

物中腎上腺皮質(zhì)類固醇的含量等，這些都必須借助現(xiàn)代化的手段，認(rèn)識(shí)才能不斷深

化。

第二章中藥藥理學(xué)總論實(shí)驗(yàn)

中藥藥理學(xué)是在中醫(yī)藥理論指導(dǎo)下運(yùn)用現(xiàn)代科學(xué)方法研究中藥和機(jī)體（包括病

原體）相互作用及其作用規(guī)律的科學(xué)。中藥藥理學(xué)的研究?jī)?nèi)容主要包括兩個(gè)方面?

①研究中藥對(duì)機(jī)體的作用、作用機(jī)理以及產(chǎn)生作用的物質(zhì)基礎(chǔ)（化學(xué)成分），即中藥

藥效學(xué)的研究；②研究機(jī)體對(duì)中藥的處理，包括中藥的吸收、分布、轉(zhuǎn)化和排泄，

即中藥藥物動(dòng)力學(xué)的研究。

一、中藥藥效學(xué)的研究

中藥藥效學(xué)除了研究中藥的基本作用和作用方式以外，一個(gè)重要研究方向是對(duì)

影響中藥發(fā)揮療效的因素的探討。影響中藥藥理作用的因素有諸多方面。藥物因素

包括藥物的基原、產(chǎn)地、采收季節(jié)、貯藏、炮制、劑型、制劑、劑量等；機(jī)體因素

包括年齡、性別、精神狀態(tài)、遺傳情況等生理因素和肝、腎功能障礙、病理狀態(tài)等

病理因素；同時(shí)環(huán)境因素也不容忽視。這些因素對(duì)中藥藥理作用都會(huì)產(chǎn)生明顯的影

響。孫⑵

中藥炮制是中藥制藥中不可或缺的傳統(tǒng)工藝。中藥在應(yīng)用前或制成各種劑型前都

要進(jìn)行一般或特殊的炮炙，炮炙后其化學(xué)成分的質(zhì)和量都會(huì)發(fā)生一定的改變，其藥

理作用的強(qiáng)弱和作用的方向亦隨之有一定的改變。陳嘉謨《本草蒙筌》中提到“酒

制升提；姜制發(fā)散；入鹽走腎而軟堅(jiān)；用醋注肝而住痛……”炮制可從以下方面影

響藥理作用：

1.消除或降低毒性如附子中含有烏頭堿，對(duì)心臟有毒性，可致心律失常甚至

心室纖維顫動(dòng)，經(jīng)過(guò)浸漂、煎煮等炮制過(guò)程，使烏頭堿分解破壞、毒性降低，但附

子中的強(qiáng)心成分消旋去甲烏藥堿耐熱，故熟附子保留了強(qiáng)心作用，而毒性較生附子

大大降低。

2.增加藥效如延胡索的有效成分為生物堿，水煎液溶出量甚少，醋炒后，延

胡索中生物堿與醋酸結(jié)合成易溶于水的醋酸鹽，故水煎液溶出的總生物堿含量增加,

故鎮(zhèn)痛作用加強(qiáng)。

3.加強(qiáng)或突出某一作用如生大黃主要有瀉下作用，炮制后的制大黃出現(xiàn)較強(qiáng)

抗茵作用。因?yàn)樯簏S瀉下的主要成分為結(jié)合型懣:昔（如番瀉昔A、B、C、D等），其

游離昔不具致瀉作用，是抗菌成分（如大黃酸、大黃素、蘆薈大黃素等）。酒大黃中

結(jié)合型慈昔損失1/4,熟大黃中結(jié)合懣:昔減少1/2,大黃炭中結(jié)合懣:昔減少4/5,故

炮制品的瀉下作用都比生大黃為弱，而抗茵作用等增強(qiáng)。

研究炮制對(duì)中藥作用影響的思路大體如下：針對(duì)藥物的作用選用相應(yīng)的動(dòng)物模

型，分組，分別給以炮制前后或不同炮制方法的藥物，觀察并記錄藥物的作用，采

用適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計(jì)學(xué)方法比較不同給藥組之間藥物作用的差異，最終得出相關(guān)結(jié)論。

二、中藥藥物動(dòng)力學(xué)的研究

中藥藥物動(dòng)力學(xué)研究，其研究對(duì)象是中藥，是指在中醫(yī)藥理論指導(dǎo)下，利用動(dòng)

力學(xué)的原則與數(shù)學(xué)處理方法，定量地描述中藥有效成分、有效部位、單味中藥和中

藥復(fù)方通過(guò)各種給藥途徑進(jìn)入機(jī)體后的吸收、分布、代謝和排泄等過(guò)程的動(dòng)態(tài)變化

規(guī)律。一般而言，對(duì)中藥的吸收、分布、代謝和排泄各有其相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)方法，但目

前主要是通過(guò)對(duì)中藥對(duì)數(shù)藥物濃度-時(shí)間曲線（C-T曲線）的測(cè)定，來(lái)間接推算出藥

物的大略動(dòng)力學(xué)特性。目前主要C-T曲線測(cè)定方法有如下幾種：

1.血藥濃度法

以中藥中的一種或幾種成分為指標(biāo)成分，測(cè)定其血藥濃度，建立濃度一時(shí)間曲

線，得到藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，以此來(lái)代表整個(gè)中藥的藥動(dòng)學(xué)規(guī)律。這種方法操作簡(jiǎn)單，測(cè)

定快速，并且具有靈敏度較高、專一性強(qiáng)、重現(xiàn)性好，回收率高等優(yōu)點(diǎn)。采用血藥

濃度法對(duì)中藥藥代動(dòng)力學(xué)進(jìn)行研究的關(guān)鍵問(wèn)題是，一要解決如何選定中藥中的指標(biāo)

成分（一個(gè)或多個(gè)），用于表示整個(gè)中藥的藥物動(dòng)力學(xué)指標(biāo)；二是如何利用先進(jìn)的科

學(xué)儀器和檢測(cè)手段，對(duì)指標(biāo)成分（包括代謝產(chǎn)物）迸行定性定量測(cè)定。常用測(cè)定已

知成分在血液中的分析方法有分光光度法、原子吸收光譜法、薄層層析法、薄層掃

描法、高效液相色譜法、氣相色譜法、核磁共振、放射性同位素法、放射性免疫法、

酶聯(lián)免疫法和多種聯(lián)用技術(shù)等。該方法需要注意以下兩個(gè)方面：①中藥主要成分在

復(fù)方和單味藥中同化學(xué)純品的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)的差異；②中藥中各個(gè)成分之間的相互作

用，是否由于配伍了其它成分使其藥動(dòng)學(xué)參數(shù)發(fā)生改變等方面進(jìn)行研究。

2.生物效應(yīng)法

70年代Smolen等提出了以藥理效應(yīng)指標(biāo)測(cè)定藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，以藥物的效應(yīng)為測(cè)定

指標(biāo)來(lái)間接反映藥物服用后的體液濃度，并依照相應(yīng)的轉(zhuǎn)化原則來(lái)計(jì)算藥物的動(dòng)力

學(xué)參數(shù)。目前此方法己廣泛用于中藥藥動(dòng)學(xué)研究中，主要包括藥理效應(yīng)法、藥物累

積法和微生物法。生物效應(yīng)法研究中藥的藥代動(dòng)力學(xué)更加符合中醫(yī)中藥基本理論，

體現(xiàn)了中藥的整體觀。但是中藥藥理作用具有多樣性，實(shí)驗(yàn)中如何選擇最合理的考

察指標(biāo)是個(gè)關(guān)鍵問(wèn)題，而且本方法由個(gè)體差異較大，靈敏度和重現(xiàn)性不如血藥濃度

法。

2.1藥理效應(yīng)法

是以藥效為指標(biāo)測(cè)定藥動(dòng)學(xué)參數(shù)的方法。其基本思想是假定藥物在體內(nèi)呈線性

配置，藥物在作用部位的濃度與給藥量成正比，而作用部位的濃度又與藥物效應(yīng)強(qiáng)

度有對(duì)應(yīng)的函數(shù)關(guān)系。給藥后某一時(shí)刻作用部位藥物濃度與藥效強(qiáng)度的函數(shù)關(guān)系，

可用給藥量與藥效強(qiáng)度的函數(shù)關(guān)系來(lái)表示，由此進(jìn)行摸型分析和推算藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。

2.2藥物累積法

又稱毒理效應(yīng)法，觀測(cè)指標(biāo)為藥物的毒性反應(yīng)，認(rèn)為血藥濃度與藥物蓄積性相

關(guān)聯(lián)，而藥物蓄積性與動(dòng)物急性死亡率相關(guān)聯(lián)，即給多組動(dòng)物按不同間隔時(shí)間給藥,

以不同時(shí)間體存百分率的動(dòng)態(tài)變化來(lái)反映藥物血藥濃度的變化，依此推算藥動(dòng)學(xué)參

數(shù)。主要適用有毒中藥的安全性評(píng)價(jià)研究。

2.3微生物法

又稱瓊脂擴(kuò)散法，其原理主要是有試驗(yàn)菌株的瓊脂平板中抗菌擴(kuò)散產(chǎn)生的抑菌

環(huán)的直徑大小與抗菌藥物濃度的對(duì)數(shù)呈線性關(guān)系。具有抗菌活性的中藥動(dòng)物或人體

服用后，在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)采取體液樣品，然后將各樣品加入具有適宜試驗(yàn)菌株的瓊脂

培養(yǎng)板中，通過(guò)測(cè)定抑菌環(huán)的直徑來(lái)反映體液中樣品濃度，然后按照藥代動(dòng)力學(xué)原

理確定房室模型，并計(jì)算有關(guān)的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)⑶。微生物法方法簡(jiǎn)單，指標(biāo)明確，操作

容易，重復(fù)性較高。但是生物樣品中的成分濃度較低，很難達(dá)到抑菌濃度，特異性

不高；而且測(cè)定結(jié)果中包括具有抗菌作用的代謝產(chǎn)物。因此本法在中藥藥動(dòng)學(xué)研究

中，還處于摸索階段。

國(guó)內(nèi)目前對(duì)中藥藥代動(dòng)力學(xué)研究大多數(shù)是采用血藥濃度法，其核心為能準(zhǔn)確、

精密、可重復(fù)的測(cè)定或表達(dá)出藥物的體液濃度。對(duì)藥物體液濃度測(cè)定方法的評(píng)價(jià)主

要包括了以下同個(gè)方面的內(nèi)容⑷：

①特異性特異性即專一性，是評(píng)價(jià)方法優(yōu)劣的關(guān)鍵，即所建立的方法必須特

異地測(cè)定待測(cè)物質(zhì)，不得被生物機(jī)體內(nèi)源性化合物或非指標(biāo)成分的藥物成分所干擾。

②精密度精密度又稱之為重復(fù)性，測(cè)得的結(jié)果應(yīng)能夠重復(fù)。精密度用相對(duì)標(biāo)

準(zhǔn)差即變異系數(shù)(CV)來(lái)表示。對(duì)同一樣品同一方法多次測(cè)定，得標(biāo)準(zhǔn)差和均值的百

分比值即為CV。除了做日內(nèi)精密度外，最好應(yīng)做日間精密度。前各系指同一天內(nèi)對(duì)

同一樣品多次測(cè)定，計(jì)算平均值、標(biāo)準(zhǔn)差及變異系數(shù)。后者系指連續(xù)數(shù)天，每天測(cè)

定同一樣品計(jì)算平均值、標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)。最好同時(shí)做高中低三種以上濃度的樣

品。

③準(zhǔn)確性準(zhǔn)確性用于衡量測(cè)定結(jié)果與真實(shí)值之間的符合程度，一個(gè)良好的方

法所得結(jié)果應(yīng)與真實(shí)值一致或十分接近。準(zhǔn)確性多用回收率來(lái)表示?；厥章氏祵⒋?/p>

測(cè)定的中藥指標(biāo)成分純品加入到生物樣品中、以測(cè)得的含量與加入的量相比求出回

收率。求回收率時(shí)應(yīng)在線性范圍內(nèi)選擇高中低三種不同濃度同時(shí)測(cè)定。回收率在90%

-100%為好，但一般應(yīng)大于75%。

④線性范圍在藥物濃度測(cè)定和計(jì)算中，藥物濃度一定范圍內(nèi)與測(cè)定信號(hào)具有

線性關(guān)系，其相關(guān)系數(shù)一般應(yīng)為0.99。同時(shí)方法的線性范圍應(yīng)至少為20倍，即通過(guò)

實(shí)驗(yàn)測(cè)出的具有線性關(guān)系的濃度范圍中最高濃度應(yīng)為最低濃度的20倍以上。工作曲

線應(yīng)至少由5個(gè)濃度組成，并應(yīng)覆蓋整個(gè)待測(cè)定生物樣品的濃度。

⑤檢出限檢出限系指用該方法最低能測(cè)得的樣品中藥物的含量，它取決于

測(cè)定技術(shù)的靈敏度以及樣品制備過(guò)程中稀釋或濃縮的程度。多數(shù)藥物的有效血藥濃

度在每毫升毫微克或微克水平，測(cè)定方法的檢出限必須在這一水平內(nèi)。同時(shí)檢測(cè)限

還應(yīng)滿足至少能檢測(cè)出3-5個(gè)半衰期或能檢測(cè)出最大血藥濃度l/10-l/20o

⑥取樣量系指為測(cè)出有效藥物體液濃度所需的生物樣品的量。它取決于方

法的檢出限及血藥濃度。如檢出極限高，血藥濃度低，則取樣量大，表明方法不可

取。

實(shí)驗(yàn)2.1延胡索和醋制延胡索鎮(zhèn)痛作用的比較（熱板法）

【目的】學(xué)習(xí)熱板法鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)方法；觀察延胡索和醋制延胡索鎮(zhèn)痛作用的差異。

【原理】將小鼠置于恒溫的熱板上，以熱刺激小鼠足部產(chǎn)生疼痛反應(yīng)（舔后爪），

通過(guò)測(cè)定小鼠痛閾（出現(xiàn)疼痛反應(yīng)即舔后爪時(shí)間），通過(guò)延胡索組與醋制延胡索小

鼠痛閾的差異，判定藥物有無(wú)鎮(zhèn)痛作用。

【器材】1ml注射器、鼠籠、天平、小鼠熱板儀。

【藥品】延胡索水煎醇沉液4g/ml、醋制延胡索水煎醇沉液4g/ml、生理鹽水。

【動(dòng)物】小鼠，雌性，體重18?22go

【方法】

1、準(zhǔn)備工作調(diào)定熱板儀溫度使之恒定于55±0.5℃。

2、小鼠的選擇及正常痛閾的測(cè)定取小鼠數(shù)只，依次熱板儀上，按“開(kāi)始”

鍵記錄時(shí)間。自放入熱板儀至出現(xiàn)舔后足所需的時(shí)間（秒）作為該鼠的痛閾

值。凡在30秒內(nèi)不舔足或逃避者棄置不用。取篩選合格的小鼠15只，隨機(jī)

分為3組，各鼠編號(hào)后重復(fù)測(cè)其正常痛閾值一次，將所測(cè)兩次正常痛閾平均

值作為該鼠給藥前痛閾值。

3、給藥及給藥后痛閾值測(cè)定按0.2ml/10g腹腔注射給藥，第1組給予延胡索

水煎醇沉液，第2組給予醋制延胡索水煎醇沉液，第3組給予生理鹽水作為

對(duì)照。給藥后lOmin、30min后各測(cè)小鼠痛閾值1次。若放入燒杯內(nèi)60秒仍

無(wú)反應(yīng)，應(yīng)將小鼠取出，痛閾值以60秒計(jì)。

4、實(shí)驗(yàn)完畢后，按下列公式計(jì)算不同時(shí)間的各鼠痛閾提高百分率：

給藥后平均痛閾值-給藥前平均痛閾值

痛閾提高百分率（％）=--------------------------------------X100%

給藥前平均痛閾值

【結(jié)果】

1、將延胡索水煎醇沉組與生理鹽水組痛閾提高百分率進(jìn)行組間t檢驗(yàn)，并比較

各組平均值，確定延胡索有無(wú)鎮(zhèn)痛作用；

2、將醋制延胡索水煎醇沉組與生理鹽水組痛閾提高百分率進(jìn)行組間t檢驗(yàn)，并

比較各組平均值，確定延胡索有無(wú)鎮(zhèn)痛作用；

3、將延胡索水煎醇沉組與醋制延胡索水煎醇沉組痛閾提高百分率進(jìn)行組間t檢

驗(yàn)，并比較各組平均值，確定炮制前后藥物鎮(zhèn)痛作用的差異；

【注意事項(xiàng)】

1、小鼠以雌性為好，因雄性小鼠受熱后陰囊易松弛觸及熱板；

2、室溫對(duì)本實(shí)驗(yàn)有一定影響，以15?20°C為宜，過(guò)低小鼠反應(yīng)遲鈍，過(guò)高則

小鼠過(guò)于敏感易引起跳躍，影響結(jié)果準(zhǔn)確性；

3、正常小鼠放入熱板后易出現(xiàn)不安、舉前肢、舔前足、踢后肢等現(xiàn)象，這些動(dòng)

作不能作為疼痛指標(biāo)，只有舔后足才作為疼痛指標(biāo)。

【思考題】

根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果討論炮制前后延胡索產(chǎn)生鎮(zhèn)痛作用差異的原因。

實(shí)驗(yàn)2.2附子炮制前后致小鼠中毒表現(xiàn)的影響

【目的】觀察生附子和制附子致小白鼠的死亡數(shù)量，評(píng)價(jià)炮制對(duì)附子毒性的作用。。

【器材】1ml注射器、鼠籠、天平。

【藥品】生附子水煎醇沉液0.5g/ml、制附子水煎醇沉液0.5g/ml。

【動(dòng)物】小鼠，雌雄各半，體重18?22go

【方法】小鼠20只，雌雄各半，隨機(jī)分為2組。按0.2ml/10g腹腔注射給藥，一組

給予生附子水煎醇沉液，第2組給予制附子水煎醇沉液。觀察并記錄30min內(nèi)各組

小鼠死亡情況。

【結(jié)果】將生附子水煎醇沉液組與制附子水煎醇沉液組動(dòng)物死亡數(shù)進(jìn)行組間t檢驗(yàn),

并比較各組平均值，確定兩者毒性的大小。

【注意事項(xiàng)】生附子和制附子水煎液制備時(shí)均應(yīng)煎煮4小時(shí)以上。

【思考題】

根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果討論炮制前后附子毒性作用差異的原因。

實(shí)驗(yàn)2.3黃苓昔健康家兔體內(nèi)藥物動(dòng)力學(xué)的研究（高效液相色譜法）[5]

【目的】熟悉血藥濃度法研究中藥藥物動(dòng)力學(xué)的基本步驟；熟悉用高效液相色譜法

測(cè)定血清中藥物濃度的操作方法；掌握血清中藥物的萃取、濃集等預(yù)處理基木技術(shù)。

【原理】黃苓普口服給藥生物利用度極低，為了改善單體化合物的治療效果，常采

用注射給藥；其在血液中藥物濃度的測(cè)定常使用高效液相色譜法進(jìn)行。

【器材】高效液相色譜儀、渦旋混合器、氮吹儀、超聲波振蕩器、兔盒、天平、離

心機(jī)、水浴鍋、離心管、容量瓶。

【試劑】甲醇、乙酸乙酯。

【藥品】黃苓昔水溶液20mg/ml。

【動(dòng)物】家兔，雌雄不限，體重約2kg。

【方法】

1、家兔2只，隨機(jī)分為給藥組和空白組?？瞻捉M耳緣靜脈采血20ml。給藥組耳

緣靜脈給予黃苓背水溶液3ml/kg后，于0、10、15、30、60、90、120min于

對(duì)側(cè)耳緣靜脈采血1.5ml。

2、空白組血液和給藥組血液于37+0.5℃水浴中溫孵30min,4000rpm離心15min,

分離各樣本血清。

3、取給藥組血清0.5ml,加入乙酸乙酯1ml,置渦旋混合器上萃取10分鐘，

4000rpm離心lOmin,吸取上清液0.5ml入尖底試管中，將試管通氮?dú)獯蹈桑?/p>

殘?jiān)屑尤?0ul甲醇溶解，4000rpm離心lOmin,取上清液作為供試品溶液。

4、取黃苓普對(duì)照品，加蒸鐳水溶解并定容使成80011g/ml的貯備液；分別用蒸

儲(chǔ)水將黃苓甘貯備液稀釋成以下5種濃度稀釋液：400ug/ml(a).200ug/ml

(b),lOOug/ml(c)、25ug/ml(d)、5Pg/ml(e)0取干燥試管5支，編號(hào)

分別為A、B、C、D和E,各管中均加入0.5ml空白血清，再于各管中分別加

入對(duì)應(yīng)編號(hào)的黃苓昔稀釋液50U1,渦旋20s,混勻。照給藥組供試品制備方

法制備工作曲線供試品溶液。

5、精密吸取各供試品溶液20“1,注入液相色譜儀，照如下色譜方法測(cè)定：

色譜柱：CM烷基鍵合相柱(250X6mm,5um)

檢測(cè)器：紫外檢測(cè)器254nm檢測(cè)，靈敏度0.02AUFS

流動(dòng)相:0.Olmol/LNaH2POz(PH2.5)-甲醇(50：50),用前經(jīng)過(guò)濾并用超聲

波脫氣處理，流速為lml/mino

記錄各樣品中黃苓昔色譜峰的峰面積，進(jìn)行計(jì)算。

【結(jié)果】繪制出工作曲線后，將給藥組各時(shí)間點(diǎn)供試品峰面積代入工作曲線，求出

各點(diǎn)的血藥濃度，給制出C-T曲線，分別進(jìn)行房室模型擬合的統(tǒng)計(jì)矩法式計(jì)算，求

出黃苓昔靜脈注射給藥時(shí)的各藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)。

【注意事項(xiàng)】

1、取血時(shí)注意勿使血細(xì)胞破裂，以免干擾后續(xù)測(cè)定，正常取血后分離得到的血

清應(yīng)為淡黃色。

2、工作曲線可由教師制備后供學(xué)生使用；也可不制備工作曲線，以各供試品中

黃苓昔峰面積作為C-T曲線中血藥濃度的表征值。

【思考題】

根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果設(shè)計(jì)合理的黃苓昔注射液給藥方案。

參考文獻(xiàn)

1.沈映君主編.中藥藥理學(xué).北京：人民衛(wèi)生出版社，2000.p3

2.王本祥主編.現(xiàn)代中藥藥理學(xué).天津：天津科學(xué)技術(shù)出版社，1997.pl5

3.王曉紅.苦參堿及氧化苦參堿的藥代動(dòng)力學(xué)與藥效動(dòng)力學(xué).藥學(xué)學(xué)報(bào)，

1992,27(8)：p572

4.韓國(guó)柱主編.中草藥藥代動(dòng)力學(xué).北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，1997.p200

5.陰健，任天池.黃苓普及其在清開(kāi)靈注射液中的藥代動(dòng)力學(xué)研究.中國(guó)實(shí)

驗(yàn)方劑學(xué)雜志，1998,4(4)：31

第三章解表藥

解表藥是一類能發(fā)散表邪，解除表證，治療外感性疾病為主要作用的單味中藥

和復(fù)方的統(tǒng)稱。根據(jù)外感六淫邪氣和機(jī)體功能狀態(tài)的不同，解表藥有辛溫解表、辛

涼解表、扶正解表之分，臨床常用的單味中藥有麻黃、桂枝、羌活、防風(fēng)、白芷、

薄荷、銀花、柴胡、桑葉等，常用復(fù)方有麻黃湯、桂枝湯、九味羌活湯、銀翹散、

桑菊飲、升麻葛根湯、人參敗毒散、參蘇飲、加減蔚蕤湯等?，F(xiàn)代藥理研究結(jié)果證

明，這類方藥具有發(fā)汗、解熱、抗炎、抗病原微生物、抗過(guò)敏、免疫調(diào)節(jié)等作用，

尚有鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、抗氧化、抗衰老、抗癌、降血糖、降血脂，保肝利膽等作用。在

研究解表藥時(shí)，主要根據(jù)外感的主要癥狀（如汗出、發(fā)熱、頭痛、咳嗽等）和外感

六淫邪氣（病原微生物）設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)指標(biāo)，具體到某一味中藥或某一個(gè)特定復(fù)方時(shí)，

應(yīng)緊密結(jié)合該藥（處方）的功能主治設(shè)計(jì)其它研究指標(biāo)。常用的實(shí)驗(yàn)方法如下：

1.發(fā)汗作用發(fā)汗是中醫(yī)臨床治療表證的重要手段之一，《內(nèi)經(jīng)》云：''其在皮者，

汗而發(fā)之”，指表證可通過(guò)發(fā)汗使外邪從汗而解。不少辛溫解表方藥能使汗腺興

奮，汗腺活動(dòng)增加，表現(xiàn)為汗液分泌增多。其發(fā)汗機(jī)理可能與抑制汗腺導(dǎo)管對(duì)鈉

離子的重吸收或與興奮外周a-受體等有關(guān)。這種發(fā)汗作用有利于祛寒散熱。

（1）目測(cè)法：小鼠是最常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。根據(jù)給藥后機(jī)體發(fā)汗情況，按發(fā)汗范圍分

五級(jí)目測(cè)打分。該法操作簡(jiǎn)單，對(duì)實(shí)驗(yàn)儀器無(wú)特殊要求，易于實(shí)行，但存在

著外界溫度影響較大，主觀性強(qiáng)，人為誤差大等不足，可以作為藥物發(fā)汗作

用的初篩研究。

（2）汗液著色法：大鼠、小鼠均可應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)。該法根據(jù)碘一淀粉接觸汗液呈藍(lán)

色的反應(yīng)原理，根據(jù)顯色反應(yīng)后汗點(diǎn)（深紫色著色點(diǎn)）出現(xiàn)的時(shí)間、顏色和數(shù)

量判斷藥物的發(fā)汗強(qiáng)度，并可以粗略定量（汗點(diǎn)數(shù)）。該法操作簡(jiǎn)單易行，但

受環(huán)境因素影響大，在控制環(huán)境條件下，使用該法無(wú)疑是解表發(fā)汗方藥初篩的

較好方法。

（3）汗液定量法：大鼠是最常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。該法是利用硅膠吸濕力強(qiáng)的特點(diǎn)，將

大鼠雙后肢足跖裝入特制的集汗管內(nèi)，按時(shí)用一定流量的干燥空氣，將足跖

部分泌的汗液吸入定量的干燥硅膠管內(nèi)進(jìn)行稱重，比較給藥前后干燥硅膠管

的重量變化，即可求出發(fā)汗量的多少，即：汗量（mg）=干燥管濕重-干燥管原

重。此法操作略為繁瑣，需控制實(shí)驗(yàn)溫度和濕度，但重復(fù)性好，具有較好的定

量作用，可以更加直觀的反應(yīng)藥物發(fā)汗作用的強(qiáng)度。

(4)皮膚電生理技術(shù)法：該法的原理是在電流一致的條件下，汗腺分泌情況可以

間接的通過(guò)皮膚電壓反射的潛伏期及電位振幅的改變來(lái)反映，尤其是皮膚電

反射可以作為觀察汗腺分泌的一個(gè)靈敏指標(biāo)。該法對(duì)實(shí)驗(yàn)儀器要求較高，但

指標(biāo)反應(yīng)靈敏，客觀，是一種值得推廣的研究方法。

(5)汗腺上皮組織形態(tài)學(xué)研究法：利用光鏡和透射電鏡技術(shù)觀察汗腺上皮細(xì)胞的

細(xì)胞形態(tài)和超微結(jié)構(gòu)變化，可以在皮膚表層無(wú)明顯可見(jiàn)的汗液情況下，分析汗

腺細(xì)胞的分泌活動(dòng)情況。尤其對(duì)發(fā)汗作用較弱的藥物此法研究具有較大的優(yōu)

勢(shì)，但本法實(shí)驗(yàn)相對(duì)而言，對(duì)實(shí)驗(yàn)設(shè)備和經(jīng)費(fèi)要求較高。

(6)腋窩部皮膚汗腺導(dǎo)管內(nèi)徑測(cè)定法：根據(jù)發(fā)汗時(shí)皮膚汗腺導(dǎo)管就會(huì)擴(kuò)張，其擴(kuò)

張的程度與發(fā)汗量之間存在一定的正相關(guān)的機(jī)制，通過(guò)測(cè)定腋窩部皮膚汗腺

導(dǎo)管的內(nèi)徑可以反應(yīng)藥物的發(fā)汗作用和發(fā)汗強(qiáng)度。

2.解熱發(fā)熱是各型表證的常見(jiàn)癥狀，是由各種刺激因子影響機(jī)體產(chǎn)生內(nèi)熱源而引

起體溫調(diào)節(jié)中樞調(diào)定點(diǎn)上移所致。解表方藥中多數(shù)具有散熱功效。實(shí)驗(yàn)和臨床實(shí)

踐證實(shí)，許多解表方藥對(duì)異常升高的體溫有明顯的解熱降溫作用，顯效快而維持

時(shí)間較短是其解熱特點(diǎn)。解熱機(jī)理較復(fù)雜，可能與抑制發(fā)熱的多個(gè)環(huán)節(jié)，如內(nèi)生

性致熱源生成、釋放、降低機(jī)體的產(chǎn)熱過(guò)程有關(guān)。解熱實(shí)驗(yàn)常用動(dòng)物為大鼠、家

兔，實(shí)驗(yàn)時(shí)首先在正常的動(dòng)物皮下或靜脈注入一定量的致熱源(如傷寒、副傷寒

菌苗；細(xì)菌培養(yǎng)液；內(nèi)毒素；內(nèi)生性致熱源；啤酒酵母混懸液；松節(jié)油和二硝基

苯酚等)，造成動(dòng)物發(fā)熱模型，然后給予試藥物治療，觀察受試藥物有無(wú)解熱作

用，解熱強(qiáng)度如何。大鼠發(fā)熱模型主要用于藥物解熱作用的初篩，家兔模型發(fā)熱

反應(yīng)典型而穩(wěn)定，藥物解熱作用強(qiáng)度和機(jī)理研究應(yīng)選擇家兔模型。一般研究中往

往采用兩種發(fā)熱模型相互驗(yàn)證，保證結(jié)果的科學(xué)性和可靠性。具體實(shí)驗(yàn)方法參考

清熱藥。

3.鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛頭痛、身痛是表證的常見(jiàn)證候。解表藥中出麻黃除中樞神經(jīng)系統(tǒng)有

明顯的興奮作用外，其余各藥皆具有不同程度的鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛作用，表現(xiàn)為自主活

動(dòng)減少，延長(zhǎng)催眠藥的睡眠時(shí)間，有的還有抗驚厥作用，并能提高痛閾值。鎮(zhèn)靜

作用常采用活動(dòng)計(jì)數(shù)法、延長(zhǎng)睡眠時(shí)間法、抗驚厥法等，以觀察藥物對(duì)中樞神經(jīng)

系統(tǒng)的影響；鎮(zhèn)痛作用常利用動(dòng)物的不同部位，進(jìn)行熱刺激、光電刺激、機(jī)械刺

激和化學(xué)刺激等方法引起疼痛反應(yīng)，觀察藥物對(duì)痛覺(jué)的影響，了解藥物有無(wú)鎮(zhèn)痛

效果，強(qiáng)度如何，常用的研究方法有小鼠熱板法、小鼠扭體法、大鼠尾尖部壓痛

法等。具體實(shí)驗(yàn)方法參考安神藥和祛風(fēng)濕藥。

4.鎮(zhèn)咳、祛痰、平喘咳嗽是表證的常見(jiàn)癥狀，解表藥大多數(shù)有鎮(zhèn)咳祛痰的作用，

有些藥物還能擴(kuò)張支氣管。鎮(zhèn)咳作用常用的實(shí)驗(yàn)方法有濃氨水噴霧法、二氧化硫

刺激法、電刺激發(fā)等；化痰常用器官段酚紅法、毛細(xì)玻管法、器官纖毛運(yùn)動(dòng)觀察

法等；平喘常用噴霧致喘法、肺溢流法等，通過(guò)實(shí)驗(yàn)觀察藥物的鎮(zhèn)咳、祛痰和平

喘作用的有無(wú)與強(qiáng)弱。具體實(shí)驗(yàn)方法參考止咳、化痰、平喘藥。

5.抗炎呼吸道的炎癥是引起咳、痰、喘癥的重要原因，也是表證的基本臨床表現(xiàn)。

不少解表方藥能抑制炎癥早期毛細(xì)血管的通透性，并能抑制肉芽形成。其抗炎機(jī)

理可能與興奮垂體-腎上腺等有關(guān)。明顯的抗炎效果有利于上呼吸道炎癥的消除。

非特異性炎癥可分為三個(gè)階段（早、中、晚），各階段都有多種實(shí)驗(yàn)方法，如急性

關(guān)節(jié)腫脹法、毛細(xì)管通適性測(cè)定法和白細(xì)胞游走實(shí)驗(yàn)法、棉球肉芽腫法以及炎癥

介質(zhì)測(cè)定法等；免疫性炎癥模型有佐劑性關(guān)節(jié)炎、n型膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎及抗原

性關(guān)節(jié)炎等模型。通過(guò)實(shí)驗(yàn)，觀察藥物對(duì)炎癥各期的影響，了解藥物的抗炎強(qiáng)度、

抗炎特點(diǎn)和抗炎機(jī)理或用以篩選炎癥性疾病的有效藥物和探討作用機(jī)理。具體實(shí)

驗(yàn)方法參考祛風(fēng)濕藥

6.抗菌、抗病毒表證是由外邪客表所致，細(xì)菌、毒素及病毒可視為外邪之一，解

表方藥對(duì)多種細(xì)菌如金葡菌、溶血鏈球菌、痢疾桿菌等有抑制作用；此外對(duì)流感

病毒、單純皰疹病毒等皆有較強(qiáng)的體內(nèi)外抑制效果。

[1]抗菌研究方法：包括體外實(shí)驗(yàn)和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)（整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)法）兩種。

（1）體外實(shí)驗(yàn)：

①連續(xù)稀釋試驗(yàn)（二倍稀釋法）。實(shí)驗(yàn)在試管內(nèi)進(jìn)行，用肉湯將中藥制劑稀釋成各種

濃度，然后在各管內(nèi)接種等量的供試菌，置37C孵箱培養(yǎng)18、24小時(shí)，觀察各管內(nèi)

細(xì)菌生長(zhǎng)情況，以判斷該藥的抑菌強(qiáng)度。本法是中藥抗菌最常用的方法，能較難確

地測(cè)得藥物抗菌力的大??；

②擴(kuò)散實(shí)驗(yàn)（平皿法）。將供試菌先接種在瓊脂表面，再挖小孔或放置銅圈，并在孔

內(nèi)加入一定量的中藥煎液，藥液即向周圍培養(yǎng)基擴(kuò)散，置培養(yǎng)箱培養(yǎng)18~24小時(shí)，

若有抗菌作用即在小孔周圍形成抑菌圈，以抑菌圈直徑的大小判斷藥物抗菌力的強(qiáng)

弱。具體方法較多：有平皿打孔法、泡沫海綿栓子法、管碟法、貼紙片法、挖溝法、

畫(huà)線法等。本法操作簡(jiǎn)便，是常用的方法之一。此外，還有揮發(fā)性物質(zhì)的熏蒸試驗(yàn)

法和氯化三苯四氮嗖（TTC）快速試驗(yàn)法等測(cè)定藥物的抗菌效力。

（2）體內(nèi)實(shí)驗(yàn)（實(shí)驗(yàn)治療法）：本法是先在正常動(dòng)物體內(nèi)注入一定量的菌液或毒素造成

一定的感染模型，然后實(shí)驗(yàn)洽療，觀察藥物抗感染的效果。

[2]抗病毒研究方法：病毒只在活細(xì)胞內(nèi)繁殖，且只對(duì)一定的細(xì)胞有親和力。常用的

方法有三種：組織培養(yǎng)法、雞胚培養(yǎng)法和整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)法。觀察藥物對(duì)體外、體內(nèi)

病毒感染的影響。

7.抗過(guò)敏支氣管哮喘是肺部過(guò)敏性疾病，不少解表方藥能抑制過(guò)敏介質(zhì)的釋放，

抑制補(bǔ)體的活性和抗體的產(chǎn)生。常用的實(shí)驗(yàn)方法有肥大細(xì)胞脫顆粒實(shí)驗(yàn)、豚鼠過(guò)

敏實(shí)驗(yàn)、遲發(fā)性超敏反應(yīng)等等。

8.對(duì)免疫功能的影響大部分解表方藥對(duì)機(jī)體的非特異性免疫功能有促進(jìn)作用。表

現(xiàn)為天然殺傷細(xì)胞（NK細(xì)胞）活性升高，巨噬細(xì)胞或白細(xì)胞的吞噬功能加強(qiáng)。免

疫功能的提高，有利于機(jī)體抵御外邪的侵襲，”正氣存內(nèi)，邪不可干?！钡珜?duì)特

異性免疫功能的影響規(guī)律性不強(qiáng)，有些能促進(jìn)細(xì)胞免疫和體液免疫；有的能抑制

細(xì)胞免疫和抗體的產(chǎn)生；還有些藥物對(duì)免疫功能呈雙向調(diào)節(jié)作用。本法以觀察藥

物對(duì)免疫功能的影響，闡明解表藥作用的綜合效應(yīng)。具體實(shí)驗(yàn)方法參考補(bǔ)益藥。

9.其他

用電生理法（中樞放電）、生化測(cè)定法（cAMP、DNA、血糖、血脂等測(cè)定），了解解

表

藥的作用機(jī)理；同時(shí)根據(jù)不同的藥物功效和特點(diǎn)設(shè)計(jì)其它實(shí)驗(yàn)，如降血糖、降血脂、

保肝利膽等。

此外，由于解表方藥在臨床上主要用于外感表證或風(fēng)水水腫、喘咳、痹癥、瘡瘍、

風(fēng)疹等兼有表邪者，研究時(shí)應(yīng)根據(jù)傳統(tǒng)的中醫(yī)藥理論并結(jié)合現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)該病的病因、

發(fā)病機(jī)制的認(rèn)識(shí)，合理設(shè)計(jì)研究?jī)?nèi)容?，F(xiàn)以感冒為例作一說(shuō)明。

感冒即外感表證，是六淫外邪襲表所致，“溫邪上受，首先犯肺”，因此外感證

臨床主要表現(xiàn)為衛(wèi)陽(yáng)被遏和肺系癥狀?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，感冒是急性上呼吸道炎

癥為主的一組癥狀群，其中絕大多數(shù)由病毒感染引起（包括感冒和流感），極少數(shù)由

變應(yīng)原等非傳染性因素引起。機(jī)體感受外邪是否發(fā)病，與機(jī)體的''正氣"直接相關(guān),

此即“正氣存內(nèi)，邪不可干”。因此直接的抗病毒和增強(qiáng)機(jī)體免疫功能就是解表藥的

主要研究?jī)?nèi)容。一般而言，感冒具有自限性，其自然病程為1?2周，但臨床主要癥

狀往往是影響患者生活質(zhì)量和導(dǎo)致并發(fā)癥的主要原因，因此緩解或解除主要癥狀亦

是解表藥研究不可缺少的一個(gè)研究方面。故解表方藥研究至少應(yīng)該設(shè)計(jì)以下幾個(gè)方

面的實(shí)驗(yàn)：（1）抗病毒實(shí)驗(yàn)（體外和體內(nèi)），針對(duì)引起感冒的主要病毒進(jìn)行研究，如

流感病毒、腺病毒、副流感病毒、冠狀病毒等；其方法主要有細(xì)胞（組織）培養(yǎng)法、

雞胚法和整體動(dòng)物保護(hù)實(shí)驗(yàn)；此外還可根據(jù)具體研究情況選用血細(xì)胞吸附抑制實(shí)驗(yàn)、

干擾素誘生實(shí)驗(yàn)等；（2）免疫增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)，主要從特異性免疫和非特異性免疫著手，

如局部粘膜免疫功能測(cè)