GB∕T 22919.6-2024 水產(chǎn)配合飼料 第6部分：石斑魚配合飼料（正式版）

水產(chǎn)配合飼料第6部分：石斑魚配合飼料2024-03-15發(fā)布2024-10-01實(shí)施I本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件是GB/T22919《水產(chǎn)配合飼料》的第6部分。GB/T22919已經(jīng)發(fā)布了以下部分：——第1部分：斑節(jié)對(duì)蝦配合飼料；——第3部分：鱸魚配合飼料；——第4部分：美國紅魚配合飼料；——第5部分：南美白對(duì)蝦配合飼料；—第6部分：石斑魚配合飼料；——第7部分：刺參配合飼料；——第8部分：巴沙魚配合飼料；——第9部分：大口黑鱸配合飼料；——第10部分：羅非魚配合飼料；——第11部分：泥鰍配合飼料；——第12部分：鯽魚配合飼料。本文件代替GB/T22919.6—2008《水產(chǎn)配合飼料第6部分：石斑魚配合飼料》,與GB/T22919.6—2008相比，除結(jié)構(gòu)調(diào)整和編輯性改動(dòng)外，主要技術(shù)變化如下：a)增加了術(shù)語和定義“石斑魚”(見第3章);b)增加了飼料含粉率指標(biāo)要求及試驗(yàn)方法(見5.2、7.3);c)刪除了原料與添加劑要求、粉化率、鈣和凈含量的要求(見2008年版的4.1、4.3、4.4、4.6、5.4、d)更改了水分、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗灰分、總磷和賴氨酸指標(biāo)要求(見5.2、5.3,2008年版的4.4);e)增加了賴氨酸/粗蛋白質(zhì)、組胺和丙二醛指標(biāo)要求及試驗(yàn)方法(見5.3、7.12、7.13、7.14);g)更改了檢驗(yàn)規(guī)則(見第8章，2008年版的第6章)。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由全國飼料工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)(SAC/TC76)提出并歸口。本文件起草單位：廣東恒興飼料實(shí)業(yè)股份有限公司、廣東海洋大學(xué)。本文件主要起草人：譚北平、張海濤、鄧君明、王卓鐸、韋振娜、孫廣文、湯燕平、謝瑞濤、張衛(wèi)、本文件及其所代替文件的歷次版本發(fā)布情況為：——2008年首次發(fā)布為GB/T22919.6—2008;——本次為第一次修訂。Ⅱ?yàn)榱吮Ｕ纤a(chǎn)配合飼料的質(zhì)量，并為產(chǎn)品生產(chǎn)、質(zhì)量檢驗(yàn)、市場監(jiān)督、產(chǎn)品認(rèn)證和產(chǎn)品貿(mào)易等提供技術(shù)依據(jù)，制定了GB/T22919《水產(chǎn)配合飼料》。根據(jù)“中國漁業(yè)統(tǒng)計(jì)年鑒”統(tǒng)計(jì)，水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物共計(jì)17目、43科、61屬，種類多，且對(duì)水產(chǎn)配合飼料產(chǎn)品質(zhì)量需求既有一定的共性，也有種類特殊性。GB/T22919對(duì)養(yǎng)殖產(chǎn)量大、區(qū)域分布廣、市場需求大的代表性種類的配合飼料質(zhì)量要求設(shè)置分部分文件。GB/T22919擬由以下27個(gè)部分構(gòu)成?！?部分：斑節(jié)對(duì)蝦配合飼料。目的在于確立斑節(jié)對(duì)蝦的配合飼料質(zhì)量要求?！?部分：軍曹魚配合飼料。目的在于確立軍曹魚的配合飼料質(zhì)量要求。——第3部分：鱸魚配合飼料。目的在于確立鱸魚的配合飼料質(zhì)量要求?！?部分：美國紅魚配合飼料。目的在于確立美國紅魚的配合飼料質(zhì)量要求?！?部分：南美白對(duì)蝦配合飼料。目的在于確立南美白對(duì)蝦的配合飼料質(zhì)量要求?！?部分：石斑魚配合飼料。目的在于確立石斑魚的配合飼料質(zhì)量要求?！?部分：刺參配合飼料。目的在于確立刺參的配合飼料質(zhì)量要求。——第8部分：巴沙魚配合飼料。目的在于確立巴沙魚的配合飼料質(zhì)量要求。——第9部分：大口黑鱸配合飼料。目的在于確立大口黑鱸的配合飼料質(zhì)量要求?！?0部分：羅非魚配合飼料。目的在于確立羅非魚的配合飼料質(zhì)量要求?！?1部分：泥鰍配合飼料。目的在于確立泥鰍的配合飼料質(zhì)量要求。——第12部分：鯽魚配合飼料。目的在于確立鯽魚的配合飼料質(zhì)量要求。——第13部分：真鯛配合飼料。目的在于確立真鯛的配合飼料質(zhì)量要求?！?4部分：鮑魚配合飼料。目的在于確立鮑魚的配合飼料質(zhì)量要求?！?5部分：斑點(diǎn)叉尾鮑配合飼料。目的在于確立斑點(diǎn)叉尾鯛的配合飼料質(zhì)量要求。——第16部分：鰻鯫配合飼料。目的在于確立鰻鯽的配合飼料質(zhì)量要求?！?7部分：虱目魚配合飼料。目的在于確立虱目魚的配合飼料質(zhì)量要求?！?8部分：鱖魚配合飼料。目的在于確立鱖魚的配合飼料質(zhì)量要求?！?9部分：黃鱔配合飼料。目的在于確立黃鱔的配合飼料質(zhì)量要求?！?0部分：梭子蟹配合飼料。目的在于確立梭子蟹的配合飼料質(zhì)量要求?！?1部分：翹嘴紅鲌配合飼料。目的在于確立翹嘴紅鲌的配合飼料質(zhì)量要求?！?2部分：龜類配合飼料。目的在于確立龜類的配合飼料質(zhì)量要求?！?3部分：青蝦配合飼料。目的在于確立青蝦的配合飼料質(zhì)量要求?！?4部分：牛蛙、青蛙配合飼料。目的在于確立牛蛙、青蛙的配合飼料質(zhì)量要求?！?5部分：羅氏沼蝦配合飼料。目的在于確立羅氏沼蝦的配合飼料質(zhì)量要求?！?6部分：牙鮮配合飼料。目的在于確立牙鮮的配合飼料質(zhì)量要求。——第27部分：長吻鮑配合飼料。目的在于確立長吻範(fàn)的配合飼料質(zhì)量要求。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展和行業(yè)需求的變化，將對(duì)GB/T22919進(jìn)行增補(bǔ)和修訂。1水產(chǎn)配合飼料第6部分：石斑魚配合飼料1范圍本文件界定了石斑魚配合飼料的術(shù)語和定義，給出了產(chǎn)品分類，規(guī)定了技術(shù)要求、檢驗(yàn)規(guī)則、標(biāo)簽、本文件適用于石斑魚配合飼料的生產(chǎn)和使用。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T5918飼料產(chǎn)品混合均勻度的測定GB/T6432飼料中粗蛋白的測定凱氏定氮法GB/T6433飼料中粗脂肪的測定GB/T6434飼料中粗纖維的含量測定GB/T6435飼料中水分的測定GB/T6437飼料中總磷的測定分光光度法GB/T6438飼料中粗灰分的測定GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法GB/T8170數(shù)值修約規(guī)則與極限數(shù)值的表示和判定GB/T10647飼料工業(yè)術(shù)語GB10648飼料標(biāo)簽GB13078飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)GB/T14699.1飼料采樣GB/T18246飼料中氨基酸的測定GB/T18823飼料檢測結(jié)果判定的允許誤差GB/T18868飼料中水分、粗蛋白質(zhì)、粗纖維、粗脂肪、賴氨酸、蛋氨酸快速測定近紅外光譜法GB/T20195動(dòng)物飼料試樣的制備NY/T4128—2022漁用膨化顆粒飼料通用技術(shù)規(guī)范SC/T1074—2022團(tuán)頭魴配合飼料3術(shù)語和定義GB/T10647界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。石斑魚grouper硬骨魚綱(Osteichthyes)、輻鰭亞綱(Neopterygii)、棘鰭總目(Acanthopterygii)、鱸形目(Perci-2formes)、鱸亞目(Percoidei)、偕科(Serranidae)、石斑魚亞科(Epinephelinae)魚類的總稱。注：常見養(yǎng)殖種類有斜帶石斑魚(Epinepheluscoioides)、點(diǎn)帶石斑魚(Epinephelusmalabaricus)、鞍帶石斑魚(Epi-nepheluslanceolatus)、赤點(diǎn)石斑魚(Epinephelusakaara)、棕點(diǎn)石斑魚(Epinephelusfuscoguttatus)、青石斑魚(Epinephelusawoara)、云紋石斑魚(Epinephelusmoara)、虎龍雜交斑(Epinephelusfuscoguttatus子×E.lan-ceolatus含)、云龍石斑魚(Epinephelusmoara早×E.lanceolatus含)和紅鰭九棘鱸(Cephalopholisaitha)等。4產(chǎn)品分類產(chǎn)品按石斑魚的生長階段分為稚魚配合飼料、幼魚配合飼料、中魚配合飼料和成魚配合飼料。產(chǎn)品分類見表1。表1產(chǎn)品分類類別稚魚配合飼料幼魚配合飼料中魚配合飼料成魚配合飼料飼喂階段(適用喂養(yǎng)對(duì)象體重，g/尾)5～<5050～<3005技術(shù)要求5.1外觀與性狀產(chǎn)品為碎粒，或大小均一、色澤一致、形狀規(guī)則的顆粒。產(chǎn)品無霉變、結(jié)塊、異味和蟲5.2加工質(zhì)量指標(biāo)應(yīng)符合表2的規(guī)定。表2加工質(zhì)量指標(biāo)%類別稚魚配合飼料幼魚配合飼料中魚配合飼料成魚配合飼料形態(tài)碎粒飼料膨化顆粒飼料膨化顆粒飼料混合均勻度(變異系數(shù)，CV)含粉率水中穩(wěn)定性(溶失率)水分5.3理化指標(biāo)應(yīng)符合表3的規(guī)定。3表3理化指標(biāo)稚魚配合飼料幼魚配合飼料中魚配合飼料成魚配合飼料粗蛋白質(zhì)/%45.0～58.042.0～52.040.0～52.038.0～52.0粗脂肪/%粗纖維/%粗灰分/%總磷/%賴氨酸/%賴氨酸/粗蛋白質(zhì)/%組胺/(mg/kg)丙二醛(以飼料所含粗脂肪為基礎(chǔ)計(jì))/(mg/kg)6取樣按GB/T14699.1的規(guī)定執(zhí)行。7試驗(yàn)方法7.1外觀與性狀取適量樣品置于清潔、干燥的白瓷盤中，在正常光照、通風(fēng)良好、無異味的環(huán)境下，通過感官進(jìn)行評(píng)定。按GB/T5918的規(guī)定執(zhí)行。按NY/T4128—2022中附錄A的規(guī)定執(zhí)行。7.4水中穩(wěn)定性(溶失率)按NY/T4128—2022中附錄C的規(guī)定執(zhí)行。7.5水分按GB/T6435或GB/T18868的規(guī)定執(zhí)行，其中GB/T6435為仲裁方法。47.6粗蛋白質(zhì)按GB/T6432或GB/T18868的規(guī)定執(zhí)行，其中GB/T6432為仲裁方法。7.7粗脂肪按GB/T6433或GB/T18868的規(guī)定執(zhí)行，其中GB/T6433為仲裁方法。7.8粗纖維的規(guī)定執(zhí)行，其中GB/T6434為仲裁方法。7.9粗灰分的規(guī)定執(zhí)行。7.10總磷按GB/T6437的規(guī)定執(zhí)行。7.11賴氨酸按GB/T18246的規(guī)定執(zhí)行。7.12賴氨酸/粗蛋白質(zhì)按SC/T1074—2022中附錄C的規(guī)定執(zhí)行。7.13組胺按附錄A的規(guī)定執(zhí)行。7.14丙二醛(以飼料所含粗脂肪為基礎(chǔ)計(jì))按附錄B的規(guī)定執(zhí)行。7.15衛(wèi)生指標(biāo)按GB13078的規(guī)定執(zhí)行。8檢驗(yàn)規(guī)則以相同的原料、相同的生產(chǎn)配方、相同的生產(chǎn)工藝和生產(chǎn)條件，連續(xù)生產(chǎn)或同一班次生產(chǎn)的同一規(guī)格產(chǎn)品為一批，每批產(chǎn)品不超過120t。8.2出廠檢驗(yàn)出廠檢驗(yàn)項(xiàng)目為外觀與性狀、水分和粗蛋白質(zhì)。8.3型式檢驗(yàn)型式檢驗(yàn)項(xiàng)目為第5章規(guī)定的所有項(xiàng)目；在正常生產(chǎn)情況下，每半年至少進(jìn)行一次型式檢驗(yàn)。有下列情況之一，也應(yīng)進(jìn)行型式檢驗(yàn)：5a)產(chǎn)品定型投產(chǎn)時(shí)；b)生產(chǎn)工藝、配方或主要原料來源有較大改變，可能影響產(chǎn)品質(zhì)量時(shí)；c)停產(chǎn)3個(gè)月或以上，恢復(fù)生產(chǎn)時(shí)；d)出廠檢驗(yàn)結(jié)果與上次型式檢驗(yàn)結(jié)果有較大差異時(shí)；e)飼料行政管理部門提出檢驗(yàn)要求時(shí)。8.4判定規(guī)則8.4.1所檢項(xiàng)目全部合格，判定該批次產(chǎn)品合格。8.4.2檢驗(yàn)項(xiàng)目中有任何指標(biāo)不符合本文件規(guī)定時(shí)，應(yīng)自同批產(chǎn)品中重新加倍取樣進(jìn)行復(fù)檢。復(fù)檢結(jié)果有任何一項(xiàng)指標(biāo)不符合本文件規(guī)定，判定該批產(chǎn)品不合格。微生物指標(biāo)不予復(fù)檢。8.4.3各項(xiàng)目指標(biāo)的極限數(shù)值判定按GB/T8170中的修約值比較法的規(guī)定執(zhí)行。8.4.4水分、理化指標(biāo)和衛(wèi)生指標(biāo)檢驗(yàn)結(jié)果判定的允許誤差按GB/T18823的規(guī)定執(zhí)行(GB/T18823未規(guī)定的項(xiàng)目除外)。8.4.5含粉率、水中穩(wěn)定性(溶失率)檢驗(yàn)結(jié)果判定的允許誤差分別按NY/T4128—2022中附錄A和附錄C的規(guī)定執(zhí)行；組胺、丙二醛檢驗(yàn)結(jié)果判定的允許誤差分別按附錄A和附錄B的規(guī)定執(zhí)行。9.1標(biāo)簽按GB10648的規(guī)定執(zhí)行。9.3運(yùn)輸運(yùn)輸工具應(yīng)清潔衛(wèi)生，不應(yīng)與有毒有害物品混裝混運(yùn)，運(yùn)輸中應(yīng)防止曝曬、雨淋與破損。9.5保質(zhì)期未開啟包裝的產(chǎn)品，在符合上述規(guī)定的包裝、運(yùn)輸、貯存條件下，產(chǎn)品保質(zhì)期與標(biāo)簽中標(biāo)明的保質(zhì)期一致。6(規(guī)范性)組胺的測定A.1原理試樣中的組胺用高氯酸溶液提取、丹磺酰氯衍生，高效液相色譜儀測定，外標(biāo)法定量。A.2試劑或材料除非另有規(guī)定，僅使用分析純試劑。A.2.3氨水。A.2.6高氯酸提取溶液(0.4mol/L):準(zhǔn)確量取高氯酸32.3mL,用水定容至1000mL,混勻。A.2.10丹磺酰氯衍生溶液(10mg/mL):稱取1g丹磺酰氯(CAS:605-65-2,純度≥99%),用丙酮溶解，定容至100mL,混勻。臨用現(xiàn)配。A.2.11組胺標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液(1mg/mL):稱取組胺(CAS:51-45-6,純度≥97%)10mg(精確至0.01mg),置于10mL棕色容量瓶中，用鹽酸溶液(A.2.9)溶解并定容，混勻。于一18℃以下保存，有效期6個(gè)月。A.2.12組胺標(biāo)準(zhǔn)中間溶液(100μg/mL):準(zhǔn)確移取組胺標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液(A.2.11)1mL于10mL棕色容量瓶中，用鹽酸溶液(A.2.9)定容，混勻。于2℃~8℃保存，有效期1周。A.2.13組胺標(biāo)準(zhǔn)系列溶液：準(zhǔn)確移取適量組胺標(biāo)準(zhǔn)中間溶液(A.2.12)于10mL棕色容量瓶中，用水稀釋定容，混勻，配制成質(zhì)量濃度為0.25μg/mL、0.5μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL、25.0μg/mL、50.0μg/mL、100.0μg/mL標(biāo)準(zhǔn)系列溶A.3儀器設(shè)備A.3.1高效液相色譜儀：配有紫外檢測器或二極管陣列檢測器。A.3.4渦旋混合儀。A.3.5離心機(jī)：轉(zhuǎn)速不低于5000r/min。A.3.6氮吹儀。A.4樣品按GB/T20195制備樣品至少200g,粉碎使其全部通過0.425mm孔徑的分析篩，充分混勻，裝入7A.5試驗(yàn)步驟平行做兩份試驗(yàn)。稱取試樣1g(精確至0.0001g),置于50mL離心管中，準(zhǔn)確加入10mL高氯酸提取溶液(A.2.6),渦旋混合1min,室溫下200r/min振蕩10min,5000r/min離心10min,上清液倒旋混合1min,備用。準(zhǔn)確移取上清液(A.5.1)1mL于15mL具塞離心管中，依次加入200μL氫氧化鈉溶液(A.2.7)、300μL飽和碳酸氫鈉溶液(A.2.8)和2mL丹磺酰氯衍生溶液(A.2.10),渦旋混合1min,置于搖床上，45℃避光反應(yīng)45min。加入100μL氨水(A.2.3)終止反應(yīng)，混勻，靜置15min,45℃氮?dú)獯等ケ麥?zhǔn)確移取組胺標(biāo)準(zhǔn)系列溶液(A.2.13)各1mL,與試樣提取液同時(shí)衍生。A.5.3.1液相色譜參考條件液相色譜參考條件如下：d)流動(dòng)相：乙酸銨溶液(A.2.5)和乙腈(A.2.2)(用前超聲脫氣);梯度洗脫程序見表A.1。表A.1高效液相色譜梯度洗脫程序表時(shí)間min乙酸銨溶液%乙腈%055A.5.3.2標(biāo)準(zhǔn)系列溶液和試樣溶液測定在儀器的最佳條件下，分別取組胺標(biāo)準(zhǔn)系列溶液(A.5.2)和試樣溶液(A.5.2)上機(jī)測定。組胺標(biāo)準(zhǔn)溶液的液相色譜圖見圖A.1。822919.6—2024定性以保留時(shí)間定性，試樣溶液中組胺保留時(shí)間應(yīng)與組胺標(biāo)準(zhǔn)系列溶液(濃度相當(dāng))中組胺的保留時(shí)間一致，其相對(duì)偏差在士2.5%之內(nèi)。A.5.3.4定量以組胺的濃度為橫坐標(biāo)、色譜峰面積(響應(yīng)值)為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，其相關(guān)系數(shù)應(yīng)不低于0.999。試樣溶液中組胺的濃度應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍內(nèi)。如超出范圍，用高氯酸提取溶液(A.2.6)稀釋上清液(A.5.1),衍生后測定。單點(diǎn)校準(zhǔn)定量時(shí)，試樣溶液中組胺的濃度與標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度相差不超A.6試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理試樣中組胺的含量以質(zhì)量分?jǐn)?shù)w?計(jì)，數(shù)值以毫克每千克(mg/kg)表示。多點(diǎn)校準(zhǔn)按公式(A.1)計(jì)算；單點(diǎn)校準(zhǔn)按公式(A.2)計(jì)算：……(A.1)式中：p——從標(biāo)準(zhǔn)曲線查得的試樣溶液中組胺的質(zhì)量濃度，單位為微克每毫升(μg/mL);V——試樣提取溶液的體積，單位為毫升(mL);V?——衍生化時(shí)所用試樣提取溶液的體積，單位為毫升(mL);V?——氮?dú)獯蹈珊髲?fù)溶的體積，單位為毫升(mL);m——試樣質(zhì)量，單位為克(g)?！?A.2)式中：A——試樣溶液中組胺的色譜峰面積；A、——標(biāo)準(zhǔn)溶液中組胺的色譜峰面積；p、——標(biāo)準(zhǔn)溶液中組胺的質(zhì)量濃度，單位為微克每毫升(μg/mL)V——試樣提取溶液的體積，單位為毫升(mL);V?——衍生化時(shí)所用試樣提取溶液的體積，單位為毫升(mL);V?——氮?dú)獯蹈珊髲?fù)溶的體積，單位為毫升(mL);m——試樣質(zhì)量，單位為克(g)。測定結(jié)果以平行測定的算術(shù)平均值表示，保留3位有效數(shù)字。A.7精密度在重復(fù)性條件下，獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對(duì)差值不應(yīng)超過其算術(shù)平均值的10%。A.8組胺標(biāo)準(zhǔn)溶液液相色譜圖組胺標(biāo)準(zhǔn)溶液的液相色譜圖見圖A.1。9timin(規(guī)范性)丙二醛的測定B.1原理試樣中的粗脂肪用石油醚提取，再用三氯乙酸溶液提取粗脂肪中的丙二醛，與硫代巴比妥酸(TBA)作用生成粉紅色復(fù)合物，高效液相色譜法測定，外標(biāo)法定量。B.2試劑或材料除非另有規(guī)定，僅使用分析純試劑。B.2.4無水硫酸鈉。B.2.5磷酸二氫鉀溶液(50mmol/L):稱取6.804g(精確至0.001g)磷酸二氫鉀，用水溶解，并定容至中，加入適量水，加熱溶解，冷卻后定容至10B.2.7三氯乙酸混合溶液：準(zhǔn)確稱取75.0g三氯乙酸、1.0g乙二胺四乙酸二鈉(EDTA)(精確至0.01g),用水溶解，稀釋至1000mL,混勻。純度不低于97%),用水溶解后稀釋至1000mL,混勻。于2℃~8℃保存，有效期B.2.9丙二醛標(biāo)準(zhǔn)中間溶液(1μg/mL):準(zhǔn)確移取丙二醛標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液(溶液(B.2.7)稀釋至100mL,混勻。于2℃~8℃保存，有效期2周。8.0mL、10.0mL,分別置于50mL容量瓶中，用三氯乙酸混合溶液(B.2.7)稀釋定容，混勻，配制成質(zhì)量濃度為0μg/mL、0.02μg/mL、0.04μg/mL、0.08μg/mL、0.16μg/mL、0.20μg/mL標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。臨用現(xiàn)配。B.3.3往復(fù)式振蕩器：不低于180次/min,溫度能保持在25℃±1℃。B.3.4恒溫水浴鍋：溫度能保持在90℃±1℃。B.3.5冷凍離心機(jī)：轉(zhuǎn)速不低于12000r/min。B.4樣品按GB/T20195制備樣品至少200g,粉碎使其全部通過0.425mm孔徑的分析篩，充分混勻，裝入B.5試驗(yàn)步驟B.5.1試樣中粗脂肪的提取平行做兩份試驗(yàn)。稱取100g試樣，分別包在10個(gè)濾紙包中(勿用脫脂棉線捆扎),置于500mL具塞三角瓶中，加入300mL石油醚(B.2.2)浸泡濾紙包，加入無水硫酸鈉(B.2.4)10g,通氮?dú)?0s,立即加塞。于25℃下在往復(fù)式振蕩器上以180次/min振蕩1h,靜置2min～3min,轉(zhuǎn)移提取液于雞心瓶或圓底燒瓶中，用100mL石油醚(B.2.2)再次洗滌一次濾紙包，合并提取液，于35℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至無石油醚溢出，殘留物為提取的粗脂肪。B.5.2粗脂肪中丙二醛的提取完成試樣中粗脂肪的提取后，立即稱取粗脂肪(B.5.1)1g(精確至0.001g),置于250mL具塞三角瓶中，準(zhǔn)確加入50mL三氯乙酸混合溶液(B.2.7),于25℃下180次/min振搖30min,取約20mL提取液于50mL離心管中，于4℃~6℃、5000r/min離心5min,上清液備用。準(zhǔn)確移取上清液(B.5.2)、丙二醛標(biāo)準(zhǔn)系列溶液(B.2.10)各5mL,分別置于25mL比色管內(nèi)，加入5.0mLTBA溶液(B.2.6),渦旋混合1min,置于90℃水浴中保溫20min,取出，用冰水浴迅速冷卻，移入離心試管內(nèi)，于4℃~6℃、12000r/min離心5min,取1mL上清液過微孔濾膜(B.2.12)