HYT 0345-2022 海水中痕量亞硝酸鹽的測(cè)定 流動(dòng)分析-重氮偶聯(lián)-長(zhǎng)光程分光光度法（正式版）

中華人民共和國(guó)海洋行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)海水中痕量亞硝酸鹽的測(cè)定流動(dòng)分析-重氮偶聯(lián)-長(zhǎng)光程分光光度法Determinationofseawatertracenitrite—Flowanalysis,diazotizationandspe中華人民共和國(guó)自然資源部發(fā)布I 12規(guī)范性引用文件 13術(shù)語(yǔ)和定義 14方法原理 15試劑與材料 26儀器和設(shè)備 27樣品采集與保存 38分析步驟 39結(jié)果計(jì)算與記錄 410精密度和準(zhǔn)確度 511質(zhì)量保證和質(zhì)量控制 512注意事項(xiàng) 5附錄A(資料性)海水中痕量亞硝酸鹽的測(cè)定分析記錄 6附錄B(規(guī)范性)海水中痕量亞硝酸鹽測(cè)定的質(zhì)量控制要求 7參考文獻(xiàn) 8Ⅲ本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專(zhuān)利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專(zhuān)利的責(zé)任。本文件由中華人民共和國(guó)自然資源部提出。本文件由全國(guó)海洋標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)(SAC/TC283)歸口。本文件起草單位：廈門(mén)大學(xué)、自然資源部第三海洋研究所。1海水中痕量亞硝酸鹽的測(cè)定流動(dòng)分析-重氮偶聯(lián)-長(zhǎng)光程分光光度法本文件描述了采用流動(dòng)分析-重氮偶聯(lián)-長(zhǎng)光程分光光度法測(cè)定海水中痕量亞硝酸鹽的方法原理、度和準(zhǔn)確度、質(zhì)量保證和質(zhì)量控制等的技術(shù)要求。本文件適用于海水中納摩爾/升(nmol/L)級(jí)別的痕量亞硝酸鹽的測(cè)定。本方法的檢出限為3nmol/L,測(cè)定下限為5nmol/L。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于GB/T12763.4海洋調(diào)查規(guī)范第4部分：海水化學(xué)要素調(diào)查GB17378.2海洋監(jiān)測(cè)規(guī)范第2部分：數(shù)據(jù)處理與分析質(zhì)量控制3術(shù)語(yǔ)和定義本文件沒(méi)有需要界定的術(shù)語(yǔ)和定義。4方法原理4.1流動(dòng)分析系統(tǒng)工作原理樣品與試劑在蠕動(dòng)泵的推動(dòng)下進(jìn)入分析模塊，在密閉的管道中按設(shè)定的順序和比例進(jìn)行混合、反應(yīng)顯色，進(jìn)入長(zhǎng)光程分光光度檢測(cè)器測(cè)定吸光值，分析樣品中的被測(cè)物質(zhì)含量。在酸性介質(zhì)中，亞硝酸鹽與磺胺發(fā)生重氮化反應(yīng)，產(chǎn)物與鹽酸萘乙二胺偶合生成紅色偶氮化合物，由分光光度檢測(cè)器在檢測(cè)波長(zhǎng)543nm、參比波長(zhǎng)700nm處測(cè)定。參考分析流路圖見(jiàn)圖1。25.2磺胺(NH?SO?C?H?NH?)。5.3鹽酸萘乙二胺(C?H?NHCH?CH?·2H5.510%(體積分?jǐn)?shù))鹽酸溶液。配制方法為：量取139mL鹽酸(見(jiàn)5.1),用水稀釋至500mL,盛于高準(zhǔn)儲(chǔ)備液(見(jiàn)5.9),稀釋并定容至250mL,貯存于中間液(見(jiàn)5.10),稀釋并定容至250mL,貯存于高密度聚乙烯瓶中，在4℃下避光保存，可穩(wěn)定15d。3——多位選擇閥，閥位兩個(gè)以上，切換時(shí)間1s以?xún)?nèi)；——六通閥；——流動(dòng)分析用分光光度檢測(cè)器；——數(shù)據(jù)處理及儀器控制軟件。6.2長(zhǎng)光程流通池，長(zhǎng)度1000mm。6.3分析天平：感量為0.0001g。6.5一般化學(xué)實(shí)驗(yàn)室常用的儀器和設(shè)備。7樣品采集與保存樣品采集與保存措施如下：a)采樣前，應(yīng)依次用鹽酸溶液(見(jiàn)5.5)、超純水清洗所有接觸樣品的器皿；b)采樣過(guò)程注意防止污染，應(yīng)戴無(wú)營(yíng)養(yǎng)鹽污染的一次性手套，每采一次樣品應(yīng)更換手套；c)先用樣品將高密度聚乙烯瓶潤(rùn)洗3次以上，再將樣品采集于瓶中；d)樣品一般無(wú)需過(guò)濾，如果必須過(guò)濾，要特別注意防止過(guò)濾過(guò)程中引入污染；e)樣品采集后宜現(xiàn)場(chǎng)分析，若無(wú)法及時(shí)分析，應(yīng)在一20℃下速凍保存并在15d內(nèi)分析完畢。8分析步驟按照?qǐng)D1所示連接分析系統(tǒng)。開(kāi)機(jī)后，先用超純水代替試劑，檢查整個(gè)分析流路的密閉性及液體流動(dòng)的順暢性。待基線穩(wěn)定后(約20min),將各管道的入口端置入對(duì)應(yīng)的試劑或樣品中。按表1設(shè)定運(yùn)行程序和參數(shù)，分析流路參見(jiàn)圖1。執(zhí)行程序時(shí)，蠕動(dòng)泵保持運(yùn)行，轉(zhuǎn)速為5r/min。具體步驟如下：a)步驟1,多位選擇閥V?處于實(shí)線位，六通閥V?處于虛線位，在蠕動(dòng)泵的推動(dòng)下，樣品作為載流進(jìn)入流路，與試劑R?(磺胺溶液)在線混合；與此同時(shí)，試劑R?(鹽酸萘乙二胺溶液)在蠕動(dòng)泵的推動(dòng)下充滿(mǎn)定量環(huán)；b)步驟2,六通閥V?切換至實(shí)線位，樣品將定量環(huán)中的試劑R?(鹽酸萘乙二胺溶液)推出，并在混合盤(pán)管C?內(nèi)發(fā)生顯色反應(yīng)；反應(yīng)后的溶液進(jìn)入長(zhǎng)光程流通池測(cè)定吸光值；c)步驟3和步驟4,多位選擇閥V?切換至虛線位，六通閥V?重復(fù)執(zhí)行程序中步驟1和步驟2的內(nèi)容，測(cè)定置于多位選擇閥V?虛線位的樣品。同時(shí)，原本置于實(shí)線位的樣品可更換為下一個(gè)待測(cè)樣。如此循環(huán)，直至完成所有樣品的測(cè)定。表1分析系統(tǒng)的運(yùn)行程序時(shí)間s說(shuō)明1第一個(gè)樣品進(jìn)入流路；試劑R?(鹽酸萘乙二胺溶液)充滿(mǎn)定量環(huán)2樣品將定量環(huán)中的試劑R?(鹽酸萘乙二胺溶液)推入反應(yīng)流路；檢測(cè)第一個(gè)樣品4時(shí)間S說(shuō)明3第二個(gè)樣品進(jìn)入流路；試劑R?(鹽酸萘乙二胺溶液)充滿(mǎn)定量環(huán)4樣品將定量環(huán)中的試劑R?(鹽酸萘乙二胺溶液)推入反應(yīng)流路；檢測(cè)第二個(gè)樣品酸鹽標(biāo)準(zhǔn)使用液(見(jiàn)5.11),用超純水稀釋并定容至100mL,制備7個(gè)濃度點(diǎn)的標(biāo)準(zhǔn)系列。亞硝酸鹽濃對(duì)8.4繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行線性擬合后，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合方程。樣品中亞硝酸鹽的濃度按照式(1)進(jìn)行計(jì)算。測(cè)定分析記錄表參見(jiàn)附錄A。510精密度和準(zhǔn)確度6家～7家實(shí)驗(yàn)室分別使用本方法對(duì)亞硝酸鹽濃度為50.0nmol/L和150.0nmo/L的樣品進(jìn)行了測(cè)試(n=7),測(cè)定平均值分別為51.7nmol/L～59.2nmol/L和149.3nmol/L～162.8nmol/L;重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)差分別為0.5nmol/L和1.3nmol/L;重復(fù)性限分別為1.3nmol/L和3.8nmol/L;再現(xiàn)性標(biāo)準(zhǔn)差分別為3.2nmol/L和5.5nmol/L;再現(xiàn)性限分別為9.0nmol/L和15.3nmol/L。在同一實(shí)驗(yàn)室，由同一操作者使用相同設(shè)備，按相同的測(cè)試方法，并在短時(shí)間內(nèi)對(duì)同一被測(cè)對(duì)象相互獨(dú)立進(jìn)行測(cè)試獲得的兩次獨(dú)立測(cè)試結(jié)果的絕對(duì)差值應(yīng)不大于這兩個(gè)測(cè)定值的算術(shù)平均值的10%,以大于10%的情況不超過(guò)5%為前提。在不同的實(shí)驗(yàn)室，由不同的操作者使用不同的設(shè)備，按相同的測(cè)試方法，對(duì)同一被測(cè)對(duì)象相互獨(dú)立進(jìn)行測(cè)試獲得的兩次獨(dú)立測(cè)試結(jié)果的絕對(duì)差值應(yīng)不大于這兩個(gè)測(cè)定值的算術(shù)平均值的20%,以大于20%的情況不超過(guò)5%為前提。取適量濃度為1.0μmol/L的亞硝酸鹽國(guó)家一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，用超純水稀釋后作為樣品(稀釋后濃度分別為50nmol/L和150nmol/L),由7家實(shí)驗(yàn)室分別使用本方法進(jìn)行測(cè)試，結(jié)果的相對(duì)偏差范圍為-5.4%～3.1%。7家實(shí)驗(yàn)室分別對(duì)實(shí)際海水樣品進(jìn)行加標(biāo)回收測(cè)定，加標(biāo)濃度范圍為25.0nmol/L~100.0nmol/L,回收率范圍為96.8%～108.0%。11質(zhì)量保證和質(zhì)量控制質(zhì)量保證和質(zhì)量控制應(yīng)按照GB17378.2和GB/T12763.4的規(guī)定執(zhí)行。每批樣品或連續(xù)測(cè)定8h后應(yīng)測(cè)定一個(gè)全程方法空白樣條件的應(yīng)再測(cè)定一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)樣品。全程方法空白樣以超純水替代樣品，測(cè)定步驟同樣品。測(cè)定結(jié)果應(yīng)符合附錄B的規(guī)定。建議每分析10個(gè)樣品，使用標(biāo)準(zhǔn)曲線中間濃度溶液進(jìn)行校準(zhǔn)核查。如果測(cè)定值與理論值的相對(duì)誤差在±10%之內(nèi)，說(shuō)明分析系統(tǒng)在可控范圍內(nèi)。如果相對(duì)誤差超過(guò)±10%,說(shuō)明分析系統(tǒng)失控，則應(yīng)檢查儀器、試劑溶液是否正常，確定無(wú)疑后重新配制、測(cè)定、繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，上樣品需重新測(cè)定，并依照新的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算濃度。本方法操作中需注意如下事項(xiàng)?！獙?shí)驗(yàn)用超純水應(yīng)當(dāng)天制備，以避免空白過(guò)高。——試劑和環(huán)境溫度會(huì)影響分析結(jié)果，冰箱內(nèi)貯存的試劑應(yīng)放置至室溫后再使用，分析過(guò)程中宜?！颗鷺悠贩治鼍鶓?yīng)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中使用新配制的試劑或標(biāo)準(zhǔn)系列溶液時(shí)，應(yīng)重新繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線?！看螛悠窚y(cè)試前、測(cè)試后或測(cè)試過(guò)程中出現(xiàn)基線漂移、管路堵塞等情況時(shí)，需水各清洗10min。6(資料性)海水中痕量亞硝酸鹽的測(cè)定分析記錄海水中痕量亞硝酸鹽的測(cè)定分析記錄見(jiàn)表A.1。表A.1海水中痕量亞硝酸鹽的測(cè)定分析記錄表(流動(dòng)分析-重氮偶聯(lián)-長(zhǎng)光程分光光度法)